Preparación de muestras para 2D-HPLC-MS de péndulo de acónito

Comience la preparación de la muestra pesando el casquillo de péndulo de acónito, o APB. Usando una balanza de sensibilidad de uno por 10.000, pese 0,25 gramos de APB seco en un tubo de microcentrífuga de tres mililitros. Agregue 2,5 mililitros de metanol y luego sonicase durante 30 minutos a una potencia de 240 vatios y una frecuencia de 40 kilohercios.

Centrifugar la muestra sonicada a 1,2 G durante cinco minutos y recoger el sobrenadante. Fíltralo a través de un filtro de membrana de 0,22 micras. A continuación, prepare la fase móvil bidimensional utilizando nitrilo de acetilo como fase orgánica o fase B, y agua ultrapura que contenga ácido fórmico al 0,1% como fase acuosa o fase A.Después de realizar la filtración bifásica a través del filtro de 0,22 micras, someta las fases móviles a sonicación ultrasónica a 40 kilohercios durante 15 minutos.

Purgue la fase móvil reemplazada para eliminar las burbujas. Seleccione una columna C18 como columna 1D y una columna hidrofílica como columna 2D, y móntelas en el instrumento. Para ajustar la relación de derivación adecuada, conecte el contorno del instrumento 2D-LC a través de una T a la entrada de masa y el otro extremo de la T a una línea derivada.

Ajuste el caudal a un valor adecuado para garantizar el caudal adecuado para el espectro másico.