growth-of-mycobacterium-tuberculosis-biofilms

Growth of <em>Mycobacterium tuberculosis</em> Biofilms

Mycobacterium tuberculosis, the etiologic agent of human tuberculosis, has an extraordinary ability to survive against environmental stresses including ...

University of Pittsburgh

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7ED3;&#x6838;&#x75C5;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x6210;&#x529F;&#x9700;&#x8981; 6-9 &#x4E2A;&#x6708;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x591A;&#x79CD;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x3002;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x652F;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x6574;&#x901A;&#x5173;&#x7ECF;&#x5E38;&#x7ED3;&#x679C;&#x75C5;&#x590D;&#x53D1;&#xFF0C;&#x5927;&#x6982;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x6062;&#x590D;&#x7684;&#x6301;&#x4E45;&#x6027;&#x8010;&#x836F;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x80BA;&#x7ED3;&#x6838;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x6027;&#x8D28;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E9B; persisters &#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x90FD;&#x4E0D;&#x77E5;&#x9053;&#x3002;&#x5728;&#x5176;&#x4ED6;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3001; &#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x8010;&#x53D7;&#x5E38;&#x5E38;&#x662F;&#x5173;&#x8054;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x819C; &mdash; &mdash; &#x6CA1;&#x6709;&#x53D9;&#x8FF0;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x9644;&#x52A0;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE; &mdash; &mdash; &#x4F46;&#x751F;&#x7406;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684; M.&#x7ED3;&#x6838;&#x75C5;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x6709;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x793E;&#x533A;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x5F62;&#x6210;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5177;&#x6709;&#x7279;&#x5B9A;&#x9057;&#x4F20;&#x548C;&#x73AF;&#x5883;&#x8981;&#x6C42;&#x6709;&#x522B;&#x4E8E;&#x6D6E;&#x6E38;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x542B;&#x6709;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x514D;&#x8D39;&#x5206;&#x679D;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x548C;&#x6D77;&#x6E2F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x8010;&#x836F;&#x4EBA;&#x53E3;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x540E;&#x4F9D;&#x7136;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;

&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x80BA;&#x7ED3;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x542B;&#x6709;&#x81EA;&#x7531;&#x5206;&#x679D;&#x9178;&#x548C;&#x7A9D;&#x85CF;&#x8010;&#x836F;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x3002;

Successful treatment of human tuberculosis requires 6-9 months' therapy with multiple antibiotics. Incomplete clearance of tubercle bacilli frequently results in disease relapse, presumably as a result of reactivation of persistent drug-tolerant Mycobacterium tuberculosis cells, although the nature and location of these persisters are not known. In other pathogens, antibiotic tolerance is often associated with the formation of biofilms--organized communities of surface-attached cells--but physiologically and genetically defined M. tuberculosis biofilms have not been described. Here, we show that M. tuberculosis forms biofilms with specific environmental and genetic requirements distinct from those for planktonic growth, which contain an extracellular matrix rich in free mycolic acids, and harbour an important drug-tolerant population that persist despite exposure to high levels of antibiotics.

Growth of Mycobacterium tuberculosis biofilms containing free mycolic acids and harbouring drug-tolerant bacteria.

Le succ&#xE8;s du traitement de la tuberculose humaine n&#xE9;cessite un traitement de 6-9 mois avec des antibiotiques multiples. Jeu incomplet de bacilles tuberculeux se traduit souvent par rechute de la maladie, probablement en raison de la r&#xE9;activation de la persistance de drogues tol&#xE9;rantes cellules de Mycobacterium tuberculosis, bien que la nature et la localisation de ces objets persistants ne sont pas connus. En d&#x26;#39;autres agents pathog&#xE8;nes, de la tol&#xE9;rance aux antibiotiques est souvent associ&#xE9;e &#xE0; la formation de biofilms - des communaut&#xE9;s organis&#xE9;es de la surface de cellules-inscrits - mais physiologiquement et g&#xE9;n&#xE9;tiquement d&#xE9;finies M. biofilms tuberculose n&#x26;#39;ont pas &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;crits. Ici, nous montrons que M. tuberculosis forme des biofilms avec des exigences environnementales sp&#xE9;cifiques et g&#xE9;n&#xE9;tiques distincts de ceux de la croissance planctonique, qui contiennent une matrice extracellulaire riche en acides mycoliques libres, et le port un important drogue tol&#xE9;rante de la population qui persistent malgr&#xE9; l&#x26;#39;exposition &#xE0; des niveaux &#xE9;lev&#xE9;s de antibiotiques.

La croissance des biofilms de Mycobacterium tuberculosis contenant des acides mycoliques libres et h&#xE9;berger des drogues tol&#xE9;rantes bact&#xE9;ries

Erfolgreicher Behandlung der menschlichen Tuberkulose erfordert 6-9 Monaten Therapie mit mehreren Antibiotika. Unvollst&auml;ndige Abfertigung der Tuberkel-Bazillen f&uuml;hrt h&auml;ufig Krankheit Rezidiv, vermutlich als Folge der Reaktivierung der persistent Droge-tolerant Mycobacterium-Tuberkulose-Zellen, obwohl die Art und Lage von diesen Persisters nicht bekannt sind. In anderen Krankheitserregern ist antibiotische Toleranz oft verbunden mit der Bildung von Biofilmen--organisierte Gemeinschaften der Oberfl&auml;che verbundene Zellen-- aber physiologisch und genetisch definierten M. Tuberkulose Biofilme wurden nicht beschrieben. Hier zeigen wir, dass M. Tuberkulose Biofilme mit spezifischen &ouml;kologischen und genetischen Anforderungen von den f&uuml;r Plankton Wachstum, die eine extrazellul&auml;re Matrix, die reich an freien Mycolic S&auml;uren enthalten, und beherbergen eine wichtige Droge-tolerante Bev&ouml;lkerung bildet, die auch bei hoher Belastung von Antibiotika erhalten bleiben.

Wachstum von Mycobacterium Tuberkulose Biofilme enthaltenden kostenlose Mycolic S&auml;uren und harbouring Droge-tolerante Bakterien.

Successo del trattamento della tubercolosi umana richiede la terapia con antibiotici multipli 6-9 mesi. Liquidazione incompleta del tubercolo bacilli spesso si traduce in ricaduta di malattia, presumibilmente a seguito di riattivazione delle cellule di tubercolosi Mycobacterium droga-tollerante persistente, anche se la natura e la posizione di questi persisters non sono noti. In altri agenti patogeni, tolleranza agli antibiotici &egrave; spesso associato con la formazione di biofilm - comunit&agrave; organizzata di cellule attaccate superficie - ma fisiologicamente e geneticamente definito M. tuberculosis biofilm non sono state descritte. Qui, ci mostra che il M. tuberculosis forme biofilm con specifiche ambientali e genetici requisiti distinti da quelli per la crescita di plancton, che contengono una matrice extracellulare ricca di acidi liberi micolico e porto un&#39;importante popolazione di droga-tolleranti che persistono nonostante l&#39;esposizione ad alti livelli di antibiotici.

Crescita di Mycobacterium tuberculosis biofilm contenenti micolico libero acidi e harbouring batteri farmaco-resistenti.

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x7D50;&#x6838;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x6210;&#x529F;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x3067;6-9&#x30F6;&#x6708; &#x26;quot;&#x6CBB;&#x7642;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x81EA;&#x7136;&#x3068;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6C38;&#x7D9A;&#x5316;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x304C;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x3001;&#x6C38;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x85AC;&#x5264;&#x8010;&#x6027;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x518D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x3001;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x518D;&#x767A;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3059;&#x3002;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x793E;&#x4F1A; -   - &#x4ED6;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x8010;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x304C;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x306F;&#x3001;&#x7121;&#x6599;&#x30DF;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178;&#x306E;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30D7;&#x30E9;&#x30F3;&#x30AF;&#x30C8;&#x30F3;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x74B0;&#x5883;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x306E;&#x8981;&#x4EF6;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x6E2F;&#x6E7E;&#x3001;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x3078;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x6301;&#x7D9A;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x85AC;&#x5264;&#x8010;&#x6027;&#x4EBA;&#x53E3;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x3002;

&#x7121;&#x6599;&#x30DF;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178;&#x3068;Harbouring&#x85AC;&#x5264;&#x8010;&#x6027;&#x83CC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x6210;&#x9577;

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xACB0;&#xD575;&#xC758; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C;&#xB85C; 6-9 &#xAC1C;&#xC6D4; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0; &#xC808; bacilli&#xC758; &#xBD88;&#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xD074;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xB7F0;&#xC2A4; &#xC790;&#xC5F0;&#xACFC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; persisters&#xC758; &#xC704;&#xCE58;&#xB294; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; &#xC601;&#xAD6C; &#xB9C8;&#xC57D; &#xD5C8;&#xC6A9; Mycobacterium &#xACB0;&#xD575; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC7AC;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC790;&#xC8FC; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC5D0; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C; &#xB0B4;&#xC131; &#xC885;&#xC885; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB41C; biofilms-&#xD615;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xBD80;&#xCC29; &#xB41C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC21C;&#xC218; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC815;&#xC758; M. &#xACB0;&#xD575; biofilms&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xB41C; &#xC0AC;&#xD68C;&#xB294; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; M. &#xACB0;&#xD575; &#xD615;&#xC131; biofilms &#xD2B9;&#xC815; &#xD658;&#xACBD;&#xACFC; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xC694;&#xAD6C; planktonic &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xBB34;&#xB8CC; mycolic &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC774; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xACE0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC57D;&#xBB3C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xC778;&#xAD6C; &#xD558;&#xBC84;&#xB294; &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Harbouring &#xC57D;&#xBB3C; &#xB0B4;&#xC131; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xBC0F; Mycobacterium &#xACB0;&#xD575; biofilms &#xD3EC;&#xD568; &#xBB34;&#xB8CC; mycolic &#xC0B0;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;.

El &#xE9;xito del tratamiento de la tuberculosis humana requiere un tratamiento de 6-9 meses con m&#xFA;ltiples antibi&#xF3;ticos. Despacho incompleto de bacilos de la tuberculosis con frecuencia se traduce en reca&#xED;da de la enfermedad, presumiblemente como consecuencia de la reactivaci&#xF3;n de la persistencia de la droga-resistentes a las c&#xE9;lulas de Mycobacterium tuberculosis, a pesar de la naturaleza y la ubicaci&#xF3;n de estos persisters no se conocen. En otros pat&#xF3;genos, tolerancia a los antibi&#xF3;ticos a menudo se asocia con la formaci&#xF3;n de biopel&#xED;culas - las comunidades organizadas de la superficie de las c&#xE9;lulas adjuntas - pero fisiol&#xF3;gica y gen&#xE9;ticamente definidos biopel&#xED;culas M. tuberculosis no se han descrito. En este sentido, muestran que M. tuberculosis forma biofilms con determinados requisitos ambientales y gen&#xE9;ticos distintos de los de crecimiento planct&#xF3;nico, que contienen una matriz extracelular rica en &#xE1;cidos mic&#xF3;licos libres, y el puerto de un f&#xE1;rmaco de tolerancia a la poblaci&#xF3;n que persiste a pesar de la exposici&#xF3;n a altos niveles de antibi&#xF3;ticos.

El crecimiento de Mycobacterium tuberculosis biofilms que contienen &#xE1;cidos mic&#xF3;licos libres y tolerantes con las drogas Albergar bacterias

&#x5206;&#x679D;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#xFF0C;&#x50CF;&#x5176;&#x4ED6;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#xFF0C;&#x81EA;&#x53D1;&#x5730;&#x5F62;&#x6210;&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8010;&#x836F;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x957F;&#x5927;&#x4F53;&#x5916;&#x65E0;&#x6D17;&#x6DA4;&#x5242;&#x7684;&#x6DB2;&#x4F53;&#x4ECB;&#x8D28;&#x4E2D;&#x3002;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x80BA;&#x7ED3;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x5F62;&#x6210;&#x901A;&#x8FC7;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A0B;&#x63A7;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x5728;&#x5927;&#x91CF;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x80DE;&#x5916;&#x514D;&#x8D39;&#x5206;&#x679D;&#x9178; (FM)&#xFF0C;&#x867D;&#x7136; FM &#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x673A;&#x7406;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x803B;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684; FM &#x751F;&#x4EA7;&#x901A;&#x8FC7;&#x9176;&#x91CA;&#x653E;&#x4ECE;&#x884D;&#x751F;&#x54C1; mycolyl &#x4E00;&#x672C;&#x3002;Fm &#x524D;&#x4F53;&#x4E4B;&#x4E00;&#x662F;&#x65B0;&#x5408;&#x6210;&#x6D77;&#x85FB;&#x7CD6; dimycolate (TDM) &#x65B0;&#x578B;&#x7684; TDM &#x7279;&#x5B9A;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x916F;&#x9176;&#xFF0C;Msmeg_1529 &#x7684;&#x5207;&#x5272;&#x3002;FM &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x6C34;&#x5E73;&#x964D;&#x4F4E;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FDF;&#x7F13;&#x7684; Msmeg_1529 &#x5BFC;&#x81F4;&#x65E0;&#x6CD5;&#x63A2;&#x6D4B;&#x7684;&#x6C34;&#x89E3;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;TDM &#x7684;&#x9176;&#x6C34;&#x89E3;&#x4ECD;&#x7136;&#x5728;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x5B58;&#x5728;&#x8FD9;&#x79CD;&#x75C5;&#x83CC;&#x5728; TDM &#x975E;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x916F;&#x9176;&#x5B88;&#x6052;&#x3002;&#x603B;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x5728;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x751F;&#x957F;&#x671F;&#x95F4;&#x63D0;&#x4F9B;&#x514D;&#x8D39;&#x5206;&#x679D;&#x9178;&#x4ECE;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4FE1;&#x5C01; mycolates &#x9176;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

&#x6D77;&#x85FB;&#x7CD6; dimycolate &#x9176;&#x6C34;&#x89E3;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x751F;&#x957F;&#x671F;&#x95F4;&#x91CA;&#x653E;&#x81EA;&#x7531;&#x5206;&#x679D;&#x9178;&#x3002;

Mycobacterial species, like other microbes, spontaneously form multicellular drug-tolerant biofilms when grown in vitro in detergent-free liquid media. The structure of Mycobacterium tuberculosis biofilms is formed through genetically programmed pathways and is built upon a large abundance of novel extracellular free mycolic acids (FM), although the mechanism of FM synthesis remained unclear. Here we show that the FM in Mycobacterium smegmatis biofilms is produced through the enzymatic release from constitutively present mycolyl derivatives. One of the precursors for FM is newly synthesized trehalose dimycolate (TDM), which is cleaved by a novel TDM-specific serine esterase, Msmeg_1529. Disruption of Msmeg_1529 leads to undetectable hydrolytic activity, reduced levels of FM in the mutant, and retarded biofilm growth. Furthermore, enzymatic hydrolysis of TDM remains conserved in M. tuberculosis, suggesting the presence of a TDM-specific esterase in this pathogen. Overall, this study provides the first evidence for an enzymatic release of free mycolic acids from cell envelope mycolates during mycobacterial growth.

Enzymatic hydrolysis of trehalose dimycolate releases free mycolic acids during mycobacterial growth in biofilms.

Esp&#xE8;ces de mycobact&#xE9;ries, comme d&#x26;#39;autres microbes, forment spontan&#xE9;ment des multicellulaires drogue tol&#xE9;rantes biofilms lorsqu&#x26;#39;il est cultiv&#xE9; in vitro dans des milieux liquides sans d&#xE9;tergent. La structure de Mycobacterium tuberculosis biofilms est form&#xE9; par des voies g&#xE9;n&#xE9;tiquement programm&#xE9;s et est construit sur une grande abondance de nouveaux extracellulaires acides mycoliques libres (FM), bien que le m&#xE9;canisme de la synth&#xE8;se FM demeuraient floues. Ici, nous montrons que la FM dans Mycobacterium smegmatis biofilms est produit par la lib&#xE9;ration enzymatique &#xE0; partir constitutivement pr&#xE9;sentes d&#xE9;riv&#xE9;s mycolyl. L&#x26;#39;un des pr&#xE9;curseurs pour la bande FM est nouvellement synth&#xE9;tis&#xE9; tr&#xE9;halose dimycolate (TDM), qui est cliv&#xE9;e par une est&#xE9;rase nouvelle s&#xE9;rine TDM-sp&#xE9;cifique, Msmeg_1529. Perturbation des Msmeg_1529 conduit &#xE0; une activit&#xE9; hydrolytique ind&#xE9;tectable, r&#xE9;duit les niveaux de FM dans la croissance du biofilm mutant, et retard&#xE9;. En outre, l&#x26;#39;hydrolyse enzymatique de la TDM reste conserv&#xE9;e dans M. tuberculosis, sugg&#xE9;rant la pr&#xE9;sence d&#x26;#39;une est&#xE9;rase TDM-sp&#xE9;cifique de cet agent pathog&#xE8;ne. Dans l&#x26;#39;ensemble, cette &#xE9;tude fournit la premi&#xE8;re preuve d&#x26;#39;une lib&#xE9;ration enzymatique des acides mycoliques libres de mycolates enveloppe cellulaire au cours de la croissance des mycobact&#xE9;ries.

L&#x26;#39;hydrolyse enzymatique de tr&#xE9;halose dimycolate lib&#xE8;re des acides mycoliques libres pendant la croissance mycobact&#xE9;rienne dans les biofilms

Mykobakterieller Arten, wie andere Mikroben bilden spontan vielzelligen Droge-tolerante Biofilme beim in-vitro in fl&uuml;ssigen Waschmittel-freie Medien gewachsen. Die Struktur der Mycobacterium-Tuberkulose-Biofilmen entsteht durch genetisch programmierten Wege und baut auf eine gro&szlig;e F&uuml;lle von Roman extrazellul&auml;re Mycolic freie S&auml;uren (FM), obwohl der Mechanismus der FM-Synthese ungekl&auml;rt blieb. Hier zeigen wir, dass die FM in Mycobacterium Smegmatis Biofilmen durch die enzymatische Freisetzung von konstitutiv vorhanden Mycolyl Derivate hergestellt wird. Einer der Vorl&auml;ufer f&uuml;r FM ist eben synthetisierten Trehalose Dimycolate (TDM), die durch eine neuartige TDM-spezifische-Serin-Esterase, Msmeg_1529 zerspaltet wird. Unterbrechung der Msmeg_1529 f&uuml;hrt zu nicht nachweisbar hydrolytische Aktivit&auml;t, verringert Konzentrationen von FM in den Mutanten und Biofilm Wachstum zur&uuml;ckgeblieben. Dar&uuml;ber hinaus bleibt die Enzymatische Hydrolyse von TDM konservierte in M. Tuberkulose, was darauf hindeutet das Vorhandensein eines TDM-spezifische Esterase in dieser Erreger. Insgesamt bietet dieser Studie die erste Beweise f&uuml;r eine enzymatische Freisetzung von freien Mycolic S&auml;uren aus Zelle Umschlag Mycolates w&auml;hrend mykobakterieller Wachstum.

Enzymatische Hydrolyse von Trehalose Dimycolate frei frei Mycolic S&auml;uren w&auml;hrend mykobakterieller Wachstums in Biofilmen.

Specie micobatteriche, come altri microbi, spontaneamente formano pluricellulari biofilm droga-tolleranti Quando coltivate in vitro in media senza detersivo liquido. La struttura del Mycobacterium tuberculosis biofilm &egrave; formata attraverso percorsi geneticamente programmati e si basa su una grande abbondanza di acidi romanzo micolico libero extracellulare (FM), anche se il meccanismo di sintesi FM &egrave; rimasto poco chiaro. Qui vi mostriamo che la FM in Mycobacterium smegmatis biofilm &egrave; prodotto attraverso il rilascio enzimatico da costitutivamente presenti derivati mycolyl. Uno dei precursori per FM &egrave; recentemente sintetizzati trealosio treholasa (TDM), che viene scisso da un romanzo esterasi di serina TDM-specifico, Msmeg_1529. Interruzione del Msmeg_1529 conduce all&#39;attivit&agrave; idrolitica inosservabile, ridotti livelli di FM in mutante e ritardata crescita di biofilm. Inoltre, idrolisi enzimatica di TDM rimane conservata in M. tuberculosis, suggerendo la presenza di un esterasi specifiche TDM in questo agente patogeno. Nel complesso, questo studio fornisce la prima evidenza per un rilascio enzimatica degli acidi liberi micolico dalla cella busta mycolates durante la crescita micobatterica.

Idrolisi enzimatica di trealosio treholasa rilascia acidi liberi micolico durante la crescita micobatterica in biofilm.

&#x754C;&#x9762;&#x6D3B;&#x6027;&#x5264;&#x3092;&#x542B;&#x307E;&#x306A;&#x3044;&#x6DB2;&#x4F53;&#x57F9;&#x5730;&#x3067;in vitro&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6642;&#x306B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x7A2E;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306B;&#x591A;&#x85AC;&#x5264;&#x8010;&#x6027;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; FM&#x30B7;&#x30F3;&#x30BB;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x306B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x5916;&#x306E;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30DF;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178;&#xFF08;FM&#xFF09;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x4E0A;&#x306B;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x30B9;&#x30E1;&#x30B0;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x4E2D;&#x306E;FM&#x304C;&#x6052;&#x5E38;&#x7684;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;mycolyl&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x7D4C;&#x3066;&#x88FD;&#x9020;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; FM&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x306E;1&#x3064;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x304F;&#x65AC;&#x65B0;&#x306A;TDM&#x7279;&#x6709;&#x306E;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;Msmeg_1529&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5207;&#x65AD;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30C8;&#x200B;&#x200B;&#x30EC;&#x30CF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B9;&#x30B8;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#xFF08;TDM&#xFF09;&#x3092;&#x3001;&#x5408;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x691C;&#x51FA;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;Msmeg_1529&#x30EA;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x4E2D;&#x65AD;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9045;&#x5EF6;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306B;FM&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;TDM&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;TDM&#x7279;&#x6709;&#x306E;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5168;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x904E;&#x7A0B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;mycolates&#x304B;&#x3089;&#x7121;&#x6599;&#x3067;&#x30DF;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C8;&#x30EC;&#x30CF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B9;&#x30B8;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x4E2D;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x7121;&#x6599;&#x30DF;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178;&#x3092;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;

&#xB2E4;&#xB978; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xAC19;&#xC740; mycobacterial &#xC885; &#xC800;&#xC808;&#xB85C; &#xB2E4;&#xC138;&#xD3EC; &#xC57D;&#xBB3C; &#xB0B4;&#xC131; biofilms &#xC561;&#xCCB4; &#xC138;&#xC81C; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCB4; &#xC678; &#xC131;&#xC7A5; &#xB420; &#xB54C; &#xD615;&#xC131;. Mycobacterium &#xACB0;&#xD575; biofilms &#xAD6C;&#xC870; &#xC720;&#xC804;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xB41C; &#xACBD;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; FM &#xD569;&#xC131; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC18C;&#xC124; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xBB34;&#xB8CC; mycolic &#xC0B0; (FM)&#xC758; &#xD070; &#xD48D;&#xC694;&#xC5D0; &#xAC74;&#xC124; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Mycobacterium smegmatis biofilms&#xC5D0; FM constitutively &#xD604;&#xC7AC; mycolyl &#xD30C;&#xC0DD; &#xC0C1;&#xD488;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6A8;&#xC18C; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. FM&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xAD6C;&#xC790; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xAC00; &#xC18C;&#xC124; TDM &#xAD00;&#xB828; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; esterase, msmeg_1529&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xD788; &#xC0C8;&#xB85C; &#xD569;&#xC131; &#xB41C; &#xD2B8; &#xB808; &#xD560; &#xB85C;&#xC2A4; dimycolate (TDM). Msmeg_1529 &#xB9AC;&#xB4DC; &#xD0D0;&#xC9C0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC911;&#xB2E8; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;, FM &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC904;&#xC5B4;&#xB4E4;&#xACE0; biofilm &#xC131;&#xC7A5; &#xC9C0;&#xC9C4; &#xC544;. &#xB610;&#xD55C;, TDM&#xC758; &#xD6A8;&#xC18C; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xC720;&#xC9C0; TDM &#xBCC4; esterase&#xC774; &#xBCD1;&#xC6D0;&#xC774; &#xCCB4;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; M. &#xACB0;&#xD575;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC874; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;,&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; mycobacterial &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC140; &#xBD09;&#xD22C; mycolates&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB34;&#xB8CC; mycolic &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC758; &#xD6A8;&#xC18C; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD2B8; &#xB808; &#xD560; &#xB85C;&#xC2A4; dimycolate&#xC758; &#xD6A8;&#xC18C; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; biofilms mycobacterial &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBB34;&#xB8CC; mycolic &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC744; &#xD574;&#xC81C;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Especies de micobacterias, al igual que otros microbios, forman espont&#xE1;neamente multicelulares tolerantes a las drogas biopel&#xED;culas cuando se cultivan in vitro en un medio l&#xED;quido sin detergente. La estructura de Mycobacterium tuberculosis biopel&#xED;culas se forman a trav&#xE9;s de las v&#xED;as gen&#xE9;ticamente programados y se basa en una gran abundancia de nuevos &#xE1;cidos mic&#xF3;licos libres extracelulares (FM), aunque el mecanismo de la s&#xED;ntesis FM sigue sin estar claro. Aqu&#xED; nos muestran que la FM en Mycobacterium smegmatis biopel&#xED;culas se produce a trav&#xE9;s de la liberaci&#xF3;n enzim&#xE1;tica de derivados mycolyl constitutivamente presentes. Uno de los precursores de FM est&#xE1; reci&#xE9;n sintetizado dimicolato de trehalosa (TDM), que es escindido por una esterasa serina novela TDM-espec&#xED;fico, Msmeg_1529. La interrupci&#xF3;n de Msmeg_1529 conduce a la actividad hidrol&#xED;tica indetectable, la reducci&#xF3;n de los niveles de la FM en la formaci&#xF3;n de biopel&#xED;culas mutante, y retardado. Adem&#xE1;s, la hidr&#xF3;lisis enzim&#xE1;tica de TDM permanece conservado en M. tuberculosis, lo que sugiere la presencia de una esterasa TDM-espec&#xED;fica en este pat&#xF3;geno. En general, este estudio proporciona la primera evidencia de una liberaci&#xF3;n enzim&#xE1;tica de los &#xE1;cidos mic&#xF3;licos de micolatos envoltura celular durante el crecimiento de micobacterias.

Hidr&#xF3;lisis enzim&#xE1;tica de la trehalosa dimicolato libera &#xE1;cidos mic&#xF3;licos Gratis Durante el crecimiento de micobacterias en los biofilms

&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4FE1;&#x5C01;&#x662F;&#x6BD2;&#x529B;&#x548C;&#x8010;&#x836F;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x82E5;&#x5E72;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x662F;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1;&#x8102;&#x7C7B;&#x3001; &#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5206;&#x679D;&#x9178;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x3002;&#x7ED3;&#x6784;&#x4FEE;&#x6539; alpha &#x5206;&#x679D;&#x9178;&#x7684;&#x73AF;&#x4E19;&#x70F7;&#x73AF;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x50AC;&#x5316;&#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#xFF0C;PcaA&#xFF0C;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x81F4;&#x547D;&#x3001; &#x6301;&#x4E45;&#x6027;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#x548C;&#x7EF3;&#x578B;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x7684;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7684; cyclopropanated &#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1; mycolates &#x5728;&#x75C5;&#x6E90;&#x5B58;&#x5728;&#x5E94;&#x53D8;&#x803B;&#x57A2;&#x5206;&#x679D;&#x548C;&#x6807;&#x8BC6;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801; PcaA &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684; MSMEG_1351&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;alpha &#x5206;&#x679D;&#x9178;&#x73AF;&#x4E19;&#x70F7;&#x5316;&#x662F;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5728;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x6210;&#x957F;&#x5728; 25 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x3002;Cyclopropanating &#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x6E29;&#x5EA6;&#x8C03;&#x5236;&#x7684;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x5E7B;&#x89D2;&#x65CB;&#x8F6C;&#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x5206;&#x6790;&#x6574;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x786E;&#x5B9A;&#x3002;&#x5728;&#x5E76;&#x884C;&#x3001; &#x5B9A;&#x91CF;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55; PCR &#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E; MSMEG_1351 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x5728; 25 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x8C03;&#x76F8;&#x6BD4; 37 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x3002;MSMEG_1351 &#x6572;&#x5E94;&#x53D8;&#x7684;&#x5206;&#x679D;&#xFF0C;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x5C55;&#x51FA;&#x7684; alpha mycolates &#x73AF;&#x4E19;&#x70F7;&#x5316;&#x4E0A;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;MSMEG_1351 &#x6572;&#x7A81;&#x53D8;&#x548C;&#x5361;&#x4ECB;&#x82D7; DeltapcaA &#x5E94;&#x53D8;&#xFF0C;&#x4EA4;&#x53C9;&#x4E92;&#x8865;&#x5C06;&#x6210;&#x7ACB;&#x7684; PcaA &#x548C; MSMEG_1351 &#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7B49;&#x540C;&#x3002;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; MSMEG_1351 &#x6062;&#x590D;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5206;&#x679D;&#x9178;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x548C;&#x5361;&#x4ECB;&#x82D7;&#x7EF3;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5728;&#x75C5;&#x6E90;&#x5206;&#x679D;&#x5206;&#x679D;&#x9178;&#x73AF;&#x4E19;&#x70F7;&#x5316;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x610F;&#x4E49;&#x4ECD;&#x7136;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5B83;&#x53EF;&#x80FD;&#x8868;&#x793A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x7EC4;&#x6210;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5E94;&#x4ED8;&#x73AF;&#x5883;&#x56E0;&#x7D20;&#x7684;&#x9002;&#x5E94;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x5206;&#x679D;&#x9178;&#x73AF;&#x4E19;&#x70F7;&#x5316;&#x8150;&#x751F;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#xFF1A; &#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x803B; 1351&#x5E74;&#x57FA;&#x56E0; (MSMEG_1351) &#x5728;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;-&#x73AF;&#x4E19;&#x70F7;&#x5316;&#x7684; alpha mycolates &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The cell envelope is a crucial determinant of virulence and drug resistance in Mycobacterium tuberculosis. Several features of pathogenesis and immunomodulation of host responses are attributable to the structural diversity in cell wall lipids, particularly in the mycolic acids. Structural modification of the alpha-mycolic acid by introduction of cyclopropane rings as catalyzed by the methyltransferase, PcaA, is essential for a lethal, persistent infection and the cording phenotype in M. tuberculosis. Here, we demonstrate the presence of cyclopropanated cell wall mycolates in the nonpathogenic strain Mycobacterium smegmatis and identify MSMEG_1351 as a gene encoding a PcaA homologue. Interestingly, alpha-mycolic acid cyclopropanation was inducible in cultures grown at 25 degrees C. The growth temperature modulation of the cyclopropanating activity was determined by high resolution magic angle spinning NMR analyses on whole cells. In parallel, quantitative reverse transcription-PCR analysis showed that MSMEG_1351 gene expression is up-regulated at 25 degrees C compared with 37 degrees C. An MSMEG_1351 knock-out strain of M. smegmatis, generated by recombineering, exhibited a deficiency in cyclopropanation of alpha-mycolates. The functional equivalence of PcaA and MSMEG_1351 was established by cross-complementation in the MSMEG_1351 knock-out mutant and also in a DeltapcaA strain of Mycobacterium bovis BCG. Overexpression of MSMEG_1351 restored the wild-type mycolic acid profile and the cording phenotype in BCG. Although the biological significance of mycolic acid cyclopropanation in nonpathogenic mycobacteria remains unclear, it likely represents a mechanism of adaptation of cell wall structure and composition to cope with environmental factors.

Temperature-dependent regulation of mycolic acid cyclopropanation in saprophytic mycobacteria: role of the Mycobacterium smegmatis 1351 gene (MSMEG_1351) in CIS-cyclopropanation of alpha-mycolates.

L&#x26;#39;enveloppe de cellules est un facteur d&#xE9;terminant de la virulence et la r&#xE9;sistance aux m&#xE9;dicaments chez Mycobacterium tuberculosis. Plusieurs caract&#xE9;ristiques de la pathogen&#xE8;se et l&#x26;#39;immunomodulation de r&#xE9;ponses de l&#x26;#39;h&#xF4;te sont attribuables &#xE0; la diversit&#xE9; structurelle dans les lipides de la paroi cellulaire, en particulier dans les acides mycoliques. Modification structurelle de l&#x26;#39;acide alpha-mycoliques par l&#x26;#39;introduction d&#x26;#39;anneaux cyclopropane que catalys&#xE9;e par la m&#xE9;thyltransf&#xE9;rase, APSC, est essentiel pour une mortelle, l&#x26;#39;infection persistante et le ph&#xE9;notype cordonnet de M. tuberculosis. Ici, nous d&#xE9;montrons la pr&#xE9;sence de la paroi cellulaire cyclopropane mycolates dans le smegmatis non pathog&#xE8;ne souche de Mycobacterium et d&#x26;#39;identifier les MSMEG_1351 comme un g&#xE8;ne codant pour un homologue APSC. Fait int&#xE9;ressant, cyclopropanation acide alpha-mycoliques est inductible dans les cultures &#xE0; 25 degr&#xE9;s C. La modulation de la temp&#xE9;rature de croissance de l&#x26;#39;activit&#xE9; cyclopropanating a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;termin&#xE9;e par l&#x26;#39;angle de r&#xE9;solution haute magie filer analyses RMN sur des cellules enti&#xE8;res. En parall&#xE8;le, quantitative RT-PCR analyse montre que l&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne MSMEG_1351 est r&#xE9;gul&#xE9;e &#xE0; la hausse &#xE0; 25 &#xB0; C par rapport &#xE0; 37 degr&#xE9;s C. Un MSMEG_1351 knock-out souche de M. smegmatis, g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; par recombineering, pr&#xE9;sentent une d&#xE9;ficience dans la cyclopropanation d&#x26;#39;alpha les mycolates. L&#x26;#39;&#xE9;quivalence fonctionnelle de APSC et MSMEG_1351 a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tabli par transversale dans la compl&#xE9;mentation. MSMEG_1351 knock-out mutant et &#xE9;galement dans une souche DeltapcaA de Mycobacterium bovis BCG La surexpression de MSMEG_1351 restaur&#xE9; le profil de type sauvage mycoliques l&#x26;#39;acide et le ph&#xE9;notype cordonnet dans le BCG. Bien que la signification biologique de cyclopropanation des acides mycoliques en non pathog&#xE8;ne des mycobact&#xE9;ries ne sait toujours pas, il repr&#xE9;sente probablement un m&#xE9;canisme d&#x26;#39;adaptation de la structure et la composition des parois cellulaires pour faire face &#xE0; des facteurs environnementaux.

D&#xE9;pendant de la temp&#xE9;rature de r&#xE8;glement Cyclopropanation acides mycoliques chez les mycobact&#xE9;ries saprophytes: R&#xF4;le de l&#x26;#39;infection &#xE0; Mycobacterium smegmatis 1351 Gene (MSMEG_1351) dans la CEI-cyclopropanation d&#x26;#39;Alpha-mycolates

Die Zellh&uuml;llen ist ein entscheidender Faktor f&uuml;r Virulenz und Resistenzen in Mycobacterium Tuberculosis. Verschiedene Funktionen der Pathogenese und Immunmodulation von Host-Antworten sind auf die Strukturvielfalt in Zellwand Lipide, besonders in den Mycolic S&auml;uren zur&uuml;ckzuf&uuml;hren. Strukturelle &Auml;nderung der Alpha-Mycolic S&auml;ure durch Einf&uuml;hrung von Cyclopropan Ringe wie durch die Methyltransferase, PcaA, katalysiert ist essentiell f&uuml;r eine t&ouml;dliche, persistente Infektion und der Aufzeichnung Ph&auml;notyp in M. Tuberkulose. Hier zeigen wir die Pr&auml;senz der Cyclopropanated Zellwand Mycolates in der nonpathogenic Stamm von Mycobacterium Smegmatis und MSMEG_1351 als Codierung eine PcaA Homolog gen zu identifizieren. Interessanterweise war Alpha-Mycolic S&auml;ure Cyclopropanation durch Induktion in Kulturen angebaut, bei 25 Grad C. Die Wachstum-Temperatur-Modulation der Cyclopropanating-Aktivit&auml;t wurde durch hochaufl&ouml;sende Magic-Angle-Spinnerei NMR-Analysen auf ganzer Zellen bestimmt. In parallele, quantitative reverse Transkription-PCR-Analyse zeigte verglichen, dass MSMEG_1351 Genexpression bei 25 Grad C oben-geregelt ist mit 37 &deg; C. Ein MSMEG_1351 Knock-out-Stamm von M. Smegmatis, generiert durch Recombineering, ausgestellt einen Mangel an Cyclopropanation des Alpha-Mycolates. Die funktionale &Auml;quivalenz von PcaA und MSMEG_1351 von Kreuz-Erg&auml;nzung in der MSMEG_1351-Knock-Out-Mutant und auch in einem DeltapcaA Stamm von Mycobacterium Bovis BCG gegr&uuml;ndet. Eine &Uuml;berexpression von MSMEG_1351 wieder hergestellt, das Wildtyp Mycolic-S&auml;ure-Profil und die Aufzeichnung Ph&auml;notyp in BCG. Obwohl die biologische Bedeutung des Mycolic sauren Cyclopropanation in nonpathogenic Mykobakterien unklar bleibt, stellt es wahrscheinlich einen Mechanismus der Anpassung der Zellwand Struktur und Zusammensetzung zu Umweltfaktoren bew&auml;ltigen.

Temperaturabh&auml;ngige Regelung der Mycolic S&auml;ure Cyclopropanation in saprophytischen Mykobakterien: Rolle des Mycobacterium Smegmatis 1351 Gens (MSMEG_1351) in CIS-Cyclopropanation des Alpha-Mycolates.

La busta delle cellule &egrave; un fondamentale determinante di virulenza e di resistenza ai farmaci in Mycobacterium tuberculosis. Diverse caratteristiche della patogenesi e immunomodulazione di risposte host sono attribuibili alla diversit&agrave; strutturale nei lipidi della parete cellulare, particolarmente in acidi micolico. Modificazione strutturale dell&#39;acido micolico alfa dall&#39;introduzione di anelli ciclopropano come catalizzata da metiltransferasi, PcaA, &egrave; essenziale per un&#39;infezione letale, persistente e il fenotipo cording in M. tuberculosis. Qui, ci dimostrano la presenza di cyclopropanated parete delle cellule mycolates nella parte colare Mycobacterium smegmatis e MSMEG_1351 per identificare come un gene che codifica per un omologo PcaA. &Egrave; interessante notare che, cyclopropanation acido micolico alfa era inducibile in colture coltivate a 25 gradi C. La modulazione della temperatura di crescita dell&#39;attivit&agrave; cyclopropanating &egrave; stata determinata dall&#39;angolo magico ad alta risoluzione, analisi NMR su cellule intere di filatura. In analisi quantitativa, parallela trascrizione inversa-PCR ha mostrato che l&#39;espressione di gene MSMEG_1351 &egrave; regolato fino a 25 gradi C rispetto con 37 gradi C. Un ceppo di knock-out MSMEG_1351 di M. smegmatis, generato da recombineering, espose un deficit di cyclopropanation di alfa-mycolates. L&#39;equivalenza funzionale di PcaA e MSMEG_1351 &egrave; stata fondata da Croce-complementazione del mutante knock-out MSMEG_1351 e anche un ceppo DeltapcaA di Mycobacterium bovis BCG. Sovraespressione di MSMEG_1351 ripristinato il profilo acido micolico wild-type e il fenotipo cording in BCG. Anche se il significato biologico di cyclopropanation acido micolico in parte micobatteri rimane poco chiaro, probabilmente rappresenta un meccanismo di adattamento della struttura della parete cellulare e la composizione per far fronte a fattori ambientali.

Regolazione temperatura-dipendente di cyclopropanation acido micolico in micobatteri saprofiti: ruolo del gene Mycobacterium smegmatis 1351 (MSMEG_1351) in CIS-cyclopropanation di alfa-mycolates.

&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x85AC;&#x5264;&#x8010;&#x6027;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x30DF;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178;&#x3067;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x306E;&#x8102;&#x8CEA;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;PcaA&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x89E6;&#x5A92;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30F3;&#x74B0;&#x306E;&#x5C0E;&#x5165;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3B1;-&#x30DF;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x306A;&#x5909;&#x66F4;&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x306A;&#x3001;&#x6301;&#x7D9A;&#x611F;&#x67D3;&#x3068;&#x7D50;&#x6838;&#x306E;cording&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;cyclopropanated&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x682A;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#xB7;&#x30B9;&#x30E1;&#x30B0;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;&#x3067;mycolates&#x793A;&#x3057;&#x3001;PcaA&#x76F8;&#x540C;&#x4F53;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;MSMEG_1351&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x3B1;-&#x30DF;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30F3;&#x306F;cyclopropanating&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x6E29;&#x5EA6;&#x5909;&#x8ABF;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5168;&#x4F53;&#x3067;NMR&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x56DE;&#x8EE2;&#x306E;&#x9AD8;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x30DE;&#x30B8;&#x30C3;&#x30AF;&#x89D2;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;25&#x2103;&#x3067;&#x6210;&#x9577;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x57F9;&#x990A;&#x7269;&#x4E2D;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30D1;&#x30E9;&#x30EC;&#x30EB;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;-PCR&#x89E3;&#x6790;&#x3067;&#x306F;C 37&#x2103;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D3;&#x30CB;&#x30A2;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;M.&#x30B9;&#x30E1;&#x30B0;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;&#x306E;MSMEG_1351&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x83CC;&#x682A;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x306E;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30F3;&#x5316;&#x306E;&#x6B20;&#x4E4F;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;MSMEG_1351&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;25&#x5EA6;&#x3067;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;-mycolates&#x3002; PcaA&#x3068;MSMEG_1351&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7B49;&#x4FA1;&#x6027;&#x306F;MSMEG_1351&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3068;&#x3082;&#x30A6;&#x30B7;&#x578B;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;BCG&#x306E;DeltapcaA&#x682A;&#x3067;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x76F8;&#x88DC;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; MSMEG_1351&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30DF;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3068;BCG&#x306E;cording&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x30DF;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x610F;&#x7FA9;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x8981;&#x56E0;&#x3068;&#x74B0;&#x5883;&#x8981;&#x56E0;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7D44;&#x6210;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8150;&#x751F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x30DF;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30F3;&#x306E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#xFF1A;&#x3B1;-mycolates&#x306E;cis-&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30F3;&#x5316;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D50;&#x6838;&#x30B9;&#x30E1;&#x30B0;&#x30DE;&#x30C1;&#x30B9;1351&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF08;MSMEG_1351&#xFF09;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;

&#xC140; &#xBD09;&#xD22C; &#xB3C5;&#xC131; &#xBC0F; &#xC57D; &#xC81C; &#xB0B4;&#xC131; &#xACB0;&#xD575;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xACB0;&#xC815; &#xC774;&#xB2E4;. Pathogenesis&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xACFC; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC751;&#xB2F5; immunomodulation mycolic &#xC0B0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xD788; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCBD; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; &#xD558;&#xB294;. Cyclopropane &#xBC18;&#xC9C0;&#xB85C; methyltransferase, PcaA&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCD09;&#xB9E4;&#xC758; &#xB3C4;&#xC785;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC54C;&#xD30C; mycolic &#xC0B0;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC218;&#xC815;, &#xC601;&#xAD6C; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xAC10;&#xC5FC;&#xACFC; M. &#xACB0;&#xD575;&#xC5D0; &#xCF54;&#xB529; &#xD615;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; nonpathogenic&#xC5D0;&#xC11C; cyclopropanated &#xC138;&#xD3EC; &#xBCBD; mycolates&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xC785;&#xC99D; Mycobacterium smegmatis &#xBCC0;&#xD615; &#xBC0F; MSMEG_1351 &#xC720;&#xC804;&#xC790; PcaA homologue &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xC54C;&#xD30C; mycolic acid cyclopropanation&#xB294; 25&#xB3C4; C&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; Cyclopropanating &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xC628;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xC870; &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xB9C8;&#xBC95;&#xC758; &#xAC01;&#xB3C4; &#xD68C;&#xC804; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140;&#xC5D0; NMR &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. 37&#xB3C4; c. &#xBE44;&#xAD50; MSMEG_1351 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; 25 &deg; C&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xB300; &#xADDC;&#xC81C;&#xB294; &#xBCD1;&#xB82C;, &#xC591;&#xC801; &#xC5ED; &#xC804;&#xC0AC; PCR &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4; M. smegmatis, recombineering&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C;&#xC758; MSMEG_1351 &#xB178;&#xD06C; &#xC544;&#xC6C3; &#xBCC0;&#xD615; &#xC54C;&#xD30C; mycolates&#xC758; cyclopropanation&#xC5D0; &#xC804;&#xC2DC;. PcaA &#xBC0F; msmeg_1351&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xB3D9;&#xB4F1;&#xC131; MSMEG_1351 &#xB178;&#xD06C; &#xC544;&#xC6C3; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC0F; Mycobacterium bovis BCG&#xC758; DeltapcaA &#xBCC0;&#xD615; &#xC0C1;&#xD638; &#xBCF4;&#xC644;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC124;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Overexpression msmeg_1351&#xC758; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; mycolic acid &#xD504;&#xB85C;&#xD544;&#xACFC; BCG&#xC5D0;&#xC11C; &#xCF54;&#xB529; &#xD615; &#xBCF5;&#xC6D0;. Nonpathogenic mycobacteria&#xC5D0; mycolic acid cyclopropanation&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC758;&#xBBF8; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCBD; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xD658;&#xACBD; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300;&#xCC98; &#xD558;&#xB294; &#xC801;&#xC751;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC5D0; &#xB9C8;&#xC800; mycobacteria mycolic acid cyclopropanation&#xC758; &#xC628;&#xB3C4; &#xB530;&#xB978; &#xADDC;&#xC81C;: &#xC54C;&#xD30C;-mycolates&#xC758; CIS-cyclopropanation&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; Mycobacterium smegmatis 1351 &#xC720;&#xC804;&#xC790; (MSMEG_1351)&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

La envoltura celular es un determinante crucial de la virulencia y resistencia a los f&#xE1;rmacos de Mycobacterium tuberculosis. Varias caracter&#xED;sticas de la patog&#xE9;nesis y la inmunomodulaci&#xF3;n de la respuesta de acogida son atribuibles a la diversidad estructural de los l&#xED;pidos de la pared celular, especialmente en los &#xE1;cidos mic&#xF3;licos. La modificaci&#xF3;n estructural del &#xE1;cido alfa-mic&#xF3;lico por introducci&#xF3;n de los anillos de ciclopropano como catalizada por la PCAA metiltransferasa, es esencial para una infecci&#xF3;n letal, persistente y el fenotipo acordonado en M. tuberculosis. En este caso, se demuestra la presencia de pared celular cyclopropanated micolatos en la cepa no patog&#xE9;nica de Mycobacterium smegmatis e identificar MSMEG_1351 como un gen que codifica un hom&#xF3;logo PCAA. Curiosamente, alfa-&#xE1;cido mic&#xF3;lico ciclopropanaci&#xF3;n era inducible en cultivos crecidos a 25 grados C. La modulaci&#xF3;n temperatura de crecimiento de la actividad cyclopropanating se determin&#xF3; por alto &#xE1;ngulo m&#xE1;gico resoluci&#xF3;n hilatura an&#xE1;lisis de RMN en c&#xE9;lulas enteras. Al mismo tiempo, cuantitativa transcripci&#xF3;n reversa-PCR an&#xE1;lisis demostr&#xF3; que la expresi&#xF3;n de genes MSMEG_1351 est&#xE1; regulado a 25 &#xB0; C en comparaci&#xF3;n con los 37 grados C. Una MSMEG_1351 knock-out cepa de M. smegmatis, generado por recombiner&#xED;a, mostraron una deficiencia en ciclopropanaci&#xF3;n de alfa de micolatos. La equivalencia funcional de PCAA y MSMEG_1351 fue establecido por transversal en la complementaci&#xF3;n. MSMEG_1351 eliminatorias mutante y tambi&#xE9;n en una cepa DeltapcaA de Mycobacterium bovis BCG La sobreexpresi&#xF3;n de MSMEG_1351 restaurado el perfil mic&#xF3;licos de tipo salvaje &#xE1;cido y el fenotipo Cording en BCG. Aunque el significado biol&#xF3;gico de ciclopropanaci&#xF3;n &#xE1;cidos mic&#xF3;licos en micobacterias no pat&#xF3;genas sigue sin estar claro, es probable que representa un mecanismo de adaptaci&#xF3;n de la estructura de la pared celular y la composici&#xF3;n para hacer frente a factores ambientales.

Dependiente de la temperatura del Reglamento ciclopropanaci&#xF3;n &#xE1;cidos mic&#xF3;licos en la micobacteria sapr&#xF3;fita: Papel de la Mycobacterium smegmatis 1351 Gene (MSMEG_1351) en la CEI-ciclopropanaci&#xF3;n de Alfa-micolatos

Mycolyl-&#x963F;&#x62C9;&#x4F2F;&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;-&#x80BD;&#x805A;&#x7CD6; (mAGP) &#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&quot;&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1;&#x6838;&#x5FC3;&quot;&#x8868;&#x793A;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x5C01;&#x7684;&#x6807;&#x5FD7;&#x3002;&#x5728;&#x8FC7;&#x53BB;&#x51E0;&#x5341;&#x5E74;&#x671F;&#x95F4;&#x4E00;&#x76F4;&#x5728;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x5404;&#x7EA7;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x7126;&#x70B9;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684; mAGP &#x4E5F;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x51E0;&#x79CD;&#x6297;&#x7ED3;&#x6838;&#x836F;&#x3002;&#x672C;&#x6587;&#x6240;&#x8FF0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x8BE5;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x725B;&#x9EC4;&#x5361;&#x4ECB;&#x82D7;&#x6216;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x6CD5;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E; thiacetazone &#xFF08;&#x4EA4;&#x8C18;&#x4F1A;&#xFF09;&#xFF0C;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x610F;&#x56FE;&#x7684;&#x6297;&#x7ED3;&#x6838;&#x836F;&#x7269;&#x3001; &#x5173;&#x8054;&#x4E3B;&#x8981; apolar &#x7CD6;&#x8102;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E25;&#x91CD;&#x4E0B;&#x964D;&#x3002;&#x6B64;&#x6291;&#x5236;&#x8981;&#x6C42; MmaA4&#xFF0C;&#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x62A5;&#x544A;&#x53C2;&#x52A0;&#x4EA4;&#x8C18;&#x4F1A;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x7EAF;&#x5316;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x7CD6;&#x8102;&#x5B81;&#x906D;&#x5230;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x5408;&#x6C14;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x3001; &#x8D28;&#x8C31;&#x3001; &#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x3002;&#x8FD9;&#x5141;&#x8BB8;&#x6807;&#x8BC6;&#x4E3A; 5-O-mycolyl-&beta;-Araf-(1&rarr;2)-5-O-mycolyl-&alpha;-Araf-(1&rarr;1)-Gro&#x3001; &#x6307;&#x5B9A; Di Mycolyl di-Arabino-&#x7518;&#x6CB9; (DMAG)&#x3002;DMAG &#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x540E;&#x6765;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x5176;&#x4ED6;&#x751F;&#x957F;&#x7F13;&#x6162;&#x81F4;&#x75C5;&#x7269;&#x79CD;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x3002;DMAG &#x751F;&#x4EA7;&#x523A;&#x6FC0;&#x4E0B;&#x5916;&#x6E90;&#x6027;&#x7518;&#x6CB9;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;DMAG &#x51FA;&#x73B0;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0A;&#x76F8;&#x540C;&#x7684; mAGP &#x7684; mycolylated arabinosyl &#x6BCD;&#x9898;&#x7684;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4EE3;&#x8C22;&#x5173;&#x7CFB;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528;&#x6297;&#x7ED3;&#x6838;&#x836F;&#x5982;&#x4E59;&#x80FA;&#x4E01;&#x9187;&#x6216;&#x5F02;&#x70DF;&#x80BC;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x77E5;&#x5206;&#x522B;&#x6291;&#x5236;&#x963F;&#x62C9;&#x4F2F;&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x6216;&#x5206;&#x679D;&#x9178;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;DMAG &#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x5728;&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1;&#x3002;&#x8FD9;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x53D1;&#x75C5;&#x7684; DMAG &#x6253;&#x5F00;&#x70C8;&#x6027;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;

&#x63A5;&#x89E6;&#x7684;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1;&#x6291;&#x5236;&#x836F;&#x7269;&#x53EF;&#x964D;&#x4F4E;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684; arabinoglycerolipid mycolyl-&#x963F;&#x62C9;&#x4F2F;&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;-&#x80BD;&#x805A;&#x7CD6;&#x4EE3;&#x8C22;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;

The "cell wall core" consisting of a mycolyl-arabinogalactan-peptidoglycan (mAGP) complex represents the hallmark of the mycobacterial cell envelope. It has been the focus of intense research at both structural and biosynthetic levels during the past few decades. Because it is essential, mAGP is also regarded as a target for several anti-tubercular drugs. Herein, we demonstrate that exposure of Mycobacterium bovis BCG or Mycobacterium marinum to thiacetazone (TAC), a second-intent anti-tubercular drug, is associated with a severe decrease in the level of a major apolar glycolipid. This inhibition requires MmaA4, a methyltransferase reported to participate in the activation process of TAC. Following purification, this glycolipid was subjected to detailed structural analyses, combining gas-liquid chromatography, mass spectrometry and nuclear magnetic resonance. This allowed to identify it as a 5-O-mycolyl-Î²-Araf-(1â†’2)-5-O-mycolyl-Î±-Araf-(1â†’1)-Gro, designated Di-Mycolyl di-Arabino-Glycerol (DMAG). The presence of DMAG was subsequently confirmed in other slow-growing pathogenic species, including Mycobacterium tuberculosis. DMAG production was stimulated in the presence of exogenous glycerol. Interestingly, DMAG appears structurally identical to the terminal portion of the mycolylated arabinosyl motif of mAGP and the metabolic relationship between these two components was provided using anti-tubercular drugs such as ethambutol or isoniazid, known to inhibit the biosynthesis of arabinogalactan or mycolic acid, respectively. Finally, DMAG was identified in the cell wall of M. tuberculosis. This opens the possibility of a potent biological function for DMAG that may be important to mycobacterial pathogenesis.

Exposure of mycobacteria to cell wall-inhibitory drugs decreases the production of an arabinoglycerolipid related to mycolyl-arabinogalactan-peptidoglycan metabolism.

La &#x26;quot;paroi cellulaire de base&#xBB;, compos&#xE9; d&#x26;#39;un mycolyl-arabinogalactane-peptidoglycane (POP) complexe repr&#xE9;sente la marque de l&#x26;#39;enveloppe cellulaire d&#x26;#39;origine mycobact&#xE9;rienne. Il a fait l&#x26;#39;objet d&#x26;#39;intenses recherches, tant au niveau structurel et biosynth&#xE8;se au cours des derni&#xE8;res d&#xE9;cennies. Parce qu&#x26;#39;il est essentiel, POP est &#xE9;galement consid&#xE9;r&#xE9; comme une cible pour plusieurs m&#xE9;dicaments anti-tuberculeux. Ici, nous d&#xE9;montrons que l&#x26;#39;exposition de Mycobacterium bovis BCG ou Mycobacterium marinum &#xE0; la thiac&#xE9;tazone (TAC), un deuxi&#xE8;me intention anti-tuberculeuse de drogue, est associ&#xE9;e &#xE0; une diminution s&#xE9;v&#xE8;re du niveau d&#x26;#39;un glycolipide majeur apolaire. Cette inhibition n&#xE9;cessite MmaA4, une m&#xE9;thyltransf&#xE9;rase rapport&#xE9; &#xE0; participer &#xE0; la proc&#xE9;dure d&#x26;#39;activation de la TAC. Apr&#xE8;s purification, ce glycolipide a &#xE9;t&#xE9; soumis &#xE0; des analyses d&#xE9;taill&#xE9;es structurelles, combinant le gaz-chromatographie en phase liquide, la spectrom&#xE9;trie de masse et r&#xE9;sonance magn&#xE9;tique nucl&#xE9;aire. Ce qui a permis de l&#x26;#39;identifier en tant que 5-O-mycolyl-&#x3B2;-Araf-(1 &#x2192; 2)-5-O-mycolyl-&#x3B1;-Araf-(1 &#x2192; 1)-Gro, d&#xE9;sign&#xE9; Di-Mycolyl di-arabino-glyc&#xE9;rol (DMAG). La pr&#xE9;sence de DMAG a ensuite &#xE9;t&#xE9; confirm&#xE9; dans d&#x26;#39;autres esp&#xE8;ces pathog&#xE8;nes &#xE0; croissance lente, y compris Mycobacterium tuberculosis. La production a &#xE9;t&#xE9; stimul&#xE9;e DMAG en pr&#xE9;sence de glyc&#xE9;rol exog&#xE8;ne. Int&#xE9;ressant, DMAG appara&#xEE;t structurellement identique &#xE0; la partie terminale du motif arabinosyle mycolylated du POP et la relation m&#xE9;tabolique entre ces deux composants est fourni &#xE0; l&#x26;#39;aide antituberculeux m&#xE9;dicaments tels que l&#x26;#39;&#xE9;thambutol ou isoniazide, connu pour inhiber la biosynth&#xE8;se de l&#x26;#39;arabinogalactane ou l&#x26;#39;acide mycolique, respectivement . Enfin, DMAG a &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9; dans la paroi cellulaire de Mycobacterium tuberculosis. Cela ouvre la possibilit&#xE9; d&#x26;#39;une fonction puissante biologique pour DMAG qui peut &#xEA;tre important &#xE0; la pathogen&#xE8;se des mycobact&#xE9;ries.

L&#x26;#39;exposition des mycobact&#xE9;ries to Cell Wall-inhibitrices drogues Diminue la production d&#x26;#39;un Arabinoglycerolipid Relatif &#xE0; la Mycolyl-arabinogalactane-peptidoglycane m&#xE9;tabolisme

Der &quot;Kern der Zellwand&quot; bestehend aus einem Mycolyl-Arabinogalactan-Peptidoglycan (Map)-Komplex stellt das Markenzeichen der mykobakterieller Zellh&uuml;llen. Es war w&auml;hrend der letzten Jahrzehnte im Mittelpunkt der intensiven Forschung sowohl die strukturellen als auch die biosynthetischen Ebene. Weil es notwendig ist, gilt die Map auch als Ziel f&uuml;r mehrere anti-tubercular Medikamente. Hierin, wir demonstrieren, dass die Exposition von Mycobacterium Bovis BCG oder Mycobacterium Marinum, Thiacetazone (TAC), eine zweite-Vorsatz anti-tubercular Droge, eine schwere Abnahme in der Ebene von einem gro&szlig;en apolaren Glycolipide zugeordnet ist. Diese Hemmung ben&ouml;tigt zur Teilnahme an der Aktivierung der TAC MmaA4, eine Methyltransferase berichtet. Nach Reinigung wurde diese Glycolipide detaillierte Strukturanalysen, Kombination von Gas-Fl&uuml;ssig-Chromatographie, Massenspektrometrie und Kernspinresonanz unterzogen. Dies erlaubt, um ihn als ein 5-O-mycolyl-&beta;-Araf-(1&rarr;2)-5-O-mycolyl-&alpha;-Araf-(1&rarr;1)-Gro, Raucherbereich Di-Mycolyl di-Arabino-Glycerin (DMAG) zu identifizieren. Das Vorhandensein von DMAG best&auml;tigte sp&auml;ter in andere langsam wachsende pathogenen Arten einschlie&szlig;lich Mycobacterium Tuberculosis. DMAG-Produktion wurde in Anwesenheit von exogenen Glycerin stimuliert. Interessanterweise DMAG scheint strukturell identisch mit den terminal Teil des Motivs Arabinosyl Mycolylated Map und die metabolische Beziehung zwischen diesen beiden Komponenten lieferte mit anti-tubercular Drogen wie ETAMBUTOL oder Isoniazid, bekannt die Biosynthese von Arabinogalactan oder Mycolic S&auml;ure, bzw. zu hemmen. DMAG wurde schlie&szlig;lich in der Zellwand von M. Tuberkulose identifiziert. Dies er&ouml;ffnet die M&ouml;glichkeit einer starken biologische Funktion f&uuml;r DMAG, die Pathogenese mykobakterieller wichtig sein k&ouml;nnen.

Exposition von Mykobakterien zu Zellwand-hemmenden Medikamenten verringert die Produktion von einer Arabinoglycerolipid mit Bezug zu Mycolyl-Arabinogalactan-Peptidoglycan-Stoffwechsel.

Il &quot;nucleo di parete cellulare&quot; costituito da un complesso mycolyl-arabinogalattano-peptidoglicano (pop) rappresenta il segno distintivo della busta delle cellule micobatteriche. &Egrave; stato il focus della ricerca intensa a livello strutturale e biosintetico durante i decenni scorsi. Perch&eacute; &egrave; essenziale, pop &egrave; anche considerato come un obiettivo per molti farmaci anti-tubercular. Nel presente documento, ci dimostrano che l&#39;esposizione di Mycobacterium bovis BCG o Mycobacterium marinum a thiacetazone (TAC), un farmaco anti-tubercular secondo intento, &egrave; associati con una grave diminuzione del livello di un glicolipide principali apolari. Questa inibizione richiede MmaA4, una metiltransferasi riferito a partecipare al processo di attivazione della TAC. Dopo la purificazione, questo glicolipide &egrave; stato sottoposto ad analisi strutturali dettagliate, che unisce la cromatografia gas-liquido, spettrometria di massa e risonanza magnetica nucleare. Questo ha permesso di identificarlo come una 5-O-mycolyl-&beta;-Araf-(1&rarr;2)-5-O-mycolyl-&alpha;-Araf-(1&rarr;1)-Gro, designata Di-Mycolyl di-Arabino-glicerolo (DMAG). Successivamente &egrave; stata confermata la presenza di DMAG in altre specie patogene crescono lentamente, compreso il Mycobacterium tuberculosis. Produzione DMAG &egrave; stata stimolata in presenza di glicerolo esogena. &Egrave; interessante notare che, DMAG appare strutturalmente identico alla parte terminale del mycolylated arabinosyl motivo del pop e la relazione metabolica tra queste due componenti &egrave; stata fornita utilizzando farmaci anti-tubercular come etambutolo e isoniazide, noti per inibire la biosintesi di acido arabinogalactano o micolico, rispettivamente. Infine, DMAG &egrave; stata identificata nella parete delle cellule di M. tuberculosis. Questo apre la possibilit&agrave; di una potente funzione biologica per DMAG che possono essere importanti per la patogenesi micobatteriche.

L&#39;esposizione dei micobatteri a parete cellulare-inibitorio droga diminuisce la produzione di un arabinoglycerolipid relative al mycolyl-arabinogalattano-peptidoglicano metabolismo.

mycolyl-&#x30A2;&#x30E9;&#x30D3;&#x30CE;&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3; - &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#xFF08;mAGP&#xFF09;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B; &#x26;quot;&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x30B3;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x26;quot;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x904E;&#x53BB;&#x6570;&#x5341;&#x5E74;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x96C6;&#x4E2D;&#x7684;&#x306A;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x7126;&#x70B9;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;mAGP&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6297;&#x7D50;&#x6838;&#x85AC;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x898B;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;thiacetazone&#xFF08;TAC&#xFF09;&#x3001;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x6297;&#x7D50;&#x6838;&#x85AC;&#x3078;&#x306E;&#x30A6;&#x30B7;&#x578B;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;BCG&#x3084;&#x7D50;&#x6838;marinum&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x975E;&#x6975;&#x6027;&#x8102;&#x8CEA;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;MmaA4&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;TAC&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x53C2;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7CBE;&#x88FD;&#x5F8C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7CD6;&#x8102;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x30AC;&#x30B9; - &#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x3001;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x3068;&#x6838;&#x78C1;&#x6C17;&#x5171;&#x9CF4;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3001;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x4F9B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;5-O-mycolyl-&#x3B2;-Araf-&#xFF08;1&#x2192;2&#xFF09;-5-O-mycolyl-&#x3B1;-Araf-&#xFF08;1&#x2192;1&#xFF09;-&#x30B0;&#x30ED;&#x3001;&#x6307;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B8;-Mycolyl&#x30B8;-&#x30A2;&#x30E9;&#x30D3;&#x30CE; - &#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x308C;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#xFF08;DMAG&#xFF09;&#x3002; DMAG&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x3092;&#x542B;&#x3081;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x304C;&#x9045;&#x3044;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x7A2E;&#x304C;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; DMAG&#x751F;&#x7523;&#x306F;&#x3001;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;DMAG&#x306F;mAGP&#x306E;mycolylated&#x30A2;&#x30E9;&#x30D3;&#x30CE;&#x30B7;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306E;&#x7AEF;&#x5B50;&#x90E8;&#x5206;&#x306B;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x306B;&#x540C;&#x4E00;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;2&#x3064;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x9593;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x30A2;&#x30E9;&#x30D3;&#x30CE;&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DF;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x9178;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x30A8;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D6;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x3084;&#x30A4;&#x30BD;&#x30CB;&#x30A2;&#x30B8;&#x30C9;&#x3001;&#x6297;&#x7D50;&#x6838;&#x85AC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;DMAG&#x306F;&#x3001;&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x306B;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;DMAG&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x958B;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x963B;&#x5BB3;&#x85AC;&#x306B;&#x6297;&#x9178;&#x83CC;&#x306E;&#x66DD;&#x9732;&#x306F;My&#x200B;&#x200B;colyl-&#x30A2;&#x30E9;&#x30D3;&#x30CE;&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;Arabinoglycerolipid&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x308B;

&quot;&#xC138;&#xD3EC; &#xBCBD; &#xCF54;&#xC5B4;&quot; mycolyl-arabinogalactan-peptidoglycan (mAGP) &#xBCF5;&#xD569; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; mycobacterial &#xC140; &#xBD09;&#xD22C;&#xC758; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC9C0;&#xB09C; &#xBA87; &#xC2ED;&#xB144; &#xB3D9;&#xC548; &#xAD6C;&#xC870; &#xBC0F; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC15;&#xB82C;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xCD08;&#xC810;&#xC774; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xBBC0;&#xB85C; mAGP &#xB610;&#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; anti-tubercular &#xC758;&#xC57D;&#xD488;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC; Mycobacterium bovis BCG &#xB610;&#xB294; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; marinum&#xC758; thiacetazone (&#xC804;&#xC220;), &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC758;&#xB3C4; anti-tubercular &#xB9C8;&#xC57D;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C;, &#xC8FC;&#xC694; apolar glycolipid &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xAD00;&#xB828;. &#xC774; &#xC800;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xC804;&#xC220; &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; methyltransferase &#xBCF4;&#xACE0; Mmaa4&#xB97C;, &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC815;&#xD654;&#xB97C;, &#xB2E4;&#xC74C;&#xC774; glycolipid&#xC740; &#xAC00;&#xC2A4;-&#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;, &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xD575; &#xC790;&#xAE30; &#xACF5;&#xBA85; &#xACB0;&#xD569; &#xC790;&#xC138;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC870; &#xBD84;&#xC11D;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1;. &#xC774; 5-O-mycolyl-&beta;-Araf-(1&rarr;2)-5-O-mycolyl-&alpha;-Araf-(1&rarr;1)-Gro, &#xC9C0;&#xC815; &#xB41C; &#xB514; Mycolyl &#xB514;-Arabino-&#xAE00;&#xB9AC;&#xC138;&#xB864; (DMAG)&#xB85C; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. DMAG&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB978; &#xB290;&#xB9B0; &#xC131;&#xC7A5; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xC885;, &#xACB0;&#xD575;&#xADE0;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. DMAG &#xC0DD;&#xC0B0; exogenous &#xAE00;&#xB9AC;&#xC138;&#xB864; &#xC874;&#xC7AC; &#xC790;&#xADF9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, DMAG Magp&#xC758; mycolylated arabinosyl &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xC758; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xBD80;&#xBD84;&#xC744; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC77C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB450; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xAC04;&#xC758; &#xB300;&#xC0AC; &#xAD00;&#xACC4; ethambutol &#xB4F1; &#xAC01;&#xAC01; arabinogalactan &#xB610;&#xB294; mycolic &#xC0B0;&#xC758; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; isoniazid anti-tubercular &#xB9C8;&#xC57D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC81C;&#xACF5; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, DMAG M. &#xACB0;&#xD575;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Mycobacterial &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; DMAG&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xAE30;&#xB2A5; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xC5F4;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Mycobacteria&#xC758; &#xC140; &#xBCBD; &#xAE08;&#xC9C0; &#xC57D;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB41C; arabinoglycerolipid mycolyl-arabinogalactan-peptidoglycan &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xAC10;&#xC18C;.

La &#x26;quot;c&#xE9;lula b&#xE1;sica de la pared&#x26;quot;, que consiste en un mycolyl-arabinogalactano-peptidoglicano (POP) complejo representa el sello de la envoltura celular de micobacterias. Ha sido el foco de una intensa investigaci&#xF3;n, tanto a nivel estructural y biosint&#xE9;tica durante las &#xFA;ltimas d&#xE9;cadas. Debido a que es esencial, POP tambi&#xE9;n es considerado como un objetivo para varios antituberculosos. Aqu&#xED;, nos demuestran que la exposici&#xF3;n de Mycobacterium bovis BCG o Mycobacterium marinum que tiacetazona (TAC), un segundo intento de la droga contra la tuberculosis, se asocia con una disminuci&#xF3;n severa en el nivel de un glicol&#xED;pido apolar importante. Esta inhibici&#xF3;n requiere MmaA4, una metiltransferasa inform&#xF3; a participar en el proceso de activaci&#xF3;n de TAC. Despu&#xE9;s de la purificaci&#xF3;n, este glicol&#xED;pido se someti&#xF3; a an&#xE1;lisis detallados estructurales, combinando cromatograf&#xED;a gas-l&#xED;quido, espectrometr&#xED;a de masas y de resonancia magn&#xE9;tica nuclear. Esto permiti&#xF3; para identificarlo como un 5-O-mycolyl-&#x3B2;-Araf-(1 &#x2192; 2)-5-O-mycolyl-&#x3B1;-Araf-(1 &#x2192; 1)-Gro, designado Di-Mycolyl di-arabino-glicerol (DMAG). La presencia de DMAG se confirm&#xF3; posteriormente en otras especies pat&#xF3;genas de crecimiento lento, como el Mycobacterium tuberculosis. DMAG producci&#xF3;n fue estimulada en presencia de glicerol ex&#xF3;geno. Curiosamente, DMAG parece estructuralmente id&#xE9;ntica a la porci&#xF3;n terminal del motivo arabinosilo mycolylated de POP y la relaci&#xF3;n metab&#xF3;lica entre estos dos componentes se proporciona utilizando antituberculosos como etambutol o isoniazida, conocida para inhibir la bios&#xED;ntesis de arabinogalactano o &#xE1;cido mic&#xF3;lico, respectivamente . Finalmente, DMAG se identific&#xF3; en la pared celular de M. tuberculosis. Esto abre la posibilidad de una funci&#xF3;n biol&#xF3;gica potente para DMAG que puede ser importante en la patog&#xE9;nesis micobacteriana.

La exposici&#xF3;n de Micobacterias de la c&#xE9;lula inhibitoria pared drogas disminuye la producci&#xF3;n de un Arabinoglycerolipid Relacionado con Mycolyl-arabinogalactano-peptidoglicano Metabolismo

Anil K. Ojha

Department of Infectious Diseases and Microbiology

University of Pittsburgh

Growth of Mycobacterium tuberculosis Biofilms

Anil K. Ojha

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Infectious Diseases and Microbiology

University of Pittsburgh

Growth of Mycobacterium tuberculosis Biofilms

Department of Infectious Diseases and Microbiology