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Genome-wide Determination of Mammalian Replication Timing by DNA Content Measurement

Replication of the genome occurs during S phase of the cell cycle in a highly regulated process that ensures the fidelity of DNA duplication. Each genomic ...

Hebrew University of Jerusalem

To investigate the prevalence of autoimmune diseases in young patients (probands) with type 1 diabetes and their first-degree relatives, and to determine the spectrum of extrapancreatic manifestations in these subjects.

Extrapancreatic autoimmune manifestations in type 1 diabetes patients and their first-degree relatives: a multicenter study.

Two non-psychotropic cannabinoids, cannabidiol (CBD) and cannabidiol-dimethylheptyl (CBD-DMH), induced apoptosis in a human acute myeloid leukemia (AML) HL-60 cell line. Apoptosis was determined by staining with bisBenzimide and propidium iodide. A dose dependent increase of apoptosis was noted, reaching 61 and 43% with 8 microg/ml CBD and 15 microg/ml CBD-DMH, respectively, after a 24 h treatment. Prior exposure of the cells to gamma-irradiation (800 cGy) markedly enhanced apoptosis, reaching values of 93 and 95%, respectively. Human monocytes from normal individuals were resistant to either cannabinoids or gamma-irradiation. Caspase-3 activation was observed after the cannabinoid treatment, and may represent a mechanism for the apoptosis. Our data suggest a possible new approach to treatment of AML.

Gamma-irradiation enhances apoptosis induced by cannabidiol, a non-psychotropic cannabinoid, in cultured HL-60 myeloblastic leukemia cells.

&#x867D;&#x7136;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x663E;&#x793A;&#x4E86;&#x76AE;&#x80A4;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE; (Dc)&#xFF0C;&#x4EE5;&#x76F4;&#x63A5; Ag CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x540E;&#xFF0C;&#x5411;&#x4E0E; lentivectors &#x76AE;&#x5185;&#x6CE8;&#x5C04;&#x514D;&#x75AB;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x76AE;&#x80A4;&#x76F4;&#x6D41;&#x5B50;&#x96C6;&#x7684;&#x8D21;&#x732E;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; langerin &#x767D;&#x5589;&#x6BD2;&#x7D20;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x8BE5;&#x6D88;&#x878D;&#x6717;&#x683C;&#x6C49;&#x65AF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; langerin &#x8868;&#x793A;&#x79EF;&#x6781;&#x771F;&#x76AE; DCs (Ln(+)dDCs) &#x6CA1;&#x6709;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5E72;&#x9884;&#x7684; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x3002;&#x7B26;&#x5408;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x6717;&#x683C;&#x6C49;&#x65AF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; Ln (+) dDCs &#x4E0D;&#x59A8;&#x788D;&#x6F14;&#x793A;&#x6587;&#x7A3F;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6D3E;&#x751F; Ag &#x7684; DCs &#x4F53;&#x5916;&#x76AE;&#x80A4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8868;&#x660E;&#x53EA;&#x6709;&#x80FD;&#x591F;&#x63D0;&#x51FA; Ag dDCs &#x548C; dDCs Ln (+)&#xFF0C;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;dDCs &#x8FC1;&#x79FB;&#x5230;&#x5F15;&#x6D41;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7ED3;&#x7684;&#x6570;&#x76EE;&#x6BD4; Ln (+) dDCs 6-fold &#x9AD8;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x76F4;&#x6D41;&#x8FC1;&#x79FB;&#x671F;&#x95F4;&#x5BF9; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x6CE8;&#x5C04;&#x90E8;&#x4F4D;&#x94F6;&#x8868;&#x8FBE;&#x5E76;&#x53D7;&#x5230;&#x591A;&#x6B21;&#x514D;&#x75AB;&#x540E;&#x6458;&#x9664;&#x6CE8;&#x5165;&#x7684;&#x76AE;&#x80A4;&#x64CD;&#x7EB5; DC &#x8FC1;&#x79FB;&#x3002;&#x4F4E;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x94F6;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E86;&#x770B; 1 wk &#x540E;&#x514D;&#x75AB;&#x63A5;&#x79CD; &#xFF1B;&#x5728;&#x4E00;&#x5468;&#x5185; 2&#xFF0C;&#x8FBE;&#x5230;&#x6700;&#x9AD8;&#x5CF0;&#xFF0C;&#x6309;&#x5468; 3 &#x901A;&#x8FC7;&#x7A7F;&#x5B54;&#x7D20;&#x4F9D;&#x8D56; fas &#x72EC;&#x7ACB;&#x673A;&#x5236;&#x5927;&#x5927;&#x6E05;&#x9664;&#x4E86;&#x3002;&#x63A5;&#x79CD;&#x75AB;&#x82D7;&#x540E;&#x5220;&#x9664;&#x7F51;&#x7AD9; 3 &#x6216; 5 d &#x6CE8;&#x5C04;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; 10 d&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x51CF;&#x5C11; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; dDCs &#x540E;&#x76AE;&#x5185;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x63A5;&#x79CD;&#xFF0C;&#x662F;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981; Apc &#x548C;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5728;&#x6700;&#x521D; 10 d &#x671F;&#x95F4; postimmunization dDCs &#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x4F18;&#x5316;&#x7684; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x3002;

Lentivectors &#x63A5;&#x79CD;&#x540E;&#x7684; CD8 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5438;&#x76AE;&#x80A4;&#x6E90;&#x6027;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Although skin dendritic cells (DCs) have been shown to directly present Ag to CD8(+) T cells after intradermal immunization with lentivectors, the contribution of the different skin DC subsets to this process remains unclear. Using langerin-diphtheria toxin receptor transgenic mice we demonstrated that ablation of langerhans cells and langerin-expressing positive dermal DCs (Ln(+)dDCs) did not interfere with the generation of CD8(+) T cells by lentiviral vectors. Consistent with these findings, the absence of langerhans cells and Ln(+)dDCs did not hamper the presentation level of lentiviral-derived Ag by skin DCs in vitro. We further demonstrated that only dDCs and Ln(+)dDCs were capable of presenting Ag, however, the number of dDCs migrating to the draining lymph nodes was 6-fold higher than that of Ln(+)dDCs. To study how the duration of DC migration influences CD8(+) T cell responses, we analyzed the kinetics of Ag expression at the injection site and manipulated DC migration by excising the injected skin at various times after immunization. A low level of Ag expression was seen 1 wk after the immunization; peaked during week 2, and was considerably cleared by week 3 via a perforin-dependent fas-independent mechanism. Removing the injection site 3 or 5 d, but not 10 d, after the immunization, resulted in a reduced CD8(+) T cell response. These findings suggest that dDCs are the main APCs active after intradermal lentiviral-mediated immunization, and migration of dDCs in the initial 10-d period postimmunization is required for optimal CD8(+) T cell induction.

The role of skin-derived dendritic cells in CD8+ T cell priming following immunization with lentivectors.

Bien que les cellules dendritiques (DCs) de la peau montrent directement pr&eacute;senter Ag aux cellules T CD8 apr&egrave;s vaccination intradermique avec lentivecteurs, la contribution des sous-ensembles DC peau diff&eacute;rente &agrave; ce processus reste floue. &Agrave; l&#39;aide de souris transg&eacute;niques du r&eacute;cepteur toxine dipht&eacute;rique langerin nous avons d&eacute;montr&eacute; que l&#39;ablation des cellules de langerhans et exprimant langerin positives DCs par voie cutan&eacute;e (Ln(+)dDCs) n&#39;interf&eacute;raient pas avec la g&eacute;n&eacute;ration des cellules T CD8 de vecteurs LENTIVIRAUX. Conform&eacute;ment &agrave; ces conclusions, l&#39;absence de cellules de langerhans et Ln (+) DSAD n&#39;a pas g&ecirc;n&eacute; au niveau de la pr&eacute;sentation des Ag des g&egrave;nes d&eacute;riv&eacute;s de peau in vitro de DCs. De plus, nous avons d&eacute;montr&eacute; que seulement DSAD et DSAD Ln (+) &eacute;tait capables de pr&eacute;senter l&#39;Ag, le nombre de DSAD migrer vers les ganglions lymphatiques de drainage &eacute;tait cependant 6 fois sup&eacute;rieur &agrave; celui de DSAD Ln (+). Afin d&#39;&eacute;tudier comment la dur&eacute;e de migration DC influe sur les lymphocytes T CD8, nous avons analys&eacute; la cin&eacute;tique d&#39;expression Ag au point d&#39;injection et manipul&eacute; la migration DC en excisant la peau inject&eacute;e &agrave; des moments diff&eacute;rents apr&egrave;s la vaccination. Un faible niveau d&#39;expression de l&#39;Ag a &eacute;t&eacute; vu 1 sem apr&egrave;s la vaccination ; a atteint un sommet au cours de la semaine 2 et a &eacute;t&eacute; consid&eacute;rablement autoris&eacute; par semaine 3 via un m&eacute;canisme ind&eacute;pendant du SAF de perforine-d&eacute;pendante. Retirer l&#39;injection site 3 ou 5 d, mais pas 10 jours, apr&egrave;s la vaccination, a entra&icirc;n&eacute; une r&eacute;ponse r&eacute;duite des cellules T CD8. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que DSAD est les principaux TTB actifs apr&egrave;s la vaccination intradermique par l&#39;interm&eacute;diaire des g&egrave;nes, et migration de DSAD dans les s&eacute;rologies p&eacute;riode initiale de 10-d est n&eacute;cessaire pour l&#39;induction de cellules T CD8 optimale.

Le r&ocirc;le des cellules dendritiques d&eacute;riv&eacute;es peau en amor&ccedil;age de cellules T CD8 + apr&egrave;s vaccination par lentivecteurs.

Obwohl direkt Ag CD8(+) T-Zellen pr&auml;sentieren nach Intradermaler Immunisierung mit Lentivectors Haut dendritische Zellen (DCs) nachgewiesen wurde, bleibt der Beitrag der verschiedenen Haut DC Teilmengen zu diesem Prozess unklar. Langerin-Diphtherie-Toxin Rezeptor transgene M&auml;use verwenden wir bewiesen die Ablation der Langerhans-Zellen und Langerin-Ausdruck positive dermal DCs (Ln(+)dDCs) nicht st&ouml;ren die Generation der CD8(+) T-Zellen durch Lentiviralen Vektoren. Mit diesen Ergebnissen das Fehlen von Langerhans-Zellen und Ln (+) DCS nicht der Pr&auml;sentation-Spiegel des Lentiviralen abgeleitete Ag von Haut DCs in-vitro-behindern. Wir gezeigt weiter, dass nur DCS und DCS Ln (+) pr&auml;sentieren Ag in der Lage waren, jedoch die Anzahl der DCS Migration zu Drainierende Lymphknoten 6-fold h&ouml;her als die der Ln (+) Transceiver. Um zu untersuchen, wie die Dauer der DC-Migration CD8(+) T Zelle Antworten beeinflusst, wir analysiert die Kinetik der Ag Ausdruck an der Injektionsstelle und manipuliert DC Migration gelenkten injizierte Haut zu verschiedenen Zeitpunkten nach der Immunisierung. Eine niedrige Ag Ausdruck war gesehen 1 Woche nach der Immunisierung; ihren H&ouml;hepunkt w&auml;hrend der Woche 2, und wurde wesentlich von Woche 3 &uuml;ber einen Perforin-abh&auml;ngige Fas-unabh&auml;ngigen Mechanismus deaktiviert. Entfernen der Injektion Standort 3 oder 5 d, aber nicht 10 d, nach der Immunisierung, f&uuml;hrte zu einer reduzierten CD8(+) T Zelle Antwort. Diese Forschungsergebnisse legen nahe, dass Transceiver die wichtigsten APCs aktiv nach Intradermaler Lentivirale-vermittelte Immunisierung sind und Migration von DCS in der ersten Periode 10-d-akute erforderlich f&uuml;r optimale CD8(+) T-Zelle-Induktion ist.

Die Rolle des Haut-abgeleitete dendritische Zellen in CD8 + T-Zelle-Grundierung nach Immunisierung mit Lentivectors.

Anche se le cellule dendritiche (DCs) hanno dimostrate di presentare direttamente Ag a cellule cellule T dopo immunizzazione intradermica con lentivectors, il contributo di sottoinsiemi di DC il pelle diversa per questo processo rimane poco chiaro. Utilizzando topi transgenici langerina-difterite tossina recettore abbiamo dimostrato che l&#39;ablazione delle cellule di langerhans e DCs dermico positivo esprimendo langerina (Ln(+)dDCs) non ha interferito con la generazione di cellule T cellule di vettori lentivirali. Coerentemente con questi risultati, l&#39;assenza di cellule di langerhans e Ln (+) dDCs non ostacolare il livello di presentazione dell&#39;Ag lentivirali derivato dalla pelle DCs in vitro. Abbiamo ulteriormente dimostrato che solo dDCs e dDCs Ln (+) sono stati in grado di presentare Ag, tuttavia, il numero di migrazione verso i linfonodi drenanti dDCs era 6-fold superiore a quello di Ln (+) dDCs. Per studiare come la durata della migrazione DC influenza le risposte delle cellule T cellule, abbiamo analizzato la cinetica dell&#39;espressione di Ag al sito di iniezione e manipolato migrazione DC da asportare la pelle iniettata in vari momenti dopo l&#39;immunizzazione. Un basso livello di espressione di Ag &egrave; stato visto a 1 settimana dopo l&#39;immunizzazione; ha raggiunto un picco durante la settimana 2 e notevolmente &egrave; stato cancellato dalla settimana 3 tramite un meccanismo indipendente dal fas perforina-dipendente. Rimuovendo l&#39;iniezione sito 3 o 5 d, ma non 10 d, dopo l&#39;immunizzazione, ha provocato una ridotta risposta delle cellule T cellule. Questi risultati suggeriscono che dDCs sono il principale APC attivo dopo immunizzazione intradermica lentivirali-mediata, e migrazione di dDCs nel postimmunization periodo di 10-d iniziale &egrave; necessaria per l&#39;induzione di cellule T cellule ottimale.

Il ruolo delle cellule dendritiche derivate da pelle di adescamento delle cellule CD8 + T dopo immunizzazione con lentivectors.

&#x76F4;&#x63A5; lentivectors &#x76AE;&#x5185;&#x63A5;&#x7A2E;&#x5F8C;&#x306E; Ag &#x3092;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E; T &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x63D0;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x76AE;&#x819A;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE; (Dc) &#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x808C;&#x306E; DC &#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x8CA2;&#x732E;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Langerin &#x30B8;&#x30D5;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x6BD2;&#x7D20;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30E9;&#x30F3;&#x30B2;&#x30EB;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073; langerin &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x6B63;&#x306E;&#x771F;&#x76AE; Dc &#x306E;&#x5B9F;&#x8A3C; (Ln(+)dDCs) &#x59A8;&#x5BB3;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E; T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x3068;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6240;&#x898B;&#x306F;, &#x30E9;&#x30F3;&#x30B2;&#x30EB;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068; Ln (+) &#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x3068; Ag &#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x76AE;&#x819A; DCs in vitro &#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3055;&#x3089;&#x3068;&#x3001;Ln (+) &#x3068; Ag &#x5727;&#x899A;&#x306E;&#x307F;&#x3001;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30C9;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3; &#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7BC0;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3068;&#x6570; 6-fold Ln (+) &#x3068;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;DC &#x79FB;&#x884C;&#x671F;&#x9593;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E; T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;Ag &#x5F0F;&#x6CE8;&#x5C04;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x3001;&#x4E88;&#x9632;&#x63A5;&#x7A2E;&#x5F8C;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x56DE;&#x3067;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x76AE;&#x819A;&#x5207;&#x9664;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; DC &#x79FB;&#x884C;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Ag &#x5F0F;&#x306E;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x514D;&#x75AB;&#x5F8C;&#x898B; 1 wk &#x3060;&#x3063;&#x305F;;&#x9031; 2 &#x65E5;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x306B;&#x9054;&#x3057;&#x3001;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x9031; 3 &#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x578B; fas &#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x7D4C;&#x7531;&#x3067;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5C04;&#x51FA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; 3 &#x307E;&#x305F;&#x306F; 5 d &#x304C;&#x306A;&#x3044; 10 d&#x3001;&#x4E88;&#x9632;&#x63A5;&#x7A2E;&#x5F8C;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x5916;&#x3057;&#x3067;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E; T &#x7D30;&#x80DE;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; &#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; Apc &#x76AE;&#x5185;&#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5A92;&#x4ECB;&#x514D;&#x75AB;&#x5F8C;&#x3067;&#x3059;&#x3068;&#x521D;&#x671F; 10 d &#x671F;&#x9593; postimmunization &#x3067;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306F;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x306E;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E; T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x76AE;&#x819A;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE; lentivectors &#x3092;&#x63A5;&#x7A2E; cd8 &#x967D;&#x6027; T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

&#xD53C;&#xBD80; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; (DCs) lentivectors&#xC640; &#xD53C;&#xBD80; &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885; &#xD6C4; Ag CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC;&#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD53C;&#xBD80; DC &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC758; &#xAE30;&#xC5EC; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Langerin-&#xB514;&#xD504;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xB3C5; &#xC18C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC950;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC785;&#xC99D; langerhans &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; langerin&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD53C;&#xBD80; Dc&#xC758; &#xADF8; &#xC808;&#xC81C; (Ln(+)dDCs) &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xBC29;&#xD574; &#xD558;&#xC9C0; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xC131; lentiviral &#xBCA1;&#xD130;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC;, langerhans &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; Ln (+)&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; dDCs &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xBC29;&#xD574; &#xD558;&#xC9C0; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; lentiviral Ag&#xC758; &#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158; &#xB808;&#xBCA8; &#xD53C;&#xBD80; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; Dcs&#xC5D0; &#xC758;&#xD574;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB354;&#xB9CC; dDCs &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; Ln (+) dDCs Ag &#xC81C;&#xC2DC; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD588;&#xB2E4;,, dDCs &#xBC30;&#xCD9C; &#xB9BC;&#xD504;&#xC808;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xD560; &#xC218;&#xB294; &#xC811;&#xC744; Ln (+) dDCs &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB192;&#xC740; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; DC &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xAE30;&#xAC04; CD8(+) T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5; &#xC601;&#xD5A5; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xC6B0;&#xB9AC; Ag &#xC2DD; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xBD80;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xACE0; &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885; &#xD6C4; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBC88; &#xC0BD;&#xC785; &#xB41C; &#xD53C;&#xBD80;&#xB97C; &#xC808; &#xAC1C; &#xD558; &#xC5EC; DC &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xC870;&#xC791;. &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; Ag &#xC2DD;&#xC740; &#xBCF8;&#xB41C; 1 &#xC8FC; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885;; &#xC8FC; 2 &#xB144; &#xB3D9;&#xC548; &#xB9CC;&#xC871; &#xD558; &#xACE0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; perforin &#xC885;&#xC18D; fas &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; 3 &#xC8FC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C0;&#xC6CC;&#xC84C;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5; &#xACB0;&#xACFC; &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885; &#xD6C4; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; 3 &#xB610;&#xB294; 5 d &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; 10d &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xAC70;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; dDCs &#xD53C;&#xBD80; lentiviral-&#xC911;&#xC7AC; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD6C4; &#xD65C;&#xC131; &#xC8FC;&#xC694; Apcs&#xB294; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; 10 d &#xAE30;&#xAC04; postimmunization&#xC5D0;&#xC11C; Ddcs&#xB294; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB3C4; &#xD544;&#xC694; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

CD8 + T &#xC138;&#xD3EC; &#xBABB;&#xC4F0;&#xAC8C; lentivectors&#xC640; &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885;&#xC744; &#xB2E4;&#xC74C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD53C;&#xBD80; &#xC720;&#xB798; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

Aunque la piel de c&eacute;lulas dendr&iacute;ticas (DCs) han demostrado presentar directamente Ag c&eacute;lulas CD8 T despu&eacute;s de la vacunaci&oacute;n intrad&eacute;rmica con lentivectors, la contribuci&oacute;n de los subconjuntos de DC de piel diferentes a este proceso sigue siendo confusa. Utilizando ratones transg&eacute;nicos de receptor de la toxina de la difteria langerin demostramos que la ablaci&oacute;n de las c&eacute;lulas de langerhans y DCs cut&aacute;neos positivos langerin-expresando (Ln(+)dDCs) no interfirieron con la generaci&oacute;n de c&eacute;lulas T CD8 por vectores lentivirales. En concordancia con estos resultados, la ausencia de c&eacute;lulas de langerhans y Ln (+) dDCs no obstaculizar el nivel de presentaci&oacute;n de Ag lentivirales derivados por piel DCs in vitro. Adem&aacute;s, demostramos que s&oacute;lo dDCs y dDCs Ln (+) eran capaces de presentar Ag, sin embargo, el n&uacute;mero de dDCs migran a los ganglios linf&aacute;ticos drenantes fue doblez mayor que la de dDCs Ln (+). Para estudiar c&oacute;mo influye en la duraci&oacute;n de la migraci&oacute;n de DC respuestas de c&eacute;lulas T CD8, analizamos la cin&eacute;tica de expresi&oacute;n de la Ag en el sitio de inyecci&oacute;n y hab&iacute;a manipulado migraci&oacute;n DC suprimiendo la piel inyectada en diferentes momentos despu&eacute;s de la inmunizaci&oacute;n. Un bajo nivel de expresi&oacute;n de la Ag fue visto 1 semana despu&eacute;s de la inmunizaci&oacute;n; alcanz&oacute; su punto m&aacute;ximo durante dos semanas y considerablemente fue despejado por semana 3 a trav&eacute;s de un mecanismo independiente del fas de perforin-dependiente. Quitar la inyecci&oacute;n sitio 3 o 5 d, pero no de 10 d, despu&eacute;s de la inmunizaci&oacute;n, result&oacute; en una disminuci&oacute;n en la respuesta celular T CD8. Estos resultados sugieren que dDCs son el principal activo de APC despu&eacute;s de vacunaci&oacute;n intrad&eacute;rmica lentivirales-mediada, y migraci&oacute;n de dDCs en el posinmunizaci&oacute;n per&iacute;odo inicial de 10-d es necesaria para la inducci&oacute;n de c&eacute;lulas T CD8 &oacute;ptima.

Dan Lehmann

The Core Research Facility,
IMRIC,
Faculty of Medicine,
The Core Research Facility, IMRIC, Faculty of Medicine

Hebrew University of Jerusalem

Genome-wide Determination of Mammalian Replication Timing by DNA Content Measurement

Dan Lehmann

The Core Research Facility,IMRIC,Faculty of Medicine,The Core Research Facility, IMRIC, Faculty of Medicine

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Genome-wide Determination of Mammalian Replication Timing by DNA Content Measurement

The Core Research Facility,
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The Core Research Facility, IMRIC, Faculty of Medicine