Isolation and Culture of Neural Crest Cells from Embryonic Murine Neural Tube

The embryonic neural crest (NC) is a multipotent progenitor population that originates at the dorsal aspect of the neural tube, undergoes an epithelial to ...

Vanderbilt University Medical Center

&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5916;&#x80DA;&#x5C42;&#x548C;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684; endodermally &#x6D3E;&#x751F;&#x80F0;&#x817A;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5F88;&#x591A;&#x4EBA;&#x4E86;&#x89E3;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x5982;&#x4F55;&#x8C03;&#x8282;&#x80F0;&#x817A;&#x53D1;&#x80B2;&#xFF0C;&#x8F83;&#x5C11;&#x4E86;&#x89E3;&#x6709;&#x5173;&#x5982;&#x4F55;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4F55;&#x65F6; ectodermally &#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x8C03;&#x8282;&#x80F0;&#x817A;&#x53D1;&#x80B2;&#x548C;&#x5177;&#x4F53;&#x6765;&#x8BF4;&#xFF0C;&beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F;&#x3002;&#x5148;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x4ECE;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8C03;&#x8282; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x6700;&#x7EC8;&#xFF0C;beta &#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x91CF;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x5F00;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x6765;&#x63CF;&#x8FF0;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x80F0;&#x82BD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x5230;&#x8FBE;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x548C;&#x6269;&#x5C55;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x975E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x81EA;&#x4E3B;&#x89D2;&#x8272;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x884D;&#x751F;&#x54C1;&#x5728; beta &#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x77E5;&#x8BC6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x8FDB;&#x5165;&#x80F0;&#x817A;&#x95F4;&#x8D28;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684; 26 &#x548C; 27 &#x4F53;&#x8282;&#x9636;&#x6BB5; (&#x7EA6; 10.0 dpc) &#x548C;&#x6210;&#x4E3A;&#x63BA;&#x6742;&#x80F0;&#x817A;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x56F4;&#x7684;&#x95F4;&#x8D28;&#x5230;&#x5206;&#x652F;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; Forkhead &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; Foxd3 &#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x7684;&#x5220;&#x9664;&#xFF0C;&#x70E7;&#x8680;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5230;&#x80F0;&#x817A;&#x7684;&#x666E;&#x5229;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4E0E;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709; Foxd3&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x56E0;&#x6B64;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x4E00;&#x81F4;&#x8868;&#x793A;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x53CA;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6297;&#x4F53;&#x9633;&#x6027;&#x9886;&#x57DF;&#x90FD;&#x6709;&#x6240;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x7684;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x589E;&#x52A0;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x8868;&#x793A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6570;&#x76EE;&#xFF0C;&#x4F46; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x5927;&#x5927;&#x53D7;&#x635F;&#x3002;&#x51CF;&#x5C11;&#x9A6C;&#x6CD5;&#x548C; Pdx1 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6240;&#x793A; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD; &#xFF1B; &#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x65E0;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74; co-expressed Glut2 &#x7684;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x9633;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x767E;&#x5206;&#x6BD4;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86; Pdx1 &#x76F8;&#x6BD4;&#x7684;&#x63A7;&#x4EF6;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x900F;&#x9732;&#x7684;&#x900F;&#x5C04;&#x7535;&#x955C;&#x5206;&#x6790;&#x51CF;&#x5C11;&#x6570;&#x5B57;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x9897;&#x7C92;&#x548C;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x8868;&#x793A;&#x80DA;&#x80CE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E2D;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38;&#x9897;&#x7C92;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x662F;&#x5728;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684; beta &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#xFF1A; &#x901A;&#x8FC7;&#x6D88;&#x6781;&#x8C03;&#x8282; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x4FC3;&#x8FDB; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

&#x5F71;&#x54CD;&#x548C;&#x5230;&#x8FBE;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x80F0;&#x817A; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x548C;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x65F6;&#x673A;&#x3002;

Interactions between cells from the ectoderm and mesoderm influence development of the endodermally-derived pancreas. While much is known about how mesoderm regulates pancreatic development, relatively little is understood about how and when the ectodermally-derived neural crest regulates pancreatic development and specifically, beta cell maturation. A previous study demonstrated that signals from the neural crest regulate beta cell proliferation and ultimately, beta cell mass. Here, we expand on that work to describe timing of neural crest arrival at the developing pancreatic bud and extend our knowledge of the non-cell autonomous role for neural crest derivatives in the process of beta cell maturation. We demonstrated that murine neural crest entered the pancreatic mesenchyme between the 26 and 27 somite stages (approximately 10.0 dpc) and became intermingled with pancreatic progenitors as the epithelium branched into the surrounding mesenchyme. Using a neural crest-specific deletion of the Forkhead transcription factor Foxd3, we ablated neural crest cells that migrate to the pancreatic primordium. Consistent with previous data, in the absence of Foxd3, and therefore the absence of neural crest cells, proliferation of insulin-expressing cells and insulin-positive area are increased. Analysis of endocrine cell gene expression in the absence of neural crest demonstrated that, although the number of insulin-expressing cells was increased, beta cell maturation was significantly impaired. Decreased MafA and Pdx1 expression illustrated the defect in beta cell maturation; we discovered that without neural crest, there was a reduction in the percentage of insulin-positive cells that co-expressed Glut2 and Pdx1 compared to controls. In addition, transmission electron microscopy analyses revealed decreased numbers of characteristic insulin granules and the presence of abnormal granules in insulin-expressing cells from mutant embryos. Together, these data demonstrate that the neural crest is a critical regulator of beta cell development on two levels: by negatively regulating beta cell proliferation and by promoting beta cell maturation.

Influence and timing of arrival of murine neural crest on pancreatic beta cell development and maturation.

Les interactions entre les cellules de l&#39;ectoderme et le m&eacute;soderme influencent le d&eacute;veloppement du pancr&eacute;as d&eacute;riv&eacute;es d&#39;endodermally. Alors que beaucoup on conna&icirc;t comment m&eacute;soderme r&eacute;gule d&eacute;veloppement pancr&eacute;atique, relativement peu est entendu sur comment et quand la cr&ecirc;te neurale d&eacute;riv&eacute; ectodermally r&eacute;gule d&eacute;veloppement du pancr&eacute;as et plus pr&eacute;cis&eacute;ment, maturation des cellules b&ecirc;ta. Une &eacute;tude ant&eacute;rieure a montr&eacute; que les signaux de la cr&ecirc;te neurale r&eacute;gulent la prolif&eacute;ration de cellules b&ecirc;ta et en fin de compte, masse des cellules b&ecirc;ta. Ici, nous &eacute;tendons ce travail de d&eacute;crire le moment d&#39;arriv&eacute;e de la cr&ecirc;te neurale dans le bourgeon du pancr&eacute;as en voie de d&eacute;veloppement et d&#39;&eacute;tendre notre connaissance du r&ocirc;le autonome non cellules pour les d&eacute;riv&eacute;s de la cr&ecirc;te neurale dans le processus de maturation des cellules b&ecirc;ta. Nous avons d&eacute;montr&eacute; que cette cr&ecirc;te neurale murine entr&eacute; le m&eacute;senchyme pancr&eacute;atique entre les &eacute;tapes du somite 26 et 27 (environ 10,0 dpc) et est devenu m&ecirc;l&eacute; aux cellules souches pancr&eacute;atiques comme l&#39;&eacute;pith&eacute;lium ramifi&eacute;e dans le m&eacute;senchyme environnant. &Agrave; l&#39;aide d&#39;une d&eacute;l&eacute;tion de la cr&ecirc;te neurale sp&eacute;cifique du facteur de transcription Forkhead Foxd3, nous avons pratiqu&eacute; l&#39;ablation des cellules neurales de cr&ecirc;te qui migrent vers le primordium pancr&eacute;atique. Compatible avec les donn&eacute;es pr&eacute;c&eacute;dentes, en l&#39;absence de Foxd3 et donc l&#39;absence de cellules de la cr&ecirc;te neurale, prolif&eacute;ration de cellules exprimant l&#39;insuline et la zone positives sont augment&eacute;s. Analyse de l&#39;expression des g&egrave;nes des cellules endocrines en l&#39;absence de cr&ecirc;te neurale a d&eacute;montr&eacute; que, bien que le nombre de cellules exprimant l&#39;insuline a &eacute;t&eacute; augment&eacute;, maturation des cellules b&ecirc;ta a &eacute;t&eacute; sensiblement r&eacute;duite. Diminution de l&#39;expression MafA et Pdx1 illustr&eacute; l&#39;anomalie de la maturation des cellules b&ecirc;ta ; Nous avons d&eacute;couvert que, sans cr&ecirc;te neurale, il y avait une r&eacute;duction du pourcentage de cellules positives que canal Glut2 et Pdx1 par rapport aux t&eacute;moins. En outre, des analyses de microscopie &eacute;lectronique &agrave; transmission ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; diminu&eacute; nombre de granules caract&eacute;ristique de l&#39;insuline et la pr&eacute;sence de granules anormales des cellules exprimant l&#39;insuline des embryons mutants. Ensemble, ces r&eacute;sultats d&eacute;montrent que la cr&ecirc;te neurale est un r&eacute;gulateur essentiel du d&eacute;veloppement de la cellule b&ecirc;ta sur deux niveaux : en r&eacute;gulant n&eacute;gativement la prolif&eacute;ration des cellules b&ecirc;ta et en favorisant la maturation des cellules b&ecirc;ta.

Influence et heure d&#39;arriv&eacute;e de la murine cr&ecirc;te neurale sur le d&eacute;veloppement des cellules b&ecirc;ta du pancr&eacute;as et de la maturation.

Interaktionen zwischen Zellen aus dem Ektoderm und Mesoderm beeinflussen die Entwicklung der Bauchspeicheldr&uuml;se endodermally abgeleitet. W&auml;hrend viel bekannt ist, &uuml;ber wie Mesoderm Pankreas Entwicklung reguliert, ist relativ wenig verstanden, &uuml;ber wie und wann der Neuralleiste ectodermally abgeleiteten Pankreas Entwicklung und insbesondere Beta-Zelle Reifung regelt. Eine fr&uuml;here Studie gezeigt, dass die Signale aus der Neuralleiste regulieren Beta Zellproliferation und letztlich Beta cell Masse. Hier erweitern wir diese Arbeit zu beschreiben Timing der Neuralleiste-Ankunft der entwickelnden Pankreas Knospe und erweitern unser Wissen &uuml;ber die nicht-Zelle autonome Rolle f&uuml;r Neuralleiste Derivate in den Prozess der Reifung der Beta-Zelle. Wir bewiesen, dass murinen Neuralleiste der Pankreas Mesenchym zwischen 26 und 27 Somiten Stadien (ca. 10,0 Dpc) eingegeben und mit Pankreas Vorl&auml;uferzellen vermischt wurde, wie das Epithel in den umliegenden Mesenchym verzweigt. Verwenden eine L&ouml;schung der Neuralleiste-spezifische des Transkriptionsfaktors Forkhead Foxd3, ablated wir Neuralleistenzellen, die in der Bauchspeicheldr&uuml;se Urzeit migrieren. Einklang mit fr&uuml;heren Daten in das Fehlen von Foxd3, und daher das Fehlen der Neuralleistenzellen, Proliferation von Zellen Insulin-Ausdr&uuml;cken und Insulin-positiven Bereich werden erh&ouml;ht. Analyse der Genexpression von endokrinen Zellen in Ermangelung der Neuralleiste gezeigt, dass, obwohl die Anzahl der Insulin-Ausdruck Zellen erh&ouml;ht wurde, Beta-Zelle Reifung erheblich beeintr&auml;chtigt wurde. Verminderte MafA und Pdx1 Ausdruck illustriert den Mangel in der Beta-Zelle Reifung; Wir entdeckten, dass ohne Neuralleiste, gab es eine Verringerung des Anteils der Insulin-positiven Zellen, die Glut2 co-expressed und Pdx1 im Vergleich zu Kontrollen. Dar&uuml;ber hinaus verringert &Uuml;bertragung Elektronenmikroskopie Analysen ergab Zahlen von charakteristischen Insulin-Granulaten und das Vorhandensein von anormale K&ouml;rnchen in Insulin-Ausdruck Zellen von mutant Embryonen. Zusammen, diese Daten zeigen, dass der Neuralleiste ein wichtiger Regulator der Beta-Zell-Entwicklung auf zwei Ebenen: durch die Regelung negativ Beta Zellproliferation und durch F&ouml;rderung der Beta-Zelle Reifung.

Einfluss und den Zeitpunkt der Ankunft des murinen Neuralleiste Betazellen Entwicklung und Reifung.

Interazioni tra le cellule dell&#39;ectoderma e mesoderma influenzano lo sviluppo del pancreas derivato da endodermally. Mentre molto &egrave; conosciuto circa come mesoderma regola lo sviluppo del pancreas, relativamente poco &egrave; capito circa come e quando la cresta neurale ectodermally derivato regola lo sviluppo del pancreas e in particolare, maturazione delle cellule beta. Un precedente studio ha dimostrato che segnali dalla cresta neurale regolano la proliferazione delle cellule beta e in ultima analisi, beta cell mass. Qui, si espande su quel lavoro per descrivere temporizzazione della cresta neurale arrivo presso il germoglio pancreatico in via di sviluppo e di estendere la nostra conoscenza del ruolo autonomo non cellule per i derivati della cresta neurale nel processo di maturazione delle cellule beta. Abbiamo dimostrato che cresta neurale murino il mesenchima del pancreas &egrave; entrato tra il 26 e 27 tappe somite (circa 10.0 dpc) e divenne intermediato con progenitori del pancreas, come l&#39;epitelio ramificato nel mesenchima circostante. Utilizzando una delezione di cresta neurale specifico del fattore di trascrizione Forkhead Foxd3, noi ablazione cellule della cresta neurale che migrano ai primordi del pancreas. Coerente con i dati precedenti, in assenza di Foxd3 e quindi l&#39;assenza di cellule della cresta neurale, proliferazione di cellule che esprimono insulina e insulino-positivo area sono aumentati. Analisi di espressione genica delle cellule endocrine in assenza della cresta neurale ha dimostrato che, anche se &egrave; stato aumentato il numero di cellule che esprimono insulina, era significativamente alterata maturazione delle cellule beta. Diminuita espressione MafA e Pdx1 illustrato il difetto nella maturazione delle cellule beta; abbiamo scoperto che senza cresta neurale, c&#39;&egrave; stata una riduzione della percentuale di cellule insulina-positive che co-expressed Glut2 e Pdx1 rispetto ai controlli. Inoltre, analisi di microscopia elettronica di trasmissione ha rivelati diminuito numero di granuli di insulina caratteristica e la presenza di granuli anormali in cellule che esprimono insulina da embrioni mutanti. Insieme, questi dati dimostrano che la cresta neurale &egrave; un regolatore critico dello sviluppo delle cellule beta su due livelli: regolando negativamente la proliferazione delle cellule beta e promuovendo la maturazione delle cellule beta.

Influenza e dei tempi di arrivo della cresta neurale murino sullo sviluppo delle cellule beta del pancreas e la maturazione.

&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x304B;&#x3089;&#x3068;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528; endodermally &#x6D3E;&#x751F;&#x81B5;&#x81D3;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x81B5;&#x81D3;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x3042;&#x307E;&#x308A;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x9593;&#x3001;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5C11;&#x3057;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3068; ectodermally &#x7531;&#x6765;&#x795E;&#x7D4C;&#x5824;&#x81B5;&#x81D3;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x898F;&#x5236;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x9802;&#x4E0A;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x3066;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7D30;&#x80DE;&#x584A;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x9802;&#x4E0A;&#x306B;&#x5230;&#x7740;&#x767A;&#x5C55;&#x9014;&#x4E0A;&#x81B5;&#x81D3;&#x82BD;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x975E;&#x7D30;&#x80DE;&#x81EA;&#x5F8B;&#x5F79;&#x5272;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x904E;&#x7A0B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x5824;&#x30C7;&#x30EA;&#x30D0;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x79C1;&#x9054;&#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4F5C;&#x54C1;&#x3092;&#x5C55;&#x958B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x5824;&#x81B5;&#x9593;&#x5145;&#x7E54;&#x3001;26 &#x3068; 27 &#x4F53;&#x7BC0;&#x6BB5;&#x968E;&#x306E;&#x9593; (&#x7D04; 10.0 dpc) &#x5165;&#x529B;&#x3057;&#x3001;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5468;&#x56F2;&#x9593;&#x5145;&#x7E54;&#x306B;&#x5206;&#x5C90;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x81B5;&#x81D3;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x6DF7;&#x5728;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF; &#x30D8;&#x30C3;&#x30C9;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50; Foxd3 &#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x5824;&#x56FA;&#x6709;&#x524A;&#x9664;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x5824;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81B5;&#x539F;&#x57FA;&#x306B;&#x79FB;&#x884C;&#x3092;&#x84B8;&#x6563;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Foxd3 &#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x795E;&#x7D4C;&#x5824;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x967D;&#x6027;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x306F;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x9802;&#x4E0A;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6570;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x304C;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x963B;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3002;MafA &#x3068; Pdx1 &#x767A;&#x73FE;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x793A;&#x3059;;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x5824;&#x306A;&#x3057; Glut2 &#x5171;&#x540C;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x967D;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3057;&#x3001;Pdx1 &#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x900F;&#x904E;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x89E3;&#x6790;&#x7279;&#x6027;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x6570;&#x5B57;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x80DA;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x9802;&#x4E0A;&#x304C;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x91CD;&#x5927;&#x306A;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;: &#x5426;&#x5B9A;&#x7684;&#x306B;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x3066;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5F71;&#x97FF;&#x3001;&#x81B5;&#x81D3;&#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3068;&#x6210;&#x719F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x9802;&#x4E0A;&#x306E;&#x5230;&#x7740;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC5EC; ectoderm&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140;&#xACFC; mesoderm &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; endodermally &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xCDCC; &#xC7A5;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9CE;&#xC740; mesoderm &#xCDCC; &#xC7A5; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xC740; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xACFC; &#xD2B9;&#xD788;, &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC219; ectodermally &#xD30C;&#xC0DD; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC870;&#xC808; &#xBC29;&#xBC95; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xD574; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xACE0; &#xAD81;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB3C4;&#xCC29; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xC0C8;&#xC2F9;&#xC758; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xD558; &#xACE0; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC219; &#xD558;&#xB294; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD30C;&#xC0DD; &#xC0C1;&#xD488;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC140;&#xC774; &#xC544;&#xB2CC; &#xC790;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC9C0;&#xC2DD;&#xC744; &#xD655;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xC791;&#xC5C5;&#xC5D0; &#xD655;&#xC7A5;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC2DC;&#xC5F0; murine &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB294; 26&#xACFC; 27 somite &#xB2E8;&#xACC4; (&#xC57D; 10.0 dpc) &#xAC04;&#xC758; &#xCDCC; &#xC7A5; mesenchyme&#xB97C; &#xC785;&#xB825; &#xD558; &#xACE0; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC8FC;&#xBCC0; mesenchyme&#xB85C; &#xCE21; &#xC1C4;&#xB85C; &#xCDCC; &#xC7A5; progenitors&#xACFC; &#xD63C;&#xD569; &#xB41C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xCDCC; primordium &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xD560; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; ablated Forkhead &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; foxd3&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xAD00;&#xB828; &#xC0AD;&#xC81C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. Foxd3&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC; &#xBC0F; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC774;&#xC804; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xC778; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xC591;&#xC131; &#xC601;&#xC5ED; &#xC99D;&#xAC00; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xACBD;&#xB3C4;&#xAC00; &#xBA38;&#xB9AC;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2DC;&#xC5F0;, &#xC778;&#xC290;&#xB9B0;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC758; &#xC218;&#xB294; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC219; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB098;&#xC058;&#xAC8C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAC10;&#xC18C; MafA Pdx1 &#xC2DD; &#xADF8;&#xB9BC; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC219;;&#xC758; &#xACB0;&#xD568; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC5C6;&#xC774; Glut2 co-expressed &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xC591;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBE44;&#xC728;&#xC774; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0; Pdx1 &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC804;&#xC1A1; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0;&#xC744; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC54C;&#xAC31;&#xC774;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC640; &#xD2B9;&#xC131; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0;&#xACFC; &#xB9BD;&#xC758; &#xC218;&#xAC00; &#xAC10;&#xC18C;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB294; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xC124;&#xBA85;: &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xACE0; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC219; &#xD64D;&#xBCF4; &#xD558; &#xC5EC;.

&#xC601;&#xD5A5;&#xB825;&#xACFC; murine &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC140; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC131;&#xC219;&#xC758; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D;.

Interacciones entre las c&eacute;lulas del ectodermo y mesodermo influyan en el desarrollo del p&aacute;ncreas derivados de endodermally. Mientras que se sabe mucho sobre c&oacute;mo mesodermo regula desarrollo, relativamente poco se entiende sobre c&oacute;mo y Cu&aacute;ndo la cresta neural ectod&eacute;rmicas derivados regula el desarrollo y espec&iacute;ficamente, maduraci&oacute;n de c&eacute;lulas beta. Un estudio anterior demostr&oacute; que las se&ntilde;ales de la cresta neural regulan la proliferaci&oacute;n de la c&eacute;lula beta y en &uacute;ltima instancia, beta masa celular. Aqu&iacute;, nos ampliar sobre ese trabajo para describir el momento de la llegada de la cresta neural en la yema pancre&aacute;tica en desarrollo y ampliar nuestro conocimiento de la funci&oacute;n aut&oacute;noma c&eacute;lulas no derivados de la cresta neural en el proceso de maduraci&oacute;n de la c&eacute;lula beta. Demostramos cresta neural murina entr&oacute; el mes&eacute;nquima pancre&aacute;tico entre las 26 y 27 etapas somitas (aproximadamente 10.0 dpc) y lleg&oacute; a ser mezclada con progenitores pancre&aacute;ticos como el epitelio se ramific&oacute; en el mes&eacute;nquima circundante. Usando una canceladura de la cresta neural espec&iacute;fica de los factores de transcripci&oacute;n Forkhead Foxd3, ablaci&oacute;n las c&eacute;lulas de la cresta neural que emigran al primordio pancre&aacute;tico. Consistente con los datos anteriores, en la ausencia de Foxd3 y por lo tanto la ausencia de c&eacute;lulas de la cresta neural, proliferaci&oacute;n de c&eacute;lulas de insulina-expresi&oacute;n y &aacute;rea de insulina-positivo se aumentan. An&aacute;lisis de expresi&oacute;n g&eacute;nica de c&eacute;lulas endocrinas en la ausencia de cresta neural demostraron que, aunque aument&oacute; el n&uacute;mero de c&eacute;lulas que expresan la insulina, la maduraci&oacute;n de la c&eacute;lula beta fue significativamente deteriorada. Expresi&oacute;n disminuida de MafA y Pdx1 ilustra el defecto en la maduraci&oacute;n de la c&eacute;lula beta; descubrimos que sin cresta neural, hubo una reducci&oacute;n en el porcentaje de c&eacute;lulas de insulina-positivas que co-expressed Glut2 y Pdx1 comparado con controles. Adem&aacute;s, el an&aacute;lisis de microscop&iacute;a electr&oacute;nica de transmisi&oacute;n revelados disminuci&oacute;n n&uacute;mero de gr&aacute;nulos caracter&iacute;sticos de la insulina y la presencia de gr&aacute;nulos anormales en c&eacute;lulas que expresan la insulina de embriones mutantes. Juntos, estos datos demuestran que la cresta neural es un regulador fundamental del desarrollo de la c&eacute;lula beta en dos niveles: regulando negativamente la proliferaci&oacute;n de la c&eacute;lula beta y por promover la maduraci&oacute;n de la c&eacute;lula beta.

Influencia y el momento de la llegada de murina cresta neural en el desarrollo de la c&eacute;lula beta pancre&aacute;tica y maduraci&oacute;n.

&#x80A0;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF; (ENS) &#x6E90;&#x4E8E;&#x534F;&#x8C03;&#x7684;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3001; &#x6269;&#x5C55;&#x548C;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7ECF;&#x548C;&#x9AB6;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7ECF;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F93;&#x5165;&#x524D;&#x5185;&#x810F;&#x53EB;&#x548C; rostro &#x5C3E;&#x65B9;&#x5411;&#xFF0C;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x6574;&#x4E2A;&#x80C3;&#x80A0;&#x9053;&#x548C;&#x751F;&#x6210; ENS.&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x8FC1;&#x79FB;&#x9AB6;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x80A0;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x5E72;&#x8349;&#xFF0C;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x5728;&#x9AB6;&#x7BA1;&#x5230;&#x5EF6;&#x9AD3;&#x6CE2;&#x4E2D;&#x7684;&#x5192;&#x53F7;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B50;&#x96C6;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x80A0;&#x6E90;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE; (ENPs) self-renew&#xFF0C;&#x5E76;&#x5F00;&#x59CB;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x586B;&#x5145;&#x80A0;&#x9053;&#x8868;&#x793A;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x5B97;&#x65CF;&#x7684;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8F83;&#x65E9;&#x524D;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x8868;&#x660E;&#x65E9;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x6D3E;&#x751F;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x3001; &#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x548C;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x591A;&#x4E2A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5305;&#x62EC; ENS.&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x9700;&#x8981;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; Foxd3&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x80CE;&#x513F;&#x7684;&#x80A0;&#x5185; Foxd3 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#xFF1A; Foxd3 &#x6709;&#x4EBA;&#x5F3A;&#x70C8;&#x8868;&#x793A;&#x5728; ENPs &#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x80C3;&#x80A0;&#x9053;&#x548C;&#x9010;&#x6B65;&#x9650;&#x5236;&#x5728;&#x80A0;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x65B0;&#x578B;&#x7684; Ednrb &#x590D;&#x5174;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6765;&#x5220;&#x9664; Foxd3 &#x540E;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7ECF;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5230;&#x80A0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x4E86;&#x4E00;&#x665A;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x8981;&#x6C42;&#x4E3A; Foxd3 ENS &#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x6CBF;&#x88AD;&#x8D34;&#x6807;&#x4E2D; Foxd3 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x80DA;&#x80CE; Ednrb &#x590D;&#x5174;&#x8868;&#x793A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x663E;&#x793A;&#x51CF;&#x5C11;&#x6574;&#x4E2A;&#x80A0;&#x9053;&#x7684; ENPs &#x548C; Ednrb &#x590D;&#x5174;&#x6CBF;&#x88AD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x7ED3;&#x80A0;&#x4E2D;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5C0F;&#x9F20;&#x662F;&#x53EF;&#x884C;&#x7684;&#x9635;&#x5217;&#x548C; ENPs &#x7684;&#x5206;&#x5E03;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x90FD;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x548C;&#x4E25;&#x91CD;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6765;&#x81EA; Ednrb &#x590D;&#x5174;&#x6CBF;&#x88AD;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x3002;ENS &#x6CBF;&#x88AD;&#x548C;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x80DA;&#x80CE;&#x5206;&#x5316;&#x5206;&#x6790;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x8868;&#x793A; Ednrb &#x590D;&#x5174;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684; Foxd3 &#x9633;&#x6027; ENPs &#x8865;&#x507F;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x7A81;&#x51FA;&#x663E;&#x793A; Foxd3 &#x5728; ENS &#x5F00;&#x53D1;&#x5305;&#x62EC;&#x524D;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x3001; &#x795E;&#x7ECF;&#x56FE;&#x6848;&#x548C;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x6240;&#x53D1;&#x6325;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x5E2E;&#x52A9;&#x754C;&#x5B9A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x63A7;&#x5236;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7ECF;&#x4E0E;&#x9AB6;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

Foxd3 &#x80A0;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5177;&#x4F53;&#x5220;&#x9664;&#x6270;&#x4E71;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x5E76;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8865;&#x507F;&#x6027;&#x80A0;&#x9053;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

The enteric nervous system (ENS) arises from the coordinated migration, expansion and differentiation of vagal and sacral neural crest progenitor cells. During development, vagal neural crest cells enter the foregut and migrate in a rostro-to-caudal direction, colonizing the entire gastrointestinal tract and generating the majority of the ENS. Sacral neural crest contributes to a subset of enteric ganglia in the hindgut, colonizing the colon in a caudal-to-rostral wave. During this process, enteric neural crest-derived progenitors (ENPs) self-renew and begin expressing markers of neural and glial lineages as they populate the intestine. Our earlier work demonstrated that the transcription factor Foxd3 is required early in neural crest-derived progenitors for self-renewal, multipotency and establishment of multiple neural crest-derived cells and structures including the ENS. Here, we describe Foxd3 expression within the fetal and postnatal intestine: Foxd3 was strongly expressed in ENPs as they colonize the gastrointestinal tract and was progressively restricted to enteric glial cells. Using a novel Ednrb-iCre transgene to delete Foxd3 after vagal neural crest cells migrate into the midgut, we demonstrated a late temporal requirement for Foxd3 during ENS development. Lineage labeling of Ednrb-iCre expressing cells in Foxd3 mutant embryos revealed a reduction of ENPs throughout the gut and loss of Ednrb-iCre lineage cells in the distal colon. Although mutant mice were viable, defects in patterning and distribution of ENPs were associated with reduced proliferation and severe reduction of glial cells derived from the Ednrb-iCre lineage. Analyses of ENS-lineage and differentiation in mutant embryos suggested activation of a compensatory population of Foxd3-positive ENPs that did not express the Ednrb-iCre transgene. Our findings highlight the crucial roles played by Foxd3 during ENS development including progenitor proliferation, neural patterning, and glial differentiation and may help delineate distinct molecular programs controlling vagal versus sacral neural crest development.

Enteric nervous system specific deletion of Foxd3 disrupts glial cell differentiation and activates compensatory enteric progenitors.

Le syst&egrave;me nerveux ent&eacute;rique (ENS) r&eacute;sulte de la migration coordonn&eacute;e, l&#39;expansion et la diff&eacute;renciation des cellules prog&eacute;nitrices des cr&ecirc;te neurale vagale et sacr&eacute;e. Au cours du d&eacute;veloppement, cellules neurales de cr&ecirc;te vagale entrer dans l&#39;intestin ant&eacute;rieur et migrent en direction rostro-caudale, qui colonisent le tube digestif entier et g&eacute;n&eacute;rant la majorit&eacute; de l&#39;ens Sacr&eacute;e cr&ecirc;te neurale contribue &agrave; un sous-ensemble des ganglions ent&eacute;riques dans l&#39;intestin, qui colonisent le c&ocirc;lon dans une vague caudal-&agrave;-rostrale. Au cours de ce processus, ent&eacute;riques d&eacute;riv&eacute; de cr&ecirc;te neurale prog&eacute;niteurs (ENPs) auto-renouveler et commencent &agrave; exprimer des marqueurs de lign&eacute;es neuronales et gliales comme ils peuplent l&#39;intestin. Nos travaux ant&eacute;rieurs ont d&eacute;montr&eacute; que le facteur de transcription Foxd3 est tenu au d&eacute;but de prog&eacute;niteurs d&eacute;riv&eacute; de cr&ecirc;te neurale d&#39;autorenouvellement, multipotentialit&eacute; et mise en place de multiples cellules neurales de cr&ecirc;te et de structures comprenant l&#39;ens Nous d&eacute;crivons ici l&#39;expression de Foxd3 dans l&#39;intestin f&oelig;tale et postnatale : Foxd3 est fortement exprim&eacute;e dans ENPs comme ils colonisent le tube digestif et a &eacute;t&eacute; progressivement limit&eacute; aux cellules gliales ent&eacute;riques. &Agrave; l&#39;aide d&#39;un transg&egrave;ne Ednrb-iCre roman de supprimer Foxd3 apr&egrave;s que les cellules neurales de cr&ecirc;te vagale migrent vers l&#39;intestin moyen, nous avons d&eacute;montr&eacute; une exigence temporelle fin pour Foxd3 au cours du d&eacute;veloppement de l&#39;ENS. Lign&eacute;e marquage de cellules exprimant Ednrb-iCre Foxd3 embryons mutants a r&eacute;v&eacute;l&eacute; une r&eacute;duction de ENPs tout au long de l&#39;intestin et la perte des cellules de lign&eacute;e Ednrb-iCre dans le c&ocirc;lon distal. Bien que les souris mutantes &eacute;taient viables, d&eacute;fauts de structuration et de la distribution de ENPs &eacute;taient associ&eacute;s &agrave; la prolif&eacute;ration r&eacute;duite et une r&eacute;duction importante des cellules gliales, d&eacute;riv&eacute;es de la lign&eacute;e Ednrb-iCre. Les analyses d&#39;ENS-lign&eacute;e et la diff&eacute;renciation des embryons mutants sugg&egrave;rent d&#39;activation d&#39;une population compensatoire de ENPs Foxd3 positifs qui n&#39;exprimaient pas le transg&egrave;ne Ednrb-iCre. Nos r&eacute;sultats soulignent le r&ocirc;le crucial jou&eacute; par Foxd3 au cours du d&eacute;veloppement ENS, y compris la prolif&eacute;ration des prog&eacute;niteurs neuronale structuration et gliale diff&eacute;renciation et peuvent aider &agrave; d&eacute;limiter des programmes distincts de mol&eacute;culaires contr&ocirc;lant vagale versus sacr&eacute;e cr&ecirc;te neurale development.

Syst&egrave;me nerveux ent&eacute;rique suppression sp&eacute;cifique de Foxd3 perturbe la diff&eacute;renciation des cellules gliales et active des prog&eacute;niteurs ent&eacute;riques compensatoires.

Enterische Nervensystem (ENS) ergibt sich aus der koordinierten Migration, Erweiterung und Differenzierung der Progenitorzellen der Neuralleiste Vagusnerven und sakral. W&auml;hrend der Entwicklung Vagusnerven Neuralleistenzellen geben Sie den Vorderdarm und Migrieren in Rostro-kaudaler Richtung kolonisieren den gesamten Magen-Darm-Trakt und die Generierung des Gro&szlig;teil der ENS Sakrale Neuralleiste tr&auml;gt zu einer Teilmenge der enterischen Ganglien in der Hinterdarm, kolonisieren den Doppelpunkt in einer kaudalen zu K&ouml;rperabschnitt Welle. W&auml;hrend dieses Vorgangs Enterische Neuralleiste abgeleitete Vorl&auml;uferzellen (ENPs) erneuern und Marker der neuronalen und Gliazellen &Uuml;bertragungslinien auszudr&uuml;cken, wie sie den Darm Auff&uuml;llen beginnen. Unsere fr&uuml;heren Arbeit gezeigt, dass der Transkriptionsfaktor Foxd3 fr&uuml;h in der Neuralleiste abgeleitete Vorl&auml;uferzellen f&uuml;r Selbsterneuerung, die Multipotenz und die Einrichtung mehrerer Neuralleiste gewonnenen Zellen und Strukturen einschlie&szlig;lich der ens erforderlich ist Hier beschreiben wir in den fetalen und postnatale Darm Foxd3 Ausdruck: Foxd3 war stark in ENPs ausgedr&uuml;ckt, da sie den Magen-Darm-Trakt kolonisieren und beschr&auml;nkte sich zunehmend auf enterischen Gliazellen. Mit einer neuartigen Ednrb-iCre Transgene Foxd3 l&ouml;schen, nach dem Migrieren von Vagusnerven Neuralleistenzellen in den Mitteldarm, demonstrierten wir sp&auml;te zeitliche Voraussetzung f&uuml;r Foxd3 w&auml;hrend der ENS-Entwicklung. Linie Kennzeichnung von Ednrb-iCre auszudr&uuml;cken Zellen in Foxd3 mutant Embryonen ergab eine Reduktion der ENPs im gesamten Darm und Verlust von Ednrb-iCre Linie Zellen im distalen Dickdarm. Obwohl Mutante M&auml;use lebensf&auml;hig waren, waren M&auml;ngel in Musterung und Verteilung der ENPs reduzierte Proliferation und starker Reduktion von Gliazellen, abgeleitet von der Linie Ednrb-iCre zugeordnet. Analysen von ENS-&Uuml;bertragungslinie und Differenzierung in mutant Embryonen vorgeschlagen Aktivierung der kompensatorischen Einwohner Foxd3-positiven ENPs, die nicht die Transgene Ednrb-iCre Ausdr&uuml;cken. Unsere Ergebnisse markieren die entscheidende Rolle, die Foxd3 w&auml;hrend der ENS Entwicklung einschlie&szlig;lich Vorl&auml;uferzellen Proliferation, neuronale Musterbildung und Gliazellen Differenzierung und k&ouml;nnen helfen, unterschiedliche Molekulare Programme Steuern Vagusnerven gegen&uuml;ber sakralen Neuralleiste Entwicklung voneinander abzugrenzen.

Enterischen Nervensystem bestimmte Streichung des Foxd3 st&ouml;rt Gliazelle Differenzierung und kompensatorische Enterische Vorl&auml;uferzellen aktiviert.

Il sistema nervoso enterico (ENS) nasce dalla migrazione coordinato, espansione e differenziazione delle cellule progenitrici della cresta neurale vagale e sacrale. Durante lo sviluppo, cellule della cresta neurale vagale immettere l&#39;apparentemente e migrano in una direzione rostro-caudale, colonizzando l&#39;intero tratto gastrointestinale e generando la maggior parte dell&#39;ENS Cresta neurale sacra contribuisce a un sottoinsieme dei gangli enterici in hindgut, colonizzando il colon di un onda caudale rostrale. Durante questo processo, progenitori derivato da cresta neurale enteriche (ENPs) auto-rinnovarsi e iniziano a esprimere marcatori dei lignaggi neurali e gliali come popolano l&#39;intestino. Il nostro lavoro precedente ha dimostrato che il fattore di trascrizione Foxd3 &egrave; necessaria all&#39;inizio della cresta neurale-derivato progenitori per auto-rinnovamento, multipotency e creazione di molteplici cellule derivate da cresta neurale e strutture tra cui l&#39;ENS Qui, descriviamo Foxd3 espressione all&#39;interno dell&#39;intestino fetale e postnatale: Foxd3 &egrave; stato fortemente espresso in ENPs come essi colonizzano il tratto gastrointestinale e fu progressivamente ristretta alle cellule gliale enteriche. Utilizzo di un transgene Ednrb-iCre romanzo per eliminare Foxd3 dopo la migrazione di cellule della cresta neurale vagale nell&#39;intestino, abbiamo dimostrato un requisito temporale tardo per Foxd3 durante lo sviluppo ENS. Lignaggio etichettatura delle cellule che esprimono Ednrb-iCre negli embrioni mutanti Foxd3, ha rivelato una riduzione di ENPs in tutto l&#39;intestino e la perdita di cellule lignaggio Ednrb-iCre nel colon distale. Sebbene i topi mutanti fossero vitali, difetti di modellatura e di distribuzione di ENPs sono stati associati con ridotta proliferazione e grave riduzione delle cellule gliale derivato dal lignaggio Ednrb-iCre. Analisi dell&#39;ENS-lignaggio e differenziazione negli embrioni mutanti suggerito attivazione di una popolazione compensativa di ENPs Foxd3-positivo che non si &egrave; espresso il transgene Ednrb-iCre. I nostri risultati evidenziano il ruolo cruciale svolto da Foxd3 durante lo sviluppo di ENS proliferazione progenitrici neurali patterning e differenziazione gliale e possono aiutare a delineare programmi molecolari distinti controllo vagale contro lo sviluppo della cresta neurale sacrale.

Sistema nervoso enterico specifica delezione di Foxd3 sconvolge la differenziazione delle cellule gliali e attiva compensativi progenitori enterici.

&#x8178;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB; &#xFF08;ENS&#xFF09; &#x306B;&#x8ABF;&#x6574;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x79FB;&#x884C;&#x3001;&#x62E1;&#x5F35;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7D4C;&#x3068;&#x4ED9;&#x9AA8;&#x795E;&#x7D4C;&#x5824;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x304B;&#x3089;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x958B;&#x767A;&#x3001;&#x4E2D;&#x306B;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7D4C;&#x5824;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x524D;&#x8178;&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3057;&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x3092;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x3057;&#x3001;ENS. &#x306E;&#x5927;&#x534A;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x543B;&#x5C3E;&#x65B9;&#x5411;&#x306B;&#x79FB;&#x884C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4ED9;&#x9AA8;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x9802;&#x4E0A;&#x306F;&#x3001;&#x5C3E;&#x543B;&#x5074;&#x6CE2;&#x3067;&#x30B3;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x3001;&#x5F8C;&#x8178;&#x306E;&#x8178;&#x7BA1;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x4E2D;&#x306B;&#x8178;&#x795E;&#x7D4C;&#x5824;&#x7531;&#x6765;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE; (ENPs) &#x306F;&#x81EA;&#x5DF1;&#x66F4;&#x65B0;&#x3057;&#x3001;&#x8178;&#x7BA1;&#x306B;&#x5165;&#x529B;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E9;&#x30EB; &#x30FB; &#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x306F;&#x3058;&#x3081;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50; Foxd3 &#x521D;&#x671F;&#x795E;&#x7D4C;&#x5824;&#x7531;&#x6765;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x7387;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x5824;&#x7531;&#x6765;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x3001;ENS. &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x69CB;&#x9020;&#x7269;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x80CE;&#x5150;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x5F8C;&#x306E;&#x8178;&#x5185;&#x306E; Foxd3 &#x5F0F;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;&#xFF1A; Foxd3 &#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x3092;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x3068;&#x3057;&#x3066; ENPs &#x3067;&#x5F37;&#x304F;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x8178;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5F90;&#x3005; &#x306B;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5C0F;&#x8AAC; Ednrb &#x74B0;&#x5883; transgene &#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7D4C;&#x5824;&#x7D30;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8178;&#x306B;&#x79FB;&#x884C;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;Foxd3 &#x3092;&#x524A;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x5F8C;&#x534A;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#x8981;&#x4EF6;&#x3092; Foxd3 ENS &#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3002;&#x30EA;&#x30CD;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E5; Ednrb &#x74B0;&#x5883;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B; Foxd3 &#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x80DA;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; ENPs &#x8178;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x524A;&#x6E1B;&#x3068;&#x9060;&#x4F4D;&#x7D50;&#x8178;&#x306E; Ednrb &#x74B0;&#x5883;&#x7CFB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5909;&#x7570;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x6B20;&#x9665; ENPs &#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x3068;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068; Ednrb &#x74B0;&#x5883;&#x30EA;&#x30CD;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E5;&#x304B;&#x3089;&#x7531;&#x6765;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x53B3;&#x3057;&#x3044;&#x524A;&#x6E1B;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;ENS &#x30EA;&#x30CD;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E5;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x89E3;&#x6790; Ednrb &#x74B0;&#x5883; transgene &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F; Foxd3 &#x6B63; ENPs &#x306E;&#x4EE3;&#x511F;&#x7684;&#x306A;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; Foxd3 &#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;, &#x795E;&#x7D4C;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x542B;&#x3080; ENS &#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x4ED9;&#x9AA8;&#x795E;&#x7D4C;&#x5824;&#x958B;&#x767A;&#x5BFE;&#x8FF7;&#x8D70;&#x795E;&#x7D4C;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x500B;&#x5225;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3092;&#x63CF;&#x304F;&#x306B;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3064;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8178;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x524A;&#x9664; Foxd3 &#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x4E71;&#x3059;&#x3057;&#x3001;&#x4EE3;&#x511F;&#x8178;&#x6EB6;&#x6027;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC7A5; &#xC6A9; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; (ENS) &#xC870;&#xC815;&#xB41C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;, &#xD655;&#xC7A5; &#xBC0F; vagal &#xBC0F; &#xC131; &#xB840; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; vagal &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; foregut &#xC785;&#xB825; &#xD558; &#xACE0; &#xC804;&#xCCB4; &#xC704;&#xC7A5;&#xC744; &#xC815;&#xCC29; &#xD558; &#xACE0; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; ENS.&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; rostro-&#xAF2C;&#xB9AC; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xC131; &#xB840;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xB300; rostral &#xD30C;&#xC5D0; &#xCF5C;&#xB860;&#xC744; &#xC815;&#xCC29; hindgut &#xC7A5;&#xC758; &#xC911;&#xCD94;&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACFC;&#xC815; &#xC911; &#xC7A5;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; progenitors (ENPs) self-renew &#xACE0; &#xC18C;&#xC7A5;&#xC744; &#xCC44;&#xC6B8; &#xB9CC;&#xD07C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAD50; &#xACC4;&#xBCF4;&#xC758; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xC2DC;&#xC791;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xC804; &#xC791;&#xD488; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; Foxd3 &#xC2E0;&#xACBD;&#xB3C4;&#xAC00; &#xBA38;&#xB9AC; &#xC720;&#xB798; progenitors &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0;, multipotency &#xBC0F; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xACBD;&#xB3C4;&#xAC00; &#xBA38;&#xB9AC; &#xC720;&#xB798; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; ENS.&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC124;&#xB9BD; &#xCD08;&#xAE30;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD0DC;&#xC544; &#xBC0F; &#xCD9C;&#xC0DD; &#xD6C4; &#xB300; &#xC7A5; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; Foxd3 &#xC2DD; &#xC124;&#xBA85;: Foxd3 &#xC704;&#xC7A5;&#xC744; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xB85C; Enps&#xC5D0; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0; &#xC7A5; glial &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC810;&#xC9C4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xD55C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC18C;&#xC124; Ednrb iCre transgene vagal &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; midgut&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xD55C; &#xD6C4; foxd3&#xB97C; &#xC0AD;&#xC81C; &#xD558;&#xB824;&#xBA74;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC785;&#xC99D; &#xB2A6;&#xC740; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC744; foxd3&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD314; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;. &#xB9AC;&#xB2C8;&#xC9C0; Ednrb iCre Foxd3 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCCB4; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xC140; &#xB77C;&#xBCA8; &#xC6A9;&#xAE30;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; Enps&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xC6D0;&#xC2EC; &#xCF5C;&#xB860; Ednrb iCre &#xD608;&#xD1B5; &#xC140;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD;&#xC950; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xD588;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xC640; Enps&#xC758; &#xACB0;&#xD568; &#xAC10;&#xC18C; &#xD655;&#xC0B0; &#xBC0F; Ednrb iCre &#xD608;&#xD1B5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; glial &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2EC;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. ENS &#xD608;&#xD1B5;&#xACFC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xD654;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC740; Ednrb iCre transgene &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; Foxd3 &#xC591;&#xC131; Enps&#xC758; &#xBCF4;&#xC0C1; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC870;&#xC0C1; &#xD655;&#xC0B0;, &#xC2E0;&#xACBD; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xAD50; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB4F1; ENS &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; foxd3&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC15;&#xC870; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC131; &#xB840;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD06C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB300; vagal &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC758; &#xC724;&#xACFD;&#xC744; &#xADF8;&#xB9AC; &#xB2E4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774;.

Foxd3&#xC758; &#xC7A5;&#xC758; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; &#xD2B9;&#xC815; &#xC0AD;&#xC81C; glial &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xBC29;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xBCF4;&#xC0C1; &#xC7A5; &#xC6A9; progenitors&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El sistema nervioso ent&eacute;rico (SNE) surge de la migraci&oacute;n coordinada, expansi&oacute;n y diferenciaci&oacute;n de c&eacute;lulas progenitoras de cresta de los nervios vagales y sacro. Durante el desarrollo, las c&eacute;lulas de la cresta de los nervios vagales entrar el foregut y migran en direcci&oacute;n rostro-a-caudal, colonizando todo el tracto gastrointestinal y la generaci&oacute;n de la mayor&iacute;a de la ENS. Nervios de la cresta sacra contribuye a un subconjunto de los ganglios ent&eacute;ricos en el intestino grueso, colonizando el colon en una ola rostral a caudal. Durante este proceso, progenitores de derivados de la cresta neural ent&eacute;ricas (ENPs) autorrenovaci&oacute;n y comienzan expresando marcadores de linajes neuronales y gliales que pueblan el intestino. Nuestro trabajo anterior demostr&oacute; que el factor de transcripci&oacute;n Foxd3 es necesaria en progenitores derivados de la cresta neural para la autorrenovaci&oacute;n y multipotencia establecimiento de m&uacute;ltiples c&eacute;lulas derivados de la cresta neural y estructuras incluyendo la ENS. Aqu&iacute;, describimos Foxd3 expresi&oacute;n dentro del intestino fetal y postnatal: Foxd3 se expres&oacute; fuertemente en ENPs como que colonizan el tracto gastrointestinal y se limit&oacute; progresivamente a las c&eacute;lulas gliales ent&eacute;ricas. Usando un transgen Ednrb-iCre novela para eliminar Foxd3 despu&eacute;s vagal cresta neural c&eacute;lulas migran en el intestino medio, demostramos un &uacute;ltimo requisito temporal para Foxd3 durante el desarrollo de la ENS. Etiquetado linaje de c&eacute;lulas expresa Ednrb-iCre en embriones mutantes Foxd3 revel&oacute; una reducci&oacute;n del ENPs a lo largo de la tripa y la p&eacute;rdida de c&eacute;lulas de linaje Ednrb-iCre en el colon distal. Aunque los ratones mutantes eran viables, defectos en el dise&ntilde;o y distribuci&oacute;n de ENPs se asociaron con reducci&oacute;n de la proliferaci&oacute;n y reducci&oacute;n severa de c&eacute;lulas gliales derivadas del linaje Ednrb-iCre. An&aacute;lisis de la ENS-linaje y diferenciaci&oacute;n en embriones mutantes sugirieron la activaci&oacute;n de una poblaci&oacute;n compensatoria de ENPs Foxd3-positivos que no expres&oacute; el transg&eacute;n Ednrb-iCre. Nuestros resultados destacan el papel fundamental jugado por Foxd3 durante el desarrollo de la ENS como progenitor proliferaci&oacute;n, patrones neuronales y glial diferenciaci&oacute;n y pueden ayudar a delimitar distintos programas moleculares control vagal versus desarrollo de nervios de la cresta sacra.

Sistema nervioso ent&eacute;rico eliminaci&oacute;n espec&iacute;fica de Foxd3 interrumpe la diferenciaci&oacute;n de c&eacute;lulas gliales y activa compensatorias progenitores ent&eacute;ricos.

Planar cell polarity (PCP) describes the polarized orientation of cells within the plane of a tissue. Unlike epithelial PCP, the mechanisms underlying PCP signaling in migrating cells remain undefined. Here, the establishment of PCP must be coordinated with dynamic changes in cell adhesion and extracellular matrix (ECM) organization. During gastrulation, the membrane type-1 matrix metalloproteinase (MT1-MMP or MMP14) is required for PCP and convergence and extension cell movements. We report that the PCP protein Vang-like 2 (VANGL2) regulates the endocytosis and cell-surface availability of MMP14 in manner that is dependent on focal adhesion kinase. We demonstrate that zebrafish trilobite/vangl2 mutant embryos exhibit increased Mmp14 activity and decreased ECM. Furthermore, in vivo knockdown of Mmp14 partially rescues the Vangl2 loss-of-function convergence and extension phenotype. This study identifies a mechanism linking VANGL2 with MMP14 trafficking and suggests that establishment of PCP in migrating gastrula cells requires regulated proteolytic degradation or remodeling of the ECM. Our findings implicate matrix metalloproteinases as downstream effectors of PCP and suggest a broadly applicable mechanism whereby VANGL2 affects diverse morphogenetic processes.

Nathan A. Mundell

Department of Cell and Developmental Biology,
Center for Stem Cell Biology,
Department of Pharmacology,
Department of Cell and Developmental Biology, Center for Stem Cell Biology,
Department of Pharmacology, Center for Stem Cell Biology

Vanderbilt University Medical Center

Isolation and Culture of Neural Crest Cells from Embryonic Murine Neural Tube