Para comenzar, tome 50 mililitros cada uno, un medio de fibroblastos y un medio epitelial vaginal, en tubos cónicos separados de 50 mililitros. Desgasifique el medio calentado bajo un vacío estéril durante cinco minutos. A continuación, desinfectar las bandejas limpias con CaviCide y etanol para el módulo de flujo dinámico.
Retire los pods del embalaje y colóquelos en las bandejas del módulo de flujo dinámico. Pipetear dos mililitros de medio epitelial vaginal desgasificado en el depósito de entrada apical. Y agregue tres mililitros de medio de fibroblastos desgasificados al depósito de entrada basal.
Pipetear 500 microlitros de medio epitelial vaginal desgasificado hasta el reservorio de salida apical y 500 microlitros de medio fibroblasto desgasificado hasta el reservorio de salida basal. Deslice las bandejas que contienen los pods en el módulo de flujo dinámico. Ahora, ejecute el ciclo principal dos veces.
Si no se forma una gota después de cuatro ciclos de cebado, haga contacto directo con el puerto dentro del depósito de salida de la cápsula. Pipetee 200 microlitros del medio respectivo para permitir que el medio fluya entre el depósito en el canal para cebar manualmente las vainas. A continuación, retire las puntas de pipeta de los chips de órganos sembrados con fibroblastos uterinos humanos.
Coloque una gota del medio respectivo sobre todos los puertos de cada chip. Deslice las papas fritas en las vainas y colóquelas en las bandejas. Aspire cualquier medio en la superficie de las virutas, luego deslice cada bandeja en un módulo de flujo dinámico.
A continuación, en el módulo, configure la parte superior e inferior como líquido, el flujo apical a 15 microlitros por hora, el flujo basal a 30 microlitros por hora, el estiramiento a 0% y la frecuencia a cero hercios. Ejecute el ciclo de regulación en el módulo y permita el flujo durante la noche. En el dispositivo de chip de órgano se observó una lámina continua de células epiteliales vaginales que formaban progresivamente múltiples capas celulares después de la diferenciación.
