Para empezar, en una campana laminar, dispense seis mililitros de los medios de Soutan suplementados con glucosa al 2% en los pocillos de una placa de seis pocillos. Inocular los pocillos con 120 microlitros de los cultivos secundarios de mycobacterium smegmatis. Mantenga uno sin inocular bien como control de medios.
A continuación, pipetee el cultivo hacia arriba y hacia abajo con una micropipeta de 1 mililitro para una mezcla uniforme. Cubra la tapa y selle cuidadosamente la placa con una película de parafina. Incubar la placa en una incubadora estática a 37 grados centígrados durante siete días.
Para una estimación visual del crecimiento de la biopelícula, coloque las placas en un sistema de documentación de gel bajo una iluminación de luz epi blanca. Para medir el peso seco, pesa una hoja de papel secante. Extraiga la biopelícula de la placa de seis pocillos y transfiérala al papel con una espátula.
Recoja cuidadosamente la mayor parte de la biopelícula del cultivo. Coloque el biofilm sobre el papel secante. Coloque el papel secante en una incubadora hasta que la biopelícula se seque por completo.
A continuación, mida el peso combinado del papel y la biopelícula. Las películas de biofilm fueron visibles a partir del día 3. La reticulación de los cultivos mejoró con la adición de 2% de glucosa a los medios de Soutan.
El desarrollo de la biopelícula fue visible entre los días 3 a 6. El día 3 se observó una película con ligera reticulación. Esta película maduró el día 5 y se desintegró a partir del día 6.
