Después de completar la eutanasia primaria, verifique la pérdida de respuesta al dolor pellizcando el pie. Coloque la rana sobre su espalda. Fije cada extremidad.
Corte a través de la línea media de la piel, luego corte lateralmente para crear dos colgajos de piel. Agarre la línea alba con fórceps y retírela de la cavidad celómica. Cortar a través de la musculatura.
Corte o fije todas las solapas fuera del camino. Corte a través de los huesos coracoides con la ayuda de tijeras de disección y elimine cualquier exceso de tejido para obtener un mejor acceso al corazón. A continuación, cambie suavemente el estómago del Xenopus disecado a la parte superior del lóbulo hepático izquierdo.
Agarre suavemente la punta de un pulmón con pinzas de tejido y tire de ella fuera de la cavidad celómica, luego fije el pulmón a través de la punta. Tire del pericardio delgado con pinzas de tejido. Usando la punta de un par de tijeras de iridectomía, perfore suavemente el pericardio sin cortar ningún tejido subyacente.
Despegue el pericardio de las cámaras del corazón. Agarre suavemente el ápice del ventrículo con fórceps. Sin perforar el ventrículo, inserte la aguja a través del cierre de los fórceps en la cámara del ventrículo.
Sujete las pinzas de tejido en su lugar con un soporte de aguja o hemostático. Inicie el flujo de la bomba a aproximadamente cinco mililitros por minuto. Esto engullirá las cámaras del corazón y el tronco arterial.
Use tijeras para hacer una muesca en la aurícula derecha. Continúe el flujo de la bomba hasta que la vasculatura del estómago se blanquee. Lance la aurícula del corazón izquierdo.
Aumente el caudal de la bomba a 10 mililitros por minuto. Con una pipeta de transferencia, enjuague la cavidad celómica y los medios de perfusión. Si los órganos cambian durante el enjuague, desplácelos suavemente hacia atrás para mantener la visibilidad del estómago y los pulmones.
Para ayudar a visualizar la perfusión que fluye fuera del corazón, las aurículas pueden reducirse aún más. Mantenga la aguja en su lugar hasta que la vasculatura del estómago y los pulmones se hayan blanqueado y el perfusión que fluye desde el corazón parezca claro. Se observó una perfusión exitosa en todos los tejidos, excepto en el hígado, haciéndolos claramente más ligeros y menos saturados de sangre.
Esto es más visible en los albinos.
