Para comenzar, capture imágenes de glomérulos marcados bajo un microscopio de fluorescencia confocal o de hoja de luz. Importe los archivos de imagen en el software de análisis de imágenes. Haga clic en el botón de superficie para crear una nueva superficie.
Siga la guía en la parte inferior izquierda de la pantalla. Haga clic en el botón siguiente. Marque la casilla de la opción suavizar e introduzca un número para controlar el detalle de la superficie.
Seleccione la resta de fondo en el umbral y rellene el cuadro con el diámetro medio aproximado de los glomérulos. Haga clic en el botón siguiente, ajústelo si es necesario y haga clic en el botón siguiente. Seleccione el rango adecuado y haga clic en el botón siguiente para crear una superficie.
A continuación, haga clic en filtrar, seguido del botón Agregar para agregar esfericidad y filtrar los objetos no esféricos. Haga clic en el botón Duplicar para copiar esta nueva superficie. Haga clic en el botón de estadísticas, seguido del botón general.
El software presentará el número de glomérulos como el número total de superficies. Para calcular el volumen de los glomérulos, haga clic en el botón de selección para seleccionar los objetos de destino y presentar el volumen de cada objeto. Exporte estadísticas a una hoja de cálculo para su posterior análisis.
Para calcular el volumen de la rebanada, o riñón entero, primero, importe las imágenes en el software de análisis de imágenes. Después de hacer clic en el botón de superficie e introducir un número en la opción de suavizado, seleccione la intensidad absoluta y el umbral. Haga clic en el botón siguiente.
Ajuste la superficie hasta que cubra todo el tejido y haga clic en el botón siguiente para crear la superficie. Haga clic en el botón de selección para seleccionar la superficie de todo el tejido y presentar el volumen del tejido. Por último, exporta las estadísticas a una hoja de cálculo.
Utilizando un software de procesamiento de imágenes, se contó el número y el volumen de glomérulos en un corte de riñón, en un riñón completo o en una tira. A partir de estos valores, se pudo calcular la relación de volumen y la frecuencia de los glomérulos.
