Control microbiano y estrategias de monitoreo para ambientes de salas limpias y terapias celulares

Resumen

El protocolo resume las mejores prácticas para minimizar la carga biológica microbiana en un entorno de sala limpia e incluye estrategias como el monitoreo ambiental, el monitoreo de procesos y las pruebas de esterilidad del producto. Es relevante para las instalaciones de fabricación y prueba que deben cumplir con los estándares actuales de buenas prácticas de tejidos y los estándares actuales de buenas prácticas de fabricación.

Resumen

Un programa holístico y bien validado que incorpore batas robustas, limpieza, monitoreo ambiental y medidas de monitoreo de personal es fundamental para minimizar la carga biológica microbiana en las salas de fabricación de terapia celular y los laboratorios de pruebas correspondientes para garantizar que las instalaciones operen en un estado de control. Garantizar la seguridad del producto a través de medidas de control de calidad, como las pruebas de esterilidad, es un requisito reglamentario tanto para las células, tejidos y productos celulares y a base de tejidos (HCT/Ps) mínimamente manipulados (sección 361) como para los más que mínimamente manipulados (artículo 351). En este video, proporcionamos una guía paso a paso sobre cómo desarrollar e incorporar las mejores prácticas asépticas para operar en un entorno de sala limpia, incluyendo batas, limpieza, puesta en escena de materiales, monitoreo ambiental, monitoreo de procesos y pruebas de esterilidad del producto utilizando inoculación directa, proporcionada por la Farmacopea de los Estados Unidos (USP<71>) y el Método Alternativo de Prueba de Esterilidad de los Institutos Nacionales de Salud (NIH). Este protocolo pretende ser una guía de referencia para los establecimientos que se espera que cumplan con las buenas prácticas de tisú actuales (cGTP) y las buenas prácticas de fabricación actuales (cGMP).

Introducción

La implementación de un sólido programa de monitoreo microbiano a través del monitoreo ambiental (EM), monitoreo de procesos y pruebas de esterilidad del producto es un requisito regulatorio para las buenas prácticas tisulares actuales (cGTP) y las buenas prácticas de fabricación actuales (cGMP) en laboratorios de terapia celular¹. Además, la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA) espera que el laboratorio que realiza las pruebas de control de calidad (QC) del producto también emplee instalaciones y controles comparables a los utilizados para las operaciones de llenado aséptico².

Protocolo

1. Prácticas asépticas

1. Personal vestido para un espacio de sala limpia
   NOTA: Este procedimiento se basa en el vestido inicial en un espacio no clasificado, seguido de la entrada en un área de la Organización Internacional de Normalización (ISO) 8 y luego en un área ISO7. Este procedimiento es relevante para los laboratorios que intentan convertir el espacio existente en una función de sala limpia. Idealmente, todo el vestido inicial ocurriría en un espacio clasificado ISO8 (no en un espacio no clasificado).
   1. Asegure el cabello suelto. Lávese las manos y cámbiese a exfoliantes (es preferible la parte superior de manga larga y los pan....

Discusión

Hay varias áreas críticas en este protocolo, incluido el mantenimiento de la técnica aséptica y el flujo de aire unidireccional dentro de las salas limpias y los BSC. Las mejores prácticas incluyen moverse lenta y deliberadamente para minimizar la turbulencia. Las manipulaciones asépticas deben realizarse desde el lado del producto, no desde arriba. Se recomienda el procesamiento de sistemas cerrados y el uso de materias primas esterilizadas terminalmente. Se debe evitar hablar en áreas críticas y apoyarse contra.......

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
20-25°C Incubator			Lab preference
30-35°C Incubator			Lab preference
Alcohol-based hand sanitizer			Lab preference
BacT/ALERT Dual-T instrument	BioMerieux Industry
Beard cover			Lab preference
Biosafety cabinet (BSC)			Lab preference
Cleanroom shoes			Lab preference
Fluidthioglycollate medium (FTM)	Hardy Diagnostics	U84	USP
Handheld cleaning mop	Contec	2665LF
Hypodermic needle			Lab preference
iFA+ BacT/ALERT bottle	Biomerieux	412990
iFN+ BacT/ALERT bottle	Biomerieux	412991
Isokinetic head			Lab preference
Laser particle counter	TSI Incorporated	9500-01
LpH III	Steris	1S16CX
Mirror			Lab preference
Non-sterile bouffant			Lab preference
Non-sterile gloves			Lab preference
Non-sterile shoe covers			Lab preference
Non-sterile sleeve covers			Lab preference
Parafilm			Lab preference
Peridox RTU	Contec	CR85335IR
Plastic bag			Lab preference
Sabouraud Dextrose Agar with Lecithinase and Tween (SABLT)	Hardy Diagnostics	P595	USP, irradiated
Sabouraurd Dextrose Agar (SAB)	Hardy Diagnostics	W565	USP, irradiated
Safety glasses			Lab preference
Scrubs (top and bottom)			Lab preference
Spor-Klenx RTU	Steris	6525M2
Sterile 70% isopropyl alcohol (IPA)	Decon CiDehol	8316
Sterile alcohol wipe			Lab preference
Sterile boot covers	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile coveralls	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile face mask			Lab preference
Sterile gloves			Lab preference
Sterile hood	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile low-lint wipes	Texwipe	TX3210
Sterile mop cleaning pads	Contec	MEQT0002SZ
Sterile sleeve covers	Kimberly Clark	36077
Sterile spreading rod	Fisher Scientific	14665231
Sterile syringe			Lab preference
Tacky mats			Lab preference
Tryptic Soy Agar (TSA)	Hardy Diagnostics	W570R	USP, irradiated
Tryptic Soy Agar with Lecithinase and Tween (TSALT)	Hardy Diagnostics	P520R	USP, irradiated
Tryptic Soy Broth (TSB)	Hardy Diagnostics	U46	USP
Tubing			Lab preference
Vesphene III	Steris	1S15CX
Viable air sampler	Hardy Diagnostics	BAS22K
Vortex			Lab preference