thermodynamics-membrane-protein-folding-measured-fluorescence

Thermodynamics of Membrane Protein Folding Measured by Fluorescence Spectroscopy

Membrane protein folding is an emerging topic with both fundamental and health-related significance.  The abundance of membrane proteins in cells ...

University of California San Diego - UCSD

&#x590D;&#x6027;&#x66F2;&#x7EBF;&#x79EF;&#x5206;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x5916;&#x819C;&#x86CB;&#x767D; (OmpA) &#x88AB;&#x6D4B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x6B64;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6298;&#x53E0;&#x7684;&#x6784;&#x8C61;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; OmpA &#x5C55;&#x54C1;&#x5C55;&#x5F00; &#xFF08;DeltaG &#x5EA6; H2O&#xFF09; 10.5 &#x5343;&#x5361;/mol.&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x542B; 7&#x3001; 15&#x3001; 57&#x3001; 102&#x3001; &#x6216; 143&#xFF0C;&#x672C;&#x673A;&#x9635;&#x5730;&#x7684;&#x5355;&#x4E00;&#x8272;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x7684;&#x81EA;&#x7531;&#x80FD;&#x6E90;&#x5206;&#x522B;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; OmpA&#xFF0C;DeltaG &#x5EA6; H2O &#x503C; 6.7&#x3001; 4.8&#x3001; 2.4&#x3001; 4.7&#x3001; &#x548C; 2.8 &#x5343;&#x5361;/&#x6469;&#x5C14;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x8D8B;&#x52BF;&#x88AB;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x975E;&#x5171;&#x4EF7;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x82B3;&#x9999;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x4E0E;&#x6C22;&#x952E;&#x3002;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x5C3E;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x8DE8;&#x819C;&#x57DF; OmpA &#x7684;&#x6784;&#x8C61;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x901A;&#x8FC7;&#x622A;&#x7684;&#x5355; Trp &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; &#xFF1B; &#x8FD8;&#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x67E5;&#x56DB;&#x4E2A;&#x4E94;&#x4E2A;&#x622A;&#x65AD;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; DeltaG H2O &#x5EA6;&#x503C;&#x662F;&#x7531;&#x66F4;&#x5927; &gt; 2.7 &#x5343;&#x5361;/&#x6469;&#x5C14;&#x4E0E;&#x5168;&#x957F;&#x7248;&#x672C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x57DF;&#x7684;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x7834;&#x574F;&#x7A33;&#x5B9A;&#x5C55;&#x5F00;&#x8DE8;&#x819C;&#x57DF;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x52A8;&#x6001;&#x5149;&#x6563;&#x5C04;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x5BF9;&#x56CA;&#x6CE1;&#x5927;&#x5C0F;&#x4E0E;&#x7A33;&#x5B9A;&#x5C3F;&#x7D20;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x5C3F;&#x7D20;&#x6D53;&#x5EA6;&#x5927;&#x4E8E; 1 &#x7C73;&#x5BFC;&#x81F4;&#x56CA;&#x6CE1;&#x5927;&#x5C0F;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x76F4;&#x5F84;&#x4E0B;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0D;&#x53D8;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x52A8;&#x6001;&#x5149;&#x6563;&#x5C04;&#x7ED3;&#x679C;&#x8865;&#x5145;&#x8367;&#x5149;&#x7814;&#x7A76;&#x548C;&#x9610;&#x91CA;&#x56CA;&#x6CE1;&#x5927;&#x5C0F;&#x5BF9;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6784;&#x8C61;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x8272;&#x6C28;&#x9178;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x3001; &#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x57DF;&#x548C;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x5927;&#x5C0F;&#x7684;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6298;&#x53E0;&#x7684;&#x70ED;&#x529B;&#x5B66;&#xFF1A; &#x8DE8;&#x819C;&#x86CB;&#x767D; OmpA &#x7684;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x6559;&#x8BAD;&#x3002;

Refolding curves of the integral membrane protein outer membrane protein A (OmpA) were measured to determine the conformational stabilities of this model system for membrane protein folding. Wild-type OmpA exhibits a free energy of unfolding (DeltaG degrees H2O) of 10.5 kcal/mol. Mutants, containing a single tryptophan residue at the native positions 7, 15, 57, 102, or 143, are less stable than wild-type OmpA, with DeltaG degrees H2O values of 6.7, 4.8, 2.4, 4.7, and 2.8 kcal/mol, respectively. The trend observed here is discussed in terms of noncovalent interactions, including aromatic interactions and hydrogen bonding. The effect of the soluble tail on the conformational stability of the transmembrane domain of OmpA was also investigated via truncated single-Trp mutants; DeltaG degrees H2O values for four of the five truncated mutants are greater by >2.7 kcal/mol relative to the full-length versions, suggesting that the absence of the soluble domain may destabilize the unfolded transmembrane domain. Finally, dynamic light scattering experiments were performed to measure the effects of urea and protein on vesicle size and stability. Urea concentrations greater than 1 M cause an increase in vesicle size, and these diameters are unaltered in the presence of protein. These dynamic light scattering results complement the fluorescence studies and illustrate the important effects of vesicle size on protein conformational stability.

Effects of tryptophan microenvironment, soluble domain, and vesicle size on the thermodynamics of membrane protein folding: lessons from the transmembrane protein OmpA.

Courbes repliement de la prot&#xE9;ine membranaire prot&#xE9;ine membranaire int&#xE9;grale de recouvrement A (OmpA) ont &#xE9;t&#xE9; mesur&#xE9;es afin de d&#xE9;terminer les stabilit&#xE9;s conformation de ce syst&#xE8;me mod&#xE8;le pour repliement de la prot&#xE9;ine membranaire. De type sauvage OmpA pr&#xE9;sente une &#xE9;nergie libre de d&#xE9;pliage (degr&#xE9;s deltaG H2O) de 10,5 kcal / mole. Mutants, contenant un r&#xE9;sidu tryptophane unique &#xE0; des postes indig&#xE8;nes 7, 15, 57, 102, ou 143, sont moins stables que de type sauvage OmpA, avec des valeurs deltag degr&#xE9;s H2O de 6,7, 4.8, 2.4, 4.7, et 2.8 kcal / mol , respectivement. La tendance observ&#xE9;e ici est discut&#xE9;e en termes d&#x26;#39;interactions non covalentes, y compris les interactions aromatiques et liaison hydrog&#xE8;ne. L&#x26;#39;effet de la queue soluble sur la stabilit&#xE9; de la conformation du domaine transmembranaire de OmpA a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9;e par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire tronqu&#xE9;es unique Trp mutants; deltag valeurs degr&#xE9;s H2O pour quatre des cinq mutants tronqu&#xE9;s sont sup&#xE9;rieurs de&#x26;gt; 2,7 kcal / mol par rapport &#xE0; la pleine- versions de longueur, ce qui sugg&#xE8;re que l&#x26;#39;absence du domaine soluble peut d&#xE9;stabiliser le d&#xE9;roulement domaine transmembranaire. Enfin, des exp&#xE9;riences de diffusion de lumi&#xE8;re dynamiques ont &#xE9;t&#xE9; effectu&#xE9;es pour mesurer les effets de l&#x26;#39;ur&#xE9;e et de prot&#xE9;ines sur la taille des v&#xE9;sicules et la stabilit&#xE9;. Concentrations d&#x26;#39;ur&#xE9;e plus que M 1 provoquer une augmentation de la taille des v&#xE9;sicules, et ces diam&#xE8;tres sont non modifi&#xE9;e, en pr&#xE9;sence de prot&#xE9;ines. Ces r&#xE9;sultats dynamiques de diffusion de lumi&#xE8;re compl&#xE9;ter les &#xE9;tudes de fluorescence et d&#x26;#39;illustrer les effets importants de la taille des v&#xE9;sicules sur la stabilit&#xE9; des prot&#xE9;ines de conformation.

Effets de micro-environnement du tryptophane, domaine soluble, et la taille des v&#xE9;sicules sur les Thermodynamique du repliement des prot&#xE9;ines membranaires: les le&#xE7;ons de la prot&#xE9;ine transmembranaire OmpA

Refalten Kurven des integralen Membrane Protein Au&szlig;enmembran Proteins eine (OmpA) wurden gemessen, um zu bestimmen, die Konformations&auml;nderungen Stabilit&auml;ten dieses Modell-Systems f&uuml;r Membrane Protein-Falte. Wildtyp OmpA Exponate eine freie Energie des sich entfaltenden (DeltaG Grad H2O) 10,5 kcal/mol-Mutanten, mit einen einzigen Tryptophan-R&uuml;ckstand an den systemeigenen 7, 15, 57, 102 oder 143, sind weniger stabil als Wildtyp OmpA, mit DeltaG grade H2O-Werten von 6,7, 4.8 2.4, 4.7 und 2,8 kcal/Mol, beziehungsweise. Hier beobachtete Trend ist im Hinblick auf die noncovalent Interaktionen, einschlie&szlig;lich aromatischen Wechselwirkungen und Wasserstoff-Bonding diskutiert. Die Wirkung der l&ouml;slichen Schwanz auf die Konformations&auml;nderungen Stabilit&auml;t der OmpA Transmembran-Dom&auml;ne wurde auch &uuml;ber abgeschnittene Einzel-Trp-Mutanten untersucht; DeltaG Grad H2O Werte f&uuml;r vier der f&uuml;nf abgeschnittenen Mutanten sind gr&ouml;&szlig;er von &gt; 2,7 kcal/Mol im Verh&auml;ltnis zu den in-Versionen, was darauf hindeutet, dass das Fehlen der l&ouml;slichen Dom&auml;ne entfaltet Transmembranegebiet destabilisieren kann. Schlie&szlig;lich wurden dynamische Lichtstreuung Experimente durchgef&uuml;hrt, um die Auswirkungen von Harnstoff und Protein auf Vesikel Gr&ouml;&szlig;e und Stabilit&auml;t zu messen. Harnstoff-Konzentrationen gr&ouml;&szlig;er als 1 M verursachen eine Steigerung in Vesikel-Gr&ouml;&szlig;e, und diese Durchmesser sind unver&auml;ndert in Anwesenheit von Protein. Diese dynamische Lichtstreuung-Ergebnisse die Fluoreszenz-Studien erg&auml;nzen und veranschaulichen die wichtigen Auswirkungen der Vesikel Gr&ouml;&szlig;e auf Protein-Konformations&auml;nderungen Stabilit&auml;t.

Wirkungen von Tryptophan Mikromilieu, l&ouml;sliche Dom&auml;ne und Vesikel Gr&ouml;&szlig;e &uuml;ber die Thermodynamik der Membrane Protein-Falte: Lehren aus der Transmembraneprotein OmpA.

Curve Refolding della proteina integrale di membrana proteina membrana esterna una (OmpA) sono state misurate per determinare lo stabilit&agrave; di questo sistema di modello per membrane protein folding conformazionali. Wild-type OmpA esposizioni un&#39;energia libera di svolgersi (DeltaG gradi H2O) di 10,5 mutanti kcal/mol, contenente un residuo di triptofano singolo nativo nelle posizioni 7, 15, 57, 102 o 143, sono meno stabili OmpA wild-type, con gradi di DeltaG H2O valori di 6,7, 4.7 e 4.8, 2.4 2,8 kcal/mol, rispettivamente. La tendenza osservata qui &egrave; discusso in termini di interazioni non covalenti, comprese le interazioni aromatiche e legame idrogeno. L&#39;effetto della coda solubile sulla stabilit&agrave; conformazionale del dominio transmembrana della OmpA &egrave; stato studiato anche tramite tronco singolo-Trp mutanti; DeltaG gradi H2O valori per quattro dei cinque troncati mutanti sono maggiori di &amp;gt; 2,7 kcal/mol rispetto alle versioni full-length, suggerendo che l&#39;assenza del dominio solubile possa destabilizzare il dominio transmembrana dispiegato. Infine, sono stati eseguiti esperimenti di diffusione dinamica della luce per misurare gli effetti di urea e proteine sulla dimensione della vescicola e la stabilit&agrave;. Concentrazioni di urea superiori a 1 M causano un aumento di dimensioni della vescicola, e questi diametri sono inalterati in presenza di proteine. Questi risultati di diffusione dinamica della luce completano gli studi di fluorescenza e illustrano gli effetti importanti della dimensione della vescicola sulla stabilit&agrave; conformazionale della proteina.

Gli effetti del microambiente triptofano, dominio solubile e vescicola dimensioni sulla termodinamica del ripiegamento proteico di membrana: lezioni dalla proteina transmembrana OmpA.

&#x5185;&#x5728;&#x6027;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5916;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x66F2;&#x7DDA;&#xFF08;&#x306E;OmpA&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;OmpA&#x306F;10.5 kcal / mol&#x3067;&#x306E;&#x5C55;&#x958B;&#x306E;&#x81EA;&#x7531;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x3092;&#xFF08;H2O&#x5EA6;DeltaG&#xFF09;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306B;7&#x3001;15&#x3001;57&#x3001;102&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;143&#x3092;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;DeltaG&#x5EA6;H2O 6.7&#x306E;&#x5024;&#x3001;4.8&#x3001;2.4&#x3001;4.7&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;2.8 kcal / mol&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;OmpA&#x672A;&#x6E80;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x50BE;&#x5411;&#x306F;&#x3001;&#x82B3;&#x9999;&#x65CF;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3068;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x975E;&#x5171;&#x6709;&#x7D50;&#x5408;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x89B3;&#x70B9;&#x304B;&#x3089;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; OmpA&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x7ACB;&#x4F53;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x306E;&#x5C3E;&#x90E8;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3082;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;Trp&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x305F;&#x3002;5&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x56DB;&#x3064;&#x306E;DeltaG&#x5EA6;H2O&#x306E;&#x5024;&#x304C;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x26;gt; 2.7 kcal / mol&#x3067;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x3067;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x304C;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x5C55;&#x958B;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x52D5;&#x7684;&#x5149;&#x6563;&#x4E71;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x3068;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5C3F;&#x7D20;&#x3068;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x3002; 1 M&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x5C3F;&#x7D20;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x76F4;&#x5F84;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x5149;&#x6563;&#x4E71;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x88DC;&#x5B8C;&#x3057;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x7ACB;&#x4F53;&#x69CB;&#x9020;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306B;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;OmpA&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6559;&#x8A13;&#xFF1A;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x3001;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x71B1;&#x529B;&#x5B66;&#x4E0A;&#x306E;&#x30D9;&#x30B7;&#x30AF;&#x30EB;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;

&#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC811;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD558; refolding &#xACE1;&#xC120; &#xC815;&#xC218; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC678;&#xBD80; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (OmpA)&#xC758; &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; OmpA &#xC804;&#xC2DC; &#xC804;&#xAC1C; (DeltaG &#xC815;&#xB3C4;&#xC758; &#xBB3C;) 7, 15, 57, 102, &#xB610;&#xB294; 143, &#xAE30;&#xBCF8; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD2B8;&#xB9BD;&#xD1A0;&#xD310; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; 10.5 kcal/mol. &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xC790;&#xC720; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0;&#xB294; &#xAC01;&#xAC01; 6.7, 4.8 2.4 4.7 2.8 kcal/mol, Deltag&#xB3C4; &#xBB3C; &#xAC12;&#xACFC; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; OmpA &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB35C; &#xC548;&#xC815;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xCD94;&#xC138; &#xC544;&#xB85C;&#xB9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBC0F; &#xC218;&#xC18C; &#xACB0;&#xD569;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; noncovalent &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. OmpA &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xB179;&#xB294; &#xAF2C;&#xB9AC;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5; &#xB610;&#xD55C; &#xC798;&#xB9B0;&#xB41C; &#xB2E8;&#xC77C; Trp &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC870;&#xC0AC; DeltaG 4 5 &#xC798;&#xB9B0;&#xB41C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBB3C; &#xAC12;&#xC740;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB354; &#xD070; &amp;gt; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC; &#xD3BC;&#xCE5C;&#xB41C; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; &#xBC84;&#xC804;&#xC744; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; 2.7 kcal/mol. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xB3D9;&#xC801; &#xAD11; &#xC0B0;&#xB780; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xAE30; &#xD06C;&#xAE30;&#xC640; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xC6B0; &#xB808; &#xC544; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC694;&#xC18C; &#xB18D;&#xB3C4;&#xAC00; 1m &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD070; &#xC18C;&#xD3EC; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294; &#xC6D0;&#xC778;&#xC774; &#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC9C1;&#xACBD; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3D9;&#xC801; &#xAD11; &#xC0B0;&#xB780; &#xACB0;&#xACFC; &#xD615;&#xAD11; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xBCF4;&#xCDA9; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xC18C;&#xD3EC; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC811;&#xAE30;&#xC758; &#xC5F4;&#xC5ED;&#xD559;&#xC5D0; &#xD2B8;&#xB9BD;&#xD1A0;&#xD310; microenvironment, &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBC0F; &#xC18C;&#xD3EC; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD06C;&#xAE30;: &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; OmpA &#xAD50;&#xD6C8;.

Curvas replegamiento de la prote&#xED;na de membrana prote&#xED;na integral de membrana externa A (OmpA) se midieron para determinar las estabilidades conformacionales de este sistema modelo para el plegamiento de prote&#xED;nas de membrana. De tipo salvaje OmpA exhibe una energ&#xED;a libre de desplegar (grados deltaG H2O) de 10,5 kcal / mol. Mutantes, que contienen un residuo de tript&#xF3;fano solo en las posiciones nativos 7, 15, 57, 102 o 143, son menos estables que los de tipo salvaje OmpA, con valores de grados deltaG H2O de 6.7, 4.8, 2.4, 4.7 y 2.8 kcal / mol , respectivamente. La tendencia que se observa aqu&#xED; se discuten en t&#xE9;rminos de interacciones no covalentes, incluyendo las interacciones arom&#xE1;ticas y enlace de hidr&#xF3;geno. El efecto de la cola soluble en la estabilidad conformacional del dominio transmembrana de OmpA Tambi&#xE9;n se investig&#xF3; mediante truncados sola-Trp mutantes; deltaG valores grados H2O para cuatro de los cinco mutantes truncadas son mayores por&#x26;gt; 2,7 kcal / mol con respecto a la plena- versiones de longitud, lo que sugiere que la ausencia del dominio soluble puede desestabilizar la desdobla dominio transmembrana. Finalmente, din&#xE1;micas experimentos de dispersi&#xF3;n de luz se realizaron para medir los efectos de la urea y la prote&#xED;na en el tama&#xF1;o de la ves&#xED;cula y la estabilidad. Las concentraciones de urea mayores de 1 M causar un aumento en el tama&#xF1;o de la ves&#xED;cula, y estos di&#xE1;metros son inalterada en la presencia de la prote&#xED;na. Estos resultados din&#xE1;micos de dispersi&#xF3;n de luz complementar los estudios de fluorescencia e ilustrar los efectos importantes del tama&#xF1;o de las ves&#xED;culas en la estabilidad de prote&#xED;nas conformacionales.

Efectos del microambiente del tript&#xF3;fano, el dominio soluble, y el tama&#xF1;o de las ves&#xED;culas en la termodin&#xE1;mica del plegamiento de prote&#xED;nas de membrana: Lecciones de la prote&#xED;na transmembrana OmpA

Protein folding is an exploding area of research in biophysics and physical chemistry. Here, we describe the integration of several techniques, including absorption spectroscopy, fluorescence spectroscopy, and FÃ¶rster resonance energy transfer (FRET) measurements, to probe important topics in protein folding. Cytochrome c is used as a model protein; comparison of conformational stabilities ( Î”GH2Oâˆ˜) measured via two chemical denaturants, urea and guanidinium hydrochloride, illustrate important concepts in protein folding and intermolecular interactions. In addition, the determination of intraprotein distances based upon the FRET pair Trp-59 and the heme group for unfolded states of cytochrome c highlights the evolution of the protein structure under unfolding conditions. Analysis and discussion of these results provide opportunities to gain in-depth understanding of models for protein folding while enhancing students' skills with optical techniques. Collectively, the combination of optical spectroscopy, rigorous quantitative analysis, and a focus on biophysics illustrates the significance of fundamental research at the growing intersection of chemistry, biology, and physics.

FÃ¶rster Resonance Energy Transfer and Conformational Stability of Proteins: An Advanced Biophysical Module for Physical Chemistry Students.

&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6298;&#x53E0;&#x662F;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x7206;&#x70B8;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x548C;&#x7269;&#x7406;&#x5316;&#x5B66;&#x9886;&#x57DF;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x51E0;&#x79CD;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5438;&#x6536;&#x5206;&#x5149;&#x5149;&#x5EA6;&#x6CD5;&#x3001; &#x8367;&#x5149;&#x5149;&#x8C31;&#x548C; F&ouml;rster &#x5171;&#x632F;&#x80FD;&#x91CF;&#x8F6C;&#x79FB; &#xFF08;&#x97F3;&#x54C1;&#xFF09; &#x6D4B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x6765;&#x63A2;&#x6D4B;&#x4E2D;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6298;&#x53E0;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4E3B;&#x9898;&#x7684;&#x4E00;&#x4F53;&#x5316;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8272;&#x7D20; c &#x7528;&#x4F5C;&#x4E00;&#x79CD;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; &#xFF1B;&#x6784;&#x8C61;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027; (&Delta;GH2O&#x2218;) &#x6BD4;&#x8F83;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5316;&#x5B66;&#x53D8;&#x6027;&#x5242;&#x3001; &#x5C3F;&#x7D20;&#x3001; &#x80CD;&#x76D0;&#x76D0;&#x9178;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D4B;&#x91CF;&#x8BF4;&#x660E;&#x4E2D;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6298;&#x53E0;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x95F4;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6982;&#x5FF5;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6839;&#x636E;&#x97F3;&#x54C1;&#x5BF9;&#x8DE8;&#x56FD;&#x6FC0;&#x8FDB;&#x515A;-59 intraprotein &#x8DDD;&#x79BB;&#x7684;&#x786E;&#x5B9A;&#x548C;&#x5C55;&#x5F00;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8272;&#x7D20; c &#x7684;&#x8840;&#x7EA2;&#x7D20;&#x7EC4;&#x7A81;&#x51FA;&#x663E;&#x793A;&#x5C55;&#x5F00;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x6F14;&#x53D8;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x4E0E;&#x63A2;&#x8BA8;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6298;&#x53E0;&#x540C;&#x65F6;&#x63D0;&#x9AD8;&#x5B66;&#x751F;&#x7684;&#x6280;&#x80FD;&#x4E0E;&#x5149;&#x5B66;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x6DF1;&#x5165;&#x4E86;&#x89E3;&#x7684;&#x673A;&#x4F1A;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x5408;&#x5149;&#x5B66;&#x5149;&#x8C31;&#x6280;&#x672F;&#x3001; &#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x91CF;&#x5316;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x91CD;&#x70B9;&#x8BF4;&#x660E;&#x4E86;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x8DEF;&#x53E3;&#x3001; &#x5316;&#x5B66;&#x3001; &#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x548C;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x610F;&#x4E49;&#x3002;

F&ouml;rster &#x5171;&#x632F;&#x80FD;&#x91CF;&#x8F6C;&#x79FB;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6784;&#x8C61;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#xFF1A; &#x5148;&#x8FDB;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x6A21;&#x5757;&#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x5316;&#x5B66;&#x5B66;&#x751F;&#x3002;

Le repliement des prot&#xE9;ines est un domaine qui explose de la recherche en biophysique et la chimie physique. Ici, nous d&#xE9;crivons l&#x26;#39;int&#xE9;gration de plusieurs techniques, y compris la spectroscopie d&#x26;#39;absorption, spectroscopie de fluorescence, et F&#xF6;rster r&#xE9;sonance de transfert d&#x26;#39;&#xE9;nergie (FRET) des mesures, pour sonder des sujets importants dans le repliement des prot&#xE9;ines. Cytochrome c est utilis&#xE9; en tant que prot&#xE9;ine de mod&#xE8;le; comparaison des stabilit&#xE9;s conformation (&#x394;GH2O &#x2218;) mesur&#xE9;e au moyen de deux d&#xE9;naturants chimiques, de l&#x26;#39;ur&#xE9;e et le chlorhydrate de guanidinium, illustrer les concepts repr&#xE9;sent&#xE9;es dans repliement de la prot&#xE9;ine et des interactions intermol&#xE9;culaires. En outre, la d&#xE9;termination des distances intraprotein bas&#xE9;s sur la paire FRET Trp-59 et le groupe h&#xE8;me pour d&#xE9;pli&#xE9; &#xE9;tats de cytochrome c met en &#xE9;vidence l&#x26;#39;&#xE9;volution de la structure de la prot&#xE9;ine dans des conditions qui se d&#xE9;roulent. Analyse et discussion de ces r&#xE9;sultats fournissent des occasions d&#x26;#39;acqu&#xE9;rir une compr&#xE9;hension en profondeur des mod&#xE8;les pour le repliement des prot&#xE9;ines, tout en am&#xE9;liorant les comp&#xE9;tences des &#xE9;l&#xE8;ves avec les techniques optiques. Collectivement, la combinaison de la spectroscopie optique, rigoureuse analyse quantitative, et l&#x26;#39;accent mis sur la biophysique illustre l&#x26;#39;importance de la recherche fondamentale &#xE0; l&#x26;#39;intersection de plus en plus de la chimie, la biologie et la physique.

Transfert F&#xF6;rster Resonance Energy et de la stabilit&#xE9; conformationnelle des prot&#xE9;ines: un module avanc&#xE9; biophysique pour les &#xE9;tudiants de chimie physique

Proteinfaltung ist eine explodierende Forschungsbereich in Biophysik und physikalische Chemie. Hier beschreiben wir die Integration von mehreren Techniken, einschlie&szlig;lich Absorptionsspektroskopie, Fluoreszenzspektroskopie und F&ouml;rster Resonanz Energie Transfer (FRET) Messungen, um wichtige Themen in der Proteinfaltung zu untersuchen. Cytochrom c dient als ein Modell-Protein; Vergleich der Konformations&auml;nderungen Stabilit&auml;ten (&Delta;GH2O&#x2218;) gemessen &uuml;ber zwei chemische Denaturierungsmittel, Harnstoff und Guanidinium Hydrochlorid, veranschaulichen wichtige Konzepte in Protein-Faltung und intermolekularen Wechselwirkungen. Dar&uuml;ber hinaus Bestimmungder Intraprotein Entfernungen auf der Grundlage der Bund-paar Trp-59 und die H&auml;m-Gruppe f&uuml;r entfaltet Zust&auml;nde des Cytochrom c highlights die Evolution der Protein-Struktur unter Entfaltung Bedingungen. Analyse und Diskussion dieser Ergebnisse bieten M&ouml;glichkeiten, sehr gute Kenntnisse der Modelle f&uuml;r die Proteinfaltung und verbessert gleichzeitig Studierenden F&auml;higkeiten mit optischen Techniken zu gewinnen. Zusammenfassend zeigt die Kombination der optischen Spektroskopie, strenge Quantitative Analyse und Fokus auf Biophysik die Bedeutung der Grundlagenforschung an der wachsenden Kreuzung von Chemie, Biologie und Physik.

F&ouml;rster-Resonanz-Energie-Transfer und Konformations&auml;nderungen Stabilit&auml;t von Proteinen: eine erweiterte biophysikalische Modul f&uuml;r physikalische Chemie-Studenten.

Il protein folding &egrave; un&#39;area che esplodono di ricerca in biofisica e chimica fisica. Qui, descriviamo l&#39;integrazione di diverse tecniche, tra cui F&ouml;rster risonanza energy transfer (FRET) misurazioni, per sondare temi importanti in ripiegamento proteico, spettroscopia di fluorescenza e spettroscopia di assorbimento. Il citocromo c &egrave; usato come una proteina di modello; confronto di stabilit&agrave; conformazionale (&Delta;GH2O&#x2218;) misurata tramite due chimici denaturanti, urea e guanidinio idrocloruro, illustrare concetti importanti in interazioni intermolecolari e pieghevole della proteina. Inoltre, la determinazione delle distanze intraprotein basato sulla coppia FRET Trp-59 e il gruppo eme per stati svelati del citocromo c mette in evidenza l&#39;evoluzione della struttura della proteina in condizioni di svolgimento. Analisi e discussione di questi risultati forniscono opportunit&agrave; di acquisire una conoscenza approfondita dei modelli per il protein folding e ne rafforza le competenze degli studenti con tecniche ottiche. Collettivamente, la combinazione della spettroscopia ottica, analisi quantitativa rigorosa e un focus sulla biofisica illustra l&#39;importanza della ricerca fondamentale all&#39;incrocio crescente di chimica, biologia e fisica.

Trasferimento di energia per risonanza e stabilit&agrave; conformazionale delle proteine: un avanzato modulo biofisico per gli studenti di chimica fisica.

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6298;&#x308A;&#x7573;&#x307F;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7269;&#x7406;&#x5316;&#x5B66;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x7206;&#x767A;&#x7684;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30C8;&#x30D4;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5438;&#x53CE;&#x5206;&#x5149;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x3001;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EB;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5171;&#x9CF4;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x79FB;&#x52D5;&#xFF08;FRET&#xFF09;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E0;c&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#xFF08;&#x394;GH2O&#x2218;&#xFF09;2&#x3064;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x5909;&#x6027;&#x5264;&#x3001;&#x5C3F;&#x7D20;&#x3001;&#x30B0;&#x30A2;&#x30CB;&#x30B8;&#x30F3;&#x5869;&#x9178;&#x5869;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6982;&#x5FF5;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;intraprotein&#x8DDD;&#x96E2;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E0;c&#x306E;&#x5C55;&#x958B;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30DA;&#x30A2;&#x306E;Trp-59&#x3001;&#x30D8;&#x30E0;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;FRET&#x306E;&#x5C55;&#x958B;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3084;&#x8B70;&#x8AD6;&#x306F;&#x3001;&#x5149;&#x5B66;&#x6280;&#x8853;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5B66;&#x751F;&#x306E;&#x30B9;&#x30AD;&#x30EB;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x6DF1;&#x3044;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6A5F;&#x4F1A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5149;&#x5B66;&#x5206;&#x5149;&#x3001;&#x53B3;&#x5BC6;&#x306A;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x6790;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x7269;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x5F53;&#x3066;&#x308B;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306F;&#x3001;&#x5316;&#x5B66;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3001;&#x7269;&#x7406;&#x5B66;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x4EA4;&#x5DEE;&#x70B9;&#x3067;&#x57FA;&#x790E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D5;&#x30A7;&#x30EB;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5171;&#x9CF4;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x79FB;&#x52D5;&#x3068;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x7ACB;&#x4F53;&#x914D;&#x5EA7;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#xFF1A;&#x7269;&#x7406;&#x5316;&#x5B66;&#x306E;&#x5B66;&#x751F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD3F4;&#xB529; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xD559; &#xBC0F; &#xBB3C;&#xB9AC; &#xD654;&#xD559;&#xC758; &#xD3ED;&#xBC1C; &#xC601;&#xC5ED;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD761;&#xC218; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;, &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD3F4;&#xB529;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC8FC;&#xC81C;&#xB97C; F&ouml;rster &#xACF5;&#xBA85; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC804;&#xC1A1; (&#xBB34;&#xC11C; &#xC6CC;) &#xCE21;&#xC815;, &#xD615;&#xAD11; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;, &#xB4F1; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAE30;&#xC220;&#xC758; &#xD1B5;&#xD569; &#xAE30;&#xC220;. &#xC2DC; &#xD1A0; &#xD06C;&#xB86C; c &#xBAA8;&#xB378; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC548;&#xC815;&#xC131; (&Delta;GH2O&#x2218;)&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xD654;&#xD559; denaturants, &#xC6B0; &#xB808; &#xC544;, guanidinium &#xC5FC;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xCE21;&#xC815; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC811;&#xD788;&#xB294; intermolecular &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC1C;&#xB150;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, Trp 59 &#xBB34;&#xC11C; &#xC6CC; &#xC30D;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; intraprotein &#xAC70;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xC815; &#xBC0F; &#xC2DC; &#xD1A0; &#xD06C;&#xB86C; c&#xC758; &#xD3BC;&#xCE5C; &#xC0C1;&#xD0DC; heme &#xADF8;&#xB8F9; &#xD558;&#xC774;&#xB77C;&#xC774;&#xD2B8; &#xC804;&#xAC1C; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAD6C;&#xC870; &#xC9C4;&#xD654;. &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xB17C;&#xC758; &#xAD11;&#xD559; &#xAE30;&#xC220;&#xB85C; &#xD559;&#xC0DD; &#xB4E4;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#xC811;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xAE4A;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAE30;&#xD68C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD1D;&#xCE6D; &#xD558; &#xC5EC; &#xAD11; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;, &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C; &#xC815;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xD559;&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810; &#xC870;&#xD569; &#xD654;&#xD559;, &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;, &#xBB3C;&#xB9AC;&#xD559;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xB294; &#xAD50;&#xCC28;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xCD08; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

F&ouml;rster &#xACF5;&#xBA85; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC804;&#xB2EC; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC548;&#xC815;&#xC131;: &#xBB3C;&#xB9AC; &#xD654;&#xD559; &#xD559;&#xC0DD; &#xB4E4;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xACE0;&#xAE09; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB4C8;.

Plegamiento de prote&#xED;nas es un &#xE1;rea de la explosi&#xF3;n de la investigaci&#xF3;n en biof&#xED;sica y la qu&#xED;mica f&#xED;sica. A continuaci&#xF3;n, describimos la integraci&#xF3;n de varias t&#xE9;cnicas, incluyendo la espectroscopia de absorci&#xF3;n, la espectroscopia de fluorescencia, la resonancia y la transferencia de energ&#xED;a F&#xF6;rster (FRET) las mediciones, para investigar temas importantes en el plegamiento de prote&#xED;nas. El citocromo C se utiliza como una prote&#xED;na modelo; comparaci&#xF3;n de estabilidades conformacionales (&#x394;GH2O &#x2218;) medido a trav&#xE9;s de dos desnaturalizantes qu&#xED;micos, urea y clorhidrato de guanidinio, ilustran conceptos importantes en el plegamiento de prote&#xED;nas y de las interacciones intermoleculares. Adem&#xE1;s, la determinaci&#xF3;n de las distancias intraprotein basados &#x200B;&#x200B;en el FRET par Trp-59 y el grupo hemo para desdobla estados de citocromo c destaca la evoluci&#xF3;n de la estructura de la prote&#xED;na en condiciones se desarrollan. An&#xE1;lisis y discusi&#xF3;n de estos resultados proporcionan la oportunidad de adquirir un conocimiento profundo de los modelos para el plegamiento de prote&#xED;nas, mientras que la mejora de habilidades de los estudiantes con las t&#xE9;cnicas &#xF3;pticas. En conjunto, la combinaci&#xF3;n de espectroscopia &#xF3;ptica, el an&#xE1;lisis cuantitativo riguroso, y un enfoque en la biof&#xED;sica ilustra la importancia de la investigaci&#xF3;n fundamental en la intersecci&#xF3;n de crecimiento de la qu&#xED;mica, la biolog&#xED;a y la f&#xED;sica.

F&#xF6;rster Resonance Energy Transfer y la estabilidad conformacional de las prote&#xED;nas: un m&#xF3;dulo avanzado de Biof&#xED;sica para estudiantes de Qu&#xED;mica F&#xED;sica

&#x8272;&#x6C28;&#x9178;&#x4E2D;&#x5404;&#x79CD;&#x6EB6;&#x5242;&#x548C;&#x6A21;&#x578B;&#x591A;&#x80BD;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x7D2B;&#x5916;&#x5171;&#x632F;&#x62C9;&#x66FC; (UVRR) &#x5149;&#x8C31;&#x88AB;&#x63D0;&#x4EA4;&#x5E76;&#x63ED;&#x793A;&#x53CD;&#x6620;&#x6EB6;&#x5242;&#x6781;&#x6027;&#x3001; &#x6C22;&#x952E;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x548C;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50; pi &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x66F4;&#x6539;&#x3002;&#x901A;&#x5E38;&#x5229;&#x7528;&#x7684; UVRR &#x5149;&#x8C31;&#x4E00;&#x76F4;&#x57FA;&#x4E8E;&#x975E;&#x5171;&#x632F;&#x62C9;&#x66FC;&#x6570;&#x636E;&#xFF0C;&#x8272;&#x6C28;&#x9178;&#x8D39;&#x7C73;&#x53CC;&#x91CD;&#x6BD4;&#x7387; I1360/I1340 &#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x6781;&#x6027;&#x6807;&#x8BB0;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x503C;&#x5728;&#x4E0A;-&#x548C;&#x975E;&#x5171;&#x632F;&#x62C9;&#x66FC;&#x5149;&#x8C31;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4E0D;&#x540C;&#x8272;&#x6C28;&#x9178;&#x884D;&#x751F;&#x7269;&#x3002;&#x5177;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x5432;&#x54DA;&#x7684; UVRR &#x8D39;&#x7C73;&#x53CC;&#x91CD;&#x6BD4;&#x7387;&#x8303;&#x56F4;&#x4ECE;&#x5728;&#x6781;&#x6027;&#x6EB6;&#x5242;&#x4E2D; 0.3 &#x5230; 0.8 &#x5728;&#x975E;&#x6781;&#x6027;&#x6EB6;&#x5242;&#xFF0C;&#x800C;&#x5404;&#x81EA;&#x7684;&#x503C;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x544A;&#x548C;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x975E;&#x5171;&#x632F;&#x62C9;&#x66FC;&#x5149;&#x8C31;&#x662F; 0.5-1.3&#x3002;&#x66F4;&#x591A;&#x751F;&#x7269;&#x76F8;&#x5173;&#x5206;&#x5B50;&#x3001; N-&#x4E59;&#x9170;&#x8272;&#x6C28;&#x9178;&#x4E59;&#x916F; (NATEE) &#x7684; UVRR &#x8D39;&#x7C73;&#x53CC;&#x91CD;&#x6BD4;&#x7387;&#x8F83;&#x5C0F;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684; 1.1 &#xFF08;&#x6781;&#x6027;&#x6EB6;&#x5242;&#xFF09; &#x5230; 1.7 (&#x975E;&#x6781;&#x6027;&#x6EB6;&#x5242;&#xFF09; &#x548C;&#x6EB6;&#x5242;&#x6781;&#x6027;/&#x6781;&#x5316;&#x53C2;&#x6570; pi * &#x548C; ETN &#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x3002;&#x5982;&#x4EE5;&#x524D;&#x62A5;&#x544A;&#x51E0;&#x4E2A; UVRR &#x6A21;&#x5F0F;&#x4E5F;&#x662F;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x6C22;&#x952E;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x7684;&#x5432;&#x54DA; N-H &#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x65B0;&#x7684;&#x660E;&#x786E;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E3A; H &#x7C98;&#x63A5;&#xFF1A; &#x5FAE;&#x7C89; W10 (&#x7EA6; 1237&#x5E74;&#x5398;&#x7C73;-1) &#x5F3A;&#x5EA6;&#x7684; W9 &#xFF08;&#x7EA6; 1254&#x5E74;&#x5398;&#x7C73;-1) &#x6A21;&#x5F0F; (RW10) &#x7684;&#x6BD4;&#x7387;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x6BD4;&#x7387;&#x662F;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x7684;&#x6C22;&#x952E;&#x53D7;&#x4F17;&#x4E3A; NATEE 0.7 &#x548C;&#x589E;&#x52A0;&#x5230; 3.1 &#x5F3A;&#x6C22;&#x952E;&#x53D7;&#x4F17;&#xFF0C;&#x503C;&#x4E3A; 2.3 &#x4E2D;&#x6C34;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;W8 &#x548C; W17 &#x6A21;&#x5F0F;&#x8F6C;&#x79FB;&#x8D85;&#x8FC7; + 10 &#x548C;&#x7EA6;-5 &#x5398;&#x7C73;-1 &#x540E;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x6C22;&#x952E;&#x5F3A;&#x5EA6; &#xFF1B;W17 &#x6B64;&#x8303;&#x56F4;&#x8F83;&#x4EE5;&#x524D;&#x62A5;&#x544A;&#xFF0C;&#x53CD;&#x6620;&#x4E86;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x548C;&#x80BD;&#x7684;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x66F4;&#x5207;&#x5408;&#x5B9E;&#x9645;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50; pi &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0B; W18 &#x548C; W16 &#x76F8;&#x5BF9;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x63D0;&#x4F9B;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;UVRR &#x8FD9;&#x4E9B;&#x6807;&#x8BB0;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x89E3;&#x91CA;&#x5149;&#x8C31;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x819C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8272;&#x6C28;&#x9178;&#x8F9B;&#x916F;&#x548C;&#x80BD;&#x6BD2;&#x7D20;&#x8702;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C31;&#x63ED;&#x793A;&#x5185;&#x90E8;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x5F71;&#x54CD;&#x5206;&#x533A;&#x5173;&#x8054;&#x819C;&#x8102;&#x53CC;&#x5C42;&#x6216;&#x7F14;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x4F4E;&#x805A;&#x7269;&#x751F;&#x7269;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x95F4;&#x6C22;&#x7C98;&#x63A5;&#x548C;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50; pi &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x7684; UVRR &#x5206;&#x6790;&#x4FEE;&#x6539;&#x548C;&#x8865;&#x5145;&#x4E86;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x9610;&#x660E;&#x5206;&#x5B50;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x5149;&#x8C31;&#x51B3;&#x7B56;&#x8005;&#x660E;&#x786E;&#x5957;&#x548C;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x951A;&#x5B9A;&#x8272;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x7559;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x591A;&#x80BD;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;

&#x6C22;&#x952E;&#x548C;&#x6EB6;&#x5242;&#x6781;&#x6027;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E2D;&#x7684;&#x7D2B;&#x5916;&#x5171;&#x632F;&#x62C9;&#x66FC;&#x5149;&#x8C31;&#x7684;&#x8272;&#x6C28;&#x9178;&#xFF1A; &#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;

Ultraviolet resonance Raman (UVRR) spectra of tryptophan compounds in various solvents and a model peptide are presented and reveal systematic changes that reflect solvent polarity, hydrogen bond strength, and cation-pi interaction. The commonly utilized UVRR spectral marker for environment polarity that has been based on off-resonance Raman data, the tryptophan Fermi doublet ratio I1360/I1340, exhibits different values in on- and off-resonance Raman spectra as well as for different tryptophan derivatives. Specifically, the UVRR Fermi doublet ratio for indole ranges from 0.3 in polar solvents to 0.8 in nonpolar solvents, whereas the respective values reported here and previously for off-resonance Raman spectra are 0.5-1.3. UVRR Fermi doublet ratios for the more biologically relevant molecule, N-acetyl tryptophan ethyl ester (NATEE), are in a smaller range of 1.1 (polar solvent) to 1.7 (nonpolar solvent) and correlate to the solvent polarity/polarization parameters pi* and ETN. As has been reported previously, several UVRR modes are also sensitive to the hydrogen bond strength of the indole N-H moiety. Here, we report a new unambiguous marker for H-bonding: the ratio of the W10 (approximately 1237 cm-1) intensity to that of the W9 (approximately 1254 cm-1) mode (RW10). This ratio is 0.7 for NATEE in the absence of hydrogen bond acceptors and increases to 3.1 in the presence of strong hydrogen bond acceptors, with a value of 2.3 in water. The W8 and W17 modes shift more than +10 and approximately -5 cm-1 upon increase in hydrogen bond strength; this range for W17 is smaller than that reported previously and reflects a more realistic range for proteins and peptides in solution. Finally, our data provide evidence for change in the W18 and W16 relative intensity in the presence of cation-pi interactions. These UVRR markers are utilized to interpret spectra of model membrane-bound systems tryptophan octyl ester and the peptide toxin melittin. These spectra reveal the importance of intra- and intermolecular hydrogen bonding and cation-pi interactions that likely influence the partitioning of membrane-associated biomolecules to lipid bilayers or self-associated soluble oligomers. The UVRR analysis presented here modifies and augments prior reports and provides an unambiguous set of spectral makers that can be applied to elucidate the molecular microenvironment and structure of a wide range of complex systems, including anchoring tryptophan residues in membrane proteins and peptides.

Hydrogen bonding and solvent polarity markers in the uv resonance raman spectrum of tryptophan: application to membrane proteins.

Ultraviolet r&#xE9;sonance Raman (UVRR) spectres de compos&#xE9;s de tryptophane dans divers solvants et d&#x26;#39;un peptide mod&#xE8;le sont pr&#xE9;sent&#xE9;s et r&#xE9;v&#xE9;ler des changements syst&#xE9;matiques qui refl&#xE8;tent la polarit&#xE9; du solvant, la force de liaison hydrog&#xE8;ne, et de cations-pi interaction. Le marqueur couramment utilis&#xE9; UVRR spectrale pour d&#xE9;terminer la polarit&#xE9; environnement qui a &#xE9;t&#xE9; bas&#xE9;e sur les donn&#xE9;es Raman hors-r&#xE9;sonance, le tryptophane Fermi doublet rapport I1360/I1340, les pr&#xE9;sente des valeurs diff&#xE9;rentes dans et hors-r&#xE9;sonance des spectres Raman ainsi que pour les d&#xE9;riv&#xE9;s du tryptophane diff&#xE9;rents. Plus pr&#xE9;cis&#xE9;ment, le doublet de Fermi UVRR ratio varie de 0,3 indole dans des solvants polaires &#xE0; 0,8 dans les solvants non polaires, tandis que les valeurs respectives rapport&#xE9;s ici et pr&#xE9;c&#xE9;demment pour hors-r&#xE9;sonance des spectres Raman sont 0,5 &#xE0; 1,3. UVRR Fermi rapports doublet pour la mol&#xE9;cule biologiquement pertinente plus, la N-ac&#xE9;tyl tryptophane ester &#xE9;thylique (Natee), sont dans une plage plus petite de 1,1 (solvant polaire) &#xE0; 1,7 (solvant non polaire) et corr&#xE9;ler les solvants de polarit&#xE9; / polarisation param&#xE8;tres pi * et ETN. Comme cela a &#xE9;t&#xE9; indiqu&#xE9; pr&#xE9;c&#xE9;demment, les modes UVRR plusieurs sont &#xE9;galement sensibles &#xE0; la force de liaison hydrog&#xE8;ne de la fraction indole NH. Nous rapportons ici un nouveau marqueur sans ambigu&#xEF;t&#xE9; pour H-collage: le rapport de la W10 (environ 1237 cm-1) l&#x26;#39;intensit&#xE9; de celle de la W9 (environ 1254 cm-1) mode (RW10). Ce ratio est de 0,7 pour Natee en l&#x26;#39;absence de accepteurs de liaisons hydrog&#xE8;ne et des augmentations &#xE0; 3,1 en pr&#xE9;sence de fortes accepteurs de liaisons hydrog&#xE8;ne, avec une valeur de 2,3 dans l&#x26;#39;eau. Les W8 et W17 modes s&#x26;#39;&#xE9;carte de plus de 10 et environ -5 cm-1 lors de l&#x26;#39;augmentation de la r&#xE9;sistance &#xE0; liaison hydrog&#xE8;ne; cette plage pour W17 est plus petite que celle pr&#xE9;c&#xE9;demment indiqu&#xE9;, et refl&#xE8;te une gamme plus r&#xE9;aliste pour des prot&#xE9;ines et des peptides en solution. Enfin, nos donn&#xE9;es fournissent la preuve de changement dans l&#x26;#39;intensit&#xE9; W18 et W16 par rapport &#xE0; la pr&#xE9;sence de cations pi interactions. Ces marqueurs sont utilis&#xE9;s UVRR d&#x26;#39;interpr&#xE9;ter les spectres de mod&#xE8;le ester li&#xE9;e &#xE0; la membrane du tryptophane syst&#xE8;mes d&#x26;#39;octyle et le melittine toxine peptidique. Ces spectres montrent l&#x26;#39;importance de la liaison hydrog&#xE8;ne intra-et intermol&#xE9;culaires et de cations pi interactions susceptibles d&#x26;#39;influer sur la r&#xE9;partition des associ&#xE9;e &#xE0; la membrane des biomol&#xE9;cules &#xE0; bicouches lipidiques ou auto-associ&#xE9;s oligom&#xE8;res solubles. L&#x26;#39;analyse pr&#xE9;sent&#xE9;e ici UVRR modifie et augmente les rapports pr&#xE9;c&#xE9;dents et fournit un ensemble sans ambigu&#xEF;t&#xE9; des d&#xE9;cideurs spectrales qui peuvent &#xEA;tre appliqu&#xE9;es pour &#xE9;lucider le microenvironnement mol&#xE9;culaire et la structure d&#x26;#39;un large &#xE9;ventail de syst&#xE8;mes complexes, y compris les r&#xE9;sidus d&#x26;#39;ancrage du tryptophane dans les prot&#xE9;ines membranaires et des peptides.

La liaison hydrog&#xE8;ne et marqueurs polarit&#xE9; du solvant dans le spectre de r&#xE9;sonance Raman UV du tryptophane: Application aux prot&#xE9;ines membranaires

Ultraviolette Resonanz Raman (UVRR) Spektren der Tryptophan-Mischungen in verschiedenen L&ouml;sungsmitteln und ein Modell-Peptid werden pr&auml;sentiert und systematische &Auml;nderungen, die L&ouml;sungsmittel Polarit&auml;t, Wasserstoff Haftfestigkeit und Interaktion kation-Pi spiegeln zu offenbaren. Der h&auml;ufig genutzte UVRR spektrale Marker f&uuml;r Umwelt-Polarit&auml;t der Grundlage-Resonanz-Raman-Daten, die Tryptophan-Fermi-Wams-Verh&auml;ltnis I1360/I1340, weist unterschiedliche Werte in auf - und ab-Resonanz Raman Spektren sowie f&uuml;r verschiedene Tryptophan-Derivate. Insbesondere reicht das UVRR Fermi-Wams-Verh&auml;ltnis f&uuml;r Indol von 0,3 in polaren L&ouml;sungsmitteln 0,8 in unpolaren L&ouml;sungsmitteln, w&auml;hrend die entsprechenden Werte hier gemeldet und zuvor f&uuml;r aus-Resonanz Raman-Spektren 0,5-1,3 sind. UVRR Fermi Wams Verh&auml;ltnisse f&uuml;r das mehr biologisch relevanten Molek&uuml;l N-Acetyl-Tryptophan-Ethyl-Ester (NATEE), sind in einen kleineren Bereich 1.1 (polare L&ouml;sungsmittel) auf 1,7 (unpolare L&ouml;sungsmittel) und korrelieren die solvent Polarit&auml;t/Polarisation Parameter Pi * und ETN. Wie bereits gemeldet wurde, sind mehrere UVRR Modi auch empfindlich auf die Wasserstoff-Verbundfestigkeit von Indol-N-H-Gruppe. Wir berichten hier, eine neue eindeutige Markierung f&uuml;r H-kleben: das Verh&auml;ltnis der W10 (ca. 1237 cm-1) Intensit&auml;t der W9 (ca. 1254 cm-1) Modus (RW10). Dieses Verh&auml;ltnis ist 0.7 f&uuml;r NATEE in Ermangelung Akzeptoren und erh&ouml;ht auf 3.1 in Gegenwart von starken Akzeptoren, mit einem Wert von 2,3 im Wasser. Die Modi W8 und W17 verschieben mehr als + 10 und ca. - 5 cm-1 bei Anstieg des Wasserstoff-Verbundfestigkeit; Dieser Bereich f&uuml;r W17 ist kleiner als der zuvor berichtet und reflektiert eine realistischere Palette f&uuml;r Proteine und Peptide in L&ouml;sung. Schlie&szlig;lich belegen unsere Daten f&uuml;r den Wandel in der W18 und W16 relative Intensit&auml;t in Anwesenheit kation-Pi-Interaktionen. Diese UVRR-Marker werden genutzt, um Spektren von Modell membrangebundener Systeme Tryptophan Octyl Ester und die Peptid-Toxin-Melittin zu interpretieren. Diese Spektren zeigen die Bedeutung der Intra- und intermolekularen Wasserstoff kation-Pi und Bindung Interaktionen, die wahrscheinlich beeinflussen die Partitionierung von Membran-assoziierte Biomolek&uuml;len Lipid-Doppelschichten oder self-associated l&ouml;sliche Oligomere. Die hier vorgestellte UVRR-Analyse &auml;ndert und erweitert die vorherigen Berichte und bietet einen eindeutigen Satz von spektralen Entscheidungstr&auml;ger, die angewendet werden k&ouml;nnen, um die molekularen Mikromilieu zu erhellen und Struktur einer Vielzahl komplexer Systeme, einschlie&szlig;lich Verankerung Tryptophan R&uuml;ckst&auml;nde in Membranproteine und Peptide.

Wasserstoff-Bonding und solvent Polarit&auml;t Marker in der uv-Resonanz Raman-Spektrum von Tryptophan: Anwendung auf Membranproteine.

Spettri Raman (UVRR) ultravioletta risonanza dei residui di triptofano in vari solventi e un peptide modello vengono presentati e rivelano cambiamenti sistematici che riflettono la polarit&agrave; solvibile, la forza di legame idrogeno e interazione catione-pi. Il marcatore di spettrale UVRR comunemente utilizzato per la polarit&agrave; di ambiente che &egrave; stata basata sui dati di fuori risonanza Raman, il rapporto di doppietto di triptofano Fermi I1360/I1340, esibisce valori diversi in su e fuori-risonanza gli spettri Raman per quanto riguarda i derivati del triptofano differenti. In particolare, il rapporto del farsetto UVRR Fermi per indolo varia da 0,3 in solventi polari a 0,8 in solventi non polari, mentre i rispettivi valori riportati qui e in precedenza per fuori risonanza gli spettri Raman sono 0,5-1,3. UVRR Fermi doppietto rapporti per la molecola pi&ugrave; biologicamente rilevante, estere etilico di N-acetil triptofano (Sandro), sono in una pi&ugrave; piccola gamma di 1.1 (solvente polare) a 1.7 (solventi non polari) e correlano per il solvente polarit&agrave;/polarizzazione parametri pi ed ETN. Come &egrave; stato segnalato in precedenza, diversi modi di UVRR sono anche sensibili alla forza di legame a idrogeno del gruppo N-H di indolo. Qui, segnaliamo un nuovo marcatore inequivocabile per H-bonding: il rapporto dell&#39;intensit&agrave; W10 (circa 1237 cm-1) a quello della modalit&agrave; W9 (1254 circa cm-1) (RW10). Questo rapporto &egrave; 0,7 per Sandro in assenza di accettori di legame idrogeno e aumenta a 3.1 in presenza di forte legame idrogeno ricettori, con un valore di 2.3 in acqua. La modalit&agrave; W8 e W17 shift + pi&ugrave; di 10 e circa - 5 cm-1 all&#39;aumento della forza di legame idrogeno; Questa gamma di W17 &egrave; inferiore rispetto a quello segnalato in precedenza e riflette una gamma pi&ugrave; realistica per le proteine e peptidi in soluzione. Infine, i nostri dati forniscono la prova per cambiamento dell&#39;intensit&agrave; relativa W18 e W16 in presenza di interazioni catione-&pi;. Questi marcatori UVRR vengono utilizzati per interpretare gli spettri di ottile triptofano membrana-limiti sistemi di modello e il melittin tossina peptide. Questi spettri rivelano l&#39;importanza di intra - e idrogeno intermolecolari bonding e catione-pi interazioni che probabilmente influenzano il partizionamento di biomolecole membrana associata a lipidici o oligomeri self-associated solubili. L&#39;analisi UVRR presentato qui modifica e potenzia le relazioni precedenti e fornisce un set di inequivocabile dei creatori spettrale che pu&ograve; essere applicato per delucidare il microambiente molecolare e la struttura di una vasta gamma di sistemi complessi, compresi residui di triptofano nelle proteine di membrana e peptidi di ancoraggio.

Legame idrogeno e indicatori di polarit&agrave; solvibile in risonanza uv spettro raman di triptofano: applicazione di proteine di membrana.

&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x7A2E;&#x3005;&#x306E;&#x6EB6;&#x5A92;&#x4E2D;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3068;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x7D2B;&#x5916;&#x5171;&#x9CF4;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#xFF08;UVRR&#xFF09;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7684;&#x306A;&#x6EB6;&#x5A92;&#x306E;&#x6975;&#x6027;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x5909;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5F37;&#x3055;&#x3001;&#x30AB;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;-&#x3C0;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AA;&#x30D5;&#x5171;&#x9CF4;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x6975;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x5229;&#x7528;UVRR&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EB;&#x30DF;&#x4E8C;&#x91CD;&#x6BD4;I1360/I1340&#x306F;&#x3001;&#x30AA;&#x30F3;&#x3068;&#x30AA;&#x30D5;&#x5171;&#x9CF4;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306B;&#x306F;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x5225;&#x306E;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5024;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6975;&#x6027;&#x6EB6;&#x5A92;&#x306B;0.3&#x304B;&#x3089;&#x975E;&#x6975;&#x6027;&#x6EB6;&#x5A92;&#x4E2D;&#x3067;0.8&#x301C;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306E;UVRR&#x30D5;&#x30A7;&#x30EB;&#x30DF;&#x4E8C;&#x91CD;&#x6BD4;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x5024;&#x306F;&#x3001;&#x30AA;&#x30D5;&#x5171;&#x9CF4;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x3053;&#x3068;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;0.5&#x304B;&#x3089;1.3&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x3001;N-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EB;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#xFF08;NATEE&#xFF09;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;UVRR&#x30D5;&#x30A7;&#x30EB;&#x30DF;&#x4E8C;&#x91CD;&#x6BD4;&#x306F;1.7&#xFF08;&#x6975;&#x6027;&#x6EB6;&#x5A92;&#xFF09;&#x301C;1.1&#xFF08;&#x6975;&#x6027;&#x6EB6;&#x5A92;&#xFF09;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x65B9;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x6EB6;&#x5A92;&#x306E;&#x6975;&#x6027;/&#x504F;&#x5149;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B;&#x76F8;&#x95A2;&#x3C0;*&#x3068;ETN&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;UVRR&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;NH&#x90E8;&#x5206;&#x306E;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5F37;&#x3055;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x3059;&#x3002; W9&#xFF08;&#x7D04;1254&#x30BB;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;-1&#xFF09;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#xFF08;RW10&#xFF09;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3068;W10&#xFF08;&#x7D04;1237&#x30BB;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;-1&#xFF09;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x6BD4;&#xFF1A;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;H-&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6BD4;&#x7387;&#x306F;&#x3001;&#x6C34;&#x4E2D;&#x3067;2.3&#x306E;&#x5024;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x5F37;&#x3044;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;3.1&#x301C;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;NATEE&#x306F;0.7&#x3067;&#x3059;&#x3002; W8&#x3068;W17&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x306F;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;10&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306B;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x7D04;-5 cm-1&#x306B;&#x3001;W17&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3084;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x73FE;&#x5B9F;&#x7684;&#x306A;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;-&#x3C0;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;W18&#x3068;W16&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;UVRR&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x819C;&#x7D50;&#x5408;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x30AA;&#x30AF;&#x30C1;&#x30EB;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x6BD2;&#x7D20;&#x30E1;&#x30EA;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x89E3;&#x91C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306F;&#x5185;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x9593;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x3068;&#x8102;&#x8CEA;&#x4E8C;&#x91CD;&#x5C64;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x81EA;&#x5DF1;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x306E;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3078;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x819C;&#x95A2;&#x9023;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x30AB;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;-&#x3C0;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x63D0;&#x793A;UVRR&#x5206;&#x6790;&#x304C;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x88DC;&#x5F37;&#x524D;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x3001;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3084;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x4E2D;&#x306E;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3092;&#x30A2;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5E83;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x3068;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x30E1;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x3068;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x306E;&#x7D2B;&#x5916;&#x5171;&#x9CF4;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6EB6;&#x5A92;&#x306E;&#x6975;&#x6027;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#xFF1A;&#x65B0;&#x898F;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;

&#xC790;&#xC678;&#xC120; &#xACF5;&#xBA85; &#xB77C;&#xB9CC; (UVRR) &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC6A9; &#xC81C;&#xC640; &#xBAA8;&#xB378; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xD2B8;&#xB9BD;&#xD1A0;&#xD310; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC6A9; &#xB9E4; &#xADF9;&#xC131;, &#xC218;&#xC18C; &#xACB0;&#xD569; &#xAC15;&#xB3C4;&#xC640; &#xC591;&#xC774;&#xC628;-&#xD30C;&#xC774; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBC18;&#xC601; &#xD558;&#xB294; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD65C;&#xC6A9;&#xB41C; UVRR &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xAE30;&#xBC18;-&#xACF5;&#xBA85; &#xB77C;&#xB9CC; &#xB370;&#xC774;&#xD130;, &#xD2B8;&#xB9BD;&#xD1A0;&#xD310; &#xD398;&#xB974;&#xBBF8; doublet &#xBE44;&#xC728; I1360/i1340&#xC73C;&#xB85C; &#xD658;&#xACBD; &#xADF9;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xAC12;&#xC5D0;&#xC5D0;-&#xBC0F; &#xC624;&#xD504;-&#xACF5;&#xBA85; &#xB2E4;&#xB978; &#xD2B8;&#xB9BD;&#xD1A0;&#xD310; &#xD30C;&#xC0DD; &#xC0C1;&#xD488; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB77C;&#xB9CC; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC;. &#xD2B9;&#xD788;, indole UVRR &#xD398;&#xB974;&#xBBF8; doublet &#xBE44;&#xC728; &#xBC94;&#xC704; &#xADF9; &#xC9C0; &#xC6A9; &#xB9E4;&#xC5D0;&#xC11C; 0.3&#xC5D0;&#xC11C; 0.8 nonpolar &#xC6A9; &#xC81C;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xAC12;&#xC774; &#xC5EC;&#xAE30; &#xBCF4;&#xACE0; &#xBC18;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0;-&#xACF5;&#xBA85; &#xB77C;&#xB9CC; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC740; 0.5 1.3. &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xAD00;&#xB828; &#xBD84;&#xC790;, N-&#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xD2B8;&#xB9BD;&#xD1A0;&#xD310; &#xC5D0;&#xD2F8; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974; (NATEE)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; UVRR &#xD398;&#xB974;&#xBBF8; doublet &#xBE44;&#xC728; 1.1 (&#xADF9; &#xC9C0; &#xC6A9; &#xB9E4;) 1.7 (nonpolar &#xC6A9; &#xB9E4;)&#xB97C; &#xC791;&#xC740; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBC0F; &#xC6A9; &#xB9E4; &#xADF9;&#xC131;/&#xC591;&#xADF9; &#xD654; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; pi *&#xC640; ETN &#xAD00;&#xB828;. &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C;, &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; UVRR &#xBAA8;&#xB4DC; indole N H moiety&#xC758; &#xC218;&#xC18C; &#xACB0;&#xD569; &#xAC15;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; H &#xACB0;&#xD569;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBA85;&#xD655;&#xD55C; &#xD45C;&#xC2DD; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;: W9 (&#xC57D; 1254 cm-1) &#xBAA8;&#xB4DC; (RW10)&#xC758; W10 (&#xC57D; 1237 cm-1) &#xAC15;&#xB3C4;&#xC758; &#xBE44;&#xC728;. &#xC774; &#xBE44;&#xC728;&#xC740; &#xC218;&#xC18C; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xB77D;&#xC790;&#xAC00; &#xC5C6;&#xC744; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; NATEE&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; 0.7 &#xC774;&#xBA70; 3.1 &#xAC12;&#xC774; 2.3 &#xBB3C;&#xC5D0; &#xAC15;&#xD55C; &#xC218;&#xC18C; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xB77D;&#xC790; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00;. W8 W17 &#xBAA8;&#xB4DC; &#xC774;&#xB3D9; + 10 &#xC774;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xC57D;-5 c m-1 &#xC218;&#xC18C; &#xACB0;&#xD569; &#xAC15;&#xB3C4;;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xB530;&#xB77C; W17&#xC774; &#xBC94;&#xC704;&#xAC00; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC791;&#xC740; &#xC774;&#xBA70; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD604;&#xC2E4;&#xC801;&#xC778; &#xBC94;&#xC704;&#xB97C; &#xBC18;&#xC601; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC591;&#xC774;&#xC628;-&#xD30C;&#xC774; &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9; &#xC874;&#xC7AC; W18 &#xBC0F; W16 &#xC0C1;&#xB300; &#xAC15;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; UVRR &#xB9C8;&#xCEE4; &#xBAA8;&#xB378; &#xB9C9; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xD2B8;&#xB9BD;&#xD1A0;&#xD310; octyl &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974;&#xC758; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xBC0F; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xB3C5; &#xC18C; melittin &#xD574;&#xC11D;&#xC5D0; &#xD65C;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xB0B4;&#xBD80; &#xBC0F; &#xC9C0;&#xC9C8; bilayers &#xB610;&#xB294; self-associated &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; biomolecules &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBD84;&#xD560;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; intermolecular &#xC218;&#xC18C; &#xACB0;&#xD569; &#xBC0F; &#xC591;&#xC774;&#xC628;-&#xD30C;&#xC774; &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC2DC; &#xB41C; UVRR &#xBD84;&#xC11D; &#xC218;&#xC815; &#xC774;&#xC804; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; &#xC99D;&#xB300; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; microenvironment&#xB97C; &#xBA85;&#xB8CC; &#xD558; &#xAC8C; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xC81C;&#xC870; &#xC5C5;&#xCCB4;&#xC758; &#xBA85;&#xD655;&#xD55C; &#xC138;&#xD2B8; &#xBC0F; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xACE0;&#xC815; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xD2B8;&#xB9BD;&#xD1A0;&#xD310; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC218;&#xC18C; &#xACB0;&#xD569; &#xBC0F; &#xC6A9; &#xB9E4; &#xADF9;&#xC131; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xC790;&#xC678;&#xC120; &#xACF5;&#xBA85;&#xC5D0; &#xD2B8;&#xB9BD;&#xD1A0;&#xD310;&#xC758; &#xB77C;&#xB9CC; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;: &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;.

Resonancia Raman ultravioleta (UVRR) espectros de los compuestos de tript&#xF3;fano en diversos disolventes y un p&#xE9;ptido modelo se presentan y revelan los cambios sistem&#xE1;ticos que reflejen la polaridad del solvente, la fuerza de enlace de hidr&#xF3;geno, y la interacci&#xF3;n cati&#xF3;n-pi. El marcador com&#xFA;nmente utilizado UVRR espectral para polaridad ambiente que se ha basado en fuera de resonancia datos Raman, el tript&#xF3;fano Fermi relaci&#xF3;n doblete I1360/I1340, exhibe valores diferentes en sobre y fuera de resonancia espectros Raman, as&#xED; como para los derivados de tript&#xF3;fano diferentes. En concreto, la relaci&#xF3;n de Fermi UVRR doblete para los rangos de indol a partir de 0,3 en disolventes polares a 0,8 en solventes no polares, mientras que los respectivos valores reportados previamente para aqu&#xED; y fuera de resonancia espectros Raman son 0.5-1.3. UVRR Fermi proporciones doblete para la mol&#xE9;cula biol&#xF3;gicamente m&#xE1;s relevante, N-acetil tript&#xF3;fano &#xE9;ster et&#xED;lico (Natee), est&#xE1;n en un rango menor de 1,1 (disolvente polar) a 1,7 (disolvente no polar) y se correlacionan con los disolventes de polaridad / polarizaci&#xF3;n par&#xE1;metros pi * y ETN. Como se ha descrito anteriormente, varios modos UVRR son tambi&#xE9;n sensibles a la fuerza de uni&#xF3;n de hidr&#xF3;geno del radical NH de indol. Aqu&#xED;, se presenta un nuevo marcador sin ambig&#xFC;edades para H-uni&#xF3;n: la relaci&#xF3;n entre el W10 (aproximadamente 1237 cm-1) la intensidad a la de la W9 (aproximadamente 1254 cm-1) el modo (RW10). Esta relaci&#xF3;n es de 0,7 por Natee en ausencia de aceptores de enlaces de hidr&#xF3;geno y aumenta a 3,1, en presencia de aceptores de enlaces de hidr&#xF3;geno fuertes, con un valor de 2,3 en agua. Las W8 y W17 modos desplazar m&#xE1;s de 10 cm y aproximadamente -5 1-en aumento en la fuerza del enlace de hidr&#xF3;geno; este rango para W17 es menor que la descrita anteriormente y refleja una gama m&#xE1;s realista para las prote&#xED;nas y p&#xE9;ptidos en soluci&#xF3;n. Por &#xFA;ltimo, nuestros datos proporcionan evidencia de un cambio en la intensidad de W18 y W16 en relaci&#xF3;n con la presencia de las interacciones cati&#xF3;n-pi. Estos marcadores UVRR se utilizan para interpretar espectros de modelo unido a la membrana sistemas &#xE9;ster tript&#xF3;fano octilo y la melitina toxina p&#xE9;ptido. Estos espectros muestran la importancia de los enlaces de hidr&#xF3;geno intra e intermoleculares y las interacciones cati&#xF3;n-pi que probable influencia de la divisi&#xF3;n de la membrana asociados a biomol&#xE9;culas de bicapas lip&#xED;dicas o de auto-asociados olig&#xF3;meros solubles. El an&#xE1;lisis presentado aqu&#xED; UVRR modifica y aumenta los informes anteriores y proporciona un conjunto inequ&#xED;voca de los fabricantes espectrales que pueden ser aplicados para dilucidar el microambiente molecular y la estructura de una amplia gama de sistemas complejos, incluyendo anclaje residuos de tript&#xF3;fano en prote&#xED;nas de la membrana y p&#xE9;ptidos.

Enlace de hidr&#xF3;geno y los marcadores solventes de polaridad en el espectro de resonancia UV Raman de tript&#xF3;fano: Aplicaci&#xF3;n a las prote&#xED;nas de membrana

LL 37 &#x662F;&#x5E7F;&#x8C31;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6297;&#x83CC;&#x80BD; cathelicidin &#x5BB6;&#x5EAD;&#x4E2D;&#x3002;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x6700;&#x5C0F;&#x6291;&#x5236;&#x6D53;&#x5EA6;&#x548C;&#x56CA;&#x6CE1;&#x6CC4;&#x6F0F;&#x6548;&#x4EF7;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x8868;&#x660E;&#x5355;-&#x8272;&#x6C28;&#x9178;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;F6W &#x548C; F17W&#xFF0C;&#x90A3;&#x6837;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x6740;&#x6B7B;&#x7EC6;&#x83CC;&#x548C;&#x6270;&#x4E71;&#x819C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x672C;&#x673A;&#x3001; &#x65E0;&#x8272;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; LL 37 &#x80BD;&#x3002;&#x7A33;&#x6001;&#x8367;&#x5149;&#x548C;&#x7D2B;&#x5916;&#x5171;&#x632F;&#x62C9;&#x66FC;&#x5149;&#x8C31;&#x7814;&#x7A76; F6W &#x548C; F17W &#x63ED;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8272;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x7559;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7EC6;&#x8282;&#x3002;&#x5F53;&#x5730;&#x73AF;&#x5883;&#x6781;&#x6027;&#xFF0C;&#x6C22;&#x952E;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x7684;&#x5432;&#x54DA; N-H &#x548C;&#x65CB;&#x8F6C;&#x81EA;&#x7531;&#x4E0B;&#x964D; F6W &#x548C; F17W &#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x78B3;&#x9178;&#x79BB;&#x5B50;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x7684;&#x7EAF;&#x84B8;&#x998F;&#x6C34; &#xFF1B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x90FD;&#x7B26;&#x5408;&#x758F;&#x6C34;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x963F;&#x5C14;&#x6CD5;&#x87BA;&#x65CB; LL 37 &#x78B3;&#x9178;&#x79BB;&#x5B50;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x5BE1;&#x805A;&#x6838;&#x4E2D;&#x57CB;&#x846C;&#x3002;F6W &#x548C; F17W &#x7684;&#x78B3;&#x9178;&#x76D0;&#x8BF1;&#x5BFC; &alpha; &#x87BA;&#x65CB;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x5149;&#x8C31;&#x6027;&#x80FD;&#x5DEE;&#x5F02;&#x53CD;&#x6620;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5730;&#x65B9;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178; F6W &#x4F7F; F6W &#x7684;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x6BD4; F17W &#x66F4;&#x6781;&#x5730;&#x9644;&#x8FD1;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x4E0B;&#x8102;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x73AF;&#x5883;&#x6781;&#x6027;&#x3001; &#x6C22;&#x952E;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x548C;&#x65CB;&#x8F6C;&#x81EA;&#x7531;&#x7684;&#x989D;&#x5916;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x5229;&#x7528;&#x6EB4;&#x5316;&#x7684;&#x8840;&#x8102;&#x7684;&#x6DEC;&#x706B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E2D;&#x7684;&#x8272;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x7559;&#x91CF;&#x57FA;&#x672C;&#x4E0A;&#x5706;&#x5FC3;&#x7B49;&#x8DDD;&#x7684;&#x53CC;&#x5C42;&#x6EB4;&#x5143;&#x7D20;&#x66F4;&#x63A5;&#x8FD1;&#x5230;&#x53CC;&#x5C42;&#x4E2D;&#x5FC3;&#xFF0C;&#x5728; 9,10 &#x7684;&#x7ACB;&#x573A;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x66F4;&#x63A5;&#x8FD1;&#x4E8E; headgroups (6,7 &#x804C;&#x4F4D;) &#x66F4;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x6291;&#x5236;&#x8367;&#x5149;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x652F;&#x6301;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x7834;&#x574F;&#x7531; LL 37 carpeting &#x6216;&#x73AF;&#x5F62;&#x5B54;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8BC1;&#x660E;&#x8272;&#x6C28;&#x9178;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x548C;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x5149;&#x8C31;&#x5DE5;&#x5177;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x53EF;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7EBF;&#x7D22;&#x6297;&#x83CC;&#x884C;&#x52A8;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;

&#x8367;&#x5149;&#x548C;&#x7D2B;&#x5916;&#x5171;&#x632F;&#x62C9;&#x66FC;&#x5149;&#x8C31;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x7C7B; ll-37 &#x548C;&#x5176; F6W &#x548C; F17W &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x80BD;&#x56CA;&#x6CE1;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

LL-37 is a broad-spectrum human antimicrobial peptide in the cathelicidin family. Potency assays in the form of minimal inhibitory concentration and vesicle leakage indicate that the single-tryptophan mutants, F6W and F17W, are as effective at killing bacteria and disrupting membranes as the native, tryptophan-free LL-37 peptide. Steady-state fluorescence and UV resonance Raman spectroscopy of F6W and F17W reveal molecular details of these tryptophan residues. The local environment polarity, hydrogen bond strength of the indole N-H moiety, and rotational freedom decrease for both F6W and F17W in the presence of carbonate ions relative to in pure distilled water; these results are consistent with burial of the hydrophobic region of alpha-helical LL-37 in oligomeric cores induced in the presence of carbonate ions. Differences in the spectroscopic properties of the carbonate-induced alpha-helical forms of F6W and F17W reflect the presence of a local lysine residue near F6W that makes the microenvironment of F6W more polar than that of F17W. In the presence of lipid vesicles, the mutants undergo additional loss of environment polarity, hydrogen bond strength, and rotational freedom. Quenching experiments utilizing brominated lipids reveal that the tryptophan residues in both mutants are essentially equidistant from the bilayer center and that bromines closer to the bilayer center, in the 9,10 positions, quench fluorescence more efficiently than those closer to the headgroups (6,7 positions). These results support carpeting or toroidal pore mechanisms of membrane disruption by LL-37 and demonstrate that the combination of tryptophan mutants and sensitive spectroscopic tools may provide important molecular clues about antimicrobial action.

Fluorescence and UV resonance Raman study of peptide-vesicle interactions of human cathelicidin LL-37 and its F6W and F17W mutants.

LL-37 est un large spectre peptide humain aux antimicrobiens dans la famille de la cath&#xE9;licidine. Potence dosages dans la forme de la concentration inhibitrice minimale et de fuite des v&#xE9;sicules indiquent que les mutants unique tryptophane, et F6W F17W, sont aussi efficace pour tuer les bact&#xE9;ries et les membranes perturber que le natif, le tryptophane sans LL-37 peptide. L&#x26;#39;&#xE9;tat d&#x26;#39;&#xE9;quilibre de fluorescence et spectroscopie Raman de r&#xE9;sonance UV de F6W et F17W r&#xE9;v&#xE9;ler les d&#xE9;tails mol&#xE9;culaires de ces r&#xE9;sidus tryptophane. La polarit&#xE9; environnement local, une force de liaison hydrog&#xE8;ne du fragment indole NH, et diminution de libert&#xE9; de rotation &#xE0; la fois pour F6W et F17W en pr&#xE9;sence d&#x26;#39;ions carbonate par rapport &#xE0; l&#x26;#39;eau distill&#xE9;e pure; ces r&#xE9;sultats sont compatibles avec enterrement de la r&#xE9;gion hydrophobe de l&#x26;#39;alpha-h&#xE9;lico&#xEF;dale LL-37 dans les noyaux oligom&#xE8;res induites en pr&#xE9;sence d&#x26;#39;ions carbonate. Les diff&#xE9;rences dans les propri&#xE9;t&#xE9;s spectroscopiques des formes de carbonate induite par l&#x26;#39;alpha-h&#xE9;lico&#xEF;daux de F6W et F17W refl&#xE9;ter la pr&#xE9;sence d&#x26;#39;un r&#xE9;sidu lysine locale pr&#xE8;s de F6W qui rend le microenvironnement de F6W plus polaire que celui de F17W. En pr&#xE9;sence de v&#xE9;sicules lipidiques, les mutants subir une perte additionnelle de polarit&#xE9; environnement, une force de liaison d&#x26;#39;hydrog&#xE8;ne, et la libert&#xE9; de rotation. Exp&#xE9;riences de trempe utilisant lipides brom&#xE9;s r&#xE9;v&#xE8;lent que les r&#xE9;sidus tryptophane dans les deux mutants sont essentiellement &#xE9;quidistants du centre bicouche et que atomes de brome plus pr&#xE8;s du centre bicouche, dans les positions 9,10, &#xE9;tancher la fluorescence de mani&#xE8;re plus efficace que ceux les plus proches de groupes de t&#xEA;te (6,7 positions). Ces tapis soutien r&#xE9;sultats ou toro&#xEF;daux m&#xE9;canismes de pores de rupture de la membrane par LL-37 et de d&#xE9;montrer que la combinaison de mutants tryptophane et sensibles des outils spectroscopiques peuvent fournir d&#x26;#39;importants indices mol&#xE9;culaires sur une action antimicrobienne.

&#xC9;tude par r&#xE9;sonance de fluorescence UV et Raman de Peptide-v&#xE9;sicules Interactions de l&#x26;#39;homme cath&#xE9;licidine LL-37 et son F6W et Mutants F17W

LL-37 ist ein Breitspektrum menschlichen antimikrobiellen Peptid aus der Familie der Cathelicidin. Wirksamkeit von Proben in Form von minimalen inhibitorischen Konzentration und Telson Leckage zeigen, dass die Einzel-Tryptophan-Mutanten, F6W und F17W, so effektiv bei der T&ouml;tung von Bakterien und die Unterbrechung von Membranen als das native, Tryptophan-free-LL-37-Peptid. Station&auml;ren Fluoreszenz- und UV-Resonanz Raman-Spektroskopie der F6W und F17W offenbaren molekularen Details dieser Tryptophan-R&uuml;ckst&auml;nde. Die lokale Umgebung Polarit&auml;t, Wasserstoff Haftfestigkeit der Indol-N-H-Gruppe und rotatorischen Freiheit R&uuml;ckgang f&uuml;r F6W und F17W in Anwesenheit von Karbonat-Ionen relativ zum reinem destilliertem Wasser; Diese Ergebnisse stehen im Einklang mit der Beerdigung der hydrophoben Region der Alpha-Kegelrad LL-37 in Oligomere Kerne induziert in Anwesenheit von Karbonat-Ionen. Unterschiede in den spektroskopischen Eigenschaften der Alpha-Kegelrad Karbonat-induzierte Formen der F6W und F17W reflektieren das Vorhandensein von lokalen Lysin R&uuml;ckst&auml;nde in der N&auml;he von F6W, die das Mikromilieu des F6W polarer als die der F17W macht. In Anwesenheit von Lipid Vesicles unterziehen die Mutanten zus&auml;tzlichen Verlust von Umwelt-Polarit&auml;t, Wasserstoff Haftfestigkeit und rotatorischen Freiheit. Abschrecken Experimente nutzen bromierte Lipide offenbaren, dass die Tryptophan-R&uuml;ckst&auml;nden in beiden Mutanten im Wesentlichen gleich weit von der Mitte Bilayer sind und Bromines n&auml;her an das Bilayer-Center, in den 9,10 Positionen, Fluoreszenz effizienter als die n&auml;her an der Headgroups (6,7 Positionen) stillen. Diese Ergebnisse unterst&uuml;tzen Teppichboden oder toroidal Pore-Mechanismen der Membrane Unterbrechung von LL-37 und zeigen, dass die Kombination aus Tryptophan Mutanten und sensible spektroskopische Tools wichtige Molekulare Anhaltspunkte &uuml;ber antimikrobielle Wirkung vorsehen.

Fluoreszenz- und UV-Resonanz Raman-Untersuchung der Peptid-Vesikel Wechselwirkungen des menschlichen Cathelicidin LL-37 und seine F6W und F17W Mutanten.

LL-37 &egrave; un peptide di antimicrobici umano ad ampio spettro della famiglia cathelicidin. Dosaggi di potenza sotto forma di minima perdita di concentrazione e vescicola inibitorio indicano che i mutanti di singolo-triptofano, F6W e F17W, sono efficaci a uccidere i batteri e disgregare le membrane come il peptide LL-37 nativo, privo di triptofano. Fluorescenza steady-state e risonanza UV spettroscopia Raman di F6W e F17W rivelare dettagli molecolari di questi residui di triptofano. La polarit&agrave; dell&#39;ambiente locale, forza di legame idrogeno del gruppo N-H indolo e diminuzione libert&agrave; rotazionale sia per F6W e F17W in presenza di ioni di carbonato relativo alla pura acqua distillata; questi risultati sono coerenti con la sepoltura della regione idrofoba di alfa-elicoidale LL-37 nei nuclei oligomerici indotta in presenza di ioni di carbonato. Le differenze nelle propriet&agrave; spettroscopiche delle forme alfa-elicoidale indotta dal carbonato di F6W e F17W riflettono la presenza di un residuo di lisina locale vicino F6W che rende il microambiente del F6W pi&ugrave; polare rispetto a quella di F17W. In presenza di vescicole di lipidi, i mutanti sono sottoposti ad ulteriore perdita di polarit&agrave; di ambiente, la forza di legame idrogeno e libert&agrave; rotazionale. Tempra esperimenti utilizzando ritardanti lipidi rivelano che i residui di triptofano in entrambi mutanti sono essenzialmente equidistanti dal centro doppio strato e che bromines pi&ugrave; vicino al centro del doppio strato, in posizioni 9,10, placare la fluorescenza in modo pi&ugrave; efficiente rispetto a quelli pi&ugrave; vicini alla headgroups (6,7 posizioni). Questi risultati supportano moquette o toroidale poro meccanismi di rottura della membrana di LL-37 e dimostrano che la combinazione di strumenti spettroscopici sensibili e triptofano mutanti possa fornire importanti indizi molecolari sull&#39;azione antimicrobica.

Risonanza di fluorescenza e UV studio Raman di interazioni peptide-vescicola di human cathelicidin LL-37 e suoi mutanti di F6W e F17W.

LL-37&#x30AB;&#x30C6;&#x30EA;&#x30B7;&#x30B8;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x6297;&#x83CC;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x5C0F;&#x767A;&#x80B2;&#x963B;&#x6B62;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x6F0F;&#x308C;&#x306E;&#x5F62;&#x3067;&#x52B9;&#x529B;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3001;F6W&#x3068;F17W&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x3092;&#x6BBA;&#x3057;&#x3001;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;LL-37&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x52B9;&#x679C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; F6W&#x3068;F17W&#x306E;&#x5B9A;&#x5E38;&#x72B6;&#x614B;&#x86CD;&#x5149;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D2B;&#x5916;&#x5171;&#x9CF4;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x6975;&#x6027;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;NH&#x90E8;&#x5206;&#x306E;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x5F37;&#x5EA6;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x76F8;&#x5BFE;&#x70AD;&#x9178;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;F6W&#x3068;F17W&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x56DE;&#x8EE2;&#x81EA;&#x7531;&#x5EA6;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306F;&#x3001;&#x7D14;&#x7C8B;&#x306A;&#x84B8;&#x7559;&#x6C34;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x3B1;-&#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x57CB;&#x846C;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x70AD;&#x9178;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x306E;LL-37&#x3002; F6W&#x3068;F17W&#x306E;&#x70AD;&#x9178;&#x5869;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3B1;-&#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x5206;&#x5149;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306F;F17W&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3088;&#x308A;&#x3082;F6W&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x306F;&#x3088;&#x308A;&#x6975;&#x6027;&#x306B;&#x306A;&#x308A;F6W&#x8FD1;&#x304F;&#x306B;&#x5730;&#x5143;&#x306E;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8102;&#x8CEA;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x74B0;&#x5883;&#x6975;&#x6027;&#x306E;&#x55AA;&#x5931;&#x3001;&#x6C34;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5F37;&#x3055;&#x3001;&#x56DE;&#x8EE2;&#x81EA;&#x7531;&#x5EA6;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x81ED;&#x7D20;&#x5316;&#x8102;&#x8CEA;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x6D88;&#x5149;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;9,10&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306B;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x682A;&#x306E;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x304C;&#x4E8C;&#x91CD;&#x5C64;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x90E8;&#x304B;&#x3089;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x7B49;&#x8DDD;&#x96E2;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x4E8C;&#x91CD;&#x5C64;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x306B;&#x8FD1;&#x3044;&#x81ED;&#x7D20;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;headgroups&#xFF08;6,7&#x306B;&#x8FD1;&#x3044;&#x3082;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x86CD;&#x5149;&#x3092;&#x6D88;&#x5149;&#x30DD;&#x30B8;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#xFF09;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;LL-37&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x30AB;&#x30FC;&#x30DA;&#x30C3;&#x30C8;&#x3084;&#x819C;&#x7834;&#x58CA;&#x306E;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C0;&#x30EB;&#x5B54;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3001;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x5206;&#x5149;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x83CC;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x80DE;&#x30D2;&#x30E5;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30AB;&#x30C6;&#x30EA;&#x30B7;&#x30B8;&#x30F3;LL-37&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3068;&#x305D;&#x306E;F6W&#x3068;F17W&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D2B;&#x5916;&#x5171;&#x9CF4;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x5206;&#x5149;&#x7814;&#x7A76;

&#xCCAD;&#xAC01;-37 cathelicidin &#xC81C;&#xD488;&#xAD70;&#xC758; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD56D;&#xADE0; &#xC131; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xC774;&#xB2E4;. &#xD798; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xCD5C;&#xC18C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xB18D;&#xB3C4; &#xAE30; &#xB204;&#xC124;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD2B8;&#xB9BD;&#xD1A0;&#xD310; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;, F6W &#xBC0F; F17W, &#xC8FD;&#xC774; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC640; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C;, &#xD2B8;&#xB9BD;&#xD1A0;&#xD310; &#xBB34;&#xB8CC; &#xCCAD;&#xAC01;-37&#xC758; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xB85C; &#xB9C9; &#xBC29;&#xD574; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xD568;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC815;&#xC0C1; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC758; &#xD615;&#xAD11; &#xBC0F; &#xC790;&#xC678;&#xC120; &#xACF5;&#xBA85; &#xB77C;&#xB9CC; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC758; F6W &#xBC0F; f17w&#xC774; &#xD2B8;&#xB9BD;&#xD1A0;&#xD310; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC138;&#xBD80; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C0;&#xC5ED; &#xD658;&#xACBD;&#xC758; &#xADF9;&#xC131;, indole N H moiety &#xC21C;&#xC218; &#xC99D;&#xB958;&#xC218;;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD0C4;&#xC0B0; &#xC774;&#xC628;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; F6W &#xBC0F; f17w&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD68C;&#xC804; &#xC790;&#xC720; &#xAC10;&#xC18C;&#xC758; &#xC218;&#xC18C; &#xACB0;&#xD569; &#xAC15;&#xB3C4; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC54C;&#xD30C; &#xB098;&#xC120;&#xD615; &#xCCAD;&#xAC01;-37 &#xC720;&#xB3C4; &#xD0C4;&#xC0B0; &#xC774;&#xC628;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; oligomeric &#xCF54;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC758; &#xB9E4;&#xC7A5;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. F6W &#xBC0F; f17w&#xC758; &#xD0C4;&#xC0B0;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; &#xC54C;&#xD30C; &#xB098;&#xC120;&#xD615; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xBD84; &#xAD11; &#xC18D;&#xC131;&#xC758; &#xCC28;&#xC774; F6W F6W microenvironment f17w&#xC758; &#xADF8;&#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xADF9; &#xD558; &#xAC8C; &#xADFC;&#xCC98; &#xB85C;&#xCEEC; lysine &#xCC0C; &#xAEBC; &#xAE30;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xBC18;&#xC601; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C0;&#xC9C8; vesicles &#xC874;&#xC7AC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD658;&#xACBD; &#xADF9;&#xC131;&#xACFC; &#xC218;&#xC18C; &#xACB0;&#xD569; &#xAC15;&#xB3C4;, &#xC790;&#xC720; &#xD68C;&#xC804;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xBC1B; &#xB2E4;. &#xBE0C;&#xB86C;&#xB41C; &#xC9C0;&#xC9C8;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB0C9;&#xAC01; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xACF5;&#xAC1C; &#xB450; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0; &#xD2B8;&#xB9BD;&#xD1A0;&#xD310; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; bilayer &#xC13C;&#xD130;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB4F1;&#xAC70;&#xB9AC; &#xACE0; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC774; bilayer &#xC13C;&#xD130; 9,10 &#xC704;&#xCE58; bromines headgroups (6,7 &#xC704;&#xCE58;)&#xC5D0; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; &#xADF8; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD615;&#xAD11;&#xC744; &#xB044;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xCCAD;&#xAC01;-37, &#xB9C9; &#xC7A5;&#xC560;&#xC758; &#xCE74;&#xD3AB; &#xB610;&#xB294; &#xC6D0;&#xD658;&#xD615; &#xAE30; &#xACF5; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD558; &#xACE0; &#xD2B8;&#xB9BD;&#xD1A0;&#xD310; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC0F; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xBD84; &#xB3C4;&#xAD6C; &#xC870;&#xD569; &#xD56D;&#xADE0; &#xC131; &#xD589;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xB2E8;&#xC11C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC785;&#xC99D;.

&#xD615;&#xAD11; &#xBC0F; &#xC790;&#xC678;&#xC120; &#xACF5;&#xBA85; &#xB77C;&#xB9CC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC778;&#xAC04; cathelicidin LL-37&#xACFC; F6W &#xBC0F; F17W &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xAE30; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758;.

LL-37 es un amplio espectro antimicrobiano p&#xE9;ptido humano en la familia catelicidina. Ensayos de potencia en la forma de la concentraci&#xF3;n inhibitoria m&#xED;nima y las fugas ves&#xED;cula indican que los mutantes sola-tript&#xF3;fano, F6W y F17W, son eficaces para matar las bacterias y perturbar las membranas como el nativo, tript&#xF3;fano libre de LL-37 p&#xE9;ptido. El estado de equilibrio y la resonancia de fluorescencia ultravioleta de la espectroscopia Raman y F6W F17W revelar los detalles moleculares de estos residuos de tript&#xF3;fano. La polaridad entorno local, la fuerza del enlace de hidr&#xF3;geno de la fracci&#xF3;n de indol NH, y disminuci&#xF3;n de la libertad rotacional para ambos F6W y F17W en presencia de iones de carbonato relativos en agua destilada pura; estos resultados son consistentes con enterramiento de la regi&#xF3;n hidr&#xF3;foba de alfa-helicoidal LL-37 en n&#xFA;cleos oligom&#xE9;ricos inducidas en la presencia de iones de carbonato. Las diferencias en las propiedades espectrosc&#xF3;picas de las formas de carbonato inducida alfa-helicoidales de F6W y F17W reflejan la presencia de un residuo lisina locales cerca F6W que hace que el microambiente de F6W m&#xE1;s polar que el de F17W. En la presencia de ves&#xED;culas lip&#xED;dicas, los mutantes someterse a la p&#xE9;rdida adicional de polaridad medio ambiente, una fuerza de uni&#xF3;n de hidr&#xF3;geno, y la libertad de rotaci&#xF3;n. Enfriamiento experimentos que utilizan l&#xED;pidos bromados revelan que los residuos de tript&#xF3;fano en ambos mutantes son esencialmente equidistantes del centro bicapa y que bromos m&#xE1;s cerca del centro bicapa, en las posiciones 9,10, saciar fluorescencia m&#xE1;s eficientemente que los m&#xE1;s cercanos a los grupos de cabeza (6,7 posiciones). Estos resultados apoyan la alfombra o toroidales mecanismos de disrupci&#xF3;n de la membrana de poro por la LL-37 y demostrar que la combinaci&#xF3;n de los mutantes de tript&#xF3;fano y sensibles instrumentos espectrosc&#xF3;picos pueden proporcionar importantes pistas moleculares sobre la acci&#xF3;n antimicrobiana.

La resonancia de fluorescencia y UV-Raman Estudio de las interacciones ves&#xED;cula p&#xE9;ptido humano de catelicidina LL-37 y Su F6W y mutantes F17W

&#x7C7B;&#x80E1;&#x841D;&#x535C;&#x7D20;&#x5728;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x7EBF;&#x6001;&#x6838;&#x88C2;&#x53D8;&#x6240;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x4E09;&#x7EBF;&#x6001;&#x6FC0;&#x5B50;&#x3002;

Triplet excitons of carotenoids formed by singlet fission in a membrane.

Excitons triplet de carot&eacute;no&iuml;des form&eacute;s par fission singulet dans une membrane.

Triplet Exzitonen Carotinoide durch Singulett Kernspaltung in einer Membran gebildet.

Eccitoni di tripletto di carotenoidi formate da fissione singoletto in una membrana.

&#x4E09;&#x91CD;&#x9805;&#x52B1;&#x8D77;&#x5B50;&#x30AB;&#x30ED;&#x30C6;&#x30CE;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x4E00;&#x91CD;&#x9805;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x819C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Triplet &#xB0B4;&#xC758; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC744; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD615;&#xC131; &#xB41C; &#xCE74;&#xB85C; &#xD2F0; &#xB178;&#xC774; &#xB4DC;&#xC758; excitons.

Diana E. Schlamadinger

Chemistry and Biochemistry

University of California San Diego - UCSD

Thermodynamics of Membrane Protein Folding Measured by Fluorescence Spectroscopy

Diana E. Schlamadinger

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Chemistry and Biochemistry

University of California San Diego - UCSD

Thermodynamics of Membrane Protein Folding Measured by Fluorescence Spectroscopy

Chemistry and Biochemistry