Electroforesis capilar (EC)

Fuente: Laboratorio del Dr. B. Jill Venton - Universidad de Virginia

Electroforesis capilar (CE) es una técnica de separación que separa las moléculas en un campo eléctrico según tamaño y carga. CE se realiza en un tubo pequeño de vidrio llamado un tubo capilar que se llena con una solución electrolítica. Los analitos se separan debido a diferencias en la movilidad electroforética, que varía con la carga, solvente viscosidad y tamaño. Tradicional electroforesis en geles es limitada por la cantidad de voltaje que se puede aplicar porque Julio calefacción efectos arruinará el gel y la separación. Los capilares tienen una relación grande de superficie a volumen superficial y así disiparán mejor el calor. Por lo tanto, los voltajes aplicados para un experimento de la electroforesis capilar son bastante grandes, a menudo 10.000 – 20.000 V.

Electroforesis capilar es útil para separaciones de alto rendimiento. En comparación con cromatografía líquida, separaciones de CE son a menudo más rápida y eficaz. Sin embargo, electroforesis capilar funciona mejor para separar moléculas cargadas, que no es una limitación de la cromatografía líquida. CE tiene una capacidad máxima mayor de cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC), significando las separaciones son más eficientes y más picos pueden ser detectados. La instrumentación puede ser muy simple. Sin embargo, HPLC es más versátil y muchas fases estacionarias y móvil se han desarrollado para diferentes tipos de moléculas.

1. configuración de instrumentación CE

1. Encienda el instrumento de la CE y la computadora. Utilizando el software de la computadora, encienda la fuente de luz para el análisis de la UV permitir que se caliente. Algunos programas tienen un indicador cuando la lámpara está lista para usar (icono de la lámpara ilumina en color).
2. Hacer un archivo de métodos. Configure los parámetros importantes para el funcionamiento de la CE. En este análisis las temperaturas del almacenaje del cartucho y de la muestra

Electropherograms recogidas para dieta Pepsi y Pepsi muestras se muestran en las figuras 1 y 2, respectivamente. Los tres picos de la cafeína, el aspartamo y el ácido benzoico se observan en la dieta Pepsi y tienen tiempos similares de migración como los estándares. Para Pepsi regular, el pico de cafeína está presente pero no los picos del aspartamo y ácido benzoico. El análisis de la CE es rápido como los tiempos de migración son sólo 3-4 minutos.

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Electroforesis capilar se utilizan para muchas separaciones de especialidad. Por ejemplo, se utiliza en la industria farmacéutica para la prueba, para asegurarse de que no hay productos secundarios ni interferentes de la calidad. CE es particularmente útil para la separación de drogas con un grupo amino básico, como las paredes del tubo capilar pueden hacerse neutras con un pH ácido y así la droga no se pegue en el capilar.

Un modo de CE también se utilizó para secuenciar el genoma hum...