Para empezar, pesa cinco gramos de polímero superabsorbente seco o SAP, y mézclalo con 500 mililitros de solución nutritiva MMS1. Aproximadamente una semana antes del montaje, germine las semillas de plantago lanceolata en papel secante humedecido con solución nutritiva MMS1 en una placa de Petri. Luego incube la placa de Petri en la oscuridad a temperatura ambiente.
Para comenzar a ensamblar el sistema SAP-AS, coloque el tallo de la plántula en la muesca del costado de la placa de Petri con la raíz hacia adentro y los cotiledones o hojas y tallos hacia afuera. Cubre las raíces con aproximadamente 1,5 a dos gramos de vermiculita. A continuación, hidrata el compartimento de la raíz con ocho mililitros de solución nutritiva MMS1.
Despeje un espacio libre de vermiculita a lo largo del filtro de malla de nailon en el costado del compartimiento de la raíz y agregue cinco gramos de SAP hidratado. A continuación, añada 15 gramos de SAP hidratado en el compartimento de relleno alto. Ahora alinee las muescas laterales de la tapa y el fondo de la placa de Petri para evitar dañar el tallo y cierre la tapa.
A continuación, selle la placa de Petri con una tira de parafilm, uniendo la base y la tapa. Pese la placa de Petri y registre su peso promedio para determinar cuándo el SAP-AS necesita rehidratación. A continuación, apila las placas de Petri para optimizar el espacio.
Use una cubierta opaca con una abertura en el costado para mantener las plántulas en la oscuridad. Con una vela de llama o un mechero Bunsen, caliente la pipeta de vidrio y estire el tubo de vidrio a medida que se derrite para separarlo. Bajo un microscopio estereoscópico, rompa la punta de la pipeta de vidrio para reducir su diámetro interno.
Ahora abra la placa de Petri y ubique dónde se colocará la espora. Despeje un espacio entre los cinco gramos de savia hidratada a lo largo de la membrana del filtro de malla de nailon para exponer una sección de una raíz. Bajo el microscopio de disección, recoja una espora en una suspensión líquida con la pipeta extruida, mientras pipetea un poco de líquido antes de recolectar la espora.
Después de eso, deposite con cuidado la espora en la raíz. Luego, reemplace la savia sobre el fragmento de raíz para mantener un microambiente húmedo para la raíz y la espora. Después de 24 horas, si es necesario, riegue el compartimento de la raíz, teniendo cuidado de no lavar la espora.
Alinee las muescas laterales de la tapa con la parte inferior de la placa de Petri para evitar dañar el tallo de la plántula y cierre la placa de Petri con la tapa.
