Comience a extraer el corazón del donante neonatal anestesiando y esterilizando a la rata, y haciendo una incisión horizontal en el xifoides con un bisturí de 15 hojas bajo un microscopio quirúrgico de 12,5x. A continuación, utilice unas tijeras para crear incisiones verticales lateralmente hasta las axilas, en ambos lados. Extirpe la pared torácica anterior con otra incisión horizontal debajo del cuello.
Diseccionar la vena cava inferior, o VCI, la vena cava superior derecha e izquierda, o VCS, y los vasos pulmonares con tijeras. Rodea y liga los vasos opacos con una sutura de seda 7-0. Empuje ligeramente el diafragma hacia abajo con unas pinzas y administre tres mililitros de solución Krebs-Henseleit modificada con alto contenido de potasio y helada en la aurícula derecha perforando la VCI con una aguja de calibre 30.
Corta la VCI, la VCS y los vasos pulmonares con unas tijeras. Asegure la longitud adecuada seccionando las arterias pulmonares lo más lejos posible, y la aorta, distal al tronco braquiocefálico, utilizando un bisturí de hoja número 11. Enjuague el corazón con la solución cardiopléjica helada con una jeringa de tres mililitros.
Coloque la rata anestesiada en un estante oblicuo. Asegure sus dientes frontales con una cuerda y coloque la cabeza hacia el cirujano. Coloque la luz en la parte exterior del cuello en el área de las cuerdas vocales.
Sujete la lengua con dos dedos y empújela suavemente hacia arriba y hacia la izquierda para obtener una visibilidad óptima de la intubación. Ahora, use una cánula de dos pulgadas de calibre 18 para una rata de 100 a 150 gramos y asegure el tubo intratraqueal con cinta adhesiva. Conecte la cánula de intubación al ventilador para animales pequeños y ajuste la configuración según el tamaño del animal, siguiendo las instrucciones del fabricante.
Después de intubar a la rata, realice una laparotomía de la línea media con un bisturí de 15 hojas para hacer la incisión en la piel. Abra la pared abdominal anterior con unas tijeras y movilice los intestinos hacia el cuadrante superior derecho. A continuación, exponga la aorta abdominal retroperitoneal y la VCI, utilizando aplicadores de punta de algodón.
Cubra los intestinos con una gasa tibia empapada en solución salina y use retractores para mantener una exposición óptima de la VCI y la aorta abdominal. Ahora, realice una disección roma de la VCI infrarrenal y de la aorta abdominal hasta la bifurcación. Ligue las arterias y venas ramificadas infrarrenales opacas con una sutura de nailon 10-0.
Transportar el corazón del donante extraído en un recipiente quirúrgico estéril que contenga tampón Krebs-Heneseleit al campo quirúrgico. Asegúrese de irrigar el corazón del donante de forma intermitente con una solución cardiopléjica helada. A continuación, separe el tronco pulmonar y la aorta descendente con unas microtijeras, e irrigar el corazón del donante con una solución cardiopléjica helada.
A continuación, aplique cuatro pinzas vasculares atraumáticas en los segmentos distal y proximal de la aorta infrarrenal y la VCI. Realizar una aortotomía con microtijeras para realizar dos pequeños cortes horizontales. Luego, coloque el corazón del donante en el lado izquierdo de la aorta.
Asegure la aorta infrarrenal del receptor y la aorta ascendente del donante y a un lado en las posiciones de las 12 y las seis en punto de la aortotomía con suturas. Proceda con la tercera y cuarta sutura en las posiciones de las tres y las nueve en punto, volteando suavemente el corazón hacia el lado izquierdo de la aorta después de la tercera sutura. Finalice la anastomosis arterial añadiendo una o dos suturas a cada espacio intersectorial.
Ahora, gira la rata en sentido contrario a las agujas del reloj, de modo que la cabeza mire hacia la mano izquierda del cirujano. Desplace el corazón del donante hacia el lado izquierdo de la aorta abdominal para obtener una vista óptima de la VCI. Realizar una venotomía en la VCI, ligeramente proximal a la anastomosis aórtica.
Utilizando una cuchilla de 11 para punción y microtijeras para ajustar el tamaño de acuerdo con el diámetro del tronco pulmonar del donante, enjuague la luz intracoval con solución salina heparinizada. A continuación, realice la anastomosis venosa entre la VCI del receptor y el tronco pulmonar del donante colocando suturas interrumpidas de nailon 11-0 en la pared posterior del vaso, comenzando en las posiciones de las 12 y las seis en punto. Colocar una sutura continua de nylon 11-0 en la pared frontal, colocar tiras de esponja de gelatina absorbible sobre las anastomosis y retirar las pinzas microvasculares, empezando por las distales.
Asegúrese de que los vasos coronarios se llenen y de que el corazón del donante comience a latir poco después de la liberación de las pinzas proximales. Aplique una ligera presión con un aplicador de punta de algodón sobre las esponjas para lograr una hemostasia óptima. Vuelva a colocar con cuidado los intestinos en el abdomen, teniendo cuidado de no distorsionar la anastomosis arterial y venosa.
Cierre la pared abdominal y deje que el animal se recupere. Se muestra un corte horizontal del injerto donante resecado a nivel ventricular medio de los ventrículos derecho e izquierdo. El análisis histológico indicó que el tejido de fibroelastosis endocárdica tenía altas cantidades de fibras organizadas de colágeno y elastina.
Tejido de fibroelastosis endocárdica, doblemente teñido para VE-Cadherin y alfa-SMA. CD-31, fosfo-SMAD2 y SMAD3, CD-31 y o caracol indicaron transición endotelial a mesenquimatosa.
