El mezclador de chorro de impacto confinado dirige dos flujos de alto número de Reynolds entre sí dentro de una cámara de mezcla más grande. El momento lineal de cada chorro se disipa en la formación de vórtices turbulentos a escala micrométrica que provocan una mezcla rápida y uniforme de las corrientes de disolvente y antidisolvente. Para comenzar a formular las nanopartículas lipídicas, llene dos jeringas de cinco mililitros con etanol y bloquee cada una en un puerto de entrada del chorro de impacto confinado, o mezclador CIJ.
Deprima rápidamente las jeringas y recoja el efluente del mezclador como residuo. Retire las jeringas de descarga de etanol de la CIJ. Sople un chorro de nitrógeno seco a través de los adaptadores de entrada para secar los canales internos de la CIJ.
Mezclar las soluciones madre lipídicas y diluirlas con etanol en un tubo de microcentrífuga de 1,5 mililitros. Diluir 100 milimolares de acetato de pH 4 a 10 milimolares en un volumen total de cuatro mililitros. Para preparar el flujo de antisolvente, mezcle ARN con tampón de acetato en un tubo de 1,5 mililitros.
Prepare 500 microlitros de solución en una jeringa de un mililitro. Invierta la jeringa y expulse el aire del chorro acuoso de antidisolvente. Del mismo modo, recoja 500 microlitros de solución lipídica en una jeringa de un mililitro.
A continuación, invierta la jeringa para expulsar el aire de la corriente de disolvente etanoico. Coloque el mezclador CIJ limpio sobre el vial del baño de enfriamiento. Acople las dos jeringas a los puertos de entrada del mezclador CIJ.
Presione ambas jeringas rápidamente para mezclar las corrientes de solvente y antisolvente y recolectar nanopartículas lipídicas en el baño de enfriamiento. Retire el mezclador CIJ del baño de enfriamiento con las jeringas aún conectadas. Sostenga el CIJ sobre un contenedor de residuos y retire las jeringas, permitiendo que el volumen residual de retención fluya hacia el contenedor de residuos.
Ahora tape el baño de enfriamiento que contiene dispersión de nanopartículas lipídicas y agite suavemente el vial.
