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Fate Mapping of Human Embryonic Stem Cells by Teratoma Formation

Human embryonic stem cells (hESCs) have an unlimited capacity for self-renewal, and the ability to differentiate into cells derived from all three ...

University of California San Francisco

&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;-1 &#xFF08;Sca-1&#x3001; Ly6A/E&#xFF09; &#x662F;&#x4E00;&#x79CD; glycosylphosphotidylinositol &#x951A;&#x86CB;&#x767D;&#x6807;&#x8BC6;&#x8BB8;&#x591A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x521D;&#x786E;&#x5B9A;&#x653F;&#x5236;&#x4E8B;&#x52A1;&#x5C40;&#x5C40;&#x957F;-1 &#x4F5C;&#x4E3A;&#x808C;&#x524D;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6807;&#x8BB0;&#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x8868;&#x660E; Sca 1 &#x8C03;&#x8282;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6210;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5728;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x7A33;&#x6001; Sca 1 &#x6697;&#x793A;&#x7740;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8D85;&#x51FA;&#x5B83;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5728;&#x89C4;&#x7BA1;&#x6269;&#x6563;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E00;&#x70B9;&#x4E86;&#x89E3;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x4ECB;&#x5BFC; Sca 1 &#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x62A5;&#x544A;&#x8102; microdomain &#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#xFF0C;&#x653F;&#x5236;&#x4E8B;&#x52A1;&#x5C40;&#x5C40;&#x957F; 1 &#x4E00;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x5230;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57DF;&#x5728;&#x6210;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x6F14;&#x793A; Sca 1 &#x5C06;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x964D;&#x89E3;&#x9176; (IDE)&#xFF0C;&#x8D1F;&#x8D23;&#x4E2D;&#x5206;&#x5316;&#x6210;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x591A;&#x80BD;&#x88C2;&#x89E3;&#x50AC;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7684; IDE &#x4EE5;&#x53CA; IDE mRNA &#x7684; RNAi &#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x7EAA;&#x8981;&#x8868;&#x578B;&#x7684; Sca 1 &#x5E72;&#x6270;&#xFF0C;&#x5373;&#x5316;&#x5B66;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x6301;&#x7EED;&#x6210;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x786E;&#x5B9A;&#x7269;&#x7406;&#x4E0A;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x5C06;&#x4E0E;&#x653F;&#x5236;&#x4E8B;&#x52A1;&#x5C40;&#x5C40;&#x957F;-1 &#x808C;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4FE1;&#x53F7;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x653F;&#x5236;&#x4E8B;&#x52A1;&#x5C40;&#x5C40;&#x957F;-1-&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;&#x4ECA;&#x540E;&#x7684;&#x52AA;&#x529B;&#x6765;&#x64CD;&#x7EB5;&#x8FD9;&#x6761;&#x6B65;&#x9053;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x65B0;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x6269;&#x5927;&#x751F;&#x808C;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6700;&#x7EC8;&#x808C;&#x8089;&#x4FEE;&#x590D;&#x3002;

&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x539F; 1 &#x5BF9;&#x8102;&#x8D28;&#x5FAE;&#x533A;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x548C;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x964D;&#x89E3;&#x9176;&#x5728;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x6210;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;

Stem cell antigen-1 (Sca-1, Ly6A/E) is a glycosylphosphotidylinositol-anchored protein that identifies many tissue progenitor cells. We originally identified Sca-1 as a marker of myogenic precursor cells and subsequently demonstrated that Sca-1 regulates proliferation of activated myoblasts, suggesting an important role for Sca-1 in skeletal muscle homeostasis. Beyond its functional role in regulating proliferation, however, little is known about the mechanism(s) that drive Sca-1-mediated events. We now report that lipid microdomain organization is essential for normal myogenic differentiation, and that Sca-1 constitutively localizes to these domains during myoblast proliferation and differentiation. We also demonstrate that Sca-1 associates with insulin degrading enzyme (IDE), a catalytic protein responsible for the cleavage of mitogenic peptides, in differentiating myoblasts. We show that chemical inhibition of IDE as well as RNAi knockdown of IDE mRNA recapitulates the phenotype of Sca-1 interference, that is, sustained myoblast proliferation and delayed myogenic differentiation. These findings identify the first signaling protein that physically and functionally associates with Sca-1 in myogenic precursor cells, and suggest a potential pathway for Sca-1-mediated signaling. Future efforts to manipulate this pathway may lead to new strategies for augmenting the myogenic proliferative response, and ultimately muscle repair.

Stem cell antigen-1 localizes to lipid microdomains and associates with insulin degrading enzyme in skeletal myoblasts.

Tige antig&#xE8;ne-1 de cellules (Sca-1, Ly6A / E) est une prot&#xE9;ine ancr&#xE9;e glycosylphosphotidylinositol qui identifie plusieurs cellules prog&#xE9;nitrices de tissus. Nous avions d&#x26;#39;abord identifi&#xE9; Sca-1 comme marqueur de cellules pr&#xE9;curseurs myog&#xE9;niques et par la suite d&#xE9;montr&#xE9; que Sca-1 r&#xE9;gule la prolif&#xE9;ration des myoblastes activ&#xE9;s, ce qui sugg&#xE8;re un r&#xF4;le important pour Sca-1 dans l&#x26;#39;hom&#xE9;ostasie du muscle squelettique. Au-del&#xE0; de son r&#xF4;le fonctionnel dans la r&#xE9;gulation de la prolif&#xE9;ration, cependant, peu est connu sur le m&#xE9;canisme (s) qui animent Sca-1-m&#xE9;di&#xE9;es par les &#xE9;v&#xE9;nements. D&#xE9;sormais, nous pr&#xE9;sentons cette organisation microdomaines lipidiques est essentielle pour la diff&#xE9;renciation myog&#xE9;nique normale, et que Sca-1 constitutivement localise &#xE0; ces domaines pendant la prolif&#xE9;ration et la diff&#xE9;renciation des myoblastes. Nous d&#xE9;montrons &#xE9;galement que Sca-1 associe avec l&#x26;#39;enzyme d&#xE9;gradant l&#x26;#39;insuline (IDE), une prot&#xE9;ine catalytique responsable du clivage de peptides mitog&#xE8;nes, dans la diff&#xE9;renciation des myoblastes. Nous montrons que l&#x26;#39;inhibition chimique de l&#x26;#39;IDE ainsi que knockdown ARNi de l&#x26;#39;ARNm r&#xE9;capitule le ph&#xE9;notype des IDE Sca-1 interf&#xE9;rences, c&#x26;#39;est-&#xE0;-prolif&#xE9;ration des myoblastes soutenue et retard&#xE9; la diff&#xE9;renciation myog&#xE9;nique. Ces r&#xE9;sultats permettent d&#x26;#39;identifier la prot&#xE9;ine de signalisation premi&#xE8;re fois que physiquement et fonctionnellement associ&#xE9;s avec Sca-1 dans les cellules pr&#xE9;curseurs myog&#xE9;niques, et de sugg&#xE9;rer une voie potentielle pour Sca-1-signalisation m&#xE9;di&#xE9;e. Les efforts futurs pour manipuler cette voie peut conduire &#xE0; de nouvelles strat&#xE9;gies pour augmenter la r&#xE9;ponse myog&#xE9;nique prolif&#xE9;rative et la r&#xE9;paration musculaire en fin de compte.

Antig&#xE8;ne-1 sur les cellules souches se localise dans des microdomaines lipidiques et Associ&#xE9;s avec l&#x26;#39;enzyme de l&#x26;#39;insuline dans les myoblastes squelettiques d&#xE9;gradants

Stammzellen-Antigen-1 (Sca-1, Ly6A/E) ist ein Glycosylphosphotidylinositol verankertes Protein, das viele Gewebe-Vorl&auml;uferzellen identifiziert. Wir urspr&uuml;nglich Sca-1 als eine Markierung der myogener Vorl&auml;uferzellen identifiziert und anschlie&szlig;end gezeigt, dass Sca-1 Proliferation von aktivierten Myoblasts regelt eine wichtige Rolle f&uuml;r Sca-1 im Skelettmuskel Hom&ouml;ostase vorschlagen. Jenseits seiner funktionalen Rolle bei der Regulierung der Verbreitung ist allerdings wenig &uuml;ber die Mechanismen bekannt, die Sca-1-vermittelte Veranstaltungen fahren. Wir berichten nun, dass Lipid Microdomain Organisation wichtig f&uuml;r eine normale myogener Differenzierung ist und, dass Sca-1 konstitutiv an diese Dom&auml;nen w&auml;hrend Myoblast Proliferation und Differenzierung lokalisiert. Wir zeigen auch, dass Sca-1 Insulin erniedrigende Enzym (IDE), ein katalytisches Protein verantwortlich f&uuml;r die Spaltung von mitogenen Peptide in Differenzierung Myoblasts zuordnet. Wir zeigen, dass chemische Hemmung des IDE sowie RNAi Niederschlag von IDE-mRNA rekapituliert der Ph&auml;notyp der Sca-1 Interferenz, d.h. Myoblast Verbreitung nachhaltig und myogener Differenzierung verz&ouml;gert. Diese Befunde identifizieren das erste Signalling Protein, das physisch und funktionell mit Sca-1 in myogener Vorl&auml;uferzellen zuordnet, und schlagen Sie einen m&ouml;glichen Weg f&uuml;r Sca-1-vermittelter signalisieren. Zuk&uuml;nftige Bem&uuml;hungen, diesem Weg zu manipulieren k&ouml;nnen dazu f&uuml;hren, dass neue Strategien f&uuml;r eine Verst&auml;rkung der myogener proliferative Antwort und letztlich Muskel-Reparatur.

Stammzellen-Antigen-1 zu Lipid Microdomains lokalisiert und ordnet Insulin erniedrigende Enzym in skelettartig Myoblasts.

Cellule staminali antigene-1 (Sca-1, Ly6A/E) &egrave; una proteina glycosylphosphotidylinositol-ancorata che identifica molte cellule progenitrici di tessuto. Abbiamo identificato originariamente Sca-1 come un marker di cellule precursori miogena e successivamente dimostrato che Sca-1 regola la proliferazione dei mioblasti attivato, suggerendo un ruolo importante per Sca-1 nell&#39;omeostasi del muscolo scheletrico. Oltre il suo ruolo funzionale nella regolazione della proliferazione, tuttavia, poco &egrave; conosciuto circa i meccanismi comprendono che guidano gli eventi Sca-1-mediata. Riportiamo ora lipidi microdomain organizzazione &egrave; essenziale per la normale differenziazione miogena, che quel Sca-1 costitutivamente localizza a questi domini durante la differenziazione e la proliferazione del myoblast. Abbiamo anche dimostrare che Sca-1 associa con insulina degradanti enzima (IDE), una proteina catalitica responsabile per la scissione dei peptidi mitogeni, nel differenziare myoblasts. Mostriamo che inibizione chimica di IDE cos&igrave; come RNAi atterramento di mRNA IDE ricapitola il fenotipo di Sca-1 interferenze, cio&egrave;, sostenuta myoblast proliferazione e differenziazione miogena in ritardo. Questi risultati identificano la prima proteina di segnalazione che fisicamente e funzionalmente associa con Sca-1 nelle cellule precursori miogena e suggeriscono un potenziale percorso per Sca-1-mediata segnalazione. Gli sforzi futuri per manipolare questo percorso possono portare a nuove strategie per aumentare la risposta proliferativa miogena e in ultima analisi muscolare riparazione.

Cellule staminali antigene-1 si localizza a microdomains lipido e associa insulina degradanti enzima in mioblasti scheletrici.

&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;-1&#xFF08;SCA-1&#x3001;Ly6A / E&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;glycosylphosphotidylinositol&#x30A2;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x578B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x3082;&#x3068;&#x3082;&#x3068;&#x7B4B;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;SCA-1&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;SCA-1&#x306F;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x306B;SCA-1&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7B4B;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8D85;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5C11;&#x3057;&#x306F;&#x3001;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x3001;SCA-1&#x5A92;&#x4ECB;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x305D;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#xFF08;S&#xFF09;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4ECA;&#x3001;&#x8102;&#x8CEA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x7D44;&#x7E54;&#x306F;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x7B4B;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x5831;&#x544A;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;SCA-1&#x306F;&#x6052;&#x5E38;&#x7684;&#x306B;&#x7B4B;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#xFF08;IDE&#xFF09;&#x3001;&#x5DEE;&#x5225;&#x5316;&#x7B4B;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x88C2;&#x4FC3;&#x9032;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x5207;&#x65AD;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x89E6;&#x5A92;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;Sca-1&#x306F;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;IDE&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;IDE&#x306E;mRNA&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3059;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x306E;RNAi&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;SCA-1&#x306E;&#x5E72;&#x6E09;&#x3001;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x7B4B;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x9045;&#x5EF6;&#x7B4B;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x7B4B;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;SCA-1&#x3068;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;SCA-1&#x5A92;&#x4ECB;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4ECA;&#x5F8C;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x7D44;&#x307F;&#x306F;&#x3001;&#x7B4B;&#x539F;&#x6027;&#x5897;&#x6B96;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3001;&#x305D;&#x3057;&#x3066;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x7B4B;&#x8089;&#x306E;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x6226;&#x7565;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;-1&#x306F;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x3068;&#x8102;&#x8CEA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x30A2;&#x30BD;&#x30B7;&#x30A8;&#x30A4;&#x30C4;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;

&#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xD56D; &#xC6D0;-1 (Sca 1, Ly6A/E) &#xB9CE;&#xC740; &#xC870;&#xC9C1; &#xBFCC;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; glycosylphosphotidylinositol &#xACE0;&#xC815; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC6D0;&#xB798; myogenic &#xC804;&#xC870; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD45C;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; Sca 1&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xD6C4; &#xC2DC;&#xC5F0; Sca 1&#xC5D0; Sca 1 &#xACE8;&#xACA9; &#xADFC;&#xC721; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; myoblasts&#xC758; &#xD655;&#xC0B0; &#xD1B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xD1B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB118;&#xC5B4;, &#xC870;&#xAE08; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; Sca 1 &#xC911;&#xC7AC; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xB9C8;&#xB354;&#xBCF4;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; &#xC9C0;&#xC9C8; microdomain &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; myogenic &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xBA70; &#xADF8; Sca 1 myoblast &#xC99D;&#xC2DD; &#xBC0F; &#xBD84;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;&#xC774; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; constitutively localizes &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C; Sca 1 &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xC800;&#xD558; &#xD6A8;&#xC18C; (IDE), &#xCD09;&#xB9E4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; myoblasts &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC5D0; mitogenic &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xB85C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; IDE Mrna&#xC758; RNAi &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xBC1C;&#xC0DD; Sca 1 &#xAC04;&#xC12D; &#xD615; &#xC989;, IDE&#xC758; &#xD654;&#xD559; &#xC800;&#xD574; myoblast &#xD655;&#xC0B0; &#xC9C0;&#xC18D; myogenic &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC5F0;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5F0;&#xAD00; myogenic &#xC804;&#xC870; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; Sca-1 &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC2E0;&#xD638; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xD638; Sca 1 &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xACBD;&#xB85C; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; &#xB178;&#xB825;&#xC774;&#xC774; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC870;&#xC791; &#xD558; &#xACE0; &#xAD81;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xBCF5;&#xAD6C; myogenic &#xC99D;&#xC2DD; &#xC751;&#xB2F5; &#xBCF4;&#xAC15;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC804;&#xB7B5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xD56D; &#xC6D0;-1 &#xC9C0;&#xC9C8; microdomains localizes &#xACE0; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xC800;&#xD558; &#xD6A8;&#xC18C; &#xACE8;&#xACA9; myoblasts&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

V&#xE1;stago ant&#xED;geno-1 de c&#xE9;lulas (Sca-1, Ly6A / E) es una prote&#xED;na glycosylphosphotidylinositol-anclado que identifica muchas c&#xE9;lulas progenitoras de tejidos. Hemos identificado originalmente Sca-1 como un marcador de las c&#xE9;lulas precursoras miog&#xE9;nicas y posteriormente demostr&#xF3; que Sca-1 regula la proliferaci&#xF3;n de mioblastos activados, lo que sugiere un papel importante para Sca-1 en la homeostasis del m&#xFA;sculo esquel&#xE9;tico. M&#xE1;s all&#xE1; de su papel funcional en la regulaci&#xF3;n de la proliferaci&#xF3;n, sin embargo, poco se sabe sobre el mecanismo (s) que la unidad Sca-1 mediada por los acontecimientos. Nos informan ahora de que la organizaci&#xF3;n de l&#xED;pidos microdominio es esencial para la diferenciaci&#xF3;n miog&#xE9;nica normal, y que Sca-1 constitutiva se localiza en estos dominios durante la proliferaci&#xF3;n y diferenciaci&#xF3;n de mioblastos. Tambi&#xE9;n demuestran que Sca-1 se asocia con la enzima degradaci&#xF3;n de la insulina (IDE), una prote&#xED;na catalizadora responsable de la divisi&#xF3;n de los p&#xE9;ptidos mit&#xF3;genos, en la diferenciaci&#xF3;n de mioblastos. Se demuestra que la inhibici&#xF3;n qu&#xED;mica de IDE, as&#xED; como RNAi desmontables de recapitula mRNA IDE el fenotipo de Sca-1 interferencia, es decir, la proliferaci&#xF3;n de mioblastos sostenido y diferenciaci&#xF3;n miog&#xE9;nica retardada. Estos hallazgos identifican la prote&#xED;na de se&#xF1;alizaci&#xF3;n en primer lugar que f&#xED;sicamente y asociados funcionalmente con Sca-1 en las c&#xE9;lulas precursoras miog&#xE9;nicas, y sugerir una v&#xED;a potencial de Sca-1 mediada por la se&#xF1;alizaci&#xF3;n. Los esfuerzos futuros para manipular esta v&#xED;a puede conducir a nuevas estrategias para aumentar la respuesta proliferativa miog&#xE9;nica, y en &#xFA;ltima instancia de reparaci&#xF3;n muscular.

Ant&#xED;geno-1 de c&#xE9;lulas madre se localiza en microdominios lip&#xED;dicos y Asociados con la enzima degradaci&#xF3;n de la insulina en los mioblastos esquel&#xE9;ticos

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (hESCs&#xFF09; &#x5B9A;&#x5411;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5206;&#x5316;&#x5DF2;&#x751F;&#x6210;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x5B66;&#x9886;&#x57DF;&#x7684;&#x5F88;&#x5927;&#x5174;&#x8DA3;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x786E;&#x5B9A;&#x5185;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x6587;&#x5316; hESCs &#x4E9A;&#x7FA4;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7279;&#x5B9A;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x662F;&#x4E0D;&#x597D;&#x7406;&#x89E3;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x610F;&#x4E49;&#x548C;&#x547D;&#x8FD0;&#x3002;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x4EE3;&#x8868;&#x968F;&#x673A;&#x6297;&#x539F;&#x5206;&#x5E03;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x6587;&#x5316;&#x5185;&#x7684;&#x6216;&#x6307;&#x793A;&#x7279;&#x5B9A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x547D;&#x8FD0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E00;&#x5B64;&#x7ACB; CD133(+) &#x6216; CD135(+) hESCs &#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x6587;&#x5316;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x5F3A;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (GFP) &#x548C;&#x5171;&#x57F9;&#x517B;&#x4E0E;&#x672A;&#x9009;&#x5B9A; GFP(-) hESCs &#x8FD9;&#x4E9B;&#x3002;GFP(+) hESCs &#x901A;&#x8FC7;&#x540E;&#x5728;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6301;&#x7EED;&#x5B58;&#x5728;&#x7684; CD133 &#x6216; CD135 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5176;&#x4ED6;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x6297;&#x539F; (Tra-1-60&#x3001; SSEA 4&#x3001; FGFR 1&#xFF09;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x7EE7;&#x7EED;&#x5BF9;&#x4E32;&#x884C;&#x901A;&#x9053;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A; CD133 &#x6216; CD135 &#x548C; CD133(+) hESCs &#x88AB;&#x6D53;&#x7F29;&#x4E3A; SSEA-4 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8FDB;&#x884C;&#x91CD;&#x65B0;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x7ECF;&#x4F53;&#x5916;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;CD133(+)GFP(+) hESCs &#x5F15;&#x8D77;&#x7EAF;&#x7CB9;&#x5916;&#x80DA;&#x5C42;&#xFF0C;&#x5982;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x7684;&#x5DE2;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x4EE3;&#x8868;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7; &#xFF08;alpha-fetoprotein(+)) &#x548C;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42; (&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C; actin(+)) &#x672A;&#x770B;&#x5230; GFP(+) &#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x9009;&#x62E9;&#x9488;&#x5BF9; CD133 &#x5F15;&#x8D77;&#x51E0;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x5168;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x548C;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;CD135(+)GFP(+) hESCs &#x5F15;&#x8D77;&#x4EE3;&#x8868;&#x6240;&#x6709;&#x4E09;&#x4E2A;&#x80DA;&#x80CE;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x88AB; CD135 &#x76F8;&#x5DEE;&#x65E0;&#x51E0; (-)-&#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x7531;&#x7578;&#x80CE;&#x7624;&#x4F53;&#x5185;&#x5206;&#x5316;&#x5F97;&#x5230;&#x4E86;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x589E;&#x6B96; hESCs &#x5176;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x547D;&#x8FD0;&#x662F;&#x9884;&#x5148;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#xFF0C;&#x548C;&#x6311;&#x6218;&#x7684;&#x6982;&#x5FF5;&#x6240;&#x6709;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x589E;&#x6B96; hESC &#x6587;&#x5316;&#x771F;&#x6B63;&#x90FD;&#x662F;&quot;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&quot;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8054;&#x5408;&#x57F9;&#x517B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8FD8;&#x5C06;&#x4F7F;&#x5176;&#x4ED6;&#x4E0D;&#x540C; hESC &#x4E9A;&#x7FA4;&#x7684;&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x9009;&#x62E9;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5E94;&#x8BE5;&#x8BC1;&#x660E;&#x5728;&#x751F;&#x6210;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7597;&#x6CD5;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x8BD5;&#x5242;&#x5B9D;&#x8D35;&#x3002;

&#x53EF;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x9009;&#x62E9;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x547D;&#x8FD0;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x3002;

Directed differentiation of human embryonic stem cells (hESCs) has generated much interest in the field of regenerative medicine. While subpopulations of hESCs within pluripotent cultures have been identified based on expression of specific surface antigens, their significance and fates are not well understood. To determine whether such subpopulations indicate specific tissue fates or represent stochastic antigen distributions within proliferating cultures, we isolated CD133(+) or CD135(+) hESCs from proliferating cultures constitutively expressing enhanced green fluorescent protein (GFP), and co-cultured these with unselected GFP(-) hESCs. After passage in culture, GFP(+) hESCs reanalyzed for the persistence of CD133 or CD135 expression, as well as other surface antigens (Tra-1-60, SSEA-4, FGFR-1), demonstrated that these two subpopulations continued to express CD133 or CD135 over serial passage, and that CD133(+) hESCs were enriched for SSEA-4 expression as well. Upon differentiation in vitro, CD133(+)GFP(+) hESCs gave rise solely to ectoderm, as detected by expression of nestin. Tissues representing endoderm (alpha-fetoprotein(+)) and mesoderm (smooth muscle actin(+)) were not seen among GFP(+) tissues. In contrast, selection against CD133 gave rise almost exclusively to mesoderm and endoderm. In contrast, CD135(+)GFP(+) hESCs gave rise to tissues representing all three embryonic germ layers, and were virtually indistinguishable from CD135(-)-derived tissues. Similar results were obtained by in vivo differentiation in teratomas. These data establish that subpopulations of proliferating hESCs whose tissue fate is predetermined exist, and challenge the notion that all cells within proliferating hESC cultures are truly "pluripotent." This co-culture approach also will enable identification of other distinct hESC subpopulations, and selection for these should prove valuable in generating tissue-specific reagents for cell-based therapy.

Subpopulations of human embryonic stem cells with distinct tissue-specific fates can be selected from pluripotent cultures.

R&#xE9;alis&#xE9; diff&#xE9;renciation des cellules souches embryonnaires humaines (CSEh) a suscit&#xE9; beaucoup d&#x26;#39;int&#xE9;r&#xEA;t dans le domaine de la m&#xE9;decine r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rative. Bien que les sous-populations de CSEh au sein des cultures pluripotentes ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s sur la base de l&#x26;#39;expression des antig&#xE8;nes de surface sp&#xE9;cifiques, leur signification et leur sort ne sont pas bien comprises. Pour d&#xE9;terminer si ces sous-populations indiquent destins des tissus sp&#xE9;cifiques ou repr&#xE9;senter les distributions de l&#x26;#39;antig&#xE8;ne prolif&#xE8;rent au sein des cultures stochastiques, nous avons isol&#xE9; CD133 (+) ou CD135 (+) CSEh &#xE0; partir de cultures prolif&#xE9;rantes exprimant de mani&#xE8;re constitutive fluorescente verte am&#xE9;lior&#xE9;e ces prot&#xE9;ines (GFP), et co-culture avec non s&#xE9;lectionn&#xE9; GFP (-) CSEh. Apr&#xE8;s le passage dans la culture, la GFP (+) CSEh r&#xE9;analys&#xE9; de la persistance de CD133 ou CD135 expression, ainsi que d&#x26;#39;autres antig&#xE8;nes de surface (Tra-1-60, AESS-4, FGFR-1), a d&#xE9;montr&#xE9; que ces deux sous-populations ont continu&#xE9; &#xE0; exprimer CD133 ou CD135 sur une s&#xE9;rie de passages, et que les CSEh CD133 (+) ont &#xE9;t&#xE9; enrichies pour l&#x26;#39;AESS-4 expression ainsi. Lors de la diff&#xE9;renciation in vitro, CD133 (+) GFP (+) CSEh donn&#xE9; lieu uniquement &#xE0; l&#x26;#39;ectoderme, telle que d&#xE9;tect&#xE9;e par l&#x26;#39;expression de la nestine. Les tissus repr&#xE9;sentant l&#x26;#39;endoderme (alpha-foetoprot&#xE9;ine (+)) et du m&#xE9;soderme (actine muscle lisse (+)) n&#x26;#39;ont pas &#xE9;t&#xE9; vus parmi les GFP (+) des tissus. En revanche, la s&#xE9;lection contre CD133 a donn&#xE9; lieu presque exclusivement &#xE0; m&#xE9;soderme et l&#x26;#39;endoderme. En revanche, CD135 (+) GFP (+) CSEh a donn&#xE9; lieu &#xE0; des tissus repr&#xE9;sentant les trois feuillets embryonnaires, et &#xE9;taient pratiquement indiscernable de celle CD135 (-)-d&#xE9;riv&#xE9;s des tissus. Des r&#xE9;sultats similaires ont &#xE9;t&#xE9; obtenus par diff&#xE9;renciation in vivo dans les t&#xE9;ratomes. Ces donn&#xE9;es &#xE9;tablissent que les sous-populations de la multiplication des CSEh dont le tissu sort est pr&#xE9;d&#xE9;termin&#xE9;e existent, et de contester l&#x26;#39;id&#xE9;e que toutes les cellules dans les cultures de CSEh prolif&#xE9;rantes sont vraiment &#xAB;pluripotentes&#xBB;. Cette approche de co-culture sera &#xE9;galement permettre l&#x26;#39;identification des autres sous-populations distinctes de CSEh, et la s&#xE9;lection pour ceux-ci devraient se r&#xE9;v&#xE9;ler utiles pour g&#xE9;n&#xE9;rer des tissus r&#xE9;actifs sp&#xE9;cifiques pour th&#xE9;rapie cellulaire.

Les sous-populations de cellules souches embryonnaires humaines avec Distinct tissu-sp&#xE9;cifiques Parques Peut &#xEA;tre s&#xE9;lectionn&#xE9; &#xE0; partir de cultures pluripotentes

Gezielte Differenzierung von humanen embryonalen Stammzellen (Zellkulturen) hat viel Interesse im Bereich der regenerativen Medizin erzeugt. W&auml;hrend Subpopulationen von Zellkulturen in pluripotente Kulturen basierend auf Ausdruck der spezifischen Oberfl&auml;che Antigene identifiziert wurden, werden ihre Bedeutung und Schicksale nicht gut verstanden. Um zu bestimmen, ob diese Subpopulationen bestimmte Gewebe Schicksale geben oder stochastische Antigen-Distributionen innerhalb der wuchernden Kulturen darstellen, wir CD133(+) oder CD135(+) Zellkulturen aus wuchernden Kulturen konstitutiv isoliert Ausdruck verbessert gr&uuml;nes fluoreszierendes Protein (GFP), und co-cultured diese mit nicht ausgew&auml;hlten GFP(-) Zellkulturen. Nach der Verabschiedung in Kultur neu analysiert GFP(+) Zellkulturen f&uuml;r die Dauerhaftigkeit von CD133 oder CD135 Ausdruck, wie auch andere OBERFL&Auml;CHENANTIGENE (Tra-1-60, SSEA-4, FGFR-bedingten-1), gezeigt, dass weiterhin, dass diese zwei Subpopulationen CD133 oder CD135 &uuml;ber serielle Durchgang Ausdruck und CD133(+) Zellkulturen f&uuml;r SSEA-4-Ausdruck als auch bereichert wurden. Bei in-vitro-Differenzierung f&uuml;hrte CD133(+)GFP(+) Zellkulturen ausschlie&szlig;lich zu Ektoderm, als Ausdruck der nestin erkannt. Gewebe, die Endodermis darstellt (alpha-fetoprotein(+)) und Mesoderm (glatte Muskulatur actin(+)) wurden bei GFP(+) Gewebe nicht sehen. Im Gegensatz dazu f&uuml;hrte Auswahl gegen CD133 fast ausschlie&szlig;lich zu Mesoderm und Entoderm. Im Gegensatz dazu CD135(+)GFP(+) Zellkulturen f&uuml;hrte zu Geweben, die alle drei embryonalen Keim Schichten repr&auml;sentieren, und waren praktisch ununterscheidbar von CD135 (-)-Gewebe abgeleitet. &Auml;hnliche Ergebnisse wurden durch in-vivo Differenzierung in Teratome erzielt. Diese Daten feststellen, dass Subpopulationen von wuchernden Zellkulturen deren Gewebe Schicksal vorbestimmten ist vorhanden, und fordern Sie die Vorstellung, dass alle Zellen innerhalb der wuchernden hESC Kulturen wirklich &quot;Pluripotent.&quot; Dieser Kokulturen-Ansatz erm&ouml;glicht auch Identifikation von anderen unterschiedliche hESC-Subpopulationen, und Auswahl f&uuml;r diese wertvolle Generieren von Gewebe-spezifischen Reagenzien f&uuml;r zellbasierte Therapie erweisen sollte.

Subpopulationen von menschlichen embryonalen Stammzellen mit unterschiedlichen Gewebe-spezifischen Schicksale k&ouml;nnen aus pluripotenten Kulturen ausgew&auml;hlt werden.

Regia di differenziazione delle cellule staminali embrionali umane (hESC) ha generato molto interesse nel campo della medicina rigenerativa. Mentre sottopopolazioni di hESCs all&#39;interno di culture pluripotenti sono state identificate basato sull&#39;espressione degli antigeni di superfici specifici, loro significato e i fati non sono ben chiari. Per determinare che se tali sottopopolazioni indicano destini specifici tessuti o rappresentano distribuzioni stocastiche antigene all&#39;interno di culture proliferanti, abbiamo isolato hESCs CD133(+) o CD135(+) da culture proliferanti costitutivamente esprimendo enhanced proteina fluorescente verde (GFP) e questi con unselected hESCs GFP(-) co-cultured. Dopo il passaggio in cultura, GFP(+) hESCs nuovamente analizzato per la persistenza dell&#39;espressione di CD133 o CD135, come pure altri antigeni superficiali (Tra-1-60, SSEA-4, FGFR-1), ha dimostrati che questi due sottopopolazioni continuarono a esprimere CD133 o CD135 sopra passaggio seriale, e che CD133(+) hESCs sono stati arricchiti per SSEA-4 espressione pure. Sulla differenziazione in vitro, CD133(+)GFP(+) hESCs diede origine esclusivamente a ectoderma, come rilevato dall&#39;espressione della nestina. Tessuti che rappresentano endoderma (alpha-fetoprotein(+)) e mesoderma (muscolo liscio actin(+)) non furono visti tra i tessuti GFP(+). Al contrario, selezione contro CD133 diede origine quasi esclusivamente di mesoderma ed endoderma. In contrasto, CD135(+)GFP(+) hESCs diede origine ai tessuti che rappresenta tutti i tre strati di germe embrionali ed erano praticamente indistinguibili da CD135 (-)-derivato dei tessuti. Risultati simili sono stati ottenuti dalla differenziazione in vivo nei teratomi. Questi dati stabiliscono che le sottopopolazioni di hESCs proliferanti cui destino tessuto &egrave; predeterminato esistono e sfidano la nozione che tutte le cellule proliferanti hESC culture sono veramente &quot;pluripotenti&quot;. Questo approccio co-culture inoltre consentir&agrave; l&#39;identificazione di altre sottopopolazioni distinte hESC e selezione per questi dovrebbe rivelarsi preziosa nella generazione di tessuto-specifici reagenti per terapia cell-based.

Sottopopolazioni di cellule staminali embrionali umane con distinti destini tessuto-specifici possono essere selezionate da culture pluripotenti.

&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x306E;&#x76E3;&#x7763;&#x5206;&#x5316;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x7642;&#x306E;&#x5206;&#x91CE;&#x3067;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x95A2;&#x5FC3;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x610F;&#x7FA9;&#x3068;&#x904B;&#x547D;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x9078;&#x629E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x96C6;&#x56E3;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x78BA;&#x7387;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x6052;&#x5E38;&#x7684;&#x306B;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;GFP&#xFF09;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;&#x57F9;&#x990A;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x306E;CD133&#xFF08;+&#xFF09;&#x307E;&#x305F;&#x306F;CD135&#xFF08;+&#xFF09;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x3001;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;GFP&#xFF08; - &#xFF09;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3002;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x901A;&#x904E;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;GFP&#xFF08;+&#xFF09;CD133&#x307E;&#x305F;&#x306F;CD135&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x6297;&#x539F;&#xFF08;TRA-1-60&#x3001;SSEA-4&#x3001;FGFR-1&#xFF09;&#x306E;&#x6C38;&#x7D9A;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x518D;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x200B;&#x200B;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x7D9A;&#x3051;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;CD133&#x307E;&#x305F;&#x306F;CD135&#x7D99;&#x4EE3;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x3001;&#x53CA;&#x3073;CD133&#xFF08;+&#xFF09;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3082;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;SSEA-4&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x3001;CD133&#xFF08;+&#xFF09;GFP&#xFF08;+&#xFF09;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30CD;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3082;&#x3063;&#x3071;&#x3089;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x306B;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#xFF08;&#x3B1;-&#x30D5;&#x30A7;&#x30C8;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF08;+&#xFF09;&#xFF09;&#x3068;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x3092;&#xFF08;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#xFF08;+&#xFF09;&#xFF09;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x7D44;&#x7E54;&#x306F;&#x3001;GFP&#xFF08;+&#xFF09;&#x7D44;&#x7E54;&#x9593;&#x3067;&#x306F;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;CD133&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x9078;&#x629E;&#x306F;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x3068;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306B;&#x307B;&#x307C;&#x72EC;&#x5360;&#x7684;&#x306B;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;CD135&#xFF08;+&#xFF09;GFP&#xFF08;+&#xFF09;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x80DA;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x5C64;&#x3092;&#x4EE3;&#x8868;&#x3059;&#x308B;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x4E8B;&#x5B9F;&#x4E0A;&#x533A;&#x5225;&#x304C;&#x3064;&#x304B;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;CD135&#x304B;&#x3089;&#xFF08; - &#xFF09;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x304C;&#x5947;&#x5F62;&#x816B;&#x306E;in vivo&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;hESC&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x5185;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x771F;&#x306E; &#x26;quot;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x26;quot;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x6982;&#x5FF5;&#x306B;&#x6311;&#x6226;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6240;&#x5B9A;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;hESC&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7D44;&#x7E54;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x8A66;&#x85AC;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x969B;&#x306B;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x8A3C;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x57F9;&#x990A;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x9078;&#x629E;&#x53EF;&#x80FD;

&#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (hESCs)&#xC758; &#xAC10;&#xB3C5;&#xB41C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC758;&#xD559; &#xBD84;&#xC57C;&#xC5D0; &#xB9CE;&#xC740; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9CC;&#xB2A5; &#xBB38;&#xD654; &#xC548;&#xC5D0;&#xC11C; Hescs&#xC758; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xD45C;&#xBA74; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC758;&#xBBF8;&#xC640; &#xC6B4;&#xBA85;&#xC744; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04; &#xD2B9;&#xC815; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC6B4;&#xBA85;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; &#xBB38;&#xD654; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xB960;&#xC801; &#xD56D; &#xC6D0; &#xBD84;&#xD3EC;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;, &#xC6B0;&#xB9AC; constitutively &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; CD133(+) &#xB610;&#xB294; CD135(+) hESCs &#xACE0;&#xB9BD; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xD45C;&#xD604; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFP)&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xC120;&#xD0DD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; GFP(-) hESCs co-cultured. &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xACFC; &#xD6C4; GFP(+) hESCs CD133 &#xB610;&#xB294; CD135 &#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD45C;&#xBA74; &#xD56D; (Tra-1-60, SSEA 4, FGFR-1)&#xC774; &#xB450; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04; CD133 &#xB610;&#xB294; CD135 &#xC9C1;&#xB82C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xACC4;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; CD133(+) hESCs SSEA-4 &#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xB18D;&#xCD95; &#xD588;&#xB2E4;&#xC758; &#xC9C0; &#xC18D;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;&#xC740;. &#xCCB4; &#xC678; &#xBD84;&#xD654;, &#xC2DC; CD133(+)GFP(+) hESCs &#xC0C1;&#xC2B9; ectoderm &#xC77C;&#xC744; &#xC804;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; nestin&#xC758; &#xC2DD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; endoderm (alpha-fetoprotein(+)) &#xBC0F; mesoderm (&#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721; actin(+)) GFP(+) &#xC870;&#xC9C1; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370;&#xB294; &#xBCF4;&#xC9C0; &#xBABB; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, CD133 &#xC0C1;&#xB300;&#xB85C; &#xC120;&#xD0DD; mesoderm endoderm&#xB97C; &#xAC70;&#xC758; &#xB3C5;&#xC810;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xC2B9;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, CD135(+)GFP(+) hESCs &#xBAA8;&#xB4E0; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xBC30;&#xC544; &#xC138;&#xADE0; &#xCE35;, &#xB300;&#xD45C; &#xC870;&#xC9C1; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0; cd135&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC70;&#xC758; &#xAD6C;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4; (-)-&#xD30C;&#xC0DD; &#xC870;&#xC9C1;. &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; teratomas vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5BB;&#xC740; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC124;&#xC815; &#xADF8; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC6B4;&#xBA85;&#xC744; &#xBBF8;&#xB9AC; &#xACB0;&#xC815;&#xC740; &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; Hescs&#xC758; &#xBD80;&#xBD84; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558; &#xACE0; &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; hESC &#xBB38;&#xD654; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC140;&#xC740; &quot;&#xB9CC;&#xB2A5;&quot; &#xC9C4;&#xC815;&#xD55C; &#xAC1C;&#xB150;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC804; Co-culture &#xC774;&#xB807;&#xAC8C;&#xB3C4; &#xB2E4;&#xB978; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; hESC &#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xBA74; &#xBC0F; &#xC774;&#xB4E4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD0DD; &#xC140;&#xC5D0; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xB454; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC870;&#xC9C1; &#xAD00;&#xB828; &#xC2DC; &#xC57D; &#xC0DD;&#xC131;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC99D;&#xBA85; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04; &#xBCC4;&#xAC1C; &#xC870;&#xC9C1; &#xAD00;&#xB828; &#xC6B4;&#xBA85; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC120;&#xD0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Diferenciaci&#xF3;n dirigida de c&#xE9;lulas madre embrionarias humanas (hESCs) ha generado mucho inter&#xE9;s en el campo de la medicina regenerativa. Mientras que las subpoblaciones de hESCs pluripotentes dentro de las culturas se han identificado basado en la expresi&#xF3;n de ant&#xED;genos de superficie espec&#xED;ficos, su significado y destino no son bien entendidos. Para determinar si una subpoblaci&#xF3;n indican los destinos espec&#xED;ficos de tejido o de representar la distribuci&#xF3;n estoc&#xE1;stica de ant&#xED;geno dentro de las culturas que proliferan, se aislaron CD133 (+) o CD135 (+) hESCs de la proliferaci&#xF3;n de las culturas que expresan constitutivamente mejorada verde fluorescente estas prote&#xED;nas (GFP), y co-cultivadas con la seleccionada GFP (-) hESCs. Despu&#xE9;s de la aprobaci&#xF3;n en la cultura, las buenas pr&#xE1;cticas agrarias (+) hESCs volver a analizar la persistencia de CD133 o CD135 expresi&#xF3;n, as&#xED; como de otros ant&#xED;genos de superficie (TRA-1-60, SSEA-4, FGFR-1), demostr&#xF3; que estas dos subpoblaciones volvi&#xF3; a expresar CD133 o CD135 sobre el paso de serie, y que hESCs CD133 (+) fueron enriquecidos por SSEA-4 expresi&#xF3;n tambi&#xE9;n. Tras la diferenciaci&#xF3;n in vitro, CD133 (+) GFP (+) hESCs dio lugar &#xFA;nicamente a ectodermo, como se detecta por la expresi&#xF3;n de nestina. Los tejidos que representan endodermo (alfa-fetoprote&#xED;na (+)) y el mesodermo (actina de m&#xFA;sculo liso (+)) no se ve entre las buenas pr&#xE1;cticas agrarias (+) los tejidos. Por el contrario, la selecci&#xF3;n contra CD133 dio origen casi exclusivamente a la mesodermo y endodermo. En contraste, CD135 (+) GFP (+) hESCs dio lugar a los tejidos que representan las tres capas germinales embrionarias, y eran virtualmente indistinguible de CD135 (-)-derivados de los tejidos. Se obtuvieron resultados similares por la diferenciaci&#xF3;n en vivo en teratomas. Estos datos demuestran que las subpoblaciones de la proliferaci&#xF3;n de hESCs cuyo tejido el destino est&#xE1; predeterminado existen, y desafiar la noci&#xF3;n de que todas las c&#xE9;lulas dentro de las culturas hESC proliferan son verdaderamente &#x26;quot;pluripotentes&#x26;quot;. Este enfoque de co-cultivo tambi&#xE9;n permitir&#xE1; la identificaci&#xF3;n de otras subpoblaciones hESC distintas, y la selecci&#xF3;n de &#xE9;stos deben ser de utilidad en la generaci&#xF3;n de tejidos espec&#xED;ficos de reactivos para la terapia basada en c&#xE9;lulas.

Subpoblaciones de c&#xE9;lulas estaminales embrionarias humanas con distintas tejidos espec&#xED;ficos Parcas Se puede seleccionar entre las Culturas pluripotentes

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE; (hESC CMs) &#x5DF2;&#x663E;&#x793A;&#x6709;&#x80FD;&#x529B;&#x6539;&#x5584;&#x5FC3;&#x808C;&#x529F;&#x80FD;&#x79FB;&#x690D;&#x6CBB;&#x7597;&#x7F3A;&#x8840;&#x6027;&#x5FC3;&#x810F;&#x75C5; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x597D;&#x5904;&#x662F;&#x77AC;&#x6001;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E;&#x6076;&#x52A3;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4FDD;&#x7559;&#x3002;&#x53EF;&#x4EE5;&#x60F3;&#x8C61;&#x5F97;&#x51FA;&#x79FB;&#x690D;&#x7684; hESC CMs &#x7684;&#x8BCA;&#x65AD;&#x6280;&#x672F;&#x53EF;&#x5E2E;&#x52A9;&#x4F18;&#x5316;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x6280;&#x672F;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x5236;&#x5B9A; hESCs &#x548C; hESC CMs &#x4E0E;&#x7F8E;&#x56FD; FDA &#x6279;&#x51C6;&#x7684;&#x9020;&#x5F71;&#x5242;&#x9752;&#x7EFF; (ICG) &#x5149;&#x5B66;&#x6210;&#x50CF; (&#x4EC1;&#x7231;) &#x6807;&#x8BB0;&#x6280;&#x672F;&#x3002;hESCs &#x90FD;&#x6807;&#x6709; 0.5&#x3001; 1.0&#x3001; 2.0 &#x548C; 2.5 &#x6BEB;&#x514B;/&#x6BEB;&#x5347;&#x7684; ICG 30&#x3001; 45&#x3001; 60 &#x5206;&#x949F;&#xFF0C;37 &#x5EA6; C.&#x7EB5;&#x5411;&#x7231;&#x7814;&#x7A76;&#x8FDB;&#x884C; hESCs &#x548C; hESC CMs&#x3002;&#x8868;&#x9762;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x8272;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4F30;&#x3002;hESCs &#x6807;&#x6709; 2 &#x6BEB;&#x514B; ICG/&#x6BEB;&#x5347; 60 &#x5206;&#x949F;&#x53D6;&#x5F97;&#x6700;&#x5927;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x3002;&#x7EB5;&#x5411;&#x7814;&#x7A76;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x4FE1;&#x53F7;&#x662F;&#x76F8;&#x5F53;&#x4E8E;&#x5728; 120 h postlabeling &#x63A7;&#x4EF6;&#x3002;HESCs &#x548C; hESC CMs &#x5728; 1&#x3001; 24&#x3001; 48 h &#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x4FE1;&#x53F7;&#x88AB;&#x5927;&#x5927;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x4EE5; precontrast &#x6570;&#x636E; (p &lt; 0.05&#xFF09;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x63ED;&#x793A;&#x7279;&#x5B9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x548C;&#x6838;&#x6807;&#x8BB0; postlabeling &#x7684;&#x4FDD;&#x7559;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; hESCs &#x548C; hESC CMs ICG &#x7528;&#x6807;&#x8BB0;&#x663E;&#x793A;&#x91CD;&#x5927;&#x8367;&#x5149;&#x81F3; 48 h &#x548C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x4E0E;&#x53CB;&#x7231;&#x3002;&#x8D34;&#x6807;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E0D;&#x635F;&#x5BB3;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x6027;&#x6216;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#x3002;&#x6280;&#x672F;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4F20;&#x9012;&#x8DEF;&#x7EBF;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FBF;&#x63D0;&#x9AD8;&#x690D;&#x5165;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x79FB;&#x690D; hESC CMs &#x6216;&#x5176;&#x4ED6;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

&#x6807;&#x7B7E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7528;&#x5432;&#x54DA;&#x83C1;&#x7EFF;&#x7684;&#x65E0;&#x521B;&#x6027;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x4E0E;&#x5149;&#x5B66;&#x6210;&#x50CF;&#xFF1A; &#x8424;&#x706B;&#x866B;&#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x9176;&#x7684; FDA &#x517C;&#x5BB9;&#x66FF;&#x4EE3;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

Human embryonic stem cell-derived cardiomyocytes (hESC-CMs) have demonstrated the ability to improve myocardial function following transplantation into an ischemic heart; however, the functional benefits are transient possibly due to poor cell retention. A diagnostic technique that could visualize transplanted hESC-CMs could help to optimize stem cell delivery techniques. Thus, the purpose of this study was to develop a labeling technique for hESCs and hESC-CMs with the FDA-approved contrast agent indocyanine green (ICG) for optical imaging (OI). hESCs were labeled with 0.5, 1.0, 2.0, and 2.5 mg/ml of ICG for 30, 45, and 60 min at 37 degrees C. Longitudinal OI studies were performed with both hESCs and hESC-CMs. The expression of surface proteins was assessed with immunofluorescent staining. hESCs labeled with 2 mg ICG/ml for 60 min achieved maximum fluorescence. Longitudinal studies revealed that the fluorescent signal was equivalent to controls at 120 h postlabeling. The fluorescence signal of hESCs and hESC-CMs at 1, 24, and 48 h was significantly higher compared to precontrast data (p < 0.05). Immunocytochemistry revealed retention of cell-specific surface and nuclear markers postlabeling. These data demonstrate that hESCs and hESC-CMs labeled with ICG show a significant fluorescence up to 48 h and can be visualized with OI. The labeling procedure does not impair the viability or functional integrity of the cells. The technique may be useful for assessing different delivery routes in order to improve the engraftment of transplanted hESC-CMs or other stem cell progenitors.

Labeling human embryonic stem cell-derived cardiomyocytes with indocyanine green for noninvasive tracking with optical imaging: an FDA-compatible alternative to firefly luciferase.

Souches embryonnaires humaines d&#xE9;riv&#xE9;es de cellules cardiomyocytes (CSEh-CMS) ont d&#xE9;montr&#xE9; la capacit&#xE9; d&#x26;#39;am&#xE9;liorer la fonction myocardique apr&#xE8;s transplantation dans une cardiopathie isch&#xE9;mique; cependant, les avantages fonctionnels sont transitoires &#xE9;ventuellement due &#xE0; la r&#xE9;tention pauvre cellule. Une technique de diagnostic qui pourraient visualiser transplant&#xE9; CSEh-CMS pourrait contribuer &#xE0; optimiser les techniques de cellules souches de livraison. Ainsi, dans le but de cette &#xE9;tude &#xE9;tait de d&#xE9;velopper une technique d&#x26;#39;&#xE9;tiquetage pour les CSEh et CSEh-CMS avec l&#x26;#39;agent de contraste approuv&#xE9; par la FDA au vert d&#x26;#39;indocyanine (ICG) pour l&#x26;#39;imagerie optique (IO). CSEh ont &#xE9;t&#xE9; marqu&#xE9;es avec 0,5, 1,0, 2,0 et 2,5 mg / ml de l&#x26;#39;ICG pour 30, 45, et 60 min &#xE0; 37 degr&#xE9;s C. Des &#xE9;tudes longitudinales ont &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;alis&#xE9;es avec OI deux CSEh et CSEh-CMS. L&#x26;#39;expression des prot&#xE9;ines de surface a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;valu&#xE9;e par immunofluorescence. CSEh &#xE9;tiquet&#xE9;s avec 2 mg GIC / ml pendant 60 min r&#xE9;alis&#xE9; par fluorescence maximale. Des &#xE9;tudes longitudinales ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que le signal de fluorescence &#xE9;tait &#xE9;quivalent aux contr&#xF4;les &#xE0; 120 postlabeling h. Le signal de fluorescence des CSEh et CSEh-CMS &#xE0; 1, 24 et 48 h &#xE9;tait significativement plus &#xE9;lev&#xE9;e par rapport aux donn&#xE9;es sans injection (p &#x26;lt;0,05). Immunocytochimie d&#xE9;montre que la r&#xE9;tention de la cellule-surface sp&#xE9;cifique et le nucl&#xE9;aire postlabeling marqueurs. Ces donn&#xE9;es d&#xE9;montrent que les CSEh et CSEh-CMS &#xE9;tiquet&#xE9; d &#x26;#39;ICG montrent une fluorescence significative jusqu&#x26;#39;&#xE0; 48 h et peuvent &#xEA;tre visualis&#xE9;es avec l&#x26;#39;OI. La proc&#xE9;dure de labellisation ne porte pas atteinte &#xE0; la viabilit&#xE9; ou &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;grit&#xE9; fonctionnelle des cellules. La technique peut &#xEA;tre utile pour &#xE9;valuer les diff&#xE9;rents itin&#xE9;raires de livraison afin d&#x26;#39;am&#xE9;liorer la prise de greffe des transplant&#xE9;s CSEh-CMS ou autres prog&#xE9;niteurs de cellules souches.

&#xC9;tiquetage de l&#x26;#39;homme les cellules souches embryonnaires d&#xE9;riv&#xE9;es cardiomyocytes avec le vert indocyanine pour le suivi non invasif avec l&#x26;#39;imagerie optique: une alternative FDA-compatible avec la lucif&#xE9;rase de luciole

Menschliche embryonale Stammzellen Cell-derived Cardiomyocytes (hESC-CMs) haben die F&auml;higkeit zur Verbesserung der myokardialen Funktion nach Transplantation in eine isch&auml;mische Herz gezeigt; jedoch sind die funktionalen Vorteile vor&uuml;bergehend m&ouml;glicherweise aufgrund schlechter Zelle Aufbewahrung. Eine diagnostische Technik, die transplantierten hESC-CMs zu visualisieren, k&ouml;nnte k&ouml;nnte dazu beitragen, um Stammzellen Lieferung Techniken zu optimieren. So war der Zweck dieser Studie eine Kennzeichnung Technik f&uuml;r Zellkulturen und hESC-CMs mit der FDA-zugelassenen Kontrast Agent Indocyanine gr&uuml;n (ICG) f&uuml;r optische Bildgebung (OI) zu entwickeln. Zellkulturen wurden beschriftet mit 0.5, 1.0, 2.0 und 2.5 mg/ml ICG f&uuml;r 30, 45 und 60 min bei 37 Grad C. l&auml;ngs OI Studien mit Zellkulturen und hESC-CMs durchgef&uuml;hrt wurden. Der Ausdruck der Oberfl&auml;che Proteine wurde mit Immunfluoreszenz-F&auml;rbung bewertet. Zellkulturen mit 2 mg ICG/ml 60 min beschriftet erreicht maximale Fluoreszenz. L&auml;ngsschnittstudien ergab, dass das Fluoreszenzsignal Kontrollen an 120 h postlabeling entspricht. Das Fluoreszenz-Signal des Zellkulturen und hESC-CMs auf 1, 24 und 48 h war signifikant h&ouml;her verglichen, um die Daten (p &lt; 0,05) precontrast. Immunzytochemie offenbart Eigentumsvorbehalt zellspezifische Marker Oberfl&auml;che und nukleare postlabeling. Diese Daten zeigen, dass Zellkulturen und hESC-CMs mit ICG beschriftet eine deutliche Fluoreszenz bis zu 48 h zeigen und mit OI visualisiert werden k&ouml;nnen. Das Kennzeichnung Verfahren beeintr&auml;chtigt nicht die Lebensf&auml;higkeit oder funktionelle Integrit&auml;t der Zellen. Die Technik kann hilfreich f&uuml;r die Beurteilung der verschiedenen Zustellrouten um die Verteilung von transplantierten hESC-CMs oder andere Stammzell-Vorl&auml;uferzellen zu verbessern sein.

Menschliche embryonale Stammzellen Cell-derived Cardiomyocytes mit Indocyanine gr&uuml;n f&uuml;r nichtinvasive Tracking mit optischen Abbildung beschriften: FDA-kompatible Alternative zur Gl&uuml;hw&uuml;rmchen Luciferase.

Umano embrionale cellule staminali derivate cardiomyocytes (hESC-CMs) hanno dimostrato la capacit&agrave; di migliorare la funzione del miocardio dopo trapianto in un cuore ischemico; Tuttavia, i benefici funzionali sono transitori eventualmente dovuto a ritenzione di povera cella. Una tecnica diagnostica che potrebbe visualizzare trapiantato hESC-CMs potrebbe aiutare a ottimizzare le tecniche di consegna delle cellule staminali. Cos&igrave;, lo scopo di questo studio era quello di sviluppare una tecnica d&#39;etichettatura per hESC e hESC-CMs con il contrasto approvato dalla FDA agente indocianina verde (ICG) per imaging ottico (OI). hESCs sono stati etichettati con 0.5, 1.0, 2.0 e 2.5 mg/ml di ICG per 30, 45 e 60 min a 37 gradi studi longitudinali OI C. sono state eseguite con entrambi hESC e hESC-CMs. L&#39;espressione delle proteine della superficie &egrave; stata valutata con colorazione di immunofluorescenza. hESC etichettati con 2 mg ICG/ml per 60 min raggiunto massimo fluorescenza. Studi longitudinali hanno rivelato che il segnale fluorescente era equivalente ai controlli a 120 h postlabeling. Il segnale di fluorescenza di hESCs e hESC-CMs a 1, 24 e 48 h &egrave; stato significativamente superiore rispetto per precontrast dati (p &lt; 0,05). Immunocitochimica ha rivelato ritenzione di cella specifici marcatori superficiali e nucleare postlabeling. Questi dati dimostrano che le hESCs ed etichettato con ICG hESC-CMs mostrano una fluorescenza significativa fino a 48 h e possono essere visualizzati con OI. La procedura di etichettatura non compromettere la vitalit&agrave; o l&#39;integrit&agrave; funzionale delle cellule. La tecnica pu&ograve; essere utile per valutare i percorsi di consegna differenti al fine di migliorare l&#39;attecchimento del trapianto hESC-CMs o altri progenitori delle cellule staminali.

Etichettatura umano cardiomyocytes derivato da cellule staminali embrionali con indocianina verde per il monitoraggio non invasivo con imaging ottico: un&#39;alternativa compatibile con FDA luciferasi firefly.

&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;hESC&#x306E;-CMS&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x865A;&#x8840;&#x6027;&#x5FC3;&#x81D3;&#x306B;&#x79FB;&#x690D;&#x5F8C;&#x306E;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8;&#x304C;&#x4E4F;&#x3057;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x4FDD;&#x6301;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x79FB;&#x690D;&#x306E;hESC-CM&#x3092;&#x8996;&#x899A;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x8A3A;&#x65AD;&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x3001;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3064;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;&#x5149;&#x5B66;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#xFF08;OI&#xFF09;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30FC;&#x30F3;&#xFF08;ICG&#xFF09;&#x3092;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B7;&#x30A2;&#x30CB;&#x30F3;FDA&#x627F;&#x8A8D;&#x9020;&#x5F71;&#x5264;&#x3067;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306E;hESC-CM&#x306E;&#x6A19;&#x8B58;&#x6CD5;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;2.0&#x3001;0.5&#x3001;1.0&#x3067;&#x6A19;&#x8B58;&#x3057;&#x305F;&#x3001;30&#x3001;45&#x3001;37&#x2103;&#x3067;&#x7E26;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;OI&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;60&#x5206;&#x9593;ICG&#x306E;2.5 mg / ml&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306E;hESC-CM&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x8868;&#x9762;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x67D3;&#x8272;&#x3067;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 60&#x5206;&#x9593;2mg&#x3092;ICG / ml&#x306E;&#x3067;&#x6A19;&#x8B58;&#x3057;&#x305F;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x5927;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9577;&#x624B;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;120&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x30DD;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x540C;&#x7B49;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 1&#x3001;24&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;48&#x6642;&#x9593;&#x3067;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;hESC&#x306E;-CMS&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306F;precontrast&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#xFF08;P &#x26;lt;0.05&#xFF09;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x9AD8;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x3068;&#x6838;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x30DD;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x4FDD;&#x6301;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;hESC&#x306E;-CMS&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x5927;48&#x6642;&#x9593;&#x307E;&#x3067;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x86CD;&#x5149;&#x3092;&#x793A;&#x3059;ICG&#x306E;&#x3067;&#x6A19;&#x8B58;&#x3057;&#x3001;OI&#x3068;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x3001;&#x79FB;&#x690D;hESC&#x306E;-CMS&#x3084;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x7740;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x914D;&#x9001;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5F79;&#x306B;&#x7ACB;&#x3064;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x5149;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684;&#x306A;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B7;&#x30A2;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EA;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#xFF1A;&#x30DB;&#x30BF;&#x30EB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;FDA&#x3068;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x4EE3;&#x66FF;

&#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; cardiomyocytes (hESC-CMs) &#xD5C8; &#xD608; &#xC131; &#xC2EC;&#xC7A5;;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC2EC;&#xADFC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC785;&#xC99D; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xD61C;&#xD0DD;&#xC740; &#xAC00;&#xB09C;&#xD55C; &#xC140; &#xBCF4;&#xC874; &#xC778;&#xD574; &#xACFC;&#xB3C4;. &#xC774;&#xC2DD;&#xB41C; hESC Cms&#xB97C; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC804;&#xB2EC; &#xAE30;&#xC220; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654;&#xB97C; &#xB3C4;&#xC6B8; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;,&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xC801;&#xC740; hESCs &#xBC0F; hESC-Cms&#xB294; FDA &#xC2B9;&#xC778; &#xB300;&#xBE44; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; indocyanine &#xB179;&#xC0C9; (ICG) &#xAD11;&#xD559; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; (&#xC624;&#xC774;)&#xC640; &#xB77C;&#xBCA8; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xB2E4;. hESCs 0.5, 1.0, 2.0, &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;&#xC640; 30, 45, &#xBC0F; 60 &#xBD84; 37&#xB3C4; C. &#xACBD;&#xB3C4; &#xC624;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; ICG&#xC758; 2.5 mg/ml Hescs&#xC640; hESC Cms&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC218;&#xD589; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD45C;&#xBA74; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD; immunofluorescent &#xC5BC;&#xB8E9;&#xACFC; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. 60 &#xBD84;&#xC5D0; 2mg ICG/ml&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; hESCs &#xCD5C;&#xB300; &#xD615;&#xAD11;&#xC744; &#xB2EC;&#xC131;. &#xACBD;&#xB3C4; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD615;&#xAD11; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0;&#xC11C; 120 h postlabeling &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; &#xACF5;&#xAC1C;. HESC-CMs, 1, 24, 48 h&#xC5D0;&#xC11C; Hescs&#xC758; &#xD615;&#xAD11; &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; (p &lt; 0.05) precontrast&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB192;&#xC558;&#xB2E4;. Immunocytochemistry &#xC140; &#xD2B9;&#xC815; &#xD45C;&#xBA74; &#xBC0F; &#xD575; &#xB9C8;&#xCEE4; postlabeling&#xC758; &#xBCF4;&#xC874;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xBCF4;&#xC5EC; Hescs&#xC640; hESC CMs ICG &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xB85C; 48 h&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD615;&#xAD11; &#xD45C;&#xC2DC; &#xBC0F; &#xC624;&#xC774; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xC874; &#xB610;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131; &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &#xD504;&#xB85C;&#xC2DC;&#xC800;&#xB97C; &#xC190;&#xC0C1; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xC220;&#xC774; &#xC774;&#xC2DD;&#xB41C; hESC Cms&#xC758; engraftment &#xB610;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; progenitors&#xC744; &#xAC1C;&#xC120; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB2E4;&#xB978; &#xBC30;&#xB2EC; &#xACBD;&#xB85C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC720;&#xC6A9; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; cardiomyocytes indocyanine&#xC640; &#xAD11;&#xD559; &#xC601;&#xC0C1;&#xACFC; &#xBE44; &#xCE68; &#xD22C; &#xC801;&#xC778; &#xCD94;&#xC801;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xB9B0; &#xB77C;&#xBCA8;: &#xAC1C; &#xB625; &#xBC8C;&#xB808; &#xB8E8;&#xC2DC;&#xD398;&#xB77C;&#xC544;&#xC81C; FDA &#xD638;&#xD658; &#xB300;&#xC2E0;.

Madre embrionarias humanas de c&#xE9;lulas derivadas de los cardiomiocitos (HESC-CM) han demostrado la capacidad para mejorar la funci&#xF3;n del miocardio despu&#xE9;s de un trasplante en una cardiopat&#xED;a isqu&#xE9;mica, sin embargo, los beneficios funcionales son transitorios, posiblemente debido a la retenci&#xF3;n de c&#xE9;lulas pobres. Una t&#xE9;cnica de diagn&#xF3;stico que pod&#xED;a visualizar trasplantado hESC-CM puede ayudar a optimizar las t&#xE9;cnicas de administraci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre. Por lo tanto, el prop&#xF3;sito de este estudio fue desarrollar una t&#xE9;cnica de etiquetado de hESCs y hESC CMS-con el agente de cambio aprobado por la FDA verde de indocianina (ICG) para la &#xF3;ptica de imagen (OI). hESCs se marcaron con 0,5, 1,0, 2,0 y 2,5 mg / ml de ICG para el 30, 45 y 60 min a 37 &#xBA; C. Los estudios longitudinales de OI se realizaron con dos hESCs y hESC los CM. La expresi&#xF3;n de prote&#xED;nas de superficie se evalu&#xF3; con la tinci&#xF3;n inmunofluorescente. hESCs etiquetados con 2 mg ICG / ml durante 60 minutos logra m&#xE1;ximo de fluorescencia. Los estudios longitudinales revelaron que la se&#xF1;al fluorescente fue equivalente a los controles en 120 postlabeling h. La se&#xF1;al de fluorescencia de hESCs y hESC CMS-a 1, 24 y 48 h fue significativamente mayor en comparaci&#xF3;n con los datos precontraste (p &#x26;lt;0,05). Inmunocitoqu&#xED;mica revel&#xF3; retenci&#xF3;n de c&#xE9;lulas espec&#xED;ficas de la superficie y postlabeling marcadores nucleares. Estos datos demuestran que hESCs y hESC CMS-etiquetados con ICG muestran una fluorescencia significativa hasta 48 horas y pueden ser visualizadas con esta enfermedad. El procedimiento de marcaje no perjudique la viabilidad o la integridad funcional de las c&#xE9;lulas. La t&#xE9;cnica puede ser &#xFA;til para la evaluaci&#xF3;n de las diferentes rutas de entrega a fin de mejorar el injerto trasplantado de hESC-CM u otros progenitores de c&#xE9;lulas madre.

Etiquetado Humanos de c&#xE9;lulas madre embrionarias derivadas de cardiomiocitos con verde de indocianina para el seguimiento no invasivo con im&#xE1;genes &#xF3;pticas: una alternativa compatible con la FDA para la luciferasa de luci&#xE9;rnaga

&#x5FC3;&#x8870;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E0E;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;hESC&#xFF09;-&#x6D3E;&#x751F;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE; (hCM) &#x53D7;&#x5230;&#x9650;&#x5236;&#x7684;&#x81EA;&#x53D1;&#x6027; hCM &#x5206;&#x5316;&#x7387;&#x8F83;&#x4F4E;&#x3002;&#x793A;&#x8BE5; p38 &#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; (p38MAPK) &#x6307;&#x793A;&#x4ECE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x53D1;&#x751F;&#x5176;&#x4ED6;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x662F;&#x5426; p38MAPK &#x6291;&#x5236;&#x5242; SB203580&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x5230; hCM &#x5206;&#x5316;&#x3002;

P38MAPK &#x5B9A;&#x65F6;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x6307;&#x793A;&#x52A0;&#x901F;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Heart failure therapy with human embryonic stem cell (hESC)-derived cardiomyocytes (hCM) has been limited by the low rate of spontaneous hCM differentiation. As others have shown that p38 mitogen-activated protein kinase (p38MAPK) directs neurogenesis from mouse embryonic stem cells, we investigated whether the p38MAPK inhibitor, SB203580, might influence hCM differentiation.

Timed inhibition of p38MAPK directs accelerated differentiation of human embryonic stem cells into cardiomyocytes.

Traitement de l&#x26;#39;insuffisance cardiaque avec des cellules souches embryonnaires humaines (CSEh) d&#xE9;riv&#xE9;s de cardiomyocytes (HCM) a &#xE9;t&#xE9; limit&#xE9;e par le faible taux de HCM diff&#xE9;renciation spontan&#xE9;e. Comme d&#x26;#39;autres ont montr&#xE9; que la prot&#xE9;ine kinase p38 activ&#xE9;e par le mitog&#xE8;ne (p38MAPK) dirige la neurogen&#xE8;se &#xE0; partir de cellules souches embryonnaires de souris, nous avons examin&#xE9; si l&#x26;#39;inhibiteur de p38MAPK, SB203580, pourrait influencer la diff&#xE9;renciation HCM.

L&#x26;#39;inhibition de la Timed p38MAPK Diriger diff&#xE9;renciation acc&#xE9;l&#xE9;r&#xE9;e de cellules souches embryonnaires humaines en cardiomyocytes

Herzinsuffizienz Therapie mit humanen embryonalen Stammzellen (hESC)-abgeleiteten Cardiomyocytes (hCM) hat durch die niedrige Rate der spontanen hCM Differenzierung begrenzt worden. Andere haben gezeigt, dass die p38 Mitogen-aktivierte Proteinkinase (p38MAPK) leitet die Neurogenese von M&auml;useder embryonalen Stammzellen, untersucht wir, ob die p38MAPK-Inhibitor, SB203580, hCM Differenzierung beeinflussen k&ouml;nnten.

Zeitgesteuerte Hemmung der p38MAPK leitet beschleunigte Differenzierung von humanen embryonalen Stammzellen in Cardiomyocytes.

Insufficienza cardiaca la terapia con cellule staminali embrionali umane (hESC)-derivata cardiomyocytes (hCM) ha stato limitato dal basso tasso di hCM spontanea differenziazione. Come altri hanno mostrato che chinasi di proteina mitogene-attivata p38 (p38MAPK) dirige la neurogenesi da cellule staminali embrionali di topo, abbiamo studiato se l&#39;inibitore di p38MAPK, SB203580, potrebbe influenzare hCM differenziazione.

Inibizione temporizzata di p38MAPK dirige accelerata differenziazione delle cellule staminali embrionali umane in cardiomiociti.

&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;hESC&#x306E;&#xFF09;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;HCM&#xFF09;&#x3068;&#x5FC3;&#x4E0D;&#x5168;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;&#x81EA;&#x7136;&#x306E;HCM&#x5206;&#x5316;&#x7387;&#x306E;&#x4F4E;&#x3055;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;p38&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;p38MAPK&#xFF09;&#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x795E;&#x7D4C;&#x3092;&#x6307;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;p38MAPK&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;SB203580&#x306F;&#x3001;HCM&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;

p38MAPK&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x52A0;&#x901F;&#x3092;&#x6307;&#x793A;

&#xC2EC;&#xC7A5; &#xB9C8;&#xBE44; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC640; &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (hESC)-&#xD30C;&#xC0DD;&#xB41C; cardiomyocytes (hCM) &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xD638;&#xCE58;&#xBBFC;&#xC2DC; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xD55C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xADF8; p38 &#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; (p38MAPK) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xCCB4;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xB300;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD638;&#xCE58;&#xBBFC; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5EC;&#xBD80; p38MAPK &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;, SB203580, &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;.

P38mapk&#xC758; &#xCD08;&#xACFC; &#xC800;&#xD574; cardiomyocytes&#xC5D0; &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC00;&#xC18D;&#xB41C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC2DC;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La terapia de la insuficiencia cardiaca con c&#xE9;lulas madre embrionarias humanas (CMEH) derivados de los cardiomiocitos (HCM) se ha visto limitado por la baja tasa de diferenciaci&#xF3;n espont&#xE1;nea HCM. Como otros han demostrado que la p38 activada por mit&#xF3;genos prote&#xED;na quinasa (p38MAPK) dirige la neurog&#xE9;nesis de c&#xE9;lulas madre embrionarias de rat&#xF3;n, se investig&#xF3; si el inhibidor de p38MAPK, SB203580, podr&#xED;an influir en la diferenciaci&#xF3;n HCM.

La inhibici&#xF3;n de la Programado p38MAPK Dirige diferenciaci&#xF3;n acelerada de c&#xE9;lulas estaminales embrionarias humanas en cardiomiocitos

&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (hESCs) &#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x524D;&#x6240;&#x672A;&#x6709;&#x7684;&#x673A;&#x4F1A;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E0E;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x75BE;&#x75C5;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x5B9E;&#x73B0;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x8FDB;&#x6B65;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x76D1;&#x6D4B;&#x4E2D;&#x6D3B; hESCs &#x80DE;&#x5185;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x800C;&#x4E0D;&#x6539;&#x53D8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5C5E;&#x6027;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x9700;&#x8981;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x4FE1;&#x6807;&#x662F;&#x7528;&#x4EE5;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5355;&#x94FE;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5176;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x7684; hESCs &#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E; Oct4 &#x4F5C;&#x4E3A;&#x76EE;&#x6807;&#x6392;&#x5E8F; (FACS) &#x53CC;&#x8367;&#x5149;&#x5171;&#x632F;&#x80FD;&#x91CF;&#x8F6C;&#x79FB; &#xFF08;&#x97F3;&#x54C1;&#xFF09; &#x5206;&#x5B50;&#x4FE1;&#x6807;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E; Oct4 &#x4E4B;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x4F7F;&#x7528;&#x5171;&#x805A;&#x7126;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7684;&#x62C5;&#x5FE7;&#x8FD9;&#x53EF;&#x5E94;&#x7528;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x5411;&#x7684; Oct4 &#x8868;&#x8FBE; hESCs &#x5206;&#x79BB;&#x4E0E;&#x9274;&#x5B9A;&#x7531;&#x5916;&#x5730;&#x8D44;&#x4EA7;&#x7BA1;&#x5236;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x97F3;&#x54C1;&#x9633;&#x6027; hESCs &#x5C55;&#x793A;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x8BC4;&#x9009;&#x548C; hESCs &#x67D3;&#x5206;&#x5B50;&#x4FE1;&#x6807;&#x968F;&#x7740;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x63A8;&#x79FB;&#x8868;&#x660E;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x901F;&#x5EA6;&#x548C;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x706D;&#x7EDD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x57FA;&#x4E8E;&#x97F3;&#x54C1;&#x7684;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EEA;&#x4F7F;&#x7528;&#x5206;&#x5B50;&#x4FE1;&#x6807;&#x9694;&#x79BB; Oct4 &#x8868;&#x8FBE;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72; hESCs&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x9002;&#x5E94;&#x9009;&#x62E9;&#x533A;&#x5206; hESCs &#x5177;&#x4F53;&#x53D1;&#x5C55;&#x65F6;&#x95F4;&#x70B9;&#x7531;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x800C;&#x529F;&#x80FD;&#x6216;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x6539;&#x52A8;&#x3002;&#x4E3A;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5B83;&#x63D0;&#x4F9B; hESC &#x6D3E;&#x751F;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x524D;&#x4F53;&#x7684;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x5206;&#x79BB;&#x91CD;&#x8981;&#x65B0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7528;&#x4E8E;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x3002;

&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x4EBA;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5177;&#x6709;&#x53CC;&#x91CD;&#x8367;&#x5149;&#x5171;&#x632F;&#x80FD;&#x91CF;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5206;&#x5B50;&#x4FE1;&#x6807;&#x3002;

Pluripotent human embryonic stem cells (hESCs) provide an unprecedented opportunity for the study of human tissue development, and the development of cell-based therapies for human disease. To realize these potential advances, however, methods for monitoring expression of intracellular proteins in live hESCs without altering cellular properties are needed. Molecular beacons are single-stranded oligonucleotides that have been employed to assay gene expression. To test their potential for high-throughput isolation of hESCs, we developed a dual fluorescence resonance energy transfer (FRET) molecular beacon system using fluorescence-activated cell sorting (FACS) with Oct4 as a target. We demonstrate that Oct4 can be detected by FRET using confocal microscopy, that this can be applied in a high-throughput manner to the identification and isolation of Oct4-expressing hESCs by FACS, that FRET-positive hESCs demonstrate pluripotency in culture and in vivo, and that hESCs transfected with molecular beacons demonstrate normal growth rates and oligonucleotide extinction over time. These studies demonstrate that FRET-based FACS using molecular beacons provides a useful tool for isolating Oct4-expressing pluripotent hESCs, and may also be adapted to selecting differentiating hESCs at specific developmental time points determined by transcription factor expression without functional or genomic alteration. As such, it provides an important new method for high-throughput isolation of hESC-derived tissue-specific precursors for analytic and therapeutic purposes.

High-throughput tracking of pluripotent human embryonic stem cells with dual fluorescence resonance energy transfer molecular beacons.

Pluripotentes cellules souches embryonnaires humaines (CSEh) fournissent une occasion sans pr&#xE9;c&#xE9;dent pour l&#x26;#39;&#xE9;tude du d&#xE9;veloppement du tissu humain, et le d&#xE9;veloppement de th&#xE9;rapies cellulaires pour les maladies humaines. Pour r&#xE9;aliser ces avanc&#xE9;es potentielles, toutefois, des m&#xE9;thodes de surveillance expression de prot&#xE9;ines intracellulaires dans les CSEh en direct sans alt&#xE9;rer les propri&#xE9;t&#xE9;s cellulaires sont n&#xE9;cessaires. Balises mol&#xE9;culaires sont oligonucl&#xE9;otides simple brin qui ont &#xE9;t&#xE9; employ&#xE9;es pour l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes dosage. Pour tester leur potentiel de haut d&#xE9;bit isolement des CSEh, nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; une double Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) syst&#xE8;me de balise mol&#xE9;culaire &#xE0; l&#x26;#39;aide de tri cellulaire activ&#xE9; par fluorescence (FACS) avec Oct4 comme une cible. Nous d&#xE9;montrons que Oct4 peut &#xEA;tre d&#xE9;tect&#xE9; par FRET en utilisant la microscopie confocale, que cela peut &#xEA;tre appliqu&#xE9;e d&#x26;#39;une mani&#xE8;re &#xE0; haut d&#xE9;bit pour l&#x26;#39;identification et l&#x26;#39;isolement de Oct4-exprimant CSEh par FACS, que FRET-positifs CSEh d&#xE9;montrer la pluripotence dans la culture et in vivo, et que les CSEh transfect&#xE9;es avec des balises mol&#xE9;culaires montrent des taux de croissance normales et d&#x26;#39;extinction oligonucl&#xE9;otide au fil du temps. Ces &#xE9;tudes d&#xE9;montrent que FRET-base FACS en utilisant les balises mol&#xE9;culaire constitue un outil utile pour isoler Oct4 exprimant CSEh pluripotentes, et peut &#xE9;galement &#xEA;tre adapt&#xE9; &#xE0; la s&#xE9;lection de diff&#xE9;renciation des CSEh &#xE0; des points de temps de d&#xE9;veloppement d&#xE9;termin&#xE9;es par l&#x26;#39;expression des facteurs de transcription, sans alt&#xE9;ration fonctionnelle ou g&#xE9;nomique. En tant que tel, il fournit une m&#xE9;thode nouvelle importante pour haut-d&#xE9;bit isolement des CSEh d&#xE9;riv&#xE9;es de tissus sp&#xE9;cifiques pr&#xE9;curseurs &#xE0; des fins analytiques et th&#xE9;rapeutiques.

&#xC0; haut d&#xE9;bit de suivi de la pluripotentes cellules souches embryonnaires humaines avec double Beacons r&#xE9;sonance de transfert de fluorescence mol&#xE9;culaire de l&#x26;#39;&#xE9;nergie

Pluripotenten embryonaler Stammzellen (Zellkulturen) bieten eine einmalige Gelegenheit f&uuml;r die Untersuchung von menschlichem Gewebe Entwicklung und die Entwicklung der zellbasierte Therapien f&uuml;r Krankheiten des Menschen. Um diesen m&ouml;glichen Fortschritten zu realisieren, sind jedoch erforderlich, Methoden f&uuml;r die &Uuml;berwachung der Expression der intrazellul&auml;ren Proteine im Leben Zellkulturen ohne Ver&auml;nderung der zellul&auml;re Eigenschaften. Molecular Beacons sind einzelstr&auml;ngige Oligonukleotide, die auf die Genexpression Brutversuch eingesetzt. Um ihr Potenzial f&uuml;r Hochdurchsatz-Isolierung von Zellkulturen zu testen, haben wir ein dual Fluoreszenz Resonanz Energie Transfer (FRET) Molekulare Leuchtfeuer System mit Fluoreszenz-aktivierte Zelle Sortieren (FACS) mit Oct4 als Ziel entwickelt. Wir zeigen, dass Oct4 durch FRET mit confocal Mikroskopie nachgewiesen werden kann, dass kann angewendet werden in gewissem Sinne Hochdurchsatz zur Identifizierung und Isolierung von Zellkulturen Oct4-Ausdruck von FACS, FRET-positivem Zellkulturen Pluripotenz in Kultur und in-vivo demonstrieren und Zellkulturen, die mit molecular Beacons transfected normale Wachstumsraten und Oligonukleotid Aussterben im Laufe der Zeit zeigen. Diese Studien zeigen, dass FRET-basierte FACS mit molecular Beacons vorsieht, dass ein n&uuml;tzliches Werkzeug Oct4-Ausdr&uuml;cken pluripotenten Zellkulturen isolieren und Auswahl von ausschlaggebenden Zellkulturen zu spezifischen Entwicklungsst&ouml;rungen Zeitpunkten bestimmt durch Transkription Faktor Ausdruck ohne funktionale oder genomischen Ver&auml;nderung angepasst werden kann. Als solches bietet es eine wichtige neue Methode f&uuml;r die Hochdurchsatz-Isolierung hESC abgeleiteten Gewebe-spezifischen Vorstufen von analytischen und therapeutischen Zwecken.

Hochdurchsatz-tracking von pluripotenten menschlichen embryonaler Stammzellen mit dual Fluoreszenz-Resonanz-Energie transfer molecular Beacons.

Pluripotent cellule staminali embrionali umane (hESC) forniscono un&#39;opportunit&agrave; senza precedenti per lo studio dello sviluppo di tessuti umani e lo sviluppo di terapie cell-based per la malattia umana. Per realizzare questi potenziali progressi, tuttavia, sono necessari metodi per il monitoraggio di espressione delle proteine intracellulari di hESCs live senza alterare le propriet&agrave; cellulari. Molecular beacons sono oligonucleotidi a singolo filamento che sono stati impiegati per l&#39;analisi di espressione genica. Per testare il loro potenziale per l&#39;isolamento di alto-rendimento delle hESCs, abbiamo sviluppato un doppia fluorescenza energy transfer (FRET) molecular beacon sistema una risonanza mediante fluorescenza-attivato delle cellule (FACS) l&#39;ordinamento con Oct4 come bersaglio. Dimostriamo che Oct4 pu&ograve; essere rilevato da FRET utilizzando la microscopia confocale, che questo pu&ograve; essere applicato in un modo ad alta velocit&agrave; per l&#39;identificazione e l&#39;isolamento di Oct4-esprimendo hESCs di FACS, che FRET-positivi hESCs dimostrare la pluripotenza in cultura e in vivo, e che hESCs transfected con molecular beacons dimostrano tassi di crescita normale e del oligonucleotide estinzione nel corso del tempo. Questi studi dimostrano che FACS FRET-based utilizzando molecular beacons fornisce un utile strumento per isolare Oct4-esprimendo pluripotent hESCs e pu&ograve; anche essere adattato alla selezione di differenziazione hESCs in punti specifici dello sviluppo tempo determinati dall&#39;espressione del fattore di trascrizione senza alterazione genomica funzionale. Come tale, fornisce un importante nuovo metodo per l&#39;isolamento di high-throughput di derivati hESC tessuto-specifici precursori per scopi analitici e terapeutici.

High-throughput tracking delle umane pluripotenti staminali embrionali con energia di risonanza di fluorescenza dual trasferimento molecular beacons.

&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x30D2;&#x30C8;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x7814;&#x7A76;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x524D;&#x4F8B;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x6A5F;&#x4F1A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x9032;&#x6B69;&#x3092;&#x5B9F;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x3092;&#x5909;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x30D3;&#x30FC;&#x30B3;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x63A1;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x4E00;&#x672C;&#x9396;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x4E8C;&#x91CD;&#x86CD;&#x5149;&#x5171;&#x9CF4;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x79FB;&#x52D5;&#xFF08;FRET&#xFF09;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;Oct4&#x306E;&#x3068;&#x86CD;&#x5149;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x9078;&#x5225;&#xFF08;FACS&#xFF09;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x5206;&#x5B50;&#x30D3;&#x30FC;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;Oct4&#x306E;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x304C;FRET&#x306E;&#x967D;&#x6027;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x3067;&#x591A;&#x5206;&#x5316;&#x80FD;&#x3092;&#x793A;&#x3059;FACS&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;Oct4&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5358;&#x96E2;&#x306B;&#x9AD8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;FRET&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x30D3;&#x30FC;&#x30B3;&#x30F3;&#x3067;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x7387;&#x3068;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x304B;&#x3051;&#x3066;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x7D76;&#x6EC5;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x30D3;&#x30FC;&#x30B3;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;FRET&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;FACS&#x306F;&#x3001;Oct4&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4FBF;&#x5229;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3084;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x5DEE;&#x5225;&#x5316;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306B;&#x9069;&#x5408;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5206;&#x6790;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6CBB;&#x7642;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x305F;&#x3081;hESC&#x7531;&#x6765;&#x7D44;&#x7E54;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x524D;&#x99C6;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB;&#x86CD;&#x5149;&#x5171;&#x9CF4;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x79FB;&#x52D5;&#x5206;&#x5B50;&#x30D3;&#x30FC;&#x30B3;&#x30F3;&#x3068;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;

&#xB9CC;&#xB2A5; &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (hESCs) &#xC778;&#xAC04; &#xC870;&#xC9C1; &#xBC1C;&#xC804;&#xACFC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xBC18; &#xCE58;&#xB8CC;&#xBC95;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC804;&#xB840; &#xC5C6;&#xB294; &#xAE30;&#xD68C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xBC1C;&#xC804;&#xC744; &#xC2E4;&#xD604; &#xD558;&#xB294;, &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; hESCs &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC2DD;&#xC774; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC774; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xC790; &#xBE44;&#xCF58;&#xC740; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; oligonucleotides &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Hescs&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC2A4;&#xB8E8;&#xD48B; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB4C0;&#xC5BC; &#xD615;&#xAD11; &#xACF5;&#xBA85; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC804;&#xC1A1; (&#xBB34;&#xC11C; &#xC6CC;) &#xBD84;&#xC790; &#xD45C;&#xC9C0; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; (FACS)&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; Oct4 &#xC815;&#xB82C;&#xC744; &#xD615;&#xAD11; &#xD65C;&#xC131; &#xC140;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC1C;&#xBC1C;. Oct4 &#xBB34;&#xC11C; &#xC6CC; confocal &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC10;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xADF8;&#xC774; &#xC218; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xBC0F; &#xACA9;&#xB9AC; Oct4 &#xD45C;&#xD604; Hescs&#xC758; FACS, &#xC5EC; &#xBB34;&#xC11C; &#xC6CC; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; hESCs pluripotency &#xBB38;&#xD654; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC785;&#xC99D; &#xD558; &#xACE0; &#xBD84;&#xC790; &#xBE44;&#xCF58;&#xC73C;&#xB85C; &#xD398; hESCs &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC131;&#xC7A5; &#xC18D;&#xB3C4; oligonucleotide &#xBA78;&#xC885; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xC9C0;&#xB0A8;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xBB34;&#xC11C; &#xC6CC; &#xAE30;&#xBC18; FACS &#xBD84;&#xC790; &#xBE44;&#xCF58;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; Oct4 &#xD45C;&#xD604; pluripotent Hescs&#xB97C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB610;&#xB294; &#xAC8C;&#xB188; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC5C6;&#xC774; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; &#xC2DD; &#xC815;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; Hescs&#xB97C; &#xC120;&#xD0DD; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC640; &#xAC19;&#xC774;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBAA9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; hESC &#xD30C;&#xC0DD; &#xC870;&#xC9C1; &#xAD00;&#xB828; &#xC120;&#xAD6C;&#xC790;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC2A4;&#xB8E8;&#xD48B; &#xACA9;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9;&#xC758; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC778;&#xAC04; &#xCD94;&#xC801; &#xB4C0;&#xC5BC; &#xD615;&#xAD11; &#xACF5;&#xBA85; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0;&#xC640; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC790; &#xBE44;&#xCF58; &#xC804;&#xC1A1;.

Pluripotentes c&#xE9;lulas madre embrionarias humanas (hESCs) proporcionan una oportunidad sin precedentes para el estudio del desarrollo de los tejidos humanos, y el desarrollo de terapias basadas en c&#xE9;lulas para la enfermedad humana. Para hacer realidad estos avances potenciales, sin embargo, los m&#xE9;todos para el seguimiento de la expresi&#xF3;n de las prote&#xED;nas intracelulares en hESCs en vivo, sin alterar las propiedades celulares son necesarios. Balizas moleculares son de cadena simple de oligonucle&#xF3;tidos que se han empleado para an&#xE1;lisis de expresi&#xF3;n g&#xE9;nica. Para probar su potencial para el alto rendimiento de aislamiento de hESCs, hemos desarrollado una doble transferencia de energ&#xED;a de resonancia fluorescente (FRET) sistema de marcador molecular con fluorescencia de c&#xE9;lulas activadas por la clasificaci&#xF3;n (FACS), con Oct4 como un objetivo. Se demuestra que Oct4 puede ser detectado por FRET mediante microscop&#xED;a confocal, que esto se puede aplicar de una forma de alto rendimiento para la identificaci&#xF3;n y aislamiento de los que expresan Oct4 hESCs por FACS, que FRET positivas hESCs demostrar la pluripotencialidad en la cultura e in vivo, y que hESCs transfectadas con marcadores moleculares demuestran las tasas normales de crecimiento y la extinci&#xF3;n de oligonucle&#xF3;tidos con el tiempo. Estos estudios demuestran que FRET basados &#x200B;&#x200B;en FACS utilizando balizas molecular proporciona una herramienta &#xFA;til para aislar Oct4 que expresan hESCs pluripotentes, y tambi&#xE9;n se puede adaptar para seleccionar hESCs diferenciadores en puntos de tiempo espec&#xED;ficos de desarrollo determinadas por la expresi&#xF3;n del factor de transcripci&#xF3;n sin alteraci&#xF3;n funcional o gen&#xF3;mica. Como tal, proporciona un m&#xE9;todo nuevo e importante para el alto rendimiento de aislamiento de los derivados de hESC-tejidos espec&#xED;ficos de precursores para fines anal&#xED;ticos y terap&#xE9;uticos.

De alto rendimiento Seguimiento de pluripotentes c&#xE9;lulas madre embrionarias humanas con faros de doble fluorescencia la transferencia de energ&#xED;a de resonancia molecular

&#x4E0E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x5668;&#x5B98;&#xFF0C;&#x5FC3;&#x810F;&#x662F;&#x65E0;&#x6CD5;&#x81EA;&#x6211;&#x4FEE;&#x590D;&#x635F;&#x4F24;&#x540E;&#x3002;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (hESCs) &#x6210;&#x957F;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x540C;&#x65F6;&#x4FDD;&#x6301;&#x6F5C;&#x529B;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E3A;&#x8BB8;&#x591A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x65E0;&#x9650;&#x5206;&#x88C2;&#x3002;&#x4E3A;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x524D;&#x6240;&#x672A;&#x6709;&#x7684;&#x673A;&#x4F1A;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x6CBB;&#x7597;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x75BE;&#x75C5;&#x8F6F;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7F3A;&#x635F;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x6765;&#x81EA; hESCs (hMPs) &#x4F7F;&#x7528; &alpha;-&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x91CD;&#x94FE; (&alpha;MHC) &#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x5FC3;&#x808C;&#x524D;&#x4F53;-GFP &#x8BB0;&#x8005;&#x4E00;&#x884C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5B9E;&#x65F6;&#x8367;&#x5149;&#x5B9A;&#x91CF; PCR &#xFF08;qPCR&#xFF09;&#xFF0C;&#x8BB0;&#x8005;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4EC5;&#x9650;&#x4E8E; hESC &#x6D3E;&#x751F; (CMs) &#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x548C; hMPs &#x5F15;&#x8D77;&#x4E13;&#x95E8;&#x4E3A;&#x808C;&#x8089;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7578;&#x80CE;&#x7624;&#x5F62;&#x6210;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x8868;&#x660E;&#x4E86;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x8BB0;&#x8005;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5E72;&#x6270; hESC &#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; hMPs &#x4F1A;&#x5F15;&#x8D77;&#x5FC3;&#x623F;&#x3001; &#x5FC3;&#x5BA4;&#x548C;&#x4E13;&#x95E8;&#x4F20;&#x5BFC;&#x5398;&#x7C73;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B;&#x7531; qPCR &#x548C;&#x5FAE;&#x7535;&#x6781;&#x9635;&#x5217;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x7684; hMPs &#x8FC7;&#x53BB;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x6307;&#x8BC1; Wnt &#x548C;&#x8F6C;&#x5316;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;-&beta; &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x5728;&#x4E2D;&#x533B;&#x836F;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;HMPs &#x4F7F;&#x7528;&#x6B64; &alpha;MHC GFP &#x8BB0;&#x8005;&#x884C;&#x7684;&#x6807;&#x8BC6;&#x5C06;&#x91CD;&#x8981;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E3A;&#x5FC3;&#x810F;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x8BD5;&#x5242;&#x3002;

&#x5DE5;&#x7A0B;&#x5FC3;&#x810F;&#x8BB0;&#x8005;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x6807;&#x8BC6;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x5FC3;&#x808C;&#x524D;&#x4F53;&#x3002;

Unlike some organs, the heart is unable to repair itself after injury. Human embryonic stem cells (hESCs) grow and divide indefinitely while maintaining the potential to develop into many tissues of the body. As such, they provide an unprecedented opportunity to treat human diseases characterized by tissue loss. We have identified early myocardial precursors derived from hESCs (hMPs) using an Î±-myosin heavy chain (Î±MHC)-GFP reporter line. We have demonstrated by immunocytochemistry and quantitative real-time PCR (qPCR) that reporter activation is restricted to hESC-derived cardiomyocytes (CMs) differentiated in vitro, and that hMPs give rise exclusively to muscle in an in vivo teratoma formation assay. We also demonstrate that the reporter does not interfere with hESC genomic stability. Importantly, we show that hMPs give rise to atrial, ventricular and specialized conduction CM subtypes by qPCR and microelectrode array analysis. Expression profiling of hMPs over the course of differentiation implicate Wnt and transforming growth factor-Î² signaling pathways in CM development. The identification of hMPs using this Î±MHC-GFP reporter line will provide important insight into the pathways regulating human myocardial development, and may provide a novel therapeutic reagent for the treatment of cardiac disease.

An engineered cardiac reporter cell line identifies human embryonic stem cell-derived myocardial precursors.

Contrairement &#xE0; certains organes, le c&#x153;ur est incapable de se r&#xE9;parer apr&#xE8;s une blessure. Cellules souches embryonnaires humaines (CSEh) cro&#xEE;tre et se diviser ind&#xE9;finiment, tout en maintenant le potentiel de se d&#xE9;velopper en de nombreux tissus de l&#x26;#39;organisme. Comme telles, elles offrent une occasion sans pr&#xE9;c&#xE9;dent pour traiter des maladies humaines caract&#xE9;ris&#xE9;es par la perte de tissu. Nous avons identifi&#xE9; au d&#xE9;but du myocarde pr&#xE9;curseurs d&#xE9;riv&#xE9;s de CSEh (HMPS) en utilisant une cha&#xEE;ne &#x3B1;-lourde de la myosine (&#x3B1;MHC)-GFP en ligne journaliste. Nous avons d&#xE9;montr&#xE9; par immunocytochimie et quantitative PCR en temps r&#xE9;el (qPCR) que l&#x26;#39;activation journaliste est limit&#xE9;e &#xE0; CSEh d&#xE9;riv&#xE9;es cardiomyocytes (CM) diff&#xE9;renci&#xE9;es in vitro, et que HMPS donner lieu exclusivement au muscle dans un essai in vivo la formation de t&#xE9;ratome. Nous d&#xE9;montrons &#xE9;galement que le journaliste n&#x26;#39;a pas nuire &#xE0; la stabilit&#xE9; g&#xE9;nomique CSEh. Surtout, nous montrons que HMPS donner lieu &#xE0; auriculaire, ventriculaire et sous-types sp&#xE9;cialis&#xE9;s CM conduction par qPCR et de l&#x26;#39;analyse matrice de micro&#xE9;lectrodes. Profilage de l&#x26;#39;expression de HMPS au cours de la diff&#xE9;renciation impliquent Wnt et facteur de croissance transformant b&#xEA;ta-voies de signalisation dans le d&#xE9;veloppement CM. L&#x26;#39;identification des HMPS utilisant cette ligne journaliste &#x3B1;MHC-GFP fournira des indications importantes sur les voies de r&#xE9;gulation du d&#xE9;veloppement humain du myocarde, et peut fournir un nouveau r&#xE9;actif th&#xE9;rapeutique pour le traitement de la maladie cardiaque.

Une ing&#xE9;nierie cellulaire cardiaque ligne Reporter Identifie les cellules souches embryonnaires humaines d&#xE9;riv&#xE9;es de pr&#xE9;curseurs du myocarde

Im Gegensatz zu einigen Organen ist das Herz nicht in der Lage, selbst nach einer Verletzung zu reparieren. Menschlicher embryonaler Stammzellen (Zellkulturen) wachsen und teilen sich unbegrenzt und gleichzeitig das Potenzial, in vielen Geweben des K&ouml;rpers zu entwickeln. So bieten sie eine beispiellose Gelegenheit zur Behandlung von Krankheiten beim Menschen gekennzeichnet durch Verlust von Gewebe. Wir haben ermittelt, dass fr&uuml;he myokardiale Vorl&auml;ufer von Zellkulturen (hMPs) mit eine &alpha;-Myosin heavy Chain (&alpha;MHC) abgeleitet-GFP-Reporter-Linie. Wir haben bewiesen, durch Immunzytochemie und quantitative Echtzeit-PCR (qPCR), die Reporter-Aktivierung zu hESC abgeleiteten Cardiomyocytes (CMs) in-vitro-differenziert und hMPs Aufstieg ausschlie&szlig;lich in einer in-vivo Teratom Bildung Probe Muskel beschr&auml;nkt ist. Wir zeigen auch, dass die Reporter nicht hESC genomischen Stabilit&auml;t beeintr&auml;chtigt. Wichtig ist, zeigen wir, dass hMPs Vorhofflimmern, ventrikul&auml;re und spezialisierte Leitverm&ouml;gen CM Subtypen von qPCR und Mikroelektrode Array-Analyse hervorrufen. Expression profiling im Laufe der Differenzierung der hMPs implizieren Wnt und transforming Growth Factor-&beta; Signalwege in CM-Entwicklung. Die Identifizierung der hMPs mit dieser &alpha;MHC-GFP-Reporter-Linie kann liefern wichtige Einblicke in die Wege, die Regulierung der menschlichen myokardialen Entwicklung, und eine neuartige therapeutische Reagenz f&uuml;r die Behandlung von Herzerkrankungen.

Ein ver&auml;nderter kardiale Reporter-Zelllinie bezeichnet menschliche embryonale Stammzellen Cell-derived myokardiale Vorstufen.

A differenza di alcuni organi, il cuore &egrave; in grado di riparare se stesso dopo l&#39;infortunio. Cellule staminali embrionali umane (hESC) crescere e dividersi indefinitamente, mantenendo il potenziale per sviluppare in molti tessuti del corpo. Come tali, essi forniscono un&#39;opportunit&agrave; senza precedenti per il trattamento di malattie umane, caratterizzate dalla perdita di tessuto. Abbiamo identificato primi precursori del miocardio derivati da hESCs (hMPs) utilizzando una catena pesante della miosina &alpha; (&alpha;MHC)-linea reporter GFP. Abbiamo dimostrato di immunocitochimica e PCR quantitativa in tempo reale (qPCR) che attivazione reporter &egrave; limitato ai derivati hESC cardiomyocytes (CMs) differenziati in vitro, e che hMPs dar luogo esclusivamente al muscolo in un saggio di formazione di teratoma in vivo. Abbiamo anche dimostrare che il reporter non interferisce con la stabilit&agrave; genomica hESC. Soprattutto, ci mostra che hMPs d&agrave; luogo a sottotipi di conduzione atriale, ventricolare e specializzati CM di analisi di matrice qPCR e microelettrodo. Delineamento di espressione di hMPs nel corso della differenziazione coinvolgono Wnt e transforming growth factor-&beta; segnalazione percorsi nello sviluppo CM. L&#39;identificazione di hMPs utilizzando questa linea reporter &alpha;MHC-GFP fornir&agrave; importante spaccato delle vie che regolano lo sviluppo umano del miocardio e pu&ograve; fornire un reagente romanzo terapeutico per il trattamento della malattia cardiaca.

Una linea di cellule ingegnerizzate reporter cardiaco identifica umani precursori embrionali derivate da cellule staminali del miocardio.

&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x81D3;&#x5668;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;&#x5FC3;&#x81D3;&#x306F;&#x640D;&#x50B7;&#x5F8C;&#x306B;&#x81EA;&#x5206;&#x81EA;&#x8EAB;&#x3092;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x4F53;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x767A;&#x5C55;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x7121;&#x9650;&#x306B;&#x5206;&#x88C2;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x30D2;&#x30C8;&#x75BE;&#x60A3;&#x3092;&#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x524D;&#x4F8B;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x6A5F;&#x4F1A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3B1;-&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x91CD;&#x9396;&#xFF08;&#x3B1;MHC&#xFF09;-GFP&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;hMPs&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x65E9;&#x671F;&#x306E;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;hMPs&#x306F;&#x3001;in vivo&#x5947;&#x5F62;&#x816B;&#x5F62;&#x6210;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x7B4B;&#x8089;&#x306B;&#x6392;&#x4ED6;&#x7684;&#x306B;&#x4E0A;&#x6607;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3002;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x304C;hESC&#x7531;&#x6765;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;CMS&#xFF09;&#x306B;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x3068;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;PCR&#xFF08;&#x5B9A;&#x91CF;PCR&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x8A18;&#x8005;&#x304C;hESC&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068;&#x5E72;&#x6E09;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;hMPs&#x306F;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;PCR&#x3068;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x96FB;&#x6975;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5FC3;&#x623F;&#x3001;&#x5FC3;&#x5BA4;&#x3084;&#x5C02;&#x9580;&#x4F1D;&#x5C0E;CM&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3092;&#x751F;&#x3058;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;hMPs&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;CM&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;Wnt&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;-&#x3B2;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x5DFB;&#x304D;&#x8FBC;&#x3080;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3B1;MHC-GFP&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;hMPs&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x5FC3;&#x81D3;&#x75C5;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x6CBB;&#x7642;&#x5264;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A8;&#x30F3;&#x30B8;&#x30CB;&#x30A2;&#x5FC3;&#x81D3;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;

&#xC77C;&#xBD80; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC640;&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xB9C8;&#xC74C;&#xC740; &#xBD80;&#xC0C1; &#xD6C4; &#xC790;&#xCCB4;&#xB97C; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (hESCs) &#xC131;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xCCB4;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xC870;&#xC9C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC804;&#xD560; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#xBB34;&#xAE30;&#xD55C;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xB215;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC640; &#xAC19;&#xC774;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC870;&#xC9C1; &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC744; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xB840; &#xC5C6;&#xB294; &#xAE30;&#xD68C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD08;&#xAE30; &#xC2EC;&#xADFC; &#xC120;&#xAD6C;&#xC790; hESCs (hMPs) &alpha; myosin &#xBB34;&#xAC70;&#xC6B4; &#xCCB4;&#xC778; (&alpha;MHC)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;-GFP &#xAE30;&#xC790; &#xC120;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; immunocytochemistry &#xBC0F; &#xAE30;&#xC790; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; cardiomyocytes (CMs)&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCB4; &#xC678; &#xBD84;&#xD654;&#xC640; hMPs vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xD615;&#xC885; &#xD615;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADFC;&#xC721;&#xC744; &#xB3C5;&#xC810;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4; hESC &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xC815;&#xB7C9;&#xC801; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; PCR (qPCR)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC99D;&#xBA85; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xAE30;&#xC790; hESC &#xAC8C;&#xB188; &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xBC29;&#xD574; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; hMPs &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4; &#xC2EC; &#xBC29;, &#xC2EC; &#xC2E4; &#xBC0F; &#xD2B9;&#xC218; &#xC804;&#xB3C4; CM &#xD558;&#xC704; qPCR microelectrode &#xBC30;&#xC5F4; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DD; Hmps&#xC758; &#xBD84;&#xD654; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; Wnt &#xBC0F; &#xBCC0;&#xD615; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;-&beta; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; CM &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;. HMPs &alpha;MHC GFP &#xAE30;&#xC790; &#xC120;&#xC774;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC2EC;&#xADFC; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC2DC; &#xC57D;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC870;&#xC791;&#xB41C; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xAE30;&#xC790; &#xC140; &#xC120; &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; &#xC2EC;&#xADFC; &#xC804;&#xC870;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

A diferencia de otros &#xF3;rganos, el coraz&#xF3;n no es capaz de repararse a s&#xED; mismo despu&#xE9;s de la lesi&#xF3;n. Las c&#xE9;lulas madre embrionarias (hESCs) crecen y se dividen de forma indefinida mientras se mantiene el potencial de convertirse en muchos tejidos del cuerpo. Por lo tanto, proporcionan una oportunidad sin precedentes para el tratamiento de enfermedades humanas que se caracterizan por la p&#xE9;rdida de tejido. Hemos identificado los primeros precursores de miocardio derivadas de hESCs (caso de los CPM) con una cadena pesada de miosina-&#x3B1; (&#x3B1;MHC)-GFP l&#xED;nea de reportero. Hemos demostrado por inmunocitoqu&#xED;mica y cuantitativa en tiempo real PCR (qPCR) que la activaci&#xF3;n del reportero se limita a los derivados de hESC-cardiomiocitos (CMS) diferenciadas in vitro, y que caso de los CPM dar lugar exclusivamente a los m&#xFA;sculos en un ensayo in vivo la formaci&#xF3;n de teratomas. Tambi&#xE9;n demuestran que el periodista no interfiera con la estabilidad gen&#xF3;mica hESC. Es importante destacar que, nos muestran que caso de los CPM dar lugar a auricular, ventricular y especializados subtipos de CM de la conducci&#xF3;n de qPCR y el an&#xE1;lisis conjunto de microelectrodos. Perfiles de expresi&#xF3;n de caso de los CPM en el transcurso de la diferenciaci&#xF3;n implicar Wnt y de crecimiento transformante beta del factor de v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n en el desarrollo de CM. La identificaci&#xF3;n de caso de los CPM que utilizan esta l&#xED;nea reportero &#x3B1;MHC-GFP proporcionar&#xE1; informaci&#xF3;n importante sobre las v&#xED;as que regulan el desarrollo del miocardio humano, y puede proporcionar un reactivo terap&#xE9;utica novedosa para el tratamiento de la enfermedad card&#xED;aca.

Una l&#xED;nea de ingenier&#xED;a de la c&#xE9;lula card&#xED;aca Reportero Identifica madre embrionarias humanas derivadas de c&#xE9;lulas precursores del miocardio

&#x5C3D;&#x7BA1;&#x6CBB;&#x7597;&#x80BA;&#x52A8;&#x8109;&#x9AD8;&#x538B;&#x7684;&#x8FDB;&#x5C55;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5C1A;&#x672A;&#x5B9E;&#x73B0;&#x771F;&#x6B63;&#x6062;&#x590D;&#x6027;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;&#x6CE8;&#x610F;&#x7ED9;&#x4E88;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x80FD;&#x591F;&#x5230;&#x8840;&#x7BA1;&#x635F;&#x4F24;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9;&#x9996;&#x9875;&#xFF0C;&#x5E76;&#x91CD;&#x65B0;&#x751F;&#x6210;&#x8840;&#x7BA1;&#x5FAA;&#x73AF;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;&#x4E5F;&#x79F0;&#x4E3A;&#x65E9;&#x671F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x96C6;&#x4F53;&#x884C;&#x52A8;&#x6761;&#x6B3E;&#xFF09;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x7C7B; CAC &#x6CBB;&#x7597;&#x80BA;&#x52A8;&#x8109;&#x9AD8;&#x538B;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x4E25;&#x91CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x7597;&#x6548;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x5230;&#x5916;&#x5468;&#x8840;&#x548C;&#x7BA1;&#x7406;&#x5BF9;&#x88F8;&#x5927;&#x9F20;&#x4E0A; 14 &#xFF08;&quot;&#x63D0;&#x524D;&quot;&#xFF09; &#x6216;&#x91CE;&#x767E;&#x5408;&#x6CE8;&#x5C04;&#x540E;&#x7684; (&quot;&#x8FDF;&#x5230;&quot;&#xFF09; 21 &#x5929;&#x3002;&#x5BF9;&#x7167;&#x7EC4;&#x6536;&#x5230;&#x91CE;&#x767E;&#x5408;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;&#x75C5;&#x60C5;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4F7F;&#x7528;&#x53F3;&#x5FC3;&#x5BFC;&#x7BA1;&#x68C0;&#x67E5;&#x548C;&#x8D85;&#x58F0;&#x5FC3;&#x52A8;&#x56FE;&#x5728;&#x591A;&#x4E2A;&#x65F6;&#x95F4;&#x70B9;&#x3002;&#x751F;&#x5B58;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3001; &#x53F3;&#x5FC3;&#x5BA4;&#x80A5;&#x5927; &#xFF08;RVH&#xFF09; &#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x80A5;&#x539A;&#x7814;&#x7A76;&#x7EC8;&#x7ED3;&#x70B9;&#x4E0A;&#x8FDB;&#x884C;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x8367;&#x5149;&#x5B9A;&#x91CF; PCR &#x8FDB;&#x884C;&#x4EE5;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7EC6;&#x80DE;&#x690D;&#x5165;&#x3002;&#x6CBB;&#x7597;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x96C6;&#x4F53;&#x884C;&#x52A8;&#x6761;&#x6B3E;&#xFF0C;&#x65E0;&#x8BBA;&#x662F;&#x5728;&#x65E9;&#x671F;&#x6216;&#x665A;&#x671F;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x70B9;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728;&#x589E;&#x52A0;&#x751F;&#x5B58;&#xFF0C;&#x548C;&#x6CBB;&#x7597;&#x6CA1;&#x6709;&#x9632;&#x6B62;&#x6216;&#x51CF;&#x5C11;&#x75BE;&#x75C5;&#x63A7;&#x5236;&#x4E0E;&#x76F8;&#x6BD4;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;RVH &#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x9972;&#x6599;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E0E;&#x63A7;&#x5236;&#x76F8;&#x6BD4;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EFB;&#x4F55;&#x597D;&#x5904;&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x63A2;&#x6D4B;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x79FB;&#x690D;&#x80BA;&#x7684;&#x4EBA;&#x8C08;&#x8BDD;&#x770B;&#x4E86;&#x540E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D; 14 &#x6216; 21 &#x5929;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;CAC &#x6CBB;&#x7597;&#x589E;&#x52A0;&#x751F;&#x5B58;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x5E76;&#x4E0D;&#x6CA1;&#x6709;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6216;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5B66;&#x7684;&#x597D;&#x5904;&#x3002;&#x672A;&#x6765;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5E94;&#x9762;&#x5411;&#x4E0D;&#x540C;&#x5242;&#x91CF;&#x672A;&#x4FEE;&#x6539;&#x96C6;&#x4F53;&#x884C;&#x52A8;&#x6761;&#x6B3E;&#x6216;&#x8005;&#x65E9;&#x671F;&#x6CBB;&#x7597;&#x65F6;&#x95F4;&#x70B9;&#x6216;&#x57FA;&#x56E0;&#x4FEE;&#x9970;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8FD0;&#x8F7D;&#x5DE5;&#x5177;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x5BF9;&#x80BA;&#x90E8;&#x52A8;&#x8109;&#x6D41;&#x901A;&#x624B;&#x6BB5;&#x3002;

&#x5FAA;&#x73AF;&#x8840;&#x7BA1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x80BA;&#x52A8;&#x8109;&#x9AD8;&#x538B;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;

Despite advances in the treatment of pulmonary arterial hypertension, a truly restorative therapy has not been achieved. Attention has been given to circulating angiogenic cells (CACs, also termed early endothelial progenitor cells) because of their ability to home to sites of vascular injury and regenerate blood vessels. We studied the efficacy of human CAC therapy in the treatment of pulmonary arterial hypertension at two different stages of disease severity. Cells were isolated from peripheral blood and administered to nude rats on day 14 ("early") or day 21 ("late") after monocrotaline injection. The control group received monocrotaline but no cell treatment. Disease progression was assessed using right heart catheterization and echocardiography at multiple time points. Survival differences, right ventricular hypertrophy (RVH), and vascular hypertrophy were analyzed at the study endpoint. Quantitative PCR was performed to evaluate cell engraftment. Treatment with human CACs either at the early or late time points did not result in increased survival, and therapy did not prevent or reduce the severity of disease compared with control. Histological analysis of RVH and vascular muscularization showed no benefit with therapy compared with control. No detectable signal was seen of human transcript in transplanted lungs at 14 or 21 days after cell transplant. In conclusion, CAC therapy was not associated with increased survival and did not result in either clinical or histological benefits. Future studies should be geared toward either earlier therapeutic time points with varying doses of unmodified CACs or genetically modified cells as a means of delivery of factors to the pulmonary arterial circulation.

Treatment of pulmonary arterial hypertension with circulating angiogenic cells.

Malgr&#xE9; les progr&#xE8;s dans le traitement de l&#x26;#39;hypertension art&#xE9;rielle pulmonaire, une th&#xE9;rapie r&#xE9;paratrice vraiment n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; atteint. Une attention particuli&#xE8;re a &#xE9;t&#xE9; accord&#xE9;e &#xE0; la circulation des cellules angiog&#xE9;niques (CACS, &#xE9;galement appel&#xE9;es cellules prog&#xE9;nitrices endoth&#xE9;liales d&#xE9;but) en raison de leur capacit&#xE9; &#xE0; la maison pour des sites de l&#xE9;sion vasculaire et r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rer les vaisseaux sanguins. Nous avons &#xE9;tudi&#xE9; l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de la th&#xE9;rapie CAC humaine dans le traitement de l&#x26;#39;hypertension art&#xE9;rielle pulmonaire &#xE0; deux stades diff&#xE9;rents de s&#xE9;v&#xE9;rit&#xE9; de la maladie. Les cellules ont &#xE9;t&#xE9; isol&#xE9;es du sang p&#xE9;riph&#xE9;rique et administr&#xE9; &#xE0; des rats nus sur 14 jours (&#xAB;pr&#xE9;coce&#xBB;) ou le jour 21 (&#xAB;en retard&#xBB;) apr&#xE8;s l&#x26;#39;injection monocrotaline. Le groupe t&#xE9;moin a re&#xE7;u monocrotaline mais aucun traitement cellulaire. Progression de la maladie a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;valu&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;aide cath&#xE9;t&#xE9;risme cardiaque droit et l&#x26;#39;&#xE9;chocardiographie &#xE0; plusieurs moments. Diff&#xE9;rences de survie, une hypertrophie du ventricule droit (HRV), et l&#x26;#39;hypertrophie vasculaire ont &#xE9;t&#xE9; analys&#xE9;s &#xE0; la fin de l&#x26;#39;&#xE9;tude. La PCR quantitative a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;alis&#xE9;e afin d&#x26;#39;&#xE9;valuer la prise de greffe de cellules. Le traitement par les PCA de l&#x26;#39;homme, soit &#xE0; des points dans le temps pr&#xE9;coces ou tardifs n&#x26;#39;ont pas abouti &#xE0; une survie accrue, et la th&#xE9;rapie n&#x26;#39;a pas pr&#xE9;venir ou r&#xE9;duire la gravit&#xE9; de la maladie par rapport au t&#xE9;moin. L&#x26;#39;analyse histologique de la HRV et muscularisation vasculaire n&#x26;#39;a montr&#xE9; aucun avantage par rapport &#xE0; la th&#xE9;rapie avec le contr&#xF4;le. Pas de signal d&#xE9;tectable a &#xE9;t&#xE9; vu de la transcription humaine dans les poumons transplant&#xE9;s &#xE0; 14 ou 21 jours apr&#xE8;s la greffe de cellules. En conclusion, CAC traitement n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; associ&#xE9;e &#xE0; une survie accrue et n&#x26;#39;a pas entra&#xEE;n&#xE9; soit des prestations cliniques ou histologiques. Les &#xE9;tudes futures devraient &#xEA;tre orient&#xE9;s vers soit des points de temps auparavant th&#xE9;rapeutiques avec des doses variant de PCA non modifi&#xE9;es ou de cellules g&#xE9;n&#xE9;tiquement modifi&#xE9;s en tant que moyen de livraison de facteurs &#xE0; la circulation art&#xE9;rielle pulmonaire.

Traitement de l&#x26;#39;hypertension art&#xE9;rielle pulmonaire avec des cellules circulantes angiog&#xE9;niques

Trotz Fortschritte in der Behandlung der pulmonalen arteriellen Hypertonie ist eine wahrhaft restaurative Therapie nicht erreicht worden. Augenmerk wurde auf die zirkulierenden angiogenen Zellen (CACs, auch genannt fr&uuml;hen endothelialen Vorl&auml;uferzellen) aufgrund ihrer F&auml;higkeit, Heimat von Websites vaskul&auml;re Sch&auml;digung und Blutgef&auml;&szlig;e zu regenerieren. Wir studierten die Wirksamkeit der menschlichen CAC-Therapie in der Behandlung der pulmonalen arteriellen Hypertonie in zwei verschiedenen Stadien der Krankheit. Zellen aus peripherem Blut isoliert waren und nackt Ratten am Tag 14 (&quot;fr&uuml;h&quot;) oder Tag 21 (&quot;sp&auml;t&quot;) nach Monocrotaline Injektion verabreicht. Die Kontrollgruppe erhielt Monocrotaline aber keine Zellenbehandlung. Fortschreiten der Krankheit war nach rechts Herzkatheter und Echokardiographie zu mehreren Zeitpunkten bewertet. &Uuml;berleben Unterschiede, rechtsventrikul&auml;ren Hypertrophie (RVH) und vaskul&auml;rer Hypertrophie wurden am Endpunkt Studie analysiert. Quantitativer PCR wurde durchgef&uuml;hrt, um die Zelle Verteilung zu bewerten. Behandlung mit menschlichen CACs entweder auf den fr&uuml;hen oder sp&auml;ten Zeitpunkte nicht zu gef&uuml;hrt hat verl&auml;ngerte &uuml;berleben und Therapie zu verhindern oder die Schwere der Krankheit im Vergleich zu Steuerelement nicht. Histologische Analyse des RVH und vaskul&auml;re Muscularization zeigte keinen Vorteil mit Therapie gegen&uuml;ber der Kontrolle. Kein nachweisbares Signal wurde 14 oder 21 Tage nach Zelle Transplantation menschlicher Protokoll im transplantierten Lunge gesehen. Abschlie&szlig;end CAC Therapie war nicht mehr &uuml;berleben zugeordnet und nicht zu einer klinischen oder histologische Vorteile. Zuk&uuml;nftige Studien sollten entweder fr&uuml;heren therapeutische Zeitpunkten bei unterschiedlichen Dosen des unver&auml;nderten CACs ausgerichtet werden oder genetisch modifizierten Zellen als Mittel zur Bereitstellung von Faktoren f&uuml;r die pulmonale arterielle Zirkulation.

Behandlung der pulmonalen arteriellen Hypertonie mit zirkulierenden angiogenen Zellen.

Nonostante i progressi nel trattamento dell&#39;ipertensione arteriosa polmonare, non &egrave; stata raggiunta una terapia veramente ristoratore. Attenzione &egrave; stata data a cellule angiogeniche (CACs, dette anche cellule progenitrici endoteliali precoce) in circolazione a causa della loro capacit&agrave; a casa per siti di lesioni vascolari e rigenerare i vasi sanguigni. Abbiamo studiato l&#39;efficacia della terapia CAC umana nel trattamento dell&#39;ipertensione arteriosa polmonare in due diversi stadi di gravit&agrave; della malattia. Le cellule sono state isolate da sangue periferico e somministrato ai ratti nudi giorno 14 (&quot;presto&quot;) o giorno 21 (&quot;late&quot;) dopo l&#39;iniezione monocrotaline. Il gruppo di controllo ha ricevuto monocrotaline ma nessun trattamento della cellula. La progressione della malattia &egrave; stata valutata utilizzando il cateterismo del cuore destro e l&#39;ecocardiografia in pi&ugrave; punti del tempo. Le differenze di sopravvivenza, ipertrofia ventricolare destra (RVH) e ipertrofia vascolare sono stati analizzati presso l&#39;endpoint di studio. PCR quantitativa &egrave; stato eseguito per valutare l&#39;attecchimento delle cellule. Trattamento con CACs umana sia a inizio o fine tempo punti non hanno risultato in aumento di sopravvivenza, e la terapia non impedire o ridurre la gravit&agrave; della malattia rispetto al controllo. L&#39;analisi istologica di RVH e muscularization vascolare ha mostrato alcun beneficio con terapia rispetto al controllo. Nessun segnale rilevabile &egrave; stato visto di trascrizione umano nei polmoni trapiantati a 14 o 21 giorni dopo il trapianto di cellule. In conclusione, CAC terapia non &egrave; stata associata con la sopravvivenza aumentata e non si traducesse in benefici clinici o istologici. Gli studi futuri dovrebbero essere orientati verso entrambi precedenti punti tempo terapeutico con varie dosi di CACs non modificato o modificato geneticamente le cellule come un mezzo di consegna di fattori per la circolazione arteriosa polmonare.

Trattamento dell&#39;ipertensione arteriosa polmonare con cellule angiogeniche circolanti.

&#x80BA;&#x52D5;&#x8108;&#x6027;&#x80BA;&#x9AD8;&#x8840;&#x5727;&#x75C7;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x771F;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x304C;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x95A2;&#x5FC3;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x8840;&#x7BA1;&#x640D;&#x50B7;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3078;&#x306E;&#x30DB;&#x30FC;&#x30E0;&#x3078;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;CACS&#x3068;&#x3082;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x306E;&#x5FAA;&#x74B0;&#x306B;&#x4E0E;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x91CD;&#x75C7;&#x5EA6;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x80BA;&#x52D5;&#x8108;&#x6027;&#x80BA;&#x9AD8;&#x8840;&#x5727;&#x75C7;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;CAC&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x672B;&#x68A2;&#x8840;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x6CE8;&#x5C04;&#x5F8C;14&#x65E5;&#x76EE;&#xFF08; &#x26;quot;&#x65E9;&#x671F;&#x26;quot;&#xFF09;&#x307E;&#x305F;&#x306F;21&#x65E5;&#x76EE;&#xFF08; &#x26;quot;&#x5F8C;&#x671F;&#x26;quot;&#xFF09;&#x3092;&#x30CC;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x6295;&#x4E0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7FA4;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7642;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x3002;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x53F3;&#x5FC3;&#x30AB;&#x30C6;&#x30FC;&#x30C6;&#x30EB;&#x691C;&#x67FB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5FC3;&#x30A8;&#x30B3;&#x30FC;&#x691C;&#x67FB;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306F;&#x3001;&#x53F3;&#x5FC3;&#x5BA4;&#x80A5;&#x5927;&#xFF08;RVH&#xFF09;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x80A5;&#x5927;&#x306F;&#x3001;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B9A;&#x91CF;PCR&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x7740;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x4EBA;&#x9593;CACS&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x65E9;&#x3044;&#x304B;&#x9045;&#x3044;&#x6642;&#x306B;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x306F;&#x81F3;&#x3089;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3001;&#x3068;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;&#x3001;&#x5BFE;&#x7167;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x91CD;&#x75C7;&#x5EA6;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; RVH&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;muscularization&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x5B66;&#x7684;&#x89E3;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5BFE;&#x7167;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x6CBB;&#x7642;&#x3068;&#x4F55;&#x306E;&#x30E1;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8;&#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x691C;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x5F8C;14&#x307E;&#x305F;&#x306F;21&#x65E5;&#x76EE;&#x306B;&#x79FB;&#x690D;&#x80BA;&#x306E;&#x4E2D;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x7269;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;CAC&#x6CBB;&#x7642;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x751F;&#x5B58;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3068;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D44;&#x7E54;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x306E;&#x5229;&#x76CA;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4ECA;&#x5F8C;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x80BA;&#x52D5;&#x8108;&#x5FAA;&#x74B0;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x624B;&#x6BB5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;CACS&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6539;&#x5909;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6295;&#x4E0E;&#x91CF;&#x3092;&#x5909;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x6642;&#x70B9;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x65B0;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5FAA;&#x74B0;&#x3068;&#x80BA;&#x52D5;&#x8108;&#x6027;&#x80BA;&#x9AD8;&#x8840;&#x5727;&#x75C7;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;

&#xD3D0; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xACE0;&#xD608;&#xC555; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC758; &#xBC1C;&#xC804;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C4;&#xC815;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6D0;&#xAE30;&#xB97C; &#xD68C;&#xBCF5; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xB294; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558;&#xC9C0; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC8FC;&#xC758; angiogenic &#xC140; (CACs, &#xB610;&#xD55C; &#xCD08;&#xAE30; &#xB0B4; &#xD53C; &#xBFCC;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xB418; &#xB098;) &#xD608;&#xAD00; &#xBD80;&#xC0C1;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB85C; &#xD648; &#xBC0F; &#xD608;&#xAD00;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC21C;&#xD658; &#xC8FC;&#xC5B4;&#xC9C4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; CAC &#xCE58;&#xB8CC; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC2EC;&#xAC01;&#xB3C4;&#xC758; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3D0; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xACE0;&#xD608;&#xC555;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC140; &#xB9D0; &#xCD08; &#xD608;&#xC561; &#xC73C;&#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xD558;&#xB8E8; 14 (&quot;&#xC77C;&#xCC0D;&quot;) &#xB610;&#xB294; monocrotaline &#xC8FC;&#xC785; &#xD6C4; &#xB370;&#xAC00; 21 (&quot;&#xB2A6;&#xAC8C;&quot;)&#xC5D0; &#xB204;&#xB4DC; &#xC950;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xD22C;&#xC5EC;. &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xADF8;&#xB8F9; monocrotaline &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC140; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xBC1B;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xC9C4;&#xD589; &#xC624;&#xB978;&#xCABD; &#xC2EC;&#xC7A5; catheterization &#xBC0F; &#xCD08;&#xC74C;&#xD30C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC1C;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xC874; &#xCC28;&#xC774;, &#xBC14;&#xB85C; &#xC2EC; &#xC2E4; &#xBE44; &#xB300; (RVH), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD608;&#xAD00; &#xBE44; &#xB300; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB05D;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC815;&#xB7C9;&#xC801; PCR &#xC140; engraftment &#xD3C9;&#xAC00;&#xB97C; &#xC218;&#xD589; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; Cacs&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xCC0D; &#xB610;&#xB294; &#xB2A6;&#xC740; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC0DD;&#xC874;, &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xAC70;&#xB098; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xC2EC;&#xAC01;&#xB3C4; &#xC904;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. RVH &#xBC0F; &#xD608;&#xAD00; muscularization&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xD559; &#xBD84;&#xC11D; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD61C;&#xD0DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xAC10;&#xC9C0; &#xC2E0;&#xD638;&#xAC00; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC131;&#xC801; &#xC99D;&#xBA85;&#xC11C; &#xC774;&#xC2DD;&#xB41C; &#xD3D0;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xC2DD; &#xD6C4; 14 ~ 21 &#xC77C;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xB05D;&#xC73C;&#xB85C;, CAC &#xCE58;&#xB8CC;&#xB294; &#xC99D;&#xAC00; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xAD00; &#xBC0F; &#xC784;&#xC0C1; &#xB610;&#xB294; &#xC870;&#xC9C1;&#xD559; &#xD61C;&#xD0DD;&#xC744; &#xCD08;&#xB798; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xB798; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC218;&#xC815; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; Cacs&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xACFC; &#xC774;&#xC804; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB97C; &#xD5A5;&#xD574; &#xAE30;&#xC5B4; &#xB4DC; &#xD574;&#xC57C;&#xD55C;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; &#xD3D0; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xC21C;&#xD658;&#xC5D0; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xC804;&#xB2EC; &#xC218;&#xB2E8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615;.

&#xC21C;&#xD658; angiogenic &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xD3D0; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xACE0;&#xD608;&#xC555;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;.

A pesar de los avances en el tratamiento de la hipertensi&#xF3;n arterial pulmonar, una verdadera terapia de restauraci&#xF3;n no se ha logrado. Se ha prestado atenci&#xF3;n a la distribuci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas angiog&#xE9;nicas (CAC, tambi&#xE9;n denominadas c&#xE9;lulas endoteliales progenitoras tempranas), debido a su capacidad para el hogar de los sitios de lesi&#xF3;n vascular y la regeneraci&#xF3;n de los vasos sangu&#xED;neos. Se estudi&#xF3; la eficacia de la terapia CAC humana en el tratamiento de la hipertensi&#xF3;n arterial pulmonar en dos etapas diferentes de la gravedad de la enfermedad. Las c&#xE9;lulas se aislaron de sangre perif&#xE9;rica y se administra a las ratas desnudas en el d&#xED;a 14 (&#x26;quot;principios&#x26;quot;) o el d&#xED;a 21 (&#x26;quot;tarde&#x26;quot;) despu&#xE9;s de la inyecci&#xF3;n monocrotalina. El grupo de control recibi&#xF3; monocrotalina pero ning&#xFA;n tratamiento celular. Progresi&#xF3;n de la enfermedad se evalu&#xF3; mediante cateterismo card&#xED;aco derecho y la ecocardiograf&#xED;a en m&#xFA;ltiples momentos. Diferencias en la supervivencia, la hipertrofia del ventr&#xED;culo derecho (HVD), y la hipertrofia vascular se analizaron en el punto final del estudio. PCR cuantitativa se realiz&#xF3; para evaluar el injerto de c&#xE9;lulas. El tratamiento con cl&#xE1;usulas de acci&#xF3;n colectiva, ya sea en humanos, los puntos de tiempo temprano o tarde no se tradujo en aumento de la supervivencia, y la terapia no prevenir o reducir la gravedad de la enfermedad en comparaci&#xF3;n con el control. El an&#xE1;lisis histol&#xF3;gico de HVD y muscularizaci&#xF3;n vascular han mostrado ning&#xFA;n beneficio con la terapia en comparaci&#xF3;n con el control. No hay se&#xF1;al detectable fue visto de la transcripci&#xF3;n humano en los pulmones trasplantados a los 14 o 21 d&#xED;as despu&#xE9;s de trasplante de c&#xE9;lulas. En conclusi&#xF3;n, el CAC tratamiento no se asoci&#xF3; con aumento de la supervivencia y no resultar en beneficios cl&#xED;nicos e histol&#xF3;gicos. Los estudios futuros deben orientarse hacia cualquiera de los puntos de tiempo antes terap&#xE9;uticos con dosis variables de cl&#xE1;usulas de acci&#xF3;n colectiva no modificados o c&#xE9;lulas modificadas gen&#xE9;ticamente, como medio de entrega de los factores de la circulaci&#xF3;n arterial pulmonar.

El tratamiento de la hipertensi&#xF3;n arterial pulmonar con circulaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas angiog&#xE9;nicas

&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8868;&#x660E;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236; p38 &#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; (p38MAPK) &#x5C06;&#x5B9A;&#x5411;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;hESC&#xFF09;-&#x6D3E;&#x751F;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE; (hCM)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x533A;&#x522B; hESC p38MAPK &#x6291;&#x5236;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x5728;&#x4E34;&#x5E8A;&#x4E0A;&#x6709;&#x5173;&#x65F6;&#x95F4;&#x5FC3;&#x808C;&#x6897;&#x6B7B; (MI) &#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x95ED;&#x80F8;&#x8D85;&#x58F0;&#x5F15;&#x5BFC;&#x4E0B;&#x6CE8;&#x5C04; hCM &#x5FC3;&#x808C;&#x5185;&#x6CE8;&#x5C04;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x597D;&#x5904;&#x3002;

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D53;&#x7F29; p38MAPK &#x6291;&#x5236;&#x5FC3;&#x808C;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x6539;&#x8FDB;&#x3002;

We have shown previously that inhibition of the p38 mitogen-activated protein kinase (p38MAPK) directs the differentiation of human embryonic stem cell (hESC)-derived cardiomyocytes (hCM). We investigated the therapeutic benefits of intramyocardial injection of hCM differentiated from hESC by p38MAPK inhibition using closed-chest ultrasound-guided injection at a clinically relevant time post-myocardial infarction (MI) in a mouse model.

Myocardial improvement with human embryonic stem cell-derived cardiomyocytes enriched by p38MAPK inhibition.

Nous avons montr&#xE9; pr&#xE9;c&#xE9;demment que l&#x26;#39;inhibition de la kinase p38 mitogen-activated protein (p38MAPK) dirige la diff&#xE9;renciation des cellules souches embryonnaires humaines (CSEh) d&#xE9;riv&#xE9;s de cardiomyocytes (HCM). Nous avons &#xE9;tudi&#xE9; les bienfaits th&#xE9;rapeutiques de l&#x26;#39;injection intramyocardique de HCM diff&#xE9;renci&#xE9;es des CSEh par inhibition p38MAPK aide &#xE0; thorax ferm&#xE9;, guid&#xE9;e par &#xE9;chographie d&#x26;#39;injection &#xE0; un moment cliniquement pertinente post-infarctus du myocarde (IM) dans un mod&#xE8;le murin.

Am&#xE9;lioration du myocarde avec les cellules souches embryonnaires humaines d&#xE9;riv&#xE9;es de cardiomyocytes enrichies par inhibition p38MAPK

Wir haben gezeigt zuvor die Hemmung der der p38 Mitogen-aktivierte Proteinkinase (p38MAPK) leitet die Differenzierung von humanen embryonalen Stammzellen (hESC)-abgeleitet von Cardiomyocytes (hCM). Wir untersuchten die therapeutischen Vorteile der intramyokardial Injektion von hCM von hESC durch Hemmung der p38MAPK mit geschlossen-Brust ultraschallgest&uuml;tzte Injektion auf eine klinisch relevante Zeit post-myocardial Myokardinfarkt (MI) in einem Mausmodell unterschieden.

Myokardiale Verbesserung mit menschlichen embryonalen Stammzellen Cell-derived Cardiomyocytes, bereichert durch Hemmung der p38MAPK.

Abbiamo dimostrato in precedenza che l&#39;inibizione della p38 mitogene-attivata della chinasi di proteina (p38MAPK) dirige la differenziazione delle cellule staminali embrionali umane (hESC)-derivato cardiomyocytes (hCM). Abbiamo studiato i benefici terapeutici di iniezione intramyocardial di hCM differenziati da hESC tramite inibizione p38MAPK utilizza l&#39;iniezione di ecografica torace chiuso a un infarto pregresso tempo clinicamente rilevanti (MI) in un modello del mouse.

Miglioramento del miocardio con umana cardiomyocytes embrionale cellule staminali derivate, arricchito da inibizione p38MAPK.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;p38&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;p38MAPK&#xFF09;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x304C;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;hESC&#x306E;&#xFF09;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;HCM&#xFF09;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x6307;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x6642;&#x9593;&#x5F8C;&#x306B;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x6897;&#x585E;&#xFF08;MI&#xFF09;&#x3067;&#x9589;&#x80F8;&#x8D85;&#x97F3;&#x6CE2;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C9;&#x4E0B;&#x6CE8;&#x5C04;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;p38MAPK&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x3088;&#x308A;hESC&#x306E;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;HCM&#x306E;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x5185;&#x6CE8;&#x5165;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

P38MAPK&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x6897;&#x585E;&#x6539;&#x5584;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB294; p38 &#xC5B5;&#xC81C; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (p38MAPK) &#xC9C0;&#xD718; &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (hESC)&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;-cardiomyocytes (hCM)&#xB97C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; p38MAPK &#xC800;&#xD574; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xB294; &#xC784;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xB828; &#xC2DC;&#xAC04; post-myocardial &#xACBD;&#xC0C9; (MI)&#xC5D0; &#xD3D0;&#xC1C4; &#xAC00;&#xC2B4; &#xCD08;&#xC74C;&#xD30C; &#xC720;&#xB3C4; &#xC8FC;&#xC785;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; Hesc&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; hCM intramyocardial &#xC8FC;&#xC0AC;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD61C;&#xD0DD;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; cardiomyocytes p38MAPK &#xC800;&#xD574; &#xD558; &#xC5EC; &#xB18D;&#xCD95; &#xB41C; &#xC2EC;&#xADFC; &#xAC1C;&#xC120;.

Hemos demostrado anteriormente que la inhibici&#xF3;n de la prote&#xED;na quinasa p38 activada por mit&#xF3;genos (p38MAPK) dirige la diferenciaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre embrionarias humanas (CMEH) derivados de los cardiomiocitos (HCM). Se investigaron los beneficios terap&#xE9;uticos de la inyecci&#xF3;n intramioc&#xE1;rdica de HCM diferenciarse de hESC por la inhibici&#xF3;n de p38MAPK con t&#xF3;rax cerrado, guiada por ecograf&#xED;a de la inyecci&#xF3;n a la vez cl&#xED;nicamente relevante despu&#xE9;s de infarto de miocardio (IM) en un modelo de rat&#xF3;n.

Carissa Ritner

Cardiovascular Research Institute,
Eli and Edythe Broad Center of Regeneration Medicine and Stem Cell Research,
Cardiovascular Research Institute, Eli and Edythe Broad Center of Regeneration Medicine and Stem Cell Research

University of California San Francisco

Fate Mapping of Human Embryonic Stem Cells by Teratoma Formation