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DNA Microarrays: Sample Quality Control, Array Hybridization and Scanning

Microarray expression profiling of the nervous system provides a powerful approach to identifying gene activities in different stages of development, ...

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Focus Formation: A Cell-based Assay to Determine the Oncogenic Potential of a Gene

Malignant transformation of cells is typically associated with increased proliferation, loss of contact inhibition, acquisition of anchorage-independent ...

University of California, Davis

&#x30D2;&#x30AD;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;arenarum&#x306E;&#x5375;&#x9EC4;&#x5C01;&#x7B52;&#xFF08;VES&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D44;&#x6210;&#x3068;&#x53D7;&#x7CBE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x4EEE;&#x60F3;&#x74B0;&#x5883;&#xFF08;VE&#xFF09;&#x306F;&#x3001;120&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#x3092;&#x6301;&#x3064;4&#x3064;&#x306E;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x3001;75&#x3001;41&#x3001;38 kDa&#x306E;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x6027;&#x8CEA;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306B;&#x7CBE;&#x5B50;-VE&#x7D50;&#x5408;&#x3068;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x304C;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;VE&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3078;&#x306E;B. arenarum&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x7570;&#x7A2E;&#x7D50;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x76F8;&#x540C;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x7D04;3&#x5206;&#x306E;1&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; B. arenarum&#x306B;X. laevis&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3068;&#x540C;&#x7B49;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306F;&#x3001;VE&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; B. arenarum&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30EC;&#x30BB;&#x30A4;&#x30F3;&#x30A4;&#x30BD;&#x30C1;&#x30AA;&#x30B7;&#x30A2;&#x30CD;&#x30FC;&#x30C8;&#x6A19;&#x8B58;VE&#x3001;&#x7CBE;&#x5B50;&#x982D;&#x90E8;&#x306E;&#x524D;&#x7AEF;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x6A19;&#x8B58;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x6A2A;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3002;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306F;&#x3001;VE&#x306E;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x4F4E;&#x5F35;&#x98DF;&#x5869;&#x6C34;&#x5A92;&#x4F53;&#x4E2D;&#x3067;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3092;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EEE;&#x60F3;&#x74B0;&#x5883;&#xFF08;VE&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x6642;&#x9593;&#x3068;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306F;&#x3001;10&#x5206;&#x5F8C;&#x306B;&#x6700;&#x5927;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30CF;&#x30FC;&#x30D5;&#x6700;&#x5927;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;1&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;/ ml&#x306E;&#x7CD6;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x305F;&#x53D7;&#x7CBE;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; B. arenarum VE&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;&#x5375;&#x306E;&#x5C01;&#x7B52;&#x306B;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3068;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x7A2E;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x3060;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x304C;&#x77E5;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x4E21;&#x751F;&#x985E;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;VE&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; X. laevis&#x3068;B. arenarum&#x306E;&#x7570;&#x7A2E;&#x7CBE;&#x5B50;-VE&#x7D50;&#x5408;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x9055;&#x3044;&#x304C;&#x53D7;&#x7CBE;&#x306E;&#x7A2E;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x7CBE;&#x5B50;-VE&#x7D50;&#x5408;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x3068;&#x77DB;&#x76FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D2;&#x30AD;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;Arenarum&#x306E;&#x5375;&#x9EC4;&#x5C01;&#x7B52;&#xFF1A;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;

Vitelline &#xBD09;&#xD22C; (VEs) Bufo arenarum&#xC758; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xBC0F; &#xC218;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Ves&#xB294; 120, 75, 41, &#xBD84;&#xC790; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBC0F; 38 kDa 4 glycoproteins&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC18D;&#xC131;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC591;&#xC801; &#xC815;&#xC790; VE &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xACFC; acrosome &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Xenopus laevis VE &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; B. arenarum &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; 1/3 &#xC815;&#xB3C4; &#xD6A8;&#xC728;&#xACFC; &#xB3D9;&#xC885; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. B. arenarum VE X. laevis &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xD574;&#xB2F9; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. B. arenarum &#xC815;&#xC790; fluorescein&#xC640; incubated &#xD588;&#xB2E4; &#xB54C; isothiocyanate &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; VE, &#xC815;&#xC790; &#xBA38;&#xB9AC;&#xC758; &#xC55E;&#xCABD; &#xB05D;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xB41C; glycoproteins &#xCE21;&#xBA74; &#xBD84;&#xD3EC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294;. &#xC720;&#xB3C4; acrosome &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC7A0;&#xBCF5;&#xAE30; VE glycoproteins&#xC640; &#xACE0;&#xC628; &#xC2DD; &#xC5FC; &#xC218; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. VEs acrosome &#xBC18;&#xC751; &#xC2DC;&#xAC04; &#xBC0F; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xC874; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Acrosome &#xBC18;&#xC751;&#xC740; 10 &#xBD84; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xCD5C;&#xB300;. &#xBC18; &#xCD5C;&#xB300;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; 1 microg&#xC758; &#xB2F9;&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740;/ml. &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4; acrosome &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC218;&#xC815; &#xBD09;&#xD22C; glycoproteins&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. B. arenarum VE &#xD654;&#xD559;&#xC801; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2EC;&#xAC40; &#xBD09;&#xD22C;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xCE58;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC18D;&#xC131; &#xC815;&#xC790; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xACFC; acrosome &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xAD00;&#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC885;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C; &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC54C;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;,, &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xC591;&#xC11C;&#xB958;&#xC5D0; &#xC815;&#xC790; acrosome &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; VE&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xAD00;&#xCC30; &#xC774;&#xB2E4;. X. laevis &#xBC0F; B. arenarum&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; heterologous &#xC815;&#xC790; VE&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xC740; &#xCC28;&#xC774; &#xD604;&#xC7AC; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784;&#xC758; &#xC218;&#xC815;&#xC5D0; &#xC885; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; &#xC815;&#xC790; VE &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADDC;&#xC81C;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Bufo arenarum&#xC758; vitelline &#xBD09;&#xD22C;: &#xC0DD; &#xD654; &#xD559;&#xC801; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131;.

Sobres vitelino (VES) de Bufo arenarum fueron aislados con el fin de estudiar su composici&#xF3;n y su papel en la fecundaci&#xF3;n. VEs se componen de cuatro glicoprote&#xED;nas, con masas moleculares de 120, 75, 41 y 38 kDa. Para la caracterizaci&#xF3;n de sus propiedades biol&#xF3;gicas, que determina cuantitativamente el esperma-VE vinculante y la inducci&#xF3;n de la reacci&#xF3;n del acrosoma. Heter&#xF3;logo uni&#xF3;n de B. arenarum esperma a los componentes de Xenopus laevis VE se observ&#xF3; con aproximadamente un tercio de la eficiencia de la uni&#xF3;n hom&#xF3;loga. Vinculante Equivalente de X. laevis espermatozoides al arenarum B. VE se observ&#xF3;. Cuando B. esperma arenarum fueron incubadas con fluoresce&#xED;na marcado con isotiocianato de VE, las glicoprote&#xED;nas marcada unida al extremo anterior de la cabeza de los espermatozoides, que muestra una distribuci&#xF3;n lateral. La inducci&#xF3;n de la reacci&#xF3;n acrosomal se evalu&#xF3; mediante la incubaci&#xF3;n de los espermatozoides en medios salinos hipot&#xF3;nicos con glicoprote&#xED;nas de VE. VEs indujo la reacci&#xF3;n del acrosoma en un tiempo y de manera dependiente de la concentraci&#xF3;n. La reacci&#xF3;n de acrosoma fue m&#xE1;xima a los 10 min. El efecto semi-m&#xE1;xima se obtuvo a una concentraci&#xF3;n glicoprote&#xED;na de 1 mcg / ml. La especificidad se determin&#xF3; a trav&#xE9;s de las glicoprote&#xED;nas de fertilizaci&#xF3;n sobre, que no han podido inducir a la reacci&#xF3;n del acrosoma. El VE B. arenarum es bioqu&#xED;micamente similar a otros sobres de huevo. Tambi&#xE9;n parece que sus propiedades biol&#xF3;gicas son similares a otras especies en lo que se refiere a la uni&#xF3;n de espermatozoides y la inducci&#xF3;n de la reacci&#xF3;n del acrosoma. Sin embargo, en lo que sabemos, esta es la primera observaci&#xF3;n de la EV la inducci&#xF3;n de la reacci&#xF3;n del acrosoma de espermatozoides en los anfibios. Las diferencias relativamente peque&#xF1;as observadas en heter&#xF3;loga espermatozoide-VE obligatorio en X. laevis y B. arenarum son incompatibles con el paradigma actual que la especificidad de especie en la fertilizaci&#xF3;n se regula en el esperma-VE paso obligatorio.

Sobre vitelina de Bufo arenarum: Caracterizaci&#xF3;n bioqu&#xED;mica y biol&#xF3;gica

Buste vitellina (VEs) di Bufo arenarum sono stati isolati per poter studiare la loro composizione e il loro ruolo nella fecondazione. VEs sono composte da quattro delle glicoproteine, con masse molecolari di 120, 75, 41 e 38 kDa. Per caratterizzare le sue propriet&agrave; biologiche, abbiamo determinato quantitativamente associazione sperma-VE e l&#39;induzione della reazione acrosomiale. Associazione eterologo di sperma arenarum b. ai componenti di Xenopus laevis VE &egrave; stata osservata con circa un terzo l&#39;efficienza dell&#39;associazione omologa. Associazione equivalente di X. laevis sperma per il b. arenarum VE &egrave; stata osservata. Quando b. arenarum sperma sono stato incubato con fluoresceina isotiocianato-etichetta VE, le glicoproteine etichette legate alla parte anteriore della testa degli spermatozoi, che mostrano una distribuzione laterale. Induzione della reazione acrosomiale &egrave; stata valutata incubando sperma in media salina ipotonica con glicoproteine VE. VEs indotto la reazione acrosomiale in maniera dipendente dal tempo e concentrazione. La reazione acrosomiale era massima dopo 10 min. L&#39;effetto di met&agrave;-massimo &egrave; stato ottenuto a una concentrazione di glicoproteina di 1 microg / ml. specificit&agrave; &egrave; stata determinata utilizzando delle glicoproteine busta di fertilizzazione, che non &egrave; riuscito a indurre la reazione acrosomiale. Il b. arenarum VE &egrave; biochimicamente simili ad altre buste di uovo. Sembra inoltre che le propriet&agrave; biologiche sono simili ad altre specie per quanto riguarda l&#39;associazione di sperma e induzione della reazione acrosomiale. Tuttavia, per quanto siamo consapevoli, questa &egrave; la prima osservazione di VE che inducono la reazione acrosomiale sperma negli anfibi. Le relativamente piccole differenze osservate in associazione sperma eterologo-VE in arenarum X. laevis e B. sono incompatibili con l&#39;attuale paradigma che specificit&agrave; specie nella fecondazione &egrave; regolata al passo associazione sperma-VE.

Busta vitellina di Bufo arenarum: caratterizzazione biochimica e biologica.

&#x5375;&#x9EC4;&#x4FE1;&#x5C01; &#xFF08;VEs&#xFF09; &#x7684;&#x87FE;&#x870D; arenarum &#x88AB;&#x5B64;&#x7ACB;&#xFF0C;&#x7814;&#x7A76;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x7EC4;&#x6210;&#x548C;&#x5728;&#x53D7;&#x7CBE;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;VEs &#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x56DB;&#x4E2A;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5206;&#x5B50;&#x7FA4;&#x4F17; 120&#x3001; 75&#x3001; 41&#x3001; 38 kDa&#x3002;&#x6765;&#x63CF;&#x8FF0;&#x5176;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7279;&#x6027;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5B9A;&#x91CF;&#x786E;&#x5B9A;&#x7CBE;&#x5B50; VE &#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x5F02;&#x6E90;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE; VE &#x7EC4;&#x4EF6; B.arenarum &#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x4E0E;&#x4F1A;&#x8005;&#x7EA6;&#x6709;&#x4E09;&#x5206;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#x3002;&#x6709;&#x4EBA;&#x5411; B.arenarum VE &#x5341;.&#x87FE;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x7B49;&#x6548;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;&#x5F53; B.arenarum &#x7CBE;&#x5B50;&#x88AB;&#x5B75;&#x5316;&#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x5F02;&#x786B;&#x6C30;&#x9178;&#x916F;&#x6807;&#x8BB0; VE&#xFF0C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5934;&#x90E8;&#x524D;, &#x7ED3;&#x675F;&#x6807;&#x8BB0;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x663E;&#x793A;&#x6A2A;&#x5411;&#x5206;&#x5E03;&#x3002;&#x5B75;&#x5316; VE &#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x4F4E;&#x6E17;&#x76D0;&#x6C34;&#x4ECB;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x3002;VEs &#x8BF1;&#x5BFC;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x65F6;&#x95F4;&#x548C;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;10 &#x5206;&#x949F;&#x540E;&#xFF0C;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x662F;&#x6700;&#x5927;&#x7684;&#x3002;&#x534A;-&#x6781;&#x5927;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x83B7;&#x5F97;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684; 1 microg/&#x6BEB;&#x5347;.&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x786E;&#x5B9A;&#x4F7F;&#x7528;&#x65BD;&#x80A5;&#x5305;&#x819C;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x672A;&#x80FD;&#x8BF1;&#x53D1;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;B.arenarum VE &#x662F;&#x751F;&#x5316;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5176;&#x4ED6;&#x86CB;&#x4FE1;&#x5C01;&#x3002;&#x770B;&#x6765;&#x5176;&#x751F;&#x7269;&#x5C5E;&#x6027;&#x90FD;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5176;&#x4ED6;&#x7269;&#x79CD;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x636E;&#x6211;&#x4EEC;&#x6240;&#x77E5;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F; VE &#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4E24;&#x6816;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x89C2;&#x5BDF;&#x3002;&#x5341;&#x3001; &#x87FE;&#x548C; B.arenarum &#x5728;&#x5F02;&#x6E90;&#x7CBE;&#x5B50; VE &#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x8F83;&#x5C0F;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x4E0E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5728;&#x7CBE;&#x5B50; VE &#x7ED1;&#x5B9A;&#x6B65;&#x9AA4;&#x7684;&#x5F53;&#x524D;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E0D;&#x7B26;&#x3002;

&#x5375;&#x9EC4;&#x4FE1;&#x5C01;&#x7684;&#x87FE;&#x870D; arenarum&#xFF1A; &#x751F;&#x7269;&#x5316;&#x5B66;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

Vitelline envelopes (VEs) of Bufo arenarum were isolated in order to study their composition and their role in fertilization. VEs are composed of four glycoproteins, with molecular masses of 120, 75, 41, and 38 kDa. To characterize its biological properties, we quantitatively determined sperm-VE binding and the induction of the acrosome reaction. Heterologous binding of B. arenarum sperm to Xenopus laevis VE components was observed with about one-third the efficiency of homologous binding. Equivalent binding of X. laevis sperm to the B. arenarum VE was observed. When B. arenarum sperm were incubated with fluorescein isothiocyanate-labeled VE, the labeled glycoproteins bound to the anterior end of the sperm head, showing a lateral distribution. Induction of the acrosome reaction was evaluated by incubating sperm in hypotonic saline media with VE glycoproteins. VEs induced the acrosome reaction in a time- and concentration-dependent manner. The acrosome reaction was maximal after 10 min. The half-maximal effect was obtained at a glycoprotein concentration of 1 microg/ml. Specificity was determined using fertilization envelope glycoproteins, which failed to induce the acrosome reaction. The B. arenarum VE is biochemically similar to other egg envelopes. It also seems that its biological properties are similar to other species in regard to sperm binding and induction of the acrosome reaction. However, as far as we are aware, this is the first observation of the VE inducing the sperm acrosome reaction in amphibians. The relatively small differences observed in heterologous sperm-VE binding in X. laevis and B. arenarum are inconsistent with the current paradigm that species specificity in fertilization is regulated at the sperm-VE binding step.

Vitelline envelope of Bufo arenarum: biochemical and biological characterization.

Enveloppes vitellines (VES) de Bufo arenarum ont &#xE9;t&#xE9; isol&#xE9;s afin d&#x26;#39;&#xE9;tudier leur composition et leur r&#xF4;le dans la f&#xE9;condation. VE sont compos&#xE9;s de quatre glycoprot&#xE9;ines, avec des masses mol&#xE9;culaires de 120, 75, 41 et 38 kDa. Afin de caract&#xE9;riser ses propri&#xE9;t&#xE9;s biologiques, nous dos&#xE9; sperme VE contraignant et l&#x26;#39;induction de la r&#xE9;action de l&#x26;#39;acrosome. H&#xE9;t&#xE9;rologue de liaison de B. arenarum sperme &#xE0; des composants de Xenopus laevis VE a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e avec environ un tiers de l&#x26;#39;efficacit&#xE9; des homologues contraignant. Contraignant &#xE9;quivalent de X. laevis sperme &#xE0; la arenarum B. VE a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e. Lorsque B. arenarum spermatozo&#xEF;des ont &#xE9;t&#xE9; incub&#xE9;es avec l&#x26;#39;isothiocyanate de fluoresc&#xE9;ine marqu&#xE9;e VE, les glycoprot&#xE9;ines marqu&#xE9; li&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; ant&#xE9;rieure de la t&#xEA;te du spermatozo&#xEF;de, montrant une distribution lat&#xE9;rale. L&#x26;#39;induction de la r&#xE9;action de l&#x26;#39;acrosome a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;valu&#xE9;e par incubation des spermatozo&#xEF;des dans les milieux salins hypotoniques avec des glycoprot&#xE9;ines VE. VE induit la r&#xE9;action acrosomique dans un temps et de mani&#xE8;re concentration d&#xE9;pendante. La r&#xE9;action de l&#x26;#39;acrosome est maximale apr&#xE8;s 10 min. L&#x26;#39;effet demi-maximale a &#xE9;t&#xE9; obtenue &#xE0; une concentration de 1 glycoprot&#xE9;ine microg / ml. La sp&#xE9;cificit&#xE9; a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;termin&#xE9;e en utilisant les glycoprot&#xE9;ines d&#x26;#39;enveloppe de fertilisation, qui n&#x26;#39;ont pas d&#x26;#39;induire la r&#xE9;action acrosomique. Le VE B. arenarum est biochimiquement semblable &#xE0; d&#x26;#39;autres enveloppes d&#x26;#39;&#x153;ufs. Il semble aussi que ses propri&#xE9;t&#xE9;s biologiques sont similaires &#xE0; d&#x26;#39;autres esp&#xE8;ces en ce qui concerne &#xE0; la liaison des spermatozo&#xEF;des et de l&#x26;#39;induction de la r&#xE9;action acrosomique. Cependant, dans la mesure o&#xF9; nous sommes conscients, c&#x26;#39;est la premi&#xE8;re observation de la VE induire la r&#xE9;action acrosomique des spermatozo&#xEF;des chez les amphibiens. Les diff&#xE9;rences relativement faibles observ&#xE9;s dans le sperme h&#xE9;t&#xE9;rologue-VE obligatoire dans X. laevis et B. arenarum sont incompatibles avec le paradigme actuel que la sp&#xE9;cificit&#xE9; d&#x26;#39;esp&#xE8;ce la f&#xE9;condation est r&#xE9;glement&#xE9;e au sperme-VE &#xE9;tape de liaison.

Enveloppe vitelline de Bufo arenarum: caract&#xE9;risation biochimique et biologique

Dottergangzyste Umschlag von Bufo arenarum: biochemische und biologische Charakterisierung.

&#xC591;&#xC11C;&#xB958; Bufo arenarum oocyte &#xBD09;&#xD22C;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xC81C;&#xACF5; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC57D;&#xAD00;&#xC740; oocyte &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;: 1) &#xB54C; coelomic &#xCE90;&#xBE44;&#xD2F0;&#xC5D0; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC30; &#xB780; (coelomic &#xBD09;&#xD22C; (CE), 2&#xC5D0; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2F8;&#xC778;) &#xD6C4; &#xC911; &#xACE0; &#xB780;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD1B5;&#xACFC; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; &#xC9C0;&#xC704;&#xB97C; &#xC783;&#xACE0; (&#xB458;&#xB7EC;&#xC2F8;&#xC778; viteline &#xBD09;&#xD22C; (VE), &#xC5EC; &#xACE0; 3) &#xD6C4; oocyte &#xD65C;&#xC131;&#xD654; (&#xC218;&#xC815; &#xBD09;&#xD22C; (FE)&#xC5D0; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2F8;&#xC5EC; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. SDS &#xD398;&#xC774;&#xC9C0; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xC5BC;&#xB8E9;&#xC774; &#xC9C0;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; glycoproteins&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC774; &#xC9C0;&#xC815; &#xB41C; lectins glycosidic &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; &#xBAA8;&#xB450; nitrocellulose &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xB610;&#xB294; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; oocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xACFC; &#xB9BD; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC18D;&#xC131; &#xB610;&#xD55C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. CE &#xBC0F; VE&#xC758; SDS &#xD398;&#xC774;&#xC9C0;, &#xD6C4; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD328;&#xD134; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC81C;&#xB294; &#xB780;&#xC758; &#xAC08; &#xAC70; &#xC608;&#xC694; recta&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;. VE&#xC640; FE&#xC758; SDS &#xD398;&#xC774;&#xC9C0; &#xD328;&#xD134;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; glycoproteins, gp75 &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC774;&#xB3D9;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. VE&#xC640; FE&#xC758; &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB2F9; &#xCCB4;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC124;&#xD0D5; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC785;&#xC99D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC2A4; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; gp120 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xBD09;&#xD22C;&#xC5D0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. N-&#xC544; &#xC138; &#xD2F8;-galactosamine &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xCCA0;&#xC5D0;&#xC11C; gp69 &#xC81C;&#xC678;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294;. Galactose &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC740; FE&#xC758; gp120&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. Lectin &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xAE00;&#xB8E8;&#xCF54;&#xC0AC;&#xBBFC;, galactose&#xACFC; N-acetyl galactosamine &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xBD80;&#xC7AC; (&#xB610;&#xB294; &#xBE44; &#xAC00;&#xC6A9;&#xC131;) N-&#xC544; &#xC138; &#xD2F8;-&#xAE00;&#xB8E8;&#xCF54;&#xC0AC;&#xBBFC; &#xB610;&#xB294; fucose &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xBD09;&#xD22C; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xACFC; &#xB9BD; &#xC81C;&#xD488; (CGP) VE&#xC758; gp75&#xC5D0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC591;&#xC11C;&#xB958; oocytes &#xBD09;&#xD22C;: Bufo arenarum &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC218;&#xC815;.

Una caracterizaci&#xF3;n de la envolvente de los Anfibios Bufo arenarum ovocitos se presenta. Se hizo en diferentes condiciones funcionales de los ovocitos: 1) cuando ha sido puesto en libertad dentro de la cavidad cel&#xF3;mica durante la ovulaci&#xF3;n (rodeada por la envoltura cel&#xF3;mica, (CE), 2) despu&#xE9;s de haber pasado a trav&#xE9;s del oviducto y el depuesto (rodeado por la dotaci&#xF3;n vitelino, (VE), y 3) despu&#xE9;s de la activaci&#xF3;n de oocitos (rodeada por la envoltura de la fertilizaci&#xF3;n, (FE). La caracterizaci&#xF3;n se hizo por SDS-PAGE seguido por tinci&#xF3;n de prote&#xED;nas y glicoprote&#xED;nas. lectinas marcadas se utiliza para identificar los residuos glicos&#xED;dicos tanto en los componentes separados en membranas de nitrocelulosa o en oocitos y embriones intactos. propiedades proteol&#xED;ticas del contenido de los gr&#xE1;nulos corticales tambi&#xE9;n se analizaron. Despu&#xE9;s de SDS-PAGE de EC y VE, un patr&#xF3;n de prote&#xED;na diferente se observ&#xF3;. Esto es probablemente debido a la actividad de una proteasa presente en la pars recta del oviducto. Comparaci&#xF3;n del patr&#xF3;n de SDS-PAGE de VE y FE mostr&#xF3; una movilidad diferente para una de las glicoprote&#xED;nas, gp75. VE y FE demostr&#xF3; tener diferentes residuos de az&#xFA;car en sus cadenas de oligosac&#xE1;ridos. residuos de manosa s&#xF3;lo est&#xE1;n presentes en la gp120 de los tres sobres. N-acetil-galactosamina residuos est&#xE1;n presentes en todos los componentes, excepto para gp69 en la FE. residuos de galactosa est&#xE1;n presentes principalmente en la gp120 de FE. lectina de uni&#xF3;n a los ensayos indican la presencia de glucosamina , galactosa y N-acetil galactosamina residuos y la ausencia (o no disponibilidad) de N-acetil-glucosamina o residuos de fucosa en la superficie sobres. El producto gr&#xE1;nulo cortical (CGP) muestra la actividad proteol&#xED;tica en gp75 de la VE.

Los sobres de ovocitos de anfibios: modificaciones fisiol&#xF3;gicas en Bufo arenarum

&#x63D0;&#x4EA4;&#x7684;&#x4E24;&#x6816;&#x52A8;&#x7269;&#x87FE;&#x870D;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE; arenarum &#x4FE1;&#x5C01;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;&#x5B83;&#x66FE;&#x5728;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0D;&#x540C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF1A; 1&#xFF09; &#x5F53;&#x5B83;&#x5DF2;&#x91CA;&#x653E;&#x8FDB;&#x5165;&#x4F53;&#x8154;&#x8154;&#x671F;&#x95F4;&#x6392;&#x5375; (&#x5305;&#x56F4;&#x5728;&#x4F53;&#x8154;&#x4FE1;&#x5C01; (CE) 2) &#x540E;&#x5B83;&#x5DF2;&#x901A;&#x8FC7;&#x8F93;&#x5375;&#x7BA1;&#x548C;&#x88AB;&#x5E9F;&#x9EDC; (&#x5305;&#x56F4;&#x7684; viteline &#x4FE1;&#x5C01;&#xFF0C;(VE)&#xFF0C;&#x548C; 3&#xFF09; &#x540E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6FC0;&#x6D3B; &#xFF08;&#x5305;&#x56F4;&#x65BD;&#x80A5;&#x4FE1;&#x5C01;&#xFF0C;(FE)&#x3002;&#x8868;&#x5F81;&#x4E86; SDS &#x8DDF;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x548C;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x67D3;&#x8272;&#x3002;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x88AB;&#x7528;&#x4E8E;&#x8BC6;&#x522B;&#x7CD6;&#x82F7;&#x6B8B;&#x7559;&#x5728;&#x785D;&#x9178;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7D20;&#x819C;&#x6216;&#x4FDD;&#x6301;&#x4E0D;&#x53D8;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x5206;&#x7ACB;&#x5143;&#x4EF6;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x5185;&#x5BB9;&#x7684;&#x76AE;&#x5C42;&#x9897;&#x7C92;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;&#x540E; SDS &#x7684; CE &#x548C; VE&#xFF0C;&#x6709;&#x4EBA;&#x6307;&#x51FA;&#x4E0D;&#x540C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x8FD9;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x8F93;&#x5375;&#x7BA1;&#x7684;&#x7531;&#x4E8E;&#x672C; &mdash; &mdash; &#x5E15;&#x5C14;&#x65AF;&#x76F4;&#x80A0;&#x4E2D;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;SDS-VE &#x548C; FE &#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x4E0D;&#x540C;&#x6D41;&#x52A8;&#x6027;&#x7684;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;gp75 &#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;VE &#x548C; FE &#x8BC1;&#x660E;&#x5177;&#x6709;&#x4E0D;&#x540C;&#x7CD6;&#x6B8B;&#x7559;&#x5728;&#x5176;&#x4F4E;&#x805A;&#x7CD6;&#x94FE;&#x3002;&#x7518;&#x9732;&#x7CD6;&#x6B8B;&#x7559;&#x90FD;&#x53EA;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E; gp120 &#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4FE1;&#x5C01;&#x3002;N-&#x4E59;&#x9170;-&#x6C28;&#x57FA;&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x6B8B;&#x7559;&#x90FD;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728; FE gp69&#x3002;&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x6B8B;&#x7559;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3B;&#x8981;&#x5728; gp120 &#x7684;&#x94C1;&#x3002;&#x51DD;&#x96C6;&#x5316;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x6C28;&#x57FA;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x3001; &#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x548C; N-&#x4E59;&#x9170;&#x6C28;&#x57FA;&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x6B8B;&#x7559;&#x548C;&#x7F3A;&#x5E2D; (&#x6216;&#x975E;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#xFF09; N-&#x4E59;&#x9170;&#x6C28;&#x57FA;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x6216;&#x5CA9;&#x85FB;&#x7CD6;&#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x4FE1;&#x5C01;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x76AE;&#x8D28;&#x9897;&#x7C92;&#x4EA7;&#x54C1; (CGP) &#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x662F; VE &#x7684; gp75 &#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;

&#x4E24;&#x6816;&#x7C7B;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4FE1;&#x5C01;&#xFF1A; &#x87FE;&#x870D; arenarum &#x4E2D;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x4FEE;&#x6539;&#x3002;

A characterization of the Amphibian Bufo arenarum oocyte envelope is presented. It was made in different functional conditions of the oocyte: 1) when it has been released into the coelomic cavity during ovulation (surrounded by the coelomic envelope, (CE), 2) after it has passed through the oviduct and is deposed (surrounded by the viteline envelope, (VE), and 3) after oocyte activation (surrounded by the fertilization envelope, (FE). The characterization was made by SDS-PAGE followed by staining for protein and glycoproteins. Labeled lectins were used to identify glycosidic residues both in separated components on nitrocellulose membranes or in intact oocytes and embryos. Proteolytic properties of the content of the cortical granules were also analyzed. After SDS-PAGE of CE and VE, a different protein pattern was observed. This is probably due to the activity of a protease present in the pars recta of the oviduct. Comparison of the SDS-PAGE pattern of VE and FE showed a different mobility for one of the glycoproteins, gp75. VE and FE proved to have different sugar residues in their oligosaccharide chains. Mannose residues are only present in gp120 of the three envelopes. N-acetyl-galactosamine residues are present in all of the components, except for gp69 in the FE. Galactose residues are present mainly in gp120 of FE. Lectin-binding assays indicate the presence of glucosamine, galactose and N-acetyl galactosamine residues and the absence (or non-availability) of N-acetyl-glucosamine or fucose residues on the envelopes surface. The cortical granule product (CGP) shows proteolytic activity on gp75 of the VE.

The envelopes of amphibian oocytes: physiological modifications in Bufo arenarum.

Une caract&#xE9;risation de l&#x26;#39;enveloppe des amphibiens Bufo ovocyte arenarum est pr&#xE9;sent&#xE9;. Elle a &#xE9;t&#xE9; faite dans diff&#xE9;rentes conditions fonctionnelles de l&#x26;#39;ovocyte: 1) quand il a &#xE9;t&#xE9; lib&#xE9;r&#xE9; dans la cavit&#xE9; coelomique pendant l&#x26;#39;ovulation (entour&#xE9;e par l&#x26;#39;enveloppe coelomique, (CE), 2) apr&#xE8;s avoir travers&#xE9; l&#x26;#39;oviducte et est d&#xE9;pos&#xE9; (entour&#xE9; par l&#x26;#39;enveloppe viteline, (VE), et 3) apr&#xE8;s activation de l&#x26;#39;ovocyte (entour&#xE9;e par l&#x26;#39;enveloppe de fertilisation, (FE). La caract&#xE9;risation a &#xE9;t&#xE9; faite par SDS-PAGE suivie par coloration des prot&#xE9;ines et des glycoprot&#xE9;ines. lectines marqu&#xE9;es ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s pour identifier les r&#xE9;sidus glycosidiques fois dans des locaux s&#xE9;par&#xE9;s des composants sur des membranes de nitrocellulose ou dans des ovocytes et des embryons intacts. propri&#xE9;t&#xE9;s prot&#xE9;olytiques du contenu des granules corticaux ont &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; analys&#xE9;s. Apr&#xE8;s SDS-PAGE de la CE et VE, un profil prot&#xE9;ique diff&#xE9;rent a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;. Ceci est probablement d&#xFB; &#xE0; l&#x26;#39;activit&#xE9; de un cadeau de prot&#xE9;ase dans la pars recta de l&#x26;#39;oviducte. Comparaison du mod&#xE8;le SDS-PAGE de VE et FE a montr&#xE9; une mobilit&#xE9; diff&#xE9;rente pour l&#x26;#39;une des glycoprot&#xE9;ines, gp75. VE et FE s&#x26;#39;est av&#xE9;r&#xE9; avoir des r&#xE9;sidus de sucre diff&#xE9;rents dans leurs cha&#xEE;nes d&#x26;#39;oligosaccharides. r&#xE9;sidus mannose sont pr&#xE9;sents uniquement dans la gp120 des trois enveloppes. N-ac&#xE9;tyl-galactosamine r&#xE9;sidus sont pr&#xE9;sents dans tous les composants, sauf pour gp69 dans le FE. r&#xE9;sidus galactose sont pr&#xE9;sents principalement dans la gp120 de FE. lectine-essais de liaison indique la pr&#xE9;sence de la glucosamine , le galactose et les r&#xE9;sidus N-ac&#xE9;tyl galactosamine et l&#x26;#39;absence (ou de non-disponibilit&#xE9;) de N-ac&#xE9;tyl-glucosamine ou r&#xE9;sidus fucose sur la surface enveloppe. Le produit granul&#xE9; corticale (EGC) montre une activit&#xE9; prot&#xE9;olytique sur gp75 de l&#x26;#39;environnement virtuel.

Les enveloppes d&#x26;#39;ovocytes d&#x26;#39;amphibiens: modifications physiologiques dans Bufo arenarum

Die Umschl&#xE4;ge der Amphibien-Oozyten: physiologische Ver&#xE4;nderungen in Bufo arenarum.

Una caratterizzazione della busta anfibi Bufo arenarum ovocita &egrave; presentata. &Egrave; stato fatto in diverse condizioni funzionali dell&#39;ovocita: 1) quando &egrave; stato rilasciato nella cavit&agrave; celomatiche durante l&#39;ovulazione (circondato da busta celomatiche, (CE), 2) dopo che &egrave; passato attraverso l&#39;ovidotto e viene deposto (circondato dalla busta di viteline, (VE) e 3) dopo l&#39;attivazione degli ovociti (circondato dalla busta di fertilizzazione, (FE). La caratterizzazione &egrave; stata fatta da SDS-PAGE seguita da colorazione per proteine e glicoproteine. Etichettati lectine sono state utilizzate per identificare residui glicosidici sia in componenti separati su membrane di nitrocellulosa o di embrioni e ovociti intatti. Propriet&agrave; proteolitica del contenuto dei granuli corticali sono stati anche analizzati. Dopo SDS-PAGE di CE e VE, &egrave; stato osservato un pattern di proteine diverse. Ci&ograve; &egrave; probabilmente dovuto all&#39;attivit&agrave; di una proteasi presente nella recta pars dell&#39;ovidotto. Confronto tra il pattern di SDS-PAGE di VE e FE ha mostrato una diversa mobilit&agrave; per una delle glicoproteine, gp75. VE e FE dimostr&ograve; di avere residui di zucchero differenti nelle loro catene di oligosaccaridi. Sono presenti in gp120 delle tre buste solo residui di mannosio. N-acetil-galattosamina residui sono presenti in tutti i componenti, ad eccezione di gp69 alla FE. Residui di galattosio sono presenti principalmente in gp120 di FE. Lectina-associazione dosaggi indicano la presenza di glucosamina, galattosio e residui di N-acetil-galattosamina e l&#39;assenza (o non disponibilit&agrave;) dei residui di N-acetil-glucosamina o fucosio sulla superficie buste. Il prodotto di granulo corticale (CGP) Mostra attivit&agrave; proteolitica gp75 della VE.

Le buste di ovociti di anfibi: modificazioni fisiologiche in Bufo arenarum.

&#x4E21;&#x751F;&#x985E;&#x306E;&#x30D2;&#x30AD;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;arenarum&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6761;&#x4EF6;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#xFF1A;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5375;&#x7BA1;&#x3092;&#x901A;&#x904E;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x9000;&#x9663;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;1&#xFF09;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3001;2&#xFF08;&#x4F53;&#x8154;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#xFF08;CE&#x306B;&#x56F2;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#xFF09;&#xFF09;&#x6392;&#x5375;&#x6642;&#x306B;&#x4F53;&#x8154;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306B;&#x653E;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#xFF08;&#x306B;&#x56F2;&#x307E;&#x308C;&#x3066;viteline&#x5C01;&#x7B52;&#x3001;&#xFF08;VE&#xFF09;&#x3001;3&#xFF09;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5F8C;&#xFF08;&#x53D7;&#x7CBE;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x56F2;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#xFF08;FE&#xFF09;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3084;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;SDS-PAGE&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x6A19;&#x8B58;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B7;&#x30C9;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306B;&#x306F;&#x3001;CE&#x306E;SDS-PAGE&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3002;&#x76AE;&#x8CEA;&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x542B;&#x6709;&#x91CF;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x7279;&#x6027;&#x3082;&#x89E3;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30BB;&#x30EB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B9;&#x819C;&#x4E0A;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x80DA;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x3001;VE&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x5375;&#x7BA1;&#x306E;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;rectum&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x5F62;&#x3067;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;VE&#x3068;FE&#x306E;SDS-PAGE&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306F;&#x3001;VE&#x3002;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3001;gp75&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x79FB;&#x52D5;&#x5EA6;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;FE&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7CD6;&#x9396;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7CD6;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30F3;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B9;&#x6B8B;&#x57FA;3&#x3064;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;gp120&#x306B;&#x306E;&#x307F;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;N-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306F;FE&#x306E;gp69&#x3092;&#x9664;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B9;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;FE&#x3002;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;gp120&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B9;&#x3001;N-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3068;N-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5C01;&#x7B52;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x30D5;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#xFF08;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x975E;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#xFF09;&#x3002;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;&#x9846;&#x7C92;&#x88FD;&#x54C1;&#xFF08;CGP&#xFF09;&#x306F;&#x3001;VE&#x306E;gp75&#x306B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E21;&#x751F;&#x985E;&#x306E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5C01;&#x7B52;&#xFF1A;&#x30D2;&#x30AD;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;Arenarum&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x5909;&#x66F4;

&#x5375;&#x9EC4;&#x4FE1;&#x5C01; (VE) &#x5728;&#x65BD;&#x80A5;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6B65;&#x9AA4;&#x4E2D;&#x53C2;&#x52A0;&#x7CBE;&#x5375;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x87FE;&#x870D; arenarum&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x4FE1;&#x5C01;&#x88AB;&#x7EC4;&#x6210;&#x81F3;&#x5C11;&#x56DB;&#x79CD;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5206;&#x5B50;&#x7FA4;&#x4F17;&#x4E0E; 120&#x3001; 75&#x3001; 41&#x3001; 38 kDa &#x548C; 1:1.3:7.4:4.8&#xFF0C;&#x6469;&#x5C14;&#x6BD4;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x88AB;&#x5B64;&#x7ACB;&#x548C;&#x5171;&#x4EF7;&#x952E;&#x8026;&#x5408;&#x5230;&#x7845;&#x70F7;&#x5316;&#x73BB;&#x7483;&#x5E7B;&#x706F;&#x7247;&#xFF0C;&#x7814;&#x7A76;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7ED3;&#x5408;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x8003;&#x8651;&#x6469;&#x5C14;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x7684;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x86CB;&#x4FE1;&#x5C01;&#x4E2D;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5047;&#x5B9A;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x90FD;&#x662F;&#x5355;&#x4EF7;&#x4E3A;&#x7CBE;&#x5B50;&#xFF0C;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x8868;&#x660E; gp41 &#x548C; gp38 &#x62E5;&#x6709; 55 &#x548C;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7ED3;&#x5408;&#x6D3B;&#x52A8;&#x603B;&#x91CF;&#x7684; 25%&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684; gp41 &#x7684;&#x5168;&#x957F; cDNA &#xFF08;ZPC) 486 &#x79CD;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x7528;&#x722A;&#x87FE; ZPC 43.3%&#x540C;&#x6E90;&#x5E8F;&#x5217;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; ZP3 &#x548C;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE; ZPC &#x4E00;&#x6837;&#x87FE;&#x870D; ZPC &#x63D0;&#x4EA4;&#x53CD;&#x6620;&#x5171;&#x540C;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x548C;&#x5206;&#x6CCC;&#x9014;&#x5F84;&#x7684; C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x8DE8;&#x819C;&#x57DF; (TMD) &#x548C;&#x5F17;&#x6797;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6837; (convertase)&#x3002;&#x5982;&#x636E;&#x62A5;&#x9053;&#x4E00;&#x4E9B;&#x9C7C;&#x7C7B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x83B7;&#x5F97;&#x4E86;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x87FE;&#x870D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x90E8;&#x5206; cDNA &#x5E8F;&#x5217;&#x7684; zpc&#x3001; &#x5357;&#x90E8;&#x7684;&#x6C61;&#x70B9;&#x548C;&#x4E8C;&#x7EF4; SDS &#x7684; deglycosylated &#x86CB;&#x4FE1;&#x5C01;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x4E2D;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A; zpc &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x90FD;&#x77E5;&#x9053;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x4E24;&#x6816;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#x7269;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C; zpc &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x89C2;&#x5BDF;&#x3002;

&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5375;&#x9EC4;&#x5305;&#x7EDC;&#x7684;&#x4E24;&#x6816;&#x7C7B;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF1A; ZPC &#x7EC4;&#x4EF6; (gp41) &#x87FE;&#x870D; arenarum &#x4E2D;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

The vitelline envelope (VE) participates in sperm-egg interactions during the first steps of fertilization. In Bufo arenarum, this envelope is composed of at least four glycoproteins, with molecular masses of 120, 75, 41, and 38 kDa and molar ratio of 1:1.3:7.4:4.8, respectively. These components were isolated and covalently coupled to silanized glass slides in order to study their sperm-binding capacity. When considering the molar ratio of the glycoproteins in the egg-envelope and assuming that each protein is monovalent for sperm, the assay showed that gp41 and gp38 possess 55 and 25% of total sperm-binding activity. We obtained a full-length cDNA of gp41 (ZPC), comprising a sequence for 486 amino acids, with 43.3% homology with Xenopus laevis ZPC. As in the case of mammalian ZP3 and Xenopus ZPC, Bufo ZPC presented a furin-like (convertase) and a C-terminal transmembrane domain (TMD) reflecting common biosynthetic and secretory pathways. As it was reported for some fishes, we obtained evidence that suggests the presence of more than one zpc gene in Bufo genome, based on different partial cDNA sequences of zpc, Southern blots and two-dimensional SDS-PAGE of deglycosylated egg-envelope components. As far as we are aware, this is the first observation of the presence of different zpc genes in an Amphibian species.

Glycoproteins of the vitelline envelope of Amphibian oocyte: biological and molecular characterization of ZPC component (gp41) in Bufo arenarum.

L&#x26;#39;enveloppe vitelline (VE) participe dans le sperme d&#x26;#39;&#x153;ufs interactions pendant les premi&#xE8;res &#xE9;tapes de la f&#xE9;condation. Dans Bufo arenarum, cette enveloppe est compos&#xE9;e d&#x26;#39;au moins quatre glycoprot&#xE9;ines, ayant des masses mol&#xE9;culaires de 120, 75, 41, et 38 kDa et le ratio molaire de 1:1.3:7.4:4.8, respectivement. Ces composants ont &#xE9;t&#xE9; isol&#xE9;s et coupl&#xE9; de fa&#xE7;on covalente &#xE0; des lames de verre silanis&#xE9;es afin d&#x26;#39;&#xE9;tudier leur sperme capacit&#xE9; de liaison. Lorsque l&#x26;#39;on consid&#xE8;re le rapport molaire des glycoprot&#xE9;ines dans l&#x26;#39;oeuf-enveloppe et en supposant que chaque prot&#xE9;ine est monovalent pour le sperme, le dosage a montr&#xE9; que la gp41 et GP38 poss&#xE8;dent de 55 &#xE0; 25% du total des spermatozo&#xEF;des activit&#xE9; de liaison. Nous avons obtenu un ADNc pleine longueur de la gp41 (ZPC), comprenant une s&#xE9;quence de 486 acides amin&#xE9;s, avec une homologie de 43,3% avec Xenopus laevis ZPC. Comme dans le cas des mammif&#xE8;res ZP3 et Xenopus ZPC, Bufo ZPC pr&#xE9;sent&#xE9; un domaine de type furine (convertase) et une transmembranaire C-terminal (TMD), refl&#xE9;tant biosynth&#xE9;tique commune et voies de s&#xE9;cr&#xE9;tion. Comme il a &#xE9;t&#xE9; signal&#xE9; pour certains poissons, nous avons obtenu des preuves qui sugg&#xE8;rent la pr&#xE9;sence de plus d&#x26;#39;un g&#xE8;ne dans zpc Bufo g&#xE9;nome, fond&#xE9;e sur diff&#xE9;rentes s&#xE9;quences partielles d&#x26;#39;ADNc de zpc, les transferts de Southern et &#xE0; deux dimensions de SDS-PAGE de d&#xE9;glycosyl&#xE9;es &#x153;uf enveloppe composants. Pour autant que nous sommes conscients, c&#x26;#39;est la premi&#xE8;re observation de la pr&#xE9;sence de diff&#xE9;rents g&#xE8;nes ZPC une esp&#xE8;ce d&#x26;#39;amphibiens.

Glycoprot&#xE9;ines de l&#x26;#39;enveloppe vitelline de l&#x26;#39;ovocyte des amphibiens: caract&#xE9;risation biologique et mol&#xE9;culaire de la composante ZPC (gp41) dans Bufo arenarum

Der Dotter Umschlag (VE) beteiligt sich an Sperma-Ei Interaktionen w&auml;hrend der ersten Schritte der Befruchtung. In Bufo Arenarum diesem Umschlag mindestens vier Glykoproteine, mit molekularen Massen von 120, 75, 41, und 38 kDa und molaren Verh&auml;ltnis von 1:1.3:7.4:4.8, bzw. besteht aus. Diese Komponenten wurden isoliert und kovalent an silanisierte Objekttr&auml;ger gekoppelt, um ihre Spermien-Bindungskapazit&auml;t zu studieren. Wenn das molare Verh&auml;ltnis von Glykoproteinen im Ei-Umschlag in Betracht und Annahme, dass jedes Protein monovalenten f&uuml;r Sperma ist, zeigte der Assay, dass gp41 und gp38 55 und 25 % der Gesamtaktivit&auml;t Sperma-Bindung besitzen. Wir erhalten eine in cDNA von gp41 (ZPC), bestehend aus eine Sequenz f&uuml;r 486 Aminos&auml;uren, mit 43,3 % Homologie mit Xenopus Laevis ZPC. Wie im Falle von S&auml;ugetieren ZP3 und Xenopus ZPC pr&auml;sentierten Bufo ZPC ein Furin-&auml;hnliche (Konvertase) und einer C-terminalen Transmembranegebiet (TMD) reflektieren gemeinsame biosynthetischen und sekretorische Bahnen. Wie es f&uuml;r einige Fische berichtet, erhalten wir Beweise, die das Vorhandensein von mehreren Zpc gen Bufo-Genoms, basierend auf verschiedenen teilweise cDNA-Sequenzen von Zpc, S&uuml;dliche Flecken und zweidimensionalen SDS-PAGE Deglycosylated Ei-Umschlag Komponenten vermuten l&auml;sst. Soweit uns bekannt ist, ist dies die erste Beobachtung der Pr&auml;senz der verschiedenen Zpc-Gene in einer Amphibienarten.

Glykoproteine des Umschlags von Amphibien Eizelle Dotter: biologische und molekulare Charakterisierung der ZPC-Komponente (gp41) in Bufo Arenarum.

La busta vitellina (VE) partecipa alla interazione spermatozoo-uovo durante i primi passi della fecondazione. In Bufo arenarum, questa busta &egrave; composto di almeno quattro delle glicoproteine, con masse molecolari di 120, 75, 41 e 38 kDa e rapporto molare di 1:1.3:7.4:4.8, rispettivamente. Questi componenti sono stati isolati e covalenza accoppiati alle diapositive di vetro silanizzata al fine di studiare la loro capacit&agrave; di sperma-associazione. Quando si considera il rapporto molare di glicoproteine nella busta di uovo e supponendo che ogni proteina &egrave; monovalente per lo sperma, il saggio ha mostrato che gp41 e gp38 possiedono 55 e il 25% del totale degli spermatozoi-associazione attivit&agrave;. Abbiamo ottenuto un full-length cDNA di gp41 (ZPC), costituito da una sequenza di 486 amminoacidi, 43,3% di omologia con Xenopus laevis ZPC. Come nel caso dei mammiferi ZP3 e Xenopus ZPC, Bufo ZPC presentato un simil-furin (convertasi) e un dominio transmembrana del C-terminale (TMD) riflettendo comuni vie biosintetiche e secretive. Come &egrave; stato segnalato per alcuni pesci, abbiamo ottenuto la prova che suggerisce la presenza di pi&ugrave; di un gene zpc nel genoma di Bufo, basato su sequenze diverse parziali del cDNA di zpc, Southern Blot e bidimensionale SDS-PAGE delle componenti di uovo-busta deglycosylated. Per quanto siamo consapevoli, questa &egrave; la prima osservazione della presenza di geni differenti zpc in una specie di anfibi.

Glicoproteine della busta vitellina di ovociti di anfibi: caratterizzazione biologica e molecolare del componente ZPC Bufo arenarum (gp41).

&#x5375;&#x9EC4;&#x5C01;&#x7B52;&#xFF08;VE&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x53D7;&#x7CBE;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x7CBE;&#x5B50; - &#x5375;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x53C2;&#x52A0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D2;&#x30AD;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;arenarum&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5C01;&#x7B52;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;120&#x306E;&#x5927;&#x8846;&#x3001;75&#x3001;41&#x3001;38 kDa&#x3068;1:1.3:7.4:4.8&#x306E;&#x30E2;&#x30EB;&#x6BD4;&#x3067;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;4&#x3064;&#x306E;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x5171;&#x6709;&#x7D50;&#x5408;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7D50;&#x5408;&#x80FD;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30B7;&#x30E9;&#x30F3;&#x5316;&#x30AC;&#x30E9;&#x30B9;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x5375;&#x5C01;&#x7B52;&#x306E;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30E2;&#x30EB;&#x6BD4;&#x3092;&#x8003;&#x616E;&#x3057;&#x3001;&#x5404;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E00;&#x4FA1;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;gp41&#x304A;&#x3088;&#x3073;gp38&#x304C;55&#x200B;&#x200B;&#x3001;&#x7DCF;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7D50;&#x5408;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;25&#xFF05;&#x3092;&#x6240;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;ZPC&#x3068;43.3&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x3067;&#x3001;486&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;gp41&#x306E;&#xFF08;ZPC&#xFF09;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x9577;cDNA&#x3092;&#x5F97;&#x305F;&#x3002;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;ZP3&#x3068;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;ZPC&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x30D2;&#x30AD;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;ZPC&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x3068;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x305F;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#xFF08;&#x8EE2;&#x63DB;&#xFF09;&#x3068;C&#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF08;TMD&#xFF09;&#x3092;&#x767A;&#x8868;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x9B5A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;ZPC&#x306E;&#x5225;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;cDNA&#x914D;&#x5217;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30B6;&#x30F3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8131;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B7;&#x30EB;&#x5316;&#x5375;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x6210;&#x5206;&#x306E;&#x4E8C;&#x6B21;&#x5143;SDS-PAGE&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30D2;&#x30AD;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x5185;&#x306B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;ZPC&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3059;&#x308B;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x5F97;&#x305F;&#x3002;&#x9650;&#x308A;&#x6211;&#x3005;&#x304C;&#x77E5;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x4E21;&#x751F;&#x985E;&#x7A2E;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;ZPC&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

&#x30D2;&#x30AD;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;Arenarum&#x306E;ZPC&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#xFF08;gp41&#xFF09;&#x3092;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x5B50;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#xFF1A;&#x4E21;&#x751F;&#x985E;&#x306E;&#x5375;&#x306E;&#x5375;&#x9EC4;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;

Vitelline &#xBD09;&#xD22C; (VE) &#xC218;&#xC815;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB2E8;&#xACC4; &#xB3D9;&#xC548; &#xC815;&#xC790;-&#xADF8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;. Bufo arenarum&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xBD09;&#xD22C;&#xB294; &#xAC01;&#xAC01; 120, 75, 41, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; 38 Kda&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBC0F; 1:1.3:7.4:4.8, &#xC5B4; &#xAE08; &#xB2C8; &#xBE44;&#xC728;&#xC774; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C; 4 &#xAC1C;&#xC758; glycoproteins&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#x70AD; silanized &#xC720;&#xB9AC; &#xC2AC;&#xB77C;&#xC774;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xC815;&#xC790; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC6A9;&#xB7C9;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xACB0;&#xD569;. &#xB2EC;&#xAC40; &#xBD09;&#xD22C;&#xC5D0; glycoproteins&#xC758; &#xC5B4; &#xAE08; &#xB2C8; &#xBE44;&#xC728;&#xC744; &#xACE0;&#xB824; &#xD558; &#xACE0; &#xAC01; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC;&#xCC28;&#xB840; &#xACE0; &#xAC00;&#xC815;&#xD560; gp41 &#xBC0F; gp38 55 &#xBC0F; &#xCD1D; &#xC815;&#xC790; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC791;&#xC5C5;&#xC758; 25% &#xBCF4;&#xC720; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xAC00; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; gp41&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774;&#xC758; Cdna&#xB97C; &#xCDE8;&#xB4DD; (z p C), 486 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; 43.3%&#xC758; homology Xenopus laevis z p C&#xC640;&#xC640; &#xB300; &#xD55C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAD6C;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; ZP3 Xenopus z p C&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0; &#xCC98;&#xB7FC; Bufo z p C furin &#xAC19;&#xC740; (convertase) &#xB2E8;&#xC790; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; (TMD) &#xACF5;&#xD1B5; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xBC0F; &#xBD84; &#xACBD;&#xB85C; &#xBC18;&#xC601;&#xC744; &#xC81C;&#xC2DC;. &#xC77C;&#xBD80; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xB294;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5BB;&#xC740; Bufo &#xAC8C;&#xB188;, z p c, &#xB0A8;&#xBD80;&#xB3C4; &#xB9D0; &#xBC0F; deglycosylated &#xACC4;&#xB780; &#xBD09;&#xD22C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; 2 &#xCC28;&#xC6D0; SDS &#xD398;&#xC774;&#xC9C0;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xBD80;&#xBD84; cDNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xAE30;&#xBC18;&#xC5D0; &#xB450; &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; z p c &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC0AC;&#xD558;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC54C;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;, &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xC218; &#xB959; &#xC591;&#xC6A9; &#xC885;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; z p c &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xAD00;&#xCC30; &#xC774;&#xB2E4;.

&#xC591;&#xC11C;&#xB958; oocyte vitelline &#xBD09;&#xD22C;&#xC758; glycoproteins: z p C &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; (gp41) Bufo arenarum&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; &#xD2B9;&#xC131;.

La envoltura vitelina (VE) participa en las interacciones de huevo de esperma en los primeros pasos de la fecundaci&#xF3;n. En Bufo arenarum, esta envoltura se compone de al menos cuatro glicoprote&#xED;nas, con masas moleculares de 120, 75, 41 y 38 kDa y la relaci&#xF3;n molar de 1:1.3:7.4:4.8, respectivamente. Estos componentes se aislaron y se acopla covalentemente a portaobjetos de vidrio silanizados con el fin de estudiar su capacidad de uni&#xF3;n de esperma. Al considerar la relaci&#xF3;n molar de las glicoprote&#xED;nas de la envoltura de huevo y suponiendo que cada prote&#xED;na es monovalente de los espermatozoides, el ensayo mostr&#xF3; que la gp41 y GP38 poseen 55 y 25% del total de esperma actividad de uni&#xF3;n. Se obtuvo un ADNc de longitud completa de la gp41 (PCC), que comprende una secuencia de 486 amino&#xE1;cidos, con 43,3% de homolog&#xED;a con Xenopus laevis PCC. Como en el caso de los mam&#xED;feros y ZP3 ZPC Xenopus, Bufo ZPC presenta un dominio tipo furina (convertasa) y un C-terminal de transmembrana (TMD) que refleja biosint&#xE9;tico com&#xFA;n y v&#xED;as de secreci&#xF3;n. Como se inform&#xF3; por algunos peces, se obtuvo evidencia que sugiere la presencia de m&#xE1;s de un gen ZPC en Bufo genoma, basado en diferentes secuencias parciales de ADNc de ZPC, transferencias Southern y de dos dimensiones de SDS-PAGE de desglicosiladas envoltura de huevo componentes. Por lo que sabemos, esta es la primera observaci&#xF3;n de la presencia de diferentes genes de la ZPC en una especie de anfibios.

Las glicoprote&#xED;nas de la envoltura vitelina de los ovocitos de anfibios: caracterizaci&#xF3;n biol&#xF3;gica y molecular de los componentes ZPC (gp41) en Bufo arenarum

Au cours du d&#xE9;veloppement, Sonic hedgehog (Shh) r&#xE9;gule la prolif&#xE9;ration des pr&#xE9;curseurs de neurones du cervelet granules (PNB) en partie via l&#x26;#39;expression de NMYC. Des mutations dans la voie de signalisation de Shh conduire &#xE0; des tumeurs c&#xE9;r&#xE9;brales chez les souris et les humains. Nous avons r&#xE9;cemment identifi&#xE9; un nouveau r&#xF4;le pour l&#x26;#39;MAD3 membre de la famille Mad dans le PNB prolif&#xE9;ration et l&#x26;#39;expression NMYC. Fait int&#xE9;ressant, l&#x26;#39;expression est r&#xE9;gul&#xE9;e positivement MAD3 dans des mod&#xE8;les murins de m&#xE9;dulloblastome, la tumeur du cerveau la plus fr&#xE9;quente chez les enfants. Ces r&#xE9;sultats sont surprenants, car les mod&#xE8;les actuels sugg&#xE8;rent que les prot&#xE9;ines Mad devrait s&#x26;#39;opposer prot&#xE9;ines Myc par la concurrence pour la liaison directe de l&#x26;#39;ADN par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire d&#x26;#39;h&#xE9;t&#xE9;rodim&#xE9;risation Max pour inhiber la prolif&#xE9;ration cellulaire et la progression de la tumeur potentiellement. Ici, nous discutons de nos travaux r&#xE9;cents dans le contexte de candidats MAD3-interaction des prot&#xE9;ines et MAD3 expression dans les tumeurs du cerveau humain qui, ensemble, de sugg&#xE9;rer des perspectives int&#xE9;ressantes dans le r&#xF4;le de MAD3 dans la prolif&#xE9;ration cellulaire et la tumorigen&#xE8;se.

De prolif&#xE9;ration c&#xE9;r&#xE9;belleuse &#xE0; la tumorigen&#xE8;se: de nouvelles perspectives sur le r&#xF4;le de la MAD3

W&auml;hrend der Entwicklung regelt Sonic Hedgehog (Shh) die Verbreitung von Kleinhirn Untermodul Neuron Vorstufen (BSP) teilweise durch den Ausdruck von Nmyc. Mutationen in der Shh Signalisierung Weg f&uuml;hren zu Hirntumoren bei M&auml;usen und Menschen. Wir haben vor kurzem eine neue Rolle f&uuml;r das Mad Familienmitglied Mad3 in GNP Proliferation und Nmyc Ausdruck identifiziert. Interessanterweise ist Mad3 Ausdruck herraufreguliert in Mausmodelle von Medulloblastom, die h&auml;ufigsten Hirntumoren bei Kindern. Diese Ergebnisse sind &uuml;berraschend, weil die derzeitige Modelle zeigen, dass Mad Proteine Myc-Proteine durch Konkurrenz f&uuml;r direkte DNA-Bindung &uuml;ber Max Heterodimerization zellul&auml;re Proliferation und potenziell Tumor Fortschreiten hemmen ver&auml;rgern sollte. Hier diskutieren wir unsere j&uuml;ngsten Arbeiten im Rahmen der Kandidat Mad3-Interaktion Proteine und Mad3 Ausdruck im menschlichen Gehirn-Tumoren, die interessante Einblicke in die Rolle des Mad3 in zellul&auml;re Proliferation und Tumorentstehung zusammen schlagen.

Von Kleinhirn Verbreitung zu Tumorentstehung: neue Einblicke in die Rolle des Mad3.

Durante lo sviluppo, Sonic hedgehog (Shh) regola la proliferazione dei precursori di neuroni cerebellari granulo (PNL) in parte tramite l&#39;espressione di Nmyc. Mutazioni di Shh signaling pathway causano tumori cerebrali nei topi ed esseri umani. Recentemente abbiamo identificato un nuovo ruolo per il membro della famiglia Mad Mad3 in proliferazione GNP e Nmyc espressione. &Egrave; interessante notare che, espressione di Mad3 &egrave; sovraregolati in modelli murini di medulloblastoma, il pi&ugrave; comune tumore al cervello nei bambini. Questi risultati sono sorprendenti, perch&eacute; i modelli correnti suggeriscono che proteine Mad dovrebbero inimicarsi le proteine Myc dalla concorrenza per il binding diretto del DNA tramite Max heterodimerization inibire la proliferazione cellulare e, potenzialmente, progressione del tumore. Discutiamo qui, nostro recente lavoro nel contesto delle proteine interagenti Mad3 candidato e Mad3 espressione nei tumori del cervello umano che insieme suggeriscono spunti interessanti nel ruolo di Mad3 nella proliferazione cellulare e tumorigenesi.

Da proliferazione cerebellare di tumorigenesi: new insights into il ruolo di Mad3.

&#x958B;&#x767A;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30BD;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0;&#xFF08;Shh&#xFF09;&#x306F;Nmyc&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4E00;&#x90E8;&#x306E;&#x5C0F;&#x8133;&#x9846;&#x7C92;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#xFF08;GNPs&#xFF09;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30BD;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x91CE;&#x515A;&#x30CF;&#x30F3;&#x30CA;&#x30E9;&#x515A;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;Nmyc&#x5F0F;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C9;&#x5BB6;&#x65CF;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;Mad3&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;Mad3&#x5F0F;&#x306F;&#x9AC4;&#x82BD;&#x816B;&#x3001;&#x5C0F;&#x5150;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x8133;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x5927;&#x306E;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x76F4;&#x63A5;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x7AF6;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x308A;Myc&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x62EE;&#x6297;&#x3059;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x816B;&#x760D;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;Mad3&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x5019;&#x88DC;Mad3-&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;Mad3&#x5F0F;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Mad3&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6D1E;&#x5BDF;&#xFF1A;&#x816B;&#x760D;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5C0F;&#x8133;&#x6838;&#x62E1;&#x6563;&#x304B;&#x3089;

&#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC18C;&#xB2C9; &#xB354; &#xD5E4;&#xC9C0;&#xD638;&#xADF8; (Shh) &#xC870;&#xC808; &#xC18C; &#xB1CC;&#xACFC; &#xB9BD; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC120;&#xAD6C;&#xC790; (GNPs)&#xC758; &#xD655;&#xC0B0; &#xC77C;&#xBD80; Nmyc&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574;. &#xC26C;&#xC774; &#xC787; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD;&#xC950;&#xC640; &#xC778;&#xAC04; &#xB450;&#xB1CC; &#xC885;&#xC591;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCD5C;&#xADFC; &#xBBF8;&#xCE5C; &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; mad3&#xACFC; Nmyc &#xC2DD; &#xD55C;&#xB098;&#xB77C;&#xB2F9; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, Mad3 &#xC2DD;&#xC740; medulloblastoma, &#xC544;&#xC774; &#xB4E4;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xB1CC;&#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; upregulated&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC; &#xBAA8;&#xB378; &#xD654;&#xAC00; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xACFC; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xC9C4;&#xD589;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xCD5C;&#xB300; heterodimerization &#xD1B5;&#xD574; &#xC9C1;&#xC811; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC704;&#xD55C; &#xACBD;&#xC7C1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; Myc &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xBC18;&#xB300; &#xD55C;&#xB2E4;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB180;&#xB77C;&#xC6B4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD6C4;&#xBCF4; Mad3 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC791;&#xC5C5;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xACFC; tumorigenesis&#xC5D0;&#xC11C; mad3&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD765;&#xBBF8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC778;&#xAC04; &#xB450;&#xB1CC; &#xC885;&#xC591;&#xC758; Mad3 &#xC2DD; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD1A0;&#xB860;.

Tumorigenesis &#xD558; &#xC18C; &#xB1CC; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0;&#xC11C;: mad3&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;.

Durante el desarrollo, Sonic hedgehog (Shh) regula la proliferaci&#xF3;n de los precursores de los gr&#xE1;nulos del cerebelo neurona (PNB), en parte, a trav&#xE9;s de la expresi&#xF3;n de NMYC. Las mutaciones en la v&#xED;a de se&#xF1;alizaci&#xF3;n de Shh dar lugar a los tumores cerebrales en ratones y seres humanos. Recientemente hemos identificado un nuevo papel para el MAD3 miembro de la familia en el PNB Mad proliferaci&#xF3;n y la expresi&#xF3;n NMYC. Curiosamente, la expresi&#xF3;n MAD3 est&#xE1; incrementada en los modelos de rat&#xF3;n de meduloblastoma, el tumor cerebral m&#xE1;s com&#xFA;n en los ni&#xF1;os. Estos resultados son sorprendentes ya que los modelos actuales sugieren que las prote&#xED;nas Mad debe antagonizar prote&#xED;nas Myc por la competencia por la uni&#xF3;n directa del ADN a trav&#xE9;s de heterodimerizaci&#xF3;n Max para inhibir la proliferaci&#xF3;n celular y la progresi&#xF3;n del tumor potencialmente. En este caso, hablamos de nuestro trabajo reciente en el contexto de candidatos que interact&#xFA;an las prote&#xED;nas y MAD3 MAD3 expresi&#xF3;n en los tumores cerebrales humanos que en conjunto sugieren ideas interesantes sobre el papel de MAD3 en la proliferaci&#xF3;n celular y tumorig&#xE9;nesis.

Desde proliferaci&#xF3;n cerebeloso a la tumorig&#xE9;nesis: Nuevos conocimientos sobre el papel de la MAD3

&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x671F;&#x95F4;&#xFF0C;&#x58F0;&#x6CE2;&#x523A;&#x732C; (Shh) &#x89C4;&#x8303;&#x5C0F;&#x8111;&#x9897;&#x7C92;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x524D;&#x4F53; (&#x6838;&#x7535;&#x7AD9;) &#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x90E8;&#x5206;&#x901A;&#x8FC7; Nmyc &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x5728; Shh &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5C0F;&#x9F20;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x8111;&#x80BF;&#x7624;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x75AF;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458; Mad3 &#x56FD;&#x6C11;&#x751F;&#x4EA7;&#x603B;&#x503C;&#x6269;&#x6563;&#x548C; Nmyc &#x8868;&#x8FBE;&#x6700;&#x8FD1;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;Mad3 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x662F;&#x9AD3;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624;&#xFF0C;&#x5728;&#x513F;&#x7AE5;&#x4E2D;&#x6700;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x8111;&#x80BF;&#x7624;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x589E;&#x9AD8;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x662F;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x60CA;&#x8BB6;&#x7684;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5F53;&#x524D;&#x6A21;&#x578B;&#x8868;&#x660E;&#x75AF;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5E94;&#x5BF9;&#x6297; Myc &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ADE;&#x4E89;&#x76F4;&#x63A5; DNA &#x7ED1;&#x5B9A; Max heterodimerization &#x901A;&#x8FC7;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x6F5C;&#x5728;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x5728;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA; Mad3 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x86CB;&#x767D;&#x65B9;&#x9762;&#x548C; Mad3 &#x4E00;&#x8D77;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x53D1;&#x751F;&#x7684; Mad3 &#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x771F;&#x77E5;&#x707C;&#x89C1;&#x7684;&#x4EBA;&#x8111;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

&#x4ECE;&#x5411;&#x80BF;&#x7624;&#x53D1;&#x751F;&#x5C0F;&#x8111;&#x6269;&#x6563;&#xFF1A; Mad3 &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x65B0;&#x89C1;&#x89E3;&#x3002;

During development, Sonic hedgehog (Shh) regulates the proliferation of cerebellar granule neuron precursors (GNPs) in part via expression of Nmyc. Mutations in the Shh signaling pathway lead to brain tumors in mice and humans. We have recently identified a novel role for the Mad family member Mad3 in GNP proliferation and Nmyc expression. Interestingly, Mad3 expression is upregulated in mouse models of medulloblastoma, the most common brain tumor in children. These results are surprising because current models suggest that Mad proteins should antagonize Myc proteins by competition for direct DNA binding via Max heterodimerization to inhibit cellular proliferation and potentially tumor progression. Here, we discuss our recent work in the context of candidate Mad3-interacting proteins and Mad3 expression in human brain tumors that together suggest interesting insights into the role of Mad3 in cellular proliferation and tumorigenesis.

From cerebellar proliferation to tumorigenesis: new insights into the role of Mad3.

&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x671F;&#x95F4;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x4E86;&#x7CBE;&#x786E;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x548C;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x8FDE;&#x63A5;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5728;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684; AMPA &#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x7A81;&#x89E6;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x671F;&#x95F4;&#x8D29;&#x5356;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x65B9;&#x9762;&#x53D6;&#x5F97;&#x4E86;&#x91CD;&#x5927;&#x8FDB;&#x5C55;&#xFF0C;&#x5C11;&#x77E5;&#x5728;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x62DB;&#x8058; AMPA &#x53D7;&#x4F53;&#x5BF9;&#x65B0;&#x751F;&#x795E;&#x7ECF;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x51FA;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x4E2D;&#x6E38;&#x79BB;&#x7684;&#x5927;&#x9F20;&#x6D77;&#x9A6C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7A81;&#x89E6; AMPA &#x53D7;&#x4F53;&#x542B;&#x91CF;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E8C;&#x8DE8;&#x819C;&#x86CB;&#x767D; (SynDIG1)&#x3002;SynDIG1 colocalizes &#x4E0E; AMPA &#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x7A81;&#x89E6;&#x548C; extrasynaptic &#x7F51;&#x7AD9;&#x548C;&#x540C;&#x4F19;&#x4E0E; AMPA &#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x5F02;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x8111;&#x4E2D;&#x3002;&#x6539;&#x53D8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5174;&#x594B;&#x6027;&#x7A81;&#x89E6;&#x6570;&#x91CF;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x663E;&#x8457;&#x53D8;&#x5316;&#x5BFC;&#x81F4; SynDIG1 &#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;SynDIG1 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x80DE;&#x5916; C &#x603B;&#x7AD9; AMPA &#x53D7;&#x4F53;&#x7ED3;&#x5408;&#x3002;&#x8010;&#x4EBA;&#x5BFB;&#x5473;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;SynDIG1 &#x5185;&#x5BB9;&#x4E2D;&#x6811;&#x7A81;&#x68D8;&#x662F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5B9A;&#x4E49; SynDIG1 &#x4E3A;&#x8C03;&#x8282;&#x5174;&#x594B;&#x6027;&#x7A81;&#x89E6;&#x53D1;&#x5C55;&#x6D3B;&#x52A8;&#x89C4;&#x8303;&#x8DE8;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;

SynDIG1&#xFF1A; &#x6D3B;&#x52A8;&#x89C4;&#x8303;&#x3001; AMPA &#x53D7;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x8DE8;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x8C03;&#x8282;&#x5174;&#x594B;&#x6027;&#x7A81;&#x89E6;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

During development of the central nervous system, precise synaptic connections between presynaptic and postsynaptic neurons are formed. While significant progress has been made in our understanding of AMPA receptor trafficking during synaptic plasticity, less is known about the molecules that recruit AMPA receptors to nascent synapses during synaptogenesis. Here we identify a type II transmembrane protein (SynDIG1) that regulates AMPA receptor content at developing synapses in dissociated rat hippocampal neurons. SynDIG1 colocalizes with AMPA receptors at synapses and at extrasynaptic sites and associates with AMPA receptors in heterologous cells and brain. Altered levels of SynDIG1 in cultured neurons result in striking changes in excitatory synapse number and function. SynDIG1-mediated synapse development is dependent on association with AMPA receptors via its extracellular C terminus. Intriguingly, SynDIG1 content in dendritic spines is regulated by neuronal activity. Altogether, we define SynDIG1 as an activity-regulated transmembrane protein that regulates excitatory synapse development.

SynDIG1: an activity-regulated, AMPA- receptor-interacting transmembrane protein that regulates excitatory synapse development.

Durante el desarrollo del sistema nervioso central, precisas conexiones sin&#xE1;pticas entre las neuronas presin&#xE1;pticos y postsin&#xE1;pticos se forman. Si bien los progresos se han realizado importantes en nuestra comprensi&#xF3;n de la trata de receptores AMPA en la plasticidad sin&#xE1;ptica, se sabe menos sobre las mol&#xE9;culas que reclutan a los receptores AMPA en las sinapsis incipientes durante la sinaptog&#xE9;nesis. Aqu&#xED; identificamos una prote&#xED;na transmembrana de tipo II (SynDIG1) que regula el contenido de los receptores AMPA en las sinapsis de las neuronas en desarrollo de hipocampo de rata disociados. SynDIG1 colocalizes con los receptores AMPA en las sinapsis y en los sitios extrasin&#xE1;pticos y asociados con los receptores AMPA en c&#xE9;lulas heter&#xF3;logas y el cerebro. Los niveles alterados de SynDIG1 resultado en las neuronas cultivadas en cambios notables en el n&#xFA;mero de sinapsis excitadoras y otras funciones. Desarrollo de la sinapsis SynDIG1 mediada depende de la asociaci&#xF3;n con los receptores AMPA extracelular a trav&#xE9;s de su extremo C terminal. Curiosamente, SynDIG1 contenido en las espinas dendr&#xED;ticas est&#xE1; regulada por la actividad neuronal. En total, se define como un SynDIG1 prote&#xED;na transmembrana la actividad regulada que regula el desarrollo de la sinapsis excitatoria.

SynDIG1: una actividad regulada, AMPA del receptor que interact&#xFA;a con la prote&#xED;na transmembrana que regula el desarrollo sinapsis excitatoria

Au cours du d&#xE9;veloppement du syst&#xE8;me nerveux central, pr&#xE9;cises connexions synaptiques entre les neurones pr&#xE9;synaptiques et postsynaptiques sont form&#xE9;s. Bien que des progr&#xE8;s significatifs ont &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;alis&#xE9;s dans notre compr&#xE9;hension de la traite des r&#xE9;cepteurs AMPA au cours plasticit&#xE9; synaptique, on en sait moins sur les mol&#xE9;cules qui recrutent r&#xE9;cepteurs AMPA aux synapses naissantes au cours de la synaptogen&#xE8;se. Ici, nous identifier une prot&#xE9;ine transmembranaire de type II (SynDIG1) qui r&#xE9;glemente la teneur en r&#xE9;cepteurs AMPA au niveau des synapses des neurones de rat en d&#xE9;veloppement dans l&#x26;#39;hippocampe dissoci&#xE9;es. SynDIG1 co-localise avec les r&#xE9;cepteurs AMPA au niveau des synapses et sur les sites extrasynaptiques et associ&#xE9;s avec des r&#xE9;cepteurs AMPA dans les cellules h&#xE9;t&#xE9;rologues et le cerveau. Les perturbations des taux SynDIG1 dans le r&#xE9;sultat des neurones en culture dans des changements frappants dans le num&#xE9;ro synapse excitatrice et de la fonction. Le d&#xE9;veloppement des synapses SynDIG1 m&#xE9;diation d&#xE9;pend de l&#x26;#39;association avec les r&#xE9;cepteurs AMPA via son C terminale extracellulaire. Curieusement, SynDIG1 contenu dans les &#xE9;pines dendritiques est r&#xE9;glement&#xE9;e par l&#x26;#39;activit&#xE9; neuronale. Au total, nous d&#xE9;finissons comme un SynDIG1 prot&#xE9;ine transmembranaire activit&#xE9; r&#xE9;glement&#xE9;e qui r&#xE9;gule le d&#xE9;veloppement des synapses excitatrices.

SynDIG1: une activit&#xE9; r&#xE9;glement&#xE9;e, prot&#xE9;ine transmembranaire AMPA Receptor-interacting qui r&#xE9;glemente le d&#xE9;veloppement synapse excitatrice

W&auml;hrend der Entwicklung des zentralen Nervensystems werden pr&auml;zise synaptische Verbindungen zwischen den pr&auml;synaptischen und postsynaptisches Neuronen gebildet. W&auml;hrend bedeutende Fortschritte in unserem Verst&auml;ndnis des AMPA-Rezeptors Menschenhandel w&auml;hrend synaptische Plastizit&auml;t bekannt kleiner &uuml;ber die Molek&uuml;le, die AMPA-Rezeptoren auf entstehende Synapsen w&auml;hrend Synaptogenese zu rekrutieren. Hier erkennen wir einen Typ II Transmembranprotein (SynDIG1), der AMPA-Rezeptor Inhalte auf die Entwicklung der Synapsen in getrennten Ratte Neuronen reguliert. SynDIG1 colocalizes mit AMPA-Rezeptoren an Synapsen und extrasynaptic Websites and Associates mit AMPA-Rezeptoren in heterologe Zellen und Gehirn. Konzentrationen von SynDIG1 in kultivierten Neuronen f&uuml;hren zu markanten Ver&auml;nderungen in exzitatorischen Synapse Anzahl und Funktion ver&auml;ndert. SynDIG1-vermittelte Synapse Entwicklung h&auml;ngt mit AMPA-Rezeptoren &uuml;ber seine extrazellul&auml;ren Carboxyl-Terminus. Interessanterweise wird SynDIG1 Inhalt in dendritische Dornen durch neuronale Aktivit&auml;t reguliert. Insgesamt definieren wir SynDIG1 als eine Aktivit&auml;t reguliert Transmembranprotein, das die Entwicklung von exzitatorischen Synapse reguliert.

SynDIG1: eine Aktivit&auml;t reguliert, AMPA-Rezeptor-Interaktion Transmembranprotein, das die Entwicklung von exzitatorischen Synapse reguliert.

Durante lo sviluppo del sistema nervoso centrale, sono formate precise connessioni sinaptiche tra neuroni presinaptico e postsinaptici. Mentre ha compiuto significativi progressi nella nostra comprensione del recettore AMPA traffico durante la plasticit&agrave; sinaptica, meno &egrave; noto circa le molecole che reclutano i recettori AMPA al nascente sinapsi durante pervasivi. Qui ci identifichiamo una tipo II proteina transmembrana (SynDIG1) che regola il contenuto del recettore AMPA allo sviluppo di sinapsi in neuroni ippocampali ratto dissociata. SynDIG1 colocalizza con i recettori AMPA alla sinapsi e siti extrasynaptic e soci con i recettori AMPA eterologa delle cellule e del cervello. Alterati livelli di SynDIG1 nel risultato di neuroni coltivati sorprendenti cambiamenti nel numero di sinapsi eccitatorie e funzione. Sviluppo di sinapsi SynDIG1-mediata dipende dall&#39;associazione con i recettori AMPA via capolinea C extracellulare. Curiosamente, SynDIG1 contenuto nelle spine dendritiche &egrave; regolata dall&#39;attivit&agrave; neuronale. Complessivamente, definiamo SynDIG1 una proteina transmembrana attivit&agrave; regolamentate che regola lo sviluppo di sinapsi eccitatorie.

SynDIG1: un&#39;attivit&agrave; regolamentata, AMPA-receptor-interacting proteina transmembrana che regola lo sviluppo di sinapsi eccitatorie.

&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F8C;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x9593;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x7D50;&#x5408;&#x304C;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x9032;&#x5C55;&#x304C;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x306E;&#x9593;&#x306B;AMPA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x304C;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x6642;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x671F;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x30EA;&#x30AF;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8;AMPA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x89E3;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x6D77;&#x99AC;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3067;AMPA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x542B;&#x6709;&#x91CF;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;II&#x578B;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;SynDIG1&#xFF09;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; SynDIG1&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x7A2E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x8133;&#x306E;AMPA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;AMPA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x8208;&#x596E;&#x6027;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x6570;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x8457;&#x3057;&#x3044;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;SynDIG1&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3002; SynDIG1&#x4ECB;&#x5728;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;C&#x672B;&#x7AEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;AMPA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x68D8;&#x306E;SynDIG1&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C4;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x8208;&#x596E;&#x6027;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;SynDIG1&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

SynDIG1&#xFF1A;&#x8208;&#x596E;&#x6027;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x6D3B;&#x6027;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3001;AMPA&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;

&#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; presynaptic&#xACFC; postsynaptic &#xB274;&#xB7F0; &#xAC04;&#xC758; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xD615;&#xC131; &#xB41C;&#xB2E4;. AMPA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xAC00; &#xC18C;&#xC131; &#xC911; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xC5D0; &#xD070; &#xC9C4;&#xC804;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC801;&#xC740; synaptogenesis &#xB3D9;&#xC548; AMPA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xCD08;&#xAE30; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xB97C; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC720;&#xD615; II &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (SynDIG1) &#xAC1C;&#xBC1C; &#xCC9C;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC950; hippocampal &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; AMPA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20;&#xB97C; &#xADDC;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. SynDIG1 colocalizes heterologous &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xB450;&#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; AMPA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640; AMPA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC640; extrasynaptic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; &#xB3D9;&#xB8CC;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;. &#xC218;&#xC900;&#xC758; SynDIG1 &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xB274;&#xB7F0; &#xD765;&#xBD84; &#xC131;&#xC758; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC22B;&#xC790;&#xC640; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xACBD;. SynDIG1 &#xC911;&#xC7AC; &#xB0C5; &#xAC1C;&#xBC1C; AMPA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; C &#xB9D0;&#xB2E8;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5F0;&#xAD00;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE00;, SynDIG1 &#xCF58;&#xD150;&#xCE20; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xCABD;&#xC774; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB450;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD765;&#xBD84; &#xC131;&#xC758; &#xB0C5; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xD65C;&#xB3D9; &#xADDC;&#xC81C; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; Syndig1&#xB97C; &#xC815;&#xC758; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

SynDIG1: &#xD55C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xADDC;&#xC81C;, AMPA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC791;&#xC6A9; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD765;&#xBD84; &#xC131;&#xC758; &#xB0C5; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xADDC;&#xC81C;.

&#x5DE6;-&#x53F3; (LR) &#x8F74;&#x7684;&#x4E00;&#x81F4;&#x4E0D;&#x5BF9;&#x79F0;&#x662F;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x65B9;&#x9762;&#x3002;&#x4E0D;&#x5BF9;&#x79F0;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5DE6;&#x5916;&#x4FA7;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x677F;&#x4E2D;&#x7684; TGF&beta; &#x5BB6;&#x65CF;&#x6210;&#x5458;&#x8282;&#x70B9;&#x76F8;&#x5173; 1 (Nr1) &#x662F;&#x8C03;&#x8282;&#x5FC3;&#x810F;&#x548C;&#x5185;&#x810F;&#x7684;&#x6240;&#x5728;&#x5730;&#x9AD8;&#x4FDD;&#x5B88;&#x4E00;&#x6B65;&#x3002;&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x3001; &#x4EA7;&#x5987;&#x8840;&#x6E05;&#x7D20; (5HT) &#x901A;&#x8FC7;&#x7F1D;&#x9699;&#x8DEF;&#x5F84;&#x5288;&#x88C2;&#x9636;&#x6BB5;&#x8FD0;&#x52A8;&#x8981;&#x6C42;&#x4E0A;&#x6E38; Nr1 &#x7684;&#x4E0D;&#x5BF9;&#x79F0;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x94FE;&#x63A5;&#x4E0E;&#x6B64;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x70B9;&#x65E9;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x4E0D;&#x5BF9;&#x79F0;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x5E76;&#x4E0D;&#x4E86;&#x89E3;&#x3002;

&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x53BB;&#x4E59;&#x9170;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x662F;&#x5DE6;-&#x53F3;&#x9635;&#x5217;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;

Consistent asymmetry of the left-right (LR) axis is a crucial aspect of vertebrate embryogenesis. Asymmetric gene expression of the TGFÎ² superfamily member Nodal related 1 (Nr1) in the left lateral mesoderm plate is a highly conserved step regulating the situs of the heart and viscera. In Xenopus, movement of maternal serotonin (5HT) through gap-junctional paths at cleavage stages dictates asymmetry upstream of Nr1. However, the mechanisms linking earlier biophysical asymmetries with this transcriptional control point are not known.

Histone deacetylase activity is necessary for left-right patterning during vertebrate development.

Conform&#xE9;ment asym&#xE9;trie de la gauche-droite (LR) l&#x26;#39;axe est un aspect crucial de l&#x26;#39;embryogen&#xE8;se chez les vert&#xE9;br&#xE9;s. L&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes asym&#xE9;trique du membre de la superfamille TGF&#xDF; Nodal li&#xE9;e 1 (Nr1) dans la plaque de m&#xE9;soderme lat&#xE9;ral gauche est une &#xE9;tape hautement conserv&#xE9;e de r&#xE9;gulation du situs du c&#x153;ur et les visc&#xE8;res. En Xenopus, le mouvement de la s&#xE9;rotonine maternelle (5HT) dans une lacune-jonctionnels chemins de diktats stades de clivage en amont de l&#x26;#39;asym&#xE9;trie Nr1. Cependant, les m&#xE9;canismes qui relient les asym&#xE9;tries t&#xF4;t biophysiques avec ce point de contr&#xF4;le de la transcription ne sont pas connus.

Activit&#xE9; histone d&#xE9;ac&#xE9;tylase est n&#xE9;cessaire pour gauche-droite au cours du d&#xE9;veloppement des vert&#xE9;br&#xE9;s Mod&#xE9;lisation

Konsistente Asymmetrie der Links-Rechts-Achse (LR) ist ein wesentlicher Aspekt der Wirbeltiere Embryogenese. Asymmetrische Genexpression ender TGF&beta; &Uuml;berfamilie Nodal Verwandte 1 (Nr1) in der linken seitlichen Mesoderm-Platte ist ein stark konservierten Schritt, die Regulierung der Situs des Herzens und der Eingeweide. In Xenopus bestimmt die Bewegung der m&uuml;tterlichen Serotonin (5HT) durch L&uuml;cke-junktionale Pfade auf Spaltung Stufen Asymmetrie stromaufw&auml;rts der Nr1. Allerdings sind die Mechanismen, die Verkn&uuml;pfung von fr&uuml;her biophysikalische Asymmetrien mit diesem transkriptionelle Kontrollpunkt nicht bekannt.

Histon Deacetylase T&auml;tigkeit ist f&uuml;r Links-rechts-Musterung w&auml;hrend der vertebrate Entwicklung notwendig.

Asimmetria coerenza dell&#39;asse sinistra-destra (LR) &egrave; un aspetto cruciale dell&#39;embriogenesi vertebrato. Espressione genica asimmetrica del membro Superfamiglia TGF&beta; 1 correlati nodale (Nr1) nella piastra di mesoderma laterale sinistro &egrave; un passaggio altamente conservato che regolano il situs del cuore e dei visceri. In Xenopus, movimento della materna serotonina (5HT) attraverso percorsi gap-giunzionale nelle fasi di clivaggio detta asimmetria a Monte di Nr1. Tuttavia, non sono noti i meccanismi di collegamento precedente biofisiche asimmetrie con questo punto di controllo trascrizionale.

Attivit&agrave; di deacetylase dell&#39;istone &egrave; necessaria per la sinistra-destra patterning durante lo sviluppo vertebrato.

&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x306F;&#x5DE6;&#x53F3;&#xFF08;LR&#xFF09;&#x8EF8;&#x306E;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x6027;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5074;&#x9762;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5DE6;&#x5916;&#x5074;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x677F;&#x306E;TGF&#x3B2;&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x7D50;&#x7BC0;&#x95A2;&#x9023;1&#xFF08;NR1&#xFF09;&#x306E;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x5FC3;&#x81D3;&#x3084;&#x5185;&#x81D3;&#x306E;&#x5185;&#x81D3;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5207;&#x65AD;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x304A;&#x3082;&#x3080;&#x304F;&#x307E;&#x307E;&#x306B;&#x30AE;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7;&#x30B8;&#x30E3;&#x30F3;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x200B;&#x200B;&#x30F3;&#x30D1;&#x30B9;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6BCD;&#x4F53;&#x306E;&#x30BB;&#x30ED;&#x30C8;&#x30CB;&#x30F3;&#xFF08;5HT&#xFF09;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x306F;&#x3001;&#x4E0A;&#x6D41;NR1&#x306E;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x6027;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x6027;&#x3092;&#x7D50;&#x3073;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x5DE6;&#x304B;&#x3089;&#x53F3;&#x306B;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

&#xC67C;&#xCABD;-&#xC624;&#xB978;&#xCABD; (LR) &#xCD95;&#xC758; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C; &#xBE44;&#xB300;&#xCE6D; &#xCC99;&#xCD94; embryogenesis&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xCE21;&#xBA74; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC67C;&#xCABD;&#xB41C; &#xCE21;&#xBA74; mesoderm &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; TGF&beta; superfamily &#xBA64;&#xBC84; &#xAFB8;&#xBC85;&#xAFB8;&#xBC85; &#xC878; &#xAE30; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; 1 (Nr1)&#xC758; &#xBE44;&#xB300;&#xCE6D; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC870;&#xC808; &#xC2EC;&#xC7A5;&#xACFC; &#xB0B4;&#xC7A5;&#xC758; &#xC0AC;&#xAC74; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Xenopus, &#xC6B4;&#xB3D9;&#xC758; &#xBD84;&#xC5F4; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC2D; &#xC811;&#xD569; &#xACBD;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xBAA8;&#xC131; &#xC138;&#xB85C;&#xD1A0;&#xB2CC; (5HT) &#xC0C1;&#xB958; nr1&#xC758; &#xBE44;&#xB300;&#xCE6D;&#xC131;&#xC744; &#xC9C0;&#xC2DC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC774;&#xC804; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9AC; asymmetries&#xC774; transcriptional &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; deacetylase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; &#xCC99;&#xCD94; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC67C;&#xCABD;-&#xC624;&#xB978;&#xCABD; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xD560; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

De acuerdo asimetr&#xED;a de la izquierda-derecha (LR), el eje es un aspecto crucial de la embriog&#xE9;nesis de vertebrados. La expresi&#xF3;n g&#xE9;nica asim&#xE9;trica de la superfamilia de TGF miembro nodal relacionado 1 (NR1) en la placa de mesodermo lateral izquierdo es un paso muy conservadas que regula el situs del coraz&#xF3;n y las v&#xED;sceras. En Xenopus, el movimiento de la serotonina materna (5-HT) a trav&#xE9;s del espacio-de uni&#xF3;n caminos en las etapas de su desdoblamiento dictados asimetr&#xED;a de aguas arriba de NR1. Sin embargo, los mecanismos que vinculan las asimetr&#xED;as antes biof&#xED;sicos con este punto de control de la transcripci&#xF3;n no se conocen.

Actividad de la histona deacetilasa es necesaria para la izquierda-derecha Patrones Durante el Desarrollo de Vertebrados

A subset of medulloblastomas, the most common brain tumor in children, is hypothesized to originate from granule neuron precursors (GNPs) in which the sonic hedgehog (SHH) pathway is over-activated. MXD3, a basic helix-look-helix zipper transcription factor of the MAD family, has been reported to be upregulated during postnatal cerebellar development and to promote GNP proliferation and MYCN expression. Mxd3 is upregulated in mouse models of medulloblastoma as well as in human medulloblastomas. Therefore, we hypothesize that MXD3 plays a role in the cellular events that lead to medulloblastoma biogenesis. In agreement with its proliferative role in GNPs, MXD3 knock-down in DAOY cells resulted in decreased proliferation. Sustained overexpression of MXD3 resulted in decreased cell numbers due to increased apoptosis and cell cycle arrest. Structure-function analysis revealed that the Sin3 interacting domain, the basic domain, and binding to E-boxes are essential for this activity. Microarray-based expression analysis indicated up-regulation of 84 genes and down-regulation of 47 genes. Potential direct MXD3 target genes were identified by ChIP-chip. Our results suggest that MXD3 is necessary for DAOY medulloblastoma cell proliferation. However, increased level and/or duration of MXD3 expression ultimately reduces cell numbers via increased cell death and cell cycle arrest.

Role of MXD3 in proliferation of DAOY human medulloblastoma cells.

Hyperamylinemia, a common pancreatic disorder in obese and insulin-resistant patients, is known to cause amylin oligomerization and cytotoxicity in pancreatic islets, leading to β-cell mass depletion and development of type 2 diabetes. Recent data has revealed that hyperamylinemia also affects the vascular system, heart, and kidneys. We therefore hypothesized that oligomerized amylin might accumulate in the cerebrovascular system and brain parenchyma of diabetic patients.

Amylin deposition in the brain: A second amyloid in Alzheimer disease?

MXD3 is a basic-helix-loop-helix-leucine-zipper transcription factor involved in cellular proliferation. In previous studies we demonstrated that knock-down of MXD3 in the human medulloblastoma cell line DAOY resulted in decreased proliferation. Surprisingly, overexpression of MXD3 in DAOY cells also decreased proliferation and increased cell death, suggesting that persistent expression of MXD3 triggers an apoptotic response, perhaps as a fail-safe mechanism. To investigate this apparent paradox in detail we developed a tamoxifen inducible system to analyze the temporal effects of MXD3 in the proliferation and transcriptional response of DAOY cells upon acute induction compared with long-term expression of MXD3.

MXD3 regulation of DAOY cell proliferation dictated by time course of activation.

Conventional chemotherapy for precursor B-cell (preB) acute lymphoblastic leukaemia (ALL) has limitations that could be overcome by targeted therapy. Previously, we discovered a potential therapeutic molecular target, MDX3 (MAX dimerization protein 3), in preB ALL. In this study, we hypothesize that an effective siRNA therapy for preB ALL can be developed using antiCD22 antibody (αCD22 Ab) and nanoparticles. We composed nanocomplexes with super paramagnetic iron oxide nanoparticles (SPIO NPs), αCD22 Abs and MXD3 siRNA molecules based on physical interactions between the molecules. We demonstrated that the MXD3 siRNA-αCD22 Ab-SPIO NP complexes entered leukaemia cells and knocked down MXD3, leading the cells to undergo apoptosis and resulting in decreased live cell counts in the cell line Reh and in primary preB ALL samples in vitro. Furthermore, the cytotoxic effects of the MXD3 siRNA-αCD22 Ab-SPIO NP complexes were significantly enhanced by addition of the chemotherapy drugs vincristine or doxorubicin. We also ruled out potential cytotoxic effects of the MXD3 siRNA-αCD22 Ab-SPIO NP complexes on normal primary haematopoietic cells. Normal B cells were affected while CD34-positive haematopoietic stem cells and non-B cells were not. These data suggest that MXD3 siRNA-αCD22 Ab-SPIO NP complexes have the potential to be a new targeted therapy for preB ALL.

Targeted therapy with MXD3 siRNA, anti-CD22 antibody and nanoparticles for precursor B-cell acute lymphoblastic leukaemia.

HB22.7, an anti-CD22 monoclonal antibody has shown consistent preclinical activity against non-Hodgkin lymphoma (NHL). Histone deacetylase inhibitors (HDACi) have demonstrated efficacy in lymphoma and can modulate cell surface receptor expression. To augment the lymphomacidal activity of HB22.7 we examined the combination of AR42 (an HDACi) and HB22.7 in vitro and in vivo. The combination resulted in 10-fold increased potency in 6 NHL cell lines when compared to either drug alone. Both drugs reduced tumor progression in xenografts, but the combination was significantly more efficacious and resulted in regression of established tumors, without toxicity. AR42 inhibited HB22.7-mediated CD22 internalization, suggesting that increased efficacy could be due to higher availability of CD22. Overall, the synergistic effects of HB22.7 and AR42 on in vitro cytotoxicity and in vivo anti-tumor activity make this combination an attractive option for further pre-clinical and clinical evaluation.

Gustavo A. Barisone

Department of Pharmacology

University of California, Davis

DNA Microarrays: Sample Quality Control, Array Hybridization and Scanning

Focus Formation: A Cell-based Assay to Determine the Oncogenic Potential of a Gene

Gustavo A. Barisone

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University of California, Davis

DNA Microarrays: Sample Quality Control, Array Hybridization and Scanning

Focus Formation: A Cell-based Assay to Determine the Oncogenic Potential of a Gene

Department of Pharmacology