Yeast Colony Embedding Method

Patterning of  different cell types in embryos is a key mechanism in metazoan development. Communities of microorganisms, such as colonies and biofilms ...

University of Missouri - Kansas City

IME1&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x542F;&#x52A8;&#x7684;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;&#x88AB;&#x53D7; Cln3:Cdc28 &#x6FC0;&#x9176;&#xFF0C;&#x5176;&#x6FC0;&#x6D3B; G1-S &#x8FC7;&#x6E21;&#x548C; Snf1 &#x6FC0;&#x9176;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x9547;&#x538B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x67E5;&#x7684; Cln3:Cdc28p &#x538B;&#x6291; IME1 &#x548C; Cln3:Cdc28p &#x548C; Snf1p &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x5728;&#x672C;&#x89C4;&#x4F8B;&#x4E2D;&#x7684;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;

CLN3/SWI6/CLN2 &#x901A;&#x8DEF;&#x548C; SNF1 &#x91C7;&#x53D6;&#x884C;&#x52A8;&#x987A;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5728;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x5F00;&#x59CB;&#x3002;

IME1, which is required for the initiation of meiosis, is regulated by Cln3:Cdc28 kinase, which activates the G1-to-S transition, and Snf1 kinase, which mediates glucose repression. Here we examine the pathway by which Cln3:Cdc28p represses IME1 and the relationship between Cln3:Cdc28p and Snf1p in this regulation.

The CLN3/SWI6/CLN2 pathway and SNF1 act sequentially to regulate meiotic initiation in Saccharomyces cerevisiae.

IME1, qui est n&#xE9;cessaire pour l&#x26;#39;initiation de la m&#xE9;iose, est r&#xE9;gie par CLN3: Cdc28 kinase, qui active le G1 &#xE0; S de transition, et SNF1 kinase, qui assure la m&#xE9;diation r&#xE9;pression par le glucose. Nous examinons ici la voie par laquelle CLN3: Cdc28p r&#xE9;prime IME1 et la relation entre CLN3: Cdc28p et Snf1p dans le pr&#xE9;sent r&#xE8;glement.

La voie CLN3/SWI6/CLN2 et SNF1 loi visant &#xE0; r&#xE9;glementer les s&#xE9;quentielle Initiation m&#xE9;iotique chez Saccharomyces cerevisiae

Der Weg CLN3/SWI6/CLN2 und SNF1 Akt sequenziell zu regulieren meiotischen Initiation in Saccharomyces cerevisiae.

IME1, che &egrave; necessaria per l&#39;avvio della meiosi, &egrave; regolata da Cln3:Cdc28 chinasi, che attiva la transizione G1-S e chinasi Snf1, che media la repressione di glucosio. Qui esaminiamo il percorso da cui Cln3:Cdc28p reprime IME1 e il rapporto tra Cln3:Cdc28p e Snf1p nel presente regolamento.

Il pathway CLN3/SWI6/CLN2 e SNF1 agiscono in sequenza per regolare iniziazione meiotica in Saccharomyces cerevisiae.

G1&#x304B;&#x3089;S&#x306B;&#x79FB;&#x884C;&#x3057;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;Snf1&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;Cdc28&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF1A;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;IME1&#x306F;&#x3001;Cln3&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5225;Cln3&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306E;Cdc28p&#x3068;Snf1p&#xFF1A;Cdc28p&#x306F;IME1&#x3068;Cln3&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

CLN3/SWI6/CLN2&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;Saccharomyces cerevisiae&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9806;&#x6B21;SNF1&#x6CD5;

Meiosis&#xC758; &#xAC1C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;, IME1 g 1-S &#xC804;&#xD658; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;, Cln3:Cdc28 &#xD0A4; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xC5B5;&#xC555;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; Snf1 &#xD0A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD1B5;&#xB85C;&#xB294; Cln3:Cdc28p &#xB204;&#xB974;&#xB294; IME1 &#xBC0F;&#xC774; &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; cln3:cdc28p&#xC640; Snf1p &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

CLN3/SWI6/CLN2 &#xD1B5;&#xB85C; SNF1 meiotic &#xAC1C;&#xC2DC; Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0; &#xADDC;&#xC81C;&#xB97C; &#xC21C;&#xCC28;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD589;&#xB3D9;.

IME1, que se requiere para la iniciaci&#xF3;n de la meiosis, est&#xE1; regulada por produce la CLN3: Cdc28 quinasa, que activa el G1 a S de transici&#xF3;n, y Snf1 quinasa, que media la represi&#xF3;n de glucosa. Aqu&#xED; examinamos la v&#xED;a por la que se produce la CLN3: Cdc28p reprime IME1 y la relaci&#xF3;n entre produce la CLN3: Cdc28p Snf1p y en este reglamento.

El Camino CLN3/SWI6/CLN2 y la Ley para Regular las SNF1 secuencial Iniciaci&#xF3;n mei&#xF3;tico en Saccharomyces cerevisiae

&#x5728;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x5468;&#x671F;&#x548C;&#x4EA7;&#x5B62;&#x662F;&#x4E92;&#x65A5;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x547D;&#x8FD0; &#xFF1B;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#xFF0C;&#x5B83;&#x523A;&#x6FC0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x5468;&#x671F;&#xFF0C;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x5F3A;&#x6548;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x4EA7;&#x5B62;&#x3002;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6; &#xFF08;0.5%&#xFF09; &#x81F3;&#x4EA7;&#x5B62;&#x4E2D;&#x7B49;&#x4E2D;&#x7B49;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x59A8;&#x788D;&#x4EA7;&#x5B62;&#xFF0C;IME1 &#x548C; IME2&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5BC6;&#x94A5;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5E76;&#x672A;&#x589E;&#x52A0; Sic1p&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x86CB;&#x767D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x6FC0;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x5728;&#x5757;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2; DNA &#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;Sic1p &#x6C34;&#x5E73;&#x548C; DNA &#x590D;&#x5236;&#x5BF9;&#x8840;&#x7CD6;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x6240;&#x9700; Grr1p&#xFF0C;SCF(Grr1p) &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;Sic1p &#x8D1F;&#x9762;&#x53D7; Ime2p &#x6FC0;&#x9176;&#x548C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x89C2;&#x5BDF;&#x8868;&#x660E;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x6291;&#x5236;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2; DNA &#x590D;&#x5236;&#x901A;&#x8FC7;&#x8D85;&#x4E34;&#x754C;&#x6D41;&#x4F53; (Grr1p)-&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x9500;&#x6BC1;&#x6B64;&#x6FC0;&#x9176;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#xFF0C;Ime2p &#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#xFF0C;&#x7834;&#x574F;&#x7A33;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x6B64;&#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x6240;&#x9700; Grr1p&#xFF0C;SCF(Grr1p)&#xFF0C;Cdc53p&#xFF0C;&#x548C;&#x8D85;&#x4E34;&#x754C;&#x6D41;&#x4F53; (Grr1p) &#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x5173;&#x8054;&#x7684; E2 &#x9176;&#xFF0C;Cdc34p&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#xFF0C;Ime2p &#x6CDB;&#x7D20;&#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#xFF0C;Ime2p &#x5FEB;&#x901F;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x4E0E;&#x6240;&#x9700; GRR1 Ime2p &#x5411;&#x6CDB;&#x7D20;&#x5171;&#x8F6D;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E09;&#x3001; &#x4E00;&#x79CD;&#x7A81;&#x53D8;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684; Ime2p (Ime2(DeltaPEST))&#xFF0C;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5047;&#x5B9A;&#x7684; Grr1p &#x4EA4;&#x4E92;&#x5E8F;&#x5217;&#x5DF2;&#x88AB;&#x5220;&#x9664;&#xFF0C;&#x662F;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; Ime2p &#x66F4;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;IME2(DeltaPEST) &#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7ED5;&#x5230;&#x7531; 0.5%&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2; DNA &#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x5757;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x5176;&#x5728; Ime2p &#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x4EA7;&#x5B62;&#x540E;&#x6765;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6; Grr1p&#x3002;

&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x6291;&#x5236;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2; DNA &#x590D;&#x5236;&#x901A;&#x8FC7; Ime2p &#x6FC0;&#x9176;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; SCFGrr1p &#x7684;&#x7834;&#x574F;&#x3002;

In the budding yeast Saccharomyces cerevisiae, the cell division cycle and sporulation are mutually exclusive cell fates; glucose, which stimulates the cell division cycle, is a potent inhibitor of sporulation. Addition of moderate concentrations of glucose (0.5%) to sporulation medium did not inhibit transcription of two key activators of sporulation, IME1 and IME2, but did increase levels of Sic1p, a cyclin-dependent kinase inhibitor, resulting in a block to meiotic DNA replication. The effects of glucose on Sic1p levels and DNA replication required Grr1p, a component of the SCF(Grr1p) ubiquitin ligase. Sic1p is negatively regulated by Ime2p kinase, and several observations indicate that glucose inhibits meiotic DNA replication through SCF(Grr1p)-mediated destruction of this kinase. First, Ime2p was destabilized in the presence of glucose, and this turnover required Grr1p, a second component of SCF(Grr1p), Cdc53p, and an SCF(Grr1p)-associated E2 enzyme, Cdc34p. Second, Ime2p-ubiquitin conjugates were detected under conditions of rapid Ime2p turnover, and conjugation of Ime2p to ubiquitin required GRR1. Third, a mutant form of Ime2p (Ime2(DeltaPEST)), in which a putative Grr1p-interacting sequence was deleted, was more stable than wild-type Ime2p. Finally, expression of the IME2(DeltaPEST) allele bypassed the block to meiotic DNA replication caused by 0.5% glucose. In addition, Grr1p is required for later events in sporulation independently of its role in Ime2p turnover.

Glucose inhibits meiotic DNA replication through SCFGrr1p-dependent destruction of Ime2p kinase.

Dans la levure Saccharomyces cerevisiae en herbe, le cycle de division cellulaire et la sporulation sont destin&#xE9;es cellulaires mutuellement exclusives; glucose, ce qui stimule le cycle de division cellulaire, est un puissant inhibiteur de la sporulation. Ajout de concentrations mod&#xE9;r&#xE9;es de glucose (0,5%) &#xE0; milieu de sporulation n&#x26;#39;a pas inhiber la transcription de deux activateurs cl&#xE9;s de la sporulation, IME1 et IME2, mais n&#x26;#39;a augmenter les niveaux de Sic1p, un inhibiteur de kinases cycline-d&#xE9;pendantes, ce qui entra&#xEE;ne dans un bloc de r&#xE9;plication de l&#x26;#39;ADN m&#xE9;iotique . Les effets du glucose sur les niveaux de Sic1p et r&#xE9;plication de l&#x26;#39;ADN n&#xE9;cessaire Grr1p, une composante de l&#x26;#39;EFC (Grr1p) ubiquitine ligase. Sic1p est r&#xE9;gul&#xE9;e n&#xE9;gativement par la kinase Ime2p, et plusieurs observations indiquent que le glucose inhibe la r&#xE9;plication d&#x26;#39;ADN m&#xE9;iotique par SCF (Grr1p) m&#xE9;di&#xE9;e par la destruction de cette kinase. Premi&#xE8;re, Ime2p &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;stabilis&#xE9;es en pr&#xE9;sence de glucose, et cette rotation n&#xE9;cessaire Grr1p, un second composant de SCF (Grr1p), Cdc53p, et une CSAH (Grr1p) associ&#xE9;e enzyme E2, Cdc34p. Deuxi&#xE8;mement, Ime2p-ubiquitine conjugu&#xE9;s ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;s dans des conditions de chiffre d&#x26;#39;affaires Ime2p rapide, et la conjugaison &#xE0; l&#x26;#39;ubiquitine de Ime2p GRR1 n&#xE9;cessaire. Troisi&#xE8;mement, une forme mutante de Ime2p (Ime2 (DeltaPEST)), dans lequel un pr&#xE9;sum&#xE9; Grr1p interagissant avec la s&#xE9;quence a &#xE9;t&#xE9; supprim&#xE9;e, &#xE9;tait plus stable que de type sauvage Ime2p. Enfin, l&#x26;#39;expression de la IME2 (DeltaPEST) all&#xE8;le court-circuit&#xE9; le bloc de r&#xE9;plication de l&#x26;#39;ADN m&#xE9;iotique caus&#xE9; par le glucose de 0,5%. En outre, Grr1p est n&#xE9;cessaire pour les &#xE9;v&#xE9;nements ult&#xE9;rieurs &#xE0; la sporulation, ind&#xE9;pendamment de son r&#xF4;le dans le chiffre d&#x26;#39;affaires Ime2p.

Glucose inhibe la r&#xE9;plication d&#x26;#39;ADN m&#xE9;iotique Gr&#xE2;ce SCFGrr1p-d&#xE9;pendante de la destruction Ime2p Kinase

Glukose hemmt meiotischen DNA-Replikation durch SCFGrr1p-abh&#xE4;ngige Zerst&#xF6;rung von Ime2p Kinase.

Il lievito gemmante Saccharomyces cerevisiae, il ciclo di divisione cellulare e la sporulazione sono fati escludono cella; glucosio, che stimola il ciclo di divisione cellulare, &egrave; un potente inibitore della sporulazione. Aggiunta di moderate concentrazioni di glucosio (0,5%) per mezzo di sporulazione non inibire la trascrizione di due attivatori chiavi di sporulazione, IME1 e IME2, ma ha fatto aumentare i livelli di Sic1p, un inibitore delle chinasi ciclina-dipendenti, risultante in un blocco di meiotic replicazione del DNA. Gli effetti del glucosio su livelli di Sic1p e la replicazione del DNA necessaria Grr1p, un componente della SCF(Grr1p) ubiquitina ligasi. Sic1p &egrave; regolato negativamente dalla chinasi Ime2p e diverse osservazioni indicano che glucosio inibisce la replicazione del DNA meiotic attraverso SCF (Grr1p)-mediata distruzione di questa chinasi. In primo luogo, Ime2p &egrave; stato destabilizzato in presenza di glucosio, e questo fatturato richiesto Grr1p, un secondo componente di SCF(Grr1p), Cdc53p e un SCF (Grr1p)-associato enzima E2, Cdc34p. In secondo luogo, Ime2p-ubiquitina coniugati sono stati rilevati in condizioni di rapida Ime2p fatturato e coniugazione di Ime2p di ubiquitin richiesto GRR1. Terzo, una forma mutante di Ime2p (Ime2(DeltaPEST)), in cui una sequenza di interazione Grr1p putativa &egrave; stata eliminata, era pi&ugrave; stabile del selvaggio-tipo Ime2p. Infine, espressione dell&#39;allele IME2(DeltaPEST) bypassato il blocco di meiotic replicazione del DNA causato da 0,5% di glucosio. Inoltre, Grr1p &egrave; richiesto per gli eventi successivi in sporulazione indipendentemente dal suo ruolo nel fatturato Ime2p.

Glucosio inibisce la replicazione del DNA meiotic attraverso la distruzione di SCFGrr1p-dipendente della chinasi di Ime2p.

&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;Saccharomyces cerevisiae&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x5468;&#x671F;&#x3068;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x76F8;&#x4E92;&#x306B;&#x6392;&#x4ED6;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x5468;&#x671F;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x57F9;&#x5730;&#x3078;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x9069;&#x5EA6;&#x306A;&#x6FC3;&#x5EA6;&#xFF08;0.5&#xFF05;&#xFF09;&#x306E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306F;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3001;IME1&#x3068;IME2&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;DNA&#x8907;&#x88FD;&#x306B;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;Sic1p&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3002; Sic1p&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3068;DNA&#x8907;&#x88FD;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;Grr1p&#x3001;SCF&#xFF08;Grr1p&#xFF09;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Sic1p&#x306F;&#x8CA0;Ime2p&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x304C;SCF&#xFF08;Grr1p&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x7834;&#x58CA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;DNA&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305A;&#x3001;Ime2p&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x58F2;&#x4E0A;&#x9AD8;&#x306F;Grr1p&#x3001;SCF&#xFF08;Grr1p&#xFF09;&#x3001;Cdc53p&#x3068;&#x3001;SCF&#xFF08;Grr1p&#xFF09;&#x95A2;&#x9023;E2&#x9175;&#x7D20;&#x3001;Cdc34p&#x306E;&#x79D2;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x306B;&#x3001;Ime2p&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E5;&#x30B2;&#x30FC;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306A;Ime2p&#x306E;&#x58F2;&#x4E0A;&#x9AD8;&#x3001;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;GRR1&#x3092;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;Ime2p&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E09;&#x306B;&#x3001;&#x63A8;&#x5B9A;Grr1p&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x304C;&#x524A;&#x9664;&#x3055;&#x308C;&#x305F;Ime2p&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x5F62;&#x306F;&#x3001;&#xFF08;Ime2&#xFF08;DeltaPEST&#xFF09;&#xFF09;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;Ime2p&#x3088;&#x308A;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;0.5&#xFF05;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;DNA&#x8907;&#x88FD;&#x306B;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D1;&#x30B9;IME2&#xFF08;DeltaPEST&#xFF09;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;Grr1p&#x306F;Ime2p&#x58F2;&#x4E0A;&#x9AD8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306F;Ime2p&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;SCFGrr1p&#x4F9D;&#x5B58;&#x7834;&#x58CA;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;DNA&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;

&#xC2E0;&#xC9C4; &#xD6A8; &#xBAA8; Saccharomyces cerevisiae, &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC8FC;&#xAE30; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131;&#xC740; &#xC0C1;&#xD638; &#xBC30;&#xD0C0;&#xC801;&#xC778; &#xC140; &#xC6B4;&#xBA85;&#xC744;; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;, &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC8FC;&#xAE30;&#xB97C; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131; &#xBCF4;&#xD1B5; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; (0.5%)&#xC758; &#xC801;&#xB2F9; &#xD55C; &#xB18D;&#xB3C4; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131;, IME1 &#xBC0F; IME2&#xC758; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC8FC;&#xC694; &#xD65C;&#xC131; &#xC81C; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; Sic1p, &#xF06C; &#xC885;&#xC18D; kinase &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xBE14;&#xB85D; meiotic DNA &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xC218;&#xCE58;&#xAC00; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. Sic1p &#xC218;&#xC900; &#xBC0F; DNA &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xB3C4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; Grr1p, SCF(Grr1p) &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9AC;&#xAC00;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xAC00; &#xD544;&#xC694;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Sic1p &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; Ime2p &#xD0A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD1B5;&#xC81C; &#xB418; &#xACE0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xAD00;&#xCC30; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; SCF (Grr1p)&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; meiotic DNA &#xBCF5;&#xC81C; &#xC5B5;&#xC81C;-&#xC911;&#xC7AC;&#xC774; &#xB2C8;&#xC758; &#xD30C;&#xAD34;. &#xCCAB;&#xC9F8;, &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;, &#xC874;&#xC7AC; ime2p&#xB294; &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xD68C;&#xC804;&#xC728; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; Grr1p, SCF(Grr1p), Cdc53p, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0;&#xB294; SCF (Grr1p)&#xC758; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;-&#xAD00;&#xB828;&#xB41C; e 2 &#xD6A8;&#xC18C;, Cdc34p. &#xB458;&#xC9F8;, Ime2p &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; conjugates &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; Ime2p &#xB9E4;&#xCD9C;&#xC758; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C; &#xACE0; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4;&#xC5D0; ime2p&#xC758; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; GRR1. 3, Ime2p&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD615;&#xD0DC; (Ime2(DeltaPEST)), &#xC0C1; Grr1p &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC0AD;&#xC81C; &#xB41C; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; Ime2p &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xC548;&#xC815;&#xC801; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, IME2(DeltaPEST) &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xBE14;&#xB85D; 0.5% &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; meiotic DNA &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xBB34;&#xC2DC;. &#xB610;&#xD55C;, grr1p&#xB294; Ime2p &#xB9E4;&#xCD9C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131; &#xC774;&#xD6C4;&#xC758; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; Ime2p &#xD0A4;&#xC758; SCFGrr1p &#xC885;&#xC18D; &#xD30C;&#xAD34;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; meiotic DNA &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;.

En la levadura de gemaci&#xF3;n Saccharomyces cerevisiae, el ciclo de divisi&#xF3;n celular y la esporulaci&#xF3;n son destino celular mutuamente exclusivos; glucosa, que estimula el ciclo de divisi&#xF3;n celular, es un potente inhibidor de la esporulaci&#xF3;n. La adici&#xF3;n de concentraciones moderadas de glucosa (0,5%) al medio de esporulaci&#xF3;n no inhibir la transcripci&#xF3;n de dos activadores clave de la esporulaci&#xF3;n, IME1 y IME2, pero aumentan los niveles de Sic1p, un inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina, que resulta en un bloque para la replicaci&#xF3;n del ADN mei&#xF3;tica . Los efectos de la glucosa sobre los niveles de Sic1p y la replicaci&#xF3;n del ADN requerido Grr1p, un componente de la SCF (Grr1p) ligasa de ubiquitina. Sic1p es regulada negativamente por la quinasa Ime2p, y varias observaciones indican que la glucosa inhibe la replicaci&#xF3;n del ADN a trav&#xE9;s mei&#xF3;tica SCF (Grr1p) mediada por la destrucci&#xF3;n de esta quinasa. En primer lugar, Ime2p se mantuvo inestable en la presencia de glucosa, y se requiere este volumen de negocios Grr1p, un segundo componente de SCF (Grr1p), Cdc53p, y un FEC (Grr1p) asociada a la enzima E2, Cdc34p. En segundo lugar, Ime2p-ubiquitina conjugados se detectan en las condiciones de volumen de negocios Ime2p r&#xE1;pida y conjugaci&#xF3;n de Ime2p a la ubiquitina GRR1 necesario. En tercer lugar, una forma mutante de Ime2p (Ime2 (DeltaPEST)), en el que un supuesto Grr1p que interact&#xFA;a con la secuencia se ha eliminado, fue m&#xE1;s estable que el de tipo salvaje Ime2p. Finalmente, la expresi&#xF3;n de la IME2 (DeltaPEST) alelo omite el bloque para la replicaci&#xF3;n del ADN mei&#xF3;tica causada por 0,5% de glucosa. Adem&#xE1;s, Grr1p se requiere para los acontecimientos posteriores en la esporulaci&#xF3;n, independientemente de su papel en el volumen de negocios Ime2p.

La glucosa inhibe la replicaci&#xF3;n del ADN mei&#xF3;tico trav&#xE9;s SCFGrr1p dependiente de la destrucci&#xF3;n de Ime2p quinasa

&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; (&#x4FDD;&#x969C;) &#x8BF1;&#x53D8;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x4E09;&#x6761;&#x652F;&#x7EBF;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4FDD;&#x969C;&#x8BF1;&#x53D8;&#x7684;&#x6269;&#x5C55;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x751F;&#x6210;&#x7CBE;&#x786E;&#x7684;&#x63D2;&#x5165;&#x3001; &#x5220;&#x9664;&#x548C;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x66FF;&#x4EE3;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x840C;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x3001; &#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x6CA1;&#x6709;&#x9644;&#x52A0;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217; &#xFF08;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x6807;&#x8BB0;&#x57FA;&#x56E0;&#x6216;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF09; &#x90FD;&#x4FDD;&#x7559;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5B8C;&#x6210;&#x540E;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7A81;&#x53D8;&#x79F0;&#x4E3A;&#x7CBE;&#x786E;&#x3002;&#x8BE5;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x57FA;&#x4E8E;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x56E0;&#x4E3A; DNA &#x514B;&#x9686;&#x65E2;&#x957F;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x7684;&#x5408;&#x6210;&#x9700;&#x8981;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5220;&#x9664;&#x8113;&#x75B1;&#x3001; &#x63D2;&#x5165;&#x4E32;&#x8054;&#x4EB2;&#x548C;&#x7EAF;&#x5316; &#xFF08;&#x6C34;&#x9F99;&#x5934;&#xFF09; &#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53D6;&#x4EE3;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5C55;&#x793A;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x7597;&#x6548;&#x3002;

&#x4E24;&#x6B65;&#x6784;&#x9020;&#x672A;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x63D2;&#x5165;&#x3001; &#x5220;&#x9664;&#x548C;&#x9175;&#x6BCD;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x7684;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x66FF;&#x6362;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

We describe three extensions of the method of site-specific genomic (SSG) mutagenesis. These three extensions of SSG mutagenesis were used to generate precise insertion, deletion, and allele substitution mutations in the genome of the budding yeast, Saccharomyces cerevisiae. These mutations are termed precise because no attached sequences (e.g., marker genes or recombination sites) are retained once the method is complete. Because the method is PCR-based, neither DNA cloning nor synthesis of long oligonucleotides is required. We demonstrated the efficacy of these methods by deleting an ORF, inserting the tandem affinity purification (TAP) tag, and replacing a wild-type allele with a mutant allele.

Two-step method for constructing unmarked insertions, deletions and allele substitutions in the yeast genome.

Nous d&#xE9;crivons trois extensions de la m&#xE9;thode de sp&#xE9;cifique au site g&#xE9;nomique (SSG) la mutagen&#xE8;se. Ces trois extensions de mutagen&#xE8;se SSG ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s pour g&#xE9;n&#xE9;rer l&#x26;#39;insertion pr&#xE9;cise, la suppression et mutations de substitution des all&#xE8;les dans le g&#xE9;nome de la levure bourgeonnante, Saccharomyces cerevisiae. Ces mutations sont appel&#xE9;es pr&#xE9;cise, car aucune des s&#xE9;quences ci-jointes (par exemple, des g&#xE8;nes marqueurs ou des sites de recombinaison) sont conserv&#xE9;s une fois la m&#xE9;thode est termin&#xE9;e. Parce que la m&#xE9;thode est bas&#xE9;e sur la PCR, le clonage d&#x26;#39;ADN ni, ni la synth&#xE8;se d&#x26;#39;oligonucl&#xE9;otides longs est n&#xE9;cessaire. Nous avons d&#xE9;montr&#xE9; l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de ces m&#xE9;thodes par la suppression d&#x26;#39;un ORF, en ins&#xE9;rant la purification par affinit&#xE9; en tandem (TAP) tag, et le remplacement d&#x26;#39;un all&#xE8;le de type sauvage avec un all&#xE8;le mutant.

M&#xE9;thode en deux &#xE9;tapes de construction d&#x26;#39;insertions, suppressions non marqu&#xE9;es et substitutions all&#xE9;liques dans le g&#xE9;nome de la levure

Zwei-Schritt-Verfahren zur Konstruktion unmarkierten Insertionen, Deletionen und Substitutionen Allel in das Hefegenom.

Descriviamo tre estensioni del metodo di site-specific genomic mutagenesi (SSG). Questi tre estensioni di mutagenesi SSG sono state utilizzate per generare mutazioni di sostituzione precise allele, eliminazione e inserimento nel genoma del lievito germogliante, Saccharomyces cerevisiae. Queste mutazioni sono definite precisione perch&eacute; nessuna sequenza associata (ad esempio, i geni marcatori o siti di ricombinazione) vengono mantenuta una volta completato il metodo. Poich&eacute; il metodo &egrave; basato su PCR, clonazione del DNA n&eacute; sintesi di oligonucleotidi lunghi sono necessario. Abbiamo dimostrato l&#39;efficacia di questi metodi di eliminazione di un ORF, inserendo il tag di purificazione (TAP) tandem affinit&agrave; e sostituendo un allele wild-type con un allele mutante.

Metodo in due fasi per la costruzione di contrassegno inserimenti, eliminazioni e sostituzioni di allele nel genoma del lievito.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#xFF08;SSG&#xFF09;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x6CD5;&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; SSG&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x200B;&#x200B;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x3001;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED;&#x30DF;&#x30BB;&#x30B9;&#xB7;&#x30BB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30B7;&#x30A8;&#xFF08;Saccharomyces cerevisiae&#xFF09;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x633F;&#x5165;&#x3001;&#x524A;&#x9664;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7F6E;&#x63DB;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x304C;&#x5B8C;&#x4E86;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x306B;&#x306F;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#xFF08;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x90E8;&#x4F4D;&#xFF09;&#x304C;&#x4FDD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x7CBE;&#x5BC6;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;PCR&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x9577;&#x3044;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;DNA&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3082;&#x5408;&#x6210;&#x3082;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;ORF&#x3092;&#x524A;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x30FC;&#x7CBE;&#x88FD;&#xFF08;TAP&#xFF09;&#x30BF;&#x30B0;&#x3092;&#x633F;&#x5165;&#x3057;&#x3001;&#x5909;&#x7570;&#x578B;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x9175;&#x6BCD;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x4E2D;&#x306B;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x633F;&#x5165;&#x3001;&#x6B20;&#x5931;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x306E;&#x7F6E;&#x63DB;&#x69CB;&#x7BC9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E8C;&#x6BB5;&#x968E;&#x65B9;&#x5F0F;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xBCC4; &#xAC8C;&#xB188; (SSG) mutagenesis &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xC138; &#xD655;&#xC7A5;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. SSG mutagenesis&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD655;&#xC7A5; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xD6A8; &#xBAA8;, Saccharomyces cerevisiae&#xC758; &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xC0BD;&#xC785;, &#xC0AD;&#xC81C;, &#xBC0F; &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB300;&#xCCB4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xAC00; &#xC644;&#xB8CC; &#xB418; &#xBA74; (&#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, &#xB9C8;&#xCEE4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB610;&#xB294; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;) &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xAC00; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC720;&#xC9C0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xB418; &#xB098;. PCR &#xAE30;&#xBC18; &#xBC29;&#xBC95; &#xC774;&#xBBC0;&#xB85C; DNA &#xBCF5;&#xC81C;&#xB3C4; &#xAE34; oligonucleotides&#xC758; &#xD569;&#xC131;&#xC774; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; ORF&#xB97C; &#xC0AD;&#xC81C; &#xD0E0;&#xB364; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC815;&#xD654; (TAP) &#xD0DC;&#xADF8;&#xB97C; &#xC0BD;&#xC785; &#xD558; &#xACE0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCCB4; &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xAD50;&#xCCB4; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xC99D;&#xBA85;.

&#xB2F5;&#xBCC0;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xCDE8;&#xC18C; &#xC0BD;&#xC785;, &#xC0AD;&#xC81C; &#xBC0F; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xB300;&#xCCB4; &#xAC74;&#xC124;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; 2 &#xB2E8;&#xACC4; &#xBC29;&#xBC95;.

Se describen tres extensiones del m&#xE9;todo de sitio espec&#xED;fico del genoma (SSG) mutag&#xE9;nesis. Estos tres extensiones de mutag&#xE9;nesis SSG fueron utilizados para generar la inserci&#xF3;n precisa, supresi&#xF3;n, y las mutaciones de sustituci&#xF3;n de alelos en el genoma de la levadura de gemaci&#xF3;n, Saccharomyces cerevisiae. Estas mutaciones se denominan precisa porque no hay secuencias adjuntos (por ejemplo, genes marcadores o sitios de recombinaci&#xF3;n) se conservan una vez que el m&#xE9;todo es completa. Debido a que el m&#xE9;todo es basado en la PCR, ni la clonaci&#xF3;n de ADN ni s&#xED;ntesis de oligonucle&#xF3;tidos largos se requiere. Hemos demostrado la eficacia de estos m&#xE9;todos mediante la supresi&#xF3;n de un ORF, la inserci&#xF3;n de la purificaci&#xF3;n por afinidad en t&#xE1;ndem (TAP) de la etiqueta, y la sustituci&#xF3;n de un alelo de tipo salvaje con un alelo mutante.

M&#xE9;todo de dos pasos para la construcci&#xF3;n de inserciones sin marcar, supresiones y sustituciones de alelos en el genoma de la levadura

&#x51E0;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x5373; Snf3p &#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x548C; Rgt1p &#x548C; Mth1p &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x88AB;&#x8BC1;&#x660E;&#x4E3A;&#x7CD6;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4EA7;&#x5B62;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x6709;&#x8C03;&#x8282;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x542F;&#x52A8;&#x3001; Ime1p &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C; Ime2p &#x6FC0;&#x9176;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x76D1;&#x7BA1;&#x8005;&#x7684;&#x8C08;&#x8BDD;&#x5185;&#x5BB9;&#x6C34;&#x5E73;&#x4F5C;&#x7528;&#x5C0F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728;&#x89C4;&#x7BA1; Ime2p &#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;Rgt1p &#x53C2;&#x4E0E;&#x4E86;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x7684;&#x5B62;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x6291;&#x5236; Ime2p &#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x53EF;&#x89C4;&#x7BA1;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2; RGT1 &#x4F9D;&#x8D56;&#x548C;&#x72EC;&#x7ACB; RGT1 &#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;

&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x8C03;&#x8282;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x5728;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684;&#x90E8;&#x5206;&#x901A;&#x8FC7;&#x63A7;&#x5236; Ime2p &#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x6FC0;&#x9176;&#x7684;&#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x3002;

Several components of the glucose induction pathway, namely the Snf3p glucose sensor and the Rgt1p and Mth1p transcription factors, were shown to be involved in inhibition of sporulation by glucose. The glucose sensors had only a minor role in regulating transcript levels of the two key regulators of meiotic initiation, the Ime1p transcription factor and the Ime2p kinase, but a major role in regulating Ime2p stability. Interestingly, Rgt1p was involved in glucose inhibition of spore formation but not inhibition of Ime2p stability. Thus, the glucose induction pathway may regulate meiosis through both RGT1-dependent and RGT1-independent pathways.

Glucose induction pathway regulates meiosis in Saccharomyces cerevisiae in part by controlling turnover of Ime2p meiotic kinase.

Plusieurs composants de la voie de l&#x26;#39;induction de glucose, &#xE0; savoir le capteur de glucose Snf3p et les facteurs de transcription et de Rgt1p Mth1p, se sont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9;es &#xEA;tre impliqu&#xE9;s dans l&#x26;#39;inhibition de la sporulation par le glucose. Les capteurs de glucose n&#x26;#39;a eu qu&#x26;#39;un r&#xF4;le mineur dans la r&#xE9;gulation des niveaux de transcrits des deux r&#xE9;gulateurs cl&#xE9;s de l&#x26;#39;initiation &#xE0; la m&#xE9;iose, le facteur de transcription Ime1p et la kinase Ime2p, mais un r&#xF4;le majeur dans la r&#xE9;gulation de la stabilit&#xE9; Ime2p. Fait int&#xE9;ressant, Rgt1p a &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9; dans l&#x26;#39;inhibition de glucose de la formation de spores, mais pas l&#x26;#39;inhibition de la stabilit&#xE9; Ime2p. Ainsi, la voie d&#x26;#39;induction de glucose peut r&#xE9;glementer la m&#xE9;iose &#xE0; travers les deux voies RGT1-d&#xE9;pendants et RGT1 ind&#xE9;pendant.

Pathway induction glucose r&#xE9;gule la m&#xE9;iose chez Saccharomyces cerevisiae dans la partie en contr&#xF4;lant chiffre d&#x26;#39;affaires de Ime2p m&#xE9;iotique Kinase

Mehrere Komponenten von der Glukose Induktion Weg, n&auml;mlich der Snf3p Glukose-Sensor und der Rgt1p und Mth1p Transkriptionsfaktoren, wurden gezeigt, von Glukose in der Hemmung der Sporenbildung einbezogen werden. Die Glukose-Sensoren hatten nur eine untergeordnete Rolle bei der Regulierung der Abschrift Ebenen der zwei wichtigsten Regulatoren der meiotischen Einleitung, den Transkriptionsfaktor Ime1p und die Ime2p-Kinase, aber eine wichtige Rolle bei der Regulierung der Ime2p Stabilit&auml;t. Interessanterweise war Rgt1p Glukose Hemmung der Spore-Formation aber nicht Hemmung der Ime2p Stabilit&auml;t beteiligt. Somit kann die Glukose-Induktion-Pathway Meiose durch RGT1-abh&auml;ngige und RGT1-unabh&auml;ngige Wege Regeln.

Glukose-Induktion-Signalweg reguliert Meiose in Saccharomyces Cerevisiae teilweise durch die Kontrolle der Umsatz der meiotischen Ime2p-Kinase.

Diversi componenti del pathway di induzione glucosio, cio&egrave; il sensore del glucosio Snf3p e i fattori di trascrizione Rgt1p e Mth1p, hanno dimostrati di essere coinvolti nell&#39;inibizione della sporulazione di glucosio. I sensori di glucosio avevano solo un ruolo minore nel regolare i livelli di trascrizione dei due regolatori chiavi di iniziazione meiotica, il fattore di trascrizione Ime1p e la chinasi Ime2p, ma un ruolo importante nella regolazione della stabilit&agrave; Ime2p. Interessante, Rgt1p fu coinvolto nella inibizione glucosio di formazione di spore, ma non l&#39;inibizione della stabilit&agrave; Ime2p. Cos&igrave;, il percorso di induzione di glucosio pu&ograve; disciplinare meiosi attraverso percorsi RGT1-indipendente e RGT1-dipendente.

Pathway di induzione di glucosio regola la meiosi in Saccharomyces cerevisiae in parte controllando il giro d&#39;affari di Ime2p meiotica chinasi.

&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x8A98;&#x5C0E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3001;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;Snf3p&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;Rgt1p&#x3068;Mth1p&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x958B;&#x59CB;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;Ime1p&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;Ime2p&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x304C;&#x3001;Ime2p&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x308F;&#x305A;&#x304B;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;Rgt1p&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;Ime2p&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x8A98;&#x5C0E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;RGT1&#x4F9D;&#x5B58;&#x3068;RGT1&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x8A98;&#x5C0E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;Ime2p&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x56DE;&#x8EE2;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;Saccharomyces cerevisiae&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;

&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;&#xC73C;&#xB85C; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC800;&#xD574;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xC720;&#xB3C4; &#xD1B5;&#xB85C;, &#xC989; Snf3p &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xC13C;&#xC11C;&#xC640; rgt1p&#xC640; Mth1p &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xC13C;&#xC11C; &#xC870;&#xC808; meiotic &#xAC1C;&#xC2DC;, Ime1p &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xC640; Ime2p kinase&#xC758; &#xB450; &#xC8FC;&#xC694; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xC758; &#xB300; &#xBCF8; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xC791;&#xC740; &#xC5ED;&#xD560; &#xC774;&#xC9C0;&#xB9CC; Ime2p &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, Rgt1p &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xD608;&#xB2F9; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; Ime2p &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xD558;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xC720;&#xB3C4; &#xD1B5;&#xB85C; meiosis RGT1 &#xC885;&#xC18D; &#xBC0F; RGT1 &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xACBD;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC870;&#xC808;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xC720;&#xB3C4; &#xD1B5;&#xB85C; Ime2p meiotic &#xD0A4;&#xC758; &#xD68C;&#xC804;&#xC728;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xC5EC; &#xC77C;&#xBD80; meiosis Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0;&#xC5D0; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8;.

Varios componentes de la v&#xED;a de la inducci&#xF3;n de la glucosa, es decir, el sensor de glucosa Snf3p y los factores de transcripci&#xF3;n y Rgt1p Mth1p, se mostr&#xF3; a estar involucrados en la inhibici&#xF3;n de la esporulaci&#xF3;n por la glucosa. Los sensores de glucosa tuvieron un papel menor en la regulaci&#xF3;n de los niveles de transcripci&#xF3;n de los dos reguladores clave de la iniciaci&#xF3;n mei&#xF3;tica, el factor de transcripci&#xF3;n Ime1p y la quinasa Ime2p, pero un papel importante en la regulaci&#xF3;n de la estabilidad Ime2p. Curiosamente, Rgt1p estaba implicado en la inhibici&#xF3;n de la glucosa de la formaci&#xF3;n de esporas, pero no la inhibici&#xF3;n de la estabilidad Ime2p. Por lo tanto, la v&#xED;a de la inducci&#xF3;n de la glucosa puede regular a trav&#xE9;s de la meiosis las dos v&#xED;as RGT1-dependientes y RGT1 independiente.

Camino de inducci&#xF3;n de glucosa regula la meiosis en Saccharomyces cerevisiae en la primera parte mediante el control de volumen de negocios de Ime2p quinasa mei&#xF3;tico

&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#x5229;&#x7528;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x5185;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x771F;&#x83CC;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x6709;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x793E;&#x533A;&#x5DF2;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x662F;&#x86EE;&#x8352;&#x4E4B;&#x5730;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x7684;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x5F62;&#x6210;&#x5C16;&#x9510;&#x5BF9;&#x7ACB;&#x7684; sporulating &#x548C; nonsporulating &#x7EC6;&#x80DE;&#x5C42;&#x3002;&#x4EA7;&#x5B62;&#x53D1;&#x8D77;&#x5728;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x7684;&#x5185;&#x653F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x5411;&#x4E0A;&#x6269;&#x5C55;&#x6B64;&#x533A;&#x57DF;&#x6210;&#x719F;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5BC6;&#x94A5;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x4EA7;&#x5B62;&#xFF0C;IME1 &#x548C; IME2&#xFF0C;&#x6700;&#x521D;&#x88AB;&#x8F6C;&#x5F55;&#x4E2D;&#x91CD;&#x53E0;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#xFF0C;&#x548C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x91CD;&#x53E0;&#x5230;&#x521D;&#x59CB;&#x4EA7;&#x5B62;&#x533A;&#x57DF;&#x76F8;&#x5BF9;&#x5E94;&#x3002;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x4EA7;&#x5B62;&#x683C;&#x5C40;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x5D4C;&#x5408;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x542B;&#x7684;&#x4E24;&#x682A;&#x6DF7;&#x5408;&#x6240;&#x793A;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x4FE1;&#x53F7;&#x662F;&#x78B1;&#x6027;&#x7684; ph &#x503C;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7; Rim101p/&#x78D0;&#x901A;&#x8DEF;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x3002;&#x589E;&#x52A0;&#x78B1;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684; Meiotic &#x902E;&#x6355;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x523A;&#x6FC0;&#x4E2D;&#x76F8;&#x90BB;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x65E9;&#x671F;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x800C;&#x51CF;&#x5C11;&#x78B1;&#x751F;&#x4EA7; (cit1Delta) &#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E0B;&#x964D;&#x6B64;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002;&#x52A0;&#x78B1;&#x5BF9;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x7684;&#x52A0;&#x901F;&#x4EA7;&#x5B62;&#xFF0C;&#x5BA4;&#x5185;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x6269;&#x5927;&#x800C;&#x706D;&#x6D3B; Rim101p &#x901A;&#x8DEF;&#x6291;&#x5236;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6269;&#x5F20;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;Rim101 &#x901A;&#x8DEF;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x9635;&#x5217;&#x901A;&#x8FC7;&#x54CD;&#x5E94; ph &#x503C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x518D;&#x52A0;&#x4E0A;&#x8425;&#x517B;&#x6E10;&#x53D8;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x53EF;&#x80FD;&#x5141;&#x8BB8;&#x9AD8;&#x6548;&#x5B62;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x5B62;&#x5B50;&#x6563;&#x5E03;&#x5728;&#x81EA;&#x7136;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x4E2D;&#x3002;

Rim101p/&#x78D0;&#x901A;&#x8DEF;&#x548C;&#x78B1;&#x6027; ph &#x503C;&#x8C03;&#x8282;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x3002;

Multicellular organisms utilize cell-to-cell signals to build patterns of cell types within embryos, but the ability of fungi to form organized communities has been largely unexplored. Here we report that colonies of the yeast Saccharomyces cerevisiae formed sharply divided layers of sporulating and nonsporulating cells. Sporulation initiated in the colony's interior, and this region expanded upward as the colony matured. Two key activators of sporulation, IME1 and IME2, were initially transcribed in overlapping regions of the colony, and this overlap corresponded to the initial sporulation region. The development of colony sporulation patterns depended on cell-to-cell signals, as demonstrated by chimeric colonies, which contain a mixture of two strains. One such signal is alkaline pH, mediated through the Rim101p/PacC pathway. Meiotic-arrest mutants that increased alkali production stimulated expression of an early meiotic gene in neighboring cells, whereas a mutant that decreased alkali production (cit1Delta) decreased this expression. Addition of alkali to colonies accelerated the expansion of the interior region of sporulation, whereas inactivation of the Rim101p pathway inhibited this expansion. Thus, the Rim101 pathway mediates colony patterning by responding to cell-to-cell pH signals. Cell-to-cell signals coupled with nutrient gradients may allow efficient spore formation and spore dispersal in natural environments.

The Rim101p/PacC pathway and alkaline pH regulate pattern formation in yeast colonies.

Les organismes multicellulaires utiliser la cellule &#xE0; cellule signaux pour construire les mod&#xE8;les de types de cellules dans les embryons, mais la capacit&#xE9; des champignons &#xE0; former des communaut&#xE9;s organis&#xE9;es a &#xE9;t&#xE9; en grande partie inexplor&#xE9;. Nous rapportons ici que les colonies de la levure Saccharomyces cerevisiae ont form&#xE9; des couches fortement divis&#xE9;es de la sporulation et non sporulant cellules. La sporulation a lanc&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur de la colonie, et cette r&#xE9;gion &#xE9;largie vers le haut comme la colonie m&#xFB;ri. Deux activateurs cl&#xE9;s de la sporulation, IME1 et IME2, ont d&#x26;#39;abord &#xE9;t&#xE9; transcrit dans les zones de chevauchement de la colonie, et ce chevauchement correspond &#xE0; la r&#xE9;gion sporulation initiale. Le d&#xE9;veloppement des modes de sporulation colonie d&#xE9;pendait de la cellule &#xE0; cellule des signaux, comme l&#x26;#39;a d&#xE9;montr&#xE9; par des colonies chim&#xE9;riques, qui contiennent un m&#xE9;lange de deux souches. Un tel signal est un pH alcalin, m&#xE9;di&#xE9;e par la voie Rim101p/PacC. M&#xE9;iotique-arr&#xEA;t mutants qui ont augment&#xE9; la production alcalin stimul&#xE9; l&#x26;#39;expression d&#x26;#39;un g&#xE8;ne pr&#xE9;coce m&#xE9;iotique dans les cellules voisines, alors qu&#x26;#39;un mutant diminution de la production alcalin (cit1Delta) a diminu&#xE9; de cette expression. Addition d&#x26;#39;alcali &#xE0; colonies acc&#xE9;l&#xE9;r&#xE9; l&#x26;#39;expansion de la zone int&#xE9;rieure de la sporulation, que l&#x26;#39;inactivation de la voie de Rim101p inhib&#xE9;e cette expansion. Ainsi, le motif Rim101 voie colonie m&#xE9;die en r&#xE9;pondant &#xE0; des signaux de pH de cellule &#xE0; cellule. Cell-&#xE0;-cellulaires signaux coupl&#xE9;s avec des gradients de nutriments peut permettre la formation de spores efficace et la dispersion des spores dans les milieux naturels.

La voie Rim101p/PacC et le pH alcalin R&#xE9;glementer Formation de Structures dans les colonies de levures

Vielzellige Organismen nutzen Zell-Zell-Signale Muster Zelltypen in Embryonen zu bauen, aber die F&auml;higkeit von Pilzen, organisierte Gemeinschaften zu bilden wurde weitgehend unerforscht. Hier berichten wir, dass die Kolonien von der Hefe Saccharomyces Cerevisiae stark geteilte Schichten sporenbildende und nonsporulating Zellen gebildet. Sporenbildung initiierte die Kolonie Interieur und dieser Region nach oben erweitert, als die Kolonie gereift. Zwei wichtigste Aktivatoren der Sporenbildung, IME1 und IME2, wurden zun&auml;chst in &uuml;berlappende Regionen der Kolonie &uuml;bertragen, und diese &Uuml;berschneidung entsprach der urspr&uuml;nglichen Sporenbildung-Region. Die Entwicklung der Kolonie Sporenbildung Muster hing von Zelle zu Zelle Signale, wie Chim&auml;ren Kolonien, die eine Mischung aus beiden Sorten enthalten. Ein solches Signal ist alkalisch pH, vermittelt durch die Rim101p/PacC-Pathway. Meiotic-Festnahme-Mutanten, die Alkali-Produktion erh&ouml;ht stimuliert Ausdruck einer fr&uuml;hen meiotischen Gens in benachbarten Zellen, w&auml;hrend eine Mutante, die Alkali-Produktion (cit1Delta) fiel dieser Ausdruck verringert. Zugabe von Alkali Kolonien beschleunigt den Ausbau der inneren Region der Sporenbildung, w&auml;hrend Inaktivierung des Rim101p Weges diese Expansion gehemmt. So vermittelt die Rim101-Pathway Kolonie Musterung durch die Reaktion auf Signale von Zelle zu Zelle pH-Wert. Zell-Zell-Signale gepaart mit N&auml;hrstoff Farbverl&auml;ufe k&ouml;nnen effiziente Spore-Formation und Spore Zerstreuung in nat&uuml;rlichen Umgebungen.

Die Rim101p/PacC Weg und alkalischen pH-Wert regulieren Musterbildung in Hefe-Kolonien.

Organismi pluricellulari utilizzano segnali cellula-cellula per costruire modelli di tipi cellulari all&#39;interno di embrioni, ma la capacit&agrave; dei funghi di formare comunit&agrave; organizzata &egrave; stata in gran parte inesplorata. Qui riportiamo che colonie del lievito Saccharomyces cerevisiae formarono nettamente divisi strati di cellule sporulanti e nonsporulating. Sporulazione avviato all&#39;interno della Colonia, e questa regione espansa verso l&#39;alto come la colonia maturato. Due attivatori chiavi di sporulazione, IME1 e IME2, furono inizialmente trascritti nelle regioni della colonia di sovrapposizione, e questa sovrapposizione corrispondeva alla regione iniziale sporulazione. Lo sviluppo di modelli di sporulazione Colonia dipendeva segnali cellula-cellula, come dimostrato dalle colonie chimerici, che contengono una miscela di due ceppi. Un tale segnale &egrave; pH alcalino, mediato attraverso il pathway Rim101p/PacC. Arresto meiotic mutanti che ha aumentato la produzione di alcali stimolarono espressione di un gene meiotic precoce in celle vicine, mentre un mutante che diminuita produzione di alcali (cit1Delta) sono diminuiti di questa espressione. Aggiunta di alcali per colonie accelerato l&#39;espansione dell&#39;area interna di sporulazione, considerando che l&#39;inattivazione del percorso Rim101p inibita questa espansione. Cos&igrave;, il percorso Rim101 media patterning Colonia rispondendo ai segnali cellula-cellula pH. Segnali cellula-cellula accoppiati con gradienti nutrizionali possono consentire spora efficiente formazione e dispersione di spore in ambienti naturali.

Il percorso Rim101p/PacC e pH alcalino regolare formazione di pattern nelle colonie del lievito.

&#x591A;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x5185;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x83CC;&#x985E;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x672A;&#x8E0F;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x9175;&#x6BCD;Saccharomyces cerevisiae&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x975E;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x6027;&#x306E;&#x4E21;&#x6975;&#x7AEF;&#x306B;&#x5206;&#x304B;&#x308C;&#x5C64;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x80DE;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x3067;&#x958B;&#x59CB;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x304C;&#x6210;&#x719F;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x3064;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x306F;&#x3001;&#x4E0A;&#x65B9;&#x306B;&#x62E1;&#x5927;&#x3002;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;IME1&#x3068;IME2&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x306E;&#x91CD;&#x8907;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x8EE2;&#x5199;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x91CD;&#x8907;&#x306F;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 2&#x83CC;&#x682A;&#x306E;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306E;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x304C;Rim101p/PacC&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x6027;&#x306E;pH&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#xFF08;cit1Delta&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2; - &#x902E;&#x6355;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3002; Rim101p&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x3078;&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x306E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x62E1;&#x5927;&#x3092;&#x52A0;&#x901F;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;pH&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;Rim101&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x6804;&#x990A;&#x52FE;&#x914D;&#x3068;&#x7D50;&#x5408;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306F;&#x3001;&#x81EA;&#x7136;&#x74B0;&#x5883;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x80DE;&#x5B50;&#x6563;&#x5E03;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Rim101p/PacC&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x6027;&#x306E;pH&#x306F;&#x3001;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;

&#xB2E4;&#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xC140; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xAD6C;&#xCD95; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC870;&#xC9C1;&#xB41C; &#xC0AC;&#xD68C;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xBC84;&#xC12F;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD0D0;&#xD5D8; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB204; &#xB8E9; Saccharomyces cerevisiae&#xC758; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; sporulating &#xBC0F; nonsporulating &#xC140;&#xC758; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB098;&#xB204;&#xC5B4; &#xCE35; &#xD615;&#xC131; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC758; &#xB0B4;&#xBD80;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC744; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xB85C; &#xC0C1;&#xD5A5; &#xD655;&#xC7A5; &#xC131;&#xC219;. &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131;, IME1 &#xBC0F; IME2&#xC758; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC8FC;&#xC694; &#xD65C;&#xC131; &#xC81C; &#xCC98;&#xC74C; &#xACB9;&#xCE58;&#xB294; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC758; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xD558;&#xAC8C; &#xD588;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0;&#xC774; &#xACB9;&#xCE58;&#xB294; &#xCD08;&#xAE30; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xB300;&#xC751;. &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131; &#xD328;&#xD134;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; chimeric &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xB450; &#xC885;&#xC790;&#xC758; &#xD63C;&#xD569;&#xBB3C;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xB300;&#xB85C; &#xC140;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD55C; &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; Rim101p/PacC &#xD1B5;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC131; pH &#xC774;&#xB2E4;. Meiotic &#xCCB4;&#xD3EC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC0DD;&#xC0B0; (cit1Delta)&#xC744; &#xAC10;&#xC18C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC774; &#xC2DD;&#xC740; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xC778;&#xC811; &#xC140;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; meiotic &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC744; &#xC790;&#xADF9;. &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; Rim101p &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xAC00;&#xC774; &#xD655;&#xC7A5;&#xC744; &#xC800;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131;, &#xB0B4;&#xBD80; &#xC601;&#xC5ED; &#xD655;&#xC7A5; &#xAC00;&#xC18D;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, Rim101 &#xD1B5;&#xB85C; &#xD734;&#xB300;-&#xD734;&#xB300; &#xC804;&#xD654; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xB97C; &#xC911;&#xC7AC;. &#xC140; &#xC2E0;&#xD638; &#xC601;&#xC591;&#xC18C; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8; &#xD568;&#xAED8; &#xC790;&#xC5F0; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xC790;&#xC758; &#xBD84;&#xC0B0;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Rim101p/PacC &#xD1B5;&#xB85C; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC131; pH &#xC870;&#xC808; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD328;&#xD134; &#xD615;&#xC131;.

Los organismos pluricelulares utilizan la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula las se&#xF1;ales para crear patrones de tipos de c&#xE9;lulas en embriones, pero la capacidad de los hongos para formar comunidades organizadas ha sido en gran parte inexplorado. Aqu&#xED; mostramos que las colonias de la levadura Saccharomyces cerevisiae formaron capas fuertemente divididas de esporulaci&#xF3;n y no esporuladas c&#xE9;lulas. La esporulaci&#xF3;n se inici&#xF3; en el interior de la colonia, y esta regi&#xF3;n se expandi&#xF3; hacia arriba, como la colonia madurado. Dos de los principales activadores de la esporulaci&#xF3;n, IME1 y IME2, fueron transcritos inicialmente en las regiones solapadas de la colonia, y esta coincidencia corresponde a la regi&#xF3;n de la esporulaci&#xF3;n inicial. El desarrollo de los patrones de esporulaci&#xF3;n colonia depend&#xED;a de se&#xF1;ales de c&#xE9;lula a c&#xE9;lula, como se demuestra por las colonias quim&#xE9;ricos, que contienen una mezcla de dos cepas. Una se&#xF1;al como es el pH alcalino, mediado a trav&#xE9;s de la v&#xED;a Rim101p/PacC. Detenci&#xF3;n mei&#xF3;tica-mutantes que el aumento de la producci&#xF3;n de &#xE1;lcali estimul&#xF3; la expresi&#xF3;n de un gen temprano mei&#xF3;tica en las c&#xE9;lulas vecinas, mientras que un mutante que la disminuci&#xF3;n de la producci&#xF3;n de &#xE1;lcali (cit1Delta) se redujo esta expresi&#xF3;n. La adici&#xF3;n de &#xE1;lcali a colonias se aceler&#xF3; la expansi&#xF3;n de la regi&#xF3;n interior de la esporulaci&#xF3;n, mientras que la inactivaci&#xF3;n de la v&#xED;a Rim101p inhibe esta expansi&#xF3;n. As&#xED;, la v&#xED;a de Rim101 patr&#xF3;n colonia media por responder a las se&#xF1;ales de pH de c&#xE9;lula a c&#xE9;lula. De la c&#xE9;lula a c&#xE9;lula, junto con las se&#xF1;ales de los gradientes de nutrientes puede permitir la formaci&#xF3;n de esporas eficiente y la dispersi&#xF3;n de esporas en ambientes naturales.

El Camino Rim101p/PacC y pH alcalino regular la formaci&#xF3;n de patrones en las colonias de levadura

&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F62;&#x6210;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5185;&#x771F;&#x83CC;&#x7684;&#x793E;&#x533A; &#xFF1B;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x7684;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x5F62;&#x6210;&#x4E24;&#x5927;&#x5E45;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x5C42; sporulating &#x7EC6;&#x80DE;&#x7531;&#x4E2D;&#x95F4;&#x5C42; unsporulated &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x9694;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x4EA7;&#x5B62;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4EC5;&#x5728;&#x5355;&#x4E2A;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x5E94;&#x53D8;&#x80CC;&#x666F; (W303) &#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8C03;&#x67E5;&#xFF0C;&#x5728;&#x672C;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x5176;&#x4ED6;&#x5E94;&#x53D8;&#x80CC;&#x666F;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5176;&#x4ED6;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x5E94;&#x53D8;&#x80CC;&#x666F; &#xFF08;sk1 &#x7EC4;&#x5408;&#x6210;&#x548C; Sigma1278b&#xFF09; &#x5728;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x5F62;&#x6001;&#x3001; &#x4FB5;&#x88AD;&#x6027;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x4EA7;&#x5B62;&#x6548;&#x7387;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E8E; W303 &#x4E0D;&#x8FC7;&#x4F5C;&#x4E3A; W303 &#x663E;&#x793A;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x82BD;&#x5B62;&#x5F62;&#x6210;&#x56FE;&#x6848;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E5F;&#x6709;&#x4EBA;&#x5728;&#x91CE;&#x751F;&#x682A;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E0E;&#x917F;&#x9152;&#x5438;&#x6C14;&#x65F6;&#x7684;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x3002;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x5F62;&#x6210;&#x5B62;&#x5B50;&#x5BF9;&#x78B3;&#x6E90;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x66F4;&#x5E7F;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x505A;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x9175;&#x6BCD;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x9175;&#x6BCD;&#x5206;&#x5C42;&#x4EA7;&#x5B62;&#x683C;&#x5C40;&#x957F;&#x5927;&#x5BF9;&#x918B;&#x9178;&#x6216;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x57F9;&#x517B;&#x57FA;&#x548C;&#x4E30;&#x5BCC;&#x6216;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x4ECB;&#x8D28;&#x4E0A;&#x3002;Sk1 &#x7EC4;&#x5408;&#x6210;&#x3001; Sigma1278b &#x548C;&#x91CE;&#x751F;&#x9175;&#x6BCD;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x5165;&#x4FB5;&#x743C;&#x8102;&#x8868;&#x9762;&#x3002;&#x8BE5;&#x5730;&#x533A;&#x7684;&#x5165;&#x4FB5;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5728;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x83CC;&#x682A;&#x548C;&#x5916;&#x89C2;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5404;&#x4E0D;&#x76F8;&#x540C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD9;&#x6B21;&#x5165;&#x4FB5;&#x603B;&#x662F;&#x4F34;&#x968F;&#x7740;&#x4EA7;&#x5B62;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4EA7;&#x5B62;&#x683C;&#x5C40;&#x662F;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#xFF0C;&#x4E00;&#x822C;&#x8D22;&#x4EA7;&#x548C;&#x4EA7;&#x5B62;&#x5728;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x53EF;&#x4EE5;&#x534F;&#x8C03;&#x4E0E;&#x4FB5;&#x88AD;&#x6027;&#x751F;&#x957F;&#x3002;

&#x4EA7;&#x5B62;&#x9635;&#x5217;&#x548C;&#x4FB5;&#x88AD;&#x6027;&#x751F;&#x957F;&#x5728;&#x91CE;&#x751F;&#x9A6F;&#x5316;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x3002;

Different cell types can form patterns within fungal communities; for example, colonies of Saccharomyces cerevisiae form two sharply defined layers of sporulating cells separated by an intervening layer of unsporulated cells. Because colony sporulation patterns have only been investigated in a single laboratory strain background (W303), in this report we examined these patterns in other strain backgrounds. Two other laboratory strain backgrounds (SK1 and Sigma1278b) that differ from W303 with respect to colony morphology, invasive growth, and sporulation efficiency nevertheless displayed the same colony sporulation pattern as W303. This pattern was also observed in colonies of wild isolates of S. cerevisiae and Saccharomyces paradoxus. The wild yeast colonies sporulated on a much wider range of carbon sources than did the lab yeast and displayed a similar layered sporulation pattern when grown on either acetate or glucose medium and on either rich or synthetic medium. SK1, Sigma1278b and wild yeast colonies invaded the agar surface. The region of invasion varied between strains with respect to the organization and appearance of cells, but this invasion was always accompanied by sporulation. Thus, sporulation patterns are a general property of S. cerevisiae, and sporulation in colonies can be coordinated with invasive growth.

Sporulation patterning and invasive growth in wild and domesticated yeast colonies.

Diff&#xE9;rents types cellulaires peuvent former des motifs au sein des communaut&#xE9;s fongiques, par exemple, les colonies de Saccharomyces cerevisiae forme deux couches nettement d&#xE9;finie de sporuler cellules s&#xE9;par&#xE9;es par une couche interm&#xE9;diaire de cellules sporul&#xE9;s. Parce que les mod&#xE8;les de sporulation colonie n&#x26;#39;ont &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9;s dans un contexte unique souche de laboratoire (W303), dans le pr&#xE9;sent rapport, nous avons examin&#xE9; ces mod&#xE8;les dans d&#x26;#39;autres milieux de contrainte. Deux autres milieux souche de laboratoire (SK1 et Sigma1278b) qui diff&#xE8;rent de W303 &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;gard de la morphologie des colonies, la croissance invasive et l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de sporulation n&#xE9;anmoins affich&#xE9; le mod&#xE8;le m&#xEA;me colonie sporulation comme W303. Ce mod&#xE8;le a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e dans les colonies des isolats sauvages de S. cerevisiae et Saccharomyces paradoxus. Les colonies de levures sauvages sporul&#xE9; sur un &#xE9;ventail beaucoup plus large de sources de carbone que ne la levure de laboratoire et affich&#xE9; une tendance similaire sporulation couches lorsqu&#x26;#39;elle est cultiv&#xE9;e sur ac&#xE9;tate ou autre support et en glucose soit un milieu riche ou synth&#xE9;tique. SK1, Sigma1278b et des colonies de levures sauvages ont envahi la surface de la g&#xE9;lose. La r&#xE9;gion de l&#x26;#39;invasion vari&#xE9; entre les souches &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;gard de l&#x26;#39;organisation et l&#x26;#39;apparence des cellules, mais cette invasion &#xE9;tait toujours accompagn&#xE9; de la sporulation. Ainsi, les modes de sporulation sont une propri&#xE9;t&#xE9; g&#xE9;n&#xE9;rale de S. cerevisiae, et la sporulation dans les colonies peuvent &#xEA;tre coordonn&#xE9;s avec la croissance invasive.

Mod&#xE9;lisation sporulation et la croissance invasive dans les colonies de levures sauvages et domestiques

Verschiedene Zelltypen k&ouml;nnen Muster innerhalb der pilzartigen Gemeinschaften zu bilden; beispielsweise bilden Kolonien von Saccharomyces Cerevisiae zwei scharf definierte Schichten sporenbildende Zellen getrennt durch eine dazwischen liegende Schicht unsporulated Zellen. Weil Kolonie Sporenbildung Muster nur in einem einzigen Labor-Stamm-Hintergrund (W303) untersucht haben, haben wir in diesem Bericht diese Muster in anderen Stamm-Hintergrund. Zwei andere Labor Belastung Hintergr&uuml;nde (SK1 und Sigma1278b), die in Bezug auf die Kolonie Morphologie, das invasive Wachstum und Sporenbildung Effizienz von W303 abweichen werden das gleichen Kolonie Sporenbildung Muster dennoch als W303 angezeigt. Dieses Muster wurde auch in Kolonien von wilden Isolaten von S. Cerevisiae und Saccharomyces Paradoxus beobachtet. Die wilde Hefe, die Kolonien auf eine viel breitere Palette von Kohlenstoffquellen zu sporulated, als die Lab-Hefe und eine &auml;hnliche angezeigt geschichtet Sporenbildung Muster wenn auf Acetat oder Glukose-Medium und entweder reich oder synthetische Mittel gewachsen. SK1, Sigma1278b und wilde Hefe-Kolonien drangen die Agar-Oberfl&auml;che. Die Region der Invasion schwankte zwischen Belastungen in Bezug auf die Organisation und die Darstellung von Zellen, aber diese Invasion war immer begleitet von Sporenbildung. So Sporenbildung-Muster sind eine allgemeine Eigenschaft von S. Cerevisiae, und Sporenbildung in Kolonien mit invasiven Wachstum abgestimmt werden kann.

Sporenbildung Musterung und das invasive Wachstum im wilden und domestizierten Hefe-Kolonien.

Diversi tipi di cellule possono formare modelli all&#39;interno delle Comunit&agrave; fungine; per esempio, colonie di Saccharomyces cerevisiae formano due strati nettamente definiti di cellule sporulanti separati da uno strato di cellule unsporulated intervenire. Perch&eacute; modelli sporulazione di Colonia sono stati indagati solo in uno sfondo di ceppo singolo laboratorio (W303), in questa relazione abbiamo esaminato questi modelli in altri sfondi di ceppo. Due altri laboratorio ceppo sfondi (SK1 e Sigma1278b) che differiscono da W303 rispetto alla morfologia della Colonia, crescita invasiva ed efficienza di sporulazione tuttavia visualizzato lo stesso modello di sporulazione Colonia come W303. Questo modello &egrave; stato osservato anche nelle colonie di selvaggi isolati di S. cerevisiae e Saccharomyces paradoxus. Il lievito selvaggio colonie sporulated su una gamma molto pi&ugrave; ampia di fonti di carbonio che ha fatto il lievito lab e visualizzato un simile a strati modello sporulazione Quando coltivate su supporto di acetato o di glucosio e su medio o ricco o sintetico. SK1, Sigma1278b e colonie di lieviti selvaggi hanno invaso la superficie dell&#39;agar. La regione di invasione variava tra ceppi per quanto riguarda l&#39;organizzazione e l&#39;aspetto delle cellule, ma questa invasione era sempre accompagnata da sporulazione. Cos&igrave;, modelli di sporulazione sono una propriet&agrave; generale di S. cerevisiae e sporulazione in colonie pu&ograve; essere coordinata con la crescita invasiva.

Patterning sporulazione e crescita invasiva nelle colonie di lieviti selvaggi e addomesticati.

&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x771F;&#x83CC;&#x306E;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x5185;&#x3067;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED;&#x30DF;&#x30BB;&#x30B9;&#xB7;&#x30BB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30B7;&#x30A8;&#xFF08;Saccharomyces cerevisiae&#xFF09;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;2&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306F;&#x6025;&#x6FC0;unsporulated&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4ECB;&#x5728;&#x5C64;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x5C64;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306E;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x5BA4;&#x682A;&#x306E;&#x80CC;&#x666F;&#xFF08;W303&#xFF09;&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x6B6A;&#x307F;&#x306E;&#x80CC;&#x666F;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x5F62;&#x614B;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;W303&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x4ED6;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x5BA4;&#x682A;&#x306E;&#x80CC;&#x666F;&#xFF08;SK1&#x3068;Sigma1278b&#xFF09;&#x3001;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684;&#x306A;&#x6210;&#x9577;&#x3001;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;W303&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306E;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;S.&#x30BB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30B7;&#x30A8;&#x3068;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED;&#x30DE;&#x30A4;&#x30BB;&#x30B9;&#xB7;&#x5947;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x83CC;&#x682A;&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30DC;&#x306E;&#x9175;&#x6BCD;&#x3092;&#x884C;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x9162;&#x9178;&#x5869;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x57F9;&#x5730;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3067;&#x3001;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B;&#x306E;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5408;&#x6210;&#x57F9;&#x5730;&#x4E0A;&#x3067;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3082;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x5C64;&#x72B6;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x70AD;&#x7D20;&#x6E90;&#x306E;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x5E83;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x80DE;&#x5B50;&#x3002; SK1&#x3001;Sigma1278b&#x3068;&#x91CE;&#x751F;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306F;&#x5BD2;&#x5929;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x4FB5;&#x5165;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4FB5;&#x7565;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3068;&#x5916;&#x89B3;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x7CFB;&#x7D71;&#x9593;&#x3067;&#x5909;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4FB5;&#x653B;&#x306F;&#x3001;&#x5E38;&#x306B;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4F34;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;S. cerevisiae&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x8CA1;&#x7523;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x5185;&#x306E;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x6D78;&#x6F64;&#x6027;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x91CE;&#x751F;&#x7A2E;&#x3068;&#x5BB6;&#x755C;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x3067;&#x6D78;&#x6F64;&#x6027;&#x5897;&#x6B96;

&#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615; &#xADE0; &#xC0AC;&#xD68C;; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xD615;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, Saccharomyces cerevisiae&#xC758; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; sporulating &#xC140; unsporulated &#xC140;&#xC758; &#xC911;&#xAC04; &#xACC4;&#xCE35;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xBD84; &#xB41C; &#xB450; &#xC120;&#xBA85; &#xD558; &#xAC8C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131; &#xD328;&#xD134; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; &#xBC30;&#xACBD; (W303)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC0AC;&#xB9CC; &#xC788;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;&#xC774; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; &#xBC30;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD328;&#xD134; &#xAC80;&#xC0AC;. &#xADF8;&#xB7FC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; &#xBC30;&#xACBD; (SK1 &#xBC0F; Sigma1278b) W303 &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;, &#xCE68;&#xB7B5; &#xC801; &#xC131;&#xC7A5;&#xACFC; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131; &#xD6A8;&#xC728;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD558;&#xC5EC; &#xB2E4;&#xB978; W303 &#xAC19;&#xC740; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131; &#xD328;&#xD134; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC774; &#xD328;&#xD134; &#xB610;&#xD55C; S. cerevisiae&#xC640; Saccharomyces paradoxus&#xC758; &#xC57C;&#xC0DD; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC758; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC18C; &#xB204; &#xB8E9; &#xD558; &#xACE0; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xB113;&#xC740; &#xBC94;&#xC704;&#xC758; &#xD0C4;&#xC18C; &#xC18C;&#xC2A4;&#xC5D0; sporulated &#xC57C;&#xC0DD; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131; &#xD328;&#xD134; &#xC131;&#xC7A5; &#xC544;&#xC138;&#xD14C;&#xC774;&#xD2B8; &#xB610;&#xB294; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB9E4;&#xCCB4;&#xC640; &#xBD80;&#xC790; &#xB610;&#xB294; &#xD569;&#xC131; &#xC911;&#xAC04; &#xACC4;&#xCE35;. SK1, Sigma1278b &#xBC0F; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xCE68;&#xB7B5; agar &#xD45C;&#xBA74;. &#xCE68;&#xB7B5;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xAE34;&#xC7A5;&#xACFC; &#xC140; &#xBAA8;&#xC591; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xD56D;&#xC0C1; &#xB3D9;&#xD589; &#xD588;&#xB2E4;&#xC774; &#xCE68;&#xACF5;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131; &#xD328;&#xD134;&#xC740; S. cerevisiae&#xC758; &#xC77C;&#xBC18; &#xC18D;&#xC131; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE68;&#xB7B5; &#xC801; &#xC131;&#xC7A5; &#xC870;&#xC815; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131; &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xC640; &#xC57C;&#xC0DD; &#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xAE38; &#xB4E4; &#xC5EC; &#xC9C4; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xCE68;&#xB7B5; &#xC801; &#xC131;&#xC7A5;.

Diferentes tipos de c&#xE9;lulas pueden formar patrones dentro de las comunidades de hongos, por ejemplo, las colonias de forma Saccharomyces cerevisiae dos capas bien definidas de esporulaci&#xF3;n c&#xE9;lulas separadas por una capa intermedia de c&#xE9;lulas no esporulados. Debido a que los patrones de la colonia esporulaci&#xF3;n s&#xF3;lo se han investigado en un fondo de laboratorio sola cepa (W303), en el presente informe se examinaron estos patrones en los fondos de otra cepa. Dos otros or&#xED;genes cepa de laboratorio (SK1 y Sigma1278b) que difieren de W303 con respecto a morfolog&#xED;a de las colonias, el crecimiento invasivo, y la eficiencia de esporulaci&#xF3;n, sin embargo muestra el patr&#xF3;n de colonia esporulaci&#xF3;n mismo W303. Este patr&#xF3;n tambi&#xE9;n se observ&#xF3; en las colonias de cepas silvestres de S. cerevisiae y Saccharomyces paradoxus. Las colonias de levaduras silvestres esporulados en una gama mucho m&#xE1;s amplia de fuentes de carbono que hizo la levadura de laboratorio y se muestra un patr&#xF3;n similar esporulaci&#xF3;n capas cuando se cultiva en cualquiera de acetato o glucosa del medio y en cualquier medio rico o sint&#xE9;tico. SK1, Sigma1278b y las colonias salvajes de levadura invadi&#xF3; la superficie del agar. La regi&#xF3;n de la invasi&#xF3;n vari&#xF3; entre cepas con respecto a la organizaci&#xF3;n y el aspecto de las c&#xE9;lulas, pero esta invasi&#xF3;n fue acompa&#xF1;ado siempre por la esporulaci&#xF3;n. Por lo tanto, los patrones de esporulaci&#xF3;n son una propiedad general de S. cerevisiae, y la esporulaci&#xF3;n en las colonias se pueden coordinar con el crecimiento invasivo.

El dibujo y la esporulaci&#xF3;n crecimiento invasivo de colonias de levaduras salvajes y dom&#xE9;sticos

&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x751F;&#x957F;&#x5728;&#x5851;&#x6599;&#x8868;&#x9762;&#x5F62;&#x6210;&#x6709;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A; minicolonies&#xFF0C;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x5706; &#xFF08;&#x9175;&#x6BCD;&#x6837;) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5305;&#x56F4;&#x7684;&#x4E1D;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x51FA;&#x82BD;) &#x94FE;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x3002;Minicolonies &#x6709;&#x5F88;&#x591A;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x5851;&#x6599;&#x8981;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x540C;&#x4E00;&#x8868;&#x9762;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x975E;&#x7ED3;&#x6784;&#x5316;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x793E;&#x533A;&#x3002;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x51FA;&#x82BD;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x53D1;&#x5C55;&#x6210;&#x94FE;&#x7684; asci&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x6784;&#x8868;&#x660E; pseudohyphal &#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x4EA7;&#x5B62; minicolonies &#x4E2D;&#x7684;&#x8FDE;&#x7EED;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x7B26;&#x5408;&#x8FD9;&#x4E00;&#x60F3;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5728;&#x523A;&#x6FC0; pseudohyphal &#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x751F;&#x957F;&#x7684; minicolonies &#x6240;&#x8F7D;&#x7684; asci &#x66F4;&#x9AD8;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;flo11&Delta; &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x7A97;&#x4F53;&#x51FA;&#x82BD;&#x5230;&#x5931;&#x8D25;&#xFF0C;&#x4EA7;&#x751F;&#x4E86;&#x6B63;&#x5E38;&#x4EA7;&#x5B62;&#x5728;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x800C;&#x662F;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684; minicolony &#x4EA7;&#x5B62;&#x3002;&#x5F53; minicolonies &#x88AB;&#x5206;&#x6563;&#x5728;&#x6C34;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7136;&#x540E;&#x83B7;&#x51C6;&#x4EE5;&#x89E3;&#x51B3;&#x5851;&#x6599;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x65F6;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6210;&#x975E;&#x5E38;&#x9AD8;&#x6548;&#x5730;&#x5B62;&#x5B50;&#x3002;&#x91C7;&#x53D6;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;minicolonies &#x5728;&#x82BD;&#x5B62;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x88AB;&#x523A;&#x6FC0;&#x4E86; pseudohyphal &#x5206;&#x5316;&#x56E0;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x51FA;&#x82BD;&#x5206;&#x6563;&#x4ECE;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x3002;

Flo11p &#x7C98;&#x9644;&#x7D20;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5851;&#x6599;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD; minicolonies &#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x5206;&#x5316;&#x3002;

Saccharomyces cerevisiae grown on plastic surfaces formed organized structures, termed minicolonies, that consisted of a core of round (yeast-like) cells surrounded by chains of filamentous cells (pseudohyphae). Minicolonies had a much higher affinity for plastic than unstructured yeast communities growing on the same surface. Pseudohyphae at the surface of these colonies developed further into chains of asci. These structures suggest that pseudohyphal differentiation and sporulation are sequential processes in minicolonies. Consistent with this idea, minicolonies grown under conditions that stimulated pseudohyphal differentiation contained higher frequencies of asci. Furthermore, a flo11Î” mutant, which fails to form pseudohyphae, yielded normal sporulation in cultures, but was defective for minicolony sporulation. When minicolonies were dispersed in water and cells were then allowed to settle on the plastic surface, these cells sporulated very efficiently. Taken together, our results suggest that sporulation in minicolonies is stimulated by pseudohyphal differentiation because these pseudohyphae are dispersed from the core of the colony.

Flo11p adhesin required for meiotic differentiation in Saccharomyces cerevisiae minicolonies grown on plastic surfaces.

Saccharomyces cerevisiae cultiv&#xE9;es sur des surfaces en plastique form&#xE9; des structures organis&#xE9;es, appel&#xE9;es minicolonies, qui se composait d&#x26;#39;un noyau de ronde (type levure) cellules entour&#xE9;es par des cha&#xEE;nes de cellules filamenteuses (pseudohyphes). Minicolonies eu une affinit&#xE9; beaucoup plus &#xE9;lev&#xE9;e pour le plastique que les communaut&#xE9;s de levure non structur&#xE9;es qui poussent sur la m&#xEA;me surface. Pseudohyphes &#xE0; la surface de ces colonies d&#xE9;velopp&#xE9;es dans les cha&#xEE;nes de asques. Ces structures sugg&#xE8;rent que la diff&#xE9;renciation et la sporulation pseudohyphal sont des processus s&#xE9;quentiels dans minicolonies. Conform&#xE9;ment &#xE0; cette id&#xE9;e, minicolonies cultiv&#xE9;es dans des conditions qui ont stimul&#xE9; la diff&#xE9;renciation pseudohyphal contenait des fr&#xE9;quences plus &#xE9;lev&#xE9;es de asques. En outre, un mutant flo11&#x394;, qui ne parvient pas &#xE0; former pseudohyphes, a abouti &#xE0; la sporulation normale dans les cultures, mais &#xE9;tait d&#xE9;fectueux pour la sporulation minicolony. Lorsque minicolonies ont &#xE9;t&#xE9; dispers&#xE9;es dans l&#x26;#39;eau et les cellules ont ensuite &#xE9;t&#xE9; autoris&#xE9;s &#xE0; s&#x26;#39;installer sur la surface en plastique, ces cellules sporul&#xE9; tr&#xE8;s efficace. Pris dans leur ensemble, nos r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que la sporulation chez minicolonies est stimul&#xE9;e par la diff&#xE9;renciation pseudohyphal parce que ces pseudo-myc&#xE9;liens sont dispers&#xE9;s &#xE0; partir du noyau de la colonie.

Flo11p Adhesin n&#xE9;cessaire &#xE0; la diff&#xE9;renciation m&#xE9;iotique dans Minicolonies Saccharomyces cerevisiae Cultiv&#xE9; sur des surfaces en plastique

Saccharomyces Cerevisiae auf Kunststoffoberfl&auml;chen angebaut gebildet organisierte Strukturen, genannt Minicolonies, die bestand aus einem runden (hefeartigen) Zellen umgeben von faserigen Zellen (Pseudohyphae). Minicolonies hatte eine viel h&ouml;here Affinit&auml;t f&uuml;r Kunststoff als unstrukturierte Hefe-Gemeinschaften, die auf der gleichen Fl&auml;che w&auml;chst. Pseudohyphae an der Oberfl&auml;che dieser Kolonien weiterentwickelt in Ketten von ASKI. Diese Strukturen schlagen vor, da&szlig; pseudohyphal Differenzierung und Sporenbildung sequentielle Prozesse in Minicolonies sind. In &Uuml;bereinstimmung mit dieser Idee, enthalten Minicolonies, die unter Bedingungen, die pseudohyphal Differenzierung gef&ouml;rdert gewachsen h&ouml;here Frequenzen des ASKI. Dar&uuml;ber hinaus eine flo11&Delta; Mutante, die in Form Pseudohyphae scheitert, ergab normale Sporenbildung in Kulturen, aber f&uuml;r Minicolony Sporenbildung defekt war. Als Minicolonies in Wasser dispergiert wurden und Zellen dann durften an der Kunststoffoberfl&auml;che zu begleichen, sporulated diese Zellen sehr effizient. Genommen wird zusammen, unsere Ergebnisse deuten darauf hin, dass Sporenbildung in Minicolonies durch pseudohyphal Differenzierung angeregt da diese Pseudohyphae aus dem Kern der Kolonie aufgel&ouml;st werden.

Flo11p Adhesin ben&ouml;tigt meiotischen Differenzierung in Saccharomyces Cerevisiae Minicolonies auf Kunststoffoberfl&auml;chen angebaut.

Saccharomyces cerevisiae coltivate su superfici plastiche forma strutture organizzate, chiamati minicolonies, che consisteva in un nucleo di turno (lievito-come) le cellule circondato da catene di cellule filamentose (pseudoife). Minicolonies aveva un&#39;affinit&agrave; molto maggiore per plastica di comunit&agrave; destrutturati lievito crescente sulla stessa superficie. Pseudoife sulla superficie di queste colonie svilupparono ulteriormente in catene di asci. Queste strutture suggeriscono che sporulazione e differenziazione pseudohyphal sono processi sequenziali in minicolonies. Coerentemente con questa idea, minicolonies coltivati in condizioni che ha stimolato la differenziazione pseudohyphal conteneva frequenze pi&ugrave; alte dell&#39;asci. Inoltre, un mutante di flo11&Delta;, che non riesce a pseudoife forma, ha reso normali sporulazione in culture, ma era difettoso per sporulazione minicolony. Quando minicolonies erano disperse in acqua e le cellule sono state poi permesso di insediarsi sulla superficie di plastica, queste cellule sporulated in modo molto efficiente. Presi insieme, che i nostri risultati suggeriscono che sporulazione in minicolonies &egrave; stimolata dalla differenziazione pseudohyphal perch&eacute; questi pseudoife sono dispersi dal nucleo della Colonia.

Flo11p adhesin necessaria differenziazione meiotica in Saccharomyces cerevisiae minicolonies coltivati su superfici in plastica.

&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x305F;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED;&#x30DF;&#x30BB;&#x30B9;&#xB7;&#x30BB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30B7;&#x30A8;&#xFF08;Saccharomyces cerevisiae&#xFF09;&#x3001;&#x7CF8;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;pseudohyphae&#xFF09;&#x306E;&#x9396;&#x306B;&#x56F2;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#xFF08;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6838;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B;&#x7DE8;&#x6210;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;minicolonies&#x3092;&#x7D50;&#x6210;&#x3002; Minicolonies&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x4E00;&#x9762;&#x4E0A;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x3066;&#x69CB;&#x9020;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x3067;Pseudohyphae&#x306F;&#x3001;ASCI&#x306E;&#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x507D;&#x83CC;&#x7CF8;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3068;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x304C;minicolonies&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EB;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8003;&#x3048;&#x65B9;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x507D;&#x83CC;&#x7CF8;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x305F;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x5897;&#x6B96;minicolonies&#x306F;&#x3001;ASCI&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;pseudohyphae&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x305F;flo11&#x394;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x3067;&#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;minicolony&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6B20;&#x9665;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; minicolonies&#x304C;&#x6C34;&#x306B;&#x5206;&#x6563;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x6B21;&#x3044;&#x3067;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x6C88;&#x964D;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x80DE;&#x5B50;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;pseudohyphae&#x306F;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x6563;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305F;&#x3081;minicolonies&#x3067;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x304C;&#x507D;&#x83CC;&#x7CF8;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x523A;&#x6FC0;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

Flo11p&#x30A2;&#x30C9;&#x30D8;&#x30B7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C1;&#x30C3;&#x30AF;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED;&#x30DE;&#x30A4;&#x30BB;&#x30B9;&#xB7;&#x30BB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30B7;&#x30A8;Minicolonies&#x3067;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;

&#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xD2F1; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC131;&#xC7A5; saccharomyces cerevisiae filamentous &#xC140; (pseudohyphae)&#xC758; &#xCCB4;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2F8;&#xC778; &#xC6D0;&#xD615; (&#xD6A8; &#xBAA8; &#xAC19;&#xC740;) &#xC140;&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; minicolonies &#xB418; &#xB098; &#xC870;&#xC9C1;&#xB41C; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xD615;&#xC131;. Minicolonies&#xB294; &#xAD6C;&#xC870;&#xD654; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xB204; &#xB8E9; &#xACF5;&#xB3D9;&#xCCB4; &#xAC19;&#xC740; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC131;&#xC7A5; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC131;&#xD615;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; pseudohyphae &#xCD94;&#xAC00; &#xAC1C;&#xBC1C; asci&#xC758; &#xCCB4;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC870; pseudohyphal &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC640; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131; minicolonies &#xC21C;&#xCC28;&#xC801; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC544;&#xC774;&#xB514;&#xC5B4;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;, minicolonies pseudohyphal &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xC7A5; asci&#xC758; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xD3EC;&#xD568;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD3FC; pseudohyphae&#xB97C; &#xC2E4;&#xD328; &#xD558;&#xBA74; flo11&Delta; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131;, &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD74;&#xBCF5; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; minicolony &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC774;. Minicolonies &#xBB3C;&#xC5D0; &#xBD84;&#xC0B0; &#xB41C; &#xC140; &#xB2E4;&#xC74C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xD2F1; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC815;&#xCC29; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC140; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; sporulated. &#xCD2C;&#xC601; &#xD568;&#xAED8; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC74;&#xC758; &#xD55C;&#xB2E4; minicolonies&#xC5D0;&#xB294; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131; &#xC790;&#xADF9; pseudohyphal &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; pseudohyphae &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC758; &#xCF54;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xC0B0; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB294; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;.

Flo11p adhesin &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xD2F1; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC131;&#xC7A5; Saccharomyces cerevisiae minicolonies meiotic &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;.

Saccharomyces cerevisiae cultiva en superficies de pl&#xE1;stico forman estructuras organizadas, minicolonies llamado, que consist&#xED;a en un n&#xFA;cleo de todo (tipo levadura), las c&#xE9;lulas rodeadas por cadenas de c&#xE9;lulas filamentosas (pseudohifas). Minicolonies ten&#xED;a una afinidad mucho mayor para el pl&#xE1;stico de las comunidades de levadura no estructurados que crecen en la misma superficie. Pseudohifas en la superficie de estas colonias desarrollado a&#xFA;n m&#xE1;s en las cadenas de ascos. Estas estructuras sugieren que la diferenciaci&#xF3;n pseudohyphal y la esporulaci&#xF3;n son procesos secuenciales en minicolonies. En consonancia con esta idea, minicolonies crecer en condiciones que estimulan la diferenciaci&#xF3;n contenida pseudohyphal frecuencias m&#xE1;s altas de ascos. Por otra parte, un mutante flo11&#x394;, que no se forma pseudohifas, dado esporulaci&#xF3;n normal en las culturas, pero estaba defectuoso para la esporulaci&#xF3;n minicolony. Cuando minicolonies se dispersaron en agua y las c&#xE9;lulas se dejaron luego a instalarse en la superficie de pl&#xE1;stico, estas c&#xE9;lulas esporulados de manera muy eficiente. Tomados en conjunto, los resultados sugieren que la esporulaci&#xF3;n en minicolonies es estimulada por la diferenciaci&#xF3;n pseudohyphal porque estos seudohifas se dispersa desde el n&#xFA;cleo de la colonia.

Flo11p Adhesin necesario para la diferenciaci&#xF3;n mei&#xF3;tico en Minicolonies Saccharomyces cerevisiae cultiva en superficies de pl&#xE1;stico

&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x7CBE;&#x786E;&#x7A81;&#x53D8;&#x88AB;&#x5B9A;&#x4E49;&#x4E3A;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x5C31;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x4FDD;&#x7559;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x9057;&#x4F20;&#x7684;&#x66F4;&#x6539;&#x5982;&#x6807;&#x8BB0;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5DE5;&#x5730;&#x9644;&#x8FD1;&#x3002;&#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#x3001; &#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x6709;&#x7CBE;&#x786E;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x6240;&#x6709;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x90FD;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x63D2;&#x5165; counter-selectable &#x6807;&#x8BB0;&#x548C;&#x8F74;&#x627F;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684; DNA &#x5F15;&#x5165;&#x7684;&#x51E0;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x5728;&#x6807;&#x8BB0;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5148;&#x63D2;&#x5165;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x66FF;&#x6362;&#x6216;&#x8005;&#x957F;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x643A;&#x5E26;&#x7A81;&#x53D8; &#xFF08;delitto perfetto&#xFF09; &#x6216; PCR &#x7247;&#x6BB5;&#x5408;&#x6210;&#x542B;&#x6709;&#x7A81;&#x53D8; (&#x4FDD;&#x969C;&#x8BF1;&#x53D8;&#xFF09; &#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5E95;&#x6F06;&#x3002;

GAL1 SceI &#x5B9A;&#x5411;&#x8BF1;&#x53D8;&#x6280;&#x672F;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7279;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; (gsSSG)&#xFF1A; &#x7CBE;&#x786E;&#x7784;&#x51C6;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x5728;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

Precise targeted mutations are defined as targeted mutations that do not require the retention of other genetic changes, such as marker genes, near the mutation site. In the yeast, S. cerevisiae, there are several methods for introducing precise targeted mutations, all of which depend on inserting both a counter-selectable marker and DNA bearing the mutation. For example, the marker can first be inserted, and then replaced with either a long oligonucleotide carrying the mutation (delitto perfetto) or a PCR fragment synthesized with one primer containing the mutation (SSG mutagenesis).

GAL1-SceI directed site-specific genomic (gsSSG) mutagenesis: a method for precisely targeting point mutations in S. cerevisiae.

Pr&#xE9;cis des mutations cibl&#xE9;es sont d&#xE9;finies comme des mutations cibl&#xE9;es qui ne n&#xE9;cessitent pas le maintien d&#x26;#39;autres modifications g&#xE9;n&#xE9;tiques, tels que les g&#xE8;nes marqueurs, pr&#xE8;s du site de mutation. Dans la levure S. cerevisiae, il existe plusieurs m&#xE9;thodes pour introduire des mutations cibl&#xE9;es pr&#xE9;cises, qui tous d&#xE9;pendent de l&#x26;#39;insertion &#xE0; la fois un marqueur contre-s&#xE9;lectionnable et portant l&#x26;#39;ADN de la mutation. Par exemple, le marqueur peut &#xEA;tre ins&#xE9;r&#xE9;e en premier, puis remplac&#xE9; soit par un oligonucl&#xE9;otide de long portant la mutation (delitto perfetto) ou un fragment de PCR synth&#xE9;tis&#xE9;s avec une amorce contenant la mutation (mutag&#xE9;n&#xE8;se SSG).

GAL1-Scel R&#xE9;alis&#xE9; site sp&#xE9;cifique g&#xE9;nomique (gsSSG) mutagen&#xE8;se: une m&#xE9;thode pour en ciblant pr&#xE9;cis&#xE9;ment mutations ponctuelles chez S. cerevisiae

Pr&auml;zise gezielte Mutationen sind definiert als gezielte Mutationen, die die Speicherung von anderen genetischen &Auml;nderungen, z. B. Markergene, nahe der Mutation nicht ben&ouml;tigen. Bei der Hefe S. Cerevisiae, gibt es mehrere Methoden f&uuml;r die Einf&uuml;hrung pr&auml;ziser gezielter Mutations, die einf&uuml;gen counter-selectable Markierung sowohl DNA tragen die Mutation abh&auml;ngig. Beispielsweise die Markierung zuerst eingef&uuml;gt werden kann, und dann durch entweder eine lange Oligonukleotid tragen die Mutation (Delitto Perfetto) oder einer PCR-fragment mit einer Grundierung mit die Mutation (SSG Mutagenese) synthetisiert.

GAL1-SceI verwiesene standortspezifische genomische (GsSSG) Mutagenese: eine Methode f&uuml;r die pr&auml;zise Ausrichtung Punktmutationen in S. Cerevisiae.

Precise e mirate le mutazioni sono definite come mutazioni mirate che non richiedono la conservazione di altre mutazioni genetiche, come ad esempio i geni marcatori, nei pressi del sito di mutazione. Il lievito, il Saccharomyces cerevisiae, ci sono diversi metodi per l&#39;introduzione di mutazioni mirate precisione, che dipendono dall&#39;inserimento di un marker counter-selectable e il DNA recanti la mutazione. Ad esempio, il marcatore pu&ograve; essere inserito prima e poi sostituito con un oligonucleotide lungo portando la mutazione (delitto perfetto) o una PCR frammento sintetizzato con un primer contenenti la mutazione (mutagenesi di SSG).

Gal1-SceI diretto mutagenesi site specific genomica (gsSSG): un metodo per il targeting precisamente mutazioni puntiformi in S. cerevisiae.

&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x6A19;&#x7684;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x5909;&#x7570;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x8FD1;&#x304F;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x4ED6;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5909;&#x5316;&#x3001;&#x306E;&#x4FDD;&#x6301;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9175;&#x6BCD;&#x3001;S.&#x30BB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30B7;&#x30A8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30BF;&#x304C;&#x9078;&#x629E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;DNA&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x633F;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x304C;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x7D5E;&#x3063;&#x305F;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3068;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x304C;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x633F;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x5909;&#x7570;&#xFF08;delitto perfetto&#xFF09;&#x3084;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#xFF08;SSG&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#xFF09;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x4E00;&#x65B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3092;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x305F;PCR&#x65AD;&#x7247;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x306E;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B;&#x9577;&#x3044;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306B;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;S.&#x30BB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30B7;&#x30A8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x70B9;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF1A;GAL1-SCEI&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#xFF08;gsSSG&#xFF09;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;

&#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xADFC;&#xCC98;&#xC5D0; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB4F1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD654; &#xB2E4;&#xB978; &#xBCF4;&#xC874; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xB300;&#xC0C1;&#xB41C; &#xBCC0;&#xC774;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD6A8; &#xBAA8; S. cerevisiae&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; counter-selectable &#xB9C8;&#xCEE4;&#xC640; DNA &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xC0BD;&#xC785; &#xC758;&#xC874; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBC29;&#xBC95;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, &#xB9C8;&#xCEE4; &#xC0BD;&#xC785; &#xBA3C;&#xC800; &#xC218; &#xACE0;&#xB294; &#xAE34; oligonucleotide &#xC6B4;&#xBC18; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; (delitto perfetto) &#xB610;&#xB294; PCR &#xC870;&#xAC01; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; (mutagenesis SSG)&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xB1CC;&#xAD00;&#xC73C;&#xB85C; &#xD569;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300;&#xCCB4;.

GAL1 SceI mutagenesis &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xBCC4; &#xAC8C;&#xB188; (gsSSG) &#xAC10;&#xB3C5;: S. cerevisiae&#xC5D0; &#xC810; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;.

Precisas mutaciones dirigidas se definen como las mutaciones espec&#xED;ficas que no requieren la retenci&#xF3;n de otros cambios gen&#xE9;ticos, tales como los genes marcadores, cerca del sitio de la mutaci&#xF3;n. En la levadura S. cerevisiae, existen varios m&#xE9;todos para la introducci&#xF3;n de mutaciones dirigidas precisas, todo lo cual depender&#xE1; de la inserci&#xF3;n tanto un marcador seleccionable y contra-cojinete ADN de la mutaci&#xF3;n. Por ejemplo, el primer marcador puede ser insertado, y luego reemplazados con un oligonucle&#xF3;tido largo que lleva la mutaci&#xF3;n (Delitto perfetto) o un fragmento de PCR sintetizado con un cebador que contiene la mutaci&#xF3;n (mutag&#xE9;nesis SSG).

GAL1-SCE dirigida espec&#xED;fica de sitio Gen&#xF3;mica (gsSSG) Mutag&#xE9;nesis: un m&#xE9;todo de focalizaci&#xF3;n Precisamente mutaciones puntuales en S. cerevisiae

Sarah Piccirillo

School of Biological Sciences

University of Missouri - Kansas City

Yeast Colony Embedding Method

Sarah Piccirillo

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University of Missouri - Kansas City

Yeast Colony Embedding Method

School of Biological Sciences