Para comenzar, encienda el fotómetro de masa y déjelo funcionar durante una hora antes de iniciar cualquier medición. Encienda la alimentación y active el botón de aislamiento para activar la mesa antivibración. A continuación, encienda el compresor de aire para activar la caja MicrofluidX.
A continuación, inicie el software de adquisición de datos seguido del software de control MicrofluidX. Para cargar la muestra y el calbirant, coloque el tubo de centrífuga de calbirant en la ranura número cuatro y el tubo de centrífuga de muestra en la ranura número cinco dentro de la caja MicrofluidX. Coloque las soluciones de limpieza, CS1, CS2 y CS3 en las posiciones uno, dos y tres respectivamente en la caja de MicrofluidX.
Coloque la tapa que conecta la línea tampón a la botella tampón de 200 mililitros de pH 7.4. A continuación, coloque el chip MicrofluidX en una placa de preparación. Conecte el otro extremo del tubo del sensor de la unidad de flujo S a la entrada de muestra del primer canal en el chip MicrofluidX que completa la línea de muestreo.
Inserte el otro extremo del sensor de la unidad de flujo L en la entrada del búfer del primer canal del chip MicrofluidX, finalizando la línea del tampón. Para la recolección de salida, conecte un tubo a la salida del primer canal en el chip MicrofluidX y coloque el otro extremo en un recipiente de desechos, matraz o vaso de precipitados. Aplique una pequeña cantidad de aceite de inmersión para microscopio en la lente del objetivo del fotómetro de masas.
Coloque el chip MicrofluidX en el soporte del fotómetro de masas, asegurándose de que la entrada de la muestra esté orientada hacia arriba y asegúrela con las abrazaderas de la platina. Utilice el software de adquisición de datos para ajustar la etapa, alineando el área de observación del canal uno con el objetivo del fotómetro. A continuación, cierre la tapa del fotómetro de masas y active la función de búsqueda de enfoque de dilución de gotas en el software de adquisición de datos.
Inspeccione el anillo de enfoque blanco en la esquina inferior izquierda de la interfaz del software. Si hay espacios que indiquen burbujas de aire en el aceite de inmersión, aumente la velocidad de la etapa al máximo y mueva suavemente la etapa de lado a lado para eliminarlas. Presione el botón de grabación para comenzar una medición de un minuto, asegurándose de que no haya impurezas presentes durante la medición.
Retire la tapa de la botella tampón de 200 mililitros con pH 7,4 y colóquela en la botella tampón de 200 mililitros con pH 5,0. Coloque el chip MicrofluidX en una placa de preparación como se demostró anteriormente y utilice el segundo canal del chip MicrofluidX en lugar del primero para la recolección del flujo de salida. En el software de control MicrofluidX, cambie el interruptor M a la posición cinco.
Ajuste el caudal de la línea de muestreo a ocho microlitros por minuto y asegúrese de que la presión en la línea de muestreo permanezca por debajo de 350 milibares. Al calcular los caudales, haga coincidir la diferencia total en la tasa baja con el factor de dilución de muestra deseado. Después de concluir el experimento, siga el protocolo de limpieza para mantener la limpieza de las líneas.
