Para comenzar, abra el software compatible con el instrumento de bastidor de carga y seleccione un archivo de control existente para el análisis. Encienda el actuador. En el menú de calibración, rompa la lectura de fuerza de la célula de carga y ajuste el desplazamiento del actuador a cero.
Después de asegurarse de que el mouse esté completamente anestesiado con el pellizco de los dedos de los pies o la cola, colóquelo en una posición prona en la plataforma. Coloque la parte inferior de la pata verticalmente entre dos dispositivos de carga. Coloque el pie en el recorte del accesorio superior y la rodilla en la copa del accesorio inferior.
Ajuste manualmente la altura del accesorio inferior para aplicar una precarga de uno a dos Newton y apriete el tornillo de fijación para mantener el mouse en su posición. A continuación, aplique una sola carga de compresión a una fuerza objetivo de 12 a 15 Newton. Establezca la velocidad de carga en el archivo de control y confirme utilizando los datos de desplazamiento de fuerza.
Si se aplica una velocidad de carga más lenta, detenga la carga de compresión inmediatamente después de la lesión para evitar daños a otros tejidos articulares. Prepare una jeringa de insulina de calibre 29 para inyectar una solución de sonda activable por fluorescencia. Coloque al ratón anestesiado de lado con el hocico en un cono nasal.
Con la mano que no se inyecta, retraiga suavemente la piel alrededor del ojo para estabilizar la cabeza y sobresalir del ojo. Con la mano de inyección, incline el bisel de la jeringa hacia el ojo. Incline la jeringa en paralelo al cuerpo del ratón y proceda avanzando con cuidado la jeringa más allá del ojo hasta que se encuentre una resistencia rígida.
Inyecte lentamente la solución de la sonda en el seno retroorbitario y retire la aguja de la cuenca del ojo. Finalmente, aplique ungüento en el ojo inyectado.