Después de anestesiar al ratón, colóquelo en posición supina sobre una superficie quirúrgica caliente. Aplique ungüento para los ojos y realice pinzamientos de las almohadillas de los pies para asegurarse de que el animal esté adecuadamente anestesiado. Levanta la piel del abdomen.
Con unas tijeras, haz una incisión longitudinal en la línea media desde el ombligo hasta la apófisis xifoides y caudalmente hacia la base del abdomen. Haga una incisión similar en el peritoneo sin perforar ni dañar los intestinos, el diafragma o el hígado. A continuación, realice una incisión transversal de longitud completa en ambos lados del ombligo para expandir el campo quirúrgico.
Luego, use una gasa limpia empapada en PBS tibio para mover el intestino grueso y delgado hacia la derecha y exponer la VCI por debajo. Con un hisopo de algodón, manipule suavemente los segmentos intestinales dentro del campo quirúrgico para ubicar la vena porta en la raíz del mesenterio. Luego, use un microscopio de disección para pasar cuidadosamente una sutura de prolene 7-0 detrás de la vena porta cerca del hilio hepático.
A continuación, inserte una aguja de media pulgada de calibre 28 de una jeringa de insulina heparinizada de un centímetro cúbico en la VCI. Recoja de 0,2 a 0,3 mililitros de la muestra de sangre. Deje la aguja dentro de la VCI para evitar el sangrado que se produciría con la extracción.
Ahora, ate suavemente la ligadura de prolene 7-0 alrededor de la vena porta. Inserte la aguja de media pulgada de calibre 28 de otra jeringa de insulina heparinizada en la vena porta. Aspire para recoger lentamente hasta 0,5 mililitros de sangre de la vena porta.
Una vez que se complete la recolección de sangre, retire las agujas de la VCI y la vena porta. Transfiera las muestras de sangre de las jeringas a tubos heparinizados de 1,5 mililitros. Coloque los tubos en hielo para su procesamiento futuro.
