Das NeutroFun-Screen-Protokoll bietet eine Gruppe von Funktionstests, die kostengünstige Chemikalien verwenden und in einem einzigen Experiment mit frischen Neutrophilen durchgeführt werden können. Dies ermöglicht eine vorläufige Bewertung einiger wichtiger neutrophiler Funktionen, um aufwändigere und teurere Folgestudien zu leiten. In der Neutrophilenforschung werden verschiedene Modulationsbedingungen eingesetzt.
Wie Zytokine, Peptide, mikrobielle Produkte und physikalische Reize. Darüber hinaus werden Durchflusszytometrie, Multiomics, mikrofluidische Geräte und Immunzytochemie analysiert. Die umfangreiche Auswahl an Bedingungen und Assays, die in Kombination verwendet werden, macht den Arbeitsablauf der Neutrophilenforschung langwierig, mühsam und teuer.
Typischerweise reduziert sich in diesen Fällen die Anzahl der getesteten Bedingungen oder die Anzahl der durchgeführten Tests, der aktuelle Stand der Technik erfordert umfangreiche konfigurierbare Einheiten, viele Zellen und langwierige Präparationsverfahren. Unser Protokoll NeutroFun Screen bietet im Vergleich zu anderen Methoden einen schnelleren und kostengünstigeren Ansatz zur Bewertung der Zellfunktionalität. Dies wird durch die Kombination verschiedener Analysen innerhalb des Protokolls erreicht, wobei die Genauigkeit und Vollständigkeit der Ergebnisse erhalten bleibt.
Zwei Forscher führten diesen Arbeitsablauf gleichzeitig durch, um einen schnellen Überblick über die Funktion der Neutrophilen zu erhalten. Forscher eins isoliert die PMNs, passt die Konzentration an und inkubiert die Aktivierungssysteme, während Forscher zwei die Materialien für die nachfolgenden Fälle vorbereitet. Dann führt Forscher eins Phagozytose und kolorimetrische NBT-Assays durch, während Forscher zwei Echtzeit-Migrations- und NBT-Objektträgertests durchführt.
