Procedimiento quirúrgico para preparar el modelo ortotópico de glioblastoma en ratón

Para empezar, prepare el ratón para la cirugía y colóquelo en el marco estereotáxico. Luego, levante la piel del cráneo y sostenga las tijeras entre el ojo derecho y la oreja para crear una incisión. Cortar hacia el lado izquierdo del cráneo, siguiendo las marcas de incisión y retirar el colgajo redondo de piel resultante.

Con una hoja de bisturí o una microcureta, rasque suavemente la superficie del cráneo para eliminar el periostio. Use solución salina y una aspiradora para mantener el área quirúrgica limpia de escombros. Rascar el periostio para asegurar una mejor adherencia al pegamento de cianoacrilato y a un cemento dental.

Luego, con un lápiz esterilizado en autoclave, marque la posición de la ventana craneal. Sostenga el taladro en la mano dominante y una jeringa o fórceps en la mano no dominante. Aplique solución salina fría en el calvario para evitar el sobrecalentamiento y mantener limpia la vista quirúrgica.

Mientras perfora, coloque el engobe de la cubierta de vidrio en la parte superior del cráneo para confirmar que encaja exactamente dentro de la ventana craneal. Una vez que sea posible presionar el colgajo de cráneo, use fórceps para extraer cuidadosamente el fragmento del campo quirúrgico. Si se produce un sangrado menor, use una esponja hemostática para la aplicación tópica de solución salina helada con una ligera presión para ayudar a reducir la pérdida de sangre.

Tome las células de glioma C6 cultivadas para su implantación. Aspire un microlitro de suspensión celular en una jeringa de microlitros hermética al gas. Luego, coloque la jeringa dentro del marco estereotáxico.

Para implantar células para obtener imágenes de dos fotones, inyecte 0,5 microlitros de la suspensión celular, a 0,8 milímetros de profundidad en el área superficial del cerebro. Después de la inyección, retraiga la aguja y salga del tejido cerebral. Ahora, mueva la barra de la cabeza y la cubierta de vidrio del alcohol a una solución salina y use una punta de vacío o fórceps para llevar estos componentes al sitio quirúrgico.

Coloque el engobe de la cubierta de vidrio dentro de la ventana craneal y aplique una pequeña cantidad de pegamento de cianoacrilato. Elimine cualquier derrame de pegamento en el engobe de la cubierta de vidrio con un aplicador de punta de algodón o raspándolo suavemente con un bisturí. Asegure el engobe de la cubierta de vidrio en la ventana craneal y aplique la barra de cabeza.

Mezcle el cemento dental, coloque la barra de cabeza y aplique cemento en el área circundante. Limpie cualquier cemento superfluo con una punta de jeringa, bisturí o punta de taladro. Después de sellar la ventana craneal, verifique si hay áreas expuestas del cráneo.