Para empezar, con una pipeta serológica dispense dos mililitros de caldo de lisogén en autoclave en dos tubos de ensayo estériles de 14 mililitros. dentro de una campana laminar. Añadir 20 microlitros de filtro esterilizado 5%Tween 80 a los tubos de ensayo con una micropipeta.
A continuación, añada la crioculación de Mycobacterium smegmatis en un tubo con un asa de inoculación. Incubar los tubos durante 48 horas en una incubadora agitadora a 300 rotaciones por minuto y 37 grados centígrados. Para preparar los cultivos secundarios, dispense dos mililitros de caldo de lisogén en autoclave en dos tubos de ensayo estériles de 14 mililitros.
A continuación, utilice una micropipeta para añadir 20 microlitros de filtro esterilizado 5%Tween 80 a los tubos de ensayo. A continuación, con una micropipeta, transfiera 20 microlitros del cultivo primario a uno de los tubos. Incubar los cultivos en una incubadora agitadora a 300 rotaciones por minuto y 37 grados centígrados hasta que alcancen un OD600 de 0,6 a 0,8.
