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A High-content <em>In Vitro</em> Pancreatic Islet &#946;-cell Replication Discovery Platform

Loss of insulin-producing &#946;-cells is a central feature of diabetes. While a variety of potential replacement therapies are being explored, expansion ...

Stanford University School of Medicine

To investigate the expression of coxsackievirus and adenovirus receptor (CAR) and adenovirus-mediated reporter gene transfer in five human colon cancer cell lines.

Analysis of the expression of coxsackievirus and adenovirus receptor in five colon cancer cell lines.

Tamoxifen is the most common antiestrogen used in the treatment of estrogen-positive breast cancer but its adverse effects and also resistance to this drug are serious challenges in the treatment of breast cancer. Characterization of mechanisms responsible for these adverse effects can lead to design of more efficient therapeutic strategies for the treatment of breast cancer. Here, we used a cellular model to evaluate the effects of autocrine expression of human growth hormone on responses of cells to tamoxifen. Our results imply for the first time that autocrine expression of growth hormone in human breast adenocarcinoma cell line, MCF-7, results in increase in cell proliferative capacity of cells even in the presence of tamoxifen. This effect may be due to up-regulation of G-coupled estrogen receptor, GPR30, which is activated by tamoxifen.

Autocrine human growth hormone expression leads to resistance of MCF-7 cells to tamoxifen.

&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6025;&#x6027;&#x65E9;&#x5E7C;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x767D;&#x8840;&#x75C5; NB 4 &#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x4E09;&#x6C27;&#x5316;&#x4E8C;&#x7837; (ATO) &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6C49;&#x82F1;&#x56DB;&#x6C2E;&#x5511;&#x6D4B;&#x8BD5;&#xFF0C;&#x6EB4;&#x8131;&#x6C27;&#x5C3F;&#x7519; (BrdU) &#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3001; &#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 3 &#x6D3B;&#x6027;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3001; &#x57FA;&#x4E8E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6838;&#x56E0;&#x5B50; kappa B (NF-&#x6D3B;&#x5316;&#xFF09; &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x9176;&#x8054;&#x514D;&#x75AB;&#x5438;&#x9644;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x548C;&#x5B9E;&#x65F6; RT-PCR &#x53D7;&#x8058;&#x6765;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x5BF9;&#x4EE3;&#x8C22;&#x6D3B;&#x6027;&#x3001; DNA &#x5408;&#x6210;&#x3001; &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x6027;&#x7684;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x548C;&#x9ECF;&#x6DB2; ATO &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x5BF9;&#x4EE3;&#x8C22;&#x6F5C;&#x529B;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x9ECF;&#x6DB2;&#x7684; ATO &#x6291;&#x5236;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E86;&#x5173;&#x8054;&#x7684; NB 4 &#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;p73&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x6FC0;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x56E0;&#x5B50; 1A mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x5F3A; (p21) &#x80BF;&#x7624;&#x86CB;&#x767D;&#x8BF1;&#x5BFC; 53 &#x6838;&#x86CB;&#x767D; 1 (TP53INP1) &#x52A8;&#x6F2B;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; 2 (WNK2) &#x548C;&#x8F7D;&#x8102;&#x86CB;&#x767D; 2 &#x52A0;&#x4E0A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; NF &#x6D3B;&#x5316;&#x6291;&#x5236; beta (IKK2) &#x6D77;&#x5E95;&#x603B;&#x52A8;&#x5458;&#xFF0C;BCL2 &#x6837; 1 &#xFF08;BCL-X(L))&#x3001; &#x51CB;&#x4EA1;&#x6291;&#x5236;&#x86CB;&#x767D; 1 &#xFF08;cIAP2&#xFF09;&#xFF0C;X &#x8FDE;&#x9501;&#x51CB;&#x4EA1;&#x6291;&#x5236;&#x86CB;&#x767D; (XIAP) &#x5927;&#x5E45;&#x5EA6;&#x51CF;&#x5C11;&#x751F;&#x5B58;&#x7D20;&#x3001; Bcl-2&#x3001; TIP60&#x3001; &#x5171;&#x6D4E;&#x5931;&#x8C03;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x8840;&#x7BA1;&#x6269;&#x5F20;&#x75C7; (ATM)&#xFF0C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5C0F;&#x6C34;&#x7535; 2 &#x548C; sirtuin (SIRT1)&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x95EE;&#x9898;&#x9996;&#x6B21;&#x663E;&#x793A; ATO &#x6CBB;&#x7597;&#x53EF;&#x4EE5;&#x675F;&#x7F1A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x589E;&#x6B96;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8BF1;&#x5BFC; NB 4 &#x901A;&#x8FC7;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; p73&#x3001; TP53INP1&#x3001; WNK2&#x3001; &#x8F7D;&#x8102;&#x86CB;&#x767D; 2&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x6291;&#x5236; NF &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6D3B;&#x5316;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; BCL-X(L)&#x3001; cIAP2&#x3001; XIAP &#x548C;&#x5B58;&#x6D3B;&#x7D20;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5BF9; p73 &#x8F6C;&#x5F55;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684; ATO inductionary &#x5F71;&#x54CD;&#x53EF;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x62BD;&#x7B4B; (&#x6291;&#x5236;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; p65&#xFF09;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA; IKK2&#x3001; ATM &#x548C;&#x6D77;&#x5E95;&#x603B;&#x52A8;&#x5458;&#x8F6C;&#x5F55;&#x963B;&#x788D;&#x901A;&#x8FC7; NF &#x6D3B;&#x5316;&#x6A21;&#x5757;&#x4EE5;&#x53CA;&#x51CF;&#x5C11; mRNA &#x8868;&#x8FBE;&#x7684; TIP60&#xFF0C;&#x5C0F;&#x6C34;&#x7535; 2 &#x548C; SIRT1&#x3002;

&#x4E09;&#x6C27;&#x5316;&#x4E8C;&#x7837;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x94CC;-4&#x3001; &#x6025;&#x6027;&#x65E9;&#x5E7C;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0A;&#x8C03; p73 &#x901A;&#x8FC7;&#x6291;&#x5236;&#x6838;&#x56E0;&#x5B50; kappa B &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684; p73 &#x8F6C;&#x5F55;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x9884;&#x9632; XIAP&#x3001; cIAP2&#x3001; BCL-XL &#x548C;&#x5B58;&#x6D3B;&#x7D20;&#x4ECB;&#x5BFC; NF &#x6D3B;&#x5316;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;

The purpose of the present study is to evaluate the effects of arsenic trioxide (ATO) on human acute promyelocytic leukemia NB-4 cells. Microculture tetrazolium test, bromodeoxyuridine (BrdU) cell proliferation assay, caspase 3 activity assay, cell-based nuclear factor kappa B (NF-kappaB) phosphorylation measurement by ELISA and real-time RT-PCR were employed to appraise the effects of ATO on metabolic activity, DNA synthesis, induction of programmed cell death and NF-kappaB activation. The suppressive effects of ATO on metabolic potential, cell proliferation and NF-kappaB activation were associated with induction of apoptosis in NB-4 cells. In addition, an expressive enhancement in mRNA levels of p73, cyclin-dependent kinase inhibitor 1A (p21), tumor protein 53-induced nuclear protein 1 (TP53INP1), WNK lysine deficient protein kinase 2 (WNK2) and lipocalin 2 coupled with a significant reduction in transcriptional levels of NF-kappaB inhibitor beta (IKK2), Nemo, BCL2-like 1 (BCL-X(L)), inhibitor of apoptosis protein 1 (cIAP2), X-linked inhibitor of apoptosis protein (XIAP), survivin, Bcl-2, TIP60, ataxia telangiectasia (ATM), SHP-2 and sirtuin (SIRT1) were observed. Altogether, these issues show for the first time that ATO treatment could trammel cell growth and proliferation as well as induces apoptosis in NB-4 cells through induction of transcriptional levels of p73, TP53INP1, WNK2, lipocalin 2 as well as suppression of NF-kappaB-mediated induction of BCL-X(L), cIAP2, XIAP and survivin. Furthermore, the inductionary effects of ATO on transcriptional stimulation of p73 might be through cramping the NF-kappaB module (through suppression of p65 phosphorylation as well as transcriptional hindering of IKK2, ATM and Nemo) along with diminishing the mRNA expression of TIP60, SHP-2 and SIRT1.

Arsenic trioxide induces apoptosis in NB-4, an acute promyelocytic leukemia cell line, through up-regulation of p73 via suppression of nuclear factor kappa B-mediated inhibition of p73 transcription and prevention of NF-kappaB-mediated induction of XIAP, cIAP2, BCL-XL and survivin.

Le but de cette &eacute;tude est d&#39;&eacute;valuer les effets de trioxyde de diarsenic (ATO) sur des cellules leuc&eacute;miques NB-4 humaine aigu&euml; promy&eacute;locytaire. Test de microculture de t&eacute;trazolium, bromod&eacute;oxyuridine (BrdU) cellulaire analyse de prolif&eacute;ration, analyse d&#39;activit&eacute; de la caspase 3, bas&eacute;s sur les cellules de facteur nucl&eacute;aire kappa B (NF-kappaB) phosphorylation mesure par ELISA et RT-PCR en temps r&eacute;el ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;es pour &eacute;valuer les effets de l&#39;OAB sur l&#39;activit&eacute; m&eacute;tabolique, de la synth&egrave;se d&#39;ADN, d&#39;induction de mort cellulaire programm&eacute;e et l&#39;activation de NF-kappaB. Les effets suppresseurs d&#39;OAB sur le potentiel m&eacute;tabolique, la prolif&eacute;ration cellulaire et l&#39;activation de NF-kappaB &eacute;taient associ&eacute;s &agrave; l&#39;induction de l&#39;apoptose dans les cellules de NB-4. En outre, un renforcement expressif dans les niveaux d&#39;ARNm de p73, 1 a inhibiteur de kinases cycline-d&eacute;pendantes (p21), la tumeur induite par 53 nucl&eacute;aire prot&eacute;ine 1 (TP53INP1), WNK lysine d&eacute;ficient prot&eacute;ine kinase 2 (WNK2) et la LIPOCALINE 2 coupl&eacute;e &agrave; une r&eacute;duction significative des niveaux de transcription de NF-kappaB inhibiteur de la b&ecirc;ta (IKK2), Nemo, BCL2 type 1 (BCL-X(L)), inhibiteur de l&#39;apoptose, prot&eacute;ines 1 (cIAP2), li&eacute; &agrave; le X inhibiteur de la prot&eacute;ine de l&#39;apoptose (XIAP), survivine, Bcl-2, TIP60, ataxie t&eacute;langiectasie (ATM), SHP-2 et la SIRTUINE (SIRT1) ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;s. Au total, ces questions d&eacute;montrent pour la premi&egrave;re fois que ATO traitement pourrait tr&eacute;mail la croissance cellulaire et la prolif&eacute;ration ainsi qu&#39;induit l&#39;apoptose dans les cellules par induction des niveaux de transcription de p73, TP53INP1, WNK2, LIPOCALINE 2 ainsi que la suppression de NF-kappaB-mediated induction de BCL-X(L), cIAP2, XIAP et survivine NB-4. En outre, les effets inductionary ATO sur stimulation transcriptionnelle de p73 peuvent &ecirc;tre par le biais de crampes du module de NF-kappaB (suppression de la phosphorylation p65) ainsi qu&#39;entraver transcriptionnelle de IKK2, ATM et Nemo ainsi que diminue l&#39;expression de l&#39;ARNm de TIP60, SHP-2 et SIRT1.

Trioxyde de diarsenic induit l&#39;apoptose dans une lign&eacute;e de cellules de la leuc&eacute;mie aigu&euml; promy&eacute;locytaire, gr&acirc;ce &agrave; une r&eacute;gulation de p73 via la suppression de la kappa nucl&eacute;aire facteur d&#39;inhibition de la transcription p73 par B et de la pr&eacute;vention de NF-kappaB-mediated induction de XIAP, cIAP2, BCL-XL et survivine, NB-4.

Der Zweck der vorliegenden Studie ist es, die Bewertung der Auswirkungen von Arsentrioxid (ATO) auf Zellen des menschlichen akute Promyelozyten-Leuk&auml;mie NB-4. Microculture Tetrazolium-Test, Bromdesoxyuridin (BrdU) Handy-Verbreitungs, Caspase 3-Aktivit&auml;tstest, zellbasierte nuklearer Faktor Kappa B (NF-KappaB) Phosphorylierung Messung von ELISA und Real-Time RT-PCR wurden eingesetzt, um die Auswirkungen der ATO auf metabolische Aktivit&auml;t, DNA-Synthese, Induktion des programmierten Zelltod und NF-KappaB Aktivierung zu beurteilen. Die unterdr&uuml;ckende Wirkungen von ATO auf metabolische Potenzial, Zellproliferation und NF-KappaB Aktivierung wurden mit Induktion von Apoptose in Zellen NB-4. Zus&auml;tzlich werden ausdrucksstarke Zubeh&ouml;rartikel in mRNA-Niveaus p73, cyclin-abh&auml;ngige Kinase-Hemmer 1A (p21), Tumor Protein induziert durch 53 nukleare Protein 1 (TP53INP1), WNK lysinarme Proteinkinase 2 (WNK2) und Lipocalin 2 gekoppelt mit einer signifikanten Reduktion in transcriptional Niveaus von NF-KappaB Inhibitor Beta (IKK2), Nemo, BCL2-Like-1 (BCL-X(L)), Inhibitor von Apoptosis Protein 1 (cIAP2), X-chromosomale Inhibitor der Apoptose-Protein (XIAP), survivin, Bcl-2, TIP60, Ataxia teleangiectatica (ATM), SHP-2 und Sirtuine (SIRT1) wurden beobachtet. Insgesamt zeigen diese Probleme zum ersten Mal, dass ATO Behandlung k&ouml;nnte Zellwachstum und Proliferation Trammelnetze sowie induziert Apoptose in Zellen durch Induktion von transkriptionelle Ebenen der p73, TP53INP1, WNK2, Lipocalin 2 sowie Unterdr&uuml;ckung von NF-KappaB-vermittelte Induktion der BCL-X(L), cIAP2, XIAP und survivin NB-4. Dar&uuml;ber hinaus m&ouml;glicherweise die inductionary Auswirkungen der ATO auf transkriptionelle Stimulation der p73 durch Kr&auml;mpfe des NF-KappaB-Moduls durch (Unterdr&uuml;ckung von p65 Phosphorylierung) sowie die transkriptionelle behindern IKK2, ATM und Nemo zusammen mit Verminderung des mRNA-Ausdrucks des TIP60, SHP-2 und SIRT1.

Arsentrioxid induziert Apoptose in NB-4, eine akute Promyelozyten Leuk&auml;mie-Zelllinie durch Up-Regulierung des p73 &uuml;ber Unterdr&uuml;ckung der nuklearen Faktor Kappa B-vermittelte Hemmung der Transkription p73 und Vermeidung von NF-KappaB-vermittelte Induktion der XIAP, cIAP2, BCL-XL und survivin.

Lo scopo del presente studio &egrave; di valutare gli effetti di triossido di arsenico (ATO) sulle cellule NB-4 la leucemia promielocitica acuta umana. Test di tetrazolium microcultura, bromodeoxyuridine (BrdU) cella saggio di proliferazione, analisi attivit&agrave; di caspase 3, cell-based fattore nucleare kappa B (NF-kappaB) fosforilazione misura da ELISA e Real-time RT-PCR sono stati impiegati per valutare gli effetti dell&#39;ATO sull&#39;attivit&agrave; metabolica, sintesi del DNA, induzione di morte programmata delle cellule e l&#39;attivazione di NF-kappaB. Gli effetti soppressivi di ATO sul potenziale metabolico, proliferazione cellulare e l&#39;attivazione di NF-kappaB sono stati associati ad induzione di apoptosi nelle cellule NB-4. In aggiunta, un potenziamento espressivo nei livelli di mRNA di p73, 1A inibitore della chinasi ciclina-dipendenti (p21), tumore indotto da 53 nucleare proteina 1 (TP53INP1), chinasi di proteina carente di lisina WNK 2 (WNK2) e lipocalina 2 accoppiato con una significativa riduzione di transcriptional livelli di NF-kappaB inhibitor beta (IKK2), Nemo, BCL2-like 1 (BCL-X(L)), inibitore della proteina di apoptosis 1 (cIAP2), X-linked inibitore della proteina di apoptosis (XIAP), survivina, Bcl-2, TIP60, atassia telangiectasia (ATM), sono stati osservati SHP-2 e sirtuine (SIRT1). Complessivamente, questi problemi mostrano per la prima volta che trattamento ATO potrebbe tramagli crescita cellulare e proliferazione cos&igrave; come induce apoptosi nelle cellule NB-4 attraverso l&#39;induzione di transcriptional livelli di p73, TP53INP1, WNK2, lipocalina 2, nonch&eacute; soppressione di NF-kappaB-mediated induction of BCL-X(L), cIAP2, XIAP e survivina. Inoltre, gli effetti inductionary dell&#39;ATO sulla stimolazione transcriptional di p73 potrebbero essere attraverso crampi il modulo NF-kappaB attraverso (soppressione della fosforilazione p65) nonch&eacute; ostacolando transcriptional di IKK2, ATM e Nemo insieme a diminuire l&#39;espressione del mRNA di TIP60, SHP-2 e SIRT1.

Triossido di arsenico induce apoptosi in NB-4, una linea di cell leucemia promielocitica acuta, attraverso up-regulation di p73 tramite soppressione di kappa fattore nucleare B-mediato l&#39;inibizione della trascrizione p73 e prevenzione dell&#39;induzione mediata da NF-kappaB di XIAP, cIAP2, BCL-XL e survivina.

&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x6025;&#x6027;&#x524D;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x7403;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5; NB 4 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x4E09;&#x9178;&#x5316;&#x7812;&#x7D20; (ATO) &#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6B64;&#x306E;&#x65B9;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30BE;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C6;&#x30B9;&#x30C8; &#x30D6;&#x30ED;&#x30E2;&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30A6;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3; (BrdU) &#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3001;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC; 3 &#x6D3B;&#x6027;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x6838;&#x56E0;&#x5B50;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D1; B &#xFF08;NF-&#x30AB;&#x30C3;&#x30D1; b) &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x6E2C;&#x5B9A; ELISA &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3001;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0; RT-PCR &#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066; ATO &#x304C;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x6D3B;&#x6027;, DNA &#x5408;&#x6210;, &#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3068; NF &kappa; b &#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;ATO &#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x52B9;&#x679C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x80FD;&#x529B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3068; NF &kappa; b &#x6D3B;&#x6027;&#x5316; NB 4 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;p73&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264; 1 a &#x306E; mRNA &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x529B;&#x5411;&#x4E0A; (p21)&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; 53 &#x8A98;&#x8D77;&#x6838;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; 1 &#xFF08;TP53INP1&#xFF09; WNK &#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x6B20;&#x4E4F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; 2 (WNK2) &#x3068;&#x30EA;&#x30DD;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3; 2 NF-&kappa; b &#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; (IKK2), &#x30CD;&#x30E2;, BCL2 &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; 1 (BCL-X(L)), &#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x6291;&#x5236;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; 1 (cIAP2)&#x3001;X &#x9023;&#x9396;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x6291;&#x5236;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (XIAP) &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x524A;&#x6E1B;&#x3068;&#x76F8;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3001;Bcl 2 &#x30B5;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D3;&#x30F3; TIP60&#x3001;&#x6BDB;&#x7D30;&#x8840;&#x7BA1;&#x62E1;&#x5F35;&#x6027;&#x904B;&#x52D5;&#x5931;&#x8ABF; (ATM)&#x3001;SHP 2 &#x30B5;&#x30FC;&#x30C1;&#x30E5;&#x30A4;&#x30F3; (SIRT1) &#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x3092;&#x521D;&#x3081;&#x3066; ATO &#x6CBB;&#x7642;&#x3053;&#x3068; NB 4 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB; p73 TP53INP1&#x3001;WNK2&#x3001;&#x30EA;&#x30DD;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3; 2&#x3001;BCL-X(L)&#x3001;cIAP2&#x3001;XIAP&#x3001;&#x30B5;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D3;&#x30F3;&#x306E; NF-&#x30AB;&#x30C3;&#x30D1; b &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x5897;&#x6B96;&#x30C8;&#x30E9;&#x30E1;&#x30EB;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;ATO &#x306E; inductionary &#x52B9;&#x679C; p73 &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x523A;&#x6FC0; NF-&kappa; b &#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB; &#xFF08;p65 &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#xFF09; &#x3068;&#x3057;&#x3066; IKK2&#x3001;ATM&#x3001;&#x30CD;&#x30E2;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066; TIP60 &#x306E; mRNA &#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3068;&#x5171;&#x306B;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3051;&#x3044;&#x308C;&#x3093;&#x3092;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044; SHP 2 &#x3068; SIRT1&#x3002;

&#x4E09;&#x9178;&#x5316;&#x7812;&#x7D20; p73 &#x6838;&#x56E0;&#x5B50;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D1; B p73 &#x8EE2;&#x5199;&#x6291;&#x5236;&#x3068; NF-&#x30AB;&#x30C3;&#x30D1; b &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E; XIAP&#x3001;cIAP2&#x3001;BCL XL&#x3001;&#x30B5;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D3;&#x30F3;&#x306E;&#x4E88;&#x9632;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x6025;&#x6027;&#x524D;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x7403;&#x6027;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB; NB 4 &#x3067;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xC801;&#xC740; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAE09;&#xC131; promyelocytic &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; NB-4 &#xC140;&#xC5D0; &#xC0BC;&#xC0B0;&#xD654; &#xBE44;&#xC18C; (ATO)&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Microculture tetrazolium &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;, bromodeoxyuridine (BrdU) &#xC138;&#xD3EC; &#xD655;&#xC0B0; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;, caspase 3 &#xD65C;&#xB3D9; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;, ELISA&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD575; &#xC694;&#xC18C; &#xC140; &#xAE30;&#xBC18; &#xCE74;&#xD30C; B (NF kappaB) &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xCE21;&#xC815; &#xBC0F; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; RT-PCR &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xD65C;&#xB3D9;, DNA &#xD569;&#xC131;, &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xBC0F; NF kappaB &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC720;&#xB3C4; ATO&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD3C9;&#xAC00;&#xB97C; &#xACE0;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;, &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xBC0F; NF kappaB &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; ATO&#xC758; &#xC9C4;&#xC555; &#xD6A8;&#xACFC; NB-4 &#xC140;&#xC5D0; apoptosis &#xC720;&#xB3C4;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, p73, &#xF06C; &#xC885;&#xC18D; kinase &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; 1a&#xC758; mRNA &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD5A5;&#xC0C1; (p21) &#xC885;&#xC591; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 53 &#xC720;&#xB3C4; &#xD575; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 1 (TP53INP1) WNK lysine &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; 2 (WNK2) lipocalin 2 NF kappaB &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xBCA0;&#xD0C0; (IKK2), &#xB2C8; &#xBAA8;, BCL2 &#xAC19;&#xC740; 1 (BCL-X(L)), apoptosis &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 1 (cIAP2), apoptosis &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (XIAP)&#xC758; X &#xC5F0;&#xACB0; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; transcriptional &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB73B;&#xAE4A;&#xC740; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xACE0;survivin, Bcl-2, TIP60, &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC2E4; &#xC870; &#xC99D; telangiectasia (ATM), SHP 2&#xC640; sirtuin (SIRT1) &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB450;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBB38;&#xC81C;&#xB294; &#xC544; &#xD1A0; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xC900;&#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xB85C; transcriptional &#xC218;&#xC900;&#xC758; p73, TP53INP1, WNK2, lipocalin 2 &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; BCL-X(L), cIAP2, XIAP survivin&#xC758; NF kappaB &#xC911;&#xC7AC; &#xC720;&#xB3C4;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xD1B5;&#xD574; NB-4 &#xC140;&#xC5D0; apoptosis &#xC720;&#xB3C4; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, p73 transcriptional &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xC544; &#xD1A0; inductionary &#xD6A8;&#xACFC; (p65 &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;) IKK2, ATM&#xACFC; &#xB2C8; &#xBAA8;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC544;&#xC11C;&#xC758; transcriptional &#xBC29;&#xD574; &#xD1B5;&#xD574; NF kappaB &#xBAA8;&#xB4C8; TIP60, mRNA &#xD45C;&#xD604; &#xAC10;&#xC18C; &#xD568;&#xAED8; &#xACBD;&#xB828; &#xD1B5;&#xD574; &#xC218;&#xB3C4; SHP 2&#xC640; SIRT1.

&#xC0BC;&#xC0B0;&#xD654; &#xBE44;&#xC18C; NB-4, p73 &#xD575; &#xC778;&#xC790; &#xCE74;&#xD30C; p73 &#xC804;&#xC0AC;&#xC758; &#xC800;&#xD574; B &#xC911;&#xC7AC; &#xBC0F; &#xC608;&#xBC29; XIAP, cIAP2, BCL XL survivin&#xC758; NF kappaB &#xC911;&#xC7AC; &#xC720;&#xB3C4; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574;&#xC758; &#xC5C5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xAE09;&#xC131; promyelocytic &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; apoptosis&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El prop&oacute;sito del presente estudio es evaluar los efectos de tri&oacute;xido de ars&eacute;nico (ATO) en las c&eacute;lulas de NB-4 de la leucemia promieloc&iacute;tica aguda humana. Microcultivo tetrazolio, bromodeoxiuridina (BrdU) celular ensayo de proliferaci&oacute;n, ensayo de actividad de caspasa 3, medici&oacute;n de fosforilaci&oacute;n basadas en c&eacute;lulas del factor nuclear kappa B (NF-kappaB) mediante ELISA y RT-PCR en tiempo real fueron empleados para evaluar los efectos de la ATO en actividad metab&oacute;lica, la s&iacute;ntesis de ADN, la inducci&oacute;n de muerte celular programada y la activaci&oacute;n de NF-kappaB. Los efectos supresores de ATO en potencial metab&oacute;lico, la proliferaci&oacute;n celular y la activaci&oacute;n de NF-kappaB se asociaron con la inducci&oacute;n de apoptosis en c&eacute;lulas de NB-4. Adem&aacute;s, una mejora expresiva en los niveles de mRNA de p73, 1A de inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina (p21), tumor inducido por 53 nuclear prote&iacute;na 1 (TP53INP1), WNK lisina deficiente prote&iacute;na quinasa 2 (WNK2) y lipocalina 2, junto con una reducci&oacute;n significativa en los niveles transcripcionales de beta del inhibidor de NF-kappaB (IKK2), Nemo, BCL2 tipo 1 (BCL-X(L)), inhibidor de la apoptosis prote&iacute;na 1 (cIAP2), X-ligado inhibidor de apoptosis prote&iacute;na (XIAP), survivin, Bcl-2, TIP60, ataxia-telangiectasia (ATM), SHP-2 y Sirtuina (SIRT1) fueron observados. En conjunto, estas cuestiones se muestran por primera vez que ATO tratamiento podr&iacute;a trasmallo crecimiento celular y la proliferaci&oacute;n as&iacute; como induce apoptosis en c&eacute;lulas de NB-4 a trav&eacute;s de la inducci&oacute;n de nivel transcripcional de p73, TP53INP1, WNK2, lipocalina 2, as&iacute; como supresi&oacute;n de NF-kappaB-mediada por la inducci&oacute;n de BCL-X(L), cIAP2, XIAP y survivin. Adem&aacute;s, los efectos inductionary de la ATO en el est&iacute;mulo transcripcional de p73 podr&iacute;an ser a trav&eacute;s de obstaculizar el m&oacute;dulo NF-kappaB (supresi&oacute;n de fosforilaci&oacute;n p65) as&iacute; como obstaculizar transcripcional de IKK2, ATM y Nemo junto con la disminuci&oacute;n de la expresi&oacute;n del mRNA de TIP60, SHP-2 y la SIRT1.

Tri&oacute;xido de ars&eacute;nico induce apoptosis en NB-4, una l&iacute;nea de c&eacute;lulas de la leucemia promieloc&iacute;tica aguda, a trav&eacute;s de la para arriba-regulaci&oacute;n de p73 v&iacute;a supresi&oacute;n del factor nuclear kappa B mediada por la inhibici&oacute;n de la transcripci&oacute;n de p73 y prevenci&oacute;n de la inducci&oacute;n de NF-kappaB-mediada de XIAP, cIAP2, BCL-XL y survivin.

Recombinant adenoviruses are currently used for a variety of purposes, including in vitro gene transfer, in vivo vaccination, and gene therapy. Ability to infect many cell types, high efficiency in gene transfer, entering both dividing and non dividing cells, and growing to high titers make this virus a good choice for using in various experiments. In the present experiment, a recombinant adenovirus containing human IL-4 coding sequence was made. IL-4 has several characteristics that made it a good choice for using in cancer gene therapy, controlling inflammatory diseases, and studies on autoimmune diseases.

Production of recombinant adenovirus containing human interlukin-4 gene.

Determination of cell fate within the prosensory domain of the developing cochlear duct relies on the temporal and spatial regulation of the bHLH transcription factor Atoh1. Auditory hair cells and supporting cells arise in a wave of differentiation that patterns them into discrete rows mediated by Notch-dependent lateral inhibition. However, the mechanism responsible for selecting sensory cells from within the prosensory competence domain remains poorly understood. We show in mice that rather than being upregulated in rows of cells, Atoh1 is subject to transcriptional activation in groups of prosensory cells, and that highly conserved sites for Hes/Hey repressor binding in the Atoh1 promoter are needed to select the hair cell and supporting cell fate. During perinatal supporting cell transdifferentiation, which is a model of hair cell regeneration, we show that derepression is sufficient to induce Atoh1 expression, suggesting a mechanism for priming the 3' Atoh1 autoregulatory enhancer needed for hair cell expression.

Yassan Abdolazimi

Department of Medicine,
Division of Endocrinology,
Department of Medicine, Division of Endocrinology

Stanford University School of Medicine

A High-content In Vitro Pancreatic Islet β-cell Replication Discovery Platform

Yassan Abdolazimi

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Medicine,Division of Endocrinology,Department of Medicine, Division of Endocrinology

Stanford University School of Medicine

A High-content In Vitro Pancreatic Islet β-cell Replication Discovery Platform

Department of Medicine,
Division of Endocrinology,
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