Detection of Toxin Translocation into the Host Cytosol by Surface Plasmon Resonance

AB toxins consist of an enzymatic A subunit and a cell-binding B subunit1.  These toxins are secreted into the extracellular milieu, but they act upon ...

University of Central Florida

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&#x4E3B;&#x673A;&#x7C7B;&#x578B; IA &#x78F7;&#x9178;&#x808C;&#x9187; 3-&#x6FC0;&#x9176;&#x9014;&#x5F84;&#x674E;&#x65AF;&#x7279;&#x83CC;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5185;&#x90E8;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;

The bacterial pathogen Listeria monocytogenes causes food-borne illnesses resulting in gastroenteritis, meningitis, or abortion. Listeria promotes its internalization into some human cells through binding of the bacterial surface protein InlB to the host receptor tyrosine kinase Met. The interaction of InlB with the Met receptor stimulates host signaling pathways that promote cell surface changes driving bacterial uptake. One human signaling protein that plays a critical role in Listeria entry is type IA phosphoinositide 3-kinase (PI 3-kinase). The molecular mechanism by which PI 3-kinase promotes bacterial internalization is not understood. Here we perform an RNA interference (RNAi)-based screen to identify components of the type IA PI 3-kinase pathway that control the entry of Listeria into the human cell line HeLa. The 64 genes targeted encode known upstream regulators or downstream effectors of type IA PI 3-kinase. The results of this screen indicate that at least 9 members of the PI 3-kinase pathway play important roles in Listeria uptake. These 9 human proteins include a Rab5 GTPase, several regulators of Arf or Rac1 GTPases, and the serine/threonine kinases phosphoinositide-dependent kinase 1 (PDK1), mammalian target of rapamycin (mTor), and protein kinase C-Î¶. These findings represent a key first step toward understanding the mechanism by which type IA PI 3-kinase controls bacterial internalization.

Identification of Components of the Host Type IA Phosphoinositide 3-Kinase Pathway That Promote Internalization of Listeria monocytogenes.

La bact&eacute;rie pathog&egrave;ne Listeria monocytogenes provoque des maladies d&#39;origine alimentaire entra&icirc;nant une gastro-ent&eacute;rite, m&eacute;ningite ou l&#39;avortement. Listeria favorise son internalisation dans certaines cellules humaines via la liaison de la prot&eacute;ine de surface bact&eacute;rienne InlB &agrave; la kinase de tyrosine de r&eacute;cepteur h&ocirc;te Met. L&#39;interaction de l&#39;InlB avec le r&eacute;cepteur Met stimule h&ocirc;te signaling pathways favorisant des modifications de la surface cellulaire bact&eacute;rienne absorption au volant. Une prot&eacute;ine de signalisation humaine qui joue un r&ocirc;le critique dans l&#39;entr&eacute;e de Listeria est de type IA phosphoinositide 3-kinase (PI 3-kinase). Le m&eacute;canisme mol&eacute;culaire par lequel PI 3-kinase favorise l&#39;internalisation bact&eacute;rienne n&#39;est pas compris. Ici, nous effectuons une interf&eacute;rence ARN (ARNi)-fonction &eacute;cran pour identifier les composants de la voie 3-kinase de type IA PI qui contr&ocirc;lent l&#39;entr&eacute;e de Listeria dans la lign&eacute;e de cellules humaines HeLa. Les 64 g&egrave;nes cibl&eacute;s Encoder connus des r&eacute;gulateurs en amont ou en aval effecteurs de type IA PI 3-kinase. Les r&eacute;sultats de cet &eacute;cran indiquent qu&#39;au moins neuf membres du sentier de la PI 3-kinase jouent des r&ocirc;les importants dans la captation de Listeria. Ces 9 prot&eacute;ines humaines comprennent une GTPase Rab5, plusieurs r&eacute;gulateurs de Arf ou Rac1 GTPases et la s&eacute;rine/thr&eacute;onine kinases phosphoinositide d&eacute;pendante kinase 1 (PDK1), mammalian target of rapamycin (mTor) et la prot&eacute;ine kinase C-&zeta;. Ces r&eacute;sultats repr&eacute;sentent une premi&egrave;re &eacute;tape cl&eacute;e vers la compr&eacute;hension du m&eacute;canisme de type bact&eacute;rienne internalisation de IA PI 3-kinase contr&ocirc;les.

Identification des composants de l&#39;h&ocirc;te Type IA Phosphoinositide 3-Kinase Pathway que promouvoir l&#39;internalisation de Listeria monocytogenes.

Der bakteriellen Erreger Listeria Monocytogenes verursacht lebensmittelbedingter Erkrankungen Magen-Darm, Meningitis oder Abtreibung. Listerien f&ouml;rdert seine Internalisierung in einige menschlichen Zellen durch Bindung des bakteriellen Oberfl&auml;che Proteins InlB zu den Host-Rezeptor-Tyrosinkinase Met. Die Interaktion des InlB mit dem Met-Rezeptor stimuliert Host Signalisierung Bahnen, die Zelle der Oberfl&auml;chenver&auml;nderung fahren bakterielle Aufnahme zu f&ouml;rdern. Ein menschliche Signalling Protein, die eine kritische in Listeria-Eintrag Rolle ist Typ IA Phosphoinositid-3-Kinase (PI 3-Kinase). Die molekulare Mechanismen, durch welche, die PI 3-Kinase f&ouml;rdert die bakterielle Internalisierung, wird nicht verstanden. Hier f&uuml;hren wir eine RNA-Interferenz (RNAi)-basierten Bildschirm Komponenten des Typs IA PI 3-Kinase Biosyntheseweges zu identifizieren, die das Eindringen von Listeria in die menschliche Zelle Linie HeLa steuern. Die 64 Gene gezielt codieren bekannten upstream Regulatoren oder nachgeschalteten Effektoren des Typs IA PI 3-Kinase. Die Ergebnisse dieses Bildschirms zeigen, dass mindestens neun Mitglieder der PI 3-Kinase-Signalweg in Listeria-Aufnahme eine wichtige Rolle spielen. Diese 9 menschliche Proteine enthalten eine Rab5 GTPase, mehrere Regler der Arf oder Rac1 GTPasen und die Serin/Threonin-Kinasen Phosphoinositid-abh&auml;ngige Kinase 1 (PDK1), angiomiolipomas (mTor) und von Protein-Kinase C-&zeta; S&auml;ugetier-Ziel. Diese Ergebnisse sind einen wichtigen ersten Schritt zu verstehen, den Mechanismus, durch welchen Typ IA PI 3-Kinase Steuerelemente bakterielle Internalisierung.

Identifikation der Bestandteile des der Host Typ IA Phosphoinositide 3-Kinase Pathway, Promote-Internalisierung von Listeria Monocytogenes.

L&#39;agente patogeno batterico Listeria monocytogenes provoca malattie tossinfezioni alimentari con conseguente aborto, meningite o gastroenterite. Listeria promuove l&#39;internalizzazione in alcune cellule umane tramite l&#39;associazione della proteina batterica superficiale InlB per l&#39;host del recettore tirosina chinasi Met. L&#39;interazione del InlB con il recettore Met stimola host signaling pathways che promuovere cambiamenti superficiali cellula batterica assorbimento di guida. Una proteina umana di segnalazione che svolge un ruolo critico nella voce di Listeria &egrave; tipo IA fosfoinositide 3-chinasi (PI 3-chinasi). Il meccanismo molecolare di cui PI 3-chinasi promuove batterica interiorizzazione non &egrave; capito. Qui eseguiamo un&#39;interferenza del RNA (RNAi)-basato su schermo per identificare i componenti del percorso tipo IA PI 3-chinasi che controllano l&#39;ingresso di Listeria nella linea di cellule HeLa. I 64 mirati i geni codificano per noti regolatori a monte o a valle effettori di tipo IA PI 3-chinasi. I risultati di questa schermata indicano che almeno 9 membri del percorso PI 3-chinasi giocano un ruolo importante nell&#39;assorbimento di Listeria. Queste proteine umane 9 includono una GTPasi Rab5, diversi regolatori di Arf o Rac1 GTPases e la chinasi di phosphoinositide-dipendente di serina/treonina chinasi 1 (PDK1), mammalian target del rapamycin (mTor) e la proteina chinasi C-&zeta;. Questi risultati rappresentano un primo passo fondamentale verso la comprensione del meccanismo di interiorizzazione batterica IA PI 3-chinasi controlli il tipo.

Identificazione dei componenti del percorso Host tipo IA fosfoinositide 3-chinasi che Promuovi interiorizzazione di Listeria monocytogenes.

&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x83CC;&#x306F;&#x3001;&#x80C3;&#x8178;&#x708E;&#x3001;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4E2D;&#x7D76;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x98DF;&#x54C1;&#x5A92;&#x4ECB;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2; &#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; Met &#x306B;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; InlB &#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x5185;&#x9762;&#x306B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Met &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068; InlB &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3092;&#x904B;&#x8EE2;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D1;&#x30B9; &#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B; 1 &#x3064;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; IA &#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9; 3-&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;PI 3-&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF09; &#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3069;&#x306E;&#x306B;&#x3088;&#x308B; PI 3-&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x5185;&#x9762;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005; &#x306F; RNA &#x306E;&#x5E72;&#x6E09; &#xFF08;RNAi&#xFF09; &#x3092;&#x5B9F;&#x884C;-&#x3072;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3; hela &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8; IA &#x578B; PI 3-&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x753B;&#x9762;&#x3002;&#x6A19;&#x7684; 64 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x65E2;&#x77E5;&#x4E0A;&#x6D41;&#x898F;&#x5236;&#x5F53;&#x5C40;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x578B; IA PI 3-&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x753B;&#x9762;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;PI 3-&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 9 &#x4EBA;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x304C;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x83CC;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; 9 &#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x306F; Rab5 GTPase&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x5F53;&#x5C40;&#x306E; Arf &#x307E;&#x305F;&#x306F; Rac1 &#x8F38;&#x9001;&#x3068;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;/&#x30B9;&#x30EC;&#x30AA;&#x30CB;&#x30F3; &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; 1 &#xFF08;PDK1)&#x3001;&#x30E9;&#x30D1;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3; &#xFF08;mTor) &#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; C &zeta; &#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; IA PI 3-&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x7D30;&#x83CC;&#x5185;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306B;&#x5411;&#x3051;&#x305F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B69;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x578B; IA &#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9; 3-&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x305D;&#x306E;&#x4FC3;&#x9032;&#x5185;&#x5316;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E; id&#x3002;

&#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; Listeria monocytogenes &#xC704;&#xC7A5;&#xC5FC;, &#xC218; &#xB9C9; &#xC5FC;, &#xB610;&#xB294; &#xB099;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xC2DD;&#xD488;&#xC744; &#xB9E4;&#xAC1C;&#xB85C; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Listeria&#xB294; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xBA54;&#xD2B8;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xD45C;&#xBA74; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Inlb&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC77C;&#xBD80; &#xC778;&#xAC04; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C;&#xC758; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA54;&#xD2B8;&#xB85C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; Inlb&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC790;&#xADF9; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xACBD;&#xB85C; &#xC138;&#xADE0; &#xAE00;&#xADC0;&#xB97C; &#xC6B4;&#xC804; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638;. Listeria &#xD56D;&#xBAA9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC2E0;&#xD638; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC720;&#xD615; IA phosphoinositide 3-kinase (PI 3-kinase)&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. PI&#xB85C; 3-kinase &#xC138;&#xADE0; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC774;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; RNA &#xAC04;&#xC12D; (RNAi) &#xC218;&#xD589;-&#xAE30;&#xBC18;&#xB41C; &#xD654;&#xBA74; &#xC720;&#xD615; IA &#xD30C;&#xC774; 3 &#xB2C8; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC778;&#xAC04; &#xC138;&#xD3EC; &#xC120; &#xD5EC;&#xB7EC; Listeria&#xC758; &#xC9C4;&#xC785;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 64 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xB610;&#xB294; &#xD615;&#xC2DD; IA PI 3-kinase&#xC758; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD654;&#xBA74; &#xACB0;&#xACFC; &#xD30C;&#xC774; 3 &#xB2C8; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 9 &#xD68C;&#xC6D0; Listeria &#xAE00;&#xADC0;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 9 &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xADDC;&#xC81C;&#xC758; Arf &#xB610;&#xB294; Rac1 GTPases &#xACE0; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0;/&#xD2B8;&#xB808;&#xC624;&#xB2CC; kinases phosphoinositide &#xC885;&#xC18D; &#xD0A4; 1 (PDK1), rapamycin (mTor) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; kinase C &zeta;&#xC758; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xB300;&#xC0C1; Rab5 GTPase &#xD3EC;&#xD568;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD615;&#xC2DD; IA &#xD30C;&#xC774; 3 &#xD0A4; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xC138;&#xADE0; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC774;&#xD574; &#xC704;&#xD55C; &#xCCAB; &#xAC78;&#xC74C;&#xC744; &#xD0A4;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC720;&#xD615; IA Phosphoinositide 3 &#xB2C8; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; Listeria monocytogenes &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD2B8; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC2DD;&#xBCC4;.

El pat&oacute;geno bacteriano Listeria monocytogenes causa enfermedades transmitidas por los alimentos resultantes en gastroenteritis, meningitis o aborto. Listeria promueve su internalizaci&oacute;n en algunas c&eacute;lulas humanas a trav&eacute;s de la Uni&oacute;n de la prote&iacute;na bacteriana superficial InlB el host receptor tirosina quinasa Met. La interacci&oacute;n con el receptor de Met de InlB estimula anfitri&oacute;n v&iacute;as que promueven cambios de la superficie de la c&eacute;lula bacteriana absorci&oacute;n de conducci&oacute;n de se&ntilde;alizaci&oacute;n. Una prote&iacute;na humana de se&ntilde;alizaci&oacute;n que desempe&ntilde;a un papel cr&iacute;tico en la entrada de Listeria es tipo IA fosfatidilinositol 3-quinasa (PI). No se entiende el mecanismo molecular por el cual PI 3-quinasa promueve la internalizaci&oacute;n bacteriana. Aqu&iacute; realizamos un ARN de interferencia (ARNi)-pantalla base para identificar los componentes de la v&iacute;a de tipo IA PI 3-quinasa que controlan la entrada de Listeria en la l&iacute;nea de c&eacute;lulas humanas HeLa. Los 64 genes objetivo codifican conocidos reguladores aguas arriba o aguas abajo efectores de tipo IA PI 3-quinasa. Los resultados de esta pantalla indican que al menos 9 miembros de la v&iacute;a de PI 3-quinasa desempe&ntilde;an papeles importantes en la absorci&oacute;n de la Listeria. Estas prote&iacute;nas humanas 9 incluyen una GTPasa Rab5, varios reguladores de Arf o GTPasas de Rac1 y la cinasa de fosfatidilinositol-dependiente de Serina/Treonina Quinasas 1 (PDK1), blanco mam&iacute;fero de rapamicina (mTor) y la prote&iacute;na quinasa C-&zeta;. Estos resultados representan un primer paso clave para entender el mecanismo por el cual tipo de internalizaci&oacute;n bacteriana de IA PI 3-quinasa controles.

Identificaci&oacute;n de los componentes del Host tipo IA fosfatidilinositol 3-quinasa camino promover la internalizaci&oacute;n de Listeria monocytogenes.

Neyda VanBennekom

Department of Molecular Biology and Microbiology

University of Central Florida

Detection of Toxin Translocation into the Host Cytosol by Surface Plasmon Resonance

Neyda VanBennekom

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University of Central Florida

Detection of Toxin Translocation into the Host Cytosol by Surface Plasmon Resonance

Department of Molecular Biology and Microbiology