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Paper-based Devices for Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles

Extracellular vesicles (EVs), membranous particles released from various types of cells, hold a great potential for clinical applications. They contain ...

National Tsing Hua University

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The ability to produce three-dimensional (3D) microstructures is of increasing importance in the miniaturization of mechanical or fluidic devices, optical elements, self-assembling components, and tissue-engineering scaffolds, among others. Traditional photolithography, the most widely used process for microdevice fabrication, is ill-suited for 3D fabrication, because it is based on the illumination of a photosensitive layer through a "photomask" (a transparent plate that contains opaque, unalterable solid-state features), which inevitably results in features of uniform height. We have devised photomasks in which the light-absorbing features are made of fluids. Unlike in conventional photomasks, the opacity of the photomask features can be tailored to an arbitrary number of gray-scale levels, and their spatial pattern can be reconfigured in the time scale of seconds. Here we demonstrate the inexpensive fabrication of photoresist patterns that contain features of multiple and/or smoothly varying heights. For a given microfluidic photomask, the developed photoresist pattern can be predicted as a function of the dye concentrations and photomask dimensions. For selected applications, microfluidic photomasks offer a low-cost alternative to present gray-scale photolithography approaches.

Gray-scale photolithography using microfluidic photomasks.

La capacit&#xE9; de produire en trois dimensions (3D) microstructures est d&#x26;#39;une importance croissante dans la miniaturisation des dispositifs m&#xE9;caniques ou fluidiques, des &#xE9;l&#xE9;ments optiques, d&#x26;#39;auto-assemblage des composants, et l&#x26;#39;ing&#xE9;nierie tissulaire &#xE9;chafaudages, entre autres. Photolithographie classique, le proc&#xE9;d&#xE9; le plus largement utilis&#xE9; pour la fabrication microdispositif, est mal adapt&#xE9; pour la fabrication 3D, parce qu&#x26;#39;il est bas&#xE9; sur l&#x26;#39;illumination d&#x26;#39;une couche photosensible &#xE0; travers un &#x26;quot;photomasque&#x26;quot; (une plaque transparente qui contient opaques, inalt&#xE9;rables &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;tat solide fonctionnalit&#xE9;s) , ce qui entra&#xEE;ne in&#xE9;vitablement des caract&#xE9;ristiques de hauteur uniforme. Nous avons con&#xE7;u des masques dans lequel les caract&#xE9;ristiques d&#x26;#39;absorption de la lumi&#xE8;re sont faits de fluides. Contrairement &#xE0; des masques classiques, l&#x26;#39;opacit&#xE9; des caract&#xE9;ristiques photomasques peuvent &#xEA;tre adapt&#xE9;s &#xE0; un nombre arbitraire de niveaux de gris, et leur r&#xE9;partition spatiale peut &#xEA;tre reconfigur&#xE9; dans l&#x26;#39;&#xE9;chelle de temps en secondes. Ici, nous d&#xE9;montrons la fabrication peu co&#xFB;teuse des mod&#xE8;les r&#xE9;sine photosensible qui contiennent des fonctionnalit&#xE9;s de hauteurs multiples et / ou variant doucement. Pour une donn&#xE9;e photomasque microfluidique, le motif de photor&#xE9;sist d&#xE9;velopp&#xE9; peut &#xEA;tre pr&#xE9;dite en fonction des concentrations de colorant et les dimensions photomasques. Pour les applications s&#xE9;lectionn&#xE9;es, des masques microfluidiques offrir une alternative &#xE0; faible co&#xFB;t pour pr&#xE9;senter des approches de photolithographie en niveaux de gris.

&#xC9;chelle de gris photolithographie utilisant Photomasks microfluidiques

Graustufen-Photolithographie mit mikrofluidischen Photomasken.

La capacit&agrave; di produrre microstrutture di tridimensionale (3D) &egrave; di crescente importanza nella miniaturizzazione di dispositivi meccanici o idraulici, elementi di ottica, componenti auto-assemblanti e ponteggi ingegneria tissutale, tra gli altri. Fotolitografia tradizionale, il processo pi&ugrave; usato per la fabbricazione di microdevice, &egrave; poco adatti per la fabbricazione di 3D, perch&eacute; si basa sull&#39;illuminazione di uno strato fotosensibile attraverso un &quot;photomask&quot; (un piatto trasparente che contiene caratteristiche allo stato solido opache, inalterabile), che si traduce inevitabilmente in caratteristiche di altezza uniforme. Noi abbiamo ideato delle maschere in cui le caratteristiche di assorbimento di luce sono fatti di fluidi. A differenza di fotomaschere convenzionali, l&#39;opacit&agrave; delle caratteristiche photomask pu&ograve; essere adattata a un numero arbitrario di livelli di scala di grigi, e loro pattern spaziali possono essere riconfigurati nella scala di tempo di secondi. Qui dimostriamo la fabbricazione economica del photoresist modelli che contengono funzioni multiple e/o senza intoppi diverse altezze. Per un photomask dato microfluidica, il modello sviluppato photoresist pu&ograve; essere previsto in funzione della concentrazione di colorante e dimensioni photomask. Per le applicazioni selezionate, microfluidica fotomaschere offrono un&#39;alternativa low-cost per presentare approcci in scala di grigi fotolitografia.

Scala di grigi photolithography usando fotomaschere microfluidica.

3&#x6B21;&#x5143;&#xFF08;3D&#xFF09;&#x5FAE;&#x7D30;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x3068;&#x308A;&#x308F;&#x3051;&#x3001;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x5C0F;&#x578B;&#x5316;&#x3001;&#x5149;&#x5B66;&#x7D20;&#x5B50;&#x3001;&#x81EA;&#x5DF1;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D44;&#x7E54;&#x5DE5;&#x5B66;&#x306E;&#x8DB3;&#x5834;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F; &#x26;quot;&#x30DE;&#x30B9;&#x30AF;&#x26;quot;&#xFF08;&#x4E0D;&#x900F;&#x660E;&#x306A;&#x3001;&#x4E0D;&#x5909;&#x306E;&#x30BD;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x900F;&#x660E;&#x677F;&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x611F;&#x5149;&#x5C64;&#x306E;&#x7167;&#x660E;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30BD;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x88FD;&#x9020;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6700;&#x3082;&#x5E83;&#x304F;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;3D&#x88FD;&#x4F5C;&#x306B;&#x306F;&#x3080;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3001;&#x5FC5;&#x7136;&#x7684;&#x306B;&#x5747;&#x4E00;&#x306A;&#x9AD8;&#x3055;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3067;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5149;&#x5438;&#x53CE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x4F53;&#x6DB2;&#x304B;&#x3089;&#x4F5C;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30DE;&#x30B9;&#x30AF;&#x3092;&#x8003;&#x6848;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x30DE;&#x30B9;&#x30AF;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;&#x30DE;&#x30B9;&#x30AF;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x4E0D;&#x900F;&#x660E;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x6570;&#x306B;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x79D2;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x3001;&#x305D;&#x3057;&#x3066;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3001;&#x6ED1;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x5909;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x9AD8;&#x3055;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D5;&#x30A9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x5B89;&#x4FA1;&#x306A;&#x88FD;&#x9020;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E0E;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A9;&#x30C8;&#x30DE;&#x30B9;&#x30AF;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x30D5;&#x30A9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x67D3;&#x6599;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x30D5;&#x30A9;&#x30C8;&#x30DE;&#x30B9;&#x30AF;&#x306E;&#x5BF8;&#x6CD5;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9078;&#x629E;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30DE;&#x30B9;&#x30AF;&#x306F;&#x30B0;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30BD;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306E;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x4F4E;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x624B;&#x6BB5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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3 &#xCC28;&#xC6D0; (3D) &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xACC4; &#xB610;&#xB294; &#xC720;&#xCCB4; &#xC18C;&#xC790;, &#xAD11;&#xD559; &#xC694;&#xC18C;, &#xAC16;&#xACE0; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xACF5;&#xD559; &#xAC74;&#xC124; &#xAE30;&#xACC4; &#xC784;&#xB300; &#xB4F1;&#xC758; &#xC18C;&#xD615;&#xD654;&#xC5D0; &#xC99D;&#xAC00; &#xC911;&#xC694;&#xC131; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; &#xC0AC;&#xC9C4; &#xD3C9;&#xD310;, microdevice &#xC81C;&#xC870;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB110;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB294; &#xC801;&#xD569; 3D &#xC81C;&#xC791; &#xC77C;&#xC815; &#xD55C; &#xB192;&#xC774;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD544;&#xC5F0;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418;&#xB294; &quot;&#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD06C;&quot; (&#xD22C;&#xBA85; &#xC811;&#xC2DC; &#xBD88;&#xD22C;&#xBA85;, &#xBD88;&#xBCC0; &#xACE0;&#xCCB4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C;)&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xAC10;&#xAD11; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;&#xAC00; &#xC870;&#xBA85;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xAC83; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xCCB4;&#xC561;&#xC758; &#xBE5B; &#xD761;&#xC218; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5B4;&#xC9C4; &#xC120;&#xC744; &#xACE0;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC640; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xD3EC;&#xD1A0;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD06C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD88;&#xD22C;&#xBA85;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xB9DE;&#xCD9C; &#xC218; &#xD68C;&#xC0C9;&#xC870; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xC218; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xACF5;&#xAC04; &#xD328;&#xD134; &#xCD08;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xAC04;&#xACA9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xAD6C;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC5EC;&#xB7EC;&#xC758; &#xC6D0;&#xD65C; &#xD558; &#xACE0;&#xB3C4; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB808;&#xC9C0;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD328;&#xD134;&#xC758; &#xC800;&#xB834; &#xD55C; &#xC81C;&#xC870;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC8FC;&#xC5B4;&#xC9C4;&#xB41C; &#xBBF8;&#xC138; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD06C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB41C; &#xB808;&#xC9C0;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD328;&#xD134; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD06C; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xD568;&#xC218;&#xB85C; &#xC608;&#xCE21; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC120;&#xD0DD;&#xD55C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBBF8;&#xC138; &#xC120; &#xD68C;&#xC0C9;&#xC870; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC18C; &#xADF8;&#xB798;&#xD53C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC81C;&#xC2DC; &#xC800;&#xAC00; &#xB300;&#xC548;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD68C;&#xC0C9;&#xC870; &#xC0AC;&#xC9C4; &#xD3C9;&#xD310; &#xBBF8;&#xC138; &#xD3EC;&#xD1A0;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La capacidad de producir en tres dimensiones (3D) microestructuras es de creciente importancia en la miniaturizaci&#xF3;n de los dispositivos mec&#xE1;nicos o de fluidos, elementos &#xF3;pticos, componentes de auto-montaje de andamios y de ingenier&#xED;a de tejidos, entre otros. Fotolitograf&#xED;a tradicional, el proceso m&#xE1;s ampliamente utilizado para la fabricaci&#xF3;n microdispositivo, es poco adecuado para la fabricaci&#xF3;n 3D, porque se basa en la iluminaci&#xF3;n de una capa fotosensible a trav&#xE9;s de una &#x26;quot;fotom&#xE1;scara&#x26;quot; (una placa transparente que contiene opacas, inalterables las caracter&#xED;sticas de estado s&#xF3;lido) , lo que inevitablemente se traduce en caracter&#xED;sticas de altura uniforme. Hemos ideado fotom&#xE1;scaras en el que las caracter&#xED;sticas de absorci&#xF3;n de luz est&#xE1;n hechas de fluidos. A diferencia de fotom&#xE1;scaras convencionales, la opacidad de las caracter&#xED;sticas fotom&#xE1;scara se puede adaptar a un n&#xFA;mero arbitrario de niveles de escala de grises, y su patr&#xF3;n espacial puede ser reconfigurado en la escala de tiempo de segundo. Aqu&#xED; nos demuestran la fabricaci&#xF3;n barata de patrones fotorresistentes que contienen caracter&#xED;sticas de alturas m&#xFA;ltiples y / o variando suavemente. Para una fotom&#xE1;scara dado microfluidos, el patr&#xF3;n fotorresistente desarrollado se puede predecir como una funci&#xF3;n de la concentraci&#xF3;n de colorante y dimensiones fotom&#xE1;scara. Para las aplicaciones seleccionadas, fotom&#xE1;scaras de microfluidos ofrecer una alternativa de bajo costo para presentar una escala de grises enfoques fotolitograf&#xED;a.

En escala de grises fotolitograf&#xED;a Con Photomasks microflu&#xED;dica

Se demuestra la fabricaci&#xF3;n y operaci&#xF3;n de &#x26;quot;microcanals&#x26;quot; (es decir, al aire libre, canales de microfluidos sin techo), que permiten la manipulaci&#xF3;n de micropipeta y el sondeo de las c&#xE9;lulas dentro de un entorno de microfluidos. Los dispositivos se fabrican en microcanal PDMS sobre sustratos de vidrio utilizando una membrana de PDMS transferencia t&#xE9;cnica. Aqu&#xED; nos muestran de patch-clamp registro electrofisiol&#xF3;gico y de inyecci&#xF3;n de tinte intracelular a cabo en c&#xE9;lulas sembradas en microcanals.

&#x26;quot;Microcanals&#x26;quot; para el acceso Micropipeta a c&#xE9;lulas individuales en entornos de microflu&#xED;dica

&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x7684;&#x5236;&#x4F5C;&#x53CA;&#x64CD;&#x4F5C;&#x7684;&quot;microcanals&quot;(&#x5373;&#x9732;&#x5929;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x901A;&#x9053;&#x6CA1;&#x6709;&#x5C4B;&#x9876;)&#xFF0C;&#x5B83;&#x4F7F;&#x5FAE;&#x5438;&#x7BA1;&#x64CD;&#x7EB5;&#x548C;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x73AF;&#x5883;&#x5185;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;Microcanal &#x8BBE;&#x5907;&#x662F;&#x5728;&#x805A;&#x4E8C;&#x7532;&#x57FA;&#x7845;&#x6C27;&#x70F7;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F20;&#x8F93;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x805A;&#x4E8C;&#x7532;&#x57FA;&#x7845;&#x6C27;&#x70F7;&#x819C;&#x7684;&#x73BB;&#x7483;&#x886C;&#x5E95;&#x4E0A;&#x634F;&#x9020;&#x7684;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x819C;&#x7247;&#x94B3;&#x7535;&#x751F;&#x7406;&#x8BB0;&#x5F55;&#x548C;&#x80DE;&#x5185;&#x67D3;&#x6599;&#x6CE8;&#x5C04;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728; microcanals &#x4E0A;&#x6267;&#x884C;&#x3002;

&quot;Microcanals&quot;&#x5FAE;&#x5438;&#x7BA1;&#x8BBF;&#x95EE;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x73AF;&#x5883;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;

We demonstrate the fabrication and operation of "microcanals"(i.e. open-air microfluidic channels without a roof), which enable micropipette manipulation and probing of cells within a microfluidic environment. The microcanal devices are fabricated in PDMS on glass substrates using a PDMS membrane transferring technique. Here we show patch-clamp electrophysiological recording and intracellular dye injection performed on cells seeded in microcanals.

"Microcanals" for micropipette access to single cells in microfluidic environments.

Nous d&#xE9;montrons la fabrication et le fonctionnement de &#x26;quot;microcanals&#xBB; (c.-&#xE0; ciel ouvert des canaux microfluidiques, sans un toit), qui permettent la manipulation micropipette et le sondage de cellules au sein d&#x26;#39;un environnement microfluidique. Les appareils sont fabriqu&#xE9;s en microcanal PDMS sur des substrats de verre en utilisant une membrane de PDMS transfert technique. Ici, nous montrons de patch-clamp enregistrement &#xE9;lectrophysiologique et l&#x26;#39;injection de colorant intracellulaire r&#xE9;alis&#xE9;es sur des cellules ensemenc&#xE9;es dans microcanals.

&#x26;quot;Microcanals&#xBB; pour l&#x26;#39;acc&#xE8;s Micropipette &#xE0; des cellules uniques dans des environnements microfluidiques

&#x26;quot;Microcanals&#x26;quot; f&#xFC;r Mikropipette Zugriff auf einzelne Zellen in mikrofluidischen Umgebungen.

Dimostriamo la fabbricazione e il funzionamento del &quot;microcanals&quot; (cio&egrave; all&#39;aperto microfluidica canali senza un tetto), che consentono la micropipetta manipolazione e sondaggio delle cellule all&#39;interno di un ambiente di microfluidica. I dispositivi di microcanal sono fabbricati in PDMS su substrati di vetro tramite una membrana PDMS trasferimento tecnica. Qui vi mostriamo la registrazione elettrofisiologica di patch-clamp e iniezione intracellulare tintura eseguita su cellule seminate in microcanals.

&quot;Microcanals&quot; per l&#39;accesso della micropipetta a singole celle in ambienti microfluidica.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x74B0;&#x5883;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D4;&#x30DA;&#x30C3;&#x30C8;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3084;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B; &#x26;quot;microcanals&#x26;quot;&#xFF08;&#x5C4B;&#x6839;&#x306A;&#x3057;&#x3064;&#x307E;&#x308A;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x30A8;&#x30A2;&#x306E;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#xFF09;&#x306E;&#x88FD;&#x9020;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; microcanal&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;PDMS&#x819C;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x30AC;&#x30E9;&#x30B9;&#x57FA;&#x677F;&#x4E0A;&#x306B;PDMS&#x3067;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x8A18;&#x9332;&#x3068;microcanals&#x306B;&#x64AD;&#x7A2E;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x8272;&#x7D20;&#x6CE8;&#x5165;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x74B0;&#x5883;&#x3067;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D4;&#x30DA;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; &#x26;quot;Microcanals&#x26;quot;

&#xC81C;&#xC870; &#xBC0F; &#xC791;&#xB3D9; &#xC2DC;&#xC5F0; &quot;microcanals&quot; (&#xC989;, &#xB178;&#xCC9C; &#xBBF8;&#xC138; &#xCC44;&#xB110; &#xC9C0;&#xBD95; &#xC5C6;&#xC774;)&#xB294; micropipette &#xC870;&#xC791;&#xACFC; &#xBBF8;&#xC138; &#xD658;&#xACBD; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; &#xD504;&#xB85C; &#xBE59;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Microcanal &#xC7A5;&#xCE58;&#xB294; PDMS PDMS &#xB9C9; &#xC804;&#xC1A1; &#xAE30;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xB9AC; &#xAE30;&#xD310;&#xC5D0; &#xC870;&#xC791; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; electrophysiological &#xB179;&#xC74C; &#xBC0F; microcanals&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xB4DC; &#xC140;&#xC5D0; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xC8FC;&#xC785; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&quot;Microcanals&quot; micropipette &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBBF8;&#xC138; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140;&#xC5D0;.

&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7406;&#x65B9;&#x9762;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x57FA;&#x7840;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;&#x5230;&#x4ECA;&#x5929;&#xFF0C;&#x7814;&#x7A76;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x9EC4;&#x91D1;&#x6807;&#x51C6;&#x662F;&#x819C;&#x7247;&#x94B3;&#x6280;&#x672F;&#x3002;&#x5939;&#x7D27;&#x7684;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x6D89;&#x53CA;&#x5230;&#x5C0F;&#x5FC3;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4EE5;&#x5F62;&#x6210;&#x9AD8;&#x7535;&#x963B;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x7F5A;&#x6B3E;&#x5012;&#x73BB;&#x7483;&#x5FAE;&#x9488; (&gt; 1 Gohms) &#x5BC6;&#x5C01; (&quot;gigaseal&quot;)&#xFF0C;&#x662F;&#x8D39;&#x529B;&#x3001; &#x632F;&#x52A8;&#x654F;&#x611F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5BB9;&#x6613;&#x9002;&#x5408;&#x81EA;&#x52A8;&#x5316;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x80FD;&#x8F7B;&#x6613;&#x4E92;&#x6362;&#x5438;&#x7BA1;&#x5185;&#x7684;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x62A5;&#x9053;&#x4E86;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5939;&#x82AF;&#x7247;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#x603B;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x6027;&#x80FD;&#x4E00;&#x76F4;&#x5F88;&#x4F4E;&#x65F6;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x5438;&#xFF0C;&#x6216;&#x5236;&#x4F5C;&#x5DE5;&#x827A;&#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x8D39;&#x7528;&#x6602;&#x8D35;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x526F;&#x672C;&#x6A21;&#x538B;&#x5F39;&#x6027;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5939;&#x82AF;&#x7247;&#x5C06;&#x7EB3;&#x5165; nanofabricated &#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x9650;&#x5236;&#xFF0C;&#x5B83;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x9AD8;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027; gigaseals&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6210;&#x529F;&#x7387;&#x5AB2;&#x7F8E;&#x5438;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x7EC6;&#x80DE;&#x55DC;&#x78B1;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x767D;&#x8840;&#x75C5; (RBL)&#x3002;&#x9AD8;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x5728;&#x5168;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F55;&#x5236;&#x671F;&#x95F4;&#x4F7F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x5916;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x7684;&#x4EA4;&#x6D41;&#x3002;103 &#x5B9E;&#x9A8C;&#x7684;&#x6837;&#x672C;&#xFF0C;66 &#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;64%&#xFF09; &#x88AB;&#x6210;&#x529F;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x5728;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5149;&#x5708; &#xFF1B; 38 &#xFF08;58%&#x7684;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;37%&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF09; &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x88AB;&#x6210;&#x529F; gigasealed &#xFF1B; &#x548C; 25 (gigasealed &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; 65%&#x3001; &#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; 34%&#x3001; 24%&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF09; &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x88AB;&#x6210;&#x529F;&#x7A7F;&#x5B54;&#x8BBF;&#x95EE;&#x6574;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#x4E00;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x7684; 27 &#x5B9E;&#x9A8C;&#xFF0C;79%&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D; 68%&#x53EF;&#x4F5C; gigasealed &#x548C; 46%&#x7A7F;&#x5B54;&#x6574;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x8BBF;&#x95EE;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x7075;&#x5DE7;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;

&#x4E00;&#x79CD;&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x5F39;&#x6027;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5939;&#x82AF;&#x7247;&#x3002;

Ion channels play key roles in cell physiology and underlie a broad spectrum of disorders. To this day, the gold standard for studying ion channels is the patch clamp technique. Patch clamping involves careful positioning of a fine-tipped glass micropipette onto the surface of the cell to form a high-resistance (>1 Gohms) seal ("gigaseal"), a procedure that is laborious, vibration-sensitive, and not easily amenable to automation. In addition, the solution inside the pipette cannot be easily exchanged. Recently reported patch clamp chips offer the potential of increased throughput, but to date the overall per-cell performance of most designs has been very low when compared to pipettes, and/or the fabrication process is prohibitively expensive. Here we demonstrate a replica-molded elastomeric patch clamp chip incorporating nanofabricated constrictions, which delivers high-stability gigaseals, with success rates comparable to those of pipettes, using rat basophilic leukemia (RBL) cells. The high stability enables exchanges of both the extracellular and intracellular solution during whole-cell recordings. In a sample of 103 experiments, 66 cells (64%) were successfully immobilized at the patch aperture; 38 cells (58% of immobilized cells, 37% of all cells) were successfully gigasealed; and 25 cells (65% of gigasealed cells, 34% of immobilized cells, 24% of all cells) were successfully perforated for whole-cell access. In the last group of 27 experiments, 79% of the cells could be immobilized, of which 68% could be gigasealed and 46% perforated for whole-cell access, indicating that dexterity is important.

A high-performance elastomeric patch clamp chip.

Les canaux ioniques jouent un r&#xF4;le cl&#xE9; dans la physiologie cellulaire et sous-tendent un large spectre de troubles. &#xC0; ce jour, l&#x26;#39;&#xE9;talon-or pour l&#x26;#39;&#xE9;tude des canaux ioniques est la technique de patch-clamp. Patch-clamp comprend le positionnement prudent d&#x26;#39;une micropipette de verre &#xE0; pointe fine sur la surface de la cellule pour former une haute r&#xE9;sistance (&#x26;gt; 1 GOhm) joint (&#x26;quot;gigaseal&#x26;quot;), une proc&#xE9;dure qui est laborieuse, sensible aux vibrations, et n&#x26;#39;est pas facilement se pr&#xEA;tent &#xE0; l&#x26;#39;automatisation. En outre, la solution &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur de la pipette ne peut pas &#xEA;tre facilement &#xE9;chang&#xE9;s. R&#xE9;cemment signal&#xE9;s puces de patch-clamp offrent la possibilit&#xE9; d&#x26;#39;un d&#xE9;bit plus &#xE9;lev&#xE9;, mais &#xE0; ce jour l&#x26;#39;ensemble par cellule performances de la plupart des dessins a &#xE9;t&#xE9; tr&#xE8;s faible par rapport &#xE0; pipettes, et / ou le proc&#xE9;d&#xE9; de fabrication est d&#x26;#39;un co&#xFB;t prohibitif. Ici, nous d&#xE9;montrons une puce r&#xE9;plique-moul&#xE9; &#xE9;lastom&#xE8;re patch clamp incorporant constrictions nanofabricated, qui offre une haute stabilit&#xE9; gigaseals, avec des taux de r&#xE9;ussite comparables &#xE0; ceux de pipettes, en utilisant la leuc&#xE9;mie basophile de rat (RBL) des cellules. La grande stabilit&#xE9; permet des &#xE9;changes &#xE0; la fois de la solution extracellulaire et intracellulaire de cellules enti&#xE8;res pendant les enregistrements. Dans un &#xE9;chantillon de 103 exp&#xE9;riences, 66 cellules (64%) ont &#xE9;t&#xE9; avec succ&#xE8;s immobilis&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;ouverture correctif; 38 cellules (58% des cellules immobilis&#xE9;es, 37% de toutes les cellules) ont &#xE9;t&#xE9; avec succ&#xE8;s gigasealed, et 25 cellules (65% des cellules gigasealed, 34% des cellules immobilis&#xE9;es, 24% de toutes les cellules) ont &#xE9;t&#xE9; perfor&#xE9; avec succ&#xE8;s pour l&#x26;#39;ensemble des cellules acc&#xE8;s. Dans le dernier groupe de 27 exp&#xE9;riences, 79% des cellules pourrait &#xEA;tre immobilis&#xE9;, dont 68% pourraient &#xEA;tre gigasealed et 46% perfor&#xE9; pour l&#x26;#39;ensemble des cellules d&#x26;#39;acc&#xE8;s, ce qui indique que la dext&#xE9;rit&#xE9; est important.

Une puce haute performance &#xE9;lastom&#xE8;re patch clamp

Ionenkan&auml;le spielen eine wichtige Rolle im Zellphysiologie und ein breites Spektrum von Erkrankungen zugrunde. Bis heute ist der Goldstandard f&uuml;r die Untersuchung von Ionenkan&auml;len der Patch-Clamp-Technik. Patch spannen beinhaltet sorgf&auml;ltige Positionierung der eine fein-Kreiss&auml;gebl&auml;tter Glas Mikropipette auf die Oberfl&auml;che der Zelle bilden eine hochohmige (&gt; 1 Gohms) Siegel (&quot;Gigaseal&quot;), eine Prozedur, die m&uuml;hsame, Vibration-Sensitive und Automatisierung nicht leicht zug&auml;nglich ist. Dar&uuml;ber hinaus kann nicht die L&ouml;sung innerhalb der Pipette leicht austauschbar. K&uuml;rzlich berichtet Patch-Clamp-Chips bieten die M&ouml;glichkeit der erh&ouml;hten Durchsatz, aber die insgesamt pro Zelle Leistung von den meisten Designs hat bisher sehr gering im Vergleich zu Pipetten und/oder das Herstellungsverfahren ist unerschwinglich teuer. Hier zeigen wir einen Replikat-geformten Elastomer Patch Klemme Chip Einbeziehung Nanofabricated Einschn&uuml;rungen, liefert hohe Stabilit&auml;t Gigaseals, mit Erfolgsraten vergleichbar mit denen von Pipetten, Ratte basophile Leuk&auml;mie (RBL) Zellen. Die hohe Stabilit&auml;t erm&ouml;glicht den Austausch der extrazellul&auml;ren und intrazellul&auml;ren L&ouml;sung w&auml;hrend der gesamten-Zelle Aufnahmen. In einer Stichprobe von 103 Experimente 66 Zellen (64 %) waren erfolgreich bei der Patch-Blende immobilisiert; 38 Zellen (58 % der immobilisierte Zellen, 37 % aller Zellen) wurden erfolgreich Gigasealed; und 25 Zellen (65 % der Gigasealed Zellen, 34 % der immobilisierte Zellen, 24 % aller Zellen) wurden erfolgreich f&uuml;r ganze Zellzugriff perforiert. In der letzten Gruppe 27 Experimente k&ouml;nnte 79 % der Zellen immobilisierte, davon 68 % konnte sein Gigasealed und 46 % perforiert f&uuml;r ganz-Zell-Zugriff darauf hinweist, dass Geschicklichkeit wichtig ist.

Ein Hochleistungs-Elastomer Patch Clamp-Chip.

Canali ionici giocano un ruolo chiave nella fisiologia cellulare e sono alla base di un ampio spettro di disturbi. A questo giorno, il gold standard per lo studio delle scanalature dello ione &egrave; la tecnica di patch clamp. Patch di serraggio coinvolge attento posizionamento di una micropipetta di vetro appuntito sulla superficie della cellula per formare un ad alta resistenza (&amp;gt; 1 Gohms) tenuta (&quot;gigaseal&quot;), una procedura che &egrave; laboriosa, sensibili alle vibrazioni e non facilmente assoggettabile all&#39;automazione. Inoltre, la soluzione all&#39;interno della pipetta non pu&ograve; essere facilmente scambiata. Recentemente segnalato patch clamp chips offrono un potenziale di rendimento aumentato, ma fino ad oggi il generale per cella le prestazioni della maggior parte dei progetti sono stata molto bassa rispetto alle pipette, o il processo di fabbricazione &egrave; proibitivamente costoso. Qui mostriamo un chip morsetto replica-molded patch elastomerico incorporando nanofabricated costrizioni, che garantisce alta stabilit&agrave; gigaseals, con percentuali di successo comparabili a quelli di pipette, utilizzando le cellule della Leucemia basofila (RBL) ratto. L&#39;elevata stabilit&agrave; consente scambi della soluzione extracellulare e intracellulare durante le registrazioni di cellule intere. In un campione di 103 esperimenti, 66 celle (64%) sono state immobilizzate con successo al diaframma patch; 38 celle (58% di cellule immobilizzate, 37% di tutte le cellule) sono state con successo gigasealed; e 25 celle (65% delle cellule gigasealed, 34% di cellule immobilizzate, 24% di tutte le cellule) con successo sono state perforate per accesso a cellule intere. Nell&#39;ultimo gruppo di 27 esperimenti, 79% delle cellule potrebbe essere immobilizzati, di cui il 68% potrebbe essere gigasealed e 46% perforato per accesso a cellule intere, che indica che la destrezza &egrave; importante.

Un chip di morsetto patch elastomero ad alte prestazioni.

&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3068;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x5E83;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x65E5;&#x306B;&#x3001;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30B4;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C0;&#x30FC;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x6CD5;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x62B5;&#x6297;&#xFF08;&#x26;gt; 1 Gohms&#xFF09;&#x30B7;&#x30FC;&#x30EB;&#xFF08; &#x26;quot;gigaseal&#x26;quot;&#xFF09;&#x3001;&#x9AA8;&#x306E;&#x6298;&#x308C;&#x308B;&#x4F5C;&#x696D;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x624B;&#x9806;&#x3001;&#x632F;&#x52D5;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x3001;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x5F93;&#x308F;&#x306A;&#x3044;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x5148;&#x306E;&#x7D30;&#x3044;&#x30AC;&#x30E9;&#x30B9;&#x30D4;&#x30DA;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x614E;&#x91CD;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6C7A;&#x3081;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x81EA;&#x52D5;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x30D4;&#x30DA;&#x30C3;&#x30C8;&#x5185;&#x306E;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x304C;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x30D4;&#x30DA;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x30BB;&#x30EB;&#x5F53;&#x305F;&#x308A;&#x306E;&#x30D1;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x4F4E;&#x304F;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x65E5;&#x4ED8;&#x306B;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x88FD;&#x9020;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6CD5;&#x5916;&#x306B;&#x9AD8;&#x4FA1;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x597D;&#x5869;&#x57FA;&#x7403;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#xFF08;RBL&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30D4;&#x30DA;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x306B;&#x5339;&#x6575;&#x3059;&#x308B;&#x6210;&#x529F;&#x7387;&#x3067;&#x3001;&#x9AD8;&#x5B89;&#x5B9A;gigaseals&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;nanofabricated&#x72ED;&#x7A84;&#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x5165;&#x308C;&#x305F;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AB;&#x6210;&#x5F62;&#x30A8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C8;&#x30DE;&#x30FC;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9AD8;&#x3044;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x8A18;&#x9332;&#x4E2D;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x6DB2;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x4EA4;&#x63DB;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 38&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;58&#xFF05;&#x3001;&#x5168;&#x3066;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;37&#xFF05;&#xFF09;&#x304C;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;gigasealed&#x305F;;&#x304A;&#x3088;&#x3073;25&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;gigasealed&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;65&#xFF05;&#x3001;103&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x200B;&#x200B;66&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;64&#xFF05;&#xFF09;&#x304C;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x958B;&#x53E3;&#x90E8;&#x306B;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;34&#xFF05;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;24&#xFF05;&#xFF09;&#x304C;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9996;&#x5C3E;&#x3088;&#x304F;&#x3042;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 27&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x6700;&#x5F8C;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;79&#xFF05;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5668;&#x7528;&#x3055;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;68&#xFF05;&#x304C;gigasealed&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;46&#xFF05;&#x3001;&#x7A7F;&#x5B54;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x3001;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x30A8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C8;&#x30DE;&#x30FC;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;

&#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559;&#xC5D0; &#xD575;&#xC2EC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558; &#xACE0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC7A5;&#xC560;&#xC758; &#xAE30;&#xCD08;&#xAC00;. &#xC774; &#xB0A0;&#xC744; &#xC704;&#xD574;, &#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD669;&#xAE08; &#xD45C;&#xC900; &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xAE30;&#xC220;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD074;&#xB7A8;&#xD551; &#xD328;&#xCE58; &#xD3EC;&#xD568; &#xB192;&#xC740; &#xC800;&#xD56D; &#xD615;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xBFB0;&#xC871;&#xD55C; &#xC720;&#xB9AC; micropipette &#xC8FC;&#xC758; &#xC704;&#xCE58; (&amp;gt; 1 Gohms) &#xC778;&#xAC10; (&quot;gigaseal&quot;), &#xD798; &#xB4DC;&#xB294;, &#xC9C4;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC21C;&#xC885; &#xC790;&#xB3D9;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC808;&#xCC28;. &#xB610;&#xD55C;,&#xB294; &#xD53C; &#xD3AB; &#xC548;&#xC5D0; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; &#xC27D;&#xAC8C; &#xAD50;&#xD658; &#xB420; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xC99D;&#xB300;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xCE69; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xB2F9; &#xC140;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xB514;&#xC790;&#xC778;&#xC758; &#xC131;&#xB2A5;&#xC744; pipettes&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB0AE;&#xC740; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; &#xC81C;&#xC870; &#xACFC;&#xC815;&#xC740; &#xC5C4;&#xCCAD;&#xB098;&#xAC8C; &#xBE44;&#xC2FC;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC950; basophilic &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; (RBL) &#xC140;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC131;&#xD615; &#xD0C4;&#xC131; &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xCE69; &#xD1B5;&#xD569; nanofabricated constrictions &#xC131;&#xACF5;&#xB960; &#xADF8; pipettes, &#xBE44;&#xAD50;&#xC640; &#xB192;&#xC740; &#xC548;&#xC815;&#xC131; gigaseals&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC2DC;&#xC5F0;. &#xB192;&#xC740; &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xB179;&#xC74C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC758; &#xAD50;&#xD658; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 103 &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; 66 &#xC140; (64%)&#xC740; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD328;&#xCE58; &#xC870;&#xB9AC;&#xAC1C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC77C; &#xC218;; 38 &#xC140; (&#xC6C0;&#xC9C1;&#xC774;&#xC9C0; &#xC140;&#xC758; 58%, 37%&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC140;) &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; gigasealed; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; 25 &#xC140; (gigasealed &#xC140;&#xC758; 65%, &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC774;&#xC9C0; &#xC140;&#xC758; 34%, 24%&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC140;) &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC9C;&#xACF5; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD588;&#xB2E4;. 27 &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC6D0; &#xC218; 79%, 68% &#xC218; &#xC218; gigasealed&#xC640; 46% &#xCC9C;&#xACF5; &#xC190; &#xC7AC;&#xC8FC;&#xAC00; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;.

&#xACE0;&#xC131;&#xB2A5; &#xD0C4;&#xC131; &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xCE69;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Los canales i&#xF3;nicos desempe&#xF1;an un papel clave en la fisiolog&#xED;a celular y la base de una amplia gama de trastornos. A d&#xED;a de hoy, el est&#xE1;ndar de oro para el estudio de los canales i&#xF3;nicos es la t&#xE9;cnica de patch clamp. Parche de sujeci&#xF3;n consiste en una colocaci&#xF3;n cuidadosa de una micropipeta de vidrio de punta fina sobre la superficie de la c&#xE9;lula para formar una alta resistencia (&#x26;gt; 1 Gohms) junta (&#x26;quot;gigaseal&#x26;quot;), un procedimiento que es laborioso, sensible a la vibraci&#xF3;n, y no f&#xE1;cilmente susceptibles a la automatizaci&#xF3;n. Adem&#xE1;s, la soluci&#xF3;n dentro de la pipeta no pueden ser f&#xE1;cilmente intercambiados. Recientemente reportados chips de la abrazadera de conexi&#xF3;n ofrecen el potencial de un mayor rendimiento, pero hasta la fecha el total de c&#xE9;lulas por el rendimiento de la mayor&#xED;a de los dise&#xF1;os ha sido muy baja si se compara con pipetas, y / o el proceso de fabricaci&#xF3;n es prohibitivamente caro. Aqu&#xED; se demuestra una r&#xE9;plica moldeada parche elast&#xF3;mero chip de la abrazadera que incorpora constricciones nanofabricados, que ofrece alta estabilidad gigaseals, con tasas de &#xE9;xito comparables a las de las pipetas, con la leucemia bas&#xF3;fila de rata (RBL) de las c&#xE9;lulas. La alta estabilidad permite el intercambio de la soluci&#xF3;n tanto extracelulares e intracelulares durante conjunto de c&#xE9;lulas grabaciones. En una muestra de 103 experimentos, las c&#xE9;lulas de 66 (64%) fueron inmovilizados con &#xE9;xito en la apertura del parche; 38 c&#xE9;lulas (58% de c&#xE9;lulas inmovilizadas, el 37% de todas las c&#xE9;lulas) se gigasealed &#xE9;xito, y 25 c&#xE9;lulas (65% de las c&#xE9;lulas gigasealed, 34% de las c&#xE9;lulas inmovilizadas, 24% de todas las c&#xE9;lulas) fueron &#xE9;xito perforada para c&#xE9;lulas enteras de acceso. En el &#xFA;ltimo grupo de 27 experimentos, 79% de las c&#xE9;lulas podr&#xED;a ser inmovilizado, de los cuales 68% podr&#xED;a ser gigasealed y 46% perforada para c&#xE9;lulas enteras de acceso, lo que indica que la destreza es importante.

Un alto rendimiento Patch Clamp elastom&#xE9;rico chip

&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x88AB;&#x52A8;&#x7684;&#x3001; &#x53EF;&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5177;&#x6709;&#x5DE8;&#x5927;&#x6F5C;&#x529B;&#x7684;&#x64CD;&#x7EB5;&#x4E0E;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x73AF;&#x5883;&#x4E2D;&#x7684;&#x9897;&#x7C92;&#x6837;&#x672C;&#x5206;&#x79BB; microvortex &#x673A;&#x68B0;&#x624B; (MVM)&#x3002;&#x7C92;&#x5B50;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x662F;&#x7531;&#x87BA;&#x65CB;&#x6D41;&#x6D6E;&#x529B;&#xFF0C;&#x548C;&#x5F15;&#x529B;&#x529B;&#x91CF;&#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x7EC4;&#x5408;&#x51B3;&#x5B9A;&#x7684;&#x3002;&#x87BA;&#x65CB;&#x6D41;&#x52A8;&#x88AB;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5FAE;&#x5730;&#x5F62;&#x56FE;&#x6848;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#xFF0C;&#x5148;&#x524D;&#x5DF2;&#x7528;&#x4E8E;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#x4E2D;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x6DF7;&#x5408;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BF4;&#x660E; MVM &#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x53CA;&#x5176;&#x5728;&#x88AB;&#x52A8;&#x5E76;&#x884C;&#x6D41;&#x8FDB;&#x73E0;&#x548C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x805A;&#x7126;&#x548C;&#x6307;&#x5BFC;&#x7684;&#x7C92;&#x5B50;&#x548C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x63A2;&#x7D22;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7684; microvortex &#x91CD;&#x70B9;&#x5E94;&#x7528;&#x548C;&#x6210;&#x529F;&#x6392;&#x5E8F;&#x4E24;&#x4E2A;&#x73E0;&#x79CD;&#x7FA4;&#x7684;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x5DEE;&#x5F02;&#x975E;&#x5E38;&#x5C0F; 0.1 g cm(-3) &#x7684;&#x6DF7;&#x5408;&#x4F53;&#x3002;

Microvortex &#x96C6;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6307;&#x5BFC;&#x5E76;&#x6392;&#x5E8F;&#x7684;&#x7C92;&#x5B50;&#x3002;

We report a microvortex manipulator (MVM) that is a passive, scalable system with great potential for the manipulation and separation of particulate samples in microfluidic environments. The movement of particles is determined by a unique combination of helical flow, buoyant, and gravitational forces. Helical flows are induced by topographically patterned microchannel surfaces, which have previously been used for molecular mixing in microfluidic devices. We illustrate the mechanism of MVM and its applications in passive focusing of beads and cells into parallel streams and guiding of particles and cells. We also explore the application of the unique density-selectivity of microvortex focusing and successfully sort a mixture of two bead populations whose density difference is as small as 0.1 g cm(-3).

Microvortex for focusing, guiding and sorting of particles.

Nous rapportons un manipulateur microvortex (MVM) qui est un passif, un syst&#xE8;me &#xE9;volutif avec un grand potentiel pour la manipulation et la s&#xE9;paration des &#xE9;chantillons de particules dans les environnements microfluidiques. Le mouvement de particules est d&#xE9;termin&#xE9;e par une combinaison unique d&#x26;#39;&#xE9;coulement h&#xE9;lico&#xEF;dal, flottant, et les forces gravitationnelles. Flux h&#xE9;lico&#xEF;daux sont induites par la topographie des surfaces &#xE0; motifs de microcanaux, qui ont d&#xE9;j&#xE0; &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s pour le m&#xE9;lange mol&#xE9;culaire dans des dispositifs microfluidiques. Nous illustrons le m&#xE9;canisme de MVM et ses applications dans une mise au point passifs des perles et des cellules dans les ruisseaux parall&#xE8;les et directeurs de particules et des cellules. On aussi explorer l&#x26;#39;application de la densit&#xE9;-s&#xE9;lectivit&#xE9; unique de focalisation et microvortex succ&#xE8;s trier un m&#xE9;lange de deux populations de talon dont la densit&#xE9; est la plus petite diff&#xE9;rence en tant 0,1 g cm (-3).

Microvortex pour mise au point, de guider et de tri de particules

Wir berichten eine Microvortex Manipulator (MVM), die eine passive, skalierbare System mit gro&szlig;em Potenzial zur Manipulation und Trennung von Partikeln Proben in mikrofluidische Umgebungen ist. Die Bewegung der Partikel wird durch eine einzigartige Kombination aus Kegelrad flie&szlig;en, lebhafte und Gravitative Kr&auml;fte bestimmt. Spiralf&ouml;rmige Str&ouml;me sind durch topografisch gemusterten Microchannel-Oberfl&auml;chen, induziert, die zuvor f&uuml;r Molekulare mischen in Microfluidic Vorrichtungen verwendet wurden. Wir zeigen den Mechanismus der MVM und ihre Anwendungen in passive Konzentration von Perlen und Zellen in parallelen Streams und F&uuml;hrung der Teilchen und Zellen. Wir erkunden auch die Anwendung der einzigartigen Dichte-Selektivit&auml;t der Microvortex Konzentration und Sortieren Sie erfolgreich eine Mischung aus zwei Perlen-Populationen, deren Dichte Unterschied 0,1 g cm(-3) m&ouml;glichst klein ist.

Microvortex f&uuml;r Konzentration, F&uuml;hrung und Sortierung von Teilchen.

Riportiamo un manipolatore di microvortex (MVM) che &egrave; un sistema scalabile di passivo con un grande potenziale per la manipolazione e la separazione di campioni di particolato in ambienti microfluidica. Il movimento delle particelle &egrave; determinato da una combinazione unica di flusso elicoidale, vivace e gravitazionale le forze. Flussi elicoidali sono indotte da superfici microchannel topograficamente fantasia, che in precedenza sono state utilizzate per la miscelazione molecolare in dispositivi microfluidici. Illustriamo il meccanismo di MVM e sue applicazioni nella messa a fuoco di perline e celle in paralleli flussi passivi e guida di particelle e cellule. Abbiamo anche esplorare l&#39;applicazione dell&#39;unica densit&agrave;-selettivit&agrave; del microvortex di messa a fuoco e ordinare correttamente una miscela di due popolazioni di tallone cui differenza di densit&agrave; &egrave; piccolo come 0.1 g cm(-3).

Microvortex per la messa a fuoco, guida e ordinamento delle particelle.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x74B0;&#x5883;&#x3067;&#x306E;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3084;&#x5FAE;&#x7C92;&#x5B50;&#x8A66;&#x6599;&#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x79D8;&#x3081;&#x305F;&#x53D7;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x3001;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30E9;&#x30D6;&#x30EB;&#x306A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;microvortex&#x30DE;&#x30CB;&#x30D4;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#xFF08;MVM&#xFF09;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3002;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x306F;&#x3001;&#x87BA;&#x65CB;&#x6D41;&#x3001;&#x6D6E;&#x529B;&#x3068;&#x91CD;&#x529B;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30EB;&#xB7;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x4E2D;&#x3067;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x6DF7;&#x5408;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5730;&#x5F62;&#x7684;&#x306B;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x8D77;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7C92;&#x5B50;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30EC;&#x30EB;&#xB7;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x6307;&#x5C0E;&#x306B;&#x30D3;&#x30FC;&#x30BA;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x53D7;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x30D4;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;MVM&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x7126;&#x70B9;microvortex&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x63A2;&#x7D22;&#x3057;&#x3001;&#x6210;&#x529F;&#x3057;&#x305F;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x5DEE;&#x304C;0.1&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306E;CM&#xFF08;-3&#xFF09;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;2&#x3064;&#x306E;&#x30D3;&#x30FC;&#x30C9;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x3092;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x3001;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AB;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x6307;&#x91DD;&#x3068;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;Microvortex

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; microvortex &#xC870;&#xC791;&#xC790; (MVM) &#xC870;&#xC791; &#xBC0F; &#xBBF8;&#xC138; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0; &#xBBF8; &#xB9BD; &#xC790; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC88B;&#xC740; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xB3D9;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xD655;&#xC7A5; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC785;&#xC790;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xB098;&#xC120;&#xD615; &#xD750;&#xB984;, &#xBD80; &#xB825;, &#xC911;&#xB825; &#xC138;&#xB825;&#xC758; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB098;&#xC120;&#xD615; &#xD750;&#xB984; &#xC9C0;&#xD615;&#xD559; &#xAF43;&#xBB34;&#xB2AC; &#xBC84;&#xC2A4;&#xAC00; &#xC544;&#xB2CC; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xCC44;&#xB110; &#xD45C;&#xBA74; &#xBD84;&#xC790; &#xACB0;&#xD569; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0; &#xD63C;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xBC1C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; MVM&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBC0F; &#xC218;&#xB3D9; &#xBCD1;&#xB82C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC2AC;&#xACFC; &#xC140;&#xC758; &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xD558; &#xACE0; &#xC785;&#xC790;&#xC640; &#xC140;&#xC758; &#xC9C0;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD574;&#xB2F9; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB610;&#xD55C; microvortex &#xCD08;&#xC810;&#xC758; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xBC00;&#xB3C4; &#xC120;&#xD0DD;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xD0D0;&#xD5D8; &#xD558; &#xACE0; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC2AC; &#xC778;&#xAD6C; &#xBC00;&#xB3C4; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xC791;&#xC740; 0.1 g cm(-3)&#xC758; &#xD63C;&#xD569; &#xC815;&#xB82C;.

&#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xC548;&#xB0B4; &#xD558; &#xACE0; &#xC785;&#xC790;&#xC758; &#xC815;&#xB82C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; Microvortex.

Se presenta un manipulador microvortex (MVM), que es un sistema pasivo, escalable con un gran potencial para la manipulaci&#xF3;n y separaci&#xF3;n de muestras de part&#xED;culas en ambientes de microfluidos. El movimiento de las part&#xED;culas es determinada por una combinaci&#xF3;n &#xFA;nica de flujo helicoidal, boyante, y las fuerzas gravitacionales. Flujos helicoidales son inducidas por topogr&#xE1;ficamente estampadas superficies microcanales, que previamente han sido utilizados para la mezcla molecular en dispositivos de microfluidos. Se ilustra el mecanismo de MVM y sus aplicaciones en el enfoque pasivo de cuentas y las c&#xE9;lulas en corrientes paralelas y rectores de las part&#xED;culas y c&#xE9;lulas. Tambi&#xE9;n explorar la aplicaci&#xF3;n de la &#xFA;nica densidad selectividad de microvortex centrado y con &#xE9;xito ordenar una mezcla de dos poblaciones de perlas cuya densidad diferencia es tan peque&#xF1;a como 0,1 g cm (-3).

Microvortex para enfocar, orientar y clasificaci&#xF3;n de las part&#xED;culas

CD4 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8BA1;&#x6570;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7528;&#x4E8E;&#x821E;&#x53F0;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9633;&#x6027;&#x60A3;&#x8005;&#xFF0C;&#x80FD;&#x591F;&#x4F5C;&#x51FA;&#x77E5;&#x60C5;&#x7684;&#x6297;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x51B3;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5E76;&#x76D1;&#x6D4B;&#x6CBB;&#x7597;&#x8FDC;&#x671F;&#x7597;&#x6548;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x533B;&#x751F;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672F;&#x7684;&#x5148;&#x8FDB;&#x7684; CD4 &#x8BA1;&#x6570;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E0D;&#x9002;&#x7528;&#x5728;&#x8D44;&#x6E90;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x9AD8;&#x6210;&#x672C;&#x548C;&#x6280;&#x672F;&#x8981;&#x6C42;&#x3002;&#x5728;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x62A4;&#x7406;&#x70B9;&#x7528;&#x4E8E; CD4 &#x8BA1;&#x6570;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x5FAE;&#x82AF;&#x7247;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x8BE5;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x82AF;&#x7247;&#x4E2D; CD4 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x4ECE; 10 microL &#x5168;&#x8840;&#x4E2D;&#x5206;&#x79BB;&#x548C;&#x679A;&#x4E3E;&#x901A;&#x8FC7;&#x5149;&#x955C;&#x6216;&#x963B;&#x6297;&#x9065;&#x611F;&#x3002;&#x5FAE;&#x82AF;&#x7247;&#x8BA1;&#x6570;&#x5339;&#x914D;&#x6D41;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672F;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E2D;&#x95F4; CD4 &#x8BA1;&#x6570;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#xFF0C;200-800 &#x7EC6;&#x80DE;/microL&#xFF0C;&#x4F46;&#x9002;&#x5F53;&#x663E;&#x793A;&#x79EF;&#x6781;&#x504F;&#x5411;&#x7EDD;&#x5BF9; CD4 &#x8BA1;&#x6570;&#x4F4E;&#x4E8E; 200 &#x7EC6;&#x80DE;/microL&#xFF0C;&#x5728;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x7ED9;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6C61;&#x67D3;&#x3002;&#x63D0;&#x9AD8;&#x7684;&#x6027;&#x80FD;&#x4F4E; CD4 &#x8BA1;&#x6570;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x544A;&#x4E24;&#x7EA7;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#x7684;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x4EE5;&#x6D88;&#x8017;&#x5168;&#x8840;&#xFF0C;&#x5176;&#x6B21;&#x662F; CD4 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6355;&#x83B7;&#x4ECE;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x53CC;&#x7EA7;&#x8BBE;&#x5907;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x7C98;&#x5EA6;&#x6E05;&#x6D17;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x76F8;&#x7ED3;&#x5408;&#xFF0C;&#x83B7;&#x5F97; CD4 &#x8BA1;&#x6570;&#x5AB2;&#x7F8E;&#x6D41;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672F;&#x7ED3;&#x679C;&#x5145;&#x5206;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x76F8;&#x5173;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684;&#x5FAE;&#x82AF;&#x7247;&#x3002;&#x9664;&#x4E86; CD4 &#x8BA1;&#x6570;&#xFF0C;&#x53EF;&#x8F7B;&#x677E;&#x5730;&#x9002;&#x5E94;&#x4E8E;&#x5176;&#x4ED6;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#x6DB2;&#x514D;&#x75AB;&#x4EB2;&#x548C;&#x6355;&#x83B7;&#x6C61;&#x67D3;&#x7269;&#x8017;&#x5C3D;&#x4E4B;&#x524D;&#x76EE;&#x6807;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x7B56;&#x7565;&#x3002;

&#x63D0;&#x9AD8;&#x6027;&#x80FD;&#x7684;&#x70B9;&#x7684;&#x62A4;&#x7406; CD4 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8BA1;&#x6570;&#x82AF;&#x7247;&#x901A;&#x8FC7;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;/&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x8BCA;&#x65AD;&#x7684;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8017;&#x7AED;&#x3002;

CD4+ T cell counts are important tests used to stage HIV-positive patients, enabling clinicians to make informed antiretroviral treatment decisions and to monitor the therapeutic outcomes. However, state-of-the-art CD4 counting methods based on flow cytometry are not applicable in resource-limited settings, due to their high cost and technical requirements. In previous work, we reported the development of a cell isolation microchip that can be used at the point of care for CD4 counts. In that microfluidic chip, CD4+ T cells were separated from 10 microL of whole blood, and enumerated via either light microscopy or impedance sensing. The microchip counts matched flow cytometry results in the intermediate CD4 count range, between 200-800 cells/microL, but displayed a positive bias at absolute CD4 counts below 200 cells/microL, due largely to monocyte contamination. To enhance the performance in the low CD4 count range, we report here an improved design of a two-stage microfluidic device to deplete monocytes from whole blood, followed by CD4+ T cell capture. Using the double-stage device combined with a high viscosity rinsing solution, we obtained microchip CD4 counts comparable to flow cytometry results in the full clinically relevant range. In addition to CD4 counting, the strategy of contaminant depletion prior to target cell isolation can be easily adapted to immunoaffinity capture of other cell types that lack a unique surface marker from a complex biological fluid.

Enhancing the performance of a point-of-care CD4+ T-cell counting microchip through monocyte depletion for HIV/AIDS diagnostics.

Cellules CD4 + T sont des tests importants utilis&#xE9;s pour mettre en sc&#xE8;ne les patients s&#xE9;ropositifs, ce qui permet aux cliniciens de prendre des d&#xE9;cisions &#xE9;clair&#xE9;es au traitement antir&#xE9;troviral et &#xE0; surveiller les r&#xE9;sultats th&#xE9;rapeutiques. Toutefois, l&#x26;#39;&#xE9;tat de l&#x26;#39;art-num&#xE9;ration des CD4 m&#xE9;thodes bas&#xE9;es sur la cytom&#xE9;trie de flux ne sont pas applicables dans les pays &#xE0; ressources limit&#xE9;es, en raison de leur co&#xFB;t &#xE9;lev&#xE9; et des exigences techniques. Dans des travaux ant&#xE9;rieurs, nous avons signal&#xE9; le d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;un isolement des cellules micro-puce qui peut &#xEA;tre utilis&#xE9; au moment de la prise en charge des taux de CD4. Dans cette puce microfluidique, cellules T CD4 + ont &#xE9;t&#xE9; s&#xE9;par&#xE9;es de 10 microL de sang total, et a &#xE9;num&#xE9;r&#xE9; par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire soit microscopie optique ou la d&#xE9;tection d&#x26;#39;imp&#xE9;dance. La puce compte appari&#xE9;s r&#xE9;sultats de cytom&#xE9;trie en flux dans la gamme de taux de CD4 interm&#xE9;diaire, entre 200-800 cellules par microlitre, mais fait preuve d&#x26;#39;un biais positif &#xE0; la num&#xE9;ration des CD4 absolus ci-dessous de 200 cellules / microlitre, en raison en grande partie &#xE0; la contamination des monocytes. Pour am&#xE9;liorer les performances dans la gamme de CD4 bas, nous rapportons ici une conception am&#xE9;lior&#xE9;e d&#x26;#39;un dispositif &#xE0; deux &#xE9;tages microfluidique pour &#xE9;puiser les monocytes du sang total, suivie par CD4 + lymphocytes T de capture. Utilisation de l&#x26;#39;appareil &#xE0; double &#xE9;tage combin&#xE9;e avec une solution de rin&#xE7;age &#xE0; haute viscosit&#xE9;, nous avons obtenu CD4 puce compte des r&#xE9;sultats comparables &#xE0; couler cytom&#xE9;trie dans toute la gamme cliniquement pertinente. En plus de num&#xE9;ration des CD4, la strat&#xE9;gie de l&#x26;#39;appauvrissement de contaminant avant de cibler l&#x26;#39;isolement des cellules peut &#xEA;tre facilement adapt&#xE9; &#xE0; la capture d&#x26;#39;immunoaffinit&#xE9; d&#x26;#39;autres types de cellules qui n&#x26;#39;ont pas un marqueur de surface unique &#xE0; partir d&#x26;#39;un fluide biologique complexe.

Am&#xE9;liorer la performance des CD4 point-of-care + T-cellule de comptage Microchip par l&#x26;#39;&#xE9;puisement des monocytes pour le VIH / sida Diagnostics

CD4 + T-Zellzahlen sind wichtige Pr&uuml;fungen, HIV-positiven Patienten, Kliniker, informierte antiretroviralen Behandlungsentscheidungen zu treffen und die therapeutischen Ergebnisse &uuml;berwachen aktivieren zu inszenieren. Zustand-of-the-Art-CD4-Z&auml;hlmethoden basierend auf Durchflusszytometrie gelten jedoch nicht-begrenzten Ressourcen, aufgrund ihrer hohen Kosten und technischen Anforderungen. Fr&uuml;here Arbeiten berichteten wir die Entwicklung einer Zelle-Isolierung-Mikrochip, der Versorgungsort f&uuml;r CD4 Grafen verwendet werden kann. Dieser Chip mikrofluidische wurden CD4 + T-Zellen von 10 MicroL von Vollblut getrennt und &uuml;ber Lichtmikroskopie oder Impedance sensing aufgez&auml;hlt. Die Mikrochip-Grafen ergab flie&szlig;en Cytometry Resultate in CD4 Graf Zwischenbereich zwischen 200-800 Zellen/MicroL, sondern angezeigt eine positive Tendenz bei absolute CD4 z&auml;hlt unter 200 Zellen/MicroL, aufgrund weitgehend Monozyte Kontamination. Zum Verbessern der Leistung im niedrigen CD4 Graf Bereich berichten wir hier verbessertes Design eines zweistufigen Microfluidic Device zum Abbau von Monozyten aus Vollblut, gefolgt von CD4 + T Zelle erfassen. Verwenden das zweistufige Ger&auml;t kombiniert mit einer hohen Viskosit&auml;t Sp&uuml;ll&ouml;sung, erwarben wir Mikrochip, die CD4 flie&szlig;en Cytometry Ergebnisse in s&auml;mtliche klinisch relevanten vergleichbar z&auml;hlt. Zus&auml;tzlich zu CD4 z&auml;hlen, die Strategie der Kontaminanten Ersch&ouml;pfung vor deiner Zelle Isolierung leicht Immunoaffinity Erfassung von anderen Zelltypen angepasst, das eine einzigartige Oberfl&auml;che Markierung aus einer komplexen biologischen Fl&uuml;ssigkeit fehlt.

Verbessern die Leistung von einem Point-of-Care CD4 + T-Zellen z&auml;hlen Mikrochip durch Monozyte Ersch&ouml;pfung f&uuml;r HIV/AIDS-Diagnose.

Conteggio delle cellule T CD4 + &egrave; importanti i test utilizzati per i pazienti HIV-positivi, consentendo ai medici per le decisioni di trattamento antiretrovirale informato e per monitorare i risultati terapeutici in scena. Tuttavia, non sono applicabili nelle impostazioni di risorse limitate, a causa del loro alto costo e requisiti tecnici dello stato-of-the-art CD4 conteggio metodi basati sul flusso cytometry. In precedenti lavori, abbiamo segnalato lo sviluppo di un microchip di isolamento delle cellule che pu&ograve; essere utilizzato nel punto di cura per la conta di CD4. Nel chip microfluidici, cellule T CD4 + sono state separate da 10 microL di sangue intero ed enumerate tramite microscopia chiara o impedance sensing. I conteggi di microchip abbinati risultati citometria a flusso nella gamma di conteggio CD4 intermedio, tra 200-800 cellule/microL, ma visualizzato un bias positivo all&#39;assoluta conta di CD4 inferiore a 200 cellule/microL, dovuto in gran parte alla contaminazione da monociti. Per migliorare le prestazioni in gamma bassa CD4 count, riportiamo qui un design migliorato di un dispositivo microfluidico due stadi per esaurire i monociti da sangue intero, seguita dalla cattura di cellule T CD4 +. Utilizzando il dispositivo doppio stadio combinato con una soluzione di lavaggio ad alta viscosit&agrave;, abbiamo ottenuto microchip che CD4 conta paragonabile ai risultati di citometria a flusso in tutta la gamma clinicamente rilevante. Oltre al conteggio di CD4, la strategia di esaurimento dei contaminanti prima dell&#39;isolamento delle cellule bersaglio pu&ograve; essere facilmente adattata a immunoaffinity cattura di altri tipi di cellule che la mancanza di un unico marcatore di superficie da un fluido biologico complesso.

Migliorare le prestazioni di un microchip conteggio di cellule CD4 + T point-of-care attraverso la deplezione di monociti per la diagnosi di HIV/AIDS.

CD4 + T&#x7D30;&#x80DE;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x533B;&#x304C;&#x60C5;&#x5831;&#x306B;&#x6297;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3092;&#x884C;&#x3046;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x6210;&#x679C;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;HIV&#x967D;&#x6027;&#x60A3;&#x8005;&#x3092;&#x4E0A;&#x6F14;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x6570;&#x3048;&#x3001;&#x6700;&#x5148;&#x7AEF;&#x306E;CD4&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C8;&#x3068;&#x6280;&#x8853;&#x7684;&#x8981;&#x4EF6;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x8CC7;&#x6E90;&#x304C;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3067;&#x306F;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;CD4&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30B1;&#x30A2;&#x306E;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x96E2;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x306F;&#x3001;CD4 + T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x5168;&#x8840;&#x306E;10 microL&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x3001;&#x5149;&#x5B66;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#xB7;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B;&#x3092;&#x7D4C;&#x7531;&#x3057;&#x3066;&#x5217;&#x6319;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;200&#x304B;&#x3089;800&#x7D30;&#x80DE;/ microL&#x9593;&#x306E;&#x4E2D;&#x9593;&#x7684;&#x306A;CD4&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x305F;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x6570;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x5358;&#x7403;&#x306E;&#x6C5A;&#x67D3;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;200&#x30BB;&#x30EB;/ microL&#x306F;&#x3001;&#x4E0B;&#x8A18;&#x306E;&#x7D76;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;CD4 + T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x6570;&#x306B;&#x6B63;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30A2;&#x30B9;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4F4E;CD4&#x6570;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x5185;&#x306E;&#x30D1;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;CD4 + T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x5168;&#x8840;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x7403;&#x3092;&#x67AF;&#x6E07;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x4E8C;&#x6BB5;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x8A2D;&#x8A08;&#x306E;&#x6539;&#x5584;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9AD8;&#x7C98;&#x5EA6;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B9;&#x6DB2;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x4E8C;&#x6BB5;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;CD4&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3057;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x7BC4;&#x56F2;&#x5185;&#x3067;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x6D41;&#x308C;&#x306B;&#x5339;&#x6575;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;CD4&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5358;&#x96E2;&#x3092;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B;&#x3001;&#x6C5A;&#x67D3;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x306F;&#x3001;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x6D41;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x8868;&#x9762;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4ED6;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306E;&#x30A4;&#x30E0;&#x30CE;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x30FC;&#x306B;&#x9069;&#x5408;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#xB7;&#x30AA;&#x30D6;&#xB7;&#x30B1;&#x30A2;&#x306E;CD4 + T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;HIV / AIDS&#x8A3A;&#x65AD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5358;&#x7403;&#x67AF;&#x6E07;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x6570;&#x3048;&#x308B;&#x306E;&#x30D1;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;

CD4 + T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; HIV &#xC591;&#xC131; &#xD658;&#xC790;, &#xC784;&#xC0C1; &#xC815;&#xBCF4; &#xD56D; &#xB808;&#xD2B8;&#xB85C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xCE58;&#xB8CC; &#xACB0;&#xC815;&#xC744; &#xD558; &#xACE0; &#xCE58;&#xB8CC; &#xACB0;&#xACFC; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC900;&#xBE44; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xCD5C;&#xC2E0;&#xC758; CD4 &#xCE74;&#xC6B4;&#xD2B8; &#xBC29;&#xBC95; cytometry &#xAE30;&#xBC18; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC2A4; &#xC81C;&#xD55C; &#xC124;&#xC815;&#xC744; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xBE44;&#xC6A9; &#xBC0F; &#xAE30;&#xC220; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xC791;&#xD488;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; CD4 &#xCE74;&#xC6B4;&#xD2B8;&#xC758; &#xAD00;&#xB9AC; &#xC9C0;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC140; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xCE69;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xBCF4;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8; &#xBBF8;&#xC138; &#xCE69; CD4 + T &#xC138;&#xD3EC; &#xC804;&#xCCB4; &#xD608;&#xC561;&#xC758; 10 Microl&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xB610;&#xB294; &#xC784;&#xD53C;&#xB358;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC9C0;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5F4;&#xAC70; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xCE69; &#xCE74;&#xC6B4;&#xD2B8; &#xD750;&#xB984; cytometry &#xACB0;&#xACFC;: 200-800 &#xC140;/microL, &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC911;&#xAC04; CD4 &#xCE74;&#xC6B4;&#xD2B8; &#xBC94;&#xC704; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; monocyte &#xC624;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC778;&#xD574; 200 &#xC140;/microL, &#xC544;&#xB798; &#xC808;&#xB300; CD4 &#xCE74;&#xC6B4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3EC;&#xC9C0;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xBC14;&#xC774;&#xC5B4;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB0AE;&#xC740; CD4 &#xCE74;&#xC6B4;&#xD2B8; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xB2A5;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC5EC;&#xAE30; &#xB4A4;&#xC5D0; CD4 + T &#xC138;&#xD3EC; &#xCEA1;&#xCC98;, &#xC804;&#xCCB4; &#xD608;&#xC561;&#xC5D0;&#xC11C; monocytes &#xACE0;&#xAC08; &#xD558; 2 &#xB2E8; &#xBBF8;&#xC138; &#xC18C;&#xC790;&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB514;&#xC790;&#xC778;. &#xC6B0;&#xB9AC; CD4 &#xCE74;&#xC6B4;&#xD2B8; &#xC804;&#xCCB4; &#xC784;&#xC0C1; &#xAD00;&#xB828; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; &#xD750;&#xB984; cytometry &#xACB0;&#xACFC;&#xB97C; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558;&#xB294; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xCE69;&#xC744; &#xC5BB;&#xC740; &#xB192;&#xC740; &#xC810;&#xB3C4; rinsing &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; &#xB354;&#xBE14; &#xBB34;&#xB300; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. CD4 &#xCE74;&#xC6B4;&#xD2B8; &#xC774;&#xC678;&#xC5D0; &#xB300;&#xC0C1; &#xC140; &#xACA9;&#xB9AC; &#xC804;&#xC5D0; &#xC624;&#xC5FC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xC18C;&#xBAA8; &#xC804;&#xB7B5; &#xBD80;&#xC871; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC720;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xD45C;&#xBA74; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xC758; immunoaffinity &#xCEA1;&#xCC98;&#xB97C; &#xC27D;&#xAC8C; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCF00;&#xC5B4; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8; CD4 + T &#xC138;&#xD3EC; &#xC138; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xCE69; HIV/&#xC5D0;&#xC774;&#xC988; &#xC9C4;&#xB2E8;&#xC758; monocyte &#xC18C;&#xBAA8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC131;&#xB2A5; &#xD5A5;&#xC0C1;.

CD4 + de c&#xE9;lulas T son pruebas importantes que se utilizan para organizar los pacientes VIH positivos, permitiendo a los m&#xE9;dicos a tomar decisiones informadas de tratamiento antirretroviral y seguimiento de los resultados terap&#xE9;uticos. Sin embargo, el estado de la t&#xE9;cnica de conteo de CD4 m&#xE9;todos basados &#x200B;&#x200B;en citometr&#xED;a de flujo no son aplicables en entornos con recursos limitados, debido a su alto costo y los requisitos t&#xE9;cnicos. En un trabajo anterior, se inform&#xF3; el desarrollo de una celda de aislamiento microchip que puede ser utilizado en el punto de atenci&#xF3;n para los recuentos de c&#xE9;lulas CD4. En ese chip de microfluidos, linfocitos T CD4 + fueron separados de 10 microlitros de sangre entera, y enumer&#xF3; a trav&#xE9;s de cualquiera de microscop&#xED;a de luz o de detecci&#xF3;n de impedancia. El microchip cuenta los resultados encontrados de citometr&#xED;a de flujo en el rango de recuento de c&#xE9;lulas CD4 intermedia entre 200-800 c&#xE9;lulas / microL, pero muestra una tendencia positiva en los recuentos de CD4 inferiores a 200 c&#xE9;lulas absolutas / microL, debido en gran medida a la contaminaci&#xF3;n de los monocitos. Para mejorar el rendimiento en el rango de recuento de CD4 bajo, que presentamos, una mejora del dise&#xF1;o de un dispositivo de microfluidos en dos etapas para agotar los monocitos de la sangre total, seguida de CD4 + T de captura de la c&#xE9;lula. Utilizando el dispositivo de doble etapa combinada con una soluci&#xF3;n de alta viscosidad aclarado, se obtuvieron c&#xE9;lulas CD4 microchip cuenta comparable a fluir resultados de la citometr&#xED;a en toda la gama cl&#xED;nicamente relevantes. Adem&#xE1;s de CD4 de conteo, la estrategia de agotamiento contaminante antes de dirigirse aislamiento de c&#xE9;lulas puede ser f&#xE1;cilmente adaptado a la captura de inmunoafinidad de otros tipos de c&#xE9;lulas que carecen de un marcador de superficie &#xFA;nica de un fluido biol&#xF3;gico complejo.

Mejoramiento de los resultados de un recuento de CD4 de punto de atenci&#xF3;n de + de c&#xE9;lulas T de conteo de Microchip A trav&#xE9;s de extracci&#xF3;n de monocitos para el VIH / SIDA, Diagn&#xF3;stico

&#x6CE1; (&#x5916;&#x6765;&#x4F53;) &#x68DA;&#x4ECE;&#x6B63;&#x5E38;&#x53CA;&#x764C;&#x53D8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7684;&#x901A;&#x4FE1;&#x624B;&#x6BB5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6CE1;&#x8FDB;&#x884C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3001; &#x8102;&#x7C7B;&#x548C;&#x6838;&#x9178;&#x4ECE;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3E;&#x751F;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x9694;&#x79BB;&#x548C;&#x5206;&#x6790;&#x4ECE;&#x8840;&#x6DB2;&#x6837;&#x672C;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6709;&#x5173;&#x72B6;&#x6001;&#x548C;&#x6076;&#x6027;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8FDB;&#x5C55;&#x7684;&#x4FE1;&#x606F;&#x548C;&#x5E94;&#x8BC1;&#x660E;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E34;&#x5E8A;&#x91CD;&#x89C6;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5F53;&#x524D;&#x534F;&#x8BAE;&#x4ECE;&#x8840;&#x6CE1;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x8981;&#x6C42;&#x9AD8;&#x901F;&#x79BB;&#x5FC3;&#x548C;&#x8FC7;&#x6EE4;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x7E41;&#x7410;&#x548C;&#x8017;&#x65F6;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x5145;&#x5206;&#x5229;&#x7528;&#x6CE1;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x5C06;&#x9700;&#x8981;&#x9694;&#x79BB;&#x7684;&#x901F;&#x5EA6;&#x66F4;&#x5FEB;&#x3001; &#x66F4;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x51FA;&#x5BB9;&#x6613;&#x548C;&#x5FEB;&#x901F;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x514D;&#x75AB;&#x4EB2;&#x548C;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x627E;&#x51FA;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4ECE;&#x8840;&#x6DB2;&#x6837;&#x672C;&#x7684;&#x8840;&#x6E05;&#x548C;&#x4ECE;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x6DB2;&#x7684;&#x5C0F;&#x5377;&#x6CE1;&#x3002;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x8BCA;&#x65AD;&#x9057;&#x4F20;&#x72B6;&#x6001;&#x4FE1;&#x606F;&#x7684;&#x6765;&#x6E90;&#x548C;&#x9884;&#x540E;&#x7684;&#x764C;&#x75C7;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6CE1;&#x63D0;&#x53D6; RNA &#x7684;&#x9AD8;&#x8D28;&#x91CF;&#x3002;

&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x9694;&#x79BB;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7EC4;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x8840;&#x6CE1;&#x3002;

Microvesicles (exosomes) shed from both normal and cancerous cells may serve as means of intercellular communication. These microvesicles carry proteins, lipids and nucleic acids derived from the host cell. Their isolation and analysis from blood samples have the potential to provide information about state and progression of malignancy and should prove of great clinical importance as biomarkers for a variety of disease states. However, current protocols for isolation of microvesicles from blood require high-speed centrifugation and filtration, which are cumbersome and time consuming. In order to take full advantage of the potential of microvesicles as biomarkers for clinical applications, faster and simpler methods of isolation will be needed. In this paper, we present an easy and rapid microfluidic immunoaffinity method to isolate microvesicles from small volumes of both serum from blood samples and conditioned medium from cells in culture. RNA of high quality can be extracted from these microvesicles providing a source of information about the genetic status of tumors to serve as biomarkers for diagnosis and prognosis of cancer.

Microfluidic isolation and transcriptome analysis of serum microvesicles.

Microv&#xE9;sicules (exosomes) vers&#xE9;es &#xE0; partir de cellules &#xE0; la fois normales et canc&#xE9;reuses peuvent servir de moyens de communication intercellulaire. Ces microv&#xE9;sicules effectuer prot&#xE9;ines, des lipides et des acides nucl&#xE9;iques d&#xE9;riv&#xE9;s de la cellule h&#xF4;te. Leur isolement et l&#x26;#39;analyse des &#xE9;chantillons de sang ont le potentiel de fournir des informations sur l&#x26;#39;&#xE9;tat et la progression de la malignit&#xE9; et devrait se r&#xE9;v&#xE9;ler d&#x26;#39;une grande importance clinique de biomarqueurs pour une vari&#xE9;t&#xE9; d&#x26;#39;&#xE9;tats pathologiques. Cependant, les protocoles actuels pour l&#x26;#39;isolement de microv&#xE9;sicules de sang exigent haute vitesse centrifugation et la filtration, qui sont lourds et fastidieux. Afin de tirer pleinement parti du potentiel de microv&#xE9;sicules comme biomarqueurs pour les applications cliniques, les m&#xE9;thodes plus rapides et plus simples d&#x26;#39;isolement seront n&#xE9;cessaires. Dans cet article, nous pr&#xE9;sentons une m&#xE9;thode immuno-facile et rapide microfluidique pour isoler microv&#xE9;sicules de petits volumes de fois dans le s&#xE9;rum &#xE0; partir des &#xE9;chantillons de sang et un milieu conditionn&#xE9; de cellules en culture. ARN de haute qualit&#xE9; peuvent &#xEA;tre extraites de ces microv&#xE9;sicules fournissant une source d&#x26;#39;information sur le statut g&#xE9;n&#xE9;tique des tumeurs pour servir de biomarqueurs pour le diagnostic et le pronostic du cancer.

Isolement Microfluidique et analyse du transcriptome de microv&#xE9;sicules s&#xE9;riques

Microvesicles (Exosomes) Schuppen aus normal- und krebsartigen Zellen k&ouml;nnen als Mittel der interzellul&auml;ren Kommunikation dienen. Diese Microvesicles tragen Proteine, Lipide und Nukleins&auml;uren, abgeleitet von der Wirtszelle. Ihre Isolation und die Analyse von Blutproben haben das Potenzial, die Auskunft &uuml;ber den Zustand und den Verlauf von B&ouml;sartigkeit und von gro&szlig;er klinischer Bedeutung als Biomarker f&uuml;r eine Vielzahl von Krankheitzust&auml;nden erweisen sollte. Aktuelle Protokolle f&uuml;r die Isolierung von Microvesicles aus Blut erfordern jedoch Hochgeschwindigkeits-Zentrifugation und Filtration, die umst&auml;ndlich und zeitraubend sind. Um das Potenzial der Microvesicles als Biomarker f&uuml;r klinische Anwendungen nutzen, die schnellere und einfachere Methoden der Isolierung erforderlich. In diesem Beitrag stellen wir eine einfache und schnelle mikrofluidische Immunoaffinity Methode um Microvesicles von kleinen Mengen sowohl Serum von Blutproben und konditionierten Medium aus Zellen in Kultur zu isolieren. RNA von hoher Qualit&auml;t kann diese eine Quelle von Informationen &uuml;ber den genetischen Status von Tumoren dienen als Biomarker f&uuml;r die Diagnose und Prognose von Krebs Microvesicles entnommen werden.

Mikrofluidische Isolation und Transkriptom-Analyse der Serum-Microvesicles.

Microvesicles (fatto) capannone da cellule normali e cancerose pu&ograve; servire come mezzo di comunicazione intercellulare. Queste microvesicles portano le proteine, lipidi e acidi nucleici derivati dalla cellula ospite. Isolamento e analisi di campioni di sangue hanno il potenziale per fornire informazioni sullo stato e la progressione di malignit&agrave; e dovrebbe rivelarsi di grande importanza clinica come biomarkers per una variet&agrave; di stati di malattia. Tuttavia, protocolli per l&#39;isolamento di microvesicles dal sangue necessitano di centrifugazione ad alta velocit&agrave; e filtrazione, che sono ingombranti e che richiede tempo. Al fine di sfruttare appieno il potenziale di microvesicles come biomarkers per applicazioni cliniche, saranno necessari metodi pi&ugrave; veloce e pi&ugrave; semplice di isolamento. In questo articolo, vi presentiamo un metodo di immunoaffinity microfluidica facile e rapido per isolare microvesicles da piccoli volumi di entrambi siero da campioni di sangue e mezzo condizionato dalle cellule in coltura. RNA di alta qualit&agrave; pu&ograve; essere estratta da questi microvesicles fornendo una fonte di informazioni circa lo status genetico dei tumori per servire come biomarcatori per la diagnosi e la prognosi del cancro.

Microfluidica isolamento e transcriptome analisi del siero microvesicles.

&#x6B63;&#x5E38;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304B;&#x3089;&#x653E;&#x51FA;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x80DE;&#xFF08;&#x30A8;&#x30AF;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF09;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x624B;&#x6BB5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x8102;&#x8CEA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;&#x6838;&#x9178;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x3002;&#x8840;&#x6DB2;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5358;&#x96E2;&#x3068;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x60AA;&#x6027;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x3068;&#x9032;&#x884C;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x79D8;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x8A3C;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x8840;&#x6DB2;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x80DE;&#x3092;&#x5358;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306F;&#x7169;&#x96D1;&#x3067;&#x6642;&#x9593;&#x304C;&#x304B;&#x304B;&#x308A;&#x9AD8;&#x901F;&#x9060;&#x5FC3;&#x5206;&#x96E2;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6FFE;&#x904E;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5FDC;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x6700;&#x5927;&#x9650;&#x306B;&#x6D3B;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x9AD8;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x7C21;&#x5358;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x4E2D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x8840;&#x6DB2;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3068;&#x99B4;&#x5316;&#x57F9;&#x5730;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x306E;&#x5C11;&#x91CF;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x80DE;&#x3092;&#x5358;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x7C21;&#x5358;&#x304B;&#x3064;&#x8FC5;&#x901F;&#x306B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30E0;&#x30CE;&#x6CD5;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x9AD8;&#x54C1;&#x8CEA;&#x306E;RNA&#x306F;&#x3001;&#x764C;&#x306E;&#x8A3A;&#x65AD;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E88;&#x5F8C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x60C5;&#x5831;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x62BD;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x3068;&#x8840;&#x6E05;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30E0;&#x89E3;&#x6790;

Microvesicles (exosomes) &#xC815;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC3D; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC758;&#xC0AC; &#xC18C;&#xD1B5;&#xC758; &#xC218;&#xB2E8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; microvesicles &#xC6B4;&#xBC18; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xC9C0;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xD575; &#xC0B0; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xACA9;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xD608;&#xC561; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xBC0F; &#xC545;&#xC131; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xAE30; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xACE0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0DD;&#xCCB4;&#xB85C; &#xD070; &#xC784;&#xC0C1; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xC99D;&#xBA85; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xD608;&#xC561;&#xC5D0;&#xC11C; microvesicles&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD604;&#xC7AC; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C; &#xD544;&#xC694; &#xACE0;&#xC18D; &#xC6D0;&#xC2EC; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC640; &#xC5EC;&#xACFC;, &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558; &#xACE0; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xB9CE;&#xC774; &#xC18C;&#xC694; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC784;&#xC0C1; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0DD;&#xCCB4;&#xB85C; microvesicles&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC774; &#xCD5C;&#xB300;&#xD55C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558;&#xB824;&#xBA74;, &#xC808;&#xC5F0; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC758; &#xBE60;&#xB974;&#xACE0; &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xAC8C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB17C;&#xBB38;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294;, microvesicles &#xD608;&#xC561; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xD608; &#xCCAD; &#xBC0F; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xAC74; &#xD654; &#xB41C; &#xB9E4;&#xCCB4;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xBCFC;&#xB968;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xAC04;&#xD3B8; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xBBF8;&#xC138; immunoaffinity &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; &#xC120;&#xBB3C;&#xC774;. &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC9C4;&#xB2E8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xBCF4; &#xC18C;&#xC2A4; &#xBC0F; &#xC554;&#xC758; &#xC608; &#xD6C4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; microvesicles&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xD488;&#xC9C8;&#xC758; RNA&#xB294; &#xCD94;&#xCD9C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD608; &#xCCAD; microvesicles&#xC758; &#xBBF8;&#xC138; &#xACE0;&#xB9BD;&#xACFC; transcriptome &#xBD84;&#xC11D;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Microves&#xED;culas (exosomas) desprendido de las c&#xE9;lulas normales y cancerosas pueden servir como medio de comunicaci&#xF3;n intercelular. Estas microves&#xED;culas llevar prote&#xED;nas, l&#xED;pidos y &#xE1;cidos nucleicos derivados de la c&#xE9;lula hu&#xE9;sped. Su aislamiento y el an&#xE1;lisis de muestras de sangre tienen el potencial para proporcionar informaci&#xF3;n sobre el estado y la progresi&#xF3;n de malignidad y deber&#xED;a resultar de gran importancia cl&#xED;nica como marcadores para una variedad de estados de enfermedad. Sin embargo, los actuales protocolos para el aislamiento de microves&#xED;culas de sangre requieren alta velocidad de centrifugaci&#xF3;n y filtraci&#xF3;n, que son engorrosos y el tiempo. Con el fin de aprovechar al m&#xE1;ximo el potencial de microves&#xED;culas como biomarcadores para aplicaciones cl&#xED;nicas, los m&#xE9;todos m&#xE1;s r&#xE1;pidos y simples de aislamiento ser&#xE1; necesario. En este art&#xED;culo se presenta un m&#xE9;todo de microfluidos inmunoafinidad f&#xE1;cil y r&#xE1;pido para aislar microves&#xED;culas de peque&#xF1;os vol&#xFA;menes de tanto suero de las muestras de sangre y el medio condicionado de c&#xE9;lulas en cultivo. ARN de alta calidad se pueden extraer de estas microves&#xED;culas que proporcionan una fuente de informaci&#xF3;n sobre el estado gen&#xE9;tico de los tumores a servir como biomarcadores para el diagn&#xF3;stico y pron&#xF3;stico del c&#xE1;ncer.

Aislamiento de microfluidos y an&#xE1;lisis del transcriptoma de microves&#xED;culas en suero

The formation of hierarchical architectures is of fundamental importance and yet a relatively elusive problem concerning many natural and industrial processes. In this paper, a nanopost array platform, or a nanopost substrate, has been developed to address this issue through a model study of the drying structures of phosphate buffered saline (PBS) solution. Unlike on a plain surface, highly ramified salt structures are formed by simply allowing the nanopost substrate wetted with the salt solution to dry, a process that completes within minutes at room temperature. The branches of salt structures have similar shapes repeating at different length scales, ranging from ∼200 nm up to a few centimeters in length, covering a 2 × 2 cm(2) area patterned with nanoposts fabricated in photoresist via laser interference lithography (LIL). Scanning electromicrograph (SEM) images show that salt structures are formed around nanoposts, and characteristic features of these salt structures can be modulated and predicted based on the surface properties and geometrical arrangements of nanoposts, suggesting that nanoposts can be used to guide the organization and crystallization of salts. This nanopost-guided crystallization approach is robust, rapid, versatile, and amenable to real-time observation and mass production, providing a great opportunity for the study and creation of large-scale hierarchical structures.

Chihchen Chen

Institute of Nanoengineering and Microsystems

National Tsing Hua University

Paper-based Devices for Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles

Chihchen Chen

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Institute of Nanoengineering and Microsystems

National Tsing Hua University

Paper-based Devices for Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles

Institute of Nanoengineering and Microsystems