No agencias financiadoras apoyó este trabajo.

1. solución de la muestra
<ol>
	<li>Calcular el límite de limpieza (CL) de un medicamento basado en el arrastre permisible máxima (MACO) según los criterios de dosis terapéutica. Nota: Aquí, el límite de limpieza (CL) para la droga A se ha calculado que 2,4 μg por 50 cm2 basado en el arrastre permisible máxima (MACO) según los criterios de dosis terapéutica. La verificación de la limpieza se ejecuta en el 50%, 100% y 150% límite de limpieza. La verificación de la limpieza ha sido evaluada para dos formulaciones (carga 2,5% y el 60% de la droga w/w).</li>
</ol>
2. procedimiento de limpieza para cupones
<ol>
	<li>Planteamiento inicial<ol>
		<li>Limpiar los cupones por lavado y limpieza de la superficie de 10-15 s dos veces con agua y dos veces con metanol para eliminar cualquier depósito residual. Realizar este proceso en la campana como el metanol es tóxico y altamente volátiles.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Enfoque avanzado<ol>
		<li>Utilizando las soluciones de limpieza en el lugar<ol>
			<li>Establecer el sonicador a temperatura ambiente. El sonicador no tiene ningún ajuste de la configuración de energía, por lo tanto, el tiempo se ajusta para dar resultados de limpieza adecuados.</li>
			<li>Introducir los cupones en agua de calidad de alto rendimiento de la cromatografía líquida (HPLC) y someter a ultrasonidos durante 2 min.</li>
			<li>Introducir los cupones en la solución de detergente alcalina 0.1% en agua de calidad HPLC y someter a ultrasonidos durante 2 minutos.</li>
			<li>Introducir los cupones en agua HPLC y someter a ultrasonidos durante 2 minutos.</li>
			<li>Introducir los cupones en 0.1% de solución de detergente ácido en agua HPLC y someter a ultrasonidos durante 2 min.</li>
			<li>Introducir los cupones en agua HPLC y someter a ultrasonidos durante 2 minutos.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Utilizando peróxido de ácido-base Nota: Este es un método alternativo incluido con ácido, base y peróxido en lugar de detergentes alcalinos y ácidos.<ol>
			<li>Establecer el sonicador a temperatura ambiente. El sonicador no tiene ningún ajuste de la configuración de energía, por lo tanto, el tiempo se ajusta para dar resultados de limpieza adecuados.</li>
			<li>Introducir los cupones en agua y someter a ultrasonidos durante 2 min.</li>
			<li>Introducir los cupones en hidróxido de sodio de 0,1 M y someter a ultrasonidos durante 2 min.</li>
			<li>Introducir los cupones en agua y someter a ultrasonidos durante 2 min.</li>
			<li>Introducir los cupones en ácido clorhídrico de 0,1 M y someter a ultrasonidos durante 2 minutos.</li>
			<li>Introducir los cupones en agua y someter a ultrasonidos durante 2 min.</li>
			<li>Introducir los cupones en 0,1 mg/mL de NaNo2 y someter a ultrasonidos durante 2 minutos.</li>
			<li>Introducir los cupones en agua y someter a ultrasonidos durante 2 min.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. procedimiento de vajillas
<ol>
	<li>Monte los cupones de acero inoxidable en la parte inferior de un vaso de plástico de 250 mL (o 500 mL) usando una cinta de doble cara.</li>
	<li>Sostener el vaso para hacer spiking y vajillas procesos fácil. Esto también minimiza algunos accidentes indeseables como pasarse la esquina al aplicador.</li>
	<li>Infundir un volumen a una concentración específica y formulación (por ejemplo, 200 μL de 12 μg/mL en la carga de droga w/w A 2,5%) en un patrón whirly en la superficie del cupón utilizando una pipeta volumétrica.</li>
	<li>Espere hasta que se seque la superficie del cupón (~ 3-10 minutos dependiendo de la volatilidad de la muestra).</li>
	<li>Sumerja un hisopo seco en un vial con 2 mL de diluyente (metanol: ácido fórmico 100:0.2 volumen/volumen).</li>
	<li>Quitar el disolvente sobrante presionando el hisopo contra la parte interior del frasco.</li>
	<li>Firmemente, limpie la superficie del cupón con movimientos de lado a lado incluso se solapen hasta la zona de pruebas2 total 50 cm se limpia con un lado de una esponja húmeda.</li>
	<li>Repita el proceso de limpieza (paso 3.7) utilizando el mismo lado de la esponja.</li>
	<li>Limpiar dos veces los cuatro bordes de cupón.</li>
	<li>Girar el hisopo hacia el otro lado y gire el cupón de 90°, hacia la derecha o hacia la izquierda; así, girando la dirección de vajillas por 90°.</li>
	<li>Repita el desmoldante como se detalla en los pasos 3.7-3.9. Después del muestreo de la superficie, cortar la cabeza de la esponja con unas tijeras en el vial de disolvente.</li>
	<li>Repita el proceso desmoldante con un segundo hisopo girando el cupón 90° hacia la misma dirección elegida antes.</li>
	<li>Someter a ultrasonidos el frasco que contiene dos cabezas de hisopo durante 5 minutos, luego vortex por 10 s.</li>
	<li>Transferir la solución a un frasco HPLC y etiqueta como solución de trabajo.</li>
</ol>
4. cálculo de recuperación
<ol>
	<li>Recuperación de la muestra<ol>
		<li>Mezcla 200 μL del cupón clavar soluciones con 1.800 μl de diluyente para preparar las soluciones de control.</li>
		<li>Haga funcionar el sistema de la cromatografía según las condiciones indicadas en la tabla 1.</li>
		<li>Calcular la recuperación de la solución de trabajo de hisopo en el área relativa bajo pico de las soluciones de trabajo base (AW) y la solución de control (C).</li>
		<li>Repita el proceso en tres cupones y calcular la recuperación media y desviación estándar relativa (Srel). Nota: Todos los métodos analíticos usados aquí fueron validados según las directrices de la ICH Q2(R1). Las condiciones de la cromatografía se enumeran en la sección material.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Validation of cleaning processes (7/93). Guide to inspections validation of cleaning processes. , (2004).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Warning Letter: 320-12-08, Gulf Pharmaceuticals. , (2012).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Warning Letter: 320-12-058, Novartis Internationsl AG. , (2012).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Warning Letter: 05-10, Teva Parenterals Medicines, Inc. , (2009).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Warning Letter: 320-14-09, Tianjin Zhongan Pharmaceutical Co., Ltd. , (2014).</li><li>Mantel, M., Wightman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+the+surface+chemistry+on+the+wettability+of+stainless+steel.">Influence of the surface chemistry on the wettability of stainless steel.</a> Surf Interface Anal. 21, 595-605 (1994).</li><li>Odaka, K., Ueda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dependence+of+outgassing+rate+on+surface+oxide+layer+thickness+in+type+304+stainless+steel+before+and+after+surface+oxidation+in+air.">Dependence of outgassing rate on surface oxide layer thickness in type 304 stainless steel before and after surface oxidation in air.</a> Vacuum. 47, 689-692 (1996).</li><li>Kerber, S. J., Tverberg, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stainless+Steel+Surface+Analysis.">Stainless Steel Surface Analysis.</a> Adv. Mater. Processes. , 33-36 (2000).</li><li>Kusumaningrum, H. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+of+foodborne+pathogens+on+stainless+steel+surfaces+and+cross-contamination+to+foods.">Survival of foodborne pathogens on stainless steel surfaces and cross-contamination to foods.</a> Int J Food Microbiol. 85, 227-236 (2003).</li><li>Liu, L., Pack, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cleaning+verification+assays+for+highly+potent+compounds+by+high+performance+liquid+chromatography+mass+spectrometry:+Strategy,+validation,+and+long-term+performance.">Cleaning verification assays for highly potent compounds by high performance liquid chromatography mass spectrometry: Strategy, validation, and long-term performance.</a> J Pharmaceut. Biomed. 43, 1206-1212 (2007).</li><li>Lambropoulos, J., Spanos, G. A., Lazaridis, N. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+validation+of+an+HPLC+assay+for+fentanyl,+alfentanil,+and+sufentanil+in+swab+samples.">Development and validation of an HPLC assay for fentanyl, alfentanil, and sufentanil in swab samples.</a> J Pharmaceut. Biomed. 23, 421-428 (2000).</li><li>Chisti, Y., Moo-Young, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clean-in-place+systems+for+industrial+bioreactors:+Design,+validation+and+operation.">Clean-in-place systems for industrial bioreactors: Design, validation and operation.</a> J. Ind. Microbiol. 13, 201-207 (1994).</li><li>Haidar Ahmad, I. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cleaning+verification:+Exploring+the+effect+of+the+cleanliness+of+stainless+steel+surface+on+sample+recovery.">Cleaning verification: Exploring the effect of the cleanliness of stainless steel surface on sample recovery.</a> J Pharmaceut. Biomed. 134, 108-115 (2017).</li></ol>

No existir intereses financieros o conflicto de intereses.

Principal contribuyente a recuperaciones bajo y variable de residuos de la API de cupones de acero inoxidable fue remontado a la falta de un procedimiento bien definido para la limpieza de las superficies de cupón. Limpiar la superficie de los cupones resultó en recuperación con picos consistente, precisos y resultados reproducibles. Con la demostración de altas recuperaciones de cupones de acero inoxidable, los limpieza verificación los resultados reales obtenidos de los equipos de fabricación utilizando métodos ...

La limpieza de los equipos no dedicados debe ser verificada antes de su posterior liberación para su uso en la fabricación de productos intermedios y de ingredientes farmacéuticos activos (API), producto cambio para evitar la contaminación cruzada. Procedimientos de limpieza deben contener información suficiente para que los operadores limpiar cada tipo de equipo de una manera reproducible y eficaz, y estos procedimientos deberían validarse según el U.S. Food y Drug Administration (FDA) requisitos1. Numerosas cartas de ADVERTENCIA debido a la inadecuada limpieza2,3,4, falta para validar el método de verificación de limpieza y no seguir los procedimientos de limpieza5 han sido emitidas por la FDA. 21 CFR §211.67 describe los requisitos necesarios para la exitosa verificación de limpieza.
Es el estándar en la industria que la validación de los métodos de análisis para verificación de la limpieza se realiza en cupones de acero inoxidable con el misma superficie/final como el equipo de fabricación. Cupones de acero inoxidable (p. ej., 50 cm2) se utilizan para representar superficies de equipo para experimentos de verificación en el laboratorio de la limpieza. Durante el desarrollo y validación de estos métodos analíticos, la muestra de interés (es decir, los residuos que deben ser recuperados desde la superficie de los equipos) se añadió en el residuo blanco en el cupón inoxidable determinado por el límite máximo permisible remanente (MACO). Este nivel es determinado basado en el límite de exposición aceptable que se define como el límite en que un paciente puede obtener expuesto sin efectos adversos para la salud (no-observado-adverso-efecto-nivel, NOAEL).
El analista u operador de producción realizar el hisopado debe seguir un procedimiento estructurado para garantizar que las recuperaciones son reproducibles independientemente de quién realiza el hisopado. El procedimiento deberá detallar explícitamente el tipo de aplicador, utiliza número de hisopos, el diluyente, la cantidad de solvente utilizado, el patrón de barrido exacto, el número de golpes aplicados a la superficie de muestreo, la cantidad de tiempo gastado hisopado/extracción de las muestras, el método de detección (ULTRAVIOLETA, fluorescencia, espectrometría de masas, carbono orgánico total, etc.), la técnica de extracción del material de la cabeza de esponja , etcetera.
Además todos los factores antes mencionados que afectan la recuperación de muestra, la superficie del cupón y por lo tanto, la superficie de los equipos también juegan un papel. La superficie del cupón puede ser modificada debido a la deposición de una capa delgada de material en la superficie o a cambio en el estado de oxidación de uno o más de los elementos de acero inoxidable (p. ej., Fe, Cr y Ni)6,7,8. La regeneración de la superficie de los cupones de acero inoxidable a su estado original es vital para el éxito del proceso de intercambio cuantitativo. Estudios, en los que los cupones de acero inoxidable no se limpiaron adecuadamente, mostraron variabilidad en como analista a otros, diferentes medicamentos, o varios spike niveles9,10,11. La desviación estándar de recuperación de diez repeticiones de un cupón puede ser hasta 14% y 26% en cinco cupones9. Es importante tener en cuenta que los valores de desviación estándar relativa (Srel) aumentan con el aumento del número de repeticiones o con el aumento de la cantidad de cupones utilizados (es decir, cinco cupones en lugar de spiking cinco veces en el mismo cupón)11. En tales casos, la variabilidad no puede interpretarse como fluctuaciones al azar. Sin embargo, sus resultados pueden ser explicados por nuestro encontrar que la limpieza de la superficie del cupón afectará a la recuperación. Los resultados descritos en este artículo muestran un aumento significativo en los resultados de recuperación y disminución de la variabilidad después de limpiar correctamente la superficie de los cupones de acero inoxidable.
Limpio-en-lugar (CIP) es una forma automatizada de la limpieza de la superficie de equipo que involucra un mínimo o ningún desmontaje de los equipos. Durante el proceso de la limpieza del CIP, se ejecuta un procedimiento definido de lavado consecutivo con base seguida por un ácido para eliminar residuos orgánicos e inorgánicos. Surfactantes, compuestos quelantes o secuestrantes agentes generalmente se añaden a soluciones para mejorar la eficacia de cualquier producto de la superficie de los equipos de limpieza CIP. La eficacia de la limpieza depende de varios parámetros incluyendo la selección y concentración de las soluciones CIP (es decir, tipo y composición de la base, ácido y surfactante), el tiempo de limpieza, temperatura (típicamente 60-80 ° C), tipo de contaminación y la presencia de difíciles de limpiar partes12. Basado en el tipo de producto de medicamentos, soluciones CIP 100 y 200 han sido elegidas para utilizar para la limpieza de los cupones de acero inoxidable utilizados para la limpieza de verificación, ya que simula el proceso CIP utilizado para limpiar el equipo de fabricación.
Este estudio reporta la influencia de diferentes factores que afectan la recuperación de residuos farmacéuticos desde la superficie de los cupones de acero inoxidable y recomienda las mejores prácticas para el desarrollo de método analítico de limpieza para pequeñas moléculas, proteínas terapéuticas y los anticuerpos. La falta de un procedimiento bien definido que constantemente limpiado la superficie del cupón fue identificada como el principal contribuyente a recuperaciones bajas y variables. Recuperación alta y reproducible se obtuvo cuando la superficie del cupón se limpió correctamente13.

<table><tbody><tr><td>stainless steel coupons</td><td>&amp;nbsp;GlobePharma (New Brunswick, NJ &lt;span class=&quot;font6&quot;&gt;).&amp;nbsp;&lt;/span&gt;</td><td>SS316-20RA-50cm2</td><td></td></tr><tr><td>Clean in place solutions (CIP100 and CIP200)&amp;nbsp;</td><td>were obtained from Steris Corporation (Mentor, OH)</td><td>1D10BG</td><td>Alkaline detergent and acid detergent, respectively</td></tr><tr><td>Positive displacement pipettes</td><td>Gilson (Middleton, WI).&amp;nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HPLC grade water</td><td>Millipore Milli-Q Advantage Water Purification System (Darmstadt, Germany)&amp;nbsp; or from Honeywell Burdick &amp;amp; Jackson (Muskegon, Michigan)</td><td>7732-18-5</td><td></td></tr><tr><td>HPLC grade Methanol</td><td>EMD</td><td>MX0475-1</td><td></td></tr><tr><td>glacial acetic acid&amp;nbsp;</td><td>EMD</td><td>MAX0073P5</td><td></td></tr><tr><td>HPLC grade Acetonitrile&amp;nbsp;</td><td>J.T. Baker (Avantor Performance Materials, Center Valley, PA)</td><td>75-05-8</td><td></td></tr><tr><td>Trifluoroacetic acid</td><td>J.T. Baker (Avantor Performance Materials, Center Valley, PA)</td><td>75-05-8</td><td></td></tr><tr><td>Chromatography column Zorbax Eclipse</td><td>&amp;nbsp;XDB-C18, 4.6 x 100 mm, 3.5 &amp;micro;m HPLC column</td><td>UNSPSC &amp;ndash; 41115709</td><td></td></tr><tr><td>Vanquish UHPLC system&amp;nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific, Germering, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Branson B8510 Ultrasonic cleaner&amp;nbsp;</td><td>Branson Ultrasonics (Danbury, CT, USA)</td><td>model (8510-D7H)</td><td></td></tr></tbody></table>

failure of cleaning verification in pharmaceutical industry due to uncleanliness of stainless steel surface

El objetivo de este trabajo es identificar los parámetros que afectan la recuperación de residuos farmacéuticos desde la superficie de los cupones de acero inoxidable. Se evaluaron una serie de factores, incluyendo drogas producto spike niveles, procedimiento spiking, ratios de droga excipiente, variabilidad de Analista a analista, variabilidad intradiaria y procedimiento de limpieza de los cupones. La falta de un procedimiento bien definido que limpia constantemente la superficie del cupón fue identificada como el principal contribuyente a recuperaciones bajas y variables. Evaluación de la limpieza de la superficie de los cupones con las soluciones de limpieza en el lugar (CIP) dio de alta recuperación (&#62; 90%) y la reproducibilidad (Srel≤4%) independientemente de las condiciones que se evaluaron previamente. El enfoque fue aplicado con éxito para la limpieza de verificación de pequeñas moléculas (MW &#60; 1.000 Da) así como de grandes biomoléculas (MW hasta 50.000 Da).

Resultados representativos de los intentos iniciales para la limpieza de verificación de droga son resumidos en la tabla 2. Antes de que los cupones fueron limpiados según el procedimiento detallado en la sección experimental, resultados inconsistentes fueron obtenidos en niveles diferentes del punto, para diferentes proporciones de API/excipiente, diferentes analistas e incluso para el analista mismo en días diferentes. La variabilidad observada en las recuperaciones...

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Failure of Cleaning Verification in Pharmaceutical Industry Due to Uncleanliness of Stainless Steel Surface

La falta de un procedimiento bien definido que limpia constantemente las superficies de cupón fue identificada como el principal contribuyente a recuperaciones bajo y variable en verificación de limpieza. Este manuscrito describe el protocolo correcto de limpieza de los cupones de acero inoxidable.

Falta de verificación en la industria farmacéutica debido a la suciedad de la superficie de acero inoxidable de limpieza

The aim of this work is to identify the parameters that affect the recovery of pharmaceutical residues from the surface of stainless steel coupons. A ...

failure-cleaning-verification-pharmaceutical-industry-due-to

Research

JoVE Journal

Chemistry

8.1K vistas.  Novartis Pharmaceuticals Corporation. La falta de un procedimiento bien definido que limpia constantemente las superficies de cupón fue identificada como el principal contribuyente a recuperaciones bajo y variable en verificación de limpieza. Este manuscrito describe el protocolo correcto de limpieza de los cupones de acero inoxidable.

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Tracking Microbial Contamination in Retail Environments Using Fluorescent Powder - A Retail Delicatessen Environment Example

Cross contamination of foodborne pathogens in the retail environment is a significant public health issue contributing to an increased risk for foodborne illness. Ready-to-eat (RTE) processed foods such as deli meats, cheese, and in some cases fresh produce, have been involved in foodborne disease outbreaks due to contamination with pathogens such as Listeria monocytogenes. With respect to L. monocytogenes, deli slicers are often the main source of cross contamination. The goal of this study was to use a fluorescent compound to simulate bacterial contamination and track this contamination in a retail setting. A mock deli kitchen was designed to simulate the retail environment. Deli meat was inoculated with the fluorescent compound and volunteers were recruited to complete a set of tasks similar to those expected of a food retail employee. The volunteers were instructed to slice, package, and store the meat in a deli refrigerator. The potential cross contamination was tracked in the mock retail environment by swabbing specific areas and measuring the optical density of the swabbed area with a spectrophotometer. The results indicated that the refrigerator (i.e. deli case) grip and various areas on the slicer had the highest risk for cross contamination. The results of this study may be used to develop more focused training material for retail employees. In addition, similar methodologies could also be used to track microbial contamination in food production environments (e.g.&#160;small farms), hospitals, nursing homes, cruise ships, and hotels.

The overall goal of this study was to demonstrate the potential cross contamination mechanism of foodborne pathogen Listeria monocytogenes in a retail deli setting. This methodology may be applied to a variety of different environments to track pathogen contamination. &#160;

El seguimiento de la contaminación microbiana en los entornos comerciales Usando fluorescente Polvo - Un menor Charcutería Ambiente Ejemplo

Cross contamination of foodborne pathogens in the retail environment is a significant public health issue contributing to an increased risk for foodborne ...

Investigación

Medio ambiente

Fabrication of Large-area Free-standing Ultrathin Polymer Films

This procedure describes a method for the fabrication of large-area and ultrathin free-standing polymer films. Typically, ultrathin films are prepared using either sacrificial layers, which may damage the film or affect its mechanical properties, or they are made on freshly cleaved mica, a substrate that is difficult to scale. Further, the size of ultrathin film is typically limited to a few square millimeters. In this method, we modify a surface with a polyelectrolyte that alters the strength of adhesion between polymer and deposition substrate. The polyelectrolyte can be shown to remain on the wafer using spectroscopy, and a treated wafer can be used to produce multiple films, indicating that at best minimal amounts of the polyelectrolyte are added to the film. The process has thus far been shown to be limited in scalability only by the size of the coating equipment, and is expected to be readily scalable to industrial processes. In this study, the protocol for making the solutions, preparing the deposition surface, and producing the films is described.

We describe a method for the fabrication of large-area (up to 13 cm diameter) and ultrathin (as thin as 8 nm) polymer films. Instead of using a sacrificial interlayer to delaminate the film from its substrate, we use a self-limiting surface treatment suitable for arbitrarily large areas.

La fabricación de superficies de gran autoportante ultrafinos Polymer Films

This procedure describes a method for the fabrication of large-area and ultrathin free-standing polymer films.  Typically, ultrathin films are prepared ...

Química

Biofilm Removal Using Carbon Dioxide Aerosols without Nitrogen Purge

Biofilms can cause serious concerns in many applications. Not only can they cause economic losses, but they can also present a public health hazard. Therefore, it is highly desirable to remove biofilms from surfaces. Many studies on CO2 aerosol cleaning have employed nitrogen purges to increase biofilm removal efficiency by reducing the moisture condensation generated during the cleaning. However, in this study, periodic jets of CO2 aerosols without nitrogen purges were used to remove Pseudomonas putida biofilms from polished stainless steel surfaces. CO2 aerosols are mixtures of solid and gaseous CO2 and are generated when high-pressure CO2 gas is adiabatically expanded through a nozzle. These high-speed aerosols were applied to a biofilm that had been grown for 24 hr. The removal efficiency ranged from 90.36% to 98.29% and was evaluated by measuring the fluorescence intensity of the biofilm as the treatment time was varied from 16 sec to 88 sec. We also performed experiments to compare the removal efficiencies with and without nitrogen purges; the measured biofilm removal efficiencies were not significantly different from each other (t-test, p &gt; 0.55). Therefore, this technique can be used to clean various bio-contaminated surfaces within one minute.

Biofilms on surfaces can be effectively and rapidly removed by using a periodic jet of carbon dioxide aerosols without a nitrogen purge.

La eliminación del biofilm El uso de aerosoles de dióxido de carbono sin purga de nitrógeno

Biofilms can cause serious concerns in many applications. Not only can they cause economic losses, but they can also present a public health hazard. ...

The Portable Chemical Sterilizer (PCS), D-FENS, and D-FEND ALL: Novel Chlorine Dioxide Decontamination Technologies for the Military

There is a stated Army need for a field-portable, non-steam sterilizer technology that can be used by Forward Surgical Teams, Dental Companies, Veterinary Service Support Detachments, Combat Support Hospitals, and Area Medical Laboratories to sterilize surgical instruments and to sterilize pathological specimens prior to disposal in operating rooms, emergency treatment areas, and intensive care units. The following ensemble of novel, &#8216;clean and green&#8217; chlorine dioxide technologies are versatile and flexible to adapt to meet a number of critical military needs for decontamination6,15. Specifically, the Portable Chemical Sterilizer (PCS) was invented to meet urgent battlefield needs and close critical capability gaps for energy-independence, lightweight portability, rapid mobility, and rugged durability in high intensity forward deployments3. As a revolutionary technological breakthrough in surgical sterilization technology, the PCS is a Modern Field Autoclave that relies on on-site, point-of-use, at-will generation of chlorine dioxide instead of steam. Two (2) PCS units sterilize 4 surgical trays in 1 hr, which is the equivalent throughput of one large steam autoclave (nicknamed &#8220;Bertha&#8221; in deployments because of its cumbersome size, bulky dimensions, and weight). However, the PCS operates using 100% less electricity (0 vs. 9 kW) and 98% less water (10 vs. 640 oz.), significantly reduces weight by 95% (20 vs. 450 lbs, a 4-man lift) and cube by 96% (2.1 vs. 60.2 ft3), and virtually eliminates the difficult challenges in forward deployments of repairs and maintaining reliable operation, lifting and transporting, and electrical power required for steam autoclaves.

The Portable Chemical Sterilizer PCS, D-FENS, and D-FEND ALL: Novel Chlorine Dioxide Decontamination Technologies for the Military

The Portable Chemical Sterilizer (PCS) is a revolutionary, energy-independent, almost waterless sterilization technology for Army medical units. The PCS generates chlorine dioxide from dry reagents mixed with water on-site, at-will, and at point-of-use (PoU) in a plastic suitcase. The Disinfectant-sprayer for Foods and ENvironmentally-friendly Sanitation (D-FENS) and the Disinfectant for ENvironmentally-friendly Decontamination, All-purpose (D-FEND ALL) produce aqueous chlorine dioxide in a collapsible spray bottle and other potential embodiments. These versatile decontamination technologies kill microbes in myriad diverse Dual-use applications for military and civilian consumers.

El esterilizador portátil Química (PCS), D-Fens, y D-Fend TODOS: Dióxido de Cloro nuevas tecnologías de descontaminación para las Fuerzas Armadas

There is a stated Army need for a field-portable, non-steam sterilizer technology that can be used by Forward Surgical Teams, Dental Companies, Veterinary ...

Bioingeniería

Light Enhanced Hydrofluoric Acid Passivation: A Sensitive Technique for Detecting Bulk Silicon Defects

A procedure to measure the bulk lifetime (&#62;100 &#181;sec) of silicon wafers by temporarily attaining a very high level of surface passivation when immersing the wafers in hydrofluoric acid (HF) is presented. By this procedure three critical steps are required to attain the bulk lifetime. Firstly, prior to immersing silicon wafers into HF, they are chemically cleaned and subsequently etched in 25% tetramethylammonium hydroxide. Secondly, the chemically treated wafers are then placed into a large plastic container filled with a mixture of HF and hydrochloric acid, and then centered over an inductive coil for photoconductance (PC) measurements. Thirdly, to inhibit surface recombination and measure the bulk lifetime, the wafers are illuminated at 0.2 suns for 1 min&#160;using a halogen lamp, the illumination is switched off, and a PC measurement is immediately taken. By this procedure, the characteristics of bulk silicon defects can be accurately determined. Furthermore, it is anticipated that a sensitive RT surface passivation technique will be imperative for examining bulk silicon defects when their concentration is low (&#60;1012 cm-3).

A RT liquid surface passivation technique to investigate the recombination activity of bulk silicon defects is described. For the technique to be successful, three critical steps are required: (i) chemical cleaning and etching of silicon, (ii) immersion of silicon in 15% hydrofluoric acid and (iii) illumination for 1 min.

Luz Enhanced pasivación ácido fluorhídrico: una técnica sensible para la detección de defectos de silicio a granel

A procedure to measure the bulk lifetime (&#62;100 &#181;sec) of silicon wafers by temporarily attaining a very high level of surface passivation when ...

Ingeniería

Preparation and High-temperature Anti-adhesion Behavior of a Slippery Surface on Stainless Steel

Anti-adhesion surfaces with high-temperature resistance have a wide application potential in electrosurgical instruments, engines, and pipelines. A typical anti-wetting superhydrophobic surface easily fails when exposed to a high-temperature liquid. Recently, Nepenthes-inspired slippery surfaces demonstrated a new way to solve the adhesion problem. A lubricant layer on the slippery surface can act as a barrier between the repelled materials and the surface structure. However, the slippery surfaces in previous studies rarely showed high-temperature resistance. Here, we describe a protocol for the preparation of slippery surfaces with high-temperature resistance. A photolithography-assisted method was used to fabricate pillar structures on stainless steel. By functionalizing the surface with saline, a slippery surface was prepared by adding silicone oil. The prepared slippery surface maintained the anti-wetting property for water, even when the surface was heated to 300 &#176;C. Also, the slippery surface exhibited great anti-adhesion effects on soft tissues at high temperatures. This type of slippery surface on stainless steel has applications in medical devices, mechanical equipment, etc.

Slippery surfaces provide a new way to solve the adhesion problem. This protocol describes how to fabricate slippery surfaces at high temperatures. The results demonstrate that the slippery surfaces showed anti-wetting for liquids and a remarkable anti-adhesion effect on soft tissues at high temperatures.

Comportamiento de anti-adherencia preparación y alta temperatura de una superficie resbaladiza en acero inoxidable

Anti-adhesion surfaces with high-temperature resistance have a wide application potential in electrosurgical instruments, engines, and pipelines. A ...

Culturing and Maintaining Clostridium difficile in an Anaerobic Environment

Clostridium difficile is a Gram-positive, anaerobic, sporogenic bacterium that is primarily responsible for antibiotic associated diarrhea (AAD) and is a significant nosocomial pathogen. C. difficile is notoriously difficult to isolate and cultivate and is extremely sensitive to even low levels of oxygen in the environment. Here, methods for isolating C. difficile from fecal samples and subsequently culturing C. difficile for preparation of glycerol stocks for long-term storage are presented. Techniques for preparing and enumerating spore stocks in the laboratory for a variety of downstream applications including microscopy and animal studies are also described. These techniques necessitate an anaerobic chamber, which maintains a consistent anaerobic environment to ensure proper conditions for optimal C. difficile growth. We provide protocols for transferring materials in and out of the chamber without causing significant oxygen contamination along with suggestions for regular maintenance required to sustain the appropriate anaerobic environment for efficient and consistent C. difficile cultivation.

Culturing and Maintaining Clostridium difficile in an Anaerobic Environment

Clostridium difficile is a pathogenic bacterium that is a strict anaerobe and causes antibiotic associated diarrhea (AAD). Here, methods for isolating, culturing and maintaining C. difficile vegetative cells and spores are described. These techniques necessitate an anaerobic chamber, which requires regular maintenance to ensure proper conditions for optimal C. difficile cultivation.

El cultivo y mantenimiento<em&gt; Clostridium difficile</em&gt; En un ambiente anaeróbico

Clostridium  difficile is a Gram-positive, anaerobic, sporogenic bacterium  that is primarily responsible for antibiotic associated diarrhea (AAD) and is ...

Inmunología e Infección

Micromechanical Tension Testing of Additively Manufactured 17-4 PH Stainless Steel Specimens

This study presents a methodology for the rapid fabrication and micro-tensile testing of additively manufactured (AM) 17-4PH stainless steels by combining photolithography, wet-etching, focused ion beam (FIB) milling, and modified nanoindentation. Detailed procedures for proper sample surface preparation, photo-resist placement, etchant preparation, and FIB sequencing are described herein to allow for high throughput (rapid) specimen fabrication from bulk AM 17-4PH stainless steel volumes. Additionally, procedures for the nano-indenter tip modification to allow tensile testing are presented and a representative micro specimen is fabricated and tested to failure in tension. Tensile-grip-to-specimen alignment and sample engagement were the main challenges of the micro-tensile testing; however, by reducing the indenter tip dimensions, alignment and engagement between the tensile grip and specimen were improved. Results from the representative micro-scale in situ SEM tensile test indicate a single slip plane specimen fracture (typical of a ductile single crystal failure), differing from macro-scale AM 17-4PH post-yield tensile behavior.

Presented here is a procedure for measuring fundamental material properties through micromechanical tension testing. Described are the methods for micro-tensile specimen fabrication (allowing rapid micro-specimen fabrication from bulk material volumes by combining photolithography, chemical etching, and focused ion beam milling), indenter tip modification, and micromechanical tension testing (including an example).

Pruebas de tensión micromecánica de muestras de acero inoxidable 17-4 PH fabricadas aditivamente

This study presents a methodology for the rapid fabrication and micro-tensile testing of additively manufactured (AM) 17-4PH stainless steels by combining ...

Determining Viral Disinfection Efficacy of Hot Water Laundering

This protocol provides an example of a laboratory process for conducting laundering studies that generate data on viral disinfection. While the protocol was developed for research during the coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic, it is intended to be a framework, adaptable to other virus disinfection studies; it demonstrates the steps for preparing the test virus, inoculating the test material, assessing visual and integrity changes to the washed items due to the laundering process, and quantifying the reduction in viral load. Additionally, the protocol outlines the necessary quality control samples for ensuring the experiments are not biased by contamination and measurements/observations that should be recorded to track the material integrity of the personal protective equipment (PPE) items after multiple laundering cycles. The representative results presented with the protocol use the Phi6 bacteriophage inoculated onto cotton scrub, denim, and cotton face-covering materials and indicate that the hot water laundering and drying process achieved over a 3-log (99.9%) reduction in viral load for all samples (a 3-log reduction is the disinfectant performance metric in U.S. Environmental Protection Agency's Product Performance Test Guideline 810.2200). The reduction in viral load was uniform across different locations on the PPE items. The results of this viral disinfection efficacy testing protocol should help the scientific community explore the effectiveness of home laundering for other types of test viruses and laundering procedures.

In response to the severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) pandemic, a laboratory protocol was developed to test the viral disinfection efficacy of hot water laundering of cloth face coverings, cotton scrubs, and denim pants. The Phi6 virus (bacteriophage) was used as the organism to test disinfection efficacy.

Determinación de la eficacia de la desinfección viral del lavado de agua caliente

This protocol provides an example of a laboratory process for conducting laundering studies that generate data on viral disinfection. While the protocol ...

Estrategias de control y monitoreo microbiano para entornos de salas limpias

Microbial Control and Monitoring Strategies for Cleanroom Environments and Cellular Therapies

A well-validated and holistic program that incorporates robust gowning, cleaning, environmental monitoring, and personnel monitoring measures is critical for minimizing the microbial bioburden in cellular therapy manufacturing suites and the corresponding testing laboratories to ensure that the facilities are operating in a state of control. Ensuring product safety via quality control measures, such as sterility testing, is a regulatory requirement for both minimally manipulated (section 361) and more than minimally manipulated (section 351) human cells, tissues, and cellular and tissue-based products (HCT/Ps). In this video, we provide a stepwise guide for how to develop and incorporate the best aseptic practices for operating in a cleanroom environment, including gowning, cleaning, staging of materials, environmental monitoring, process monitoring, and product sterility testing using direct inoculation, provided by the United States Pharmacopeia (USP&lt;71&gt;) and the National Institutes of Health (NIH) Alternative Sterility Testing Method. This protocol is intended as a reference guide for establishments expected to meet current good tissue practices (cGTP) and current good manufacturing practices (cGMP).

Autor destacado: Estrategias de control y monitoreo microbiano para entornos de salas limpias y terapias celulares  

The protocol summarizes the best practices to minimize microbial bioburden in a cleanroom environment and includes strategies such as environmental monitoring, process monitoring, and product sterility testing. It is relevant for manufacturing and testing facilities that are required to meet current good tissue practice standards and current good manufacturing practice standards.

Control microbiano y estrategias de monitoreo para ambientes de salas limpias y terapias celulares

A well-validated and holistic program that incorporates robust gowning, cleaning, environmental monitoring, and personnel monitoring measures is critical ...