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Studying the Effects of Matrix Stiffness on Cellular Function using Acrylamide-based Hydrogels

Tissue stiffness is an important determinant of cellular function, and changes in tissue stiffness are commonly associated with fibrosis, cancer and ...

University of Pennsylvania 

&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x66FE;&#x62A5;&#x9053;&#x901A;&#x8FC7;&#x9632;&#x6B62;&#x5176;&#x65E9;&#x671F;&#x7684; G1 &#x76F8;&#x611F;&#x5E94;&#xFF0C;Rac &#x548C; &#xFF08;&#x6216;&#xFF09; Cdc42 &#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x5468;&#x671F; D1 &#x8868;&#x8FBE;&#x7684; Rho Rho &#x6FC0;&#x9176;&#x901A;&#x8DEF;&#x63A7;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x589E;&#x52A0;&#x5176;&#x4F9D;&#x8D56; ERK &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5F3A;&#x8C03;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x663E;&#x793A; Rho &#x6FC0;&#x9176;&#x6548;&#x5E94;&#x5668; LIM &#x6FC0;&#x9176;&#x662F;&#x8D1F;&#x8D23;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x51FA;&#x4EBA;&#x610F;&#x6599;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x7531; LIM &#x6FC0;&#x9176; Rac &#x4F9D;&#x8D56;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; D1 &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E; cofilin &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x5176;&#x6838;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x548C;&#x5BFC;&#x51FA;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x7A81;&#x53D8;&#x8868;&#x660E; LIM &#x6FC0;&#x9176;&#x884C;&#x4E3A;&#x5728;&#x904F;&#x6291;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; Cdc42 &#x7684; Rac &#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; D1 &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x56E0;&#x6B64;&#x63CF;&#x8FF0;&#x9700;&#x8981;&#x6838;&#x6613;&#x4F4D;&#x7684; LIM &#x6FC0;&#x9176;&#x610F;&#x60F3;&#x4E0D;&#x5230;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F; D1 &#x8868;&#x8FBE;&#x6838; LIM &#x6FC0;&#x9176;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x6700;&#x7EC8;&#x89C4;&#x7BA1; G1 &#x671F;&#x7684;&#x6301;&#x7EED;&#x65F6;&#x95F4;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5E94;&#x529B;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7D27;&#x5F20;&#x5B9E;&#x65BD;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E; G1 &#x671F;&#x8FDB;&#x5C55;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;

&#x6838;&#x6613;&#x4F4D;&#x7684; LIM &#x6FC0;&#x9176;&#x4ECB;&#x5BFC; Rho Rho &#x6FC0;&#x9176;&#x8C03;&#x63A7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x7D20; D1 &#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

We previously reported that the Rho-Rho kinase pathway controls cyclin D1 expression by preventing its early G1 phase induction in response to Rac and/or Cdc42, thus increasing its dependence on ERK signaling and actin stress fiber formation. We now show that the Rho kinase effector LIM kinase is responsible for this effect. Surprisingly, inhibition of Rac-dependent cyclin D1 expression by LIM kinase is independent of both cofilin phosphorylation and actin polymerization. Instead, specific mutation of its nuclear localization and export sequences showed that LIM kinase acts in the nucleus to suppress Rac/Cdc42-dependent cyclin D1 expression. Our results therefore describe an unexpected role for LIM kinase that requires nuclear translocation. The effect of nuclear LIM kinase on cyclin D1 expression ultimately regulates the duration of G1 phase and the degree to which G1 phase progression depends on actin stress fiber formation and imposition of cellular tension.

Nuclear translocation of LIM kinase mediates Rho-Rho kinase regulation of cyclin D1 expression.

Nous avons d&#xE9;j&#xE0; indiqu&#xE9; que la voie Rho-Rho kinase cycline D1 contr&#xF4;le d&#x26;#39;expression en emp&#xEA;chant son induction d&#xE9;but de la phase G1 en r&#xE9;ponse &#xE0; Rac et / ou Cdc42, augmentant ainsi sa d&#xE9;pendance &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;gard de signalisation ERK et la formation de l&#x26;#39;actine en fibres de stress. Nous allons maintenant montrer que la Rho kinase effecteur LIM kinase est responsable de cet effet. &#xC9;tonnamment, l&#x26;#39;inhibition de la cycline D1 Rac-d&#xE9;pendante l&#x26;#39;expression par LIM kinase est ind&#xE9;pendant de la phosphorylation cofiline fois et polym&#xE9;risation de l&#x26;#39;actine. Au lieu de cela, mutation sp&#xE9;cifique de sa localisation nucl&#xE9;aire et des s&#xE9;quences &#xE0; l&#x26;#39;exportation a montr&#xE9; que LIM kinase agit dans le noyau pour supprimer Rac/Cdc42-dependent cycline D1 expression. Nos r&#xE9;sultats d&#xE9;crivent donc un r&#xF4;le inattendu pour kinase LIM qui n&#xE9;cessite la translocation nucl&#xE9;aire. L&#x26;#39;effet de la LIM kinase nucl&#xE9;aire cycline D1 r&#xE9;gule l&#x26;#39;expression d&#xE9;finitive de la dur&#xE9;e de la phase G1 et la mesure dans laquelle la progression de la phase G1 d&#xE9;pend de la formation de fibres d&#x26;#39;actine le stress et l&#x26;#39;imposition de la tension cellulaire.

Translocation nucl&#xE9;aire de la m&#xE9;diation kinase LIM Rho-kinase Rho r&#xE8;glement de la cycline D1 Expression

Nukle&#xE4;re Translokation von LIM-Kinase vermittelt Rho-Rho-Kinase-Regulation von Cyclin D1 Expression.

Abbiamo segnalato in precedenza che i Rho-Rho kinase pathway controlli ciclina D1 espressione prevenendo la sua induzione di fase G1 precoce in risposta a Rac e/o Cdc42, aumentando cos&igrave; la sua dipendenza da ERK segnalazione e actina stress formazione di fibra. Mostriamo ora che la chinasi della chinasi LIM di Rho della effettrici &egrave; responsabile per questo effetto. Sorprendentemente, l&#39;inibizione dell&#39;espressione di D1 cyclin Rac-dipendente dalla chinasi LIM &egrave; indipendente sia cofilin fosforilazione e polimerizzazione dell&#39;actina. Invece, specifica mutazione delle sue sequenze di localizzazione e di esportazione nucleare ha mostrato che la chinasi LIM agisce nel nucleo di sopprimere l&#39;espressione di Rac/Cdc42-dipendente cyclin D1. I nostri risultati, quindi, descrivere un ruolo inatteso per chinasi LIM che richiede la traslocazione nucleare. L&#39;effetto della chinasi LIM nucleare sulla ciclina D1 espressione in definitiva regola la durata della fase G1 ed il grado a cui progressione fase G1 dipende dalla formazione di fibre di actina lo stress e l&#39;imposizione della tensione cellulare.

Traslocazione nucleare delle chinasi LIM da intermediario regolamento chinasi Rho-Rho di ciclina D1 espressione.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;Rho-Rho&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;ERK&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30D0;&#x30FC;&#x5F62;&#x6210;&#x3078;&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3092;&#x5897;&#x5927;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3001;Rac&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;Cdc42&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;G1&#x76F8;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;D1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4ECA;&#x3001;Rho&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;LIM&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;LIM&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;Rac&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;D1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x91CD;&#x5408;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8F38;&#x51FA;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;LIM&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x304C;Rac/Cdc42-dependent&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;D1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6838;&#x5185;&#x3067;&#x50CD;&#x304F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6838;&#x5185;&#x79FB;&#x884C;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;LIM&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x4E88;&#x60F3;&#x5916;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;D1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x6838;LIM&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x306F;G1&#x671F;&#x3068;G1&#x671F;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7DCA;&#x5F35;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x8CE6;&#x8AB2;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;D1&#x767A;&#x73FE;&#x306E;LIM&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x306E;&#x6838;&#x5185;&#x79FB;&#x884C;&#x306F;&#x3001;Rho-Rho&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x898F;&#x5236;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; Rac &#xB610;&#xB294; cdc42&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD08;&#xAE30;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; g 1&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558; &#xC5EC; D1 &#xC2DD; &#xF06C;&#xB294; &#xB178; &#xB178; &#xB2C8; &#xD1B5;&#xB85C; &#xB300; &#xD55C; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; ERK&#xC5D0;&#xC758; &#xC758;&#xC874;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC12C;&#xC720; &#xD615;&#xC131; &#xBCF4;&#xACE0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; &#xB178; &#xB2C8; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xC784; &#xB2C8;&#xAC00;&#xC774; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC740; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, Rac &#xC885;&#xC18D; cyclin D1 &#xC2DD; &#xC784; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5B5;&#xC81C; cofilin &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC640; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD569; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC2E0;, &#xD575;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBC0F; &#xB0B4;&#xBCF4;&#xB0B4;&#xAE30; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC784; &#xB2C8; Rac/Cdc42 &#xC885;&#xC18D; cyclin D1 &#xC2DD;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xB824;&#xBA74; &#xD575;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xD575; &#xC804; &#xC784; &#xB2C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC608;&#xC0C1;&#xCE58; &#xBABB;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;. &#xF06C; D1 &#xC2DD;&#xC5D0; &#xD575; &#xC784; &#xB2C8;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xAD81;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; G1 &#xC704;&#xC0C1; &#xAE30;&#xAC04;&#xACFC; &#xC815;&#xB3C4;&#xB294; g 1 &#xB2E8;&#xACC4; &#xC9C4;&#xD589; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC12C;&#xC720; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC758; &#xBD80;&#xACFC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC870;&#xC808;.

&#xC784; &#xB2C8;&#xC758; &#xD575; &#xC804; &#xC911;&#xC7AC; &#xF06C; D1 &#xC2DD;&#xC758;&#xB85C; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xADDC;&#xC815;.

Hemos informado anteriormente de que la v&#xED;a Rho-Rho quinasa controla expresi&#xF3;n de ciclina D1 mediante la prevenci&#xF3;n de la inducci&#xF3;n temprana fase G1 en respuesta a Rac y / o Cdc42, lo que aumenta su dependencia de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de ERK y la formaci&#xF3;n de fibras de estr&#xE9;s de actina. Vamos a demostrar que la quinasa Rho-cinasa efector LIM es responsable de este efecto. Sorprendentemente, la inhibici&#xF3;n de Rac-dependiente de la ciclina D1 por LIM quinasa es independiente de la fosforilaci&#xF3;n cofilina ambos y polimerizaci&#xF3;n de la actina. En cambio, la mutaci&#xF3;n espec&#xED;fica de su localizaci&#xF3;n nuclear y las secuencias de exportaci&#xF3;n mostr&#xF3; que el LIM quinasa act&#xFA;a en el n&#xFA;cleo de suprimir la expresi&#xF3;n de ciclina D1 Rac/Cdc42-dependent. Nuestros resultados por lo tanto, describen un papel inesperado para la cinasa LIM que requiere la translocaci&#xF3;n nuclear. El efecto de la energ&#xED;a nuclear en LIM quinasa ciclina D1 expresi&#xF3;n en &#xFA;ltima instancia, regula la duraci&#xF3;n de la fase G1 y el grado en que la progresi&#xF3;n de la fase G1 depende de la formaci&#xF3;n de fibras de actina estr&#xE9;s y la imposici&#xF3;n de tensi&#xF3;n celular.

Translocaci&#xF3;n nuclear del LIM media la quinasa de Rho-Rho quinasa Reglamento de la expresi&#xF3;n de ciclina D1

&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#xFF0C;&#x9175;&#x6BCD; Ada2 (yAda2) &#x662F;&#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x591A;&#x7EC4;&#x5206;&#x7684;&#x4F20;&#x5947;&#xFF0C;&#x62E5;&#x6709;&#x901A;&#x8FC7; yGcn5 &#x50AC;&#x5316;&#x9176;&#x884C;&#x52A8;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x4E59;&#x9170;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;yAda2&#xFF0C;&#x9664;&#x51E0;&#x4E2A;&#x4F20;&#x5947;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x662F;&#x8981;&#x62DB;&#x52DF;&#x5230;&#x901A;&#x8FC7;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x4F20;&#x5947;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x65B0;&#x4EBA;&#x7C7B; Ada2 &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#xFF0C;hAda2beta &#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;&#x4E0E; Ada2beta &#x4E0D;&#x540C;&#x4E24;&#x8005;&#x751F;&#x5316;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x4EE5;&#x524D;&#x4E3A;&#x7279;&#x5F81;&#x7684; hAda2alpha&#xFF0C;&#x5B83;&#x662F;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B; PCAF (&#x4EBA;&#x7C7B; Gcn5 &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;) acetylase &#x7A33;&#x5B9A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x3002;Ada2beta&#xFF0C;Ada2alpha&#xFF0C;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x4EA4;&#x4E92;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x867D;&#x7136;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x542B;&#x6709; Gcn5 &#x7684;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x590D;&#x6742;&#x4E8B;/STAGA&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;Ada2beta &#x4E0E; Baf57 &#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x4EA4;&#x6D41; &#xFF08;&#x4EBA;&#x7C7B; Swi/&#x7231;&#x68EE;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#xFF09; &#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x5C4F;&#x5E55;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B; Swi/&#x7231;&#x68EE;&#x4F53;&#x5916;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x5728;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x5206;&#x6790;&#x3001; hAda2beta &#xFF08;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; Ada2alpha&#xFF09;&#xFF0C;Gcn5 &#xFF08;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; PCAF&#xFF09; &#x534F;&#x540C;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x6216; Brg1 &#xFF08;hSwi/&#x7231;&#x68EE;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x50AC;&#x5316;&#x7EC4;&#x4EF6;&#xFF09;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x901A;&#x8FC7; B-&#x7EC6;&#x80DE;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; Pax5/BSAP &#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x652F;&#x6301;&#x8BA4;&#x4E3A; Gcn5 &#x548C; PCAF &#x6709;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x65B0;&#x7684;&#x8F85;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x56E0;&#x5B50; pgc-1 &#x51FD;&#x6570;&#xFF0C;&#x5355;&#x4E2A;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x86CB;&#x767D; (Ada2beta) &#x53EF;&#x4EE5;&#x534F;&#x8C03;&#x9488;&#x5BF9;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x91CD;&#x5851;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x65B0;&#x578B;&#x4EBA;&#x7C7B; Ada2 &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x804C;&#x80FD;&#x4E0E; Gcn5 &#x6216; Brg1 coactivate &#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;

In yeast, the transcriptional adaptor yeast Ada2 (yAda2) is a part of the multicomponent SAGA complex, which possesses histone acetyltransferase activity through action of the yGcn5 catalytic enzyme. yAda2, among several SAGA proteins, serves to recruit SAGA to genes via interactions with promoter-bound transcription factors. Here we report identification of a new human Ada2 homologue, hAda2beta. Ada2beta differs both biochemically and functionally from the previously characterized hAda2alpha, which is a stable component of the human PCAF (human Gcn5 homologue) acetylase complex. Ada2beta, relative to Ada2alpha, interacted selectively, although not stably, with the Gcn5-containing histone acetylation complex TFTC/STAGA. In addition, Ada2beta interacted with Baf57 (a component of the human Swi/Snf complex) in a yeast two-hybrid screen and associated with human Swi/Snf in vitro. In functional assays, hAda2beta (but not Ada2alpha), working in concert with Gcn5 (but not PCAF) or Brg1 (the catalytic component of hSwi/Snf complex), increased transcription via the B-cell-specific transcription factor Pax5/BSAP. These findings support the view that Gcn5 and PCAF have distinct roles in vivo and suggest a new mechanism of coactivator function, in which a single adaptor protein (Ada2beta) can coordinate targeting of both histone acetylation and chromatin remodeling activities.

A novel human Ada2 homologue functions with Gcn5 or Brg1 to coactivate transcription.

Chez la levure, l&#39;adaptateur transcriptionnelle de levure Ada2 (yAda2) est une partie de la SAGA &agrave; plusieurs composantes complexe, qui poss&egrave;de l&#39;activit&eacute; histone ac&eacute;tyltransf&eacute;rase par l&#39;action de l&#39;enzyme catalytique yGcn5. yAda2, parmi plusieurs prot&eacute;ines SAGA, sert &agrave; recruter SAGA &agrave; g&egrave;nes via des interactions avec les facteurs de transcription li&eacute;s aux promoteurs. Nous rapportons ici l&#39;identification de nouveaux humain Ada2 homologue, hAda2beta. Ada2beta diff&egrave;re tant biochimiquement et fonctionnellement les hAda2alpha d&eacute;j&agrave; caract&eacute;ris&eacute;, qui est un &eacute;l&eacute;ment stable de l&#39;ac&eacute;tylase de (homologue Gcn5 humain) PCAF humaine complexe. Ada2beta, par rapport &agrave; Ada2alpha, interagit s&eacute;lectivement, mais pas de fa&ccedil;on stable, avec l&#39;ac&eacute;tylation des histones contenant Gcn5 complexe TFTC/aura. En outre, Ada2beta a interagi avec Baf57 (un composant de l&#39;humain complexe Swi/Snf) dans un &eacute;cran de deux-hybride de levure et associ&eacute;s &agrave; Swi/Snf humain in vitro. Dans les essais fonctionnels, hAda2beta (mais pas Ada2alpha), travaillant de concert avec Gcn5 (mais pas le PCAF) ou Brg1 (le composant catalytique du complexe de hSwi/Snf), a augment&eacute; la transcription par le facteur de transcription de B-cellule-sp&eacute;cifique Pax5/BSAP. Ces r&eacute;sultats confirment l&#39;hypoth&egrave;se que Gcn5 PCAF ont des r&ocirc;les distincts in vivo et proposer un nouveau m&eacute;canisme de fonction coactivateur, dans laquelle une prot&eacute;ine unique adaptateur (Ada2beta) peut coordonner de ciblage de l&#39;ac&eacute;tylation des histones et activit&eacute;s de remodelage de la chromatine.

Un roman Ada2 homologue fonctions humaines avec Gcn5 ou Brg1 &agrave; co-activer de transcription.

Eine neue humane Homolog Ada2 Funktionen mit Gcn5 oder BRG1 zu Koaktivator der Transkription.

In lievito, l&#39;adattatore transcriptional lievito Ada2 (yAda2) &egrave; una parte della SAGA multicomponente complesso, che possiede attivit&agrave; acetiltransferasi dell&#39;istone attraverso l&#39;azione dell&#39;enzima catalitico yGcn5. yAda2, tra le diverse proteine della SAGA, serve per reclutare SAGA di geni tramite interazioni con fattori di trascrizione associati a promotore. Qui riportiamo l&#39;identificazione di un nuovo umano Ada2 omologo, hAda2beta. Ada2beta differisce sia biochimicamente e funzionalmente da hAda2alpha precedentemente caratterizzato, che &egrave; un componente stabile dell&#39;umano PCAF (omologo umano Gcn5) acetylase complesso. Ada2beta, rispetto al Ada2alpha, ha interagito in modo selettivo, anche se non stabile, con l&#39;acetilazione dell&#39;istone Gcn5 contenenti complesso TFTC/STAGA. Inoltre, Ada2beta ha interagito con Baf57 (un componente di umana Swi/Snf complesse) in uno schermo di due-ibrido del lievito e associati Swi/Snf umana in vitro. In analisi funzionale, hAda2beta (ma non Ada2alpha), lavorando in concerto con Gcn5 (ma non PCAF) o Brg1 (la componente catalitica del complesso hSwi/Snf), aumentata trascrizione tramite il fattore di trascrizione della B-cellula-specifico BSAP/Pax5. Questi risultati supportano la visualizzazione che Gcn5 e PCAF hanno ruoli distinti in vivo e suggerire un nuovo meccanismo di funzione coactivator, in cui una proteina dell&#39;adattatore singolo (Ada2beta) pu&ograve; coordinare il targeting di acetilazione dell&#39;istone e di attivit&agrave; di rimodellamento della cromatina.

Un romanzo umano Ada2 omologo funzioni con Gcn5 o Brg1 a coactivate la trascrizione.

&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E; Ada2 (yAda2) yGcn5 &#x89E6;&#x5A92;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x3082;&#x3064;&#x591A;&#x6210;&#x5206;&#x4F50;&#x8CC0;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x4F50;&#x8CC0;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x52DF;&#x96C6;&#x3059;&#x308B; yAda2&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4F50;&#x8CC0;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x4EBA;&#x9593; Ada2 &#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x3001;hAda2beta &#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Ada2beta &#x4E21;&#x65B9;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x65E2;&#x5831;&#x306E; hAda2alpha &#x304B;&#x3089;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; PCAF &#xFF08;&#x4EBA;&#x9593; Gcn5 &#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;) acetylase &#x304C;&#x3044;&#x308B;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Ada2beta&#x3001;Ada2alpha&#x3001;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x306A;&#x3044;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3067;&#x3001;Gcn5 &#x542B;&#x6709;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x304C;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; TFTC/STAGA&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;Ada2beta &#x3068; Baf57 &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528; (&#x4EBA;&#x9593; Swi/Snf &#x8907;&#x96D1;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;) &#x9175;&#x6BCD; 2 &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9; &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x3068; in vitro &#x3067;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E; Swi/Snf &#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3001;hAda2beta (&#x304C;&#x306A;&#x3044; Ada2alpha)&#x3001;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30C8; Gcn5 &#xFF08;&#x304C;&#x306A;&#x3044; PCAF&#xFF09; &#x3067;&#x306E;&#x4F5C;&#x696D;&#x3067;&#x307E;&#x305F;&#x306F; Brg1 (hSwi/Snf &#x8907;&#x96D1;&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;) &#x5897;&#x52A0;&#x8EE2;&#x5199; B &#x7D30;&#x80DE;&#x7279;&#x7570;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50; Pax5/BSAP &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C; Gcn5 &#x3068; PCAF in vivo &#x3067;&#x306E;&#x500B;&#x5225;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3068;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30E2;&#x30C7; &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x5358;&#x4E00;&#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (Ada2beta) &#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x30B3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5C0F;&#x8AAC;&#x4EBA;&#x9593; Ada2 &#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x95A2;&#x6570; Gcn5 &#x307E;&#x305F;&#x306F; Brg1 &#x8EE2;&#x5199;&#x3092; coactivate &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD6A8; &#xBAA8;, transcriptional &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; ada2&#xC744; &#xD6A8; &#xBAA8; (yAda2) yGcn5 &#xCD09;&#xB9E4; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; acetyltransferase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC720; &#xD558; &#xACE0; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;, &#xAE61;&#xD1B5;&#xC774; &#xC0AC;&#xAC00;&#xC758; &#xD55C; &#xBD80;&#xBD84; &#xC774;&#xB2E4;. yAda2, &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0AC;&#xAC00; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xC640;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC0AC;&#xAC00; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD558;&#xB294; &#xC5ED;&#xD560;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC778;&#xAC04; Ada2 homologue Hada2beta&#xC758; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;. Ada2beta &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBAA8;&#xB450; &#xD654;&#xD559;&#xC801; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC774; Hada2alpha&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; PCAF (&#xC778;&#xAC04; Gcn5 homologue) acetylase&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ada2beta, Ada2alpha, &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; &#xC791;&#xC6A9;&#xD560; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xBE44;&#xB85D; &#xC548;&#xC815; &#xD558;&#xC9C0; Gcn5 &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; histone acetylation &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; TFTC/STAGA. &#xB610;&#xD55C;, Ada2beta baf57&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; (&#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; Swi/Snf&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;) &#xD6A8; &#xBAA8; 2 &#xC7A1;&#xC885; &#xD654;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB41C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; Swi/Snf &#xCCB4; &#xC678;. &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;, hAda2beta (&#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; Ada2alpha), Gcn5 (&#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; PCAF)&#xC640; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xC5C5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB610;&#xB294; Brg1 (hSwi/Snf &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;&#xC758; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC131;&#xBD84;), B &#xC140; &#xD2B9;&#xC815; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; Pax5/BSAP&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC804;&#xC0AC; &#xC99D;&#xAC00;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; Gcn5 &#xBC0F; PCAF vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC774; &#xACE0; coactivator &#xD568;&#xC218;&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC5B4;&#xB311;&#xD130; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (Ada2beta)&#xB294; histone acetylation &#xBC0F; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xAC1C;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; chromatin&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xBCF4;&#xAE30;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC18C;&#xC124; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; Ada2 homologue &#xAE30;&#xB2A5; &#xC804;&#xC0AC; coactivate Gcn5 &#xB610;&#xB294; Brg1.

En la levadura, el adaptador transcripcional levadura Ada2 (yAda2) es una parte de la SAGA multicomponente compleja, que posee la actividad de la histona acetiltransferasa a trav&eacute;s de la acci&oacute;n de la enzima catal&iacute;tico yGcn5. yAda2, entre varias prote&iacute;nas de la SAGA, sirve para reclutar SAGA a los genes a trav&eacute;s de interacciones con los factores de transcripci&oacute;n promotor-limite. Aqu&iacute; divulgamos la identificaci&oacute;n de un nuevo hom&oacute;logo humano de Ada2, hAda2beta. Ada2beta difiere tanto bioqu&iacute;mico y funcionalmente la hAda2alpha previamente caracterizados, que es un componente estable de la humana PCAF (hom&oacute;logo humano Gcn5) acetilasa complejo. Ada2beta, en relaci&oacute;n con Ada2alpha, interactuaron selectivamente, aunque no estable, con la acetilaci&oacute;n de histonas que contienen Gcn5 complejo TFTC/STAGA. Adem&aacute;s, Ada2beta interactu&oacute; con Baf57 (un componente de la humana Swi/Snf complejo) en una pantalla de dos h&iacute;bridos de levadura y asociado humano Swi/Snf in vitro. En el an&aacute;lisis funcionales, hAda2beta (pero no Ada2alpha), trabajan en conjunto con Gcn5 (pero no PCAF) o Brg1 (el componente catal&iacute;tico de hSwi/Snf complejo), aumentado la transcripci&oacute;n mediante el factor de transcripci&oacute;n B-c&eacute;lula espec&iacute;fica Pax5/BSAP. Estos resultados apoyan la visi&oacute;n que Gcn5 y PCAF tienen diferentes roles en vivo y sugieren un nuevo mecanismo de funci&oacute;n coactivator, en que una prote&iacute;na simple adaptador (Ada2beta) puede coordinar ataques contra la acetilaci&oacute;n de histonas y actividades de remodelaci&oacute;n de la cromatina.

Una novela humana Ada2 hom&oacute;logo funciones con Gcn5 o Brg1 coactivate transcripci&oacute;n.

Nukleare Translokation der LIM-Kinase vermittelt Rho-Rho-Kinase-Verordnung von cyclin D1 Ausdruck.

p21(cip1) &#x6291;&#x5236; S &#x9636;&#x6BB5;&#x8FDB;&#x5165;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F; cdk2 (&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x6FC0;&#x9176;-2&#xFF09; &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x3002;P21(cip1) &#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x6B63;&#x5728;&#x8FC5;&#x901F;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x540E;&#x9759;&#x6B62;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x4E0B;-&#x89C4;&#x8303;&#x8FBE;&#x6210; G(1) &#x665A;&#x671F;&#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; E cdk2 &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x4E86;&#x836F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x6291;&#x5236;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; C (PKC)&#xFF0C;&#x5360;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x5730;&#x4F4D;&#x7684;&#x6D88;&#x6781;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6216;&#x4E0E;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6270; RNA &#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x63D0;&#x5347; p21(cip1) &#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6548;&#x5E94;&#x662F;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#xFF0C;&#x548C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x7684;&#x4F46;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E8E;&#x5148;&#x524D;&#x88AB;&#x8F6C;&#x5F55;&#x63A7;&#x5236;&#x673A;&#x5236;&#x6D89;&#x53CA;&#x51CF;&#x5C11;&#x8FDB;&#x5165; S &#x671F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; D1 &#x548C; Skp2&#x3002; &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6291;&#x5236;&#x7ED3;&#x679C;&#x548C; p21 &#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E0D;&#x5230;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6548;&#x679C; (cip1) &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5219;&#x4E3A; null&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684; p21(cip1) &#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E3B;&#x8981;&#x3002;

&#x7531;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; C p21cip1 &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;

p21(cip1) inhibits S phase entry by binding to cyclin-cdk2 (cyclin-dependent kinase-2) complexes. The levels of p21(cip1) are rapidly induced after mitogenic stimulation of quiescent fibroblasts and then down-regulate as the cells reach late G(1) phase and activate cyclin E-cdk2. In this study, we have shown that pharmacological inhibition of protein kinase C (PKC), expression of dominant negative PKCdelta, or knockdown of PKCdelta with small interfering RNA elevates p21(cip1) protein levels in mouse embryo fibroblasts. This effect is selective, post-transcriptional, and proteasome-dependent but distinct from previously identified post-transcriptional control mechanisms involving cyclin D1 and Skp2. PKCdelta inhibition results in a reduced entry into S phase, and this effect is not detected in p21(cip1)-null cells. Thus, post-transcriptional destabilization of p21(cip1) appears to be a major mitogenic effect of PKCdelta in fibroblasts.

Post-transcriptional destabilization of p21cip1 by protein kinase C in fibroblasts.

p21 (Cip1) inhibe l&#x26;#39;entr&#xE9;e en phase S en se liant &#xE0; la cycline-cdk2 (kinases cycline-d&#xE9;pendantes-2) complexes. Les niveaux de p21 (Cip1) sont rapidement induite apr&#xE8;s stimulation mitog&#xE9;nique des fibroblastes quiescents puis r&#xE9;guler &#xE0; la baisse que les cellules atteignent la fin de G (1) de phase et d&#x26;#39;activer la cycline E-cdk2. Dans cette &#xE9;tude, nous avons montr&#xE9; que l&#x26;#39;inhibition pharmacologique de la prot&#xE9;ine kinase C (PKC), l&#x26;#39;expression de PKCdelta dominant n&#xE9;gatif, ou effet de choc de PKCdelta avec de petits ARN interf&#xE9;rents &#xE9;l&#xE8;ve les taux de prot&#xE9;ines p21 (Cip1) dans les fibroblastes d&#x26;#39;embryon de souris. Cet effet est s&#xE9;lective, post-transcriptionnelle, et prot&#xE9;asome-d&#xE9;pendante, mais distincte de pr&#xE9;alablement identifi&#xE9;s les m&#xE9;canismes de contr&#xF4;le post-transcriptionnels impliquant la cycline D1 et SKP2. Les r&#xE9;sultats d&#x26;#39;inhibition PKCdelta dans une entr&#xE9;e r&#xE9;duite en phase S, et cet effet n&#x26;#39;est pas d&#xE9;tect&#xE9; dans p21 (Cip1)-nulles cellules. Ainsi, post-transcriptionnelle de p21 d&#xE9;stabilisation (Cip1) semble &#xEA;tre un effet majeur mitog&#xE8;ne de PKCdelta dans les fibroblastes.

Post-transcriptionnelle de d&#xE9;stabilisation p21Cip1 par la prot&#xE9;ine kinase C dans des fibroblastes

P21(CIP1) hemmt S Phase Eintrag durch Bindung an cyclin-cdk2 (cyclin-abh&auml;ngige Kinase-2)-komplexe. Die p21(cip1) sind schnell nach mitogenen Stimulierung der Ruhezustand Fibroblasten induziert und dann nach unten-Regeln wie die Zellen G(1) Sp&auml;tphase erreichen und cyclin E-cdk2 zu aktivieren. In dieser Studie haben wir gezeigt, dass die pharmakologische Hemmung der Proteinkinase C (PKC), Ausdruck der dominierenden negativen PKCdelta oder Niederschlag von PKCdelta mit kleinen interfering RNA p21(cip1) Protein-Ebene in Fibroblasten der Maus-Embryo erhebt. Dieser Effekt ist selektive Posttranskriptionale und Proteasom-abh&auml;ngigen aber von zuvor identifizierten Posttranskriptionale Kontrollmechanismen mit cyclin D1 und Skp2. PKCdelta Hemmung f&uuml;hrt zu einer erm&auml;&szlig;igten Eintritt in S Phase und dieser Effekt wird nicht erkannt, in p21 (cip1)-null-Zellen. Somit scheint Posttranskriptionale Destabilisierung des p21(cip1) eine gro&szlig;e mitogenen Wirkung von PKCdelta in Fibroblasten.

Posttranskriptionale Destabilisierung des p21cip1 durch Proteinkinase C in Fibroblasten.

P21(cip1) inibisce la voce fase S legandosi ai complessi di cdk2-ciclina (chinasi ciclina-dipendente-2). I livelli di p21(cip1) sono rapidamente indotto dopo mitogeni stimolazione dei fibroblasti quiescenti e poi down-regolano le cellule raggiungono la fine della fase g (1) e attivare cyclin E-cdk2. In questo studio, abbiamo dimostrato che l&#39;inibizione farmacologica della protein chinasi C (PKC), espressione del dominante negativo PKCdelta o atterramento di PKCdelta con piccolo RNA interferente eleva i livelli della proteina p21(cip1) in fibroblasti di embrione di topo. Questo effetto &egrave; selettivo, espresione e proteasoma-dipendente ma distinte da precedentemente identificati meccanismi di controllo posttrascrizionale coinvolgendo cyclin D1 e Skp2. PKCdelta risultati di inibizione in un ridotto entrata in fase S, e questo effetto non viene rilevato in p21 (cip1)-cellule di null. Cos&igrave;, destabilizzazione espresione di p21(cip1) sembra essere un importante effetto mitogeni di PKCdelta nei fibroblasti.

Destabilizzazione espresione di p21cip1 di chinasi di proteina C nei fibroblasti.

P21&#xFF08;CIP1&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;-CDK2&#xFF08;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;-2&#xFF09;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;S&#x671F;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x9045;&#x308C;&#x3066;G&#xFF08;1&#xFF09;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;E-CDK2&#x306B;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x3068;P21&#xFF08;CIP1&#xFF09;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x9759;&#x6B62;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x523A;&#x6FC0;&#x5F8C;&#x306B;&#x200B;&#x200B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;C&#xFF08;PKC&#xFF09;&#x3001;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6E09;RNA&#x306E;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;PKCdelta&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;PKCdelta&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;p21&#xFF08;CIP1&#xFF09;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x4E0A;&#x6607;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x3001;&#x53CA;&#x3073;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;D1&#x3068;Skp2&#x304C;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x5236;&#x5FA1;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; S&#x671F;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306E;PKCdelta&#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;P21&#xFF08;CIP1&#xFF09;&#x30CC;&#x30EB;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;P21&#xFF08;CIP1&#xFF09;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;PKCdelta&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x4FC3;&#x9032;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x601D;&#x308F;&#x308C;&#x308B;&#x3002;

&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;C&#x306B;&#x3088;&#x308B;P21cip1&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;

p21(cip1) &#xF06C; cdk2 (&#xF06C; &#xC885;&#xC18D; &#xD0A4;-2) &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xC5EC; S &#xB2E8;&#xACC4; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;. P21(cip1) &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xBB34;&#xBD80;&#xD558; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; mitogenic &#xC790;&#xADF9; &#xD6C4; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xC720;&#xBC1C; &#xB418; &#xACE0; &#xC804;&#xC9C0;&#xC640; &#xB2A6;&#xC740; G(1) &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC; cyclin E cdk2 &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB85C; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xADDC;&#xC81C;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC57D;&#xB9AC; &#xC5B5;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; C (PKC), &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; Pkcdelta&#xC758; &#xC2DD;&#xC774;&#xB098; &#xC791;&#xC740; &#xAC04;&#xC12D; RNA&#xC640; Pkcdelta&#xC758; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758;&#xC758; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; p21(cip1) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xB04C;&#xC5B4;&#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;, post-transcriptional, &#xBC0F; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC885;&#xC18D; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB2E4;&#xB97C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB41C; S &#xB2E8;&#xACC4;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC5D0;&#xC11C; cyclin d 1&#xACFC; Skp2. PKCdelta &#xC5B5;&#xC81C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; post-transcriptional &#xC81C;&#xC5B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBC0F;&#xC774; &#xD6A8;&#xACFC; p21&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC2DD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; (cip1)-&#xC140;&#xC744; null. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, p21(cip1)&#xC758; post-transcriptional &#xBD88;&#xC548; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; Pkcdelta&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; mitogenic &#xD6A8;&#xACFC; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; C &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; p21cip1&#xC758; post-transcriptional &#xBD88;&#xC548;.

p21 (CIP1) inhibe la entrada de la fase S mediante la uni&#xF3;n a la ciclina CDK2 (dependientes de ciclina quinasa 2) complejos. Los niveles de p21 (CIP1) se induce r&#xE1;pidamente despu&#xE9;s de la estimulaci&#xF3;n mitog&#xE9;nica de los fibroblastos en reposo y luego hacia abajo regular-como las c&#xE9;lulas llegar a finales de G (1) y activar la fase de ciclina E-CDK2. En este estudio, hemos demostrado que la inhibici&#xF3;n farmacol&#xF3;gica de la prote&#xED;na quinasa C (PKC), la expresi&#xF3;n de PKCdelta dominante negativo, o una ca&#xED;da de PKCdelta con peque&#xF1;os ARN de interferencia (CIP1 eleva p21) los niveles de prote&#xED;na en los fibroblastos de embri&#xF3;n de rat&#xF3;n. Este efecto es selectivo, post-transcripcional, y el proteasoma dependiente, pero distinta de la previamente identificados los mecanismos de control post-transcripcional que involucran la ciclina D1 y Skp2. PKCdelta resultados de inhibici&#xF3;n de una entrada reducida en la fase S, y este efecto no se detecta en p21 (CIP1) son nulos c&#xE9;lulas. As&#xED;, post-transcripcional desestabilizaci&#xF3;n de p21 (CIP1) parece ser un importante efecto mitog&#xE9;nico de PKCdelta en los fibroblastos.

Post-transcripcional de desestabilizaci&#xF3;n de P21cip1 por la prote&#xED;na quinasa C en los fibroblastos

&#x9700;&#x8981;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; G1 &#x671F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x6FC0;&#x9176;&#x548C;&#x8FDB;&#x5C55;&#x901A;&#x8FC7; G1 &#x671F;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x3001; &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x8F93;&#x7684;&#x5408;&#x4F5C;&#x3002;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5408;&#x4F5C;&#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x548C;&#x4F9D;&#x4ECE;&#x6027;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x4E0B;&#x5367;&#x5C42;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F3A;&#x70C8;&#x5F71;&#x54CD;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7C98;&#x9644;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7AE0;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x548C;&#x4E0B;&#x5367;&#x5C42;&#x6CD5;&#x89C4;&#x9075;&#x4ECE;&#x6027;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x5982;&#x4F55;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x8FDB; G1 &#x671F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x63A7;&#x5236;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E86;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F53;&#x524D;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;

&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x3001; &#x8702;&#x7A9D;&#x7D27;&#x5F20;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8C03;&#x63A7;&#x3002;

Cooperative signaling between growth factor receptor tyrosine kinases, integrins, and the actin cytoskeleton is required for activation of the G1-phase cyclin-dependent kinases and progression through G1-phase. Increasing evidence suggests that there is cell type specificity in these cooperative interactions and that the compliance of the underlying substratum can strongly affect adhesion-dependent signaling to the cell cycle. This chapter reviews our current methods for studying how cell type specificity and changes in substratum compliance can contribute to G1-phase cell cycle control. We also describe several of our current analytical procedures.

Cell adhesion, cellular tension, and cell cycle control.

Signalisation de coop&#xE9;ration entre les kinases de facteurs de croissance r&#xE9;cepteurs tyrosine, les int&#xE9;grines, et le cytosquelette d&#x26;#39;actine est requise pour l&#x26;#39;activation des phases G1 kinases cycline-d&#xE9;pendantes et de progression dans la phase G1-. L&#x26;#39;augmentation de la preuve sugg&#xE8;re qu&#x26;#39;il ya une sp&#xE9;cificit&#xE9; de type cellulaire dans ces interactions coop&#xE9;ratives et que la conformit&#xE9; du sous-sol sous-jacent peut fortement affecter l&#x26;#39;adh&#xE9;rence d&#xE9;pendante de la signalisation du cycle cellulaire. Ce chapitre passe en revue nos m&#xE9;thodes actuelles pour &#xE9;tudier comment la sp&#xE9;cificit&#xE9; de type cellulaire et des changements dans le respect substrat peut contribuer &#xE0; G1 en phase de contr&#xF4;le du cycle cellulaire. Nous d&#xE9;crivons &#xE9;galement plusieurs de nos proc&#xE9;dures actuelles d&#x26;#39;analyse.

Cell Adhesion, la tension cellulaire, et le contr&#xF4;le du cycle cellulaire

Genossenschaft, die Signalisierung zwischen Wachstumsfaktor-Rezeptor-Tyrosin-Kinasen, Integrine und das Aktin-Zytoskelett ist erforderlich f&uuml;r die Aktivierung der G1-Phase cyclin-abh&auml;ngige Kinasen und Fortschreiten der G1-Phase durch. Zunehmende Beweise darauf hin, dass in dieser kooperativen Wechselwirkungen gibt es Zelle Typ Spezifit&auml;t und die Einhaltung der zugrunde liegenden Substrat Adh&auml;sion-abh&auml;ngige Signalisierung des Zellzyklus stark beeinflussen kann. In diesem Kapitel Bewertungen unserer aktuellen Methoden zur Untersuchung, wie Zelle Typ Spezifit&auml;t und Ver&auml;nderungen im Substrat-Konformit&auml;t zu G1-Phase Zellzyklus-Kontrolle beitragen k&ouml;nnen. Auch beschreiben wir einige unserer aktuellen analytischen Verfahren.

Zelladh&auml;sion, zellul&auml;re Spannungen und Zellzyklus-Kontrolle.

Cooperativa di segnalazione tra fattore di crescita recettore tirosina chinasi, integrine e il citoscheletro di actina &egrave; richiesto per l&#39;attivazione della chinasi ciclina-dipendente fase G1 e progressione attraverso la fase G1. Crescente evidenza suggerisce che c&#39;&egrave; una specificit&agrave; di tipo cellulare in queste interazioni cooperative e che la conformit&agrave; del substrato sottostante pu&ograve; influenzare fortemente dipendente dalla adesione di segnalazione per il ciclo cellulare. Questo capitolo recensioni nostre attuali metodi per studiare come cella tipo specificit&agrave; e cambiamenti nel rispetto del substrato possono contribuire al controllo del ciclo cellulare G1-fase. Descriveremo anche alcuni dei nostri attuali procedure analitiche.

Adesione cellulare, cellulare tensione e controllo del ciclo cellulare.

&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x5354;&#x529B;&#x7684;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;G1&#x671F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;G1&#x671F;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x9032;&#x884C;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x5897;&#x3084;&#x3059;&#x3068;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5354;&#x540C;&#x7D44;&#x5408;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x57FA;&#x5C64;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30A2;&#x30F3;&#x30B9;&#x304C;&#x5F37;&#x304F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x3078;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7AE0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3068;&#x57FA;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30A2;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;G1&#x76F8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x79C1;&#x9054;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x624B;&#x9806;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x5236;&#x5FA1;

&#xD611;&#xB3D9; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; kinases integrins, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton &#xAC04;&#xC758; &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; g 1 &#xB2E8;&#xACC4; &#xF06C; &#xC885;&#xC18D; kinases&#xC640; g 1 &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC9C4;&#xD589;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC99D;&#xAC70;&#xAC00; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD611;&#xB825; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;&#xC740; &#xAE30;&#xBCF8; &#xD558; &#xCE35;&#xC758; &#xC900;&#xC218; &#xC811;&#xCC29; &#xC885;&#xC18D; &#xC2E0;&#xD638; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC758; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; &#xBC0F; &#xD558; &#xCE35; &#xC900;&#xC218;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654; g 1 &#xB2E8;&#xACC4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xACF5;&#xBD80;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD604;&#xC7AC; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xAC80;&#xD1A0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD604;&#xC7AC; &#xBD84;&#xC11D; &#xC808;&#xCC28;&#xC758; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29;, &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xAE34;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC81C;&#xC5B4;.

Se&#xF1;alizaci&#xF3;n de cooperaci&#xF3;n entre las quinasas de tirosina del receptor de crecimiento, integrinas y el citoesqueleto de actina es necesaria para la activaci&#xF3;n de la fase G1-quinasas dependientes de ciclina y la progresi&#xF3;n a trav&#xE9;s de la fase G1. El aumento de la evidencia sugiere que hay especificidad de tipo celular en estas interacciones cooperativas y que el cumplimiento del sustrato subyacente puede afectar seriamente la adhesi&#xF3;n dependiente de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n para el ciclo celular. Este cap&#xED;tulo revisa los m&#xE9;todos actuales para estudiar c&#xF3;mo la especificidad de tipo celular y los cambios en el cumplimiento de sustrato puede contribuir al control de la fase G1 del ciclo celular. Tambi&#xE9;n se describen varios de nuestros procedimientos anal&#xED;ticos actuales.

La adhesi&#xF3;n celular, la tensi&#xF3;n celular, y control del ciclo celular

&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7C98;&#x9644;&#x5230;&#x4E0B;&#x5367;&#x5C42;&#x9700;&#x8981;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F; D1 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x95F4;&#x5145;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; D1 &#x7684;&#x4ECD;&#x7136;&#x6301;&#x7EED;&#x5C01;&#x9501;&#x7684; ECM-&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5728; MCF10A &#x4E73;&#x817A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;E-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;-&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x8FD8;&#x652F;&#x6301;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; D1 &#x611F;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5E76;&#x9700;&#x9632;&#x6B62;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x7D20; D1 mRNA &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7ED3;&#x5408;&#x7684; E-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x9ECF;&#x9644;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x5B66;&#x7684;&#x63CF;&#x8FF0; E-&#x9499; MCF10A &#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x5BFC; Rac&#xFF0C;pro &#x589E;&#x6B96;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x663E;&#x793A; Rac &#x662F;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE; D1 mRNA &#x8BF1;&#x5BFC;&#x5468;&#x671F;&#x7531; E-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x3002;&#x7531; E-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;-&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x53D7;&#x4E0D;&#x5230; p21Cip1 &#x548C; p27Kip1&#xFF0C;&#x4E5F;&#x662F;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x8C61;&#x7684; Cdk &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x4E0E; E-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;-&#x4F9D;&#x8D56;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684; D1 mRNA &#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x52A0;&#x5B58;&#x5728;&#x7740;&#x56E0;&#x679C;&#x8054;&#x7CFB;&#x589E;&#x52A0;&#x8FDB;&#x5165; S &#x671F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x786E;&#x5B9A; Rac &#x4F5C;&#x4E3A;&#x5173;&#x952E; pro &#x589E;&#x6B96;&#x6548;&#x679C;&#x7684; E-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;-&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; D1 &#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;

Rac &#x4F9D;&#x8D56;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D; D1 &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7C98;&#x9644;&#x3002;

Integrin-mediated adhesion to substratum is required for cyclin D1 induction in mesenchymal cells, but we show here that the induction of cyclin D1 persists despite blockade of ECM-integrin signaling in MCF10A mammary epithelial cells. E-cadherin-mediated cell-cell adhesion also supports cyclin D1 induction in these cells, and the combined inhibition of both E-cadherin and integrin adhesion is required to prevent the expression of cyclin D1 mRNA and protein. Our previous studies described a pro-proliferative effect of E-cadherin in MCF10A cells, mediated by Rac, and we now show that Rac is required for cyclin D1 mRNA induction by both E-cadherin and integrin engagement. The levels of p21Cip1 and p27Kip1, Cdk inhibitors that are also targets of integrin signaling, are not affected by E-cadherin-mediated cell-cell adhesion. Finally, we show that the increased expression of cyclin D1 mRNA associated with E-cadherin-dependent cell-cell adhesion is causally linked to an increased entry into S phase. Our results identify Rac signaling to cyclin D1 as a crucial pro-proliferative effect of E-cadherin-mediated cell-cell adhesion.

Rac-dependent cyclin D1 gene expression regulated by cadherin- and integrin-mediated adhesion.

Participent &#xE0; la transmission d&#x26;#39;adh&#xE9;rence au substrat est n&#xE9;cessaire pour la cycline D1 &#xE0; induction dans les cellules m&#xE9;senchymateuses, mais nous montrons ici que l&#x26;#39;induction de la cycline D1 persiste malgr&#xE9; le blocus de l&#x26;#39;ECM-int&#xE9;grine de signalisation dans les cellules &#xE9;pith&#xE9;liales mammaires MCF10A. E-cadh&#xE9;rine-m&#xE9;diation adh&#xE9;sion cellule-cellule prend &#xE9;galement en charge la cycline D1 &#xE0; induction dans ces cellules, et l&#x26;#39;inhibition combin&#xE9;e du E-cadh&#xE9;rine et l&#x26;#39;adh&#xE9;rence int&#xE9;grine est n&#xE9;cessaire pour emp&#xEA;cher l&#x26;#39;expression de la cycline D1 ARNm et de prot&#xE9;ine. Nos &#xE9;tudes ant&#xE9;rieures d&#xE9;crit un effet pro-prolif&#xE9;rative de la E-cadh&#xE9;rine dans les cellules MCF10A, m&#xE9;di&#xE9;e par Rac, et nous allons montrer que Rac est n&#xE9;cessaire pour la cycline D1 &#xE0; induction d&#x26;#39;ARNm &#xE0; la fois par la E-cadh&#xE9;rine et l&#x26;#39;engagement de l&#x26;#39;int&#xE9;grine. Les niveaux de p21Cip1 et p27Kip1, des inhibiteurs de Cdk qui sont &#xE9;galement des cibles de l&#x26;#39;int&#xE9;grine de signalisation, ne sont pas affect&#xE9;s par la E-cadh&#xE9;rine-m&#xE9;diation adh&#xE9;sion cellule-cellule. Enfin, nous montrons que l&#x26;#39;expression accrue de la cycline D1 ARNm associ&#xE9; &#xE0; la E-cadh&#xE9;rine-d&#xE9;pendante adh&#xE9;sion cellule-cellule est un lien de causalit&#xE9; li&#xE9;e &#xE0; une p&#xE9;n&#xE9;tration accrue dans la phase S. Nos r&#xE9;sultats mettent en &#xE9;vidence Rac de signalisation pour la cycline D1 comme un &#xE9;l&#xE9;ment crucial pro-prolif&#xE9;rative effet de la E-cadh&#xE9;rine-m&#xE9;diation adh&#xE9;sion cellule-cellule.

Rac-d&#xE9;pendante l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique cycline D1 R&#xE9;glement&#xE9;e par la cadh&#xE9;rine et participent &#xE0; la transmission d&#x26;#39;adh&#xE9;rence

Integrin-vermittelte Adh&auml;sion auf Substrat ist erforderlich f&uuml;r cyclin D1 Induktion in Mesenchymale Zellen, aber wir zeigen hier, dass die Induktion von cyclin D1 trotz Blockade ECM-Integrin MCF10A Milch-Epithelzellen zu signalisieren weiterhin besteht. E-Cadherin-vermittelten Zell-Zell-Adh&auml;sion unterst&uuml;tzt auch cyclin D1 Induktion in diesen Zellen, und die kombinierte Hemmung der Adh&auml;sion von E-Cadherin und Integrin wird ben&ouml;tigt, um zu verhindern, dass den Ausdruck des cyclin D1-mRNA und Protein. Unsere fr&uuml;heren Studien beschrieben eine Pro-proliferative Wirkung von E-Cadherin in MCF10A Zellen, von Rac, vermittelt und wir jetzt zeigen, dass Rac f&uuml;r cyclin D1 mRNA Induktion von E-Cadherin und Integrin Engagement erforderlich ist. P21Cip1 und p27Kip1, Cdk-Inhibitoren, die auch Ziele Integrin zu signalisieren, sind von E-Cadherin-vermittelten Zell-Zell-Adh&auml;sion nicht betroffen. Schlie&szlig;lich zeigen wir, dass die erh&ouml;hte Expression von cyclin D1 mRNA zugeordnete E-Cadherin-abh&auml;ngigen Zell-Zell-Adh&auml;sion eine erh&ouml;hte Eintritt in S Phase kausal verkn&uuml;pft ist. Unsere Ergebnisse identifizieren Rac Signalisierung cyclin D1 als entscheidende Pro-proliferativen Effekt von E-Cadherin-vermittelten Zell-Zell-Adh&auml;sion.

RAC-abh&auml;ngige cyclin D1 Genexpression durch Cadherin und Integrin-vermittelte Adh&auml;sion geregelt.

Integrina-mediata adesione al substrato &egrave; richiesto per la ciclina D1 induzione nelle cellule mesenchimali, ma mostriamo qui che l&#39;induzione di cyclin D1 persiste nonostante blocco di ECM-integrina segnalazione delle cellule epiteliali mammarie MCF10A. Adesione cellula-cellula E-caderina-mediata supporta anche cyclin D1 induzione in queste cellule, e l&#39;inibizione combinata di adesione E-cadherin sia integrina &egrave; necessaria per impedire l&#39;espressione della ciclina D1 mRNA e proteina. I nostri studi precedenti descritto un effetto pro-proliferativo della E-caderina nelle cellule MCF10A, mediata dal Rac, e mostriamo ora che Rac &egrave; richiesto per ciclina induzione D1 mRNA di impegno sia E-caderina e integrina. I livelli di p21Cip1 e p27Kip1, inibitori Cdk che sono anche obiettivi di integrina segnalazione, non risentono di adesione cellula-cellula E-caderina-mediata. Infine, ci mostra che l&#39;aumentata espressione di ciclina D1 mRNA associato adesione cellula-cellula E-caderina-dipendente &egrave; causalmente collegata a una maggiore entrata in fase S. I nostri risultati identificano Rac segnalazione di cyclin D1 come un effetto pro-proliferativo cruciale di adesione cellula-cellula E-caderina-mediata.

RAC-dipendente cyclin D1 gene espressione regolata dalla adesione caderina - e integrina-mediata.

&#x57FA;&#x5C64;&#x3078;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x63A5;&#x7740;&#x306F;&#x3001;&#x9593;&#x8449;&#x7CFB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;D1&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;D1&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x304C;MCF10A&#x4E73;&#x623F;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;ECM-&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x906E;&#x65AD;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x6301;&#x7D9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;D1&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x63A5;&#x7740;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;D1&#x306E;mRNA&#x3068;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;RAC&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;MCF10A&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4ECA;&#x3001;E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;D1 mRNA&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;Rac&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; p21Cip1&#x3068;p27Kip1&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;CDK&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306F;&#x3001;E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;D1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x306F;&#x56E0;&#x679C;S&#x671F;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x305F;mRNA&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;RAC&#x306F;E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x52B9;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x200B;&#x200B;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;D1&#x306B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x5A92;&#x4ECB;&#x63A5;&#x7740;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x898F;&#x5236;&#x306E;Rac&#x4F9D;&#x5B58;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;D1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;

Integrin-&#xC911;&#xC7AC; &#xD558; &#xCE35; &#xC811;&#xCC29; &#xB825; &#xC911;&#xAC04; &#xC5FD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; D1 &#xC720;&#xB3C4; &#xF06C; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC5EC;&#xAE30; cyclin D1 &#xC720;&#xB3C4; ECM integrin MCF10A &#xC720; &#xBC29; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xBD09;&#xC1C4;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xACC4;&#xC18D; &#xB418;. E cadherin &#xC911;&#xC7AC; &#xC140; &#xC811;&#xCC29;&#xC774;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; cyclin D1 &#xC720;&#xB3C4; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xB418;&#xBA70; &#xC804;&#xC790; cadherin &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; integrin &#xC811;&#xCC29;&#xC758; &#xACB0;&#xD569;&#xB41C; &#xC800;&#xD574; &#xF06C; D1 Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;. E-cadherin MCF10A &#xC140;&#xC5D0; Rac, &#xC911;&#xC7AC;&#xC758; &#xD504;&#xB85C; &#xC99D;&#xC2DD; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; Rac&#xAC00; &#xC804;&#xC790; cadherin &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; integrin &#xD3EC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; D1 mRNA &#xC720;&#xB3C4; &#xF06C; &#xD544;&#xC694; &#xBCF4;&#xC5EC;. P21Cip1 &#xBC0F; p27Kip1, &#xB610;&#xD55C; integrin &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; Cdk &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC804;&#xC790; cadherin &#xC911;&#xC7AC; &#xC140; &#xC811;&#xCC29;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xF06C; &#xC804;&#xC790; cadherin &#xC885;&#xC18D; &#xC140; &#xC811;&#xCC29;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; D1 Mrna&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DD; causally S &#xB2E8;&#xACC4;&#xB85C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; Rac cyclin d1&#xC744; E cadherin &#xC911;&#xC7AC; &#xC140; &#xC811;&#xCC29;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD504;&#xB85C; &#xC99D;&#xC2DD; &#xD6A8;&#xACFC;&#xB85C; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC811;&#xCC29; cadherin integrin &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; cyclin D1 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; Rac&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Mediada por la integrina adherencia al sustrato es necesaria para la ciclina D1 en la inducci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas mesenquimales, pero se muestra aqu&#xED; que la inducci&#xF3;n de la ciclina D1 persiste a pesar del bloqueo de ECM-integrina de se&#xF1;alizaci&#xF3;n en c&#xE9;lulas epiteliales mamarias MCF10A. E-cadherina mediada por c&#xE9;lulas de adhesi&#xF3;n celular tambi&#xE9;n es compatible con la ciclina D1 en la inducci&#xF3;n de estas c&#xE9;lulas, y la inhibici&#xF3;n combinada de la E-cadherina y la adhesi&#xF3;n de las integrinas es necesario para impedir la expresi&#xF3;n de ciclina D1 mRNA y prote&#xED;na. Nuestros estudios anteriores se ha descrito un efecto favorable a la proliferaci&#xF3;n de E-cadherina en las c&#xE9;lulas MCF10A, mediada por el RAC, y ahora nos muestran que el RAC se requiere para la inducci&#xF3;n del ARNm de la ciclina D1 tanto por la E-cadherina y la participaci&#xF3;n de la integrina. Los niveles de p21Cip1 y p27Kip1, los inhibidores de Cdk que tambi&#xE9;n son objetivos de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de integrina, no se ven afectados por la E-cadherina mediada por c&#xE9;lulas de adhesi&#xF3;n celular. Finalmente, mostramos que el incremento en la expresi&#xF3;n de la ciclina D1 mRNA asociado con E-cadherina celular dependiente de la adhesi&#xF3;n celular est&#xE1; causalmente relacionada con un aumento de la entrada en la fase S. Nuestros resultados identifican Rac se&#xF1;alizaci&#xF3;n de la ciclina D1 como un importante pro-proliferativa efecto de la E-cadherina mediada por c&#xE9;lulas de adhesi&#xF3;n celular.

Rac dependiente de la ciclina D1 expresi&#xF3;n de genes regulados por la cadherina y mediada por la integrina adhesi&#xF3;n

&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x6B64;&#x5904;&#x63CF;&#x8FF0; MCF7 &#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE; ABCG2 &#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x4FA7; (SP) &#x4EBA;&#x53E3;&#x4E30;&#x5EA6;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;ABCG2 mRNA &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x5E73;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x5927;&#xFF0C;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x975E; SP &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EAF;&#x5316; MCF7 SP &#x4E2D;&#x548C; ABCG2 &#x4E13;&#x7528;&#x963B;&#x57A2;&#x5242;&#x6216; ABCG2 &#x77ED;&#x5E72;&#x6270; RNA &#x4E0E;&#x5B75;&#x5316;&#x6D88;&#x9664; sp MCF7&#x3002;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684; MCF7 SP &#x53EF;&#x4EE5;&#x751F;&#x6210;&#x5305;&#x542B; SP &#x548C;&#x975E; SP &#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x4E2D;&#x7684;&#x5F02;&#x7C7B;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3002;&#x4F53;&#x5185;&#x81F4;&#x7624;&#x6027;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684; MCF7 SP &#x5DF2;&#x62D3;&#x6B96;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E73;&#x817A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;MCF7 SP &#x67AF;&#x7AED;&#x7684;&#x8F6C;&#x5316;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; &beta; (TGFbeta)-&#x6307;&#x793A;&#x4E0A;&#x76AE;-&#x95F4;&#x5145;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C; (EMT)&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6548;&#x679C;&#x4E0E; ABCG2 &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x548C;&#x7C73;&#x6258;&#x84BD;&#x918C;&#x5BF9;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x5F3A;&#x4E0B;&#x8C03;&#x6709;&#x5173;&#x3002;&#x5728;&#x53D6;&#x6D88;&#x7684;&#x8F6C;&#x5316;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;-&beta; &#x548C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x8868;&#x578B;&#x9006;&#x8F6C;&#x540E;&#x6062;&#x590D;&#x4E86; ABCG2 &#x8868;&#x8FBE;&#x548C; SP &#x4E30;&#x5EA6;&#x3002;E-&#x9499;&#x649E;&#x4E5F;&#x51CF;&#x5C11; SP &#x4E30;&#x5BCC;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6548;&#x679C;&#x4E0D;&#x966A;&#x540C; ABCG2 mRNA &#x6216;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA; MCF7 &#x7EC6;&#x80DE; ABCG2 &#x8868;&#x8FBE;&#x7BA1;&#x5236;&#x671F;&#x95F4; EMT &#x548C; EMT &#x6548;&#x679C;&#x53CD;&#x6620; ABCG2 &#x529F;&#x80FD; E-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x8C03;&#x8282;&#x548C; ABCG2 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6291;&#x5236;&#x3002;

ABCG2 &#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x4FA7;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4E30;&#x5EA6;&#x8F6C;&#x5316;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; &beta; &#x5B9A;&#x5411;&#x4E0A;&#x76AE;-&#x95F4;&#x5145;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;

We describe here the regulation of ABCG2 expression and side population (SP) abundance in MCF7 human breast cancer cells. The level of ABCG2 mRNA and protein were increased in purified MCF7 SP relative to non-SP cells, and incubation with an ABCG2-specific inhibitor or ABCG2 short interfering RNA eliminated the MCF7 SP. The purified MCF7 SP could generate a heterogeneous population containing both SP and non-SP cells in culture. In vivo tumorigenicity experiments showed that the purified MCF7 SP has an increased ability to colonize the mouse mammary gland. Importantly, the MCF7 SP was depleted by a transforming growth factor-beta (TGFbeta)-directed epithelial-mesenchymal transition (EMT), and this effect was associated with a strong down-regulation of ABCG2 gene expression, and an increased sensitivity to mitoxantrone. ABCG2 expression and SP abundance were restored upon the removal of transforming growth factor-beta and reversion of the cells to an epithelial phenotype. Knock-down of E-cadherin also reduced SP abundance, but this effect was not accompanied by the loss of ABCG2 mRNA or protein. We conclude that ABCG2 expression in MCF7 cells is regulated during an EMT, and that the EMT effect reflects posttranslational regulation of ABCG2 function by E-cadherin as well as transcriptional repression of the ABCG2 gene.

ABCG2 expression and side population abundance regulated by a transforming growth factor beta-directed epithelial-mesenchymal transition.

Nous d&#xE9;crivons ici la r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;expression et ABCG2 c&#xF4;t&#xE9; de la population (SP) abondance dans MCF7 cellules humaines de cancer du sein. Le niveau de ABCG2 ARNm et la prot&#xE9;ine purifi&#xE9;e a &#xE9;t&#xE9; augment&#xE9; dans MCF7 SP par rapport aux non-SP cellules, et l&#x26;#39;incubation avec un inhibiteur de ABCG2-sp&#xE9;cifique ou ABCG2 courts ARN interf&#xE9;rents &#xE9;limin&#xE9; le SP MCF7. Le purifi&#xE9; MCF7 SP pourrait g&#xE9;n&#xE9;rer une population h&#xE9;t&#xE9;rog&#xE8;ne contenant &#xE0; la fois SP et non-SP cellules en culture. In vivo exp&#xE9;riences de tumorig&#xE9;nicit&#xE9; a montr&#xE9; que le SP a purifi&#xE9; MCF7 une capacit&#xE9; accrue &#xE0; coloniser la glande mammaire de la souris. Surtout, le SP a &#xE9;t&#xE9; appauvri MCF7 par un facteur de croissance transformant b&#xEA;ta (TGFbeta) dirig&#xE9;e transition &#xE9;pith&#xE9;lio-m&#xE9;senchymateuse (EMT), et cet effet a &#xE9;t&#xE9; associ&#xE9; &#xE0; une r&#xE9;gulation &#xE0; la baisse forte de l&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne ABCG2, et une sensibilit&#xE9; accrue &#xE0; la mitoxantrone. ABCG2 expression et l&#x26;#39;abondance SP ont &#xE9;t&#xE9; restaur&#xE9;es sur l&#x26;#39;&#xE9;limination de facteur de croissance transformant b&#xEA;ta et la r&#xE9;version des cellules &#xE0; un ph&#xE9;notype &#xE9;pith&#xE9;lial. Knock-down de la E-cadh&#xE9;rine &#xE9;galement r&#xE9;duit l&#x26;#39;abondance des SP, mais cet effet n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; accompagn&#xE9;e par la perte de ABCG2 ARNm ou de prot&#xE9;ines. Nous concluons que ABCG2 expression dans les cellules MCF7 est r&#xE9;glement&#xE9;e au cours d&#x26;#39;une EMT, et que l&#x26;#39;effet EMT refl&#xE8;te la r&#xE9;glementation post-traductionnelle de ABCG2 fonction par la E-cadh&#xE9;rine, ainsi que la r&#xE9;pression de la transcription du g&#xE8;ne ABCG2.

ABCG2 Abondance de la population d&#x26;#39;expression et de Side r&#xE9;gul&#xE9;e par un facteur de croissance b&#xEA;ta-dirig&#xE9; Transformer transition &#xE9;pith&#xE9;liale-m&#xE9;senchymateuse

Wir beschreiben hier die Regulierung der F&uuml;lle ABCG2 Ausdruck und Seite der Bev&ouml;lkerung (SP) in MCF7 menschlichen Brustkrebszellen. ABCG2 mRNA und Protein in gereinigtem MCF7-SP im Vergleich zu nicht-SP-Zellen erh&ouml;ht wurden, und Inkubation mit einem ABCG2-spezifischen Inhibitor oder ABCG2 short interfering RNA beseitigt die MCF7 SP. Die gereinigten MCF7-SP konnte eine heterogene Bev&ouml;lkerung, die sowohl SP als auch nicht-SP-Zellen in Kultur generieren. Tumorigenicity in-vivo-Experimente zeigten, dass die gereinigten MCF7-SP hat eine erh&ouml;hte F&auml;higkeit der Brustdr&uuml;se Maus zu kolonisieren. Wichtig ist, den MCF7-SP war ersch&ouml;pft durch eine transformierende Wachstumsfaktor-Beta (TGFbeta)-epitheliale-Mesenchymale Transition (EMT) gerichtet, und dieser Effekt war eine starke Herunterregulation ABCG2-Genexpression und eine erh&ouml;hte Empfindlichkeit gegen&uuml;ber Mitoxantron zugeordnet. ABCG2 Ausdruck und SP F&uuml;lle wurden nach der Entfernung der Transformation von Wachstumsfaktor-Beta und Wiedereinsetzung der Zellen in einer epithelialen Ph&auml;notyps wiederhergestellt. Knock-Down von E-Cadherin reduziert auch SP-&Uuml;berfluss, aber dieser Effekt wurde nicht durch den Verlust des ABCG2 mRNA oder Protein begleitet. Wir folgern, dass ABCG2 Ausdruck in MCF7 Zellen w&auml;hrend einer EMT geregelt ist, und dass der EMT-Effekt posttranslationale Verordnung ABCG2 Funktion von E-Cadherin sowie transcriptional Repression des Gens ABCG2 widerspiegelt.

ABCG2 Ausdruck und Seite Bev&ouml;lkerung F&uuml;lle durch eine transformierende Wachstumsfaktor Beta-Regie epithelial-Mesenchymale &Uuml;bergang geregelt.

Descriviamo qui il regolamento della ABCG2 espressione e lato abbondanza di popolazione (SP) in cellule di cancro al seno umano MCF7. Il livello della ABCG2 mRNA e proteina sono stati aumentati in SP MCF7 purificato rispetto le cellule non-SP e incubazione con un inibitore specifico ABCG2 o RNA interferente breve ABCG2 eliminato MCF7 SP. La SP MCF7 purificato potrebbe generare una popolazione eterogenea contenenti sia SP e SP non cellule in coltura. Esperimenti tumorigenicity in vivo hanno dimostrato che la SP MCF7 purificata ha un&#39;aumentata capacit&agrave; di colonizzare la ghiandola mammaria del mouse. Soprattutto, la SP MCF7 &egrave; stato impoverito da un fattore di crescita trasformante-beta (TGFbeta)-regia di transizione epiteliale-mesenchimale (EMT), e questo effetto &egrave; stato associato con un forte down-regulation dell&#39;espressione del gene ABCG2 e una maggiore sensibilit&agrave; al mitoxantrone. Espressione ABCG2 e abbondanza di SP sono stati ristabiliti dopo la rimozione di trasformare growth factor-beta e reversione delle cellule di un fenotipo epiteliale. Knock-down della E-caderina ridotto anche abbondanza di SP, ma questo effetto non &egrave; stato accompagnato dalla perdita della ABCG2 mRNA e delle proteine. Concludiamo che ABCG2 espressione nelle cellule MCF7 &egrave; regolata durante un EMT, e che l&#39;effetto di EMT riflette posttranslational regolamento della ABCG2 funzione di E-caderina e repressione trascrizionale del gene ABCG2.

ABCG2 espressione e lato popolazione abbondanza regolata da transforming growth factor beta-diretto epiteliale-mesenchymal transizione.

&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;MCF7&#x30D2;&#x30C8;&#x4E73;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;ABCG2&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x5074;&#x9762;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#xFF08;SP&#xFF09;&#x8C4A;&#x304B;&#x3055;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; ABCG2 mRNA&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x975E;SP&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;MCF7 SP&#x306E;&#x7CBE;&#x88FD;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;ABCG2&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x307E;&#x305F;&#x306F;ABCG2&#x77ED;&#x9396;&#x5E72;&#x6E09;RNA&#x3068;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;MCF7 SP&#x3092;&#x9664;&#x53BB;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;MCF7 SP&#x306F;&#x3001;SP&#x3068;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x975E;SP&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x4E0D;&#x5747;&#x4E00;&#x306A;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002; in vivo&#x3067;&#x816B;&#x760D;&#x5F62;&#x6210;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;MCF7 SP&#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x4E73;&#x817A;&#x3092;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;MCF7 SP&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;-&#x3B2;&#xFF08;TGFbeta&#xFF09;&#x4E3B;&#x5C0E;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x9593;&#x8449;&#x79FB;&#x884C;&#xFF08;EMT&#xFF09;&#x304C;&#x67AF;&#x6E07;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;ABCG2&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DF;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B5;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002; ABCG2&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;SP&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x4E0A;&#x76AE;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3078;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;-&#x3B2;&#x3068;&#x5FA9;&#x5E30;&#x3092;&#x5909;&#x3048;&#x308B;&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x6642;&#x306B;&#x5FA9;&#x5143;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x3082;&#x3001;SP&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x91CF;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;ABCG2 mRNA&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x4F34;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;MCF7&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;ABCG2&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;EMT&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x200B;&#x200B;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3057;&#x3001;EMT&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;ABCG2&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;ABCG2&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x4E3B;&#x5C0E;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x9593;&#x8449;&#x79FB;&#x884C;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x898F;&#x5236;ABCG2&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9;&#x500B;&#x4F53;&#x6570;

&#xC5EC;&#xAE30; ABCG2 &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xCABD; &#xC778;&#xAD6C; (SP) &#xD48D;&#xBD80; MCF7 &#xC778;&#xAC04; &#xC720;&#xBC29;&#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C; &#xC124;&#xBA85;. -SP &#xC140; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xC21C;&#xD654; MCF7 sp ABCG2 Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC0F; ABCG2 &#xAD00;&#xB828; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xB610;&#xB294; ABCG2 &#xC9E7;&#xC740; &#xAC04;&#xC12D; RNA&#xC640; &#xC778;&#xD050;&#xBCA0;&#xC774;&#xC158; MCF7 SP. &#xD0C8;&#xB77D; &#xC815;&#xD654; MCF7 SP SP &#xBC0F; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;-SP &#xC140;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Vivo&#xC5D0;&#xC11C; tumorigenicity &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC815;&#xD654; MCF7 SP&#xB294; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC720;&#xC120; &#xC120;&#xC73C;&#xB85C; &#xC99D;&#xAC00; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBCC0;&#xD615; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xBCA0;&#xD0C0; (TGFbeta)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; MCF7 SP&#xB97C; &#xC18C;&#xBAA8; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;,-&#xC0C1;&#xD53C; &#xC5FD; &#xC804;&#xD658; (&#xC751;&#xAE09;) &#xAC10;&#xB3C5;&#xACFC;&#xC774; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; ABCG2 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; mitoxantrone &#xC99D;&#xAC00; &#xAC10;&#xB3C4;&#xC758; &#xAC15;&#xD55C; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xADDC;&#xC81C;&#xC640; &#xAD00;&#xB828;&#xC774; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. ABCG2 &#xC2DD;&#xACFC; SP &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;-&#xBCA0;&#xD0C0;&#xACFC; &#xC0C1;&#xD53C; phenotype &#xC140;&#xC758; &#xADC0;&#xC120;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. E cadherin &#xB215;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C; SP &#xD48D;&#xBD80; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC;&#xC774; &#xD6A8;&#xACFC; ABCG2 mRNA &#xB098; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xD589; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; ABCG2 &#xC2DD; MCF7 &#xC140;&#xC5D0;&#xB294; &#xAD6C;&#xAE09; &#xB300; &#xC911; &#xADDC;&#xC81C; &#xACB0;&#xB860; &#xC751;&#xAE09; &#xD6A8;&#xACFC; E cadherin &#xC5EC; ABCG2 &#xD568;&#xC218;&#xC758; posttranslational &#xADDC;&#xC81C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; ABCG2 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; transcriptional &#xC5B5;&#xC555;&#xC744; &#xBC18;&#xC601;.

ABCG2 &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xCABD; &#xC778;&#xAD6C; &#xD48D;&#xBD80; &#xBCC0;&#xD615; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xAC10;&#xB3C5; &#xC5FD; &#xC0C1;&#xD53C; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C;.

Se describe aqu&#xED; la regulaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n y ABCG2 lado de la poblaci&#xF3;n (SP), su abundancia en las c&#xE9;lulas MCF7 c&#xE1;ncer de mama humano. El nivel de ABCG2 ARNm y prote&#xED;na se increment&#xF3; en purific&#xF3; MCF7 SP relativa a la no-SP c&#xE9;lulas, y la incubaci&#xF3;n con un inhibidor espec&#xED;fico de ABCG2 o ABCG2 ARN corto de interferencia eliminado el SP MCF7. El purificado MCF7 SP podr&#xED;a generar una poblaci&#xF3;n heterog&#xE9;nea que contiene tanto SP y no SP c&#xE9;lulas en cultivo. En experimentos in vivo mostraron que la tumorigenicidad purificado MCF7 SP tiene una mayor capacidad de colonizar la gl&#xE1;ndula mamaria de rat&#xF3;n. Es importante destacar que el SP MCF7 fue agotada por un factor de crecimiento transformante-beta (TGFbeta)-dirigida transici&#xF3;n epitelio-mesenquimal (EMT), y este efecto se asocia con una fuerte baja regulaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica ABCG2, y un aumento de la sensibilidad a la mitoxantrona. ABCG2 expresi&#xF3;n y abundancia SP fueron restaurados a la eliminaci&#xF3;n de factor de crecimiento transformante-beta y reversi&#xF3;n de las c&#xE9;lulas a un fenotipo epitelial. Knock-down de la E-cadherina tambi&#xE9;n se reduce la abundancia de SP, pero este efecto no fue acompa&#xF1;ada por la p&#xE9;rdida de ABCG2 ARNm o prote&#xED;na. Se concluye que ABCG2 expresi&#xF3;n en las c&#xE9;lulas MCF7 est&#xE1; regulada durante un EMT, y que el efecto EMT refleja regulaci&#xF3;n postraduccional de ABCG2 funci&#xF3;n de E-cadherina, as&#xED; como la represi&#xF3;n transcripcional del gen ABCG2.

ABCG2 Abundancia Poblaci&#xF3;n expresi&#xF3;n y al otro regulado por un factor de crecimiento transformante beta-dirigido transici&#xF3;n epitelio-mesenquimal

&#x5927;&#x91CF;&#x7C98;&#x9644;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x6709;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#xFF0C;&#x4F46;&#x7814;&#x7A76;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#x4E00;&#x76F4;&#x672A;&#x80FD;&#x786E;&#x5B9A;&#x54EA;&#x4E9B;&#x6709;&#x5173;&#x751F;&#x7406;&#x53D8;&#x5316;&#x54CD;&#x5E94;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x901A;&#x8DEF;&#x63A7;&#x5236; mitogenesis &#x7EC4;&#x7EC7;&#x5F39;&#x6027;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6C34;&#x51DD;&#x80F6;&#x57FA;&#x8D28;&#x4E0E;&#x751F;&#x7269;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x521A;&#x5EA6;&#x5339;&#x914D;&#x6765;&#x8C03;&#x67E5;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x7684;&#x77E9;&#x9635;&#x5F39;&#x6027;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x63A7;&#x5236;&#x7531;&#x751F;&#x7406;&#x77E9;&#x9635;&#x5F39;&#x6027;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x52A0;&#x52B2;&#x3002;

A number of adhesion-mediated signaling pathways and cell-cycle events have been identified that regulate cell proliferation, yet studies to date have been unable to determine which of these pathways control mitogenesis in response to physiologically relevant changes in tissue elasticity. In this report, we use hydrogel-based substrata matched to biological tissue stiffness to investigate the effects of matrix elasticity on the cell cycle.

Cell-cycle control by physiological matrix elasticity and in vivo tissue stiffening.

Un certain nombre de d&#x26;#39;adh&#xE9;sion &#xE0; m&#xE9;diation voies de signalisation et du cycle cellulaire des &#xE9;v&#xE9;nements ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s qui r&#xE9;gulent la prolif&#xE9;ration cellulaire, mais des &#xE9;tudes &#xE0; ce jour ont &#xE9;t&#xE9; incapables de d&#xE9;terminer laquelle de ces voies de contr&#xF4;le mitogen&#xE8;se en r&#xE9;ponse aux changements physiologiquement pertinents dans l&#x26;#39;&#xE9;lasticit&#xE9; des tissus. Dans ce rapport, nous utilisons un hydrogel &#xE0; base de substrats adapt&#xE9;s &#xE0; la rigidit&#xE9; des tissus biologiques pour enqu&#xEA;ter sur les effets de l&#x26;#39;&#xE9;lasticit&#xE9; de matrice sur le cycle cellulaire.

Contr&#xF4;le du cycle cellulaire par &#xE9;lasticit&#xE9; matrice physiologique et dans la rigidification des tissus in vivo

Eine Reihe von Adh&auml;sion-vermittelte Signalisierung Bildungswege und Zellzyklus Ereignisse wurden identifiziert, die das Zellwachstum kontrollieren, aber dennoch Studien bisher gewesen nicht in der Lage zu bestimmen, welche &uuml;ber diese Wege Steuerung Mitogenesis physiologisch relevanten Ver&auml;nderungen im Gewebe Elastizit&auml;t. In diesem Bericht verwenden wir Hydrogel-basierte Substraten abgestimmt auf biologisches Gewebe Steifigkeit, um die Auswirkungen der Matrix Elastizit&auml;t auf Zellzyklus zu untersuchen.

Zellzyklus-Kontrolle durch physiologische Matrix Elastizit&auml;t und in-vivo Gewebe Versteifung.

Un certo numero di adesione-mediata signaling pathways e ciclo cellulare sono stati identificati gli eventi che regolano la proliferazione cellulare, eppure gli studi fino ad oggi sono stati in grado di determinare quale di questi percorsi controllo endoteliali in risposta a fisiologicamente rilevanti cambiamenti nell&#39;elasticit&agrave; dei tessuti. In questa relazione, usiamo i substrati a base di idrogel abbinati a rigidit&agrave; dei tessuti biologici di indagare gli effetti della elasticit&agrave; della matrice sul ciclo cellulare.

Cellula-ciclo di controllo di matrice fisiologica elasticit&agrave; e irrigidimento dei tessuti in vivo.

&#x63A5;&#x7740;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x5F3E;&#x529B;&#x6027;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x4E0A;&#x306E;&#x884C;&#x5217;&#x306E;&#x5F3E;&#x529B;&#x6027;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x751F;&#x4F53;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x786C;&#x3055;&#x306B;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x305F;&#x30CF;&#x30A4;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x200B;&#x200B;&#x57FA;&#x8CEA;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x751F;&#x4F53;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x5F3E;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x7D44;&#x7E54;&#x88DC;&#x5F37;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x5236;&#x5FA1;

&#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC811;&#xCC29; &#xC911;&#xC7AC; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC544;&#xC9C1;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC870;&#xC9C1; &#xD0C4;&#xB825;&#xC758; &#xC21C;&#xC218; &#xAD00;&#xB828; &#xBCC0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACBD;&#xB85C; &#xC81C;&#xC5B4; mitogenesis &#xACB0;&#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xD0C4;&#xB825;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; hydrogel &#xAE30;&#xBC18; substrata &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xACBD;&#xC9C1;&#xC131;&#xC744; &#xC77C;&#xCE58;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xD0C4;&#xC131; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC870;&#xC9C1; &#xC2A4;&#xD2F0;&#xD504;&#xB2DD; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;.

Una serie de adherencia mediada por las v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n y eventos del ciclo celular han sido identificados que regulan la proliferaci&#xF3;n celular, sin embargo, los estudios realizados hasta la fecha han sido incapaces de determinar cu&#xE1;l de estas v&#xED;as de control de la mitog&#xE9;nesis en respuesta a los cambios fisiol&#xF3;gicamente relevantes de la elasticidad del tejido. En este informe, se utiliza a base de hidrogel substratos adaptados a la rigidez del tejido biol&#xF3;gico para investigar los efectos de la elasticidad de la matriz sobre el ciclo celular.

De control del ciclo celular por la elasticidad de la matriz fisiol&#xF3;gica y en refuerzos de tejido vivo

&#x6297;&#x589E;&#x6B96;&#x6D17;&#x8131;&#x652F;&#x67B6;&#x836F;&#x7269;&#x9650;&#x5236;&#x518D;&#x72ED;&#x7A84;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#x5E38;&#x7528;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x662F;&#x76F8;&#x5BF9;&#x975E;&#x7279;&#x5B9A;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x5185;&#x819C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5185;&#x4FA7;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x8840;&#x7BA1;&#x6210;&#x5F62;&#x672F;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5E76;&#x53D1;&#x75C7;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x627E;&#x51FA;&#x66F4;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x6297;&#x589E;&#x6B96;&#x5242;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6BD4;&#x8F83;&#x96F7;&#x5E15;&#x9709;&#x7D20;&#x5BF9;&#x90A3;&#x4E9B; cicaprost&#xFF0C;&#x6A21;&#x62DF;&#x7684;&#x81EA;&#x7136;&#x53D1;&#x751F;&#x7684; anti-mitogen&#x3001; PGI(2)&#x3002;&#x96F7;&#x5E15;&#x9709;&#x7D20;&#x548C; cicaprost &#x90FD;&#x5F3A;&#x70C8; anti-mitogenic &#x5728;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x536B;&#x751F;&#x5385;&#xFF09;&#x3002;&#x4F46;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x96F7;&#x5E15;&#x9709;&#x7D20;&#xFF0C;cicaprost &#x4EBA;&#x4E0D;&#x6291;&#x5236;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8109;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D53;&#x5EA6;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x65F6;&#xFF0C;&#x751A;&#x81F3;&#x5728; mitogenesis &gt; 10 &#x500D;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x5176; ED(50) &#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x3002;&#x540C;&#x6837;&#x5730;&#xFF0C;&#x96F7;&#x5E15;&#x9709;&#x7D20;&#x548C; cicaprost &#x636E;&#x8BF4;&#x4EE5;&#x89C4;&#x7BA1;&#x6C34;&#x5E73; cdk &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;p27(kip1)&#x3002;&#x4F46;&#x96F7;&#x5E15;&#x9709;&#x7D20;&#x4ECD;&#x7136;&#x5728; p27 anti-mitogenic (kip1)-&#x7A7A;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#xFF0C;&#x800C; anti-mitogenic cicaprost &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x5B8C;&#x5168;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; p27(kip1)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x7A33;&#x5B9A; PGI(2) mimetics &#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x6781;&#x5F3A;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242; p27 (kip1)-&#x4F9D;&#x8D56;&#x8840;&#x7BA1;&#x635F;&#x4F24;&#x540E;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x3002;

&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;-&#x7279;&#x5B9A;&#x6297; mitogenesis &#x7684; cicaprost&#x3002;

Stents eluting anti-proliferative drugs limit restenosis, but drugs commonly used to date are relatively non-specific cytostatic agents which inhibit proliferation of intimal endothelial cells as well as medial smooth muscle cells and may thereby contribute to the clinical complications associated with angioplasty. In an effort to identify a more specific anti-proliferative agent, we compared the effects of rapamycin to those of cicaprost, a mimetic of the naturally occurring anti-mitogen, PGI(2). Rapamycin and cicaprost were both strongly anti-mitogenic in vascular smooth muscle cells (VSMCs). But unlike rapamycin, cicaprost did not inhibit mitogenesis in aortic endothelial cells even when used at concentrations >10-fold higher than its ED(50) for VSMCs. Similarly, both rapamycin and cicaprost have been reported to regulate levels of the cdk inhibitor, p27(kip1). But rapamycin remained anti-mitogenic in p27(kip1)-null VSMCs whereas the anti-mitogenic effect of cicaprost was completely dependent on p27(kip1). We conclude that stable PGI(2) mimetics may be highly specific inhibitors of p27(kip1)-dependent VSMC proliferation after vascular injury.

Cell-type- and cell-cycle-specific anti-mitogenesis by cicaprost.

Les stents &#xE0; &#xE9;lution de m&#xE9;dicaments anti-prolif&#xE9;ratifs de limiter la rest&#xE9;nose, mais les m&#xE9;dicaments couramment utilis&#xE9;s &#xE0; ce jour sont relativement non sp&#xE9;cifiques des agents cytostatiques qui inhibent la prolif&#xE9;ration des cellules endoth&#xE9;liales intimales ainsi que m&#xE9;dianes des cellules musculaires lisses et peuvent ainsi contribuer &#xE0; des complications cliniques associ&#xE9;es &#xE0; une angioplastie. Dans un effort pour identifier un plus sp&#xE9;cifique anti-prolif&#xE9;rative agent, nous avons compar&#xE9; les effets de la rapamycine &#xE0; ceux de cicaprost, un mim&#xE9;tique de l&#x26;#39;origine naturelle anti-mitog&#xE8;ne, IGP (2). La rapamycine et cicaprost &#xE9;taient tous les deux fortement anti-mitog&#xE9;nique dans les cellules musculaires lisses vasculaires (CMLV). Mais contrairement &#xE0; la rapamycine, cicaprost n&#x26;#39;a pas inhib&#xE9; la mitogen&#xE8;se dans les cellules endoth&#xE9;liales aortiques m&#xEA;me lorsqu&#x26;#39;ils sont utilis&#xE9;s &#xE0; des concentrations&#x26;gt; 10 fois plus &#xE9;lev&#xE9;e que l&#x26;#39;ES (50) pour les CMLV. De m&#xEA;me, &#xE0; la fois de la rapamycine et cicaprost ont &#xE9;t&#xE9; signal&#xE9;s &#xE0; r&#xE9;guler les niveaux de l&#x26;#39;inhibiteur de cdk, p27 (Kip1). Mais la rapamycine rest&#xE9;s anti-mitog&#xE9;nique dans p27 (Kip1)-nulles CMLV alors que l&#x26;#39;effet anti-mitog&#xE8;ne de cicaprost &#xE9;tait compl&#xE8;tement d&#xE9;pendante de p27 (Kip1). Nous concluons que la stabilit&#xE9; des IGP (2) mim&#xE9;tiques peuvent &#xEA;tre inhibiteurs hautement sp&#xE9;cifiques de p27 (Kip1)-d&#xE9;pendante la prolif&#xE9;ration des CMLV apr&#xE8;s une l&#xE9;sion vasculaire.

Cell-type et du cycle cellulaire sp&#xE9;cifique anti-mitogen&#xE8;se par cicaprost

Antiproliferative eluting Stents Drogen Grenze Restenose, aber bis heute gebr&auml;uchlichsten Medikamente sind relativ unspezifischen Zytostatika hemmen die Proliferation von Hypertrophien Endothelzellen sowie medialen glatten Muskelzellen und k&ouml;nnen so die klinischen Komplikationen im Zusammenhang mit Angioplastie zur. In dem Bem&uuml;hen, einen spezifischeren Anti-proliferativen Agent identifizieren verglichen wir die Auswirkungen der angiomiolipomas des Cicaprost, einer mimetischen des nat&uuml;rlich vorkommenden Anti-mitogen, PGI(2). Angiomiolipomas und Cicaprost waren beide stark anti-mitogenic in vaskul&auml;ren glatten Muskelzellen (VSMCs). Aber im Gegensatz zu angiomiolipomas, Cicaprost Mitogenesis in Aorten Endothelzellen, selbst wenn in Konzentrationen verwendet nicht hemmen &gt; 10-fache h&ouml;her als seine ED(50) f&uuml;r VSMCs. Ebenso angiomiolipomas und Cicaprost wurden beschrieben, Ebenen der Cdk-Inhibitor zu regulieren p27(kip1). Aber angiomiolipomas blieb anti-mitogenic in p27 (kip1)-VSMCs null, w&auml;hrend die anti-mitogenic Wirkung der Cicaprost vollst&auml;ndig von der p27(kip1) abh&auml;ngig war. Wir schlie&szlig;en, dass stabile PGI(2) Mimetics hochspezifische p27-Inhibitoren sein kann (kip1)-abh&auml;ngige VSMC Verbreitung nach vaskul&auml;re Sch&auml;digung.

Art von Zelle und Zelle-Zyklus-spezifische Anti-Mitogenesis von Cicaprost.

Stent eluizione anti-proliferativa farmaci limite ristenosi, ma farmaci comunemente usati fino ad oggi sono relativamente non-specifici agenti citostatici che inibiscono la proliferazione delle cellule endoteliali intimale cos&igrave; come le cellule muscolari lisce mediale e possono quindi contribuire a complicazioni cliniche associate con angioplastica. Nel tentativo di identificare un agente anti-proliferativo pi&ugrave; specifico, abbiamo confrontato gli effetti della rapamicina per quelli di cicaprost, una mimetica delle anti-mitogen naturali, PGI(2). Rapamicina e cicaprost erano entrambi fortemente anti-mitogenic nelle cellule muscolari lisce vascolari (VSMCs). Ma a differenza di rapamicina, cicaprost non inibire endoteliali nelle cellule endoteliali dell&#39;aorta anche quando utilizzato a concentrazioni &amp;gt; 10 volte superiore al suo ED(50) per VSMCs. Allo stesso modo, sia rapamicina e cicaprost sono stati segnalati per regolare i livelli dell&#39;inibitore cdk, p27(kip1). Ma rapamicina &egrave; rimasto anti-mitogenic in p27 (kip1)-null VSMCs considerando che l&#39;effetto anti-mitogenic di cicaprost era completamente dipendente da p27(kip1). Concludiamo che stabile PGI(2) mimetico pu&ograve; essere altamente specifici inibitori di p27 (kip1)-dipendente proliferazione VSMC dopo lesioni vascolari.

Tipo di cellula e cellula-ciclo-specifici anti-endoteliali da cicaprost.

&#x6297;&#x5897;&#x6B96;&#x85AC;&#x5264;&#x3092;&#x6EB6;&#x51FA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x518D;&#x72ED;&#x7A84;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x85AC;&#x306F;&#x5185;&#x819C;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x8853;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5408;&#x4F75;&#x75C7;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x975E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x6291;&#x5236;&#x5264;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3088;&#x308A;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x6297;&#x5897;&#x6B96;&#x5264;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x52AA;&#x529B;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;cicaprost&#x3001;&#x5929;&#x7136;&#x306E;&#x6297;&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x306E;&#x6A21;&#x5023;&#x3001;PGI&#xFF08;2&#xFF09;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x306B;&#x30E9;&#x30D1;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30E9;&#x30D1;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;cicaprost&#x306F;&#x4E21;&#x65B9;&#x5F37;&#x304F;&#x3001;&#x6297;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;VSMC&#x3092;&#xFF09;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30E9;&#x30D1;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;cicaprost&#x306F;VSMC&#x3092;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x306E;ED&#xFF08;50&#xFF09;&#x3088;&#x308A;&#x26;gt; 10&#x500D;&#x9AD8;&#x3044;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3067;&#x3082;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x8A98;&#x767A;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x30E9;&#x30D1;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;cicaprost&#x4E21;&#x65B9;&#x306F;&#x3001;CDK&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3001;p27&#x306E;&#xFF08;kip1&#xFF09;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; cicaprost&#x306E;&#x6297;&#x5206;&#x88C2;&#x4FC3;&#x9032;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;P27&#xFF08;kip1&#xFF09;&#x306B;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30E9;&#x30D1;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;P27&#xFF08;kip1&#xFF09;&#x30CC;&#x30EB;VSMC&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6297;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;PGI&#xFF08;2&#xFF09;&#x6A21;&#x5023;&#x7269;&#x306F;&#x3001;p27&#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#xFF08;kip1&#xFF09;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x640D;&#x50B7;&#x5F8C;&#x306E;VSMC&#x5897;&#x6B96;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

Cicaprost&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x6297;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;

&#xC2A4;&#xD150; &#xD2B8; &#xC548;&#xD2F0; &#xC99D;&#xC2DD; eluting &#xC57D; &#xC81C;&#xD55C; restenosis &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB0A0;&#xC9DC;&#xB97C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xC57D;&#xBB3C;&#xC740; &#xB0B4;&#xCE21; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC; &#xB0B4; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; &#xD608;&#xAD00; &#xC131;&#xD615; &#xC220;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC784;&#xC0C1; &#xD569;&#xBCD1;&#xC99D;&#xC758; &#xC6D0;&#xC778;&#xC774; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC73C;&#xBA70; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; cytostatic &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;. &#xBCF4;&#xB2E4; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC778; &#xC548;&#xD2F0; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; cicaprost, &#xC790;&#xC5F0;&#xC2A4;&#xB7FD; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xC0DD; anti-mitogen PGI(2)&#xC758; &#xBAA8;&#xBC29;&#xC758; rapamycin&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50;. Rapamycin &#xBC0F; cicaprost &#xD608;&#xAD00; &#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC; &#xC138;&#xD3EC; (VSMCs)&#xC5D0; &#xB458; &#xB2E4; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; anti-mitogenic&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. Rapamycin, &#xB2EC;&#xB9AC; cicaprost mitogenesis &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xB300;&#xB3D9;&#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &amp;gt; Vsmcs&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; ED(50) &#xBCF4;&#xB2E4; 10 &#xBC30; &#xB354; &#xB192;&#xC740;. &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C;, rapamycin &#xBC0F; cicaprost &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; cdk &#xC5B5;&#xC81C; &#xBB3C; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C;&#xB97C; p27(kip1). &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; rapamycin &#xB0A8;&#xC544; p27&#xC5D0;&#xC11C; anti-mitogenic (kip1)-cicaprost&#xC758; anti-mitogenic &#xD6A8;&#xACFC; &#xC644;&#xC804;&#xD788; p27(kip1)&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; VSMCs null. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; PGI(2) mimetics p27&#xC758; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC778; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xACB0;&#xB860; (kip1)-&#xD608;&#xAD00; &#xC190;&#xC0C1; &#xD6C4; &#xC885;&#xC18D; VSMC &#xD655;&#xC0B0;.

Cicaprost&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC548;&#xD2F0; mitogenesis&#xC744; &#xC140; &#xD615; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30;-&#xAD00;&#xB828;.

Los stents liberadores de f&#xE1;rmacos antiproliferativos limitar la reestenosis, pero las drogas de uso com&#xFA;n hasta la fecha son relativamente no espec&#xED;ficos agentes citost&#xE1;ticos que inhiben la proliferaci&#xF3;n de la &#xED;ntima c&#xE9;lulas endoteliales, as&#xED; como medial c&#xE9;lulas del m&#xFA;sculo liso y por lo tanto puede contribuir a las complicaciones cl&#xED;nicas asociadas a la angioplastia. En un esfuerzo para identificar una m&#xE1;s espec&#xED;fica anti-proliferativa agente, se compararon los efectos de la rapamicina a los de cicaprost, un mim&#xE9;tico de la natural anti-mit&#xF3;geno, IGP (2). La rapamicina y cicaprost fueron fuertemente anti-mitog&#xE9;nica en c&#xE9;lulas musculares lisas vasculares (CMLV). Pero a diferencia de la rapamicina, cicaprost no inhibe la mitog&#xE9;nesis en las c&#xE9;lulas endoteliales a&#xF3;rticas, incluso cuando se usa en concentraciones&#x26;gt; 10 veces por encima de su disfunci&#xF3;n er&#xE9;ctil (50) de CMLV. De manera similar, tanto la rapamicina y cicaprost han descrito para regular los niveles del inhibidor de CDK, p27 (kip1). Sin embargo, la rapamicina se mantuvo en la lucha contra el mit&#xF3;geno p27 (kip1) son nulos CMLV mientras que el efecto anti-mitog&#xE9;nica de cicaprost era completamente dependiente de p27 (kip1). Llegamos a la conclusi&#xF3;n que la estabilidad de IGP (2) mim&#xE9;ticos pueden ser inhibidores altamente espec&#xED;ficos de p27 (Kip1) que dependen de la proliferaci&#xF3;n de las CMLV despu&#xE9;s de una lesi&#xF3;n vascular.

Paola Castagnino

Department of Pharmacology

University of Pennsylvania

Studying the Effects of Matrix Stiffness on Cellular Function using Acrylamide-based Hydrogels

Paola Castagnino

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University of Pennsylvania

Studying the Effects of Matrix Stiffness on Cellular Function using Acrylamide-based Hydrogels

Department of Pharmacology