Para empezar, tome los extractos acuosos y etanólicos obtenidos de la Gracilaria gracilis seca. En una microplaca de 96 pocillos, dispense dos microlitros de cada muestra y 198 microlitros de DPPH disueltos en etanol absoluto. Luego, usando un espectrofotómetro de microplacas, mida la absorbancia a 517 nanómetros.
Tome los queratinocitos humanos cultivados en placas de 96 pocillos durante la noche. Agregue dos microlitros de los extractos disueltos de DMSO a 198 microlitros del medio en pocillos de microplacas. Retire el medio de cultivo.
Añadir 100 microlitros de MTT a las células e incubar en la oscuridad durante 30 minutos. Para solubilizar los cristales de formazano intracelular, añadir 100 microlitros de DMSO. Con un lector de microplacas, mida la absorbancia a 570 nanómetros.
La prueba DPPH demostró que la temperatura de 40 grados centígrados mostró valores de inhibición más altos de la actividad oxidante en comparación con los extractos obtenidos a temperatura ambiente o 70 grados centígrados. No se observaron efectos citotóxicos en los queratinocitos humanos, lo que sugiere que a la concentración máxima del ensayo, tanto los extractos acuosos como los etanólicos son seguros para el uso cutáneo.
