Preparation of Synaptoneurosomes from Mouse Cortex using a Discontinuous Percoll-Sucrose Density Gradient

Synaptoneurosomes (SNs) are obtained after homogenization and fractionation of mouse brain cortex. They are resealed vesicles or isolated terminals that ...

University of Wisconsin

&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; IIIA &#xFF08;TFIIIA&#xFF09;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28; 7 S &#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x86CB;&#x767D;&#x590D;&#x5408;&#x4F53;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x65F6;&#x5B75;&#x5316;&#x4E0E; ATP [&gamma;-(32) P]&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4FEE;&#x6539;&#x662F;&#x51C0;&#x5316;&#x7684;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x51C0;&#x5316;&#x7684;&#x901A;&#x8FC7;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6B65;&#x9AA4;&#x56E0;&#x5B50;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x6FC0;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x6FC0;&#x9176;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F7F;&#x7528; ATP &#x6216; GTP&#xFF0C;&#x5E76;&#x5C06; phosphorylate &#x916A;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x9AD8; TFIIIA &#x6392;&#x9664;&#x5728;&#x5916;&#x3002;&#x6FC0;&#x9176;&#x662F;&#x5341;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x80BD;&#x662F;&#x7279;&#x5B9A;&#x57FA;&#x8D28;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; CK2 &#xFF08;CK2&#xFF0C;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x916A;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; II&#xFF09; &#x4E0E;&#x65E0;&#x529F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x809D;&#x7D20;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x548C;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x4E9A;&#x7CBE;&#x80FA;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x6D3B;&#x52A8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F52;&#x56E0;&#x4E8E; CK2&#x3002;&#x78F7;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5206;&#x6790;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x8BE5;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x78F7;&#x9170;&#x5316;&#x627F;&#x5151;&#x4EBA;&#x5728; TFIIIA &#x4E2D;&#x3002;&#x6709;&#x56DB;&#x4E2A;&#x5171;&#x8BC6;&#x5730;&#x70B9;&#x4E3A; CK2 &#x5728; TFIIIA &#xFF1B;&#x6240;&#x6709;&#x5305;&#x542B;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x6307;&#x8BA4;&#x73B0;&#x573A;&#x7684;&#x6B8B;&#x7559;&#x3002;&#x4ECE;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5B75;&#x5316;&#x4E0E; [(32) P] &#x836F;&#x5242;.&#x6B63; TFIIIA immunoprecipitated &#x4E5F;&#x662F;&#x5B8C;&#x5168;&#x4EE5;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x7559;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x3002;&#x53EA;&#x6709;&#x6C30;&#x6EB4;&#x7247;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x6D3E;&#x751F;&#x7684; TFIIIA N &#x7EC8;&#x7AEF;&#x7ED3;&#x675F;&#xFF0C;&#x88AB;&#x79F0;&#x4E3A;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;CK2&#xFF0C;&#x4F4D;&#x4E8E; Ser(16) &#x950C;&#x6307;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765; beta &#x7248;&#x7684;&#x8BC6;&#x522B;&#x5E8F;&#x5217;&#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x5171;&#x8BC6;&#x5E8F;&#x5217;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x6B64;&#x591A;&#x80BD;&#x3002;&#x4E0E;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; TFIIIA &#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5EFA;&#x7ACB; Ser(16) &#x662F;&#x9996;&#x9009;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E00;&#x4E9B;&#x8F85;&#x52A9;&#x7684;&#x4FEE;&#x6539;&#xFF0C;&#x5728; Ser(314) &#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x3002;

&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; IIIA &#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; CK2 &#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x3002;

Transcription factor IIIA (TFIIIA), isolated from the cytoplasmic 7 S ribonucleoprotein complex of Xenopus oocytes, is phosphorylated when incubated with [gamma-(32)P]ATP. This modification is due to a trace kinase activity that remains associated with the factor through several steps of purification. The kinase can use either ATP or GTP, and will phosphorylate casein and phosvitin to the exclusion of TFIIIA. The kinase is reactive with a ten-amino-acid peptide that is a specific substrate for protein kinase CK2 (CK2; formerly casein kinase II). In addition, inhibition of phosphorylation by heparin and stimulation by spermidine indicate that the activity can be ascribed to CK2. Phospho amino acid analysis established that serine is the sole phosphoryl acceptor in TFIIIA. There are four consensus sites for CK2 in TFIIIA; all contain serine residues at the putative site of phosphorylation. TFIIIA immunoprecipitated from oocytes, which were incubated with [(32)P]orthophosphate, is also phosphorylated exclusively on serine residues. Only the cyanogen bromide fragment, which was derived from the N-terminal end of TFIIIA, is labelled in vivo. A recognition sequence for CK2, located at Ser(16) in the beta-turn of the first zinc-finger domain, is the only protein kinase consensus sequence present in this peptide. Assays in vitro with site-specific mutants of TFIIIA established that Ser(16) is the preferred site of phosphorylation, with some secondary modification at Ser(314).

Phosphorylation of Xenopus transcription factor IIIA by an oocyte protein kinase CK2.

Facteur de transcription IIIA (facteur), isol&eacute;e de la 7 cytoplasmique S complexe ribonucl&eacute;oprot&eacute;ique des ovocytes de Xenopus, est phosphoryl&eacute; incub&eacute;s avec ATP [gamma-(32), P]. Cette modification est due &agrave; une activit&eacute; de kinase de trace qui reste associ&eacute;e par le facteur &agrave; travers plusieurs &eacute;tapes de purification. La kinase peut utiliser ATP ou GTP et va phosphoryler la cas&eacute;ine et la phosvitine &agrave; l&#39;exclusion de facteur. La kinase est r&eacute;active avec un peptide de dix acides amin&eacute;s qui est un substrat sp&eacute;cifique de la prot&eacute;ine-kinase CK2 (CK2 ; anciennement cas&eacute;ine kinase II). En outre, l&#39;inhibition de la phosphorylation par l&#39;h&eacute;parine et la stimulation de la spermidine indiquent que l&#39;activit&eacute; peut &ecirc;tre attribu&eacute;e &agrave; CK2. Analyse des acides amin&eacute;s phospho &eacute;tabli que cette s&eacute;rine est l&#39;accepteur de phosphoryle unique en facteur. Il y a quatre sites de consensus pour CK2 en facteur ; tous contiennent des r&eacute;sidus s&eacute;rine du site putatif de phosphorylation. Immunopr&eacute;cipit&eacute;e facteur d&#39;ovocytes, qui ont &eacute;t&eacute; incub&eacute;e avec [(32) P] orthophosphate, est &eacute;galement phosphoryl&eacute;e exclusivement sur les r&eacute;sidus s&eacute;rine. Uniquement le fragment de bromure cyanog&egrave;ne, qui provenait de l&#39;extr&eacute;mit&eacute; N-terminale de facteur, est &eacute;tiquet&eacute; in vivo. Une s&eacute;quence de reconnaissance de la CK2, situ&eacute; &agrave; Ser(16) dans le virage du premier domaine doigt de zinc, b&ecirc;ta est la seule prot&eacute;ine kinase s&eacute;quence pr&eacute;sente dans ce peptide. Des essais in vitro avec des mutants de facteur &eacute;tabli que Ser(16) est le site privil&eacute;gi&eacute; de la phosphorylation, avec quelques modifications secondaires &agrave; Ser(314).

Phosphorylation du facteur de transcription de Xenopus IIIA par une ovocyte prot&eacute;ine kinase CK2.

Die Phosphorylierung von Xenopus-Transkriptionsfaktor IIIA von einer Eizelle Proteinkinase CK2.

Fattore di trascrizione IIIA (TFIIIA), isolato da 7 citoplasmatica S ribonucleoproteina complesso di ovociti di Xenopus, &egrave; fosforilata quando incubati con ATP [gamma-(32) P]. Questa modifica &egrave; dovuta a un&#39;attivit&agrave; di chinasi traccia che rimane associata con il fattore attraverso diversi passaggi di purificazione. La chinasi possono utilizzare ATP o GTP e sar&agrave; fosforila caseina e phosvitin con l&#39;esclusione di TFIIIA. La chinasi &egrave; reattiva con un dieci-amminoacido peptide che &egrave; un substrato specifico per la proteina chinasi CK2 (CK2; precedentemente chinasi II di caseina). Inoltre, l&#39;inibizione della fosforilazione di eparina e stimolazione da spermidina indicano che l&#39;attivit&agrave; pu&ograve; essere ascritto alla CK2. Analisi dell&#39;amminoacido fosfo stabilito che la serina &egrave; l&#39;accettore di fosforile suola in TFIIIA. Ci sono quattro siti di consenso per CK2 in TFIIIA; tutti contengono residui di serina nel sito putativo di fosforilazione. TFIIIA immunoprecipitated da ovociti, che sono stata incubata con [(32) P] ortofosfato, inoltre &egrave; fosforilata esclusivamente sui residui di Serina. Solo il cianogeno bromuro frammento, che &egrave; stato derivato dall&#39;estremit&agrave; N-terminale del TFIIIA, viene etichettato in vivo. Una riconoscimento sequenza per CK2, situato a Ser(16) alla beta-girata del primo dominio zinc-finger, &egrave; l&#39;unica proteina chinasi consenso presente in questo peptide. Saggi in vitro con mutanti site-specific di TFIIIA stabilito che Ser(16) &egrave; il sito preferito di fosforilazione, con qualche modifica secondaria a Ser(314).

Fosforilazione del fattore di trascrizione di Xenopus IIIA da una proteina chinasi CK2 di ovocita.

&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50; iiia &#x671F; (TFIIIA) &#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA; 7 S &#x304B;&#x3089;&#x30EA;&#x30DC;&#x6838;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316; [&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;-(32) P] ATP &#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306F;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x6D44;&#x5316;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x8981;&#x56E0;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9; &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x304C;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F; ATP &#x307E;&#x305F;&#x306F; GTP &#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x30AB;&#x30BC;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068; TFIIIA &#x306E;&#x6392;&#x9664;&#x306B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D3;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3067;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x3002;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (CK2; &#x4EE5;&#x524D;&#x30AB;&#x30BC;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; II) &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; CK2 &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x7279;&#x5B9A;&#x57FA;&#x677F; 10 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30D8;&#x30D1;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B9;&#x30DA;&#x30EB;&#x30DF;&#x30B8;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3; CK2 &#x306B;&#x5E30;&#x3055;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3002;&#x30D5;&#x30A9;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9; &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x5206;&#x6790;&#x305D;&#x306E;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x552F;&#x4E00;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30EA;&#x30EB; &#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF; TFIIIA &#x3067;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x3002;CK2 TFIIIA &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; 4 &#x3064;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30B9; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x63A8;&#x5B9A;&#x8DE1;&#x5730;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;TFIIIA &#x6C88;&#x6FB1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30C8; [(32) P] &#x6B63;&#x71D0;&#x9178;&#x5869;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x3082;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x6392;&#x4ED6;&#x7684;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;TFIIIA N &#x672B;&#x7AEF;&#x672B;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x306E;&#x307F;&#x3001;&#x30B7;&#x30A2;&#x30F3;&#x81ED;&#x5316; fragment in vivo &#x3067;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Ser(16) &#x3067;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30B8;&#x30F3;&#x30AF;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; &#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x3042;&#x308B; CK2 &#x306E;&#x8A8D;&#x8B58;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x4E00;&#x81F4;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x3053;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Ser(16) &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30BB;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x306E;&#x4FEE;&#x6B63; Ser(314) &#x6642;&#x306E;&#x512A;&#x5148;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3068;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x5909;&#x7570;&#x4F53; TFIIIA &#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5916;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3092;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; CK2 &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50; IIIA &#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3002;

&#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778; IIIA (TFIIIA) &#xC808;&#xC5F0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; 7 S&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; ribonucleoprotein &#xB2E8;&#xC9C0; Xenopus oocytes&#xC758; phosphorylated&#xC740; [&#xAC10;&#xB9C8;-(32) P] ATP&#xC640; &#xC778; &#xD050;&#xBCA0;&#xC774; &#xD305; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;. &#xC774; &#xC218;&#xC815; &#xC815;&#xD654;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC694;&#xC18C;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB0A8;&#xC544; &#xCD94;&#xC801; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC608;&#xC815; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB2C8; ATP &#xB610;&#xB294; GTP, &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC73C;&#xBA70; &#xCE74; &#xC81C;&#xC778; &#xBC0F; TFIIIA &#xC81C;&#xC678; &#xD558; phosvitin phosphorylate &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; ck2&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xAE30;&#xD310; (CK2; &#xC774;&#xC804; &#xCE74; &#xC138; &#xB2C8; 2 &#xC138;)&#xC740; 10 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0B0; &#xC131; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBC18;&#xC751;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD5E4; &#xD30C; &#xB9B0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC640; spermidine&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC790;&#xADF9;&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xD65C;&#xB3D9; CK2 &#xAD00;&#xCC30; &#xB420; &#xC218;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; TFIIIA &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; phosphoryl &#xC218;&#xB77D;&#xC790; &#xC124;&#xB9BD;. &#xAC70;&#xAE30;&#xC5D0; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xD569;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; CK2 TFIIIA;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB450; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xC0C1; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;. TFIIIA immunoprecipitated [(32) P] incubated orthophosphate &#xD588;&#xB2E4; oocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xC810;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; phosphorylated &#xB610;&#xD55C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB9CC; &#xC2DC;&#xC548; &#xD654;&#xC5D0;&#xB294; fragment TFIIIA N &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB05D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC154; &#xC11C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC544;&#xC5F0; &#xC190;&#xAC00;&#xB77D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD134; &#xBCA0;&#xD0C0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; ser(16)&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58;&#xD55C; CK2 &#xC778;&#xC2DD; &#xC21C;&#xC11C;&#xAC00; &#xD3A9; &#xD2F0;&#xC774; &#xB4DC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD569;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xAC00;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. TFIIIA&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xAD00;&#xB828; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC640; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC124;&#xB9BD; Ser(16) ser(314)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xBD80; &#xBCF4;&#xC870; &#xC218;&#xC815; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xC120;&#xD638; &#xD558;&#xB294; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Xenopus &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC218; IIIA oocyte &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; kinase ck2&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;.

Factor de transcripci&oacute;n IIIA (TFIIIA), aislado del citopl&aacute;smico 7 S complejo de Ribonucleoprote&iacute;na de ovocitos de Xenopus, es fosforilado cuando se incuban con [gamma-(32) P] ATP. Esta modificaci&oacute;n obedece a una actividad de la cinasa de rastro que permanece asociada con el factor a trav&eacute;s de varios pasos de purificaci&oacute;n. La quinasa puede utilizar ATP o GTP y fosforilan case&iacute;na y phosvitin a la exclusi&oacute;n de TFIIIA. La quinasa es reactiva con un p&eacute;ptido de 10 amino&aacute;cidos que es un sustrato espec&iacute;fico para la prote&iacute;na quinasa CK2 (CK2; anteriormente case&iacute;na quinasa II). Adem&aacute;s, inhibici&oacute;n de la fosforilaci&oacute;n por heparina y estimulaci&oacute;n por espermidina indican que la actividad puede atribuirse a la CK2. An&aacute;lisis de amino&aacute;cidos Phospho establecieron que eso serina es el aceptador de fosforilo &uacute;nico en TFIIIA. Hay cuatro sitios de consenso para la CK2 en TFIIIA; todos contienen residuos de serina en el supuesto sitio de fosforilaci&oacute;n. TFIIIA immunoprecipitated de ovocitos, que fueron incubado con [(32) P] ortofosfato, tambi&eacute;n es fosforilado exclusivamente en residuos de serina. S&oacute;lo el fragmento de bromuro cian&oacute;geno, que fue derivado desde el extremo N-terminal de TFIIIA, est&aacute; marcado en vivo. Una secuencia de reconocimiento para CK2, situado a Ser(16) en la beta-vuelta del primer dominio de zinc-finger, es la secuencia de consenso de la cinasa de prote&iacute;na &uacute;nica presente en este p&eacute;ptido. Ensayos in vitro con site-specific mutantes de TFIIIA establecieron que Ser(16) es el sitio preferido de fosforilaci&oacute;n, con alguna modificaci&oacute;n secundaria en Ser(314).

Fosforilaci&oacute;n del factor de transcripci&oacute;n de Xenopus IIIA por una quinasa de ovocitos CK2.

RhoB &#x662F;&#x5C0F; GTP &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x548C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5C3F;&#x82F7;&#x5BCC;&#x7EF5;&#x5EF6;&#x514B;&#x9686;&#x9F20;&#x6807; RhoB mRNA &#x5305;&#x62EC; 1377&#x5E74;&#x6838;&#x82F7;&#x9178; 3&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x533A; (UTR)&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x542B;&#x516D;&#x4E2A;&#x975E;&#x76DF;&#x4E30;&#x5BCC;&#x5143;&#x7D20; &#xFF08;&#x963F;&#x745E;&#x65AF;&#xFF09;&#x3002;&#x6709; 94%&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x603B;&#x4F53;&#x9F20;&#x6807;&#x548C;&#x5927;&#x9F20; RhoB &#x57FA;&#x56E0;&#x4E0E;&#x9F20;&#x6807;&#x548C;&#x5047;&#x5B9A;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x514B;&#x9686;&#x4E4B;&#x95F4; 92%&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x3002;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x5149; (UVL) &#x8BF1;&#x5BFC; RhoB &#x751F;&#x4EA7;&#x901A;&#x8FC7;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C; mRNA &#x7A33;&#x5B9A;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x867D;&#x7136;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x540E;&#x8005;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230; UVL &#x589E;&#x52A0; RhoB mRNA &#x4ECE; 63 &#x5206;&#x949F;&#x81F3; 3.3 h NIH/3T3 &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; 87 &#x5206;&#x949F;&#x81F3; 2.7 h &#x6B63;&#x5E38;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x89D2;&#x8D28;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x534A;&#x8870;&#x671F;&#x3002;&#x4F53;&#x5916;&#x79FB;&#x52A8; shift &#x5316;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x5730;&#x70B9; &#xFF08;&#x6838;&#x82F7;&#x9178; 1342&#x5E74; 1696&#x5E74;&#x3001; 1765&#x5E74;-1920 &#x5E74;&#x548C; 1897&#x5E74;-1977 &#x5E74;) &#x73E5;&#x7ED1;&#x5B9A; 3&#39;-UTR &#x7684; RhoB &#x6697;&#x793A;&#x6B64; RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x76D1;&#x7BA1;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x73E5; immunoprecipitations RhoB mRNA &#x8868;&#x660E;&#x4F53;&#x5185;&#x534F;&#x4F1A;&#x4E0E;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x6CD5;&#x8868;&#x660E;&#x73E5;&#x5FEB;&#x901F;&#x5206;&#x533A;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x5411;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28; UVL &#x540E;&#x4E3A;&#x9633;&#x6027;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D; UVL &#x8BF1;&#x4F7F;&#x5E94;&#x6FC0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6838;/&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x7A7F;&#x68AD;&#x73E5;&#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x51FA;&#x73B0;&#x7684; RhoB mRNA &#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

RhoB mRNA &#x73E5; UV &#x706F;&#x540E;&#x4FBF;&#x7A33;&#x5B9A;&#x4E0B;&#x6765;&#x3002;

RhoB is a small GTP-binding protein that is involved in apoptotic signal transduction. We have cloned the mouse RhoB mRNA including a 1377 nucleotide 3'-untranslated region (UTR) that contains six AU-rich elements (AREs) as well as several uridine-rich stretches. There is 94% homology overall between the mouse and rat RhoB genes and 92% homology between the mouse and a putative human clone. Ultraviolet light (UVL) induces RhoB production through regulated changes in gene transcription and mRNA stabilization although the latter mechanism is unknown. We observed that UVL increased the half-life of RhoB mRNA from 63 min to 3.3 h in NIH/3T3 cells and from 87 min to 2.7 h in normal human keratinocyte cells. In vitro mobility shift assays demonstrated that HuR bound the 3'-UTR of RhoB at three distinct locations (nucleotides 1342-1696, 1765-1920 and 1897-1977) suggesting a regulatory role for this RNA-binding protein. HuR immunoprecipitations were positive for RhoB mRNA indicating an in vivo association, and Western blot analysis and immunofluorescence demonstrated that HuR rapidly partitions from the nucleus to the cytoplasm after UVL. Therefore, we propose a model in which UVL induces stress-activated signal transduction leading to nuclear/cytoplasmic shuttling of HuR and subsequent stabilization of RhoB mRNA.

RhoB mRNA is stabilized by HuR after UV light.

RhoB est un petit prot&#xE9;ine liant le GTP qui est impliqu&#xE9; dans la transduction du signal apoptotique. Nous avons clon&#xE9; l&#x26;#39;ARNm RhoB souris dont un nucl&#xE9;otide 3&#x26;#39;-1377 r&#xE9;gion non traduite (UTR) qui contient six &#xE9;l&#xE9;ments de l&#x26;#39;UA-riches (ARE) ainsi que plusieurs uridine-riches &#xE9;tendues. Il ya homologie globale de 94% entre la souris et de rat et de g&#xE8;nes RHOB homologie de 92% entre la souris et un clone pr&#xE9;sum&#xE9; humain. La lumi&#xE8;re ultraviolette (UVL) induit la production de RhoB par des changements dans la transcription des g&#xE8;nes r&#xE9;gul&#xE9;s et stabilisation de l&#x26;#39;ARNm, bien que ce dernier m&#xE9;canisme est inconnu. Nous avons observ&#xE9; que UVL augment&#xE9; la demi-vie de l&#x26;#39;ARNm &#xE0; partir de 63 min RhoB &#xE0; 3,3 h en cellules NIH/3T3 et de 87 min &#xE0; 2,7 h en cellules normales k&#xE9;ratinocytes humains. In vitro des dosages de d&#xE9;calage de mobilit&#xE9; a d&#xE9;montr&#xE9; que HuR li&#xE9; le 3&#x26;#39;-UTR de RhoB &#xE0; trois endroits distincts (nucl&#xE9;otides 1342-1696, les 1765-1920 et 1897-1977) sugg&#xE9;rant un r&#xF4;le de r&#xE9;gulation de cette prot&#xE9;ine fixation &#xE0; l&#x26;#39;ARN. Immunopr&#xE9;cipitations Hur &#xE9;taient positifs pour l&#x26;#39;ARNm de RhoB indiquant une association in vivo, et l&#x26;#39;analyse Western blot et immunofluorescence a d&#xE9;montr&#xE9; que HuR rapidement des partitions du noyau vers le cytoplasme apr&#xE8;s UVL. Par cons&#xE9;quent, nous proposons un mod&#xE8;le dans lequel UVL transduction du signal induit le stress-activated conduisant &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;nergie nucl&#xE9;aire / cytoplasmique navette de Hur et la stabilisation ult&#xE9;rieure de l&#x26;#39;ARNm de RhoB.

ARNM RhoB est stabilis&#xE9;e par HuR Apr&#xE8;s la lumi&#xE8;re UV

RhoB mRNA wird durch HuR nach UV-Licht stabilisiert.

RhoB &egrave; una piccola proteina GTP-binding che &egrave; coinvolto nella trasduzione del segnale apoptotico. Noi abbiamo clonato il mouse RhoB mRNA compreso un nucleotide 1377 3&#39;-regione non tradotta (UTR) che contiene sei elementi AU-rich (AREs) oltre a diversi tratti di uridina-ricco. C&#39;&egrave; omologia 94% complessivo tra il topo e ratto RhoB geni e 92% di omologia tra il mouse e un clone umano putativo. Luce ultravioletta (UVL) induce la produzione di RhoB attraverso cambiamenti regolamentati nella stabilizzazione di mRNA e la trascrizione genica anche se il meccanismo di quest&#39;ultimo &egrave; sconosciuto. Abbiamo osservato che UVL aumentata l&#39;emivita del mRNA RhoB da 63 min a 3,3 h in cellule NIH/3T3 e da 87 min a 2,7 h in cellule normali dei cheratinociti umani. Mobilit&agrave; in vitro MAIUSC analisi hanno dimostrato che HuR associato il 3&#39;-UTR di RhoB in tre sedi distinte (nucleotidi 1342-1696, 1765-1920 e 1897-1977) suggerendo un ruolo normativo per questo RNA-binding protein. HuR immunoprecipitazione erano positivi per RhoB mRNA che indica un&#39;associazione in vivo e Western blot analisi e immunofluorescenza ha dimostrato che HuR rapidamente partizioni dal nucleo al citoplasma dopo UVL. Pertanto, vi proponiamo un modello in cui UVL induce la trasduzione del segnale attivata da stress che portano a spola nucleare/citoplasmico di HuR e successiva stabilizzazione del mRNA RhoB.

RhoB mRNA &egrave; stabilizzata da HuR dopo la luce UV.

RhoB&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;GTP&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;6&#x3064;&#x306E;AU-&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#xFF08;ARE&#xFF09;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30A6;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x306B;&#x5BCC;&#x3093;&#x3060;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C1;&#x3092;&#x542B;&#x3080;1377&#x5869;&#x57FA;&#x306E;3&#x26;#39;-&#x975E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x9818;&#x57DF;&#xFF08;UTR&#xFF09;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;RhoB mRNA&#x3092;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;RhoB&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x9593;&#x306B;92&#xFF05;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;94&#xFF05;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F8C;&#x8005;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x7D2B;&#x5916;&#x5149;&#xFF08;UVL&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3068;mRNA&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x306B;&#x898F;&#x5236;&#x5909;&#x66F4;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;RhoB&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;UVL&#x304C;&#x6B63;&#x5E38;&#x30D2;&#x30C8;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CE;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;87&#x5206;&#x304B;&#x3089;2.7 h&#x306B;NIH/3T3&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;3.3&#x6642;&#x9593;&#x306B;63&#x5206;&#x304B;&#x3089;RhoB mRNA&#x306E;&#x534A;&#x6E1B;&#x671F;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x306E;&#x79FB;&#x52D5;&#x5EA6;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;HuR&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;RNA&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;3&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5834;&#x6240;&#xFF08;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;1342&#x304B;&#x3089;1696&#x5E74;&#x3001;1765&#x5E74;&#x304B;&#x3089;1920&#x5E74;&#x3068;1897&#x5E74;&#x304B;&#x3089;1977&#x5E74;&#xFF09;&#x3067;RhoB&#x306E;3&#x26;#39;-UTR&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; HuR&#x306E;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x95A2;&#x9023;&#x3067;&#x793A;&#x3059;RhoB mRNA&#x306E;&#x967D;&#x6027;&#x3001;&#x30A6;&#x30A8;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x5206;&#x6790;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x306F;&#x6838;&#x304B;&#x3089;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x3078;&#x306E;UVL&#x5F8C;HuR&#x306E;&#x304C;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;UVL&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;/&#x6838;HuR&#x306E;&#x3068;RhoB mRNA&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x306E;&#x5F80;&#x5FA9;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

RhoB mRNA&#x306F;&#x3001;UV&#x30E9;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x5F8C;HuR&#x306E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;

RhoB apoptotic &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xC791;&#xC740; GTP &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C;, &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; uridine &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xBED7;&#xC5B4; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; RhoB mRNA 1377 &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; 3&#39;-untranslated (UTR) &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC601;&#xC5ED;&#xC774; 6 &#xB204;&#xAD6C;&#xB098; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C; (AREs)&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF5;&#xC81C;. 94%&#xC758; homology &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC640; &#xC950; RhoB &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; 92%&#xC758; homology &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC640; &#xC0C1; &#xC778;&#xAC04; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC0AC;&#xC774; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC790;&#xC678;&#xC120; (UVL) &#xBE44;&#xB85D; &#xD6C4;&#xC790;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;&#xC640; mRNA &#xC548;&#xC815;&#xD654; &#xADDC;&#xC81C; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; RhoB &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; UVL &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; keratinocyte &#xC140; 2.7 h 87 &#xBD84; &#xBC0F; NIH/3T3 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; 3.3 h 63 &#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; RhoB Mrna&#xC758; &#xBC18;&#xAC10;&#xAE30; &#xC99D;&#xAC00; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCCB4; &#xC678; &#xAE30;&#xB3D9;&#xC131; &#xAD50;&#xB300; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD5C8; &#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC704;&#xCE58; (&#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; 1342-1696, 1765-1920, 1897-1977) &#xC2DC; Rhob&#xC758; 3&#39;-UTR&#xC774; RNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADDC;&#xC81C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD5C8; immunoprecipitations RhoB mRNA vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xD611;&#xD68C; &#xBC0F; &#xC11C;&#xC591; &#xC624; &#xC810; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xAC80;&#xC0AC;&#xB294; &#xD5C8; &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xBD84;&#xD560; &#xD575;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC5D0; UVL &#xD6C4; &#xC2DC;&#xC5F0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; UVL &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xD5C8; &#xACE0; RhoB Mrna&#xC758; &#xD6C4;&#xC18D; &#xC548;&#xC815;&#xD654;&#xC758; &#xD575;/&#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xC600;&#xC8E0; &#xC120;&#xB3C4; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

RhoB Mrna&#xB294; &#xD5C8; &#xD6C4; &#xC790;&#xC678;&#xC120;&#xC5D0; &#xC548;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

RhoB es una peque&#xF1;a prote&#xED;na de uni&#xF3;n a GTP que est&#xE1; implicado en la transducci&#xF3;n de la se&#xF1;al apopt&#xF3;tica. Hemos clonado el ARNm RhoB rat&#xF3;n incluyendo un nucle&#xF3;tido 1377 regi&#xF3;n 3 &#x26;#39;no traducida (UTR) que contiene seis UA-ricos elementos (ARE), as&#xED; como varios tramos uridina-ricos. Hay 94% de homolog&#xED;a general entre el rat&#xF3;n y los genes de rata RhoB y 92% de homolog&#xED;a entre el rat&#xF3;n y un clon humano putativo. La luz ultravioleta (LUV) induce la producci&#xF3;n de RhoB a trav&#xE9;s de cambios en la transcripci&#xF3;n de genes regulados y la estabilizaci&#xF3;n del ARNm, aunque este &#xFA;ltimo mecanismo es desconocido. Hemos observado que la LUV incrementado la vida media del ARNm RhoB de 63 min a 3,3 h en c&#xE9;lulas NIH/3T3 y de 87 min a 2,7 h en condiciones normales de c&#xE9;lulas de queratinocitos humanos. En los ensayos in vitro de cambio de movilidad demostrado que HuR obligada la 3&#x26;#39;-UTR de RhoB en tres lugares distintos (1342-1696 y 1765-1920 nucle&#xF3;tidos y 1897-1977) lo que sugiere un papel regulador de esta prote&#xED;na de uni&#xF3;n al ARN. Immunoprecipitations Hur fueron positivas para ARNm RhoB indica un estudio in vivo de asociaci&#xF3;n, y el an&#xE1;lisis de Western blot e inmunofluorescencia demostr&#xF3; que Hur r&#xE1;pidamente particiones desde el n&#xFA;cleo hasta el citoplasma despu&#xE9;s de la LUV. Por lo tanto, se propone un modelo en el que UVL induce el estr&#xE9;s activa la transducci&#xF3;n de se&#xF1;ales que conduce a la energ&#xED;a nuclear / citoplasm&#xE1;tica ir y venir de los Hur y posterior estabilizaci&#xF3;n del ARNm RhoB.

ARNm RhoB se estabiliza por Hur Despu&#xE9;s de la luz ultravioleta

HuR &egrave; un elemento AU-rich ubiquitously espresso (sono)-proteina che interagisce con e stabilizza selettiva precoce risposta genica (ERG) mRNAs dopo attivazione delle cellule o di stress. Ad oggi, circa 20 mRNAs sono stati definiti senza ambiguit&agrave; come ligandi HuR. Data la discordanza tra il grande numero dei mRNAs ERG e quei pochi definiti come leganti, abbiamo applicato la selezione in vitro per isolare i ligandi di mRNA un ampia gamma di HuR utilizzando tessuto ippocampale postseizure del mouse. MRNAs selezionati sono stati convertiti in librerie di cDNA e sequenziato. Utilizzando questo approccio, abbiamo individuato oltre 600 ligandi di mRNA HuR romanzo, putativo. Questi geni codificano per una variet&agrave; di proteine, tra cui fattori di trascrizione, molecole di segnalazione e chinasi, ma molti hanno sconosciuto funzione. Coerente con il mezzo della loro selezione, molti di questi ligandi HuR sono differenzialmente espressi in hippocampus dopo il sequestro. Questi risultati dimostrano un approccio biochimico per identificare e caratterizzare il repertorio vario di ligandi per HuR e altre proteine regolatorie mRNA-associazione.

HuR ligandi mRNA espressi dopo il sequestro.

&#x73E5;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x8868;&#x793A;&#x7684;&#x975E;&#x76DF;&#x4E30;&#x5BCC;&#x5143;&#x7D20; (&#x662F;)-&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E0E;&#x4EA4;&#x4E92;&#x548C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6216;&#x5E94;&#x6FC0;&#x540E;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x65E9;&#x671F;&#x53CD;&#x5E94;&#x57FA;&#x56E0; (ERG) &#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#xFF0C;&#x5927;&#x7EA6; 20 mRNAs &#x88AB;&#x660E;&#x786E;&#x754C;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x73E5;&#x914D;&#x4F53;&#x3002;&#x9274;&#x4E8E; ERG &#x5206;&#x6CCC;&#x5927;&#x91CF;&#x4E0E;&#x5B9A;&#x4E49;&#x4E3A;&#x914D;&#x4F53;&#x90A3;&#x4E9B;&#x5C11;&#x6570;&#x98CE;&#x6CE2;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5E94;&#x7528;&#x4F53;&#x5916;&#x9009;&#x62E9;&#x9694;&#x79BB;&#x4F7F;&#x7528; postseizure &#x5C0F;&#x9F20;&#x6D77;&#x9A6C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x8303;&#x56F4;&#x6237;&#x73E5; mRNA &#x914D;&#x4F53;&#x3002;&#x9009;&#x5B9A;&#x7684; mRNAs &#x88AB;&#x8F6C;&#x6362;&#x6210; cDNA &#x5E93;&#x548C;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x6709;&#x8D85;&#x8FC7; 600 &#x65B0;&#x9896;&#x3001; &#x6307;&#x8BA4;&#x73E5; mRNA &#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x4EE3;&#x7801;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5206;&#x5B50;&#x548C;&#x6FC0;&#x9176;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8BB8;&#x591A;&#x5177;&#x6709;&#x672A;&#x77E5;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;&#x7B26;&#x5408;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6240;&#x9009;&#x62E9;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x73E5;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5DEE;&#x5F02;&#x8868;&#x793A;&#x6D77;&#x9A6C;&#x540E;&#x6263;&#x62BC;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x751F;&#x5316;&#x7684;&#x529E;&#x6CD5;&#x6765;&#x786E;&#x5B9A;&#x548C;&#x8FA8;&#x522B;&#x4E0D;&#x540C;&#x6C47;&#x8F91; &#x300B; &#x914D;&#x4F53;&#x73E5;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x76D1;&#x7BA1;&#x7684; mRNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;

&#x73E5; mRNA &#x914D;&#x4F53;&#x540E;&#x6263;&#x62BC;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x3002;

HuR is a ubiquitously expressed AU-rich element (ARE)-binding protein that interacts with and stabilizes selective early response gene (ERG) mRNAs after cell activation or stress. To date, approximately 20 mRNAs have been unambiguously defined as HuR ligands. Given the discordance between the large number of ERG mRNAs and those few defined as ligands, we applied in vitro selection to isolate a broad range of HuR mRNA ligands using postseizure mouse hippocampal tissue. Selected mRNAs were converted into cDNA libraries and sequenced. Using this approach, we have identified over 600 novel, putative HuR mRNA ligands. These genes code for a variety of proteins, including transcription factors, signaling molecules, and kinases, but many have unknown function. Consistent with the means of their selection, several of these HuR ligands are differentially expressed in hippocampus after seizure. These results demonstrate a biochemical approach to identify and characterize the diverse repertoire of ligands for HuR and other regulatory mRNA-binding proteins.

HuR mRNA ligands expressed after seizure.

HuR est une expression ubiquitaire de l&#x26;#39;UA riche en &#xE9;l&#xE9;ment (ARE)-binding protein qui interagit avec et stabilise s&#xE9;lectifs d&#xE9;but de r&#xE9;ponse de g&#xE8;nes (ERG) ARNm apr&#xE8;s l&#x26;#39;activation des cellules ou de stress. &#xC0; ce jour, environ 20 ARNm ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;finies sans ambigu&#xEF;t&#xE9; en tant que ligands Hur. Compte tenu de la discordance entre le grand nombre de ERG ARNm et les rares d&#xE9;fini en tant que ligands, nous avons appliqu&#xE9; la s&#xE9;lection in vitro d&#x26;#39;isoler un large &#xE9;ventail de ligands ARNm Hur en utilisant des tissus de la souris postseizure hippocampique. ARNm s&#xE9;lectionn&#xE9;s ont &#xE9;t&#xE9; converties en banques d&#x26;#39;ADNc et s&#xE9;quenc&#xE9;. En utilisant cette approche, nous avons identifi&#xE9; plus de 600 roman, putatifs ligands ARNm Hur. Ces g&#xE8;nes codent pour une vari&#xE9;t&#xE9; de prot&#xE9;ines, y compris les facteurs de transcription, des mol&#xE9;cules de signalisation, et les kinases, mais beaucoup ont une fonction inconnue. Conform&#xE9;ment avec les moyens de leur choix, plusieurs de ces ligands Hur sont exprim&#xE9;s de fa&#xE7;on diff&#xE9;rentielle dans l&#x26;#39;hippocampe apr&#xE8;s la saisie. Ces r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent une approche biochimique pour identifier et caract&#xE9;riser le r&#xE9;pertoire diversifi&#xE9; de ligands pour Hur et autres organismes de r&#xE9;glementation ARNm des prot&#xE9;ines de liaison.

Ligands ARNm Hur exprim&#xE9; apr&#xE8;s la saisie

HuR ist ein ubiquit&auml;r exprimierten AU-Reich-Element (ARE)-verbindliches Protein, die mit interagiert und selektive fr&uuml;he Antwort gen (ERG) mRNAs nach ZELLAKTIVIERUNG oder Stress stabilisiert. Bis heute wurden ca. 20 mRNAs als HuR Liganden eindeutig definiert. Da die Diskordanz zwischen der Vielzahl der ERG mRNAs und jene wenigen, die als Liganden definiert, angewendet wir in-vitro-Auswahl, um eine breite Palette von HuR mRNA-Liganden mit postseizure Maus hippocampal Gewebe zu isolieren. Ausgew&auml;hlte mRNAs waren umgewandelt cDNA-Bibliotheken und sequenziert. Bei dieser Vorgehensweise haben wir &uuml;ber 600 Roman, vermeintliche HuR mRNA-Liganden identifiziert. Diese Gene Codieren f&uuml;r eine Vielzahl von Proteinen, einschlie&szlig;lich Transkriptionsfaktoren, signalisierende Molek&uuml;le und Kinasen, aber viele haben unbekannte Funktion. Einklang mit den Mitteln von ihrer Auswahl, werden mehrere von diesen HuR-Liganden differentiell Hippocampus nach Beschlagnahme ausgedr&uuml;ckt. Diese Ergebnisse zeigen einen biochemischen Ansatz zu identifizieren und zu charakterisieren das vielf&auml;ltige Repertoire der Liganden f&uuml;r HuR und anderen regulatorischen mRNA-bindenen Proteine.

HuR-mRNA-Liganden nach Beschlagnahme ausgedr&uuml;ckt.

HuR&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x504F;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;AU-&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#xFF08;ARE&#xFF09;&#x7D50;&#x5408;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3084;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x5F8C;&#x306B;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306A;&#x521D;&#x671F;&#x5FDC;&#x7B54;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF08;ERG&#xFF09;&#x306E;mRNA&#x3092;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x307E;&#x3067;&#x306B;&#x3001;&#x7D04;20 mRNA&#x306F;&#x660E;&#x78BA;HuR&#x306E;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; ERG mRNA&#x3068;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x6570;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x4E0D;&#x4E00;&#x81F4;&#x3092;&#x8003;&#x3048;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;postseizure&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x6D77;&#x99AC;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;HuR&#x306E;mRNA&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3092;&#x7279;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9078;&#x629E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;mRNA&#x306F;cDNA&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x5909;&#x63DB;&#x3057;&#x3001;&#x914D;&#x5217;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;600&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3001;&#x63A8;&#x5B9A;HuR&#x306E;mRNA&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5206;&#x5B50;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x304C;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x624B;&#x6BB5;&#x3068;&#x3001;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;HuR&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306F;&#x5DEE;&#x52D5;&#x767A;&#x4F5C;&#x5F8C;&#x6D77;&#x99AC;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;HuR&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306E;mRNA&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x30EC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x767A;&#x4F5C;&#x5F8C;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;HuR&#x306E;mRNA&#x306E;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;

&#xD5C8;&#xB294; &#xD3B8; &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; &#xB204;&#xAD6C;&#xB098; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C; (&#xC740;)-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB610;&#xB294; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xD6C4; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xCD08;&#xAE30; &#xC751;&#xB2F5; &#xC720;&#xC804;&#xC790; (&#xB974; &#xADF8;) mRNAs &#xC548;&#xC815;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;. &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC57D; 20 Mrnas&#xB294; &#xD5C8; ligands&#xB85C; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xC815;&#xC758; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB974; &#xADF8; Mrnas&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xC218;&#xC640; &#xADF8; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; ligands&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xBD80;&#xC870;&#xD654;&#xB97C; &#xAC10;&#xC548;&#xD560; &#xB54C;, &#xC6B0;&#xB9AC; postseizure &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; hippocampal &#xD2F0;&#xC288;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xD5C8; mRNA ligands &#xBD84;&#xB9AC; &#xCCB4; &#xC678; &#xC120;&#xD0DD; &#xC801;&#xC6A9;. &#xC120;&#xD0DD;&#xD55C; mRNAs cDNA &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; &#xBCC0;&#xD658; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC; 600 &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xC18C;&#xC124;, &#xC0C1; &#xD5C8; mRNA ligands &#xD655;&#xC778;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCF54;&#xB4DC; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;, &#xB4F1; &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC790;, kinases, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB9CE;&#xC740; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xD568;&#xC218;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xC758; &#xC758;&#xBBF8;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD5C8; ligands&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xCC28;&#xB3D9; &#xD45C;&#xD604; &#xD574; &#xB9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC791; &#xD6C4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC785;&#xC99D; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; &#xADDC;&#xC81C; mRNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD5C8; ligands&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB808; &#xD37C; &#xD1A0;&#xB9AC;&#xB97C; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0DD; &#xD654; &#xD559;&#xC801; &#xC811;&#xADFC;.

&#xD5C8; mRNA ligands &#xBC1C;&#xC791; &#xD6C4; &#xD45C;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hur es una expresi&#xF3;n ubicua de la UA-ricos elementos (ARE)-prote&#xED;na de uni&#xF3;n que interact&#xFA;a con y estabiliza selectiva de genes de respuesta temprana (ERG) despu&#xE9;s de la activaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas ARNm o el estr&#xE9;s. Hasta la fecha, aproximadamente 20 ARNm se han definido de manera inequ&#xED;voca como ligandos Hur. Dada la discordancia entre el gran n&#xFA;mero de ERG ARNm y aquellos pocos define como ligandos, se aplic&#xF3; la selecci&#xF3;n in vitro para aislar una amplia gama de ligandos de mRNA Hur utilizando tejido del hipocampo postseizure rat&#xF3;n. MRNAs elegidos fueron convertidos en bibliotecas de cDNA y secuenciado. Con este enfoque, se han identificado m&#xE1;s de 600 novela, supuestos ligandos mRNA Hur. Estos genes codifican para una variedad de prote&#xED;nas, incluyendo factores de transcripci&#xF3;n, mol&#xE9;culas de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, y quinasas, pero muchos tienen funci&#xF3;n desconocida. De acuerdo con los medios de su selecci&#xF3;n, varios de estos ligandos Hur est&#xE1;n expresados &#x200B;&#x200B;diferencialmente en el hipocampo despu&#xE9;s de la toma. Estos resultados demuestran un enfoque bioqu&#xED;mico para identificar y caracterizar el diverso repertorio de ligandos para Hur y otras prote&#xED;nas reguladoras de uni&#xF3;n del mRNA.

Los ligandos Hur mRNA expresado despu&#xE9;s de la toma

&Uuml;berproduktion von Amyloid Vorl&auml;uferprotein (APP) und Beta-Amyloid wahrscheinlich tragen zur Neurodegeneration bei Alzheimer-Krankheit (AD). In einer Bem&uuml;hung, neuronale APP Genregulation zu verstehen, haben wir ein 52 base-Element (52sce) identifiziert sofort stromabw&auml;rts von der Stop-Codon, das APP mRNA stabilisiert. L&ouml;schung dieser Domain drastisch destabilisierten APP mRNAs und APP-Synthese in-vitro reduziert. Chim&auml;ren Globin-APP mRNAs, enth&auml;lt die Codierung Sequenz Globin verschmolzen, die gesamte APP 3&#39;-UTR, zeigte Verordnung in APP-mRNA &auml;hnlich. Eine Vielzahl von zytoplasmatischen Lysates enthalten 52sce RNA Bindung Aktivit&auml;t, was darauf hindeutet, dass die Cis-Trans-Interaktionen des Elements Funktionen regulieren. Schlie&szlig;lich die &Uuml;berexpression von Chim&auml;ren mRNAs, mit der GFP coding-Sequenz und APP 3&#39;-UTR, drastisch reduzierte endogene APP station&auml;ren Ebenen in SH-SY5Y Neuroblastoma Zellen und schl&auml;gt einen neuartigen Ansatz zur Verringerung der amiloide Belastung bei AD-Patienten.

K&ouml;der mRNAs reduzieren Beta-Amyloid-Vorl&auml;uferprotein mRNA in neuronalen Zellen.

Sovrapproduzione della proteina precursore dell&#39;amiloide (APP) e beta-amiloide probabilmente contribuiscono alla neurodegenerazione nella malattia di Alzheimer (AD). Nel tentativo di comprendere la regolazione dei geni neuronali APP, abbiamo identificato un elemento base 52 (52sce) immediatamente a valle del codone di stop che stabilizza APP mRNA. Eliminazione di questo dominio drasticamente destabilizzato APP mRNAs e ridotta sintesi APP in vitro. MRNA chimerico globina-APP contenente la sequenza codificante di globina fusi per l&#39;intera APP 3&#39;-UTR, ha mostrato regolamento simile al mRNA APP full-length. Una variet&agrave; di lisati citoplasmatici contengono attivit&agrave; di associazione RNA 52sce, suggerendo le interazioni cis-trans regolano la funzionalit&agrave; dell&#39;elemento. Infine, la sovraespressione di mRNA chimerico, contenente la GFP codifica APP e sequenza 3&#39;-UTR, drasticamente ridotto i livelli di steady-state APP endogeni in cellule di neuroblastoma SH-SY5Y e suggerisce un approccio innovativo per ridurre l&#39;onere di amiloide nei pazienti AD.

Decoy mRNAs ridurre proteina precursore della beta-amiloide mRNA nelle cellule neuronali.

&#x751F;&#x4EA7;&#x8FC7;&#x5269;&#x7684;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x524D;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D; (APP) &#x548C; &beta;-&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x86CB;&#x767D;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x5728;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5; (AD) &#x795E;&#x7ECF;&#x53D8;&#x6027;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x4E86;&#x89E3;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143; APP &#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86; 52 &#x57FA;&#x5143;&#x7D20; (52sce) &#x7ACB;&#x5373;&#x4E0B;&#x6E38;&#x4ECE;&#x7A33;&#x5B9A; APP mRNA &#x7684;&#x7EC8;&#x6B62;&#x5BC6;&#x7801;&#x3002;&#x5220;&#x9664;&#x6B64;&#x57DF;&#x7684;&#x6025;&#x5267;&#x52A8;&#x8361; APP mRNAs &#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5408;&#x6210;&#x4F53;&#x5916;&#x3002;&#x542B;&#x73E0;&#x86CB;&#x767D;&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x5D4C;&#x5408;&#x7684;&#x73E0;&#x86CB;&#x767D;&#x80BD;&#x94FE; APP mRNAs &#x878D;&#x5408;&#x5230;&#x6574;&#x4E2A;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F; 3&#39;-UTR&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5168;&#x957F; APP mRNA &#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x88C2;&#x89E3;&#x5305;&#x542B; 52sce RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x8DE8;&#x4EA4;&#x4E92;&#x89C4;&#x8303;&#x7684;&#x5143;&#x7D20;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x5D4C;&#x5408;&#x4F53; mRNAs&#xFF0C;&#x5305;&#x542B;&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C; APP 3&#39;-UTR&#xFF0C;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x663E;&#x8457; SH SY5Y &#x795E;&#x7ECF;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; APP &#x7A33;&#x6001;&#x6C34;&#x5E73;&#x964D;&#x4F4E;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x51CF;&#x5C11;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837; AD &#x60A3;&#x8005;&#x8D1F;&#x62C5;&#x3002;

&#x8BF1;&#x9975;&#x5206;&#x6CCC;&#x51CF;&#x5C11; &beta;-&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x524D;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D; mRNA &#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Overproduction of amyloid precursor protein (APP) and beta-amyloid likely contribute to neurodegeneration in Alzheimer's disease (AD). In an effort to understand neuronal APP gene regulation, we identified a 52 base element (52sce) immediately downstream from the stop codon that stabilizes APP mRNA. Deletion of this domain drastically destabilized APP mRNAs and reduced APP synthesis in vitro. Chimeric globin-APP mRNAs containing the globin coding sequence fused to the entire APP 3'-UTR, showed regulation similar to full-length APP mRNA. A variety of cytoplasmic lysates contain 52sce RNA binding activity, suggesting cis-trans interactions regulate the element's functionality. Finally, the overexpression of chimeric mRNAs, containing the GFP coding sequence and APP 3'-UTR, dramatically reduced endogenous APP steady-state levels in SH-SY5Y neuroblastoma cells and suggests a novel approach to reduce the amyloid burden in AD patients.

Decoy mRNAs reduce beta-amyloid precursor protein mRNA in neuronal cells.

La surproduction de la prot&#xE9;ine pr&#xE9;curseur amylo&#xEF;de (APP) et de b&#xEA;ta-amylo&#xEF;de susceptibles de contribuer &#xE0; la neurod&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence dans la maladie d&#x26;#39;Alzheimer (AD). Dans un effort pour comprendre la r&#xE9;gulation neuronale du g&#xE8;ne APP, nous avons identifi&#xE9; un &#xE9;l&#xE9;ment de base 52 (52sce) imm&#xE9;diatement en aval du codon stop qui stabilise l&#x26;#39;ARNm APP. La suppression de ce domaine de fa&#xE7;on drastique d&#xE9;stabilis&#xE9; ARNm et la synth&#xE8;se APP APP r&#xE9;duite in vitro. Chim&#xE9;riques globine-APP ARNm contenant la s&#xE9;quence de codage de globine fusionn&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;APP toute 3&#x26;#39;-UTR, ont montr&#xE9; la r&#xE9;glementation semblable &#xE0; l&#x26;#39;ARNm APP de pleine longueur. Une vari&#xE9;t&#xE9; de lysats cytoplasmiques contiennent 52sce ARN activit&#xE9; de liaison, ce qui sugg&#xE8;re cis-trans interactions r&#xE9;guler la fonctionnalit&#xE9; de l&#x26;#39;&#xE9;l&#xE9;ment. Enfin, la surexpression de l&#x26;#39;ARNm chim&#xE9;riques, contenant la s&#xE9;quence codante GFP et APP 3&#x26;#39;-UTR, consid&#xE9;rablement r&#xE9;duit endog&#xE8;nes APP &#xE9;tat d&#x26;#39;&#xE9;quilibre dans les cellules de neuroblastome SH-SY5Y et sugg&#xE8;re une nouvelle approche pour r&#xE9;duire le fardeau amylo&#xEF;de chez des patients AD.

ARNm Decoy R&#xE9;duire b&#xEA;ta-amylo&#xEF;de ARNm de la prot&#xE9;ine pr&#xE9;curseur dans les cellules neuronales

&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;APP&#xFF09;&#x3068;&#x3B2;-&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x7523;&#x751F;&#x306F;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#xFF08;AD&#xFF09;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;APP&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x52AA;&#x529B;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;APP mRNA&#x3092;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x7D42;&#x6B62;&#x30B3;&#x30C9;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x3059;&#x3050;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;52&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x8981;&#x7D20;&#xFF08;52sce&#xFF09;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;in vitro&#x3067;&#x306E;APP mRNA&#x3068;&#x6E1B;&#x5C11;APP&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3002;&#x5168;&#x4F53;APP 3&#x26;#39;-UTR&#x306B;&#x878D;&#x5408;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D3;&#x30F3;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D3;&#x30F3;&#x306E;APP mRNA&#x306F;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x9577;&#x306E;APP mRNA&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x305F;&#x898F;&#x5236;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x6DB2;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;cis-trans&#x306E;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x8981;&#x7D20;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x793A;&#x5506;52sce RNA&#x7D50;&#x5408;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;GFP&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x914D;&#x5217;&#x304A;&#x3088;&#x3073;APP&#x306E;3&#x26;#39;-UTR&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;mRNA&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x5287;&#x7684;&#x306B;SH-SY5Y&#x795E;&#x7D4C;&#x82BD;&#x816B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;APP&#x5B9A;&#x5E38;&#x72B6;&#x614B;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x4F4E;&#x6E1B;&#x3057;&#x3001;AD&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x8CA0;&#x62C5;&#x3092;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30C7;&#x30B3;&#x30A4;&#x306E;mRNA&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3B2;-&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;mRNA&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;

&#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xC804; &#xAD6C;&#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (&#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;)&#xC640; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC544; &#xBC00; &#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xACFC;&#xC789; neurodegeneration &#xC54C;&#xCE20;&#xD558;&#xC774;&#xBA38;&#xBCD1; (AD)&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;. &#xC2E0;&#xACBD; APP &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xADDC;&#xCE59;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB178;&#xB825;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; 52 &#xAE30;&#xBCF8; &#xC694;&#xC18C; (52sce) &#xD655;&#xC778; &#xC989;&#xC2DC; APP mRNA &#xC548;&#xC815;&#xD654; &#xC815;&#xC9C0; codon&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC;. &#xC774; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC0AD;&#xC81C;&#xB294; &#xACFC;&#xAC10; &#xD558; &#xAC8C; &#xC560;&#xD50C; &#xB9AC; &#xCF00;&#xC774; &#xC158; mRNAs &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC560;&#xD50C; &#xB9AC; &#xCF00;&#xC774; &#xC158; &#xD569;&#xC131; &#xCCB4; &#xC678; &#xAC10;&#xC18C;. Chimeric globin APP mRNAs globin &#xCF54;&#xB529; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xCCB4; &#xC560;&#xD50C; &#xB9AC; &#xCF00;&#xC774; &#xC158; 3&#39;-UTR, &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; APP Mrna&#xC640; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xADDC;&#xC815;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC735;&#xD569;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; lysates 52sce RNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD65C;&#xB3D9;, cis-&#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC870;&#xC808; &#xC694;&#xC18C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD3EC;&#xD568; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC640; &#xC560;&#xD50C; &#xB9AC; &#xCF00;&#xC774; &#xC158; 3&#39;-UTR, GFP chimeric Mrnas&#xC758; overexpression&#xB294; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; SH SY5Y &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD; APP &#xC548;&#xC815; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC218;&#xC900; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xACE0; AD &#xD658;&#xC790;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xBD80;&#xB2F4;&#xC744; &#xC904;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;.

&#xBBF8;&#xB07C; mRNAs &#xC804;&#xC870; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC544; &#xBC00; &#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC10;&#xC18C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; mRNA.

La sobreproducci&#xF3;n de la prote&#xED;na precursora amiloide (APP) y beta-amiloide probablemente contribuyen a la neurodegeneraci&#xF3;n en la enfermedad de Alzheimer (EA). En un esfuerzo para comprender la regulaci&#xF3;n neuronal del gen APP, hemos identificado un elemento de base 52 (52sce) inmediatamente aguas abajo del cod&#xF3;n de parada que estabiliza mRNA APP. La supresi&#xF3;n de este dominio dr&#xE1;sticamente desestabilizado mRNAs APP y la s&#xED;ntesis de APP reducida in vitro. Quim&#xE9;ricos APP-globina ARNm que contienen la secuencia de codificaci&#xF3;n de globina fundido a la aplicaci&#xF3;n completa 3&#x26;#39;-UTR, mostr&#xF3; regulaci&#xF3;n similar a la del mRNA APP de longitud completa. Una variedad de lisados &#x200B;&#x200B;citopl&#xE1;smicos contienen 52sce actividad de uni&#xF3;n a ARN, lo que sugiere cis-trans interacciones regular la funcionalidad del elemento. Finalmente, la sobreexpresi&#xF3;n de ARNm quim&#xE9;ricos, que contiene la secuencia de codificaci&#xF3;n de las buenas pr&#xE1;cticas agrarias y APP 3&#x26;#39;-UTR, reduce dr&#xE1;sticamente end&#xF3;genos APP estado de los niveles en c&#xE9;lulas de neuroblastoma SH-SY5Y y sugiere un nuevo enfoque para reducir la carga amiloide en pacientes con EA.

MRNAs Decoy Reducir Beta-amiloide ARNm de la prote&#xED;na precursora en las c&#xE9;lulas neuronales

&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x524D;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D; (APP) &#x80FD;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5927;&#x8111;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#xFF0C;&#x5728;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210; &beta;-&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x86CB;&#x767D; (Abeta) &#x79EF;&#x7D2F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x4E0E;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x548C;&#x635F;&#x5BB3;&#x7684;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x3002;&#x8106;&#x6027; X &#x667A;&#x529B;&#x8FDF;&#x949D;&#x86CB;&#x767D; (FMRP) &#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28; mRNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x8FF7;&#x5931;&#x5728;&#x8106;&#x6027; X &#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; FMRP &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5728;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5BCC;&#x9E1F;&#x560C;&#x5464; G-&#x56DB;&#x65B9;&#x6837;&#x5E8F;&#x5217; mRNA &#x7F16;&#x7801;&#x533A;&#x3002;&#x4EE3;&#x8C22;&#x578B;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242; DHPG &#x76AE;&#x8D28; synaptoneurosomes &#x6216;&#x539F;&#x4EE3;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x589E;&#x52A0; APP &#x7FFB;&#x8BD1;&#x4E2D;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x574F; 1 &#x6316;&#x7A7A;&#x6837;&#x54C1;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3002;APP mRNA coimmunoprecipitated &#x4E0E; FMRP &#x4E2D;&#x4F11;&#x606F;&#x7684; synaptoneurosomes&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4EA4;&#x4E92; DHPG &#x6CBB;&#x7597;&#x540E;&#x5F88;&#x5FEB;&#x5931;&#x53BB;&#x4E86;&#x3002;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x7684; Abeta40 &#x6216; Abeta42 &#x6C34;&#x5E73;&#x90FD;&#x660E;&#x663E;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x7B2C;&#x574F; 1 &#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x76F8;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x63A7;&#x4EF6;&#x591A;&#x682A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E; FMRP &#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x548C;&#x8C03;&#x8282;&#x4EE3;&#x8C22;&#x578B;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x901A;&#x8FC7; APP mRNA &#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x8106;&#x5F31; X &#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x548C;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x8054;&#x7CFB;&#x3002;

FMRP &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x524D;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; mGluR5 &#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x3002;

Amyloid precursor protein (APP) facilitates synapse formation in the developing brain, while beta-amyloid (Abeta) accumulation, which is associated with Alzheimer disease, results in synaptic loss and impaired neurotransmission. Fragile X mental retardation protein (FMRP) is a cytoplasmic mRNA binding protein whose expression is lost in fragile X syndrome. Here we show that FMRP binds to the coding region of APP mRNA at a guanine-rich, G-quartet-like sequence. Stimulation of cortical synaptoneurosomes or primary neuronal cells with the metabotropic glutamate receptor agonist DHPG increased APP translation in wild-type but not fmr-1 knockout samples. APP mRNA coimmunoprecipitated with FMRP in resting synaptoneurosomes, but the interaction was lost shortly after DHPG treatment. Soluble Abeta40 or Abeta42 levels were significantly higher in multiple strains of fmr-1 knockout mice compared to wild-type controls. Our data indicate that postsynaptic FMRP binds to and regulates the translation of APP mRNA through metabotropic glutamate receptor activation and suggests a possible link between Alzheimer disease and fragile X syndrome.

FMRP mediates mGluR5-dependent translation of amyloid precursor protein.

Pr&#xE9;curseur de la prot&#xE9;ine amylo&#xEF;de (APP) facilite la formation des synapses dans le cerveau en d&#xE9;veloppement, tandis que la b&#xEA;ta-amylo&#xEF;de (Abeta) l&#x26;#39;accumulation, qui est associ&#xE9;e &#xE0; la maladie d&#x26;#39;Alzheimer, entra&#xEE;ne une perte synaptique et de la neurotransmission avec facult&#xE9;s affaiblies. Fragile prot&#xE9;ine X retard mental (FMRP) est une prot&#xE9;ine cytoplasmique de liaison d&#x26;#39;ARNm dont l&#x26;#39;expression est perdue dans le syndrome de l&#x26;#39;X fragile. Ici, nous montrons que FMRP se lie &#xE0; la r&#xE9;gion codante de l&#x26;#39;ARNm de l&#x26;#39;APP &#xE0; une guanine-riche, G-quartet s&#xE9;quence semblable. Stimulation de la synaptoneurosomes corticales ou primaires cellules neuronales avec l&#x26;#39;agoniste de r&#xE9;cepteur glutamate m&#xE9;tabotropique DHPG traduction APP augment&#xE9; dans des &#xE9;chantillons de type sauvage knockout mais pas fmr-1. ARNm APP coimmunoprecipitated avec FMRP dans synaptoneurosomes repos, mais l&#x26;#39;interaction a &#xE9;t&#xE9; perdu peu apr&#xE8;s DHPG traitement. Solubles ou Abeta40 Abeta42 &#xE9;taient significativement plus &#xE9;lev&#xE9;s dans plusieurs souches de souris knock-out FMR-1 par rapport &#xE0; des contr&#xF4;les de type sauvage. Nos donn&#xE9;es indiquent que la prot&#xE9;ine FMRP postsynaptique se lie et r&#xE9;gule la traduction de l&#x26;#39;ARNm de l&#x26;#39;APP par l&#x26;#39;activation des r&#xE9;cepteurs m&#xE9;tabotropiques du glutamate et sugg&#xE8;re un lien possible entre la maladie d&#x26;#39;Alzheimer et le syndrome du X fragile.

M&#xE9;diatise FMRP mGluR5-d&#xE9;pendante Traduction de la prot&#xE9;ine pr&#xE9;curseur amylo&#xEF;de

Amyloid Vorl&auml;uferprotein (APP) erleichtert die Synapse-Formation in die Entwicklung des Gehirns, w&auml;hrend Beta-Amyloid (Abeta) Akkumulation, die Alzheimer-Krankheit zugeordnet ist, synaptische Verlust und gest&ouml;rte Neurotransmission f&uuml;hrt. Fragile X Mental Retardation Protein (FMRP) ist eine cytoplasmatische mRNA-verbindliches Protein deren Ausdruck in Fragiles X verloren ist Syndrom. Hier zeigen wir, dass FMRP an die kodierende Region APP mRNA an einer G-Quartett-wie Guanin-reichen Sequenz bindet. Stimulation der kortikalen Synaptoneurosomes oder prim&auml;ren Nervenzellen mit den Metabotropic Glutamat-Rezeptor-Agonisten DHPG erh&ouml;ht APP &Uuml;bersetzung in Wildtyp aber nicht Fmr-1 Knockout-Beispiele. APP-mRNA-Coimmunoprecipitated mit FMRP in Ruhe Synaptoneurosomes, sondern die Interaktion wurde kurz nach der DHPG Behandlung verloren. L&ouml;sliche Abeta40 oder Abeta42 Niveaus waren signifikant h&ouml;her in mehrere St&auml;mme von Fmr-1 Knockout-M&auml;use im Vergleich zu Wildtyp Steuerelemente. Unsere Daten zeigen, dass postsynaptisches FMRP bindet an und die &Uuml;bersetzung des APP-mRNA durch Metabotropic Glutamat-Rezeptor-Aktivierung regelt und einen m&ouml;glichen Zusammenhang zwischen der Alzheimer-Krankheit und fragile X-Syndrom schl&auml;gt.

FMRP vermittelt mGluR5-abh&auml;ngige &Uuml;bersetzung des Amyloid-Vorl&auml;ufer-Proteins.

Proteina precursore dell&#39;amiloide (APP) facilita la formazione di sinapsi nel cervello in via di sviluppo, mentre l&#39;accumulo di beta-amiloide (Abeta), che &egrave; associato con la malattia di Alzheimer, si traduce in perdita sinaptica e alterata neurotrasmissione. X fragile ritardo mentale proteina (FMRP) &egrave; una proteina di legame mRNA citoplasmatici cui espressione &egrave; perso nel X fragile sindrome. Qui vi mostriamo che FMRP si lega alla regione codificante del APP mRNA in una sequenza ricca di guanina, G-quartetto-come. Stimolazione corticale synaptoneurosomes o cellule neuronali primarie con l&#39;agonista del recettore glutammato metabotropic DHPG aumentato traduzione APP nel wild-type ma campioni non fmr-1 ad eliminazione diretta. Coimmunoprecipitated mRNA APP con FMRP in synaptoneurosomes riposo, ma l&#39;interazione &egrave; stato perso poco dopo trattamento DHPG. Livelli di Abeta40 o Abeta42 solubili erano significativamente pi&ugrave; elevati di pi&ugrave; ceppi di topi knockout di fmr-1 rispetto al wild-type controlli. I nostri dati indicano che FMRP postsinaptica si lega a e regola la traduzione del mRNA APP attraverso l&#39;attivazione di recettori glutammato metabotropic e suggerisce un possibile legame tra la malattia di Alzheimer e X sindrome fragile.

FMRP media traduzione mGluR5-dipendente della proteina precursore dell&#39;amiloide.

&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;APP&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3084;&#x969C;&#x5BB3;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3B2;-&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#xFF08;&#x5B89;&#x90E8;&#x7530;&#xFF09;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x8133;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x8106;&#x5F31;X&#x7CBE;&#x795E;&#x9045;&#x6EDE;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;FMRP&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x8106;&#x5F31;X&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x3067;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;mRNA&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;FMRP&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30A2;&#x30CB;&#x30F3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x3001;G-&#x30AB;&#x30EB;&#x30C6;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3067;&#x306E;APP mRNA&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x76AE;&#x8CEA;synaptoneurosomes&#x307E;&#x305F;&#x306F;FMR-1&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x8A66;&#x6599;&#x4E2D;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;APP&#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3092;DHPG&#x4EE3;&#x8B1D;&#x578B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3068;&#x521D;&#x4EE3;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002; APP mRNA&#x306F;&#x4F11;&#x6B62;synaptoneurosomes&#x3067;FMRP&#x3068;&#x5171;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x304C;&#x3001;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x3082;&#x306A;&#x304F;&#x6CBB;&#x7642;&#x3092;DHPG&#x5F8C;&#x306B;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x306E;Abeta40&#x307E;&#x305F;&#x306F;Abeta42&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5BFE;&#x7167;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;FMR-1&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x3067;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x9AD8;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F8C;FMRP&#x306F;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x578B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;APP mRNA&#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x3084;&#x8106;&#x5F31;X&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;FMRP&#x306E;&#x5A92;&#x4ECB;&#x4F53;mGluR5&#x4F9D;&#x5B58;&#x7FFB;&#x8A33;

&#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xC804; &#xAD6C;&#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (APP) &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB450;&#xB1CC;&#xC758; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; Alzheimer &#xC9C8;&#xBCD1;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xC788;&#xB294; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC544; &#xBC00; &#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; (Abeta) &#xCD95;&#xC801; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC190;&#xC2E4; &#xBC0F; &#xC7A5;&#xC560; neurotransmission &#xADC0;&#xCC29;&#xB418;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;. &#xAE68;&#xC9C0;&#xAE30; X &#xC815;&#xC2E0; &#xC9C0;&#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (FMRP)&#xC740; &#xADF8; &#xC2DD; &#xAE68;&#xC9C0;&#xAE30; X&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xC2E4; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; mRNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; FMRP guanine &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C;, G 4 &#xC911; &#xC8FC; &#xAC19;&#xC740; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; APP mRNA &#xCF54;&#xB529; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE38; &#xD56D; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; metabotropic glutamate &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC81C; DHPG&#xC640; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; synaptoneurosomes &#xB610;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC790;&#xADF9; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0; fmr 1 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xC0D8;&#xD50C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785;&#xC758; &#xC560;&#xD50C; &#xB9AC; &#xCF00;&#xC774; &#xC158; &#xBC88;&#xC5ED;. &#xD734;&#xC2DD; synaptoneurosomes&#xC5D0; FMRP &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; mRNA coimmunoprecipitated DHPG &#xCE58;&#xB8CC; &#xC9C1;&#xD6C4; &#xC190;&#xC2E4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; fmr 1 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xC0DD;&#xC950;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBCC0;&#xC885; &#xC131; Abeta40 &#xB610;&#xB294; Abeta42 &#xC218;&#xC900; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB192;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xACE0; postsynaptic FMRP &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; metabotropic glutamate &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; Mrna&#xC758; &#xBC88;&#xC5ED;&#xC744; &#xC870;&#xC808; Alzheimer &#xC9C8;&#xBCD1; &#xAC04;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xB9C1;&#xD06C; &#xD5C8;&#xC57D;&#xD55C; X &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;&#xC744; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;.

FMRP mGluR5 &#xC885;&#xC18D; &#xBC88;&#xC5ED; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xC804;&#xC870; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC911;&#xC7AC;.

Prote&#xED;na precursora del amiloide (APP) facilita la formaci&#xF3;n de sinapsis en el cerebro en desarrollo, mientras que el beta-amiloide (Abeta) de acumulaci&#xF3;n, que se asocia con la enfermedad de Alzheimer, se traduce en la p&#xE9;rdida sin&#xE1;ptica y la neurotransmisi&#xF3;n alterada. Fr&#xE1;gil prote&#xED;na X retraso mental (FMRP) es una prote&#xED;na del ARNm citopl&#xE1;smico vinculante, cuya expresi&#xF3;n se pierde en el s&#xED;ndrome de X fr&#xE1;gil. Aqu&#xED; nos muestran que FMRP se une a la regi&#xF3;n codificante del ARNm APP en una guanina-rica, el G-cuarteto-como secuencia. La estimulaci&#xF3;n de synaptoneurosomes corticales o c&#xE9;lulas neuronales primarias con el agonista de los receptores de glutamato metabotr&#xF3;picos DHPG aumento de la traducci&#xF3;n de APP en las muestras de knock-out de tipo salvaje, pero no FMR-1. MRNA APP coinmunoprecipit&#xF3; con FMRP en synaptoneurosomes descanso, pero la interacci&#xF3;n se perdi&#xF3; poco despu&#xE9;s de DHPG tratamiento. Solubles Abeta40 o Abeta42 niveles fueron significativamente mayores en m&#xFA;ltiples cepas de ratones knock-out FMR-1 en comparaci&#xF3;n con controles de tipo salvaje. Nuestros datos indican que la FMRP postsin&#xE1;ptica se une y regula la traducci&#xF3;n de ARNm de APP a trav&#xE9;s de la activaci&#xF3;n de los receptores de glutamato metabotr&#xF3;picos y sugiere una posible relaci&#xF3;n entre la enfermedad de Alzheimer y el s&#xED;ndrome de X fr&#xE1;gil.

Media la FMRP mGluR5 dependiente de la traducci&#xF3;n de la prote&#xED;na precursora del amiloide

&#x80F8;&#x817A;&#x57FA;&#x8D28; lymphopoietin &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x8FC7;&#x654F;&#x80BA;&#x90E8;&#x708E;&#x75C7;&#x662F; Pin1 &#x4F9D;&#x8D56;&#x3002;

Thymic stromal lymphopoietin expression in allergic pulmonary inflammation is Pin1-dependent.

Thymique Expression lymphopo&#xEF;&#xE9;tine stromale dans l&#x26;#39;inflammation pulmonaire allergique est Pin1-d&#xE9;pendante

Thymom stromal Lymphopoietin Ausdruck in allergische pulmonale Entz&uuml;ndung ist Pin1 abh&auml;ngig.

Espressione lymphopoietin stromali del timo nell&#39;infiammazione allergica polmonare &egrave; Pin1-dipendente.

&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x6027;&#x200B;&#x200B;&#x80BA;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x306E;&#x80F8;&#x817A;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30DE;Lymphopoietin&#x5F0F;&#x306F;1&#x756A;&#x30D4;&#x30F3;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;

Thymic &#xAE30;&#xC9C8; lymphopoietin &#xC2DD; &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30; &#xD3D0; &#xC5FC;&#xC99D;&#xC5D0;&#xB294; pin1&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Expresi&#xF3;n del timo linfopoyetina estromal de la inflamaci&#xF3;n pulmonar al&#xE9;rgica es dependiente de la Pin1

&#x8106;&#x6027; X &#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x548C;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5;&#x7684;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x524D;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D; (APP) &#x548C; &beta;-&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x86CB;&#x767D; (Abeta) &#x8868;&#x8FBE;&#x5BF9;&#x663E;&#x793A;&#x7A81;&#x89E6;&#x8868;&#x578B;&#x548C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x5171;&#x4EAB;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x521B;&#x5EFA;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x4E13;&#x95E8;&#x7814;&#x7A76;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684; APP &#x548C; Abeta &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8D8A;&#x8FC7; Tg2576&#xFF0C;&#x800C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x8F6F;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x745E;&#x5178;&#x7A81;&#x53D8; (hAPPsw)&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E0E;&#x574F; 1 KO &#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x540E;&#x4EE3;&#xFF0C;&#x547D;&#x540D;&#x4E3A; FRAXAD&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x589E;&#x52A0; &#xFF08;&#x901A;&#x8FC7; 30 &#x5929;&#x7684;&#x5E74;&#x9F84; 23%&#xFF09; &#x76F8;&#x6BD4; Tg2576 (3%) &#x548C; WT &#x548C;&#x574F; 1 KO littermate &#x63A7;&#x4EF6; (0%) &#x7B26;&#x5408;&#x53D1;&#x80B2;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;60 &#x5929;&#x7684;&#x5E74;&#x9F84;&#xFF0C;Tg2576 &#x548C; FRAXAD &#x5C0F;&#x9F20;&#x63A5;&#x8FD1; 40%&#x7684;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x4E3A; WT &#x548C;&#x574F; 1 KO littermates 0%&#x76F8;&#x6BD4;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x4E86;&#x89E3; APP &#x4F7F;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x57FA;&#x7840;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC4;&#x4F30;&#x6263;&#x62BC;&#x5728;&#x620A;&#x56DB;&#x6C2E; (PTZ) &#x54CD;&#x5E94;&#x9608;&#x503C;&#x3002;Tg2576 &#x548C; FRAXAD &#x5C0F;&#x9F20;&#x5DF2;&#x5230;&#x4E91;&#x53F0;&#x60CA;&#x53A5;&#x95E8;&#x69DB;&#x8F83;&#x4F4E; &#xFF08;&#x5E73;&#x5747;&#x6263;&#x62BC;&#x5206;&#x6570;&#x7684; &gt; / = 4.0) nontransgenic littermates (&#x5E73;&#x5747;&#x6263;&#x62BC;&#x5F97;&#x5206; 1.9-2.9) &#x76F8;&#x6BD4;&#x3002;&#x7F09;&#x83B7;&#x91CF;&#x662F; AD&#xFF0C;&#x63A5;&#x7EED;&#x4E0B;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x3001; &#x81EA;&#x95ED;&#x75C7;&#x548C;&#x766B;&#x75EB;&#xFF0C;, &#x4E3B;&#x8981;&#x8868;&#x578B;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x53D1;&#x5C55;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6; APP &#x6216; Abeta &#x8FC7;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x52A0;&#x766B;&#x75EB;&#x6613;&#x611F;&#x6027;&#x3002;

&#x60CA;&#x53A5;&#x6613;&#x611F;&#x6027;&#xFF0C;&#x800C;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x524D;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x3002;

Alzheimer's disease and Fragile X syndrome both display synaptic phenotypes, and based on recent studies, likely share dendritic over expression of amyloid precursor protein (APP) and beta-amyloid (Abeta). In order to create a mouse model to specifically study the effects of APP and Abeta at synapses, we crossed Tg2576, which over-express human APP with the Swedish mutation (hAPPsw), with fmr-1 KO mice. The progeny, named FRAXAD, displayed increased mortality (23% by 30 days of age) compared to Tg2576 (3%) and WT and fmr-1 KO littermate controls (0%) consistent with a developmental defect. By 60 days of age, both the Tg2576 and FRAXAD mice approached a 40% mortality rate compared to 0% for WT and fmr-1 KO littermates. To understand the mechanism underlying increased mortality in APP over-expressing mice, we assessed seizure thresholds in response to pentylenetetrazol (PTZ). Both the Tg2576 and FRAXAD mice had a lower threshold to PTZ-induced seizures (average seizure score of >/=4.0) in comparison to nontransgenic littermates (average seizure score 1.9-2.9). Seizures are a major phenotype of AD, FXS, Down syndrome, autism and epilepsy, and these data suggested that developmental over-expression of dendritic APP or Abeta increased seizure susceptibility.

Seizure susceptibility and mortality in mice that over-express amyloid precursor protein.

Le syndrome de la maladie d&#x26;#39;Alzheimer la maladie X et fragile &#xE0; la fois d&#x26;#39;afficher les ph&#xE9;notypes synaptiques, et bas&#xE9;e sur des &#xE9;tudes r&#xE9;centes, dendritiques part probable sur l&#x26;#39;expression de la prot&#xE9;ine pr&#xE9;curseur amylo&#xEF;de (APP) et de b&#xEA;ta-amylo&#xEF;de (Abeta). Afin de cr&#xE9;er un mod&#xE8;le de souris pour &#xE9;tudier sp&#xE9;cifiquement les effets de l&#x26;#39;APP et Abeta au niveau des synapses, nous avons travers&#xE9; Tg2576, qui sur-expriment l&#x26;#39;APP humaine avec la mutation su&#xE9;doise (hAPPsw), avec des souris KO FMR-1. La descendance, nomm&#xE9; FRAXAD, affich&#xE9; une mortalit&#xE9; accrue (23% en 30 jours d&#x26;#39;&#xE2;ge) par rapport &#xE0; Tg2576 (3%) et WT et FMR-1 contr&#xF4;les m&#xEA;me port&#xE9;e KO (0%) compatibles avec un d&#xE9;faut de d&#xE9;veloppement. En 60 jours d&#x26;#39;&#xE2;ge, &#xE0; la fois les souris Tg2576 et FRAXAD approch&#xE9; un taux de mortalit&#xE9; de 40% par rapport &#xE0; 0% pour la m&#xEA;me port&#xE9;e KO WT et FMR-1. Pour comprendre le m&#xE9;canisme fondamental de la mortalit&#xE9; a augment&#xE9; dans APP sur-exprimant la souris, nous avons &#xE9;valu&#xE9; les seuils de saisie en r&#xE9;ponse &#xE0; pentyl&#xE8;net&#xE9;trazol (PTZ). Les deux souris Tg2576 et FRAXAD avait un seuil inf&#xE9;rieur &#xE0; PTZ-crises induites (score moyen de la saisie&#x26;gt; / = 4,0) en comparaison avec la m&#xEA;me port&#xE9;e non transg&#xE9;niques (score moyen de 1.9 &#xE0; 2.9 de saisie). Les saisies sont un ph&#xE9;notype majeur de la DA, FXS, le syndrome de Down, l&#x26;#39;autisme et l&#x26;#39;&#xE9;pilepsie, et ces donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que la surexpression de d&#xE9;veloppement des cellules dendritiques APP ou Abeta une susceptibilit&#xE9; accrue saisie.

La sensibilit&#xE9; &#xE0; la saisie et la mortalit&#xE9; chez les souris qui surexpriment la prot&#xE9;ine pr&#xE9;curseur amylo&#xEF;de

Alzheimer-Krankheit und Fragiles X-Syndrom, beide zeigen synaptische Ph&auml;notypen und basierend auf aktuellen Studien wahrscheinlich Aktie dendritische &uuml;ber einen Ausdruck des Amyloid Vorl&auml;uferprotein (APP) und Beta-Amyloid (Abeta). Um ein Mausmodell, um speziell die Auswirkungen der APP und Abeta an Synapsen studieren zu schaffen, &uuml;berquerten wir Tg2576, die menschliche APP mit der schwedischen Mutation (hAPPsw) over-express, mit Fmr-1 KO-M&auml;usen. Die Nachkommenschaft, benannt FRAXAD, angezeigt erh&ouml;hte Sterblichkeit (23 % von 30 Tage alt) im Vergleich zu Tg2576 (3 %) und WT und Fmr-1 KO Littermate Steuerungen (0 %) mit einer Entwicklungsst&ouml;rung. Sowohl die Tg2576 als auch die FRAXAD M&auml;use herangetreten 60 Tage alt eine 40 %-Mortalit&auml;t im Vergleich zu 0 % f&uuml;r WT und Fmr-1 KO Wurfgeschwister. Um die Mechanismus zugrunde liegende erh&ouml;hte Sterblichkeit bei APP &uuml;berexprimierenden M&auml;usen zu verstehen, beurteilen wir Beschlagnahme Schwellenwerte als Reaktion auf Pentetrazol (PTZ). Sowohl die Tg2576 als auch die FRAXAD M&auml;use hatten eine niedrigere Schwelle zu PTZ-induzierte Anf&auml;lle (Durchschnittsnote Beschlagnahme von &gt; = 4.0) im Vergleich zu nontransgenic Wurfgeschwister (durchschnittliche Beschlagnahme Ergebnis 1,9-2,9). Krampfanf&auml;lle sind einem gro&szlig;en Ph&auml;notyp der Anzeige, FXS, Down-Syndrom, Autismus und Epilepsie, und diese Daten vorgeschlagen, dass entwicklungsbedingte &Uuml;berexpression von dendritischen APP oder Abeta erh&ouml;hte Anf&auml;lligkeit der Beschlagnahme.

Beschlagnahme Anf&auml;lligkeit und Sterblichkeit in den M&auml;usen, die Amyloid-Vorl&auml;uferprotein over-express.

La malattia di Alzheimer e la sindrome X Fragile sia visualizzare fenotipi sinaptici e sulla base di recenti studi, probabile quota dendritica sopra espressione della proteina precursore dell&#39;amiloide (APP) e beta-amiloide (Abeta). Al fine di creare un modello del mouse per studiare in particolare gli effetti di APP e Abeta alle sinapsi, abbiamo attraversato Tg2576, che intra umana APP con la mutazione svedese (hAPPsw), con topi KO fmr-1. La progenie, denominata FRAXAD, visualizzato aumento della mortalit&agrave; (23% di 30 giorni di et&agrave;) rispetto a Tg2576 (3%) e WT e fmr-1 KO alleverei controlli (0%) coerenti con un difetto dello sviluppo. 60 Giorni di et&agrave;, il Tg2576 e il FRAXAD topi si avvicin&ograve; ad un tasso di mortalit&agrave; del 40% rispetto allo 0% per WT e littermates KO fmr-1. Per comprendere il meccanismo sottostante aumento della mortalit&agrave; nei topi over-expressing APP, abbiamo valutato le soglie di sequestro in risposta a pentylenetetrazol (PTZ). Il Tg2576 e il FRAXAD topi avevano una soglia inferiore a convulsioni indotte PTZ (sequestro valutazione di media &amp;gt; = 4.0) rispetto a nontransgenic littermates (sequestro media punteggio 1,9-2,9). Sequestri sono un fenotipo pi&ugrave; importante dell&#39;annuncio, FXS, gi&ugrave; sindrome, autismo ed epilessia, e questi dati suggerirono che evolutiva sovraespressione di APP dendritiche o Abeta aumentata suscettibilit&agrave; sequestro.

Suscettibilit&agrave; sequestro e mortalit&agrave; nei topi che intra proteina precursore dell&#39;amiloide.

&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x3084;&#x8106;&#x5F31;X&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x3001;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;APP&#xFF09;&#x3068;&#x3B2;-&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#xFF08;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3B2;&#xFF09;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x30B7;&#x30A7;&#x30A2;&#x6A39;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3067;APP&#x3068;&#x5B89;&#x90E8;&#x7530;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;FMR-1 KO&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30A6;&#x30A7;&#x30FC;&#x30C7;&#x30F3;&#x5909;&#x7570;&#xFF08;hAPPsw&#xFF09;&#x3067;&#x3001;Tg2576&#x3092;&#x4EA4;&#x5DEE;&#x3055;&#x305B;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x30D2;&#x30C8;APP&#x3002; FRAXAD&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x540D;&#x524D;&#x306E;&#x5B50;&#x5B6B;&#x306F;&#x3001;Tg2576&#xFF08;3&#xFF05;&#xFF09;&#x3068;WT&#x3068;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;FMR-1&#x306E;KO&#x540C;&#x8179;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#xFF08;0&#xFF05;&#xFF09;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#xFF08;30&#x65E5;&#x9F62;&#x3067;23&#xFF05;&#xFF09;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 60&#x65E5;&#x9F62;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Tg2576&#x3068;FRAXAD&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306F;&#x3001;WT&#x3068;FMR-1 KO&#x540C;&#x8179;&#x5B50;&#x306E;0&#xFF05;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;40&#xFF05;&#x306E;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x306B;&#x8FD1;&#x3065;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;APP&#x306E;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30DA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#xFF08;PTZ&#xFF09;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x767A;&#x4F5C;&#x306E;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Tg2576&#x3068;FRAXAD&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x975E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x540C;&#x8179;&#xFF08;&#x5E73;&#x5747;&#x767A;&#x4F5C;&#x30B9;&#x30B3;&#x30A2;1.9&#x304B;&#x3089;2.9&#xFF09;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;PTZ&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x767A;&#x4F5C;&#xFF08;&#x26;gt; / = 4.0&#x306E;&#x5E73;&#x5747;&#x767A;&#x4F5C;&#x30B9;&#x30B3;&#x30A2;&#xFF09;&#x306E;&#x4E0B;&#x9650;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x767A;&#x4F5C;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x3001;&#x81EA;&#x9589;&#x75C7;&#x3001;&#x3066;&#x3093;&#x304B;&#x3093;&#xB7;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3001;FXS&#x3001;AD&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x6A39;&#x72B6;APP&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5B89;&#x90E8;&#x7530;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x767A;&#x4F5C;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x767A;&#x4F5C;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x305D;&#x308C;&#x3092;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;

&#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1; &#xBC0F; &#xD5C8;&#xC57D;&#xD55C; X &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xC804; &#xAD6C;&#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (&#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;)&#xC640; &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xC544; &#xBC00; &#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; (Abeta)&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBC0F; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xACE0;&#xAE30; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xACF5;&#xC720;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC560;&#xD50C; &#xB9AC; &#xCF00;&#xC774; &#xC158; &#xBC0F; Abeta&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC; Tg2576, &#xC2A4;&#xC6E8;&#xB374; &#xBCC0;&#xC774; (hAPPsw)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; over-express&#xB294;&#xB85C; &#xB118;&#xC5B4; fmr 1 &#xCF54; &#xC950;. FRAXAD, &#xBA85;&#xBA85; &#xB41C; &#xC790;&#xC190; &#xD45C;&#xC2DC; tg2576&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC99D;&#xAC00; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xB960; (23% &#xB098;&#xC774;&#xC758; 30 &#xC77C;) (3%)&#xC640; WT &#xBC0F; fmr 1 &#xCF54; littermate &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; (0%) &#xC77C;&#xCE58; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xACB0;&#xD568;. &#xB098;&#xC774;&#xC758; 60 &#xC77C;, Tg2576 &#xBC0F; FRAXAD &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; WT &#xBC0F; fmr 1 &#xCF54; littermates 0%&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; 40% &#xC0AC;&#xB9DD;&#xB960; &#xC811;&#xADFC;. &#xC99D;&#xAC00; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xB960; APP over-expressing &#xC950;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; pentylenetetrazol (PTZ)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; &#xBC1C;&#xC791; &#xC784;&#xACC4;&#xAC12; &#xD3C9;&#xAC00;. Tg2576 &#xBC0F; FRAXAD &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD588;&#xB2E4; PTZ &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xBC1C;&#xC791;&#xC744; &#xD558;&#xD55C;&#xAC12; (&#xD3C9;&#xADE0;&#xC758; &#xBC1C;&#xC791; &#xC810;&#xC218; &amp;gt; / 4.0 =) nontransgenic littermates (&#xD3C9;&#xADE0; &#xBC1C;&#xC791; &#xD3C9;&#xC810; 2.9 1.9)&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;. &#xBC1C;&#xC791; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;, &#xC790;&#xD3D0;&#xC99D;&#xACFC; &#xAC04; &#xC9C8;, &#xAD11;&#xACE0;, FXS&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xD615; &#xC774;&#xBA70; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC81C;&#xC548; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; APP &#xB610;&#xB294; Abeta&#xC758; &#xBC1C;&#xB2EC; over-expression &#xADF8; &#xBC1C;&#xC791; &#xBBFC;&#xAC10;&#xC131;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xBC1C;&#xC791; &#xBBFC;&#xAC10;&#xC131;&#xACFC; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xC804;&#xC870; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; over-express &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xB9DD;.

El s&#xED;ndrome de la enfermedad de Alzheimer y la de X fr&#xE1;gil, tanto mostrar fenotipos sin&#xE1;pticas, y en base a estudios recientes, dendr&#xED;ticas cuota que, probablemente m&#xE1;s de expresi&#xF3;n de la prote&#xED;na precursora amiloide (APP) y la beta-amiloide (Abeta). Con el fin de crear un modelo de rat&#xF3;n para estudiar espec&#xED;ficamente los efectos de la APP y Abeta en las sinapsis, cruzamos Tg2576, que sobreexpresan APP humana con la mutaci&#xF3;n sueca (hAPPsw), con FMR-1 ratones KO. La progenie, llamado FRAXAD, muestra una mayor mortalidad (23% en 30 d&#xED;as de edad) en comparaci&#xF3;n con Tg2576 (3%) y el WT y FMR-1 controla littermate KO (0%) en consonancia con un defecto del desarrollo. A los 60 d&#xED;as de edad, tanto los ratones Tg2576 y FRAXAD se acerc&#xF3; a una tasa de mortalidad del 40% frente al 0% para el peso y el FMR-1 KO camada. Para entender el mecanismo que subyace a una mayor mortalidad en APP sobre-expresi&#xF3;n de los ratones, se evalu&#xF3; umbrales de los ataques en respuesta a pentilentetrazol (PTZ). Tanto los ratones Tg2576 y FRAXAD ten&#xED;an un umbral m&#xE1;s bajo de las crisis inducidas por PTZ (puntuaci&#xF3;n media de convulsi&#xF3;n&#x26;gt; / = 4,0) en comparaci&#xF3;n con sus compa&#xF1;eros de camada no transg&#xE9;nicos (puntuaci&#xF3;n media convulsi&#xF3;n 01.09 a 02.09). Las convulsiones son un fenotipo importante de AD, FXS, el s&#xED;ndrome de Down, el autismo y la epilepsia, y estos datos sugieren que el desarrollo sobre-expresi&#xF3;n de APP o dendr&#xED;ticas Abeta mayor susceptibilidad a las crisis.

Incautaci&#xF3;n de susceptibilidad y la mortalidad en ratones que sobreexpresan la prote&#xED;na amiloide precursora

&#x4EE3;&#x8C22;&#x578B;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53; 5 &#xFF08;mGluR(5)) &#x89C4;&#x8303;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x524D;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D; (APP) &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x4E0B;&#x4F11;&#x606F;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF0C;mRNA &#x662F;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x4E0E;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x9547;&#x538B;&#x8106;&#x5F31; X &#x667A;&#x529B;&#x8FDF;&#x949D;&#x86CB;&#x767D; (FMRP)&#x3002;&#x540E;&#x7EC4; 1 &#x4F5C;&#x7528;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;FMRP &#x52A0;&#x5165;&#x4ECE; mRNA &#x548C;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x968F;&#x4E4B;&#x4EA7;&#x751F;&#x3002;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7EA7;&#x522B;&#x90FD;&#x662F;&#x5728;&#x521D;&#x7EA7;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6587;&#x5316;&#x7684;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5728; synaptoneurosomes (SN) &#x5206;&#x522B;&#x7F16;&#x5199;&#x4ECE; (KO) &#x80DA;&#x80CE;&#x548C;&#x5C11;&#x5E74;&#x574F; 1 &#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6811;&#x7A81;&#x5347;&#x9AD8;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x548C;&#x5176;&#x6C34;&#x89E3;&#x4EA7;&#x54C1; Abeta &#x5BF9;&#x8106;&#x6027; X &#x7EFC;&#x5408;&#x5F81; &#xFF08;&#x63A5;&#x7EED;&#xFF09; &#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x521B;&#x5EFA;&#x4E86; over-expresses &#x4EBA; APPSwe/Abeta &#x574F; 1 KO &#x80CC;&#x666F;&#x4E0B;&#x65B0;&#x578B;&#x9F20;&#x6807;&#x6A21;&#x578B; (FRAXAD)&#x3002;&#x672C;&#x6587;&#x6240;&#x8FF0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC4;&#x4F30; (1) &#x4EBA;&#x7C7B; APP(Swe) &#x548C; Abeta &#x6C34;&#x5E73;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x51FD;&#x6570;&#x7684; FRAXAD &#x5C0F;&#x9F20;&#x548C;&#x620A;&#x56DB;&#x6C2E; (PTZ) (2) &#x6263;&#x62BC;&#x6613;&#x60A3;&#x5E74;&#x9F84;&#x540E; mGluR(5) &#x5C01;&#x9501;&#x3002;FRAXAD &#x5C0F;&#x9F20; MPEP mGluR(5) &#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x4E0E;&#x9884;&#x5904;&#x7406;&#x51CF;&#x5C11; PTZ &#x81F4;&#x75EB;&#x4E25;&#x91CD;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; Abeta &#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x6263;&#x62BC;&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x51CF;&#x8F7B;&#x6263;&#x62BC;&#x75C5;&#x7406;&#x7684;&#x63A5;&#x7EED;&#x3001; &#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5; (AD) &#x548C;&#x5510;&#x6C0F;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7; (DS) &#x60A3;&#x8005;&#x3002;

MPEP &#x5BF9;&#x8868;&#x8FBE;&#x4EBA;&#x7C7B; Abeta &#x964D;&#x4F4E;&#x574F; 1 KO &#x5C0F;&#x9F20;&#x6263;&#x62BC;&#x4E25;&#x91CD;&#x6027;&#x3002;

Metabotropic glutamate receptor 5 (mGluR(5)) regulates the translation of amyloid precursor protein (APP) mRNA. Under resting conditions, mRNA is bound to and translationally repressed by the fragile X mental retardation protein (FMRP). Upon group 1 mGluR activation, FMRP dissociates from the mRNA and translation ensues. APP levels are elevated in the dendrites of primary neuronal cultures as well as in synaptoneurosomes (SN) prepared from embryonic and juvenile fmr-1 knockout (KO) mice, respectively. In order to study the effects of APP and its proteolytic product Abeta on Fragile X syndrome (FXS) phenotypes, we created a novel mouse model (FRAXAD) that over-expresses human APPSwe/Abeta in an fmr-1 KO background. Herein, we assess (1) human APP(Swe) and Abeta levels as a function of age in FRAXAD mice, and (2) seizure susceptibility to pentylenetetrazol (PTZ) after mGluR(5) blockade. PTZ-induced seizure severity is decreased in FRAXAD mice pre-treated with the mGluR(5) antagonist MPEP. These data suggest that Abeta contributes to seizure incidence and may be an appropriate therapeutic target to lessen seizure pathology in FXS, Alzheimer's disease (AD) and Down syndrome (DS) patients.

MPEP reduces seizure severity in Fmr-1 KO mice over expressing human Abeta.

R&#xE9;cepteur m&#xE9;tabotropique 5 du glutamate (mGluR (5)) r&#xE9;glemente la traduction de la prot&#xE9;ine pr&#xE9;curseur amylo&#xEF;de (APP) ARNm. Dans des conditions de repos, l&#x26;#39;ARNm est li&#xE9;e et en translation r&#xE9;prim&#xE9;e par la prot&#xE9;ine X fragile retard mental (FMRP). Sur le groupe 1 activation mGluR, se dissocie de l&#x26;#39;ARNm FMRP et la traduction en d&#xE9;coule. Niveaux APP sont &#xE9;lev&#xE9;s dans les dendrites des cultures de neurones primaires ainsi que dans synaptoneurosomes (SN) pr&#xE9;par&#xE9;s &#xE0; partir de l&#x26;#39;embryon et des mineurs FMR-1 knock-out (KO) chez la souris, respectivement. Afin d&#x26;#39;&#xE9;tudier les effets de l&#x26;#39;APP et son Abeta produit prot&#xE9;olytique sur Fragile X syndrome (FXS) ph&#xE9;notypes, nous avons cr&#xE9;&#xE9; un nouveau mod&#xE8;le de souris (FRAXAD) qui surexprime humaine APPSwe / Abeta dans un FMR-1 KO de fond. Ici, nous &#xE9;valuons (1) APP humaine (Swe) et les niveaux de Abeta en fonction de l&#x26;#39;&#xE2;ge chez la souris FRAXAD, et susceptibilit&#xE9; aux crises (2) &#xE0; pentyl&#xE8;net&#xE9;trazol (PTZ), apr&#xE8;s mGluR (5) le blocus. La gravit&#xE9; des crises induites par PTZ est diminu&#xE9;e chez les souris FRAXAD pr&#xE9;-trait&#xE9;s avec le MPEP mGluR antagoniste (5). Ces donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que Abeta contribue &#xE0; l&#x26;#39;incidence de saisie et peut &#xEA;tre une cible th&#xE9;rapeutique appropri&#xE9;e afin de r&#xE9;duire la saisie pathologie FXS, la maladie d&#x26;#39;Alzheimer (AD) et le syndrome de Down (DS) des patients.

MPEP R&#xE9;duit la gravit&#xE9; des crises dans le FMR-1 souris KO sur Exprimant humaines Abeta

Metabotropic Glutamate Rezeptor 5 (mGluR(5)) regelt die &Uuml;bersetzung des Amyloid Vorl&auml;uferprotein (APP) mRNA. Unter Bedingungen ruhen, ist die mRNA gebunden zu und translationally durch die fragile X Mental Retardation Protein (FMRP) unterdr&uuml;ckt. Bei der Gruppe 1 mGluR Aktivierung FMRP distanziert sich von mRNA und &Uuml;bersetzung folgt. APP-Ebenen sind die Dendriten der neuronalen Prim&auml;rkulturen ebenso wie in Synaptoneurosomes (SN) bzw. aus embryonalen und juvenile Fmr-1 Knockout (KO)-M&auml;use, vorbereitet erhoben. Um die Auswirkungen der APP und seine proteolytische Produkt Abeta auf Fragiles X-Syndrom (FXS) Ph&auml;notypen zu untersuchen, haben wir eine neuartige Maus-Modell (FRAXAD), die menschliche APPSwe/Abeta in einem Fmr-1 KO Hintergrund over-expresses. Hierin, bewerten wir nach mGluR(5) Blockade (1) menschlichen APP(Swe) und Abeta-Ebene in Abh&auml;ngigkeit von Alter in FRAXAD M&auml;use und (2) die Beschlagnahme Anf&auml;lligkeit f&uuml;r Pentetrazol (PTZ). PTZ-induzierte Beschlagnahme Schweregrad wird bei FRAXAD M&auml;usen Filtrationsanlagen mit der mGluR(5)-Antagonist MPEP verringert. Diese Daten legen nahe, dass Abeta zur Beschlagnahme Inzidenz tr&auml;gt und kann ein entsprechendes therapeutisches Ziel, Beschlagnahme Pathologie FXS, Alzheimer-Krankheit (AD) und Patienten mit Down-Syndrom (DS) zu vermindern.

MPEP reduziert Beschlagnahme Schweregrad Fmr-1 KO M&auml;usen &uuml;ber menschliche Abeta zum Ausdruck zu bringen.

Recettore del glutammato di metabotropic 5 (mGluR(5)) regola la traduzione della proteina precursore dell&#39;amiloide (APP) mRNA. In condizioni di riposo, mRNA &egrave; associato a e translationally repressi da fragile X ritardo mentale della proteina (FMRP). Dopo l&#39;attivazione di 1 mGluR del gruppo, FMRP si dissocia da mRNA e traduzione ensues. APP i livelli sono elevati in dendriti di un neurone colture primarie cos&igrave; come in synaptoneurosomes (SN) preparati da topi embrionale e giovanile fmr-1 knockout (KO), rispettivamente. Al fine di studiare gli effetti delle APP e del suo prodotto proteolitico Abeta su fenotipi (FXS) la sindrome X Fragile, abbiamo creato un modello di romanzo del mouse (FRAXAD) che over-expresses APPSwe/Abeta umana in uno sfondo di KO fmr-1. Nel presente documento, valutiamo (1) umani APP(Swe) e Abeta livelli in funzione dell&#39;et&agrave; in topi FRAXAD e (2) sequestro suscettibilit&agrave; alla pentylenetetrazol (PTZ) dopo il blocco di mGluR(5). Gravit&agrave; indotta PTZ sequestro &egrave; diminuito in FRAXAD topi pretrattati con l&#39;antagonista mGluR(5) MPEP. Questi dati suggeriscono che Abeta contribuisce all&#39;incidenza di grippaggio e pu&ograve; essere un obiettivo terapeutico appropriato per ridurre la patologia di sequestro in FXS, morbo di Alzheimer (AD) e pazienti di sindrome di Down (DS).

MPEP riduce la gravit&agrave; sequestro nei topi KO Fmr-1 sopra esprimendo Abeta umana.

&#x4EE3;&#x8B1D;&#x578B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;5&#xFF08;mGluR&#x306E;&#xFF08;5&#xFF09;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;APP&#xFF09;mRNA&#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;mRNA&#x304C;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x4E26;&#x9032;&#x8106;&#x5F31;X&#x7CBE;&#x795E;&#x9045;&#x6EDE;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;FMRP&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6291;&#x5236;&#x3002;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;1&#x306E;mGluR&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3001;mRNA&#x304B;&#x3089;FMRP&#x89E3;&#x96E2;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x7FFB;&#x8A33;&#x7D9A;&#x304F;&#x3002; APP&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x521D;&#x4EE3;&#x795E;&#x7D4C;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x3068;&#x540C;&#x200B;&#x200B;&#x69D8;&#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x80DA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5E7C;&#x82E5;FMR-1&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#xFF08;KO&#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x8ABF;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;synaptoneurosomes&#xFF08;SN&#xFF09;&#x3067;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x8106;&#x5F31;X&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#xFF08;FXS&#xFF09;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x4E0A;&#x306E;APP&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x751F;&#x6210;&#x7269;&#x5B89;&#x90E8;&#x7530;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;FMR-1 KO&#x306E;&#x80CC;&#x666F;&#x306B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;APPSwe /&#x5B89;&#x90E8;&#x7530;&#x3092;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#xFF08;FRAXAD&#xFF09;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; mGluR&#x306E;&#xFF08;5&#xFF09;&#x5C01;&#x9396;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;FRAXAD&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5E74;&#x9F62;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#xFF08;1&#xFF09;&#x30D2;&#x30C8;APP&#xFF08;SWE&#xFF09;&#x3068;&#x5B89;&#x90E8;&#x7530;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x3001;&#x30DA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30BE;&#x30FC;&#x30EB;&#xFF08;PTZ&#xFF09;&#x306B;&#xFF08;2&#xFF09;&#x767A;&#x4F5C;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3002; PTZ&#x8A98;&#x767A;&#x767A;&#x4F5C;&#x306E;&#x91CD;&#x75C7;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;mGluR&#x306E;&#xFF08;5&#xFF09;&#x62EE;&#x6297;&#x85AC;MPEP&#x3067;&#x524D;&#x51E6;&#x7406;FRAXAD&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x5B89;&#x90E8;&#x7530;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#xFF08;AD&#xFF09;&#x3068;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#xFF08;DS&#xFF09;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x767A;&#x4F5C;&#x306E;&#x767A;&#x75C7;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3057;&#x3001;FXS&#x306B;&#x767A;&#x4F5C;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x3092;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;

MPEP&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30E5;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#xB7;&#x5B89;&#x90E8;&#x7530;&#x3092;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;FMR-1 KO&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x767A;&#x4F5C;&#x306E;&#x91CD;&#x75C7;&#x5EA6;&#x3092;&#x8EFD;&#x6E1B;

5 Metabotropic glutamate &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (mGluR(5)) &#xC870;&#xC808; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xC804;&#xC870; (&#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;)&#xC758; &#xBC88;&#xC5ED; mRNA. &#xC870;&#xAC74; &#xD734;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; mRNA &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; translationally &#xC5B5;&#xC555; &#xD5C8;&#xC57D;&#xD55C; &#xC815;&#xC2E0; &#xC9C0;&#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (FMRP) X&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB8F9; 1 mGluR &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC2DC; FMRP&#xB294; Mrna&#xC5D0;&#xC11C; dissociates &#xACE0; &#xBC88;&#xC5ED; ensues. &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xC218;&#xC900; &#xBB38;&#xD654;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; synaptoneurosomes (SN) &#xCC98;&#xB7FC; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xBC0F; &#xCCAD;&#xC18C;&#xB144; fmr 1 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; (KO) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC01;&#xAC01; &#xC900;&#xBE44; dendrites&#xC5D0;&#xC11C; &#xB192;&#xC740; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC560;&#xD50C; &#xB9AC; &#xCF00;&#xC774; &#xC158; &#xBC0F; &#xD5C8;&#xC57D;&#xD55C; X &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (FXS) &#xACE0;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC81C;&#xD488; Abeta&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; over-expresses Abeta APPSwe/&#xC778;&#xAC04;&#xC758; fmr 1 &#xCF54; &#xBC30;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC18C;&#xC124; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378; (FRAXAD)&#xC744; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; mGluR(5) &#xBD09;&#xC1C4; &#xD6C4; FRAXAD &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC0F; pentylenetetrazol (PTZ) (2) &#xBC1C;&#xC791; &#xBBFC;&#xAC10;&#xC131;&#xC5D0; &#xB098;&#xC774;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C; (1) &#xC778;&#xAC04;&#xC758; app(swe)&#xC640; Abeta &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. PTZ &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xBC1C;&#xC791; &#xC2EC;&#xAC01;&#xB3C4; MPEP mGluR(5) &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911; FRAXAD &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC81C;&#xC548; Abeta &#xBC1C;&#xC791; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xB960;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; FXS, &#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1; (AD)&#xC640; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (DS) &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC791; &#xBCD1;&#xB9AC;&#xD559;&#xC744; &#xC644;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB300;&#xC0C1; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

MPEP &#xC778;&#xAC04;&#xC758; Abeta &#xD45C;&#xD604; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; Fmr 1 &#xCF54; &#xC950;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC791; &#xC2EC;&#xAC01;&#xB3C4; &#xC904;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Receptores metabotr&#xF3;picos de glutamato 5 (mGluR (5)) regula la traducci&#xF3;n de la prote&#xED;na precursora amiloide (APP) de ARNm. En condiciones de reposo, el ARNm se une a la traslaci&#xF3;n y reprimidos por la prote&#xED;na de retraso mental X fr&#xE1;gil (FMRP). Al grupo 1 la activaci&#xF3;n mGluR, se disocia de la FMRP ARNm y la traducci&#xF3;n se produce. Los niveles de APP son elevados en las dendritas de cultivos primarios de neuronas, as&#xED; como en synaptoneurosomes (SN) preparados a partir de embriones y juveniles FMR-1 knockout (KO) los ratones, respectivamente. Con el fin de estudiar los efectos de la APP y su Abeta producto de prote&#xF3;lisis en el s&#xED;ndrome de X fr&#xE1;gil (FXS) fenotipos, hemos creado un modelo de rat&#xF3;n novela (FRAXAD) que sobre-expresa humana APPswe / Abeta en un fondo de FMR-1 KO. Aqu&#xED;, evaluar (1) humana APP (Swe) y los niveles de Abeta en funci&#xF3;n de la edad en los ratones FRAXAD, y (2) susceptibilidad a las crisis de pentilentetrazol (PTZ), despu&#xE9;s de mGluR (5) bloqueo. PTZ inducida por gravedad de las convulsiones se reduce en ratones FRAXAD pre-tratados con el antagonista de mGluR MPEP (5). Estos datos sugieren que contribuye a la incidencia de Abeta crisis y ser una meta terap&#xE9;utica adecuada para disminuir la patolog&#xED;a en crisis FXS, la enfermedad de Alzheimer (EA) y el s&#xED;ndrome de Down (SD) de los pacientes.

MPEP reduce severidad de las crisis en el FMR-1 en ratones KO Expresando Humanos Abeta

&#x67D0;&#x4E9B;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x5B66;&#x4E60;&#x548C;&#x8BB0;&#x5FC6;&#x5176;&#x7535;&#x751F;&#x7406;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x957F;&#x65F6;&#x7A0B;&#x589E;&#x5F3A; (LTP) &#x9700;&#x8981;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8BC1;&#x660E; Pin1 (&#x5C3C;&#x739B; 1 &#x4E0E;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;) &#x9170;-&#x812F;&#x6C28;&#x9170;&#x5F02;&#x6784;&#x9176;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x6811;&#x7A81;&#x68D8;&#x548C;&#x8F74;&#x548C;&#x6291;&#x5236;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5408;&#x6210;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6240;&#x81F4;&#x3002;Pin1 &#x5236;&#x6B62;&#x589E;&#x52A0;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x771F;&#x6838;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x8D77;&#x59CB;&#x56E0;&#x5B50; 4E &#xFF08;eIF4E&#xFF09; &#x548C; eIF4E &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; 1 &#x548C; 2 &#xFF08;4E-BP1/2)&#x3002;&#x7B26;&#x5408;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5408;&#x6210;&#xFF0C;&#x6D77;&#x9A6C;&#x4ECE; Pin(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x5DF2;&#x6B63;&#x5E38;&#x65E9;&#x671F; LTP (E-LTP) &#x4F46;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x5F3A;&#x665A; LTP (L LTP) &#x76F8;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x63A7;&#x4EF6;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; C zeta (PKCzeta) &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; M zeta (PKMzeta) &#x589E;&#x52A0; Pin1(-/-) &#x9F20;&#x6807;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#xFF0C;&#x800C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7EF4;&#x62A4;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x6240;&#x9700;&#x3002;PKMzeta &#x4EA4;&#x4E92;&#x548C;&#x6291;&#x5236; Pin1 &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178; 16&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x3001; &#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5408;&#x6210;&#x987A;&#x5E8F;&#x7531; 1&#xFF0C;PKMzeta &#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;

1&#xFF0C;PKMzeta &#x6309;&#x987A;&#x5E8F;&#x63A7;&#x5236;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x5408;&#x6210;&#x3002;

Some forms of learning and memory and their electrophysiologic correlate, long-term potentiation (LTP), require dendritic translation. We demonstrate that Pin1 (protein interacting with NIMA 1), a peptidyl-prolyl isomerase, is present in dendritic spines and shafts and inhibits protein synthesis induced by glutamatergic signaling. Pin1 suppression increased dendritic translation, possibly through eukaryotic translation initiation factor 4E (eIF4E) and eIF4E binding proteins 1 and 2 (4E-BP1/2). Consistent with increased protein synthesis, hippocampal slices from Pin(-/-) mice had normal early LTP (E-LTP) but significantly enhanced late LTP (L-LTP) compared to wild-type controls. Protein kinase C zeta (PKCzeta) and protein kinase M zeta (PKMzeta) were increased in Pin1(-/-) mouse brain, and their activity was required to maintain dendritic translation. PKMzeta interacted with and inhibited Pin1 by phosphorylating serine 16. Therefore, glutamate-induced, dendritic protein synthesis is sequentially regulated by Pin1 and PKMzeta signaling.

Pin1 and PKMzeta sequentially control dendritic protein synthesis.

Certaines formes d&#x26;#39;apprentissage et de m&#xE9;moire et de leur corr&#xE9;lation &#xE9;lectrophysiologique, potentialisation &#xE0; long terme (LTP), exiger une traduction dendritique. Nous d&#xE9;montrons que Pin1 (interacting protein avec NIMA 1), une peptidyl-prolyl isom&#xE9;rase, est pr&#xE9;sent dans les &#xE9;pines dendritiques et des arbres et inhibe la synth&#xE8;se prot&#xE9;ique induite par la signalisation glutamatergique. Pin1 suppression augment&#xE9; traduction dendritique, &#xE9;ventuellement par le biais 4E traduction facteur eucaryote d&#x26;#39;initiation (eIF4E) et eIF4E prot&#xE9;ines de liaison 1 et 2 (4E-BP1 / 2). Conform&#xE9;ment &#xE0; la synth&#xE8;se accrue des prot&#xE9;ines, des tranches d&#x26;#39;hippocampe de Pin (- / -) chez la souris normale avait au d&#xE9;but LTP (E-LTP), mais nettement am&#xE9;lior&#xE9;e LTP tardive (L-LTP) par rapport &#xE0; des contr&#xF4;les de type sauvage. La prot&#xE9;ine kinase C z&#xEA;ta (PKCzeta) et la prot&#xE9;ine kinase M zeta (PKMzeta) ont &#xE9;t&#xE9; augment&#xE9;s en Pin1 (- / -) de cerveau de souris, et leur activit&#xE9; a &#xE9;t&#xE9; n&#xE9;cessaire pour maintenir la traduction dendritique. PKMzeta interagi avec et inhib&#xE9;e par la phosphorylation de s&#xE9;rine Pin1 16. Par cons&#xE9;quent, induite par le glutamate, la synth&#xE8;se des prot&#xE9;ines dendritique est s&#xE9;quentiellement r&#xE9;gie par Pin1 et PKMzeta signalisation.

Pin1 et PKMzeta s&#xE9;quentielle contr&#xF4;ler la synth&#xE8;se des prot&#xE9;ines dendritiques

Einige Formen von lernen und Ged&auml;chtnis und ihre elektrophysiologische Korrelat, m&uuml;ssen langfristige Erm&ouml;glichung (LTP), Dendritische &uuml;bersetzt. Wir zeigen, dass Pin1 (Protein Interaktion mit NIMA-1), ein konvertierende-Prolyl Isomerase ist in dendritische Dornen und Wellen und hemmt die Proteinsynthese, induziert durch das Glutamat zu signalisieren. PIN1 Unterdr&uuml;ckung erh&ouml;ht dendritische &Uuml;bersetzung, m&ouml;glicherweise durch eukaryotic &Uuml;bersetzung Einleitung Faktor 4E (eIF4E) und eIF4E-bindende Proteine 1 und 2 (4E-BP1/2). Erh&ouml;hte Proteinsynthese, hippocampal Scheiben aus Pin(-/-) M&auml;use normale fr&uuml;hen LTP (E-LTP) aber wesentlich verbesserten sp&auml;ten LTP (L-LTP hatten) im Vergleich zu Wildtyp Steuerelemente im Einklang stehen. Protein-Kinase C Zeta (PKCzeta) und Protein-Kinase-M-Zeta (PKMzeta) wurden in Pin1(-/-) Maus Gehirn erh&ouml;ht, und ihre T&auml;tigkeit war erforderlich, um die dendritischen &Uuml;bersetzung pflegen. PKMzeta mit interagiert und Pin1 durch Serin 16 PHOSPHORYLIEREND gehemmt. Daher induziert durch Glutamat, Dendritische Proteinsynthese sequenziell geregelt ist Pin1 und PKMzeta signalisieren.

PIN1 und PKMzeta Steuern nacheinander dendritische Proteinsynthese.

Alcune forme di apprendimento e memoria e loro correlazione elettrofisiologiche, potenziamento a lungo termine (LTP), richiedono traduzione dendritiche. Dimostriamo che il Pin1 (proteina interagendo con NIMA 1), una peptidilica-Prolil isomerasi, &egrave; presente nelle spine dendritiche e alberi e inibisce la sintesi proteica indotta da glutamatergico di segnalazione. PIN1 soppressione aumentato traduzione dendritiche, possibilmente attraverso la traduzione negli eucarioti iniziazione fattore 4E (eIF4E) e le proteine leganti eIF4E 1 e 2 (4E-BP1/2). Coerente con la sintesi proteica aumentata, fette hippocampal da Pin(-/-) topi avevano LTP precoce normale (E-LTP) ma significativamente migliorata tardo LTP (L-LTP) rispetto ai controlli wild-type. Zeta di proteina chinasi C (PKCzeta) e della proteina chinasi M zeta (PKMzeta) sono stati aumentati nel cervello del mouse Pin1(-/-), e la loro attivit&agrave; era necessaria per mantenere la traduzione dendritiche. PKMzeta interagito con e inibito Pin1 da fosforilante serina 16. Pertanto, la sintesi proteica indotta da glutammato, dendritiche sequenzialmente sono regolata da Pin1 e PKMzeta di segnalazione.

PIN1 e PKMzeta in sequenza di controllo sintesi proteica dendritiche.

&#x5B66;&#x7FD2;&#x3068;&#x8A18;&#x61B6;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x3001;&#x9577;&#x671F;&#x5897;&#x5F37;&#xFF08;LTP&#xFF09;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x306F;&#x3001;&#x6A39;&#x72B6;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;1&#x756A;&#x30D4;&#x30F3;&#xFF08;NIMA 1&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF09;&#x3001;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB; - &#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30EB;&#x30A4;&#x30BD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x68D8;&#x3068;&#x30B7;&#x30E3;&#x30D5;&#x30C8;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 1&#x756A;&#x30D4;&#x30F3;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306F;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x7FFB;&#x8A33;&#x958B;&#x59CB;&#x56E0;&#x5B50;4E&#xFF08;eIF4E&#xFF09;&#x3068;eIF4E&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;1&#x304A;&#x3088;&#x3073;2&#xFF08;4E-BP1 / 2&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6A39;&#x72B6;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5408;&#x6210;&#x3001;&#x30D4;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x6D77;&#x99AC;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x3067;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x65E9;&#x671F;LTP&#xFF08;E-LTP&#xFF09;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F8C;&#x671F;LTP&#xFF08;L-LTP&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5BFE;&#x7167;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8133;&#x3092;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x6A39;&#x72B6;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;C&#x30BC;&#x30FC;&#x30BF;&#xFF08;PKCzeta&#xFF09;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;M&#x30BC;&#x30FC;&#x30BF;&#xFF08;PKMzeta&#xFF09;&#x306F;1&#x756A;&#x30D4;&#x30F3;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3002; PKMzeta&#x306F;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3001;16&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;1&#x756A;&#x30D4;&#x30F3;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3001;&#x6A39;&#x72B6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5408;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x9806;&#x6B21;1&#x756A;&#x30D4;&#x30F3;&#x3068;PKMzeta&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;

1&#x756A;&#x30D4;&#x30F3;&#x3068;PKMzeta&#x9806;&#x6B21;&#x6A39;&#x72B6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;

&#xC5B4;&#xB5A4; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xD559;&#xC2B5; &#xBC0F; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; electrophysiologic &#xC0C1;&#xAD00;, &#xC7A5;&#xAE30; potentiation (LTP), &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xBCC0;&#xD658; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC785;&#xC99D; Pin1 (NIMA 1 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;) peptidyl prolyl isomerase &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xB4F1;&#xBF08;&#xC640; &#xC0E4;&#xD504;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xBC0F; glutamatergic &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;. Pin1 &#xC5B5;&#xC81C; &#xC99D;&#xAC00; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; &#xC9C4; &#xD575; &#xBC88;&#xC5ED; &#xAC1C;&#xC2DC; &#xC694;&#xC18C; 4E &#xD1B5;&#xD574; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xBC88;&#xC5ED; (eIF4E)&#xC640; eIF4E &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 1&#xACFC; 2 (4E-BP1/2). &#xC99D;&#xAC00; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131;, &#xC950; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB2A6;&#xC740; LTP (L-LTP) &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC815;&#xC0C1; &#xCD08;&#xAE30; LTP (E-LTP) &#xD588;&#xB2E4; pin(-/-)&#xC5D0;&#xC11C; hippocampal &#xC870;&#xAC01;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; C &#xC81C;&#xD0C0; (PKCzeta) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; M &#xC81C;&#xD0C0; (PKMzeta) Pin1(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xBC88;&#xC5ED;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xD588;&#xB2E4;. Pkmzeta&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; 16 phosphorylating&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; Pin1 &#xC800;&#xD574;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, glutamate &#xC720;&#xBC1C;, &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131; Pin1 &#xBC0F; Pkmzeta&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xC21C;&#xCC28;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2E0;&#xD638;.

Pin1 PKMzeta &#xC21C;&#xCC28;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4;.

Algunas formas de aprendizaje y la memoria y su correlato electrofisiol&#xF3;gico, potenciaci&#xF3;n a largo plazo (LTP), exigir la traducci&#xF3;n dendr&#xED;ticas. Se demuestra que Pin1 (interacci&#xF3;n prote&#xED;na con NIMA 1), una peptidil-isomerasa prolil, est&#xE1; presente en las espinas dendr&#xED;ticas y los ejes e inhibe la s&#xED;ntesis de la prote&#xED;na inducida por la se&#xF1;alizaci&#xF3;n glutamat&#xE9;rgica. Pin1 supresi&#xF3;n de aumento de traducci&#xF3;n dendr&#xED;ticas, posiblemente a trav&#xE9;s de 4E factor de iniciaci&#xF3;n de la traducci&#xF3;n eucari&#xF3;tica (eIF4E) y prote&#xED;nas de uni&#xF3;n eIF4E 1 y 2 (4E-BP1 / 2). De acuerdo con la s&#xED;ntesis de prote&#xED;nas mayor, rodajas de hipocampo de Pin (- / -) ratones normales ten&#xED;an principios de LTP (E-LTP), pero LTP finales de mejora de forma significativa (L-LTP) en comparaci&#xF3;n con controles de tipo salvaje. La prote&#xED;na quinasa C zeta (PKCzeta) y la prote&#xED;na quinasa M zeta (PKMzeta) se incrementaron en Pin1 (- / -) de cerebro de rat&#xF3;n, y su actividad se requiere para mantener la traducci&#xF3;n dendr&#xED;ticas. PKMzeta interactu&#xF3; con e inhibe la fosforilaci&#xF3;n de la serina Pin1 por 16. Por lo tanto, inducida por el glutamato, la s&#xED;ntesis de prote&#xED;nas dendr&#xED;ticas es secuencial regulada por la aguja 1 y se&#xF1;alizaci&#xF3;n PKMzeta.

La aguja 1 y PKMzeta secuencial control de la s&#xED;ntesis de prote&#xED;nas dendr&#xED;ticas

&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x86CB;&#x767D;&#x524D;&#x4F53; (AbetaPP) &#x662F;&#x5728;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5; (AD)&#x3001; &#x5510;&#x6C0F;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7; (DS)&#x3001; &#x81EA;&#x95ED;&#x75C7;&#xFF0C;&#x5916;&#x6E90;&#x548C;&#x8106;&#x5F31; X &#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x3002;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x795E;&#x7ECF;&#x7D0A;&#x4E71;&#xFF0C;&#x5E38;&#x89C1;&#x8868;&#x578B;&#x7F09;&#x83B7;&#x91CF;&#x5C1A;&#x6263;&#x62BC;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x548C;&#x7E41;&#x6B96;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x4ECD;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x672A;&#x77E5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8BC1;&#x660E;&#x5E7F;&#x544A; (Tg2576) &#x548C; DS &#xFF08;Ts65Dn&#xFF09; &#x5C0F;&#x9F20;&#x51FA;&#x73B0;&#x60CA;&#x53A5;&#x7F09;&#x83B7;&#x91CF;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E0E;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x4EE3;&#x8C22;&#x578B;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53; 5 (mGluR5) &#x6216;&#x7531; amyloid beta &#x7248;&#x6297;&#x4F53;&#x88AB;&#x52A8;&#x514D;&#x75AB;&#x51CF;&#x6BD2;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x5F3A;&#x70C8;&#x6263;&#x62BC;&#x6613;&#x611F;&#x6027;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x6D89;&#x53CA; AbetaPP &#x6216; catabolite&#xFF0C;&#x5E76;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8BE5; mGluR5 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6B64;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;

&#x5510;&#x6C0F;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x548C;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5;&#x7684;&#x556E;&#x9F7F;&#x52A8;&#x7269;&#x6A21;&#x578B;&#x51FA;&#x73B0;&#x60CA;&#x53A5;&#x53D1;&#x4F5C;&#x3002;

Amyloid-beta protein precursor (AbetaPP) is overexpressed in Alzheimer's disease (AD), Down syndrome (DS), autism, and fragile X syndrome. Seizures are a common phenotype in all of these neurological disorders, yet the underlying molecular mechanism(s) of seizure induction and propagation remain largely unknown. We demonstrate that AD (Tg2576) and DS (Ts65Dn) mice exhibit audiogenic seizures, which can be attenuated with antagonists to metabotropic glutamate receptor 5 (mGluR5) or by passive immunization with anti-amyloid-beta antibody. Our data strongly implicates AbetaPP or a catabolite in seizure susceptibility and suggests that mGluR5 mediates this response.

Alzheimer's disease and Down syndrome rodent models exhibit audiogenic seizures.

Pr&#xE9;curseur de la prot&#xE9;ine b&#xEA;ta-amylo&#xEF;de (AbetaPP) est surexprim&#xE9; dans la maladie d&#x26;#39;Alzheimer (AD), le syndrome de Down (DS), l&#x26;#39;autisme et le syndrome du X fragile. Les saisies sont un ph&#xE9;notype commun dans tous ces troubles neurologiques, mais le m&#xE9;canisme mol&#xE9;culaire sous-jacent (s) de l&#x26;#39;induction de saisie et de la propagation restent encore largement inconnus. Nous d&#xE9;montrons que AD (Tg2576) et DS (Ts65Dn) souris pr&#xE9;sentent crises audiog&#xE8;nes, qui peuvent &#xEA;tre att&#xE9;nu&#xE9;s par des antagonistes de r&#xE9;cepteur m&#xE9;tabotropique du glutamate &#xE0; 5 (mGluR5) ou par l&#x26;#39;immunisation passive avec des anticorps anti-b&#xEA;ta-amylo&#xEF;de anticorps. Nos donn&#xE9;es implique fortement AbetaPP ou un catabolite de susceptibilit&#xE9; aux crises et sugg&#xE8;re que mGluR5 la m&#xE9;diation de cette r&#xE9;ponse.

Maladie d&#x26;#39;Alzheimer et de Down Syndrome des mod&#xE8;les de rongeurs pi&#xE8;ce crises audiog&#xE8;nes

Amyloid-Beta-Protein-Vorl&auml;ufer (AbetaPP) ist in der Alzheimer-Krankheit (AD), Down-Syndrom (DS), Autismus &uuml;berexprimiert und fragile X-Syndrom. Anf&auml;lle sind einer gemeinsamen Ph&auml;notyp in allen diesen neurologischen Erkrankungen, obwohl die zugrunde liegenden molekularen Mechanismen der Beschlagnahme Induktion und Vermehrung, bleiben weitgehend unbekannt. Wir zeigen, dass AD (Tg2576) und DS (Ts65Dn)-M&auml;use zeigen eine Audiogenic Anf&auml;lle, die mit Antagonisten an Metabotropic Glutamate Rezeptor 5 (mGluR5) oder durch Passive Immunisierung mit anti-amyloid-Beta-Antik&ouml;rper abgeschw&auml;cht werden k&ouml;nnen. Unsere Daten stark steht in Verbindung mit AbetaPP oder eine Catabolite Beschlagnahme Anf&auml;lligkeit und l&auml;sst vermuten, dass diese mGluR5 diese Reaktion vermittelt.

Alzheimer-Krankheit und Down-Syndrom-Nagetier-Modelle weisen Audiogenic Anf&auml;lle.

Precursore della proteina amiloide-beta (AbetaPP) &egrave; overexpressed nel morbo di Alzheimer (AD), sindrome di Down (DS), autismo e X sindrome fragile. Sequestri sono un fenotipo comune in tutti questi disturbi neurologici, eppure i sottostanti meccanismi molecolari comprendono di sequestro induzione e propagazione rimangono in gran parte sconosciuti. Dimostriamo che annuncio (Tg2576) e topi DS (Ts65Dn) esibiscono audiogenic sequestri, che possono essere attenuati con antagonisti per il recettore del glutammato di metabotropic 5 (mGluR5) o da immunizzazione passiva con anticorpi anti-amyloid-beta. I nostri dati fortemente implica AbetaPP o un catabolite nella suscettibilit&agrave; sequestro e suggeriscono che mGluR5 da intermediario questa risposta.

Morbo di Alzheimer e sindrome di Down roditori modelli esibiscono audiogenic sequestri.

&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3B2;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#xFF08;AbetaPP&#xFF09;&#x306F;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#xFF08;DS&#xFF09;&#x3001;&#x81EA;&#x9589;&#x75C7;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8106;&#x5F31;X&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#xFF08;AD&#xFF09;&#x3067;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x767A;&#x4F5C;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306B;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x767A;&#x4F5C;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3068;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#xFF08;s&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;AD&#xFF08;Tg2576&#xFF09;&#x3068;DS&#xFF08;Ts65Dn&#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x578B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;5&#xFF08;mGluR5&#xFF09;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30F3;&#x30BF;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6297;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3B2;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x53D7;&#x52D5;&#x514D;&#x75AB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E1B;&#x8870;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x8074;&#x539F;&#x767A;&#x4F5C;&#x3092;&#x5448;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x5F37;&#x304F;AbetaPP&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x767A;&#x4F5C;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x304C;&#x3068;mGluR5&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#x3068;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x75C7;&#x306E;&#x9F67;&#x6B6F;&#x985E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8074;&#x539F;&#x767A;&#x4F5C;&#x3092;&#x51FA;&#x5C55;

&#xC804;&#xC870; &#xC544; &#xBC00; &#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (AbetaPP)&#xC740; &#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xBCD1; (AD), &#xB2E4;&#xC6B4; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (DS), &#xC790;&#xD3D0;&#xC99D;, overexpressed &#xD5C8;&#xC57D;&#xD55C; X &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;. &#xBC1C;&#xC791;&#xC774; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC7A5;&#xC560;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD615; &#xC544;&#xC9C1; &#xBC1C;&#xC791; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xC804;&#xD30C;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBD84;&#xC790; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xB9C8;&#xB354;&#xBCF4;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C0;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC81C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xAD11;&#xACE0; (Tg2576)&#xACFC; DS (Ts65Dn) &#xC0DD;&#xC950; &#xC804;&#xC2DC; metabotropic glutamate &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; 5 (mGluR5) &#xB610;&#xB294; &#xC218;&#xB3D9; &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885; amyloid-&#xBCA0;&#xD0C0; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB85C; &#xD558; &#xC5EC; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xC640; &#xAC10;&#xC1E0; &#xC218; audiogenic &#xBC1C;&#xC791;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xC791; &#xBBFC;&#xAC10;&#xC131;&#xC5D0; AbetaPP &#xB610;&#xB294; catabolite&#xB97C; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; Mglur5&#xC774;&#xC774; &#xC751;&#xB2F5; &#xC911;&#xC7AC; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC54C; &#xCE20; &#xD558;&#xC774; &#xBA38; &#xC9C8;&#xD658;&#xACFC; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; &#xC124;&#xCE58;&#xB958; &#xBAA8;&#xB378; audiogenic &#xBC1C;&#xC791;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD55C;&#xB2E4;.

Beta-amiloide prote&#xED;na precursora (AbetaPP) se sobreexpresa en la enfermedad de Alzheimer (EA), el s&#xED;ndrome de Down (SD), el autismo y el s&#xED;ndrome de X fr&#xE1;gil. Las convulsiones son un fenotipo com&#xFA;n en todos estos trastornos neurol&#xF3;gicos, sin embargo, el mecanismo molecular subyacente (s) de la inducci&#xF3;n de convulsiones y la propagaci&#xF3;n siguen siendo en gran parte desconocido. Se demuestra que AD (Tg2576) y DS (Ts65Dn) ratones muestran crisis audiog&#xE9;nicas, que pueden ser atenuados con antagonistas de los receptores de glutamato metabotr&#xF3;picos 5 (mGluR5) o por la inmunizaci&#xF3;n pasiva con anticuerpos anti-beta-amiloide. Nuestros datos implican fuertemente AbetaPP o catab&#xF3;lica en la susceptibilidad a convulsiones y sugiere que mGluR5 media esta respuesta.

Enfermedad de Alzheimer y s&#xED;ndrome de Down modelos en rat&#xF3;n Prueba crisis audiog&#xE9;nicas

&#x8106;&#x6027; X &#x7EFC;&#x5408;&#x5F81; &#xFF08;&#x63A5;&#x7EED;&#xFF09; &#x662F;&#x6700;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7EE7;&#x627F;&#x667A;&#x529B;&#x6B8B;&#x75BE;&#x548C;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x81EA;&#x95ED;&#x75C7;&#x9057;&#x4F20;&#x539F;&#x56E0;&#x7684;&#x9886;&#x5148;&#x3002;&#x8106;&#x6027; X &#x667A;&#x529B;&#x8FDF;&#x949D;&#x86CB;&#x767D; (FMRP)&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x6216;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x63A5;&#x7EED;&#x5927;&#x5E45;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E00;&#x7EA7;&#x3001; &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x548C;&#x63A7;&#x5236;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837; &beta; &#x86CB;&#x767D;&#x524D;&#x4F53; (A&beta;PP) &#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x7FFB;&#x8BD1; mRNA&#x3002;&#x5288;&#x88C2;&#x7684; A&beta;PP &#x53EF;&#x4EE5;&#x4EA7;&#x751F; &beta;-&#x6DC0;&#x7C89; (A&beta;) &#x5728;&#x963F;&#x5C14;&#x8328;&#x6D77;&#x9ED8;&#x75C5; (AD) &#x548C;&#x5510;&#x6C0F;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7; (DS) mis-expressed 39 43 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x80BD;&#x3002;A&beta; &#x662F; over-expressed &#x7684; Fmr1(KO) &#x5C0F;&#x9F20;&#x5927;&#x8111;&#x6697;&#x793A;&#x5728;&#x63A5;&#x7EED;&#x4E2D;&#x7684;&#x81F4;&#x75C5;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x9057;&#x4F20;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684; A&beta;PP/A&beta; &#x6551;&#x52A9;&#x8868;&#x578B;&#x63A5;&#x7EED;&#x7279;&#x6027;&#xFF0C;&#x662F;&#x5426;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC4;&#x4F30;&#x60CA;&#x53A5;&#x53D1;&#x4F5C; (AGS)&#x3001; &#x7126;&#x8651;&#x3001; &#x6210;&#x719F;&#x4E0E;&#x672A;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x6811;&#x7A81;&#x68D8;&#x548C;&#x4EE3;&#x8C22;&#x578B;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53; (&#x4F5C;&#x7528;) &#x7684;&#x6BD4;&#x4F8B;&#xFF0C;-&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x8427;&#x6761; (&#x6709;&#x9650;&#x516C;&#x53F8;) Fmr1(KO) &#x5C0F;&#x9F20;&#x540E;&#x4E00;&#x4E2A; App &#x57FA;&#x56E0;&#x53BB;&#x9664;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8868;&#x578B;&#x88AB;&#x90E8;&#x5206;&#x6216;&#x5B8C;&#x5168;&#x6062;&#x590D;&#x6B63;&#x5E38;&#x3002;A&beta;(1-42) &#x8840;&#x6D46;&#x4E2D;&#x5168;&#x7A81;&#x53D8;&#x63A5;&#x7EED;&#x7537;&#x6027;&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x5339;&#x914D;&#x7684;&#x63A7;&#x4EF6;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x6709;&#x70B9;&#x589E;&#x52A0;&#x5927;&#x8111;&#x76AE;&#x5C42;&#x548C;&#x6D77;&#x9A6C;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x5927;&#x8111;&#x4E2D;&#xFF0C;A&beta; &#x87AF;&#x5408;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x53EF;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x63A5;&#x7EED;&#x4E0D;&#x65AD;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x7597;&#x6CD5;&#x65E8;&#x5728;&#x51CF;&#x5C11;&#x5728; AD &#x4E2D;&#x7684; A&beta; &#x548C; A&beta; &#x53EF;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x4F53;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x8BB0;&#x7269;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x8BCA;&#x65AD;&#x6216;&#x8BC4;&#x4F30;&#x6CBB;&#x7597;&#x6548;&#x679C;&#x3002;

&#x9006;&#x8F6C;&#x7684;&#x8106;&#x5F31; X &#x8868;&#x578B;&#x7684; A&beta;PP/A&beta; &#x6C34;&#x5E73; Fmr1KO &#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x64CD;&#x7EB5;&#x3002;

Fragile X syndrome (FXS) is the most common form of inherited intellectual disability and the leading known genetic cause of autism. Fragile X mental retardation protein (FMRP), which is absent or expressed at substantially reduced levels in FXS, binds to and controls the postsynaptic translation of amyloid Î²-protein precursor (AÎ²PP) mRNA. Cleavage of AÎ²PP can produce Î²-amyloid (AÎ²), a 39-43 amino acid peptide mis-expressed in Alzheimer's disease (AD) and Down syndrome (DS). AÎ² is over-expressed in the brain of Fmr1(KO) mice, suggesting a pathogenic role in FXS. To determine if genetic reduction of AÎ²PP/AÎ² rescues characteristic FXS phenotypes, we assessed audiogenic seizures (AGS), anxiety, the ratio of mature versus immature dendritic spines and metabotropic glutamate receptor (mGluR)-mediated long-term depression (LTD) in Fmr1(KO) mice after removal of one App allele. All of these phenotypes were partially or completely reverted to normal. Plasma AÎ²(1-42) was significantly reduced in full-mutation FXS males compared to age-matched controls while cortical and hippocampal levels were somewhat increased, suggesting that AÎ² is sequestered in the brain. Evolving therapies directed at reducing AÎ² in AD may be applicable to FXS and AÎ² may serve as a plasma-based biomarker to facilitate disease diagnosis or assess therapeutic efficacy.

Reversal of fragile X phenotypes by manipulation of AÎ²PP/AÎ² levels in Fmr1KO mice.

Fragile X syndrome (FXS) est la forme la plus fr&#xE9;quente de d&#xE9;ficience intellectuelle h&#xE9;rit&#xE9;e et la principale cause g&#xE9;n&#xE9;tique de l&#x26;#39;autisme connu. Fragile X prot&#xE9;ines retard mental (FMRP), qui est absent ou exprim&#xE9;s &#xE0; des niveaux sensiblement r&#xE9;duits dans FXS, se lie &#xE0; la traduction et de contr&#xF4;le post-synaptique de la substance amylo&#xEF;de &#x3B2;-prot&#xE9;ine pr&#xE9;curseur (A&#x3B2;PP) ARNm. Le clivage de A&#x3B2;PP peut produire &#x3B2;-amylo&#xEF;de (A&#xDF;), un acide amin&#xE9; 39-43 peptide mal exprim&#xE9; dans la maladie d&#x26;#39;Alzheimer (AD) et le syndrome de Down (DS). A&#xDF; est sur-exprim&#xE9; dans le cerveau de FMR1 (KO) chez la souris, sugg&#xE9;rant un r&#xF4;le pathog&#xE8;ne dans le SXF. Pour d&#xE9;terminer si la r&#xE9;duction de la g&#xE9;n&#xE9;tique A&#x3B2;PP / A&#xDF; sauvetages caract&#xE9;ristiques ph&#xE9;notypes FXS, nous avons &#xE9;valu&#xE9; crises audiog&#xE8;nes (AGS), l&#x26;#39;anxi&#xE9;t&#xE9;, le ratio des &#xE9;pines dendritiques matures par rapport immature et r&#xE9;cepteurs m&#xE9;tabotropiques du glutamate (mGluR) m&#xE9;di&#xE9;e par d&#xE9;pression &#xE0; long terme (LTD) dans FMR1 (KO) chez la souris apr&#xE8;s l&#x26;#39;enl&#xE8;vement d&#x26;#39;un all&#xE8;le App. Tous ces ph&#xE9;notypes ont &#xE9;t&#xE9; partiellement ou compl&#xE8;tement revenu &#xE0; la normale. A&#xDF; plasma (1-42) a &#xE9;t&#xE9; significativement r&#xE9;duite chez les m&#xE2;les FXS plein mutation par rapport &#xE0; l&#x26;#39;&#xE2;ge des t&#xE9;moins appari&#xE9;s alors que les niveaux corticales et hippocampiques ont &#xE9;t&#xE9; quelque peu augment&#xE9;, ce qui sugg&#xE8;re que A&#xDF; est s&#xE9;questr&#xE9; dans le cerveau. L&#x26;#39;&#xE9;volution des th&#xE9;rapies visant &#xE0; r&#xE9;duire A&#xDF; dans la MA peut &#xEA;tre applicable &#xE0; FXS et A&#xDF; peut servir de biomarqueur &#xE0; base de plasma afin de faciliter le diagnostic des maladies ou d&#x26;#39;&#xE9;valuer l&#x26;#39;efficacit&#xE9; th&#xE9;rapeutique.

Reprise de ph&#xE9;notypes du X fragile par la manipulation de A&#x3B2;PP / A&#xDF; niveaux chez la souris Fmr1KO

Fragiles X-Syndrom (FXS) ist die h&auml;ufigste Form der geerbten geistiger Behinderung und den f&uuml;hrenden genetische Ursache von Autismus bekannt. Fragile X Mental Retardation Protein (FMRP), das ist abwesend oder mit deutlich verminderter H&auml;ufigkeit in FXS ausgedr&uuml;ckt, bindet an und steuert die postsynaptisches &Uuml;bersetzung von Amyloid-&beta;-Protein-Vorl&auml;ufer (A&beta;PP) mRNA. Spaltung von A&beta;PP produzieren &beta;-Amyloid (A&beta;), 39-43 Aminos&auml;ure Peptid in der Alzheimer-Krankheit (AD) und Down-Syndrom (DS) mis-expressed. A&beta; ist im Gehirn Fmr1(KO) M&auml;use, over-expressed und eine pathogene Rolle in FXS vorschlagen. Um zu bestimmen, wenn genetische Verringerungder A&beta;PP/A&beta; charakteristische FXS-Ph&auml;notypen rettet, beurteilen wir Audiogenic Sicherstellungen (AGS), Angst, das Verh&auml;ltnis von reif versus unreif dendritische Dornen und Metabotropic Glutamate Rezeptor (mGluR)-vermittelte langfristige Depression (LTD) Fmr1(KO) M&auml;usen nach Entfernung von einem App-Allel. Alle diese Ph&auml;notypen wurden teilweise oder ganz normal r&uuml;ckg&auml;ngig gemacht. Plasma A&beta;(1-42) in voll-Mutation FXS M&auml;nner gegen&uuml;ber altersbezogenen Steuerelemente w&auml;hrend kortikale und hippocampal Ebene etwas erh&ouml;ht wurden, was darauf hindeutet, dass im Gehirn A&beta; Kohlenstoff ist deutlich reduziert. Entwicklung von Therapien, die auf eine Verringerung der A&beta; in AD u.u. zu FXS und A&beta; dienen als Plasma-basierte Biomarker erleichtern Krankheit Diagnose oder therapeutische Wirksamkeit zu beurteilen.

Umkehrung der fragile X Ph&auml;notypen durch Manipulation des A&beta;PP/A&beta; Ebenen Fmr1KO M&auml;usen.

Sindrome X fragile (FXS) &egrave; la forma pi&ugrave; comune di disabilit&agrave; intellettuale ereditati e il leader noto causa genetica dell&#39;autismo. Proteina di ritardo mentale X fragile (FMRP), che &egrave; assente o espressa a livelli sostanzialmente ridotti in FXS, si lega a e controlla la traduzione postsinaptica del precursore &beta;-proteina amiloide (A&beta;PP) mRNA. Scissione di A&beta;PP &egrave; in grado di produrre &beta;-amiloide (A&beta;), un 39-43 dell&#39;amminoacido del peptide mis-expressed nella malattia di Alzheimer (AD) e la sindrome di Down (DS). A&beta; &egrave; sovraespresso nel cervello di topi Fmr1(KO), suggerendo un ruolo patogeno in FXS. Per determinare se genetica riduzione di A&beta;PP/A&beta; salv&ograve; caratteristici fenotipi FXS, abbiamo valutato audiogenic sequestri (AGS), l&#39;ansia, il rapporto di maturo versus spine dendritiche immature e recettore del glutammato di metabotropic (mGluR)-mediata depressione a lungo termine (LTD) in topi Fmr1(KO) dopo la rimozione di un allele di App. Tutti questi fenotipi sono stati parzialmente o completamente torn&ograve; alla normalit&agrave;. Plasma A&beta;(1-42) era significativamente ridotta in piena mutazione FXS maschi rispetto ai controlli corrispondenti et&agrave; mentre un po &#39; sono stati aumentati livelli corticali e dell&#39;ippocampo, suggerendo che A&beta; &egrave; sequestrato nel cervello. Evoluzione terapie dirette a ridurre A&beta; in annuncio potrebbe essere applicabile a FXS e A&beta; pu&ograve; servire come un biomarker plasmatica per facilitare la diagnosi di malattia o per valutare l&#39;efficacia terapeutica.

Inversione di X fenotipi di manipolazione dei livelli A&beta;PP/A&beta; in topi Fmr1KO fragile.

&#x8106;&#x5F31;X&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#xFF08;FXS&#xFF09;&#x304C;&#x7D99;&#x627F;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x77E5;&#x7684;&#x969C;&#x5BB3;&#x3068;&#x81EA;&#x9589;&#x75C7;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x5F62;&#x5F0F;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x304B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;FXS&#x3067;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8106;&#x5F31;X&#x7CBE;&#x795E;&#x9045;&#x6EDE;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;FMRP&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3B2;&#x86CB;&#x767D;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#xFF08;A&#x3B2;PP&#xFF09;mRNA&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; A&#x3B2;PP&#x306E;&#x5207;&#x65AD;&#x304C;&#x3B2;-&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#xFF08;A&#x3B2;&#xFF09;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;39&#x304B;&#x3089;43&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30A2;&#x30EB;&#x30C4;&#x30CF;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x75C5;&#xFF08;AD&#xFF09;&#x3068;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#xFF08;DS&#xFF09;&#x3067;&#x30DF;&#x30B9;&#x304C;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3002; A&#x3B2;&#x306F;&#x3001;FXS&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;FMR1&#xFF08;KO&#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8133;&#x3067;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; A&#x3B2;PP/A&#x3B2;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x6E1B;&#x5C11;&#x304C;&#x7279;&#x5FB4;&#x7684;&#x306A;FXS&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x6551;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x5224;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x8074;&#x539F;&#x767A;&#x4F5C;&#xFF08;AGS&#xFF09;&#x3001;&#x4E0D;&#x5B89;&#x3001;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x5BFE;&#x672A;&#x6210;&#x719F;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x68D8;&#x306E;&#x6BD4;&#x3068;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x578B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;mGluR&#x306E;&#xFF09;&#x4ECB;&#x5728;&#x6027;&#x9577;&#x671F;&#x6291;&#x5727;&#xFF08;LTD&#xFF09;FMR1&#x306E;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;1&#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x9664;&#x53BB;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#xFF08;KO&#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x308A;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x623B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x76AE;&#x8CEA;&#x3068;&#x6D77;&#x99AC;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x3084;&#x3084;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x4E00;&#x65B9;&#x8840;&#x6F3F;A&#x3B2;&#xFF08;1-42&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x305D;&#x306E;A&#x3B2;&#x304C;&#x8133;&#x5185;&#x3067;&#x9694;&#x96E2;&#x3055;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x5E74;&#x9F62;&#x306E;&#x5BFE;&#x7167;&#x7FA4;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x3001;&#x30D5;&#x30EB;&#x5909;&#x7570;FXS&#x306E;&#x7537;&#x6027;&#x3067;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002; AD&#x3067;A&#x3B2;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x306B;&#x5411;&#x3051;&#x9032;&#x5316;&#x3057;&#x3066;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306F;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x8A3A;&#x65AD;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6CBB;&#x7642;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x50CD;&#x304F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;FXS&#x304A;&#x3088;&#x3073;A&#x3B2;&#x306B;&#x3082;&#x9069;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

Fmr1KO&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;A&#x3B2;PP/A&#x3B2;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x64CD;&#x4F5C;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8106;&#x5F31;X&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x9006;&#x8EE2;

&#xAE68;&#xC9C0;&#xAE30; &#xC26C;&#xC6B4; &#xC5D1;&#xC2A4; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (FXS) &#xC0C1;&#xC18D; &#xB41C; &#xC9C0;&#xC801; &#xC7A5;&#xC560; &#xBC0F; &#xC790;&#xD3D0;&#xC99D;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xC6D0;&#xC778; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xD589;&#xAC04;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD615;&#xD0DC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE68;&#xC9C0;&#xAE30; X &#xC815;&#xC2E0; &#xC9C0;&#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (FMRP), &#xACB0; &#xC11D; &#xB610;&#xB294; FXS&#xC758; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604;, &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &beta; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC804;&#xC870; (A&beta;PP)&#xC758; postsynaptic &#xBCC0;&#xD658;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; mRNA. A&beta;PP&#xC758; &#xBD84;&#xC5F4; &beta; &#xC544; &#xBC00; &#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; (A&beta;)-39-43 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xC54C;&#xCE20;&#xD558;&#xC774;&#xBA38;&#xBCD1; (AD)&#xC640; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (DS)&#xC5D0;&#xC11C; mis-expressed&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. A&beta;&#xC740; over-expressed Fmr1(KO) &#xC950;&#xC758; &#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; FXS&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xC5ED;&#xD560;. A&beta;PP/A&beta;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC10;&#xC18C; &#xD2B9;&#xC131; FXS &#xACE0;&#xAE30; &#xAD6C;&#xCD9C;, &#xB9CC;&#xC57D; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD3C9;&#xAC00; audiogenic &#xBC1C;&#xC791; (AGS), &#xBD88;&#xC548;, &#xC131;&#xC219;&#xD55C; &#xBBF8; &#xC219; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xCABD;&#xC774; &#xACE0; metabotropic glutamate &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (mGluR) &#xB300;&#xC758; &#xBE44;&#xC728;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74;-&#xC911;&#xC7AC; &#xC7A5;&#xAE30; &#xD55C; App &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70; &#xD6C4; Fmr1(KO) &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xC6B8;&#xC99D; (&#xD68C;&#xC0AC;). &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACE0;&#xAE30; &#xD588;&#xB2E4; &#xC815;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB610;&#xB294; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xBCF5;&#xADC0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; A&beta;(1-42) &#xC804;&#xCCB4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; FXS &#xB0A8;&#xC131; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xBC0F; hippocampal &#xC218;&#xC900; &#xC99D;&#xAC00; &#xB2E4;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xB098;&#xC774;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; A&beta;&#xB294; &#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC555;&#xC218; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC9C4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xAD11;&#xACE0;&#xC5D0; A&beta;&#xB97C; &#xC904;&#xC774;&#xB294; &#xAC10;&#xB3C5; &#xC694;&#xBC95; FXS&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; A&beta; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xAE30;&#xBC18; biomarker&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

A&beta;PP/A&beta; &#xB808;&#xBCA8; Fmr1KO &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC870;&#xC791;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACE0;&#xAE30; X &#xAE68;&#xC9C0;&#xAE30; &#xC26C;&#xC6B4;&#xC758; &#xBC18;&#xC804;.

S&#xED;ndrome X fr&#xE1;gil (FXS) es la forma m&#xE1;s com&#xFA;n de discapacidad intelectual hereditaria y la principal causa gen&#xE9;tica conocida de autismo. Fr&#xE1;gil prote&#xED;na X retraso mental (FMRP), que est&#xE1; ausente o se expresa a niveles sustancialmente reducidos en FXS, se une y controla la traducci&#xF3;n de amiloide &#x3B2; postsin&#xE1;ptica-prote&#xED;na precursora (A&#x3B2;PP) mRNA. La escisi&#xF3;n de A&#x3B2;PP puede producir &#x3B2;-amiloide (Ap), un 39-43 amino&#xE1;cidos del p&#xE9;ptido expresado mal en la enfermedad de Alzheimer (EA) y el s&#xED;ndrome de Down (SD). Ap est&#xE1; sobreexpresado en el cerebro de FMR1 (KO) los ratones, lo que sugiere un papel patog&#xE9;nico en el SXF. Para determinar si la reducci&#xF3;n de la gen&#xE9;tica de A&#x3B2;PP / Ap rescata fenotipos caracter&#xED;sticos FXS, se evalu&#xF3; la crisis audiog&#xE9;nicas (AGS), la ansiedad, la relaci&#xF3;n de las espinas dendr&#xED;ticas maduras contra inmaduros y de los receptores metabotr&#xF3;picos de glutamato (mGluR) mediada por la depresi&#xF3;n a largo plazo (LTD) en el gen FMR1 (KO) los ratones despu&#xE9;s de la eliminaci&#xF3;n del alelo App uno. Todos estos fenotipos fueron parcial o completamente vuelto a la normalidad. Ap plasma (1-42) se redujo significativamente en los hombres plena mutaci&#xF3;n-FXS en comparaci&#xF3;n con controles pareados por edad, mientras que los niveles corticales y del hipocampo se aument&#xF3; un poco, lo que sugiere que Ap es secuestrada en el cerebro. La evoluci&#xF3;n de las terapias dirigidas a la reducci&#xF3;n de Ap en el a&#xF1;o puede ser aplicable a los puertos FXS y Ap puede servir como un biomarcador base de plasma para facilitar el diagn&#xF3;stico de la enfermedad o evaluar la eficacia terap&#xE9;utica.

Reversi&#xF3;n de los fenotipos X fr&#xE1;gil mediante la manipulaci&#xF3;n de A&#x3B2;PP / Ap niveles en ratones Fmr1KO

El cerebro del Astrocito &aacute;cido graso binding protein (Fabp7) se ha demostrado previamente tener una regulaci&oacute;n coordinada diurna de mRNA y prote&iacute;na en el cerebro de rat&oacute;n y un descenso dependiente de la edad en la expresi&oacute;n de la prote&iacute;na dentro de fracciones de synaptoneurosomal. No se conocen los mecanismos que controlan la hora de cambios en la expresi&oacute;n y tr&aacute;fico Fabp7 al proceso perisynaptic. En este estudio, se confirm&oacute; un enriquecimiento de Fabp7 mRNA y prote&iacute;na en el compartimiento perisynaptic astroc&iacute;ticos y observ&oacute; un cambio diurno en la distribuci&oacute;n intracelular de Fabp7 mRNA en capas moleculares del hipocampo. Borrar norte revel&oacute; una oscilaci&oacute;n de-d&iacute;a-dependiente del tiempo coordinada para la cola de poly(A) de Fabp7 mRNA por cerebro murino. Prote&iacute;na de uni&oacute;n a elemento de poliadenilaci&oacute;n citopl&aacute;smico 1 (CPEB1) regula el tr&aacute;fico subcelular y la traducci&oacute;n de mRNAs relacionados con plasticidad sin&aacute;ptica. A continuaci&oacute;n os mostramos ese mRNA Fabp7 coinmunoprecipit&oacute; con CPEB1 de extractos de astrositos primario de rat&oacute;n y sus 3&#39;UTR contiene elementos de poliadenilaci&oacute;n citopl&aacute;smico filogen&eacute;ticamente conservados (CPEs) capaces de regular la traducci&oacute;n de mRNAs reportero durante la maduraci&oacute;n de ovocitos de Xenopus. Dado que Fabp7 expresi&oacute;n se limita a los astrocitos y progenitores neuronales en el cerebro de rat&oacute;n adulto, la secuencia del ciclo sincronizada de mRNA de Fabp7 es un novedoso descubrimiento entre conocidos transcritos regulados por el CPE. Estos resultados implican circadiano, sue&ntilde;o, o control metab&oacute;lico de la mediada por CPEB subcelular trata y localizada traducci&oacute;n de mRNA de Fabp7 en la sinapsis tripartita del cerebro mam&iacute;fero.

Hora del d&iacute;a regula tr&aacute;fico subcelular, localizaci&oacute;n sin&aacute;ptica tripartita y poliadenilaci&oacute;n de la astroc&iacute;ticos fabp7 mRNA.

&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8111;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (Fabp7) &#x5148;&#x524D;&#x5DF2;&#x88AB;&#x8BC1;&#x660E;&#x5177;&#x6709;&#x534F;&#x8C03;&#x663C;&#x591C;&#x8C03;&#x63A7;&#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x9F20;&#x6807;&#x5927;&#x8111;&#x548C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x5E74;&#x9F84;&#x7684;&#x4E0B;&#x964D;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5185; synaptoneurosomal &#x5206;&#x6570;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x3002;&#x63A7;&#x5236;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x548C;&#x8D29;&#x8FD0; Fabp7 perisynaptic &#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x4E00;&#x5929;&#x4E2D;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x5E76;&#x4E0D;&#x4E86;&#x89E3;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x5B9E; Fabp7 mRNA &#x53CA;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE; perisynaptic &#x8F66;&#x53A2;&#xFF0C;&#x6D53;&#x7F29;&#xFF0C;&#x5E76;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x5206;&#x5E03; Fabp7 mRNA &#x5206;&#x5B50;&#x5C42;&#x7684;&#x6D77;&#x9A6C;&#x4E2D;&#x7684;&#x663C;&#x591C;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x5317;&#x90E8;&#x5370;&#x8FF9;&#x900F;&#x9732; Fabp7 mRNA poly(A) &#x5C3E;&#x6574;&#x4E2A;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8111;&#x534F;&#x8C03;&#x7684;&#x5929;&#x4F9D;&#x8D56;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x632F;&#x8361;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28; polyadenylation &#x5143;&#x7D20;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; 1 (CPEB1) &#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D29;&#x8FD0;&#x548C;&#x7A81;&#x89E6;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x76F8;&#x5173; mRNAs &#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5; Fabp7 mRNA coimmunoprecipitated &#x4E0E; CPEB1 &#x4ECE;&#x4E3B;&#x9F20;&#x6807;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x63D0;&#x53D6;&#x7269;&#xFF0C;&#x548C;&#x5176; 3&#39;UTR &#x5305;&#x542B;&#x548C;&#x5B88;&#x6052;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28; polyadenylation &#x5143;&#x7D20; &#xFF08;&#x56FD;&#x5BB6;&#x65B9;&#x6848;&#x8BC4;&#x4EF7;&#xFF09; &#x80FD;&#x591F;&#x8C03;&#x8282;&#x8BB0;&#x8005; mRNAs &#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x3002;&#x9274;&#x4E8E; Fabp7 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4EC5;&#x9650;&#x4E8E;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x6210;&#x5E74;&#x9F20;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#xFF0C;&#x540C;&#x6B65;&#x5FAA;&#x73AF;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684; Fabp7 mRNA &#x662F;&#x5DF2;&#x77E5; CPE &#x8C03;&#x8282;&#x8A8A;&#x672C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x7275;&#x8FDE;&#x663C;&#x591C;&#x8282;&#x5F8B;&#xFF0C;&#x7761;&#x7720;&#xFF0C;&#x548C;/&#x6216;&#x4EE3;&#x8C22;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x5BFC; CPEB &#x8D29;&#x8FD0;&#x548C;&#x4E09;&#x65B9;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x8111;&#x7A81;&#x89E6; Fabp7 mRNA &#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x3002;

&#x4E00;&#x5929;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x4F5C;&#x4E86;&#x89C4;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D29;&#x8FD0;&#x3001; &#x4E09;&#x65B9;&#x7A81;&#x89E6;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x548C; polyadenylation &#x7684;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE; fabp7 mRNA&#x3002;

The astrocyte brain fatty acid binding protein (Fabp7) has previously been shown to have a coordinated diurnal regulation of mRNA and protein throughout mouse brain, and an age-dependent decline in protein expression within synaptoneurosomal fractions. Mechanisms that control time-of-day changes in expression and trafficking Fabp7 to the perisynaptic process are not known. In this study, we confirmed an enrichment of Fabp7 mRNA and protein in the astrocytic perisynaptic compartment, and observed a diurnal change in the intracellular distribution of Fabp7 mRNA in molecular layers of hippocampus. Northern blotting revealed a coordinated time-of-day-dependent oscillation for the Fabp7 mRNA poly(A) tail throughout murine brain. Cytoplasmic polyadenylation element-binding protein 1 (CPEB1) regulates subcellular trafficking and translation of synaptic plasticity-related mRNAs. Here we show that Fabp7 mRNA coimmunoprecipitated with CPEB1 from primary mouse astrocyte extracts, and its 3'UTR contains phylogenetically conserved cytoplasmic polyadenylation elements (CPEs) capable of regulating translation of reporter mRNAs during Xenopus oocyte maturation. Given that Fabp7 expression is confined to astrocytes and neural progenitors in adult mouse brain, the synchronized cycling pattern of Fabp7 mRNA is a novel discovery among known CPE-regulated transcripts. These results implicate circadian, sleep, and/or metabolic control of CPEB-mediated subcellular trafficking and localized translation of Fabp7 mRNA in the tripartite synapse of mammalian brain.

Time of day regulates subcellular trafficking, tripartite synaptic localization, and polyadenylation of the astrocytic fabp7 mRNA.

L&#39;astrocyte cerveau fatty acid binding protein (Fabp7) a d&eacute;montr&eacute; auparavant d&#39;avoir une r&eacute;gulation coordonn&eacute;e diurne d&#39;ARNm et de prot&eacute;ines dans le cerveau de souris et une diminution de la fonction de l&#39;&acirc;ge dans l&#39;expression de la prot&eacute;ine quelques fractions de synaptoneurosomal. Les m&eacute;canismes qui contr&ocirc;lent les changements d&#39;heure expression et Fabp7 traite du processus de p&eacute;risynaptique ne sont pas connus. Dans cette &eacute;tude, nous a confirm&eacute; un enrichissement de Fabp7 ARNm et de prot&eacute;ines dans le compartiment p&eacute;risynaptique astrocytaires et observ&eacute; une &eacute;volution diurne la distribution intracellulaire de l&#39;ARNm de Fabp7 dans les couches mol&eacute;culaires de l&#39;hippocampe. Northern Blot ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; une oscillation d&eacute;pendante du temps de jour coordonn&eacute;e pour la queue poly a Fabp7 mRNA tout cerveau murin. Polyad&eacute;nylation cytoplasmique element-binding protein 1 (CPEB1) r&eacute;gule le trafic subcellulaire et la traduction des ARNm d&#39;ax&eacute;s sur la plasticit&eacute; synaptique. Nous montrons ici que coimmunoprecipitated d&#39;ARNm Fabp7 avec CPEB1 de souris primaire astrocyte extraits et ses 3&#39;UTR contient des &eacute;l&eacute;ments de polyad&eacute;nylation cytoplasmique phylog&eacute;n&eacute;tiquement conserv&eacute;e (CPE) capables de r&eacute;guler la traduction des ARNm de la journaliste au cours de la maturation des ovocytes Xenopus. &Eacute;tant donn&eacute; que l&#39;expression Fabp7 est limit&eacute;e aux astrocytes et des prog&eacute;niteurs neurones dans le cerveau de souris adultes, le mod&egrave;le cyclisme synchronis&eacute; de Fabp7 mRNA est une d&eacute;couverte parmi les transcriptions de CPE r&eacute;glement&eacute;s connues. Ces r&eacute;sultats impliquent circadienne, sommeil et/ou contr&ocirc;le m&eacute;tabolique de la m&eacute;diation CPEB subcellulaire traite et traduction localis&eacute;e de l&#39;ARNm de Fabp7 dans la synapse tripartite du cerveau des mammif&egrave;res.

Heure du jour r&eacute;gule le trafic sous-cellulaire, localisation synaptique tripartite et polyad&eacute;nylation de l&#39;astrocytaires fabp7 ARNm.

Die Gliazelle-Gehirn-Fetts&auml;uren verbindliches Protein (Fabp7) wurde zuvor gezeigt, eine koordinierte tagaktive Verordnung von mRNA und Protein im gesamten Gehirn der Maus, und eine altersbedingt R&uuml;ckgang in Proteinexpression in Bruchteilen von Synaptoneurosomal haben. Mechanismen, die der Tageszeit &Auml;nderungen im Ausdruck und Menschenhandel Fabp7 an den Perisynaptic-Prozess zu steuern sind nicht bekannt. In dieser Studie haben wir best&auml;tigt eine Bereicherung der Fabp7 mRNA und Protein im Fach astrozytische Perisynaptic und beobachtet eine tagaktive &Auml;nderung die intrazellul&auml;re Verteilung der Fabp7 mRNA in molekularen Schichten des Hippocampus. Nordbeflecken ergab eine koordinierte von-Tag-zeitabh&auml;ngige Schwingung f&uuml;r der Fabp7 mRNA-Poly-Schwanz im gesamten murine Gehirn. Zytoplasmatischen Polyadenylierung Element-verbindliches Protein 1 (CPEB1) regelt subzellulare Menschenhandel und &Uuml;bersetzung synaptische Plastizit&auml;t-bezogene mRNAs. Hier zeigen wir, dass Fabp7 mRNA-Coimmunoprecipitated mit CPEB1 prim&auml;re Maustaste Gliazelle Extrakte, und seine 3&#39;UTR phylogenetisch konservierten zytoplasmatischen Polyadenylierung Elemente (CPEs) f&auml;hig zur &Uuml;bersetzung der Reporter mRNAs w&auml;hrend Xenopus Eizelle Reifung Regelung enth&auml;lt. Da Fabp7 Ausdruck auf Astrozyten und neuronalen Vorl&auml;uferzellen im adulten Maus Gehirn begrenzt ist, ist das synchronisierte Radfahren Muster der Fabp7 mRNA eine neuartige Entdeckung unter den bekannten CPE-regulierten Transkripte. Diese Ergebnisse implizieren circadian, Schlaf und/oder Stoffwechseleinstellung des CPEB-vermittelte subzellulare Menschenhandels und lokalisierte &Uuml;bersetzung der Fabp7 mRNA in der dreigliedrigen Synapse des Gehirn von S&auml;ugetieren.

Tageszeit regelt subzellulare Menschenhandel, dreiseitige synaptische Lokalisierungs- und Polyadenylierung von der astrozytische fabp7-mRNA.

L&#39;astrocita cervello fatty acid binding protein (Fabp7) in precedenza ha dimostrato di avere un regolamento diurno coordinato di mRNA e di proteina nel cervello del mouse e un declino et&agrave;-dipendente nell&#39;espressione della proteina all&#39;interno delle frazioni di synaptoneurosomal. Non sono noti i meccanismi che controllano il tempo del giorno cambiamenti nell&#39;espressione e traffico Fabp7 al processo di perisynaptic. In questo studio, abbiamo confermato un arricchimento di Fabp7 mRNA e proteine nel vano astrocitari perisynaptic e osservata una variazione diurna la distribuzione intracellulare del mRNA di Fabp7 in strati molecolari dell&#39;ippocampo. Northern blotting, ha rivelato un&#39;oscillazione coordinata tempo-del-giorno-dipendente per la coda di poli (a) Fabp7 mRNA in tutto cervello murino. Poliadenilazione citoplasmatica element-binding protein 1 (CPEB1) regola traffico sottocellulare e traduzione dei mRNAs correlati a plasticit&agrave; sinaptica. Qui vi mostriamo che mRNA Fabp7 coimmunoprecipitated con CPEB1 da estratti di Astrocita principale del mouse e le sue 3&#39;UTR contiene elementi filogeneticamente conservate poliadenilazione citoplasmatici (CPE) in grado di regolare la traduzione dei mRNAs reporter durante la maturazione degli ovociti di Xenopus. Dato che espressione di FABP7 &egrave; limitata al astrociti e progenitori neurali nel cervello di topo adulto, il modello ciclismo sincronizzato del mRNA di Fabp7 &egrave; una romanzo scoperta tra trascrizioni conosciute CPE-regolato. Questi risultati implicano circadiano, sonno, e/o controllo metabolico del traffico sottocellulare di CPEB-mediata e localizzata traduzione del mRNA di Fabp7 in sinapsi tripartita del cervello dei mammiferi.

Ora del giorno regola sottocellulari traffico, localizzazione sinaptica tripartito e poliadenilazione dell&#39;astrocitari fabp7 mRNA.

&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x8133;&#x8102;&#x80AA;&#x9178;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (Fabp7) &#x4EE5;&#x524D;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x767A;&#x73FE; synaptoneurosomal &#x5206;&#x6570;&#x5185;&#x3067;&#x5354;&#x8ABF;&#x65E5;&#x5468;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306E; mRNA &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CB;&#x767D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8133;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5E74;&#x9F62;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x6E1B;&#x5C11;&#x4E2D;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6642;&#x523B;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7; Fabp7 perisynaptic &#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x5236;&#x5FA1;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6FC3;&#x7E2E; Fabp7 mRNA &#x3068;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; perisynaptic &#x533A;&#x753B;&#x5185;&#x306E;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3001;Fabp7 mRNA &#x5206;&#x5B50;&#x5C64;&#x306E;&#x6D77;&#x99AC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5206;&#x5E03;&#x306E;&#x65E5;&#x5468;&#x5909;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5317;&#x3057;&#x307F;&#x304C;&#x4ED8;&#x304F;&#x8ABF;&#x6574;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x4E00;&#x65E5;&#x4F9D;&#x5B58;&#x578B;&#x767A;&#x632F; Fabp7 mRNA &#x30DD;&#x30EA; (a) &#x30C6;&#x30FC;&#x30EB; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8133;&#x5168;&#x4F53;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x8D77;&#x3053;&#x308B;&#x8981;&#x7D20;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 1 &#xFF08;CPEB1&#xFF09; &#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B; Mrna &#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x305D;&#x306E; CPEB1 &#x3068; Fabp7 mRNA coimmunoprecipitated &#x4E00;&#x6B21;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x62BD;&#x51FA;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x898B;&#x308B;&#x3068;&#x305D;&#x306E; 3&#39;UTR &#x7CFB;&#x7D71;&#x4FDD;&#x5B58;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x8D77;&#x3053;&#x308B;&#x8981;&#x7D20; (Cpe) &#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x8A18;&#x8005; Mrna &#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Fabp7 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6210;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x8133;&#x5185;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8003;&#x3048;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x540C;&#x671F;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; &#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3; Fabp7 mRNA &#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x63A2;&#x7D22; CPE &#x898F;&#x5236;&#x65E2;&#x77E5;&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x6982;&#x65E5;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3001;&#x5DFB;&#x304D;&#x8FBC;&#x3080;&#x7761;&#x7720;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; &#xFF0F; &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x306E; CPEB &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x3068; Fabp7 mRNA &#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x4E09;&#x8005;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3067;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3002;

1 &#x65E5;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x3001;&#x4E09;&#x8005;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5C40;&#x5728;&#x3068;&#x8D77;&#x3053;&#x308B;&#x3001;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E; fabp7 mRNA&#x3002;

&#xB1CC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD1A0; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC0B0;&#xC744; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (Fabp7) &#xBC14;&#xC778;&#xB529; synaptoneurosomal &#xBD84;&#xC218; &#xB0B4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD45C;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB1CC; &#xC5F0;&#xB839;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC870;&#xC815;&#xB41C; &#xC77C;&#xC8FC; &#xADDC;&#xC81C;&#xB97C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DD; &#xBC0F; perisynaptic &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBC00;&#xB9E4; fabp7&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; Fabp7 Mrna&#xC640; astrocytic perisynaptic &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB18D;&#xCD95;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xACE0; &#xD574; &#xB9C8;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xCE35;&#xC5D0; Fabp7 Mrna&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBD84;&#xD3EC;&#xC758; &#xC77C;&#xC8FC; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30;. &#xBD81;&#xBD80; blotting murine &#xB1CC;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; Fabp7 mRNA &#xB9CE;&#xC740; &#xAF2C;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC870;&#xC815;&#xB41C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0;&#xC758; &#xD558;&#xB8E8; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xBC1C;&#xC9C4;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; polyadenylation &#xC694;&#xC18C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 1 (CPEB1) &#xC870;&#xC808; subcellular &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xC640; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xAC00; &#xC18C;&#xC131; &#xAD00;&#xB828; Mrnas&#xC758; &#xBC88;&#xC5ED;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xAE30;&#xBCF8; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC0AC;&#xC774;&#xD1A0; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; cpeb1&#xC640; &#xADF8; Fabp7 mRNA coimmunoprecipitated &#xBCF4;&#xC5EC; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; 3&#39;UTR phylogenetically &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; polyadenylation &#xC694;&#xC18C; (CPEs) Xenopus oocyte &#xC131;&#xC219; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xAE30;&#xC790; Mrnas&#xC758; &#xBC88;&#xC5ED;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Fabp7 &#xC2DD; &#xC774;&#xB2E4; &#xACE0; &#xC131;&#xC778; &#xC950;&#xC758; &#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; progenitors&#xC5D0; &#xAD6D;&#xD55C; &#xB418;&#xB294; Fabp7 Mrna&#xC758; &#xB3D9;&#xAE30;&#xD654; &#xB41C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xB9C1; &#xD328;&#xD134; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; cpe&#xB294; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xB179;&#xCDE8; &#xB85D; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC1C;&#xACAC; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xC5F0;&#xB8E8; circadian, &#xC218; &#xBA74;, &#xB610;&#xB294; subcellular &#xBC00;&#xB9E4; CPEB &#xC911;&#xC7AC;&#xC758; &#xB300;&#xC0AC; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xB450;&#xB1CC;&#xC758; &#xB178;&#xC0AC; &#xC815; &#xB0C5;&#xC5D0; Fabp7 Mrna&#xC758; &#xBC88;&#xC5ED; &#xB41C;.

&#xD558;&#xB8E8;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC870;&#xC808; subcellular &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;, &#xB178;&#xC0AC; &#xC815; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBC0F; polyadenylation&#xB294; astrocytic&#xC758; fabp7 mRNA.

Cara J. Westmark

Department of Pathology and Laboratory Medicine,
Waisman Center for Developmental Disabilities,
Department of Pathology and Laboratory Medicine, Waisman Center for Developmental Disabilities

University of Wisconsin

Preparation of Synaptoneurosomes from Mouse Cortex using a Discontinuous Percoll-Sucrose Density Gradient

Cara J. Westmark

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Pathology and Laboratory Medicine,Waisman Center for Developmental Disabilities,Department of Pathology and Laboratory Medicine, Waisman Center for Developmental Disabilities

University of Wisconsin

Preparation of Synaptoneurosomes from Mouse Cortex using a Discontinuous Percoll-Sucrose Density Gradient

Department of Pathology and Laboratory Medicine,
Waisman Center for Developmental Disabilities,
Department of Pathology and Laboratory Medicine, Waisman Center for Developmental Disabilities