virus-induced-gene-silencing-vigs-in-nicotiana-benthamiana-and-tomato

Virus-induced Gene Silencing (VIGS) in <em>Nicotiana benthamiana</em> and Tomato

RNA interference (RNAi) is a highly specific gene-silencing phenomenon triggered by dsRNA1. This silencing mechanism uses two major classes of RNA ...

assay-for-pathogen-associated-molecular-pattern-pamp-triggered

Assay for Pathogen-Associated Molecular Pattern (PAMP)-Triggered Immunity (PTI) in Plants

To perceive potential pathogens in their environment, plants use pattern recognition receptors (PRRs) present on their plasma membranes. PRRs recognize ...

Boyce Thompson Institute for Plant Research

&#x4ECE;&#x756A;&#x8304;&#x7684; Pti4&#x3001; Pti5&#x3001; &#x548C; Pti6 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x57FA;&#x4E8E;&#x53D6;&#x529B;&#x5668;&#x75C5;&#x6297;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;Ser-&#x82CF;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x4E0E;&#x4EA7;&#x54C1;&#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5C5E;&#x4E8E;&#x690D;&#x7269;&#x72EC;&#x7279;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x4E59;&#x70EF;&#x53CD;&#x5E94;&#x56E0;&#x5B50; (ERF) &#x5BB6;&#x5EAD;&#x5E76;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5177;&#x4F53;&#x5230;&#x6D77;&#x5408;&#x4F1A;&#x6846;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x5143;&#x7D20; (PR) &#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x5021;&#x5BFC;&#x8005;&#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6750;&#x6599;&#x7535;&#x6D41;&#x53D8;&#x6DB2;&#x5DF2;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x5230;&#x539F;&#x5B50;&#x6838;&#x548C;&#x51FD;&#x6570;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x6D77;&#x5408;&#x4F1A;&#x6846;&#x5305;&#x542B; PR &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x756A;&#x8304;&#x3002;PR1&#x3001; PR2 &#x6C34;&#x6768;&#x9178;&#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B; Pti4&#x3001; Pti5 &#x6216; Pti6 &#x5728;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8309;&#x8389;&#x9178;&#x548C;&#x4E59;&#x70EF;&#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5982; PR3&#x3001; PR4&#x3001; PDF1.2&#x3001; Thi2.1&#x3001; &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x88AB;&#x53D7;&#x4E0D;&#x540C;&#x6BCF;&#x4E09;&#x4E2A;&#x756A;&#x8304;&#x6750;&#x6599;&#x7535;&#x6D41;&#x53D8;&#x6DB2;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5; Pti4 &#x690D;&#x7269;&#x5177;&#x6709;&#x6781;&#x9AD8;&#x7684; PDF1.2 &#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x3002;&#x6C34;&#x6768;&#x9178;&#x5BF9;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5; Pti4 &#x690D;&#x7269;&#x7684;&#x5916;&#x6E90;&#x5E94;&#x7528;&#x6291;&#x5236;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; PDF1.2&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684; PR1 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002;&#x8868;&#x793A; Pti4 &#x7684;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x690D;&#x7269;&#x75C5;&#x539F;&#x771F;&#x83CC;&#x767D;&#x7C89; orontii &#x548C;&#x5047;&#x5355;&#x80DE;&#x83CC;&#x6591;&#x70B9;&#x5149;&#x4F0F;&#x756A;&#x8304;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6027;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x8010;&#x663E;&#x793A;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x963B;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; Pti4&#xFF0C;Pti5 &#x548C; Pti6 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684; PR &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5728;&#x690D;&#x7269;&#x9632;&#x5FA1;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x548C;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x756A;&#x8304;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; pti4&#x3001; pti5&#x3001; &#x548C; pti6 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x65F6;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x4E2D;&#x7684;&#x9632;&#x5FA1;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

The Pti4, Pti5, and Pti6 proteins from tomato were identified based on their interaction with the product of the Pto disease resistance gene, a Ser-Thr protein kinase. They belong to the ethylene-response factor (ERF) family of plant-unique transcription factors and bind specifically to the GCC-box cis element present in the promoters of many pathogenesis-related (PR) genes. Here, we show that these tomato ERFs are localized to the nucleus and function in vivo as transcription activators that regulate the expression of GCC box-containing PR genes. Expression of Pti4, Pti5, or Pti6 in Arabidopsis activated the expression of the salicylic acid-regulated genes PR1 and PR2. Expression of jasmonic acid- and ethylene-regulated genes, such as PR3, PR4, PDF1.2, and Thi2.1, was affected differently by each of the three tomato ERFs, with Arabidopsis-Pti4 plants having very high levels of PDF1.2 transcripts. Exogenous application of salicylic acid to Arabidopsis-Pti4 plants suppressed the increased expression of PDF1.2 but further stimulated PR1 expression. Arabidopsis plants expressing Pti4 displayed increased resistance to the fungal pathogen Erysiphe orontii and increased tolerance to the bacterial pathogen Pseudomonas syringae pv tomato. These results indicate that Pti4, Pti5, and Pti6 activate the expression of a wide array of PR genes and play important and distinct roles in plant defense.

Tomato transcription factors pti4, pti5, and pti6 activate defense responses when expressed in Arabidopsis.

Les Pti4, Pti5, et Pti6 prot&#xE9;ines de la tomate ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s sur la base de leur interaction avec le produit du g&#xE8;ne Pto la r&#xE9;sistance aux maladies, une prot&#xE9;ine kinase Ser-Thr. Ils appartiennent au facteur d&#x26;#39;&#xE9;thyl&#xE8;ne-r&#xE9;ponse (ERF) de la famille des facteurs de la plante-uniques de transcription et de se lier sp&#xE9;cifiquement &#xE0; la pr&#xE9;sente GCC-box cis &#xE9;l&#xE9;ment dans les promoteurs de nombreux li&#xE9;e &#xE0; la pathogen&#xE8;se (PR) des g&#xE8;nes. Ici, nous montrons que ces p&#xE9;nalit&#xE9;s de remboursement anticip&#xE9; de tomates sont localis&#xE9;es dans le noyau et la fonction in vivo comme activateurs de la transcription qui r&#xE9;gulent l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes du CCG PR bo&#xEE;te contenant. Expression de Pti4, Pti5, ou Pti6 chez Arabidopsis activ&#xE9; l&#x26;#39;expression des salicylique g&#xE8;nes r&#xE9;gul&#xE9;s PR1 et PR2. Expression de l&#x26;#39;acide jasmonique et d&#x26;#39;&#xE9;thyl&#xE8;ne-g&#xE8;nes r&#xE9;gul&#xE9;s, comme PR3, PR4, des PDF1.2 et Thi2.1, a &#xE9;t&#xE9; affect&#xE9;s diff&#xE9;remment par chacun des trois ERF tomate, avec Arabidopsis-Pti4 plantes ayant des niveaux &#xE9;lev&#xE9;s de PDF1.2 transcriptions. Application exog&#xE8;ne d&#x26;#39;acide salicylique pour Arabidopsis-Pti4 plantes a supprim&#xE9; l&#x26;#39;expression accrue de PDF1.2 mais encore stimul&#xE9; PR1 expression. Des plantes d&#x26;#39;Arabidopsis exprimant Pti4 r&#xE9;sistance affich&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;augmentation des champignons pathog&#xE8;nes orontii Erysiphe et une tol&#xE9;rance accrue &#xE0; l&#x26;#39;agent pathog&#xE8;ne de tomate bact&#xE9;rienne Pseudomonas syringae pv. Ces r&#xE9;sultats indiquent que Pti4, Pti5, et Pti6 activer l&#x26;#39;expression d&#x26;#39;un large &#xE9;ventail de g&#xE8;nes PR et jouent un r&#xF4;le important et distinct dans la d&#xE9;fense des plantes.

Facteurs de transcription de tomates Pti4, Pti5, et Pti6 Activer les r&#xE9;actions de d&#xE9;fense lorsqu&#x26;#39;il est exprim&#xE9; dans Arabidopsis

Tomato Transkriptionsfaktoren pti4, pti5 und pti6 aktivieren Abwehrreaktionen, wenn ausgedr&#xFC;ckt in Arabidopsis.

Le proteine Pti4, Pti5 e Pti6 da pomodoro sono state identificate basato sulla loro interazione con il prodotto del gene di resistenza malattia della Pto, un Ser-Thr chinasi di proteina. Essi appartengono alla famiglia di fattore (ERF) etilene-risposta di fattori di trascrizione pianta unica e legano specificamente all&#39;elemento cis GCC-box presente nei promotori di molti correlati a patogenesi (PR) geni. Qui, ci mostrano che questi pomodori opera &egrave; localizzati per il nucleo e la funzione in vivo come attivatori della trascrizione che regolano l&#39;espressione dei geni GCC scatola contenente PR. Espressione di Pti4, Pti5 o Pti6 in Arabidopsis attivato l&#39;espressione dei geni regolati acido salicilico PR1 e PR2. Espressione dei geni regolamentati di etilene e Acido jasmonico, quali PR3, PR4, PDF1.2 e Thi2.1, &egrave; stata colpita in modo diverso da ciascuno dei tre pomodoro opera, con piante di Arabidopsis Pti4 avere livelli molto elevati di PDF1.2 trascrizioni. Applicazione esogena di acido salicilico per piante di Arabidopsis Pti4 soppressa l&#39;espressione aumentata di PDF1.2, ma ulteriormente stimolata espressione PR1. Piante di Arabidopsis esprimendo Pti4 visualizzato maggiore resistenza ai patogeni fungini Erysiphe orontii e maggiore tolleranza al patogeno batterico pomodoro di Pseudomonas syringae pv. Questi risultati indicano che Pti4, Pti5 e Pti6 attivare l&#39;espressione di una vasta gamma di geni PR e svolgono un ruolo importante e distinto nella difesa della pianta.

Pti6, pti5 e pomodoro trascrizione fattori pti4 attivare risposte di difesa quando espresso in Arabidopsis.

&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;Pti4&#x3001;Pti5&#x3001;&#x3068;Pti6&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;PTO&#x306E;&#x75C5;&#x5BB3;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;Ser-Thr&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x5FDC;&#x7B54;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;ERF&#xFF09;&#x690D;&#x7269;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x5C5E;&#x3057;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x95A2;&#x9023;&#xFF08;PR&#xFF09;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;GCC-box&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;ERFs&#x306F;GCC&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x542B;&#x3080;PR&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x6838;&#x95A2;&#x6570;&#x306B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306E;Pti4&#x3001;Pti5&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;Pti6&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x30B5;&#x30EA;&#x30C1;&#x30EB;&#x9178;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;PR1&#x3068;PR2&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3002;&#x30B8;&#x30E3;&#x30B9;&#x30E2;&#x30F3;&#x9178;&#x3084;PR3&#x3001;PR4&#x3001;PDF1.2&#x3001;&#x3068;Thi2.1&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;PDF1.2&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;Pti4&#x690D;&#x7269;&#x3067;&#x3001;3&#x3064;&#x306E;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;ERFs&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x8EE2;&#x5199;&#x3002;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;Pti4&#x690D;&#x7269;&#x3078;&#x306E;&#x30B5;&#x30EA;&#x30C1;&#x30EB;&#x9178;&#x306E;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;PDF1.2&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;PR1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x771F;&#x83CC;&#x6027;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3069;&#x3093;&#x3053;orontii&#x304A;&#x3088;&#x3073;Pti4&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x62B5;&#x6297;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x690D;&#x7269;&#x306F;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;Pseudomonas syringae&#x306E;PV&#x306E;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x8010;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;Pti4&#x3001;Pti5&#x3001;&#x3068;Pti6&#x306F;PR&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x9632;&#x5FA1;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x304B;&#x3064;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x306E;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;Pti4&#x3001;Pti5&#x3001;&#x3068;Pti6&#x306F;&#x9632;&#x5FA1;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;

&#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xC5D0;&#xC11C; Pti4, Pti5, &#xBC0F; Pti6 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Pto &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC800;&#xD56D; &#xC720;&#xC804;&#xC790; Ser Thr &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544;&#xC758; &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xAE30;&#xBC18;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xACE0;&#xC720;&#xC758; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xC5D0;&#xD2F8;&#xB80C; &#xBC18;&#xC751; &#xACC4;&#xC218; (ERF) &#xAC00;&#xC871;&#xC5D0; &#xC18D;&#xD55C;&#xB2E4; &#xACE0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD2B9;&#xBCC4;&#xD788; pathogenesis &#xAD00;&#xB828; &#xB9CE;&#xC740; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; (&#xD64D;&#xBCF4;)&#xC5D0; GCC &#xC0C1;&#xC790; cis &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; ERFs &#xD575; &#xBC0F; GCC &#xC0C1;&#xC790; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xD64D;&#xBCF4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xC0AC; &#xD65C;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Pti4, Pti5, &#xB610;&#xB294; Pti6 Arabidopsis&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC0B4;&#xB9AC;&#xC2E4;&#xC0B0; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; p r 1&#xACFC; p r 2&#xC758; &#xD45C;&#xD604;. Thi2.1, PDF1.2, PR4 p r 3 &#xB4F1; jasmonic &#xC0B0; &#xC5D0;&#xD2F8;&#xB80C; &#xADDC;&#xC81C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4; Arabidopsis Pti4 &#xC2DD;&#xBB3C; PDF1.2 &#xC131;&#xC801;&#xD45C;&#xC758; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xAC01; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; ERFs, &#xB2E4;&#xB974;&#xAC8C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744;. Exogenous &#xC751;&#xC6A9; Arabidopsis Pti4 &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xC0B4;&#xB9AC;&#xC2E4;&#xC0B0;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; PDF1.2 &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB354; &#xC790;&#xADF9;&#xB41C; PR1 &#xC2DD;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Pti4 &#xD45C;&#xD604; Arabidopsis &#xC2DD;&#xBB3C; &#xACF0; &#xD321;&#xC774; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; Erysiphe orontii &#xBC0F; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xB179; syringae pv &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xC624;&#xCC28;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xC800;&#xD56D; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; Pti4, Pti5, &#xBC0F; Pti6 &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; PR &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xBC29;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778; pti4, pti5, &#xBC0F; pti6 Arabidopsis &#xD45C;&#xD604; &#xAD6D;&#xBC29; &#xC751;&#xB2F5;&#xACFC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;.

Los Pti4, Pti5, y Pti6 prote&#xED;nas de tomate fueron identificados en base a su interacci&#xF3;n con el producto del gen de resistencia Pto. enfermedad, una prote&#xED;na quinasa Ser-Thr. Pertenecen al factor de etileno-respuesta (FER), la familia de factores de transcripci&#xF3;n de las plantas-&#xFA;nicos y se unen espec&#xED;ficamente a la presencia de GCC-cis cuadro de los elementos de los promotores de muchos relacionados con la patog&#xE9;nesis (PR) genes. En este sentido, muestran que estos ERFs tomate se localiza en el n&#xFA;cleo y la funci&#xF3;n in vivo como activadores de transcripci&#xF3;n que regulan la expresi&#xF3;n de GCC que contienen los genes PR-box. Expresi&#xF3;n de Pti4, Pti5, o Pti6 en Arabidopsis activa la expresi&#xF3;n de los salic&#xED;lico &#xE1;cido de los genes regulados PR1 y PR2. Expresi&#xF3;n de &#xE1;cido jasm&#xF3;nico y etileno-regulados los genes, como el PR3, PR4, PDF 1.2, y Thi2.1, se vio afectado de manera diferente por cada uno de los tres ERFs de tomate, con plantas de Arabidopsis-Pti4 tener niveles muy altos de PDF 1.2 transcripciones. Aplicaci&#xF3;n ex&#xF3;gena de &#xE1;cido salic&#xED;lico para Arabidopsis Pti4 plantas suprimi&#xF3; la expresi&#xF3;n aumentada de PDF 1.2, pero a&#xFA;n m&#xE1;s estimulado PR1 expresi&#xF3;n. Plantas de Arabidopsis que expresan la resistencia Pti4 mostraron un aumento en el hongo pat&#xF3;geno orontii Erysiphe y el aumento de la tolerancia al pat&#xF3;geno bacteriano del tomate Pseudomonas syringae pv. Estos resultados indican que Pti4, Pti5 y Pti6 activar la expresi&#xF3;n de una amplia gama de genes y relaciones p&#xFA;blicas juegan un papel importante y distinto en defensa de la planta.

Factores de Transcripci&#xF3;n de tomate Pti4, Pti5 y Pti6 Activar las respuestas de defensa cuando se expresa en Arabidopsis

&#x82B1;&#x6930;&#x83DC;&#x82B1;&#x53F6;&#x75C5;&#x6BD2; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50; (35S) &#x5E7F;&#x6CDB;&#x7528;&#x4E8E;&#x672C;&#x6784;&#x7684;&#x53CC;&#x5B50;&#x53F6;&#x690D;&#x7269;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x91CD;&#x590D;&#x4F7F;&#x7528;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x706D;&#x6D3B;&#x7531;&#x4E8E;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x3002;&#x4EE5;&#x6B64;&#x6765;&#x56DE;&#x907F;&#x8FD9;&#x4E00;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x4E86;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8005;&#xFF0C;&#x5728;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x7B49;&#x540C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6709;&#x6700;&#x4F4E;&#x9650;&#x5EA6;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x53D1;&#x5C55;&#x6218;&#x7565;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8005;&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7; (a) &#x5F15;&#x5165;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x6216;&#x5408;&#x6210;&#x62C9;&#x4F38;&#x7684; DNA &#x6216; (&quot;b) &#x57DF;&#x4EA4;&#x6362;&#xFF0C;&quot;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E00;&#x4E2A;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x57DF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x66FF;&#x6362;&#x7B49;&#x540C;&#x5176;&#x4ED6;&#x5F02;&#x6E90;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x4ECE;&#x57DF;&#x4E2D;&#x7684;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x5143;&#x7D20;&#x751F;&#x6210;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC4;&#x4F30;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x4FEE;&#x6539;&#x4F7F;&#x7528;&#x57DF; A &#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7B56;&#x7565; &#xFF08;&#x5305;&#x62EC;&#x6700;&#x5C0F;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x548C;&#x5B50;&#x57DF; A1&#xFF09; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x5176;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x76F8;&#x6BD4;&#x672C;&#x8EAB;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x62A5;&#x544A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x75C5;&#x7406;&#x6027; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#xFF0C;&#x88AB;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E00;&#x5957;&#x6539;&#x6027;&#x7684; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x3002;&#x77AC;&#x6001;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x57DF;&#x4EA4;&#x6362;&#x663E;&#x8457;&#x4E0B;&#x964D;&#x4E2D;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x521B;&#x529E;&#x4EBA;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x65B0;&#x578B; DNA &#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x4E2D;&#x653E;&#x7F6E;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x5143;&#x7D20;&#x663E;&#x793A;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x5AB2;&#x7F8E; 35S&#x3002;Mod2A1T &#x548C; Mod3A1T &#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6784;&#x9020;&#x7136;&#x540E;&#x65E8;&#x5728;&#x901A;&#x8FC7;&#x6838;&#x5FC3;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x6700;&#x5C0F;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x548C;&#x5B50;&#x57DF; A1 &#x7F6E;&#x4E8E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684; DNA &#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x70DF;&#x8349; &#xFF08;&#x70DF;&#x8349;&#xFF09; &#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6784;&#x9020;&#x4E0E;&#x53D1;&#x8FBE;&#x56FD;&#x5BB6;&#x548C;&#x4E0E; 35S &#x4F5C;&#x4E3A;&#x63A7;&#x4EF6;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x4E3B;&#x8981;&#x6297;&#x866B;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;Mod2A1T &#x548C; Mod3A1T &#x53D1;&#x73B0;&#x5904;&#x4E8E;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x72B6;&#x6001;&#xFF0C;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x6D4B;&#x8BD5;&#xFF0C;&#x76F8;&#x5F53;&#x4E8E; 35S &#x5404;&#x7EA7;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#xFF0C;&#x5728; T1 &#x4EE3;&#x82D7; Mod2A1T &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E5F;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x3002;&#x672C;&#x6218;&#x7565;&#x5F00;&#x8F9F;&#x4E86;&#x901A;&#x8FC7;&#x521B;&#x5EFA;&#x4E00;&#x7EC4;&#x5408;&#x6210;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x4E0E;&#x6700;&#x4F4E;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x548C;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x5AB2;&#x7F8E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x539F;&#x578B;&#x4FEE;&#x6539;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x690D;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x5143;&#x7D20;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;

&#x6700;&#x4F4E;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x690D;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x529F;&#x80FD;&#x7B49;&#x540C;&#x5BA3;&#x4F20;&#x5458;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x6218;&#x7565;&#xFF1A; &#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x5143;&#x7D20;&#x4E0E;&#x57DF;&#x6362;&#x7528;&#x65B0;&#x578B; DNA &#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x4E2D;&#x3002;

The cauliflower mosaic virus 35S (35S) promoter has been extensively used for the constitutive expression of transgenes in dicotyledonous plants. The repetitive use of the same promoter is known to induce transgene inactivation due to promoter homology. As a way to circumvent this problem, we tested two different strategies for the development of synthetic promoters that are functionally equivalent but have a minimum sequence homology. Such promoters can be generated by (a) introducing known cis-elements in a novel or synthetic stretch of DNA or (b) "domain swapping," wherein domains of one promoter can be replaced with functionally equivalent domains from other heterologous promoters. We evaluated the two strategies for promoter modifications using domain A (consisting of minimal promoter and subdomain A1) of the 35S promoter as a model. A set of modified 35S promoters were developed whose strength was compared with the 35S promoter per se using beta-glucuronidase as the reporter gene. Analysis of the expression of the reporter gene in transient assay system showed that domain swapping led to a significant fall in promoter activity. In contrast, promoters developed by placing cis-elements in a novel DNA context showed levels of expression comparable with that of the 35S. Two promoter constructs Mod2A1T and Mod3A1T were then designed by placing the core sequences of minimal promoter and subdomain A1 in divergent DNA sequences. Transgenics developed in tobacco (Nicotiana tabacum) with the two constructs and with 35S as control were used to assess the promoter activity in different tissues of primary transformants. Mod2A1T and Mod3A1T were found to be active in all of the tissues tested, at levels comparable with that of 35S. Further, the expression of the Mod2A1T promoter in the seedlings of the T1 generation was also similar to that of the 35S promoter. The present strategy opens up the possibility of creating a set of synthetic promoters with minimum sequence homology and with expression levels comparable with the wild-type prototype by modifying sequences present between cis-elements for transgene expression in plants.

Strategies for development of functionally equivalent promoters with minimum sequence homology for transgene expression in plants: cis-elements in a novel DNA context versus domain swapping.

Le chou-fleur mosaic virus 35 s promoteur (35 s) a &eacute;t&eacute; largement utilis&eacute;e pour l&#39;expression constitutive de transg&egrave;nes dans les plantes dicotyl&eacute;dones. L&#39;utilisation r&eacute;p&eacute;titive du m&ecirc;me promoteur est connue pour induire le transg&egrave;ne inactivation par homologie de promoteur. Comme un moyen de contourner ce probl&egrave;me, nous avons test&eacute; deux strat&eacute;gies diff&eacute;rentes pour le d&eacute;veloppement des promoteurs synth&eacute;tiques qui sont fonctionnellement &eacute;quivalents, mais ont une homologie de s&eacute;quence minimale. Les promoteurs peuvent &ecirc;tre g&eacute;n&eacute;r&eacute;es par (a) introduction de cis-&eacute;l&eacute;ments connus dans un roman ou un &eacute;tirement synth&eacute;tique de l&#39;ADN, ou (b) &laquo; domaine de permutation,&quot;dans lequel les domaines d&#39;un porteur de projet peuvent &ecirc;tre remplac&eacute;s par domaines fonctionnellement &eacute;quivalents d&#39;autres promoteurs h&eacute;t&eacute;rologues. Nous avons &eacute;valu&eacute; les deux strat&eacute;gies pour les modifications du promoteur &agrave; l&#39;aide de domaine A (consistant en promoteur minimal et sous-domaine A1) du promoteur 35 s comme un mod&egrave;le. Un ensemble de 35 s modifi&eacute; promoteurs ont &eacute;t&eacute; &eacute;labor&eacute;s dont la force a &eacute;t&eacute; compar&eacute;e avec le promoteur 35 s en soi &agrave; l&#39;aide de b&ecirc;ta-glucuronidase, le g&egrave;ne rapporteur. Analyse de l&#39;expression du g&egrave;ne rapporteur dans le syst&egrave;me d&#39;essai transitoire a montr&eacute; que la permutation de domaine conduit &agrave; une chute significative dans l&#39;activit&eacute; du promoteur. En revanche, promoteurs mis au point en pla&ccedil;ant les &eacute;l&eacute;ments cis dans un contexte nouveau de l&#39;ADN ont montr&eacute; des niveaux d&#39;expression comparable &agrave; celui de la 35 s. Deux constructions de promoteur Mod2A1T et Mod3A1T ont &eacute;t&eacute; con&ccedil;ues puis en pla&ccedil;ant les s&eacute;quences de base du promoteur minimal et sous-domaine A1 en s&eacute;quences divergentes. Transg&eacute;niques d&eacute;velopp&eacute;es dans le tabac (Nicotiana tabacum) avec les deux constructions et avec 35 s comme contr&ocirc;le ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;es pour &eacute;valuer l&#39;activit&eacute; du promoteur dans diff&eacute;rents tissus des transformants primaires. Mod2A1T et Mod3A1T ont &eacute;t&eacute; trouv&eacute;s &agrave; &ecirc;tre active dans tous les tissus test&eacute;s, &agrave; des niveaux comparables &agrave; celui de 35 s. En outre, l&#39;expression du promoteur de la Mod2A1T dans les semis de la g&eacute;n&eacute;ration T1 &eacute;tait &eacute;galement semblable &agrave; celle du promoteur 35 s. La pr&eacute;sente strat&eacute;gie ouvre la possibilit&eacute; de cr&eacute;er un ensemble de promoteurs synth&eacute;tiques avec une homologie de s&eacute;quence minimale et avec des niveaux d&#39;expression comparable avec le prototype sauvage en modifiant les s&eacute;quences pr&eacute;sentes entre les &eacute;l&eacute;ments cis pour l&#39;expression de transg&egrave;nes dans les plantes.

Strat&eacute;gies de d&eacute;veloppement de promoteurs fonctionnellement &eacute;quivalentes avec une homologie s&eacute;quentielle minimale pour l&#39;expression de transg&egrave;nes dans les plantes : cis-elements dans un contexte de nouveaux ADN contre &eacute;change de domaine.

Strategien f&#xFC;r die Entwicklung von funktional gleichwertigen Promotoren mit einem Minimum an Sequenzhomologie f&#xFC;r Transgenexpression in Pflanzen: cis-Elemente in einer neuen DNA-Kontext versus Domain Swapping.

Il cavolfiore mosaic virus 35S (35S) promotore &egrave; stato ampiamente utilizzato per l&#39;espressione costitutiva di transgeni nelle piante dicotiledoni. L&#39;uso ripetitivo del promotore stesso &egrave; conosciuto per indurre il transgene inattivazione a causa di omologia del promotore. Come un modo per aggirare questo problema, abbiamo testato due diverse strategie per lo sviluppo dei promotori sintetici che sono funzionalmente equivalenti, ma hanno un&#39;omologia di sequenza minima. Tali promotori possono essere generati da (a) l&#39;introduzione di elementi cis-conosciuti in un romanzo o un tratto sintetico di DNA o (&quot;b) scambio di dominio&quot;, in cui domini di un promotore possono essere sostituiti con domini funzionalmente equivalenti da altri promotori eterologa. Abbiamo valutato le due strategie per modifiche promotore utilizzando un dominio (composto da promotore minimale e sottodominio A1) del promotore 35S come un modello. Un gruppo di promotori 35S modificate sono state sviluppate cui forza &egrave; stato confrontato con il promotore 35S per s&eacute; utilizzando beta-glucuronidasi come il gene reporter. Analisi dell&#39;espressione del gene reporter nel sistema transitorio dosaggio ha dimostrato che lo scambio di dominio ha portato ad un calo significativo nell&#39;attivit&agrave; di promotore. In contrasto, promotori sviluppate inserendo elementi cis-in un contesto di DNA romanzo ha mostrato livelli di espressione paragonabile con quello del 35S. Due costrutti promotore Mod2A1T e Mod3A1T quindi sono stati progettati ponendo le sequenze di nucleo del promotore minimale e sottodominio A1 in sequenze di DNA divergenti. Transgenica sviluppato nel settore del tabacco (Nicotiana tabacum) con i due costrutti e con 35S come controllo sono stati utilizzati per valutare l&#39;attivit&agrave; di promotore in diversi tessuti di transformants primaria. Mod2A1T e Mod3A1T sono stati trovati per essere attivi in tutti i tessuti testati, a livelli comparabili con quella di 35S. Inoltre, l&#39;espressione del promotore Mod2A1T nelle piantine della generazione T1 anche era simile a quella del promotore 35S. La presente strategia apre la possibilit&agrave; di creare un gruppo di promotori sintetici con omologia di sequenza minima e con livelli di espressione paragonabile con il prototipo del selvaggio-tipo modificando le sequenze presenti tra cis-elementi per l&#39;espressione del transgene nelle piante.

Strategie per lo sviluppo dei promotori funzionalmente equivalenti con omologia di sequenza minima per l&#39;espressione del transgene nelle piante: cis-elementi in un contesto di romanzo del DNA contro lo scambio di dominio.

&#x30AB;&#x30EA;&#x30D5;&#x30E9;&#x30EF;&#x30FC; &#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; 35S &#xFF08;35 s&#xFF09; &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x304C;&#x5E83;&#x304F;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6052;&#x5E38;&#x767A;&#x73FE;&#x306B; transgenes &#x53CC;&#x5B50;&#x8449;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3002;&#x540C;&#x3058;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x53CD;&#x5FA9;&#x7684;&#x306A;&#x4F7F;&#x7528;&#x306F;&#x3001;transgene &#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x3092;&#x56DE;&#x907F;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x540C;&#x7B49;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x6700;&#x5C0F;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x5408;&#x6210;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;(a) &#x65E2;&#x77E5;&#x306E; cis &#x8981;&#x7D20;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x540C;&#x7B49;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x4ED6;&#x306E;&#x7570;&#x7A2E;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x304B;&#x3089;&#x3068;&#x524D;&#x8A18;&#x5408;&#x6210;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C1; DNA &#x307E;&#x305F;&#x306F; (b)&#x300C;&#x30B9;&#x30EF;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x300D;&#x306E;&#x5C0E;&#x5165;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; 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&#xAF43; &#xC591;&#xBC30;&#xCD94; &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; 35S (35S) &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC81C;&#xC815; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; transgenes dicotyledonous &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC19;&#xC740; &#xBAA8;&#xD130;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC18;&#xBCF5;&#xC801;&#xC778; transgene &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; homology &#xC778;&#xD574; &#xC720;&#xBC1C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xC6B0;&#xD68C; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC77C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCD5C;&#xC18C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; homology &#xD569;&#xC131; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; (a) &#xC18C;&#xC124; &#xB610;&#xB294; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD55C; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB2E4;&#xB978; heterologous &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300;&#xCCB4; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; DNA &#xB610;&#xB294; (&quot;b) &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xAD50;&#xD658;&quot;&#xC758; &#xD569;&#xC131; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xCE6D; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; cis &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xB3C4;&#xC785; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; A&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC218;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; (&#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xBC0F; &#xD558;&#xC704; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; a 1&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C;) &#xBAA8;&#xB378;&#xB85C; 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758;. &#xC9D1;&#xD569; &#xC218;&#xC815;&#xB41C; 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; &#xAC15;&#xB3C4; &#xB77C;&#xAE30;&#xBCF4;&#xB2E4; &#xBCA0;&#xD0C0;-glucuronidase&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB85C; 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50;&#xB294; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xACFC;&#xB3C4; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC73C;&#xB85C;&#xB294; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;&#xAC00; &#xC8FC;&#xB3C4; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xAD50;&#xD658; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC18C;&#xC124; DNA &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; cis &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xBC30;&#xCE58; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB41C;&#xB294; 35s&#xC758; &#xADF8;&#xAC83;&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. Mod2a1t&#xC640; Mod3A1T &#xB450; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xAD6C;&#xBB38; &#xB2E4;&#xC74C; &#xBD84;&#xAE30; DNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xBC0F; &#xD558;&#xC704; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; a 1&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xBC30;&#xCE58; &#xD558; &#xC5EC; &#xC124;&#xACC4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC81C; &#xB2C9; &#xB2F4;&#xBC30; (Nicotiana tabacum) &#xB450; &#xAD6C;&#xBB38;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xACFC; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xB85C; 35S &#xAE30;&#xBCF8; transformants&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. Mod2A1T &#xBC0F; Mod3A1T &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; 35s&#xC758; &#xADF8;&#xAC83;&#xACFC; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC801;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, T1 &#xC138;&#xB300;&#xC758; &#xBAA8; &#xC885;&#xC5D0; Mod2A1T &#xBAA8;&#xD130; &#xC2DD; 35S &#xBAA8;&#xD130;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC; &#xC804;&#xB7B5; &#xD569;&#xC131; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC9D1;&#xD569;&#xC774; &#xCD5C;&#xC18C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; homology&#xC640; &#xC2DD; &#xB808;&#xBCA8; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0; &#xD0C0;&#xC785;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC218;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xB294; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; transgene &#xC2DD; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; cis-&#xC694;&#xC18C; &#xC0AC;&#xC774; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xC5FD;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Transgene &#xC2DD; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD5C;&#xC18C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; homology&#xC640; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC804;&#xB7B5;: &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xAD50;&#xD658; &#xB300; &#xC18C;&#xC124; DNA &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; cis-&#xC694;&#xC18C;.

El virus del mosaico del coliflor 35S promotor (35S) se ha utilizado extensivamente para la expresi&oacute;n constitutiva de transgenes en plantas dicotiled&oacute;neas. El uso repetitivo del mismo promotor se sabe para inducir inactivaci&oacute;n del transg&eacute;n por homolog&iacute;a de promotor. Como una forma de evitar este problema, probamos dos estrategias diferentes para el desarrollo de promotores sint&eacute;ticos que son funcionalmente equivalentes pero tienen una homolog&iacute;a de secuencia m&iacute;nima. Estos promotores pueden generarse introduciendo a cis-elementos conocidos en una novela o un tramo sint&eacute;tico de ADN o (&quot;b) intercambio de dominio&quot;, en donde los dominios de un promotor pueden reemplazarse con dominios funcionalmente equivalentes de otros promotores heter&oacute;logos. Evaluamos las dos estrategias para modificaciones de promotor con dominio A (consistiendo en promotor m&iacute;nimo y subdominio A1) del promotor 35S como modelo. Se elaboraron un conjunto de promotores 35S modificado cuya fuerza se compar&oacute; con el promotor 35S propiamente utilizando beta-glucuronidase como el gen reportero. An&aacute;lisis de la expresi&oacute;n del gen reportero en sistema transitorio de ensayo mostr&oacute; que dominio que intercambia condujo a una ca&iacute;da significativa en la actividad del promotor. Por el contrario, promotores, desarrollados mediante la colocaci&oacute;n de elementos cis en un nuevo contexto de ADN mostraron niveles de expresi&oacute;n comparable con la del 35S. Posteriormente, se dise&ntilde;aron dos construcciones de promotor Mod2A1T y Mod3A1T colocando las secuencias de la base del promotor m&iacute;nimo y subdominio A1 en secuencias de ADN divergentes. Transg&eacute;nicos desarrollaron en tabaco (Nicotiana tabacum) con las dos construcciones y con 35S como control se utilizaron para evaluar la actividad del promotor en diferentes tejidos de transformantes primarios. Mod2A1T y Mod3A1T fueron encontrados para ser activo en todos los tejidos analizados, con niveles comparables con el de 35S. Adem&aacute;s, la expresi&oacute;n del promotor Mod2A1T en las plantas de semillero de la generaci&oacute;n de T1 tambi&eacute;n fue similar a la del promotor 35S. La presente estrategia abre la posibilidad de crear un conjunto de promotores sint&eacute;ticos con homolog&iacute;a de secuencia m&iacute;nima y con niveles de expresi&oacute;n comparable con el prototipo de salvaje-tipo modificando secuencias presentes entre cis-elementos para la expresi&oacute;n del transg&eacute;n en las plantas.

Estrategias para el desarrollo de promotores funcionalmente equivalentes con homolog&iacute;a de secuencia m&iacute;nima para la expresi&oacute;n del transg&eacute;n en las plantas: cis-elementos en un nuevo contexto de ADN versus dominio que intercambia.

&#x756A;&#x8304;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; Pti4&#xFF0C;&#x4E59;&#x70EF;&#x53CD;&#x5E94;&#x56E0;&#x5B50; (ERF) &#x4E0E;&#x75BE;&#x75C5;&#x62B5;&#x6297;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53D6;&#x529B;&#x5668;&#x7269;&#x7406;&#x4EA4;&#x4E92;&#x5E76;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x6D77;&#x5408;&#x4F1A;&#x6846;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x5143;&#x7D20;&#xFF0C;&#x76EE;&#x524D;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x76F8;&#x5173; &#xFF08;PR&#xFF09; &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x66FE;&#x62A5;&#x9053;&#x4E00;&#x8868;&#x793A; Pti4 &#x7684;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x690D;&#x7269;&#x8868;&#x8FBE;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6D77;&#x5408;&#x4F1A;&#x6846;&#x5305;&#x542B; PR &#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x4E0E;&#x5047;&#x5355;&#x80DE;&#x83CC;&#x6591;&#x70B9;&#x5149;&#x4F0F;&#x756A;&#x8304;&#x6216;&#x767D;&#x7C89; orontii &#x63A5;&#x79CD;&#x540E;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x690D;&#x7269;&#x76F8;&#x6BD4;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x75C7;&#x72B6;&#x3002;&#x8981;&#x6DF1;&#x5165;&#x4E86;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x53D7; Pti4&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E32;&#x884C;&#x5206;&#x6790;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE; (SAGE) &#x6765;&#x6BD4;&#x8F83;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C; Pti4 &#x8868;&#x8FBE;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x690D;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x3002;&#x5723;&#x4EBA;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6D4B;&#x91CF; &gt; 20,000 &#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x548C;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684; 50 &#x7684;&#x6700;&#x9AD8;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x690D;&#x7269;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x3002;&#x4ECE;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C; Pti4 &#x8868;&#x8FBE;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x690D;&#x7269;&#x8C31;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7814;&#x7A76;&#x663E;&#x793A;&#x7F16;&#x7801;&#x56FD;&#x9632;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x3001; &#x6838;&#x7CD6;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; &#xFF08;TFs&#xFF09; 78 &#x5DEE;&#x5F02;&#x4E30;&#x5BCC;&#x8A8A;&#x672C;&#x3002;&#x8BB8;&#x591A;&#x786E;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E5F;&#x8868;&#x793A;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5728;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x671F;&#x95F4;&#x611F;&#x67D3;&#x4E86;&#x5047;&#x5355;&#x80DE;&#x83CC;&#x5149;&#x4F0F;&#x756A;&#x8304;&#x6591;&#x70B9;&#x75C5;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E0E;&#x56FD;&#x9632;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5927;&#x591A;&#x6570; Pti4 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A; GCC &#x6846;&#x3002;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x6C89;&#x6DC0;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x5B9E; Pti4 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x4F53;&#x5185;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x6B64;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x5143;&#x7D20;&#x7684;&#x5BA3;&#x4F20;&#x5458;&#x3002;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9; ERF&#x3001; MYB&#xFF0C;&#x548C; GBF TFs &#x5728;&#x573A;&#x53D7; Pti4 &#x7684;&#x53D1;&#x8D77;&#x4EBA;&#x5728;&#x7EDF;&#x8BA1;&#x4E0A;&#x663E;&#x8457;&#x589E;&#x52A0;&#x4EBA;&#x6570;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;Pti4 &#x4F3C;&#x4E4E;&#x7531;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6D77;&#x5408;&#x4F1A;&#x6846;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x80FD;&#x975E;&#x6D77;&#x6E7E;&#x5408;&#x4F5C;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x6846;&#x5143;&#x7D20;&#x548C;&#x76F4;&#x63A5;&#x95F4;&#x63A5;&#x5730;&#x6FC0;&#x6D3B; TF &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6216;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6; TFs &#x7269;&#x7406;&#x4EA4;&#x4E92;&#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

&#x756A;&#x8304;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; Pti4 &#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D77;&#x5408;&#x4F1A;&#x6846;&#x548C;&#x975E; GCC &#x6846;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x5143;&#x7D20;&#x4E0E;&#x56FD;&#x9632;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

The tomato transcription factor Pti4, an ethylene-responsive factor (ERF), interacts physically with the disease resistance protein Pto and binds the GCC box cis element that is present in the promoters of many pathogenesis-related (PR) genes. We reported previously that Arabidopsis plants expressing Pti4 constitutively express several GCC box-containing PR genes and show reduced disease symptoms compared with wild-type plants after inoculation with Pseudomonas syringae pv tomato or Erysiphe orontii. To gain insight into how genome-wide gene expression is affected by Pti4, we used serial analysis of gene expression (SAGE) to compare transcripts in wild-type and Pti4-expressing Arabidopsis plants. SAGE provided quantitative measurements of >20,000 transcripts and identified the 50 most highly expressed genes in Arabidopsis vegetative tissues. Comparison of the profiles from wild-type and Pti4-expressing Arabidopsis plants revealed 78 differentially abundant transcripts encoding defense-related proteins, protein kinases, ribosomal proteins, transporters, and two transcription factors (TFs). Many of the genes identified were expressed differentially in wild-type Arabidopsis during infection by Pseudomonas syringae pv tomato, supporting a role for them in defense-related processes. Unexpectedly, the promoters of most Pti4-regulated genes did not have a GCC box. Chromatin immunoprecipitation experiments confirmed that Pti4 binds in vivo to promoters lacking this cis element. Potential binding sites for ERF, MYB, and GBF TFs were present in statistically significantly increased numbers in promoters regulated by Pti4. Thus, Pti4 appears to regulate gene expression directly by binding the GCC box and possibly a non-GCC box element and indirectly by either activating the expression of TF genes or interacting physically with other TFs.

The tomato transcription factor Pti4 regulates defense-related gene expression via GCC box and non-GCC box cis elements.

Le facteur de transcription de tomate Pti4, un facteur d&#x26;#39;&#xE9;thyl&#xE8;ne-sensible (FER), interagit physiquement avec la maladie de r&#xE9;sistance &#xE0; la prot&#xE9;ine se lie avec prise de force et l&#x26;#39;&#xE9;l&#xE9;ment de bo&#xEE;te de CCG cis qui est pr&#xE9;sent dans les promoteurs de nombreux pathogen&#xE8;se li&#xE9;s (PR) g&#xE8;nes. Nous avons signal&#xE9; pr&#xE9;c&#xE9;demment que des plantes d&#x26;#39;Arabidopsis exprimant Pti4 expriment constitutivement GCC plusieurs box-contenant des g&#xE8;nes PR et de montrer des sympt&#xF4;mes de maladie r&#xE9;duits par rapport &#xE0; plantes de type sauvage apr&#xE8;s l&#x26;#39;inoculation avec Pseudomonas syringae pv de tomate ou Erysiphe orontii. Pour mieux comprendre comment l&#x26;#39;ensemble du g&#xE9;nome expression des g&#xE8;nes est affect&#xE9;e par Pti4, nous avons utilis&#xE9; l&#x26;#39;analyse en s&#xE9;rie de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique (SAGE) de comparer les transcriptions de type sauvage et Pti4 exprimant des plantes d&#x26;#39;Arabidopsis. SAGE ont fourni des mesures quantitatives de 20.000 transcriptions&#x26;gt; et a identifi&#xE9; les 50 g&#xE8;nes les plus fortement exprim&#xE9;s dans Arabidopsis tissus v&#xE9;g&#xE9;tatifs. La comparaison des profils de type sauvage et Pti4 exprimant des plantes d&#x26;#39;Arabidopsis a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; 78 g&#xE8;nes diff&#xE9;rentiellement abondantes codant li&#xE9;es &#xE0; la d&#xE9;fense des prot&#xE9;ines, des prot&#xE9;ines kinases, des prot&#xE9;ines ribosomiques, des transporteurs, et deux facteurs de transcription (FT). La plupart des g&#xE8;nes identifi&#xE9;s ont &#xE9;t&#xE9; exprim&#xE9;s de mani&#xE8;re diff&#xE9;rentielle de type sauvage Arabidopsis cours de l&#x26;#39;infection par Pseudomonas syringae pv tomate, soutenant un r&#xF4;le pour eux li&#xE9;es &#xE0; la d&#xE9;fense processus. De fa&#xE7;on inattendue, les promoteurs de la plupart des g&#xE8;nes r&#xE9;gul&#xE9;s par Pti4 n&#x26;#39;a pas eu une bo&#xEE;te de GCC. Exp&#xE9;riences immunopr&#xE9;cipitation de la chromatine a confirm&#xE9; que Pti4 se lie in vivo &#xE0; des promoteurs qui n&#x26;#39;ont pas cet &#xE9;l&#xE9;ment cis. Sites de liaison potentiels pour TFS FER, MYB, et GBF &#xE9;taient pr&#xE9;sents en nombre une augmentation statistiquement significative dans promoteurs r&#xE9;gul&#xE9;s par Pti4. Ainsi, Pti4 appara&#xEE;t pour r&#xE9;guler l&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne directement par liaison de la bo&#xEE;te CCG et &#xE9;ventuellement un &#xE9;l&#xE9;ment de bo&#xEE;te de non-GCC et indirectement par l&#x26;#39;activation soit l&#x26;#39;expression de g&#xE8;nes ou TF TF interaction physique avec les autres.

Le facteur de transcription de tomates Pti4 r&#xE9;gule l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique li&#xE9;es &#xE0; la d&#xE9;fense via la bo&#xEE;te GCC et non-membres du CCG &#xE9;l&#xE9;ments cis Box

Die Tomate Transkriptionsfaktor reguliert Pti4 Verteidigungsindustrie Genexpression &#xFC;ber GCC-Box und nicht-GCC-Box cis-Elemente.

Il fattore di trascrizione di pomodoro Pti4, un fattore di etilene-reattivo (ERF), interagisce fisicamente con la proteina di resistenza di malattia Pto e associa l&#39;elemento cis della casella di GCC che &egrave; presente nei promotori di molti geni (PR) correlati a patogenesi. Abbiamo segnalato in precedenza che piante di Arabidopsis esprimendo Pti4 costitutivamente esprimono diversi GCC scatola contenente PR geni e mostrano i sintomi della malattia ridotta rispetto al wild-type piante dopo l&#39;inoculazione con pomodoro di Pseudomonas syringae pv o Erysiphe orontii. Per guadagnare la comprensione come genome-wide gene expression &egrave; influenzata da Pti4, abbiamo usato serial analysis of gene expression (SAGE) per confrontare le trascrizioni in wild-type e piante di Arabidopsis Pti4-esprimere. SAGE fornito misurazioni quantitative di &amp;gt; 20.000 trascrizioni e identificato 50 geni pi&ugrave; altamente espressi nei tessuti vegetativi Arabidopsis. Confronto dei profili da piante di Arabidopsis wild-type ed esprimendo Pti4 rivelato 78 trascritti differenzialmente abbondanti codifica proteine correlate a difesa, chinasi, proteine ribosomiali, trasportatori e due fattori di trascrizione (TFs). Molti dei geni identificati sono stati espressi differenzialmente nel selvaggio-tipo Arabidopsis durante l&#39;infezione da pomodoro pv Pseudomonas syringae sostenendo un ruolo per loro nei processi di difesa. Inaspettatamente, i promotori della maggior parte dei geni regolati Pti4 non hanno una casella di GCC. Gli esperimenti di immunoprecipitazione della cromatina ha confermato che Pti4 associa in vivo ai promotori manca questo elemento cis. Potenziali siti di legame per ERF, MYB e TFs GBF erano presenti in numero statisticamente significativo aumento in promotori regolamentate da Pti4. Cos&igrave;, Pti4 sembra regolare espressione del gene legandosi direttamente la casella GCC e possibilmente un elemento della casella non-GCC e indirettamente o attivando l&#39;espressione di geni TF o interagire fisicamente con altri TFs.

Il fattore di trascrizione di pomodoro Pti4 regola l&#39;espressione genica correlati a difesa tramite GCC box e non-GCC casella cis elementi.

&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;Pti4&#x3001;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x5FDC;&#x7B54;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;ERF&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x5BB3;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;PTO&#x3068;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306B;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x95A2;&#x9023;&#xFF08;PR&#xFF09;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;GCC&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Pti4&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x690D;&#x7269;&#x304C;&#x6052;&#x5E38;&#x7684;&#x306B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;GCC&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x542B;&#x3080;PR&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;Pseudomonas syringae&#x306E;PV&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x3084;&#x3069;&#x3093;&#x3053;orontii&#x63A5;&#x7A2E;&#x5F8C;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x690D;&#x7269;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3059;&#x308B;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x75C7;&#x72B6;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x30EF;&#x30A4;&#x30C9;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;Pti4&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;Pti4&#x767A;&#x73FE;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x9023;&#x7D9A;&#x5206;&#x6790;&#xFF08;SAGE&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; SAGE&#x306F;&#x26;gt;2&#x4E07;&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x690D;&#x7269;&#x7D44;&#x7E54;&#x4E2D;&#x306E;50&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;Pti4&#x767A;&#x73FE;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x690D;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306F;&#x3001;&#x9632;&#x885B;&#x95A2;&#x9023;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x30EA;&#x30DC;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;&#x53CA;&#x3073;2&#x3064;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;TF&#xFF09;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;78&#x5DEE;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306F;&#x3001;&#x9632;&#x885B;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x652F;&#x63F4;&#x3059;&#x308B;&#x3001;Pseudomonas syringae&#x306E;PV&#x306E;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x611F;&#x67D3;&#x4E2D;&#x306B;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306B;&#x793A;&#x5DEE;&#x7684;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x4E88;&#x671F;&#x305B;&#x305A;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;Pti4&#x8ABF;&#x7BC0;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;GCC&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Pti4&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;in vivo&#x3067;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x305F;&#x3002; ERF&#x3001;MYB&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;GBF TF&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x304C;Pti4&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x7D71;&#x8A08;&#x7684;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x756A;&#x53F7;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;Pti4&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;TF&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;TFS&#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306B;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x9593;&#x63A5;&#x7684;&#x306B;GCC&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x975E;GCC&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x8981;&#x7D20;&#x3068;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x76F4;&#x63A5;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;Pti4&#x306F;&#x3001;GCC&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;&#x975E;GCC&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x9632;&#x885B;&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;

&#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; Pti4, &#xC5D0;&#xD2F8;&#xB80C; &#xBC18;&#xC751; &#xACC4;&#xC218; (ERF), &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC800;&#xD56D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Pto&#xC640; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xB9CE;&#xC740; pathogenesis &#xAD00;&#xB828; (&#xD64D;&#xBCF4;) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; GCC &#xC0C1;&#xC790; cis &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; Arabidopsis &#xC2DD;&#xBB3C; constitutively Pti4 &#xD45C;&#xD604; &#xD64D;&#xBCF4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC0C1;&#xC790; &#xBA87; GCC&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xACE0; &#xB179; syringae pv &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; &#xB610;&#xB294; Erysiphe orontii &#xC811;&#xC885; &#xD6C4; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xAC10;&#xC18C; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC99D;&#xC0C1;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;. &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xAC8C;&#xB188; &#xC804;&#xCCB4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC5BB;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC2DD; pti4&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xBC0F; Pti4 &#xD45C;&#xD604; Arabidopsis &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC131;&#xC801; &#xBE44;&#xAD50; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; (&#xC138;&#xC774; &#xC9C0;)&#xC758; &#xC9C1;&#xB82C; &#xBD84;&#xC11D; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xC138;&#xC774; &#xC9C0; &#xC81C;&#xACF5;&#xC758; &#xC815;&#xB7C9;&#xC801; &#xCE21;&#xC815; &amp;gt; 20000 &#xC131;&#xC801;&#xD45C; Arabidopsis &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; 50 &#xAC00;&#xC7A5; &#xB192;&#xC740; &#xD45C;&#xD604;&#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558; &#xACE0;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBC0F; Pti4 &#xD45C;&#xD604; Arabidopsis &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xBC29;&#xC5B4; &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; kinases, ribosomal &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xC804;&#xC1A1;&#xAE30;, &#xBC0F; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778; (TFs) 78 &#xCC28;&#xB3D9; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xB179;&#xCDE8; &#xB85D;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; Arabidopsis&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; &#xB179; syringae pv &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0;, &#xAD6D;&#xBC29; &#xAD00;&#xB828; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD558; &#xC5EC;. &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xAC8C;, &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; Pti4 &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130;&#xB294; GCC &#xC0C1;&#xC790;&#xB97C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. Chromatin immunoprecipitation &#xC2E4;&#xD5D8; &#xD655;&#xC778; Pti4 vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC774; ci &#xC694;&#xC18C; &#xACB0;&#xC5EC;&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. ERF, MYB &#xC77C; &#xBC0F; GBF Tfs&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; pti4&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xACC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; &#xC22B;&#xC790;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, Pti4 GCC &#xC0C1;&#xC790; &#xBC0F; &#xBE44; GCC &#xC0C1;&#xC790; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xC5EC; &#xC9C1;&#xC811; &#xBC0F; &#xAC04;&#xC811;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; TF &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xB2E4;&#xB978; Tfs&#xC640; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; Pti4 GCC &#xC0C1;&#xC790; &#xBC0F; &#xBE44; GCC &#xC0C1;&#xC790; cis &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC29;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC870;&#xC808;.

El factor de transcripci&#xF3;n de tomate Pti4, un factor de etileno-sensible (FER), interacciona f&#xED;sicamente con la prote&#xED;na de la enfermedad por toma de la resistencia y se une el cuadro de GCC elemento cis que est&#xE1; presente en los promotores de muchos relacionados con la patog&#xE9;nesis (PR) genes. Hemos informado anteriormente de que las plantas de Arabidopsis que expresan constitutivamente expresar Pti4 GCC varias cajas que contienen los genes PR y muestran reducci&#xF3;n de los s&#xED;ntomas de enfermedad en comparaci&#xF3;n con plantas silvestres despu&#xE9;s de la inoculaci&#xF3;n con Pseudomonas syringae pv tomate o orontii Erysiphe. Para tener una idea de c&#xF3;mo el genoma expresi&#xF3;n de los genes se ve afectada por Pti4, se utiliz&#xF3; el an&#xE1;lisis serial de expresi&#xF3;n g&#xE9;nica (SAGE) para comparar las transcripciones de las plantas de Arabidopsis de tipo salvaje y Pti4 expresar. SAGE proporciona mediciones cuantitativas de&#x26;gt; 20.000 expedientes y se identificaron los 50 genes m&#xE1;s altamente expresados &#x200B;&#x200B;en Arabidopsis tejidos vegetativos. La comparaci&#xF3;n de los perfiles de las plantas de Arabidopsis de tipo salvaje y Pti4 expresar-78 revel&#xF3; transcripciones diferencialmente abundantes que codifican prote&#xED;nas relacionadas con la defensa, las prote&#xED;nas quinasas, prote&#xED;nas ribosomales, transportistas, y dos factores de transcripci&#xF3;n (TFS). Muchos de los genes identificados fueron expresados &#x200B;&#x200B;diferencialmente en el medio silvestre de tipo Arabidopsis durante la infecci&#xF3;n por Pseudomonas syringae pv tomate, el apoyo a un papel para ellos en los procesos relacionados con la defensa. Inesperadamente, los promotores de la mayor&#xED;a de los Pti4 genes regulados no tienen un cuadro de GCC. Experimentos de inmunoprecipitaci&#xF3;n de cromatina confirm&#xF3; que Pti4 se une in vivo a los promotores que carecen de este elemento cis. Los posibles sitios de uni&#xF3;n para TFS FER, MYB, y la FAG estaban presentes en un n&#xFA;mero estad&#xED;sticamente significativo aumento en los promotores regulados por Pti4. As&#xED;, Pti4 parece regular la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica directamente mediante la uni&#xF3;n de la caja de GCC y posiblemente un elemento de caja no CCG e indirectamente por cualquiera de activar la expresi&#xF3;n de genes TF o interactuar f&#xED;sicamente con otros FF.

El factor de transcripci&#xF3;n de tomate Pti4 Regula relacionados con la defensa la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica a trav&#xE9;s de caja del CCG y la No-CCG elementos cis Caja

&#x82B1;&#x6930;&#x83DC;&#x82B1;&#x53F6;&#x75C5;&#x6BD2; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50; (35S) &#x88AB;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7528;&#x4E8E;&#x5404;&#x79CD;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x690D;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x53D1;&#x8D77;&#x4EBA;&#x5DF2;&#x5212;&#x5B9A;&#x5230;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5B50;&#x57DF;&#xFF0C;&#x5220;&#x9664;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x589E;&#x76CA;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x53EA;&#x5728;&#x57DF; B1 &#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x5143;&#x7D20; &#xFF08;2 &#x4F5C;&#x4E3A;&#x5143;&#x7D20;&#xFF09;&#xFF0C;A1 &#xFF08;1 &#x4F5C;&#x4E3A;&#x5143;&#x7D20;&#xFF09; &#x548C;&#x6700;&#x5C0F;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50; &#xFF08;TATA &#x6846;&#xFF09;&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x5143;&#x7D20;&#x8BF4;&#x660E;&#x4E86;&#x5728;&#x5B50;&#x57DF; B2-B5&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x636E;&#x8BF4;&#x6709;&#x91CD;&#x8981; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x6574;&#x4F53;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x91CD;&#x65B0;&#x8BC4;&#x4F30;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B50;&#x57DF;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x7684;&#x8D21;&#x732E;&#xFF0C;&#x5373; B5&#x3001; B4&#x3001; B2&#xFF0C;&#x5230; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x51E0;&#x4E2A;&#x4FEE;&#x6539;&#x5BA3;&#x4F20;&#x5458;&#x3002;&#x9A71;&#x52A8;&#x88AB;&#x4FEE;&#x6539;&#x8FC7;&#x7684;&#x521B;&#x529E;&#x4EBA;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x70DF;&#x8349;&#x884C;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5728; T(1) &#x4E00;&#x4EE3;&#xFF0C;&#x5E7C;&#x82D7;&#x7684;&#x75C5;&#x7406;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x65B0;&#x5C42;&#x9762;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF1A; (i) 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x622A;&#x65AD;&#x8FBE;-301 &#x51FD;&#x6570;&#x4EE5;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x5411;-343 (&#x5168;&#x957F;) 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50; &#xFF1B;(ii) &#x7684;&#x81EA;&#x7531;&#x5EA6;&#x6838;&#x5FC3;&#x548C;&#x6846;&#x6838;&#x5FC3;&#x5B50;&#x57DF;&#x4E2D;&#x6307;&#x51FA; B4 &#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027; &#xFF1B;&#x53CA; (iii) &#x8BE5;&#x5B50;&#x57DF; B2 &#x662F;&#x4FDD;&#x6301;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x8DDD;&#x79BB;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8FD1;&#x7AEF;&#x548C;&#x8FDC;&#x7AEF; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x5C06;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x4E0E;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x5408;&#x6210; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x9A71;&#x52A8;&#x591A;&#x4E2A;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E0D;&#x5524;&#x8D77;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#x57FA;&#x4E8E;&#x540C;&#x6E90;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x65F6;&#x5C1D;&#x8BD5;&#x57FA;&#x56E0;&#x5806;&#x53E0;&#x3002;

&#x82B1;&#x6930;&#x83DC;&#x82B1;&#x53F6;&#x75C5;&#x6BD2; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#xFF1A; &#x91CD;&#x65B0;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x7684;&#x5B50;&#x57DF; B5&#x3001; B4&#x3001; B2 &#x4E2D;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The cauliflower mosaic virus 35S (35S) promoter is used extensively for transgene expression in plants. The promoter has been delineated into different subdomains based on deletion analysis and gain-of-function studies. However, cis-elements important for promoter activity have been identified only in the domains B1 (as-2 element), A1 (as-1 element) and minimal promoter (TATA box). No cis-elements have been described in subdomains B2-B5, although these are reported to be important for the overall activity of the 35S promoter. We have re-evaluated the contribution of three of these subdomains, namely B5, B4 and B2, to 35S promoter activity by developing several modified promoters. The analysis of beta-glucuronidase gene expression driven by the modified promoters in different tissues of primary transgenic tobacco lines, as well as in seedlings of the T(1) generation, revealed new facets about the functional organization of the 35S promoter. This study suggests that: (i) the 35S promoter truncated up to -301 functions in a similar manner to the -343 (full-length) 35S promoter; (ii) the Dof core and I-box core observed in the subdomain B4 are important for 35S promoter activity; and (iii) the subdomain B2 is essential for maintaining an appropriate distance between the proximal and distal regions of the 35S promoter. These observations will aid in the development of functional synthetic 35S promoters with decreased sequence homology. Such promoters can be used to drive multiple transgenes without evoking promoter homology-based gene silencing when attempting gene stacking.

Functional analysis of cauliflower mosaic virus 35S promoter: re-evaluation of the role of subdomains B5, B4 and B2 in promoter activity.

Le virus de mosa&iuml;que de chou-fleur 35 s promoteur (35 s) est largement utilis&eacute; pour l&#39;expression de transg&egrave;nes dans les v&eacute;g&eacute;taux. Le promoteur a &eacute;t&eacute; d&eacute;limit&eacute; dans diff&eacute;rents sous-domaines bas&eacute;es sur l&#39;analyse de suppression et d&#39;&eacute;tudes de gain de fonction. Cependant, le cis-&eacute;l&eacute;ments importants pour l&#39;activit&eacute; du promoteur ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s seulement dans les domaines B1 (&eacute;l&eacute;ment sous-2), A1 (comme-1 &eacute;l&eacute;ment) et promoteur minimal (bo&icirc;te TATA). Aucun &eacute;l&eacute;ment-cis n&#39;ont &eacute;t&eacute; d&eacute;crits en sous-domaines B2-B5, m&ecirc;me si ceux-ci sont signal&eacute;s comme &eacute;tant importante pour l&#39;activit&eacute; globale du promoteur 35 s. Nous avons r&eacute;&eacute;valu&eacute; la contribution de trois de ces sous-domaines, savoir le B5, B4 et B2, &agrave; l&#39;activit&eacute; du promoteur 35 s en d&eacute;veloppant plusieurs promoteurs modifi&eacute;. L&#39;analyse de l&#39;expression du g&egrave;ne b&ecirc;ta-glucuronidase entra&icirc;n&eacute;e par les promoteurs modifi&eacute;s dans diff&eacute;rents tissus de lign&eacute;es de tabac transg&eacute;nique primaire, ainsi que chez les plantules de la g&eacute;n&eacute;ration de T(1), a r&eacute;v&eacute;l&eacute; de nouvelles facettes sur l&#39;organisation fonctionnelle du promoteur 35 s. Cette &eacute;tude sugg&egrave;re que: (i) du promoteur 35 s tronqu&eacute;e jusqu&#39;&agrave;-301 fonctions de mani&egrave;re similaire au promoteur 35 s (long) de-343 ; (ii) la Dof et c&oelig;urs de bo&icirc;te j&#39;ai observ&eacute; dans le sous-domaine B4 sont importants pour l&#39;activit&eacute; du promoteur 35 s ; et (iii) le sous-domaine B2 est essentielle pour maintenir une distance appropri&eacute;e entre les r&eacute;gions proximales et distales du promoteur 35 s. Ces observations facilitera le d&eacute;veloppement des promoteurs de la fonctionnelle de 35 s synth&eacute;tique avec une diminution d&#39;homologie. Ces promoteurs peuvent &ecirc;tre utilis&eacute;s pour piloter plusieurs transg&egrave;nes sans &eacute;voquer le promoteur ax&eacute;e sur l&#39;homologie avec des g&egrave;nes silencieux lors de la tentative d&#39;empilage de g&egrave;nes.

Analyse fonctionnelle du promoteur 35 s du virus mosa&iuml;que du chou-fleur : r&eacute;&eacute;valuation du r&ocirc;le des sous-domaines B5, B4 et B2 dans l&#39;activit&eacute; du promoteur.

Die Blumenkohl-Mosaik-Virus 35S (35S) Projekttr&auml;ger wird extensiv f&uuml;r Transgene Ausdruck in den Anlagen. Der Projekttr&auml;ger hat in verschiedenen Subdom&auml;nen basierend auf L&ouml;schung Analyse und Gain of Function Studien abgegrenzt worden. Jedoch Cis-Elemente wichtig f&uuml;r Promotor-Aktivit&auml;t wurden nur in den Bereichen B1 (als-2-Element), A1 (als-1-Element) und minimale F&ouml;rderer (TATA-Box). Keine Cis-Elemente wurden in Unterdom&auml;nen B2-B5, obwohl diese gemeldet werden, wichtig f&uuml;r die Gesamtaktivit&auml;t des Projekttr&auml;gers 35S beschrieben. Wir haben den Beitrag von drei dieser Sub-Domains neu bewertet, n&auml;mlich B5, B4 und B2, 35S F&ouml;rderer Aktivit&auml;t durch die Entwicklung mehrerer Veranstalter ge&auml;ndert. Die Analyse der Beta-Glukuronidase-Genexpression, getrieben durch die ge&auml;nderte F&ouml;rderer in verschiedenen Geweben der prim&auml;ren transgenen Tabak Linien sowie in S&auml;mlinge der T(1) Generation, ergab neue Facetten &uuml;ber die funktionelle Organisation des Projekttr&auml;gers 35S. Diese Studie legt nahe, dass: (i) der 35S-Promoter abgeschnitten bis zu-301 Funktionen in &auml;hnlicher Weise f&uuml;r den-343 (in) 35S F&ouml;rderer; (Ii) die Dof Core und -Box Core beobachtet in der Subdom&auml;ne B4 sind wichtig f&uuml;r 35S F&ouml;rderer Aktivit&auml;t; und (Iii) die Subdomain B2 ist wesentlich f&uuml;r die Aufrechterhaltung der eines angemessenen Abstand zwischen der proximalen und distalen Regionen des Projekttr&auml;gers 35S. Diese Beobachtungen werden bei der Entwicklung der funktionalen synthetische 35S F&ouml;rderer mit verringerter Sequenz-Homologie helfen. Solche F&ouml;rderer k&ouml;nnen verwendet werden, um mehrere transgene fahren ohne hervorzurufen, Projekttr&auml;ger Homologie-basierte gen Unterdr&uuml;ckender beim Stapeln von gen.

Funktionsanalyse von Blumenkohl Mosaik Virus 35S F&ouml;rderer: Neubewertung der Rolle der Subdomains B5, B4 und B2 in Promotor-Aktivit&auml;t.

Il cavolfiore mosaic virus 35S promotore (35S) &egrave; ampiamente utilizzato per l&#39;espressione del transgene nelle piante. Il promotore ha stato delineato in diversi sottodomini basati sul guadagno di funzione studi e analisi di eliminazione. Tuttavia, cis-elementi importanti per l&#39;attivit&agrave; di promotore sono stati identificati solo in domini B1 (come 2 elemento), A1 (elemento come-1) e promotore minimo (TATA box). No elementi cis-sono state descritte in sottodomini B2-B5, anche se questi sono segnalati per essere importante per l&#39;attivit&agrave; complessiva del promotore 35S. Noi abbiamo rivalutato il contributo di tre di questi sottodomini, vale a dire B5, B4 e B2, all&#39;attivit&agrave; di promotore 35S sviluppando diversi modificato promotori. L&#39;analisi di espressione del gene beta-glucuronidasi guidato dai promotori modificati in diversi tessuti di linee tabacco transgenico primario, cos&igrave; come nei semenzali di generazione T(1), ha rivelato nuove sfaccettature circa l&#39;organizzazione funzionale del promotore 35S. Questo studio suggerisce che: (i) il promotore 35S troncato fino a-301 funzioni in modo simile al promotore 35S (full-length)-343; (ii) il Dof core e core casella osservata nel sottodominio B4 sono importanti per l&#39;attivit&agrave; di promotore 35S; e (iii) il sottodominio B2 &egrave; essenziale per mantenere un&#39;adeguata distanza tra regioni prossimali e distali del promotore 35S. Queste osservazioni saranno di aiuto nello sviluppo di promotori 35S sintetica funzionale con omologia di sequenza &egrave; diminuito. Tali promotori possono essere utilizzati per guidare pi&ugrave; transgeni senza evocare promotore gene basati su omologia tacere quando si tenta di gene stacking.

Analisi funzionale del promotore di 35S virus del mosaico del cavolfiore: rivalutazione del ruolo dei sottodomini B5, B2 e B4 in attivit&agrave; di promotore.

&#x30AB;&#x30EA;&#x30D5;&#x30E9;&#x30EF;&#x30FC; &#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; 35S &#xFF08;35 s&#xFF09; &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x5E83;&#x304F;&#x690D;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x524A;&#x9664;&#x89E3;&#x6790;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30B5;&#x30D6;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x7DDA;&#x5F15;&#x304D;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;cis &#x8981;&#x7D20;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A; B1 &#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;&#x306E;&#x307F;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; (2 &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8981;&#x7D20;) A1 (1 &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8981;&#x7D20;) &#x3068;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; (TATA &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;)&#x3002;&#x30B5;&#x30D6;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; B2 B5 &#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089; 35 s &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;cis &#x306E;&#x8981;&#x7D20;&#x3092;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E; 3 &#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x8CA2;&#x732E;&#x3092;&#x518D;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;, &#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061; B5&#x3001;B4&#x3001;B2 &#x306B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x3088;&#x308B; 35 s &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x7DDA;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F; T(1) &#x4E16;&#x4EE3;&#x306E;&#x5B9F;&#x751F;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x308B; &beta;-&#x30B0;&#x30EB;&#x30AF;&#x30ED;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306F; 35 s &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x5074;&#x9762;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#xFF1A; &#xFF08;i&#xFF09; 35 s &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;-343 &#xFF08;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#xFF09; 35 s &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;; &#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x6700;&#x5927;-301 &#x95A2;&#x6570;&#x3092;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;(ii)&#x3001;Dof&#x3001;- &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; &#x30B3;&#x30A2;&#x3067;&#x30B5;&#x30D6;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; B4 &#x306F; 35 s &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x89B3;&#x5BDF;;(iii) &#x30B5;&#x30D6;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; B2 &#x306F; 35 s &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x8FD1;&#x4F4D;&#x3068;&#x9060;&#x4F4D;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x9593;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x8DDD;&#x96E2;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x6E1B;&#x5C11;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x5408;&#x6210; 35 s &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x652F;&#x63F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x8907;&#x6570; transgenes &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x30B9;&#x30BF;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x3088;&#x3046;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x76F8;&#x540C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x306A;&#x304F;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AB;&#x30EA;&#x30D5;&#x30E9;&#x30EF;&#x30FC; &#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; 35 s &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;: B5&#x3001;B4&#x3001;B2 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x518D;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3002;

&#xAF43; &#xC591;&#xBC30;&#xCD94; &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; 35S (35S) &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; transgene &#xC2DD; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC0AD;&#xC81C; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xC774;&#xB4DD;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD558;&#xC704; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; delineated &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; b 1&#xC5D0;&#xB9CC; cis &#xC694;&#xC18C; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, (2&#xB85C; &#xC694;&#xC18C;) A1 (1-1&#xB85C; &#xC694;&#xC18C;)&#xC640; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; (&#xD0C0; &#xD0C0; &#xBC15;&#xC2A4;). Cis &#xC694;&#xC18C;&#xAC00; &#xC5C6;&#xB294;&#xC774; 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xB294; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC704; b 2-b 5&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC138;&#xC774; &#xD558;&#xC704; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xAE30;&#xC5EC;&#xB97C; &#xC7AC;&#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC989; B5, B4 &#xBC0F; B2, 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xC5EC; &#xC218;&#xC815; &#xB41C; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;. &#xC218;&#xC815;&#xB41C; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; T(1) &#xC138;&#xB300;&#xC758; &#xBAA8; &#xC885;&#xC5D0; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB2F4;&#xBC30; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xBCA0;&#xD0C0;-glucuronidase &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xBD84;&#xC11D; 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBA74;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xAC74;&#xC758; &#xD55C;&#xB2E4;: (i) 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;-343 (&#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774;) 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;;&#xB97C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD5C;&#xB300;-301 &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xC798;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4; (ii) Dof &#xCF54;&#xC5B4;&#xC640; &#xB09C; &#xC0C1;&#xC790; &#xCF54;&#xC5B4; b 4&#xB294; 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9;;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD558;&#xC704; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; (iii) &#xD558;&#xC704; B2 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xC6D0;&#xC2EC; &#xC778;&#xC811; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xAC70;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21;&#xC740; &#xAC10;&#xC18C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; homology&#xB85C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; &#xD569;&#xC131; 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; homology &#xAE30;&#xBC18; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC785;&#xC744; &#xB54C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2A4;&#xD0DC;&#xD0B9; evoking &#xC5C6;&#xC774; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC1C;&#xC758; transgenes &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAF43; &#xC591;&#xBC30;&#xCD94; &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;: B5, B4 &#xBC0F; B2 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD558;&#xC704; &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; &#xC7AC;&#xD3C9;&#xAC00;.

El virus del mosaico del coliflor 35S promotor (35S) se utiliza ampliamente para la expresi&oacute;n del transg&eacute;n en las plantas. El promotor ha sido delineado en diferentes subdominios basados en an&aacute;lisis de deleci&oacute;n y estudios de ganancia de funci&oacute;n. Sin embargo, cis-elementos importantes para la actividad del promotor se han identificado s&oacute;lo en los dominios B1 (elemento como-2), A1 (como-1 elemento) y promotor m&iacute;nimo (caja de TATA). No hay elementos cis se han descrito en subdominios B2-B5, aunque &eacute;stos se divulgan para ser importante para el conjunto de la actividad del promotor 35S. Nos hemos a evaluar la contribuci&oacute;n de tres de estos subdominios, es decir, B4, B5 y B2, actividad de promotor 35S mediante el desarrollo de varios modificaron promotores. El an&aacute;lisis de expresi&oacute;n g&eacute;nica de beta-glucuronidasa impulsado por los promotores modificados en diferentes tejidos de l&iacute;neas de tabaco transg&eacute;nico primaria, as&iacute; como en pl&aacute;ntulas de la generaci&oacute;n de T(1), revel&oacute; nuevas facetas sobre la organizaci&oacute;n funcional del promotor 35S. Este estudio sugiere que: () el promotor 35S truncado hasta-301 las funciones de una manera similar al promotor 35S (larga duraci&oacute;n)-343; (ii) el Dof n&uacute;cleo y n&uacute;cleo-cuadro observados en el subdominio B4 son importantes para la actividad de promotor 35S; y (iii) el subdominio B2 es esencial para mantener una distancia adecuada entre las regiones proximales y distales del promotor 35S. Estas observaciones para facilitar el desarrollo de promotores 35S sint&eacute;tico funcional con homolog&iacute;a de secuencia disminuida. Tales promotores pueden utilizarse para controlar m&uacute;ltiples transgenes sin evocando promotor silenciamiento del gen basadas en homolog&iacute;a al tratar de apilamiento de gene.

An&aacute;lisis funcional del promotor de 35S del virus de mosaico coliflor: reevaluaci&oacute;n del papel de subdominios B4, B5 y B2 en la actividad del promotor.

&#x5728;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7531;&#x4E8E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6548;&#x5E94;&#x548C;&#x62F7;&#x8D1D;&#x6570;&#x53D8;&#x5F02;&#x5747;&#x6B63;&#x5E38;&#x5316;&#x65F6;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x6BD4;&#x8F83;&#x4E0D;&#x540C;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x4F18;&#x52BF;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x53D1;&#x8D77;&#x4EBA;&#x8981;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x653E;&#x5230;&#x8BB0;&#x8005;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E0A;&#x6E38;&#x548C;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x5361;&#x5E26;&#x94FE;&#x63A5;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x5728;&#x540C;&#x4E00;&#x8F6C;&#x79FB; DNA (T-DNA) &#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E86;&#x3002;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x5728;&#x8BE5;&#x6D3B;&#x52A8;&#x6B63;&#x5E38;&#x5316;&#x88AB;&#x8FDB;&#x884C;&#x8BA1;&#x7B97;&#x7684;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x548C;&#x53C2;&#x8003;&#x5BA3;&#x4F20;&#x5458;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x3002;&#x65F6;&#x6709;&#x9002;&#x5F53;&#x6570;&#x91CF;&#x7684;&#x72EC;&#x7ACB;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x6B63;&#x5E38;&#x5316;&#x6709;&#x5229;&#x4E8E;&#x8BC4;&#x4F30;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5021;&#x5BFC;&#x8005;&#x88AB;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4F18;&#x52BF;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4FEE;&#x6539;&#x7684;&#x7248;&#x672C;&#xFF0C;&#x82B1;&#x6930;&#x83DC;&#x82B1;&#x53F6;&#x75C5;&#x6BD2; &#xFF08;CaMV&#xFF09; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x8868;&#x8FBE;&#x8BB0;&#x8005;&#x57FA;&#x56E0;&#x75C5;&#x7406;&#x6027; (gus) &#xFF08;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x76D2;&#xFF09; &#x94FE;&#x63A5;&#x5230;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6C2F;&#x9709;&#x7D20;&#x4E59;&#x9170;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; (cat) &#x57FA;&#x56E0;&#x4E0B; &#xFF08;&#x53C2;&#x8003;&#x5361;&#x5E26;) &#x91CE;&#x751F;&#x578B; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x5728;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x70DF;&#x8349;&#x884C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x770B;&#x5230;&#x732B;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5DEE;&#x5F02;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x4FEE;&#x6539;&#x7684; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50; gus &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x3002;&#x5F15;&#x7528;&#x5361;&#x5E26; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x5DF2;&#x4E0A;&#x8C03;&#x6539;&#x6027;&#x7684; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; 35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x8F83;&#x5F31;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x3002;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#xFF0C;&#x7814;&#x7A76;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#xFF0C;&#x5B83;&#x662F;&#x6307;&#x51CF;&#x5C11;&#x8868;&#x8FBE;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x4E0A;&#x6E38;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x4E0B;&#x6E38;&#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x73B0;&#x8C61;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BB8;&#x591A;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x79EF;&#x6781;&#x4E92;&#x52A8;&#x5176;&#x4E2D;&#x524A;&#x5F31;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8FDE;&#x7EED;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0A;&#x8C03;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x89C2;&#x5BDF;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5728;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x548C;&#x53C2;&#x8003;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x5171;&#x4EAB;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F71;&#x54CD;&#x53C2;&#x8003;&#x53C2;&#x8003;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x89C4;&#x8303;&#x5316;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5242;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x65F6;&#x88AB;&#x4F4E;&#x4F30;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;

&#x6B63;&#x706B;&#x4E0E;&#x53C2;&#x8003;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x690D;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x5206;&#x6790;&#xFF1A; &#x53C2;&#x8003;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x5BF9;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38;&#x3002;

Variations in transgene expression due to position effect and copy number are normalized when analysing and comparing the strengths of different promoters. In such experiments, the promoter to be tested is placed upstream to a reporter gene and a second expression cassette is introduced in a linked fashion in the same transfer DNA (T-DNA). Normalization in the activity of the test promoter is carried out by calculating the ratio of activities of the test and reference promoters. When an appropriate number of independent transgenic events are analysed, normalization facilitates assessment of the relative strengths of the test promoters being compared. In this study, using different modified versions of the Cauliflower Mosaic Virus (CaMV) 35S promoter expressing the reporter gene beta-glucuronidase (gus) (test cassette) linked to a chloramphenicol acetyl transferase (cat) gene under the wild-type 35S promoter (reference cassette) in transgenic tobacco lines, we observed that cat gene expression varied depending upon the strength of the modified 35S promoter expressing the gus gene. The 35S promoter in the reference cassette was found to have been upregulated in cases where the modified 35S promoter was weaker than the wild-type 35S promoter. Many studies have been carried out in different organisms to study the phenomenon of transcriptional interference, which refers to the reduced expression of the downstream promoter by a closely linked upstream promoter. However, we observed a positive interaction wherein the weakened activity of a promoter led to upregulation of a contiguous promoter. These observations suggest that, in situations where the promoters of the test and reference gene share the same transcription factors, the activity of the test promoter can influence the activity of the reference promoter in a way that the test promoter's strength is underestimated when normalized by the reference promoter.

Analysis of promoter activity in transgenic plants by normalizing expression with a reference gene: anomalies due to the influence of the test promoter on the reference promoter.

Variations dans l&#39;expression du transg&egrave;ne due &agrave; l&#39;effet de la position et le nombre de copies sont normalis&eacute;es en analysant et comparant les forces des promoteurs diff&eacute;rents. Dans ces exp&eacute;riences, le promoteur &agrave; tester est plac&eacute; en amont d&#39;un g&egrave;ne rapporteur et une deuxi&egrave;me cassette d&#39;expression est introduite de fa&ccedil;on li&eacute;e dans le m&ecirc;me transfert ADN (ADN-T). Normalisation de l&#39;activit&eacute; du promoteur de l&#39;essai s&#39;effectue en calculant le rapport des activit&eacute;s des promoteurs de l&#39;essai et de r&eacute;f&eacute;rence. Lorsqu&#39;un certain nombre d&#39;&eacute;v&eacute;nements transg&eacute;niques ind&eacute;pendantes est analys&eacute;, normalisation facilite l&#39;&eacute;valuation de la force relative des promoteurs tests compar&eacute;s. Dans cette &eacute;tude, &agrave; l&#39;aide de diff&eacute;rentes versions modifi&eacute;es du promoteur 35 s Virus mosa&iuml;que du chou-fleur (CaMV) exprimant le g&egrave;ne rapporteur b&ecirc;ta-glucuronidase (gus) (cassette du test) li&eacute; &agrave; un g&egrave;ne chloramph&eacute;nicol ac&eacute;tyl transf&eacute;rase (cat) du promoteur 35 s sauvage (cassette de r&eacute;f&eacute;rence) dans les lignes de tabac transg&eacute;nique, nous avons observ&eacute; que l&#39;expression des g&egrave;nes chat varie selon la force du promoteur 35 s modifi&eacute;es exprimant le g&egrave;ne gus. Du promoteur 35 s dans la cassette de r&eacute;f&eacute;rence a &eacute;t&eacute; consid&eacute;r&eacute; comme ayant &eacute;t&eacute; augment&eacute;e dans les cas o&ugrave; le promoteur 35 s mis &agrave; jour l&#39;&eacute;tait plus faible que le promoteur 35 s sauvage. De nombreuses &eacute;tudes ont &eacute;t&eacute; effectu&eacute;es dans diff&eacute;rents organismes pour &eacute;tudier le ph&eacute;nom&egrave;ne d&#39;interf&eacute;rence transcriptionnelle, qui se r&eacute;f&egrave;re &agrave; la r&eacute;duction de l&#39;expression du promoteur en aval par un promoteur en amont &eacute;troitement li&eacute;. Cependant, nous avons observ&eacute; une interaction positive dans laquelle l&#39;activit&eacute; affaiblie d&#39;un promoteur qui a conduit &agrave; une augmentation d&#39;un promoteur contigu. Ces observations sugg&egrave;rent que, dans les situations o&ugrave; les promoteurs du g&egrave;ne de l&#39;essai et r&eacute;f&eacute;rence partagent les m&ecirc;mes facteurs de transcription, l&#39;activit&eacute; du promoteur de l&#39;essai peut influencer l&#39;activit&eacute; du promoteur r&eacute;f&eacute;rence de fa&ccedil;on que la force du promoteur de l&#39;essai est sous-estim&eacute;e lors de leur normalisation par le promoteur de r&eacute;f&eacute;rence.

Analyse de l&#39;activit&eacute; de promoteur dans les plantes transg&eacute;niques en normalisant l&#39;expression avec un g&egrave;ne de r&eacute;f&eacute;rence : anomalies dues &agrave; l&#39;influence du promoteur de l&#39;essai sur le promoteur de r&eacute;f&eacute;rence.

Variationen in Transgenexpression aufgrund Position Effekt und Exemplarnummer werden normalisiert, wenn Analyse und den Vergleich der St&auml;rken der verschiedenen Veranstalter. In solchen Experimenten wird der Projekttr&auml;ger zu pr&uuml;fenden upstream zu einem Reporter-gen und eine zweite Ausdruck-Kassette wird in eine verkn&uuml;pfte Mode in demselben &uuml;bertragen DNA (T-DNA). Normalisierung der Aktivit&auml;t des Projekttr&auml;gers Test erfolgt durch die Berechnung des Verh&auml;ltnisses der Aktivit&auml;ten der Test- und F&ouml;rderer. Wenn eine entsprechende Anzahl von unabh&auml;ngigen transgene Ereignisse analysiert werden, erleichtert die Normalisierung Beurteilung &uuml;ber die relativen St&auml;rken der verglichenen Test-Promotoren. In dieser Studie beobachtet mit verschiedene modifizierte Versionen des Cauliflower Mosaic Virus (CaMV) 35S Promotors Ausdr&uuml;cken der Reporter-gen Beta-Glukuronidase (Gus) (Testkassette) ein Chloramphenicol Acetyl Transferase (Kat) Gen unter der Wildtyp 35S-Promoter (Verweis Kassette) in transgenen Tabak-Linien, die mit wir, dass die Katze Genexpression variiert je nach der St&auml;rke der modifizierten 35S-Promoter, in das Gus-gen. Der 35S-Promoter in der Referenz-Kassette wurde gefunden, herraufreguliert in F&auml;llen wo der modifizierten 35S-Promoter schw&auml;cher als der Wildtyp-35S-Promoter war gewesen zu sein. Viele Studien wurden in verschiedenen Organismen, das Ph&auml;nomen der transkriptionelle Interferenz zu studieren, bezieht sich auf den reduzierten Ausdruck des nachgeschalteten Promotors durch eine eng verkn&uuml;pfte upstream Projekttr&auml;ger durchgef&uuml;hrt. Allerdings beobachteten wir eine positive Interaktion worin die herabgesetzte Aktivit&auml;t f&uuml;hrte zur Hochregulation von zusammenh&auml;ngenden F&ouml;rderer F&ouml;rderer. Diese Beobachtungen legen nahe, dass in Situationen, wo die F&ouml;rderer des Gens Test- und die gleichen Transkriptionsfaktoren teilen, die Aktivit&auml;t des Projekttr&auml;gers Test die Aktivit&auml;t des Projekttr&auml;gers Verweis in einer Weise beeinflussen kann, dass des Projekttr&auml;gers Test St&auml;rke untersch&auml;tzt ist, wenn der Verweis-Projekttr&auml;ger normalisiert.

Analyse der T&auml;tigkeit der Projekttr&auml;ger in transgenen Pflanzen durch Normalisierung Ausdruck mit einem Referenz-gen: Anomalien durch den Einfluss des Projekttr&auml;gers Test auf der Referenz-Promoter.

Variazioni nell&#39;espressione del transgene dovuto effetto di posizione e numero di copia vengono normalizzati quando analizzare e confrontare i punti di forza dei promotori differenti. In tali esperimenti, il promotore per essere testato &egrave; posto a Monte di un gene reporter e una seconda cassetta di espressione &egrave; stato introdotto in una moda collegato il trasferimento stesso DNA (T-DNA). Normalizzazione dell&#39;attivit&agrave; del promotore della prova viene effettuata calcolando il rapporto delle attivit&agrave; dei promotori di prova e di riferimento. Quando un numero adeguato di eventi transgenici indipendenti &egrave; analizzato, normalizzazione facilita la valutazione dei punti di forza relativa dei promotori test di confronto. In questo studio, utilizzando diverse versioni modificate del promotore 35S del Virus del mosaico del cavolfiore (CaMV) esprimendo il reporter gene beta-glucuronidasi (gus) (test a cassetta) legata ad un gene di cloramfenicolo acetil transferasi (gatto) sotto il promotore 35S wild-type (cassetta di riferimento) in linee di tabacco transgenico, abbiamo osservato che l&#39;espressione di gene gatto varia dipendendo dalla forza del promotore 35S modificato che esprimono il gene gus. Il promotore 35S nella cassetta di riferimento &egrave; stato trovato sia stato sovraregolati nei casi dove il promotore 35S modificato &egrave; stato pi&ugrave; debole rispetto al promotore 35S wild-type. Molti studi effettuati in diversi organismi per studiare il fenomeno di interferenza trascrizionale, che si riferisce all&#39;espressione ridotta del promotore a valle di un promotore strettamente collegato a monte. Tuttavia, abbiamo osservato un&#39;interazione positiva in cui l&#39;attivit&agrave; indebolito un promotore che ha portato alla sovraregolazione di un promotore contiguo. Queste osservazioni suggeriscono che, in situazioni dove i promotori del gene della prova e di riferimento condividono gli stessi fattori di trascrizione, l&#39;attivit&agrave; del promotore del test pu&ograve; influenzare l&#39;attivit&agrave; del promotore di riferimento in modo che forza del promotore test &egrave; sottovalutata quando normalizzata per il promotore di riferimento.

Analisi dell&#39;attivit&agrave; di promotore in piante transgeniche di normalizzare l&#39;espressione di un gene di riferimento: anomalie a causa dell&#39;influenza del promotore della prova sul promotore di riferimento.

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&#xC704;&#xCE58; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC0F; &#xB9E4;&#xC218; transgene &#xC2DD;&#xC758; &#xBCC0;&#xD615;&#xC740; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xACE0; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xAC15;&#xC810;&#xC744; &#xC815;&#xADDC;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xD560; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC704;&#xCE58; &#xD558; &#xACE0; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC2DD;&#xC740; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8; &#xAC19;&#xC740; &#xC804;&#xC1A1; DNA (T-DNA)&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xBC29;&#xC2DD; &#xB3C4;&#xC785;. &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xADDC;&#xD654; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC0F; &#xCC38;&#xC870; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xBE44;&#xC728;&#xC744; &#xACC4;&#xC0B0; &#xD558; &#xC5EC; &#xC218;&#xD589; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC218;&#xB97C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC815;&#xADDC;&#xD654; &#xBE44;&#xAD50;&#xD560; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; &#xAC15;&#xC810;&#xC758; &#xD3C9;&#xAC00; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xACE0;&#xC591;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xAC70; &#xC2A4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604; &#xC218;&#xC815;&#xB41C; 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xAC15;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCA0;&#xD0C0;-glucuronidase (&#xAC70; &#xC2A4;) (&#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8;) &#xD398;&#xB2C8; &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xC804;&#xC774; (&#xACE0;&#xC591;&#xC774;) &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB2F4;&#xBC30; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; (&#xCC38;&#xC870; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8;) &#xC544;&#xB798;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xAF43; &#xC591;&#xBC30;&#xCD94; &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (CaMV) 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xBC84;&#xC804;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xCC38;&#xC870; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8; 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC218;&#xC815;&#xB41C; 35S &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130;&#xB294; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; 35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC57D;&#xD55C; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;&#xB294; upregulated&#xC744; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9CE;&#xC740; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xAC00; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xC2DD; &#xC5B8;&#xAE09; &#xD558;&#xB294; transcriptional &#xAC04;&#xC12D; &#xD604;&#xC0C1; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAD00;&#xCC30; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xC18D; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; upregulation &#xC8FC;&#xB3C4; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xC57D;&#xD654; &#xB41C; &#xD65C;&#xB3D9;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCC30;, &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC0F; &#xCC38;&#xC870; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xB97C; &#xACF5;&#xC720; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC870; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC815;&#xADDC;&#xD654; &#xB54C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xD798;&#xC740; &#xACFC;&#xC18C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC38;&#xC870; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC601;&#xD5A5; &#xC218; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2DD; &#xCC38;&#xC870; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC815;&#xC0C1;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBD84;&#xC11D;: &#xCC38;&#xC870; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xC608;&#xC678;.

Variaciones en la expresi&oacute;n del transg&eacute;n debido al efecto de la posici&oacute;n y n&uacute;mero de copia se normalizan al analizar y comparar las fortalezas de diferentes promotores. En tales experimentos, el promotor a probarse se coloca arriba a un gen reportero y se introduce un segundo casete de expresi&oacute;n de manera vinculada en la misma transferencia de DNA (DNA-T). Normalizaci&oacute;n de la actividad del promotor de la prueba se realiza mediante el c&aacute;lculo de la relaci&oacute;n de las actividades de los promotores de la prueba y de referencia. Cuando se analiza un n&uacute;mero apropiado de eventos transg&eacute;nicos independientes, normalizaci&oacute;n facilita la evaluaci&oacute;n de los m&eacute;ritos de los promotores de la prueba se comparan. En este estudio, usando diferentes versiones modificadas del promotor 35S Virus Mosaico de la coliflor (CaMV) expresando el reportero gen beta-glucuronidasa (gus) (prueba de cassette) ligado a un cloranfenicol acetil transferasa (gato) gene bajo el promotor 35S del tipo salvaje (cassette de referencia) en l&iacute;neas de tabaco transg&eacute;nico, observamos que la expresi&oacute;n g&eacute;nica de gato var&iacute;a dependiendo de la fuerza del promotor 35S modificado expresando el gen gus. El promotor 35S del cassette de referencia fue encontrado para haber sido a alza en casos donde el promotor 35S modificado era m&aacute;s d&eacute;bil que el promotor 35S salvaje-tipo. Se han realizado muchos estudios en diferentes organismos para estudiar el fen&oacute;meno de interferencia transcripcional, lo que se refiere a la expresi&oacute;n reducida del promotor aguas abajo por un promotor ascendente estrechamente vinculado. Sin embargo, se observ&oacute; una interacci&oacute;n positiva en donde la actividad debilitada de un promotor que condujo a la regulaci&oacute;n al alza de un promotor contiguo. Estas observaciones sugieren que, en situaciones donde los promotores del gen test y referencia comparten los mismos factores de transcripci&oacute;n, la actividad del promotor de la prueba puede influir en la actividad del promotor referencia de manera que la fuerza del promotor de la prueba est&aacute; subestimada cuando normalizado por el promotor de la referencia.

An&aacute;lisis de la actividad del promotor en las plantas transg&eacute;nicas por normalizar la expresi&oacute;n con un gen de referencia: anomal&iacute;as debido a la influencia de la promotora de la prueba en el promotor de la referencia.

&#x9003;&#x7A0E;&#x6216;&#x4E3B;&#x673A;&#x9632;&#x5FA1;&#x79EF;&#x6781;&#x5236;&#x6B62;&#x662F;&#x79CD;&#x690D;&#x7269;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC; biotrophic &#x548C; hemibiotrophs &#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#x673A;&#x5236;&#x5305;&#x62EC;&#x987A;&#x5E8F; biotrophic &#x548C; necrotrophic &#x9636;&#x6BB5;&#x6240;&#x91C7;&#x7528;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x6218;&#x7565;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x9632;&#x5FA1;&#x6291;&#x5236;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x597D;&#x7559;&#x5B66;&#x7EC6;&#x83CC;&#x3001; &#x771F;&#x83CC;&#x548C;&#x5375;&#x83CC;&#x4E2D;&#x7684;&#x7B49;&#x6548;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5374;&#x4E0D;&#x751A;&#x4E86;&#x89E3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684; SNE1 &#x8868;&#x5F81; (&#x6291;&#x5236;&#x7F3A;&#x8840;&#x6027;&#x574F;&#x6B7B; 1&#xFF09;&#xFF0C;&#x4ECE; hemibiotrophic oomycete &#x7684;&#x671F;&#x95F4;&#x5185;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x690D;&#x7269;&#x756A;&#x8304; (&#x767D;&#x6BDB; lycopersicum) &#x7684; biotrophic &#x589E;&#x957F;&#x660E;&#x786E;&#x8868;&#x660E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x4E00;&#x7EA7;&#x9A6C;&#x94C3;&#x85AF;&#x665A;&#x75AB;&#x75C5;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x7F16;&#x7801;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x77AC;&#x65F6;&#x8868;&#x8FBE;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A; SNE1 &#x6291;&#x5236;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4EA7;&#x751F;&#x4ECE;&#x75AB;&#xFF0C;&#x5728; necrotrophic &#x589E;&#x957F;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x6027;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x4ECB;&#x5BFC; Avr &#x7CFB;&#x5217;-R &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x884C;&#x52A8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x62A5;&#x544A; SNE1 &#x5305;&#x542B;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684; NLS &#x56FE;&#x6848;&#x548C; translocates &#x5BF9;&#x690D;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x4E2D;&#x7684;&#x77AC;&#x65F6;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x6982;&#x5FF5;&#x6A21;&#x578B;&#x88AB;&#x63D0;&#x4EA4;&#x7684;&#x987A;&#x5E8F;&#x534F;&#x8C03;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x62EE;&#x6297;&#x6548;&#x5E94;&#x5668;&#x7684;&#x9A6C;&#x94C3;&#x85AF;&#x665A;&#x75AB;&#x75C5;&#x75C5;&#x83CC;&#x9996;&#x5148;&#x53D6;&#x6D88;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#x7136;&#x540E;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x76D1;&#x7BA1;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#x6765;&#x63A7;&#x5236;&#x4ECE; biotrophy &#x5230; necrotrophy &#x7684;&#x8FC7;&#x6E21;&#x3002;

&#x4ECE;&#x9A6C;&#x94C3;&#x85AF;&#x665A;&#x75AB;&#x75C5;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D; (SNE1) &#x662F;&#x5927;&#x81F4;&#x7F72;&#x7406;&#x6291;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x6027;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;

Evasion or active suppression of host defenses are critical strategies employed by biotrophic phytopathogens and hemibiotrophs whose infection mechanism includes sequential biotrophic and necrotrophic stages. Although defense suppression by secreted effector proteins has been well studied in bacteria, equivalent systems in fungi and oomycetes are poorly understood. We report the characterization of SNE1 (suppressor of necrosis 1), a gene encoding a secreted protein from the hemibiotrophic oomycete Phytophthora infestans that is specifically expressed at the transcriptional level during biotrophic growth within the host plant tomato (Solanum lycopersicum). Using transient expression assays, we show that SNE1 suppresses the action of secreted cell death-inducing effectors from Phytophthora that are expressed during the necrotrophic growth phase, as well as programmed cell death mediated by a range of Avr-R protein interactions. We also report that SNE1 contains predicted NLS motifs and translocates to the plant nucleus in transient expression studies. A conceptual model is presented in which the sequential coordinated secretion of antagonistic effectors by P. infestans first suppresses, but then induces, host cell death, thereby providing a highly regulated means to control the transition from biotrophy to necrotrophy.

A secreted effector protein (SNE1) from Phytophthora infestans is a broadly acting suppressor of programmed cell death.

Evasion ou de suppression active de d&#xE9;fenses de l&#x26;#39;h&#xF4;te sont les strat&#xE9;gies employ&#xE9;es par les critiques et les phytopathog&#xE8;nes biotrophiques hemibiotrophs dont l&#x26;#39;infection m&#xE9;canisme comprend biotrophe s&#xE9;quentielle et les stades n&#xE9;crotrophes. Bien que la suppression de la d&#xE9;fense par des prot&#xE9;ines effectrices s&#xE9;cr&#xE9;t&#xE9;es a &#xE9;t&#xE9; bien &#xE9;tudi&#xE9; chez les bact&#xE9;ries, les champignons dans des syst&#xE8;mes &#xE9;quivalents et les oomyc&#xE8;tes sont mal comprises. Nous rapportons la caract&#xE9;risation des SNE1 (suppresseur de la n&#xE9;crose 1), un g&#xE8;ne codant pour une prot&#xE9;ine s&#xE9;cr&#xE9;t&#xE9;e par les infestans h&#xE9;mibiotrophe Phytophthora oomyc&#xE8;tes qui est sp&#xE9;cifiquement exprim&#xE9;es au niveau transcriptionnel lors de la croissance au sein de la tomate biotrophe plante h&#xF4;te (Solanum lycopersicum). Utilisant des essais d&#x26;#39;expression transitoire, nous montrons que SNE1 supprime l&#x26;#39;action de la mort cellulaire s&#xE9;cr&#xE9;t&#xE9;es induisant effecteurs de Phytophthora qui sont exprim&#xE9;s lors de la phase de croissance n&#xE9;crotrophe, ainsi que la mort cellulaire programm&#xE9;e m&#xE9;di&#xE9;e par une s&#xE9;rie d&#x26;#39;interactions prot&#xE9;iques Avr-R. Nous avons &#xE9;galement signaler que SNE1 contient pr&#xE9;dites motifs NLS et se diffuse dans le noyau des plantes dans les &#xE9;tudes d&#x26;#39;expression transitoire. Un mod&#xE8;le conceptuel est pr&#xE9;sent&#xE9; dans lequel la s&#xE9;cr&#xE9;tion s&#xE9;quentielle coordonn&#xE9;e des effecteurs antagonistes par P. infestans premier supprime, mais induit alors, la mort des cellules d&#x26;#39;accueil, fournissant ainsi un moyen tr&#xE8;s r&#xE9;glement&#xE9; afin de contr&#xF4;ler le passage de biotrophie &#xE0; n&#xE9;crotrophie.

Une prot&#xE9;ine s&#xE9;cr&#xE9;t&#xE9;e Effector (SNE1) &#xE0; partir de Phytophthora infestans est un suppresseur de mani&#xE8;re g&#xE9;n&#xE9;rale par int&#xE9;rim de la mort cellulaire programm&#xE9;e

Ausweichen oder aktiver Unterdr&uuml;ckung des Hostverteidigungsma&szlig;nahmen sind wichtige Strategien biotrophen Phytopathogens und Hemibiotrophs, deren Infektion-Mechanismus sequenzielle biotrophen und Necrotrophic Phasen beinhaltet. Obwohl Verteidigung Unterdr&uuml;ckung durch sezernierte Effektor-Proteinen in Bakterien gut studiert hat, sind entsprechende Systeme in Pilzen und Oomycetes schlecht verstanden. Wir berichten die Charakterisierung der SNE1 (Entst&ouml;rer der Nekrose 1), ein Gen, das f&uuml;r eine sezernierte Protein aus der Hemibiotrophic Eipilze Phytophthora Infestans, der speziell auf die transkriptionelle Ebene w&auml;hrend biotrophen Wachstum innerhalb der Host Pflanze Tomate (Solanum Lycopersicum) ausgedr&uuml;ckt wird. Anhand transient Ausdruck Proben zeigen wir, dass SNE1 die Aktion des sekretierten Zelle Tod-induzierende Effektoren von Phytophthora, die werden w&auml;hrend der Wachstumsphase Necrotrophic ausgedr&uuml;ckt unterdr&uuml;ckt, sowie die programmierten Zelltod, vermittelt durch eine Reihe von Avr-R-Protein-Interaktionen. Wir berichten auch, dass SNE1 vorhergesagten NLS-Motive enth&auml;lt und zum Werk Kern in vor&uuml;bergehender Ausdruck Studien zeigten. Ein konzeptionelles Modell wird vorgestellt, in denen die sequenzielle koordinierte Sekretion von antagonistischen Effektoren von p. Infestans zun&auml;chst unterdr&uuml;ckt, doch dann veranlasst, Host Zelltod, wodurch ein stark regulierten Mittel, um den &Uuml;bergang vom Biotrophy zum Necrotrophy zu steuern.

Eine sezernierte Effektor-Protein (SNE1) von Phytophthora Infestans ist ein weitgehend handelnden Entst&ouml;rer der programmierten Zelltod.

Evasione o soppressione attiva delle difese di host sono critici strategie impiegate da biotrophic confronti e hemibiotrophs cui meccanismo di infezione include biotrophic sequenziale e stadi del parassita. Sebbene soppressione difesa da proteine effettrici secreta &egrave; stato ben studiato nei batteri, sistemi equivalenti in funghi e oomycetes sono capiti male. Riportiamo la caratterizzazione di SNE1 (soppressore di necrosi 1), un gene che codifica per una proteina secreta dall&#39;hemibiotrophic Oomycota Phytophthora infestans che &egrave; specificamente espressa a livello trascrizionale durante biotrophic crescita all&#39;interno del pomodoro pianta ospite (Solanum lycopersicum). Utilizzando dosaggi espressione transitoria, mostriamo che SNE1 sopprime l&#39;azione della cella secreta indurre morte effettori da Phytophthora che sono espressi durante la fase di sviluppo del parassita, cos&igrave; come la morte programmata delle cellule mediata da un interazioni proteina gamma di Avr-R. Segnaliamo anche che SNE1 contiene motivi NLS previsti e trasloca nel nucleo di pianta in studi di espressione transitoria. Un modello concettuale &egrave; presentato in cui la secrezione sequenza coordinata di effettori antagonistici da p. infestans sopprime la prima, ma poi induce la morte della cellula ospite, fornendo quindi un mezzo altamente regolato per controllare il passaggio da biotrophy a necrotrophy.

Una proteina secreta (SNE1) da Phytophthora infestans &egrave; un soppressore largamente recitazione di morte cellulare programmata.

&#x56DE;&#x907F;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x9632;&#x5FA1;&#x306E;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306A;&#x6291;&#x5236;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EB;biotrophic&#x3068;necrotrophic&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;biotrophic phytopathogens&#x3068;hemibiotrophs&#x3067;&#x63A1;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6226;&#x7565;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9632;&#x5FA1;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x304C;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x7D30;&#x83CC;&#x3067;&#x7814;&#x7A76;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x771F;&#x83CC;&#x3001;&#x5375;&#x83CC;&#x7DB1;&#x306B;&#x76F8;&#x5F53;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x304C;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;SNE1&#xFF08;&#x58CA;&#x6B7B;1&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#xFF09;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3001;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x30C8;&#x200B;&#x200B;&#x30DE;&#x30C8;&#xFF08;Solanum lycopersicum&#xFF09;&#x306E;&#x5185;biotrophic&#x6210;&#x9577;&#x4E2D;&#x306B;&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B;hemibiotrophic&#x5375;&#x83CC;&#x985E;&#x306E;&#x75AB;&#x75C5;&#x83CC;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;SNE1&#x306F;necrotrophic&#x6210;&#x9577;&#x671F;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;AVR-R&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x75AB;&#x75C5;&#x83CC;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;SNE1&#x306F;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x200B;&#x200B;&#x3067;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x6838;&#x306B;&#x4E88;&#x6E2C;NLS&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3068;&#x79FB;&#x884C;&#x3057;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6982;&#x5FF5;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;P. infestans&#x306E;&#x7B2C;&#x4E00;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x62EE;&#x6297;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EB;&#x5354;&#x8ABF;&#x5206;&#x6CCC;&#x304C;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x63D0;&#x793A;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;biotrophy&#x304B;&#x3089;necrotrophy&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x624B;&#x6BB5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B8;&#x30E3;&#x30AC;&#x30A4;&#x30E2;&#x75AB;&#x75C5;&#x83CC;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;SNE1&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x5927;&#x307E;&#x304B;&#x6F14;&#x6280;&#x6291;&#x5236;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

&#xD68C;&#xD53C; &#xB610;&#xB294; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC29;&#xC5B4;&#xC758; &#xD65C;&#xC131; &#xC5B5;&#xC81C; biotrophic phytopathogens &#xBC0F; hemibiotrophs&#xC758; &#xAC10;&#xC5FC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC21C;&#xCC28;&#xC801; biotrophic &#xBC0F; necrotrophic &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xACE0;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC804;&#xB7B5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xB85D; &#xBE44; effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC29;&#xC5B4; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC798; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;, &#xADE0; &#xB958; &#xBC0F; oomycetes&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC11C; &#xD22C;&#xB974; &#xAC8C; &#xC774;&#xD574;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; SNE1 &#xD2B9;&#xC131; (&#xAD34; 1 &#xC5B5;&#xC555;) &#xC778;&#xCF54;&#xB529; hemibiotrophic oomycete &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; (&#xAE4C; lycopersicum) &#xB0B4;&#xC758; biotrophic &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; transcriptional &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; Phytophthora infestans&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;. &#xACFC;&#xB3C4; &#xC2DD; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; SNE1 &#xBE44; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xC774;&#xD399;&#xD130; Phytophthora&#xC5D0;&#xC11C; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; Avr &#xBC94;&#xC704; R &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; necrotrophic &#xC131;&#xC7A5; &#xB2E8;&#xACC4; &#xB3D9;&#xC548; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xB294; &#xC791;&#xC5C5;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; SNE1 &#xC608;&#xCE21;&#xB41C; NLS &#xBAA8;&#xD2F0;&#xD504;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xACE0; translocates &#xACFC;&#xB3C4; &#xC2DD; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xACF5;&#xC7A5; &#xD575;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC1C;&#xB150;&#xC801; &#xBAA8;&#xB378;&#xC740; P. infestans &#xC5EC; &#xB300;&#xB9BD; &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xC758; &#xC21C;&#xCC28;&#xC801; &#xC870;&#xC815;&#xB41C; &#xBD84; &#xBE44; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBA3C;&#xC800; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; biotrophy&#xC5D0;&#xC11C; necrotrophy&#xB85C;&#xC758; &#xC804;&#xD658; &#xC81C;&#xC5B4;&#xB97C; &#xB192;&#xC740; &#xADDC;&#xC81C; &#xC218;&#xB2E8;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xB2E4;&#xC74C;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Phytophthora infestans&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44; effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (SNE1)&#xC740; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xD589;&#xB3D9; &#xC5B5;&#xC555;.

Evasi&#xF3;n o supresi&#xF3;n activa de las defensas del hu&#xE9;sped son las estrategias empleadas por los cr&#xED;ticos y los fitopat&#xF3;genos biotr&#xF3;ficos hemibiotrophs cuya infecci&#xF3;n mecanismo incluye biotr&#xF3;fico secuencial y etapas necrotr&#xF3;ficos. A pesar de la supresi&#xF3;n de la defensa por la secreci&#xF3;n de prote&#xED;nas efectoras ha sido bien estudiado en las bacterias, los sistemas equivalentes en los hongos y oomicetos son poco conocidos. Se presenta la caracterizaci&#xF3;n de SNE1 (supresor de la necrosis 1), un gen que codifica una prote&#xED;na secretada por las Phytophthora infestans hemibiotrophic oomycete que se expresa concretamente en el nivel transcripcional durante el crecimiento biotr&#xF3;fico dentro de la planta hu&#xE9;sped de tomate (Solanum lycopersicum). El uso de ensayos de expresi&#xF3;n transitoria, nos muestran que SNE1 suprime la acci&#xF3;n de la secreci&#xF3;n de c&#xE9;lulas que inducen la muerte-los efectores de Phytophthora que se expresan durante la fase de crecimiento necrotr&#xF3;fico, as&#xED; como la muerte celular programada mediada por una serie de interacciones de prote&#xED;nas Avr-R. Informamos adem&#xE1;s, que SNE1 contiene motivos previstos NLS y se transloca al n&#xFA;cleo central en los estudios de expresi&#xF3;n transitoria. Un modelo conceptual se presenta en el cual la secreci&#xF3;n secuencia coordinada de efectores antagonistas de P. infestans, primero suprime, pero luego se provoca la muerte de la c&#xE9;lula hu&#xE9;sped, proporcionando as&#xED; un medio altamente reguladas para controlar la transici&#xF3;n de la biotrophy de necrotrophy.

Una prote&#xED;na secretada de Efectos (SNE1) de Phytophthora infestans es un supresor de t&#xE9;rminos en funciones de muerte celular programada

&#x4E3A;&#x4E86;&#x786E;&#x5B9A;&#x75C5;&#x539F;&#x76F8;&#x5173;&#x5206;&#x5B50;&#x6A21;&#x5F0F;&#x89E6;&#x53D1;&#x514D;&#x75AB; (PTI) &#x901A;&#x8DEF;&#x5728;&#x70DF;&#x8349;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x5411;&#x524D;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4F7F;&#x7528;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x548C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x8BC4;&#x4F30;&#x516C;&#x5171;&#x4EA4;&#x901A;&#x4EA4;&#x6C47;&#x5904;&#x3002;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x4F9D;&#x8D56;&#x516C;&#x5171;&#x4EA4;&#x901A;&#x4EA4;&#x6C47;&#x5904;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; nonpathogens &#x548C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#x8005;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x56DB;&#x79CD;&#x7EC4;&#x5408;&#xFF0C;&#x9996;&#x5148;&#x9A8C;&#x8BC1; FLS2 &#x6216; BAK1 &#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x3002;&#x8D85;&#x8FC7; 3,200 &#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x7504;&#x522B;&#x548C; 14 &#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x786E;&#x8BA4;&#x65F6;&#x53D7;&#x5230;&#x538B;&#x5236;&#xFF0C;&#x7834;&#x574F;&#x516C;&#x5171;&#x4EA4;&#x901A;&#x4EA4;&#x6C47;&#x5904;&#x6839;&#x636E;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x6765;&#x5224;&#x65AD;&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E; 14 &#x57FA;&#x56E0;&#x5E76;&#x4E0D;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4E00;&#x822C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B50;&#x96C6;&#x884C;&#x4E8B; FLS2 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x516C;&#x5171;&#x4EA4;&#x901A;&#x4EA4;&#x6C47;&#x5904;&#x611F;&#x5E94;&#x7684;&#x4E0B;&#x6E38;&#x548C;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x4E09;&#x79CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x7834;&#x574F;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7269;&#x79CD;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E; flg22 &#x7684;&#x53F6;&#x5B50;&#x3002;14 &#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x9632;&#x5FA1;&#x548C;&#x6FC0;&#x7D20;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3001; &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x548C;&#x9000;&#x5316;&#x3001; &#x80FD;&#x6E90;&#x548C;&#x6B21;&#x751F;&#x4EE3;&#x8C22;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65B0;&#x7684;&#x8D44;&#x6E90;&#xFF0C;&#x63A2;&#x8BA8;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x5728;&#x516C;&#x5171;&#x4EA4;&#x901A;&#x4EA4;&#x6C47;&#x5904;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;

&#x70DF;&#x8349;&#x672C;&#x751F;&#x70DF;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x75C5;&#x539F;&#x76F8;&#x5173;&#x5206;&#x5B50;&#x6A21;&#x5F0F;&#x89E6;&#x53D1;&#x514D;&#x75AB;&#x4E2D;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;

In order to identify components of pathogen-associated molecular pattern-triggered immunity (PTI) pathways in Nicotiana benthamiana, we conducted a large-scale forward-genetics screen using virus-induced gene silencing and a cell-death-based assay for assessing PTI. The assay relied on four combinations of PTI-inducing nonpathogens and cell-death-causing challenger pathogens and was first validated in plants silenced for FLS2 or BAK1. Over 3,200 genes were screened and 14 genes were identified that, when silenced, compromised PTI as judged by the cell-death-based assay. Further analysis indicated that the 14 genes were not involved in a general cell death response. A subset of the genes was found to act downstream of FLS2-mediated PTI induction, and silencing of three genes compromised production of reactive oxygen species in leaves exposed to flg22. The 14 genes encode proteins with potential functions in defense and hormone signaling, protein stability and degradation, energy and secondary metabolism, and cell wall biosynthesis and provide a new resource to explore the molecular basis for the involvement of these processes in PTI.

Identification of Nicotiana benthamiana genes involved in pathogen-associated molecular pattern-triggered immunity.

Afin d&#x26;#39;identifier les composants de micro-organismes pathog&#xE8;nes mol&#xE9;culaire associ&#xE9; &#xE0; motif d&#xE9;clench&#xE9;e par l&#x26;#39;immunit&#xE9; (PTI) voies dans Nicotiana benthamiana, nous avons men&#xE9; une grande &#xE9;chelle avant-g&#xE9;n&#xE9;tique &#xE9;cran &#xE0; l&#x26;#39;aide gene silencing induit par un virus et un dosage de la mort cellulaire bas&#xE9;e sur l&#x26;#39;&#xE9;valuation PTI. Le test s&#x26;#39;est appuy&#xE9; sur quatre combinaisons de PTI induisant nonpathogens et les agents pathog&#xE8;nes des challengers la mort cellulaire qui causent et a d&#x26;#39;abord &#xE9;t&#xE9; valid&#xE9; dans les usines de silencieux pour FLS2 ou BAK1. Plus de 3200 g&#xE8;nes ont &#xE9;t&#xE9; examin&#xE9;s et 14 g&#xE8;nes ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s, lorsque r&#xE9;duit au silence, compromise PTI &#xE0; en juger par le dosage de mort cellulaire bas&#xE9;e sur. Une analyse plus pouss&#xE9;e a indiqu&#xE9; que les 14 g&#xE8;nes n&#x26;#39;ont pas &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9;s dans une r&#xE9;ponse la mort cellulaire en g&#xE9;n&#xE9;ral. Un sous-ensemble des g&#xE8;nes a &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9; pour agir en aval de FLS2 m&#xE9;di&#xE9;e par l&#x26;#39;induction PTI, et faire taire de trois g&#xE8;nes compromis la production d&#x26;#39;esp&#xE8;ces r&#xE9;actives de l&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne dans les feuilles expos&#xE9;es &#xE0; flg22. Les 14 g&#xE8;nes codent pour des prot&#xE9;ines avec des fonctions potentiels dans la signalisation de la d&#xE9;fense et de l&#x26;#39;hormone, la stabilit&#xE9; et la d&#xE9;gradation des prot&#xE9;ines, le m&#xE9;tabolisme de l&#x26;#39;&#xE9;nergie et du secondaire, et biosynth&#xE8;se de la paroi cellulaire et de fournir une nouvelle ressource pour explorer la base mol&#xE9;culaire de l&#x26;#39;implication de ces processus dans les PTI.

Identification des g&#xE8;nes benthamiana Nicotiana Impliqu&#xE9; dans pathogen-associated mol&#xE9;culaire Motif d&#xE9;clench&#xE9;e par l&#x26;#39;immunit&#xE9;

Um Komponenten der Pathogen-assoziierte Molekulare Muster ausgel&ouml;ste Immunit&auml;t (PTI) Bahnen in Nicotiana Benthamiana zu identifizieren, haben wir einen gro&szlig; angelegte vorw&auml;rts-Genetik-Bildschirm mit Virus-induzierte gen zum Schweigen und eine Tod-zellbasierte Assays f&uuml;r die Beurteilung der PTI durchgef&uuml;hrt. Der Assay st&uuml;tzte sich auf vier Kombinationen von PTI-induzierende Nonpathogens und Zelle Tod-verursachender Herausforderer Krankheitserreger und wurde zun&auml;chst in den Anlagen zum Schweigen gebracht f&uuml;r FLS2 oder BAK1 &uuml;berpr&uuml;ft. Mehr als 3.200 Gene wurden gezeigt und wurden 14 Gene identifiziert, die, wenn zum Schweigen gebracht, kompromittierte PTI Schreibraten von Tod-zellbasierte Assays. Weitere Analysen ergaben, dass die 14 Gene nicht an eine allgemeine Zellselbstmord beteiligt waren. Eine Teilmenge der Gene wurde gefunden handeln flussabw&auml;rts von PTI FLS2-vermittelte Induktion und drei Genen gef&auml;hrdet Produktion von reaktiven Sauerstoffspezies silencing Bl&auml;tter flg22 ausgesetzt. Die 14 Gene kodieren Proteine mit m&ouml;glichen Funktionen in Verteidigung und Hormon-Signalisierung, Protein Stabilit&auml;t und Abbau, Energie und sekund&auml;ren Stoffwechsel und Zellwand-Biosynthese und bieten eine neue Ressource f&uuml;r die molekulare Grundlage f&uuml;r die Einbeziehung dieser Prozesse in PTI erkunden.

Identifizierung von Nicotiana Benthamiana Selbstmordprogramm Pathogen-assoziierte Molekulare Muster ausgel&ouml;ste Immunit&auml;t.

Al fine di identificare i componenti di Nicotiana benthamiana percorsi pathogen-associated molecular pattern-innescato immunit&agrave; (PTI), abbiamo condotto una schermata avanti-genetica su larga scala mediante silenziamento genico indotto da virus e un dosaggio cellula-morte-base per valutare PTI. Il dosaggio si basava su quattro combinazioni di indurre PTI nonpathogens e causando cellula-morte sfidante patogeni e in primo luogo &egrave; stato convalidato in piante a tacere per FLS2 o BAK1. Oltre 3.200 geni sono stati proiettati e 14 geni sono stati identificati che, quando messo a tacere, PTI compromessa come giudicato dal dosaggio cellula-morte-based. Un&#39;ulteriore analisi ha indicato che i 14 geni non sono stati coinvolti in una risposta di morte cellulare generale. Un sottoinsieme dei geni &egrave; stato trovato ad per agire a valle di induzione PTI FLS2-mediata e silenziamento dei tre geni compromessi produzione di specie reattive dell&#39;ossigeno in foglie esposte a flg22. 14 Geni codificano proteine con funzioni potenziali in difesa e segnalazione dell&#39;ormone, stabilit&agrave; proteica e degrado, energia e metabolismo secondario e parete delle cellule biosintesi e forniscono una nuova risorsa per esplorare la base molecolare per il coinvolgimento di questi processi in PTI.

Identificazione di Nicotiana benthamiana geni coinvolti in pathogen-associated molecular pattern-innescato immunit&agrave;.

&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x30D9;&#x30F3;&#x30B5;&#x30DF;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x95A2;&#x9023;&#x5206;&#x5B50;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#xB7;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#xB7;&#x514D;&#x75AB;&#xFF08;PTI&#xFF09;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;PTI&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x524D;&#x5411;&#x304D;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x306E;&#x753B;&#x9762;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;PTI&#x8A98;&#x5C0E;nonpathogens&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x6311;&#x6226;&#x8005;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;4&#x3064;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306B;&#x983C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306E;FLS2&#x307E;&#x305F;&#x306F;BAK1&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6C88;&#x9ED9;&#x306E;&#x690D;&#x7269;&#x3067;&#x691C;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 3200&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x3001;14&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5224;&#x65AD;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x6C88;&#x9ED9;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x3001;PTI&#x3092;&#x4FB5;&#x5BB3;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;14&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;FLS2&#x5A92;&#x4ECB;PTI&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x3001;flg22&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8449;&#x3067;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x308F;3&#x3064;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x4E0B;&#x6D41;&#x3067;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 14&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x9632;&#x885B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068;&#x5206;&#x89E3;&#x3001;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x3068;&#x4E8C;&#x6B21;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3068;PTI&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x57FA;&#x76E4;&#x3092;&#x63A2;&#x6C42;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30EA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x95A2;&#x9023;&#x5206;&#x5B50;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#xB7;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x514D;&#x75AB;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x30D9;&#x30F3;&#x30B5;&#x30DF;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;

&#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBD84;&#xC790; &#xD328;&#xD134; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; &#xBA74;&#xC5ED; (PTI) &#xACBD;&#xB85C; Nicotiana benthamiana&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC5F0;&#xD569;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC720;&#xB3C4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xC55E;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC804;&#xD559; &#xD654;&#xBA74; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0;. &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC5F0;&#xD569; &#xC720;&#xB3C4; nonpathogens&#xC640; &#xCC4C; &#xB9B0; &#xC800; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xB9DD; &#xC6D0;&#xC778;&#xC758; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558; &#xACE0; &#xBA3C;&#xC800; FLS2 &#xB610;&#xB294; bak1&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC785; &#xB9C9; &#xC74C;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 3200 &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; 14 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xACAC;, &#xCE68;&#xBB35;, &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC5F0;&#xD569;&#xC73C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC758;&#xD574; &#xD310;&#xB2E8; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;. &#xCD94;&#xAC00; &#xBD84;&#xC11D; &#xD45C;&#xC2DC; 14 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC77C;&#xBC18; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4; &#xD589;&#xB3D9; &#xC5F0;&#xD569; FLS2 &#xC911;&#xC7AC; &#xC720;&#xB3C4;&#xC758; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xBC0F; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0; 3 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; silencing &#xC78E; flg22&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C;. 14 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC29;&#xC5B4;&#xC640; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; &#xC2E0;&#xD638;, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xBC0F; &#xC800;&#xD558;, &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xBC0F; 2 &#xCC28; &#xB300;&#xC0AC;&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCBD; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; &#xC5F0;&#xD569;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xD0D0;&#xAD6C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBD84;&#xC790; &#xD328;&#xD134; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; &#xBA74;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; Nicotiana benthamiana &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;.

Con el fin de identificar los componentes de pat&#xF3;genos asociados patr&#xF3;n molecular, disparado por la inmunidad (PTI) en las v&#xED;as de Nicotiana benthamiana, llevamos a cabo a gran escala hacia el pantalla usando la gen&#xE9;tica inducida por el virus de silenciamiento g&#xE9;nico y un ensayo de la muerte celular basada en la evaluaci&#xF3;n de la PTI. El ensayo se bas&#xF3; en cuatro combinaciones de PTI no pat&#xF3;genos que inducen la muerte celular y los pat&#xF3;genos que causan el Challenger y se valid&#xF3; por primera vez en las plantas de FLS2 silenciados o BAK1. M&#xE1;s de 3.200 genes que fueron seleccionados y se identificaron 14 genes que, cuando se silenci&#xF3;, comprometida PTI, a juzgar por el ensayo de la muerte celular basada en. An&#xE1;lisis posteriores indicaron que los 14 genes no estaban involucrados en una respuesta de muerte celular en general. Un subconjunto de los genes se encontr&#xF3; a actuar despu&#xE9;s del proceso de FLS2 mediada por la inducci&#xF3;n PTI, y el silenciamiento de los genes comprometidos tres la producci&#xF3;n de especies reactivas del ox&#xED;geno en las hojas expuestas a flg22. Los 14 genes que codifican prote&#xED;nas con funciones potenciales en la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de defensa y de la hormona, la estabilidad y la degradaci&#xF3;n de las prote&#xED;nas, el metabolismo de energ&#xED;a y secundaria, y la bios&#xED;ntesis de la pared celular y proporcionar un nuevo recurso para explorar la base molecular de la participaci&#xF3;n de estos procesos en el PTI.

Identificaci&#xF3;n de genes de Nicotiana benthamiana Participa en pat&#xF3;genos asociados patr&#xF3;n molecular activada por la inmunidad

&#x4E86;&#x89E3;&#x690D;&#x7269;&#x5BF9;&#x75C5;&#x539F;&#x76F8;&#x5173;&#x5206;&#x5B50;&#x6A21;&#x5F0F; &#xFF08;PAMPs&#xFF09; &#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x57FA;&#x7840;&#x662F;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x533A;&#x57DF;&#x4E2D;&#x7684;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;-&#x690D;&#x7269;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x65B9;&#x9762;&#x3002;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x57FA;&#x56E0;&#x53C2;&#x4E0E; PAMP &#x89E6;&#x53D1;&#x514D;&#x75AB;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x6B65;&#x9AA4; &#xFF08;&#x516C;&#x5171;&#x4EA4;&#x901A;&#x4EA4;&#x6C47;&#x5904;&#xFF09; &#x9014;&#x5F84;&#x548C;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x56E0;&#x7D20;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x542F;&#x53D1;&#x5F0F;&#x6216;&#x5236;&#x6B62;&#x7684;&#x516C;&#x5171;&#x4EA4;&#x901A;&#x4EA4;&#x6C47;&#x5904;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x6709;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x548C;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5236;&#x5B9A;&#x548C;&#x4F18;&#x5316;&#x8BE5;&#x6A21;&#x5F0F;&#x690D;&#x7269;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x516C;&#x5171;&#x4EA4;&#x901A;&#x4EA4;&#x6C47;&#x5904;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x516C;&#x5171;&#x4EA4;&#x901A;&#x4EA4;&#x6C47;&#x5904;&#x662F;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x690D;&#x7269;&#x4E4B;&#x95F4;&#xFF0C;&#x53CD;&#x5E94;&#x8C31;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6709;&#x5FC5;&#x8981;&#x505A;&#x9C81;&#x68D2;&#x7684;&#x516C;&#x5171;&#x4EA4;&#x901A;&#x4EA4;&#x6C47;&#x5904;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E2D;&#x5176;&#x4ED6; pathosystems&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x6D89;&#x53CA;&#x8304;&#x79D1;&#x690D;&#x7269;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC;&#x8BB8;&#x591A;&#x91CD;&#x8981;&#x7ECF;&#x6D4E;&#x690D;&#x7269;&#x53CA;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x4F18;&#x5316;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x548C;&#x6574;&#x5382;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x516C;&#x5171;&#x4EA4;&#x901A;&#x4EA4;&#x6C47;&#x5904;&#x54CD;&#x5E94;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7814;&#x7A76;&#x8304;&#x679C;&#x7C7B;&#x7269;&#x79CD;&#x3001; &#x756A;&#x8304; &#xFF08;&#x767D;&#x6BDB; lycopersicum) &#x548C;&#x672C;&#x751F;&#x70DF;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E3A;&#x8861;&#x91CF;&#x5404;&#x79CD;&#x516C;&#x5171;&#x4EA4;&#x901A;&#x4EA4;&#x6C47;&#x5904;&#x5173;&#x8054;&#x578B;&#x540E;&#x53F6;&#x4E0E; PAMPs &#x7684;&#x9884;&#x5904;&#x7406;&#x3001; &#x611F;&#x5E94;&#x7684;&#x8BB0;&#x8005;&#x57FA;&#x56E0;&#x3001; &#x80FC;&#x80DD;&#x8D28;&#x6C89;&#x79EF;&#x3001; &#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x8367;&#x5149;&#x7D20;&#x9176;&#x7684;&#x8BB0;&#x8005;&#x7CFB;&#x7EDF;, &#x5305;&#x62EC;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7C7B;&#x7FA4;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x534F;&#x8BAE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5C06;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x6709;&#x9650;&#x9057;&#x4F20;&#x5C4F;&#x5E55;&#x548C;&#x6F5C;&#x5728;&#x516C;&#x5171;&#x4EA4;&#x901A;&#x4EA4;&#x6C47;&#x5904;&#x76F8;&#x5173;&#x57FA;&#x56E0;&#x6A21;&#x578B;&#x53CA;&#x7ECF;&#x6D4E;&#x4E0A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x8304;&#x679C;&#x7C7B;&#x6746;&#x83CC;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

&#x7814;&#x7A76;&#x4F7F;&#x7528;&#x756A;&#x8304;&#x548C;&#x70DF;&#x8349;&#x7684;&#x6625;&#x82B1;&#x89E6;&#x53D1;&#x514D;&#x75AB;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

Understanding the molecular basis of plant responses to pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) is an active area of research in the field of plant-microbe interactions. A growing number of plant genes involved in various steps of PAMP-triggered immunity (PTI) pathways and microbial factors involved in the elicitation or suppression of PTI have been identified. These studies have largely relied on Arabidopsis thaliana and, therefore, most of the PTI assays have been developed and optimized for that model plant system. Although PTI is a conserved feature among plants, the response spectra vary across different species. Thus, there is a need for robust PTI assays in other pathosystems, such as those involving Solanaceae plant-pathogen interactions, which include many economically important plants and their diseases. We have optimized molecular, cellular, and whole-plant methods to measure PTI responses in two widely studied solanaceous species, tomato (Solanum lycopersicum) and Nicotiana benthamiana. Here, we provide detailed protocols for measuring various PTI-associated phenotypes, including bacterial populations after pretreatment of leaves with PAMPs, induction of reporter genes, callose deposition, activation of mitogen-activated protein kinases, and a luciferase-based reporter system. These methods will facilitate limited genetic screens and detailed characterization of potential PTI-related genes in model and economically important Solanaceae spp.-pathogen interactions.

Methods to study PAMP-triggered immunity using tomato and Nicotiana benthamiana.

Comprendre les bases mol&#xE9;culaires de la r&#xE9;ponse des plantes &#xE0; des agents pathog&#xE8;nes motifs mol&#xE9;culaires associ&#xE9;s (PAMP) est un domaine de recherche actif dans le domaine de interactions plantes-microorganismes. Un nombre croissant de g&#xE8;nes v&#xE9;g&#xE9;taux impliqu&#xE9;s dans diff&#xE9;rentes &#xE9;tapes de PAMP d&#xE9;clench&#xE9;es par l&#x26;#39;immunit&#xE9; (PTI) voies et les facteurs microbiens impliqu&#xE9;s dans l&#x26;#39;activation ou la suppression de PTI ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s. Ces &#xE9;tudes ont surtout compt&#xE9; sur Arabidopsis thaliana et, par cons&#xE9;quent, la plupart des essais ont &#xE9;t&#xE9; PTI d&#xE9;velopp&#xE9; et optimis&#xE9; pour que le syst&#xE8;me plante mod&#xE8;le. Bien que le PTI est une caract&#xE9;ristique conserv&#xE9;e parmi les plantes, les spectres de r&#xE9;ponse varient selon les diff&#xE9;rentes esp&#xE8;ces. Ainsi, il existe un besoin pour des essais de PTI robustes dans pathosyst&#xE8;mes autres, tels que ceux impliquant des solanac&#xE9;es interactions plante-pathog&#xE8;ne, qui comprennent de nombreuses plantes d&#x26;#39;importance &#xE9;conomique et de leurs maladies. Nous avons optimis&#xE9; les m&#xE9;thodes mol&#xE9;culaires, cellulaires, et la plante enti&#xE8;re pour mesurer les r&#xE9;ponses en deux PTI largement &#xE9;tudi&#xE9;s esp&#xE8;ces de solanac&#xE9;es, la tomate (Solanum lycopersicum) et Nicotiana benthamiana. Ici, nous fournissons des protocoles d&#xE9;taill&#xE9;s pour mesurer diff&#xE9;rents ph&#xE9;notypes associ&#xE9;s PTI-, y compris les populations bact&#xE9;riennes apr&#xE8;s pr&#xE9;traitement des feuilles avec PAMP, l&#x26;#39;induction de g&#xE8;nes rapporteurs, les d&#xE9;p&#xF4;ts de callose, l&#x26;#39;activation des prot&#xE9;ines kinases activ&#xE9;es par les mitog&#xE8;nes, et un syst&#xE8;me rapporteur de la lucif&#xE9;rase bas&#xE9;. Ces m&#xE9;thodes seront limit&#xE9;es faciliter &#xE9;crans g&#xE9;n&#xE9;tiques et la caract&#xE9;risation d&#xE9;taill&#xE9;e des potentiels PTI g&#xE8;nes li&#xE9;s dans le mod&#xE8;le et &#xE9;conomiquement importantes solanac&#xE9;es spp.-pathog&#xE8;ne interactions.

Des m&#xE9;thodes pour &#xE9;tudier PAMP d&#xE9;clench&#xE9; immunit&#xE9; en utilisant la tomate et Nicotiana benthamiana

Verst&auml;ndnis der molekularen Basis der Pflanze Antworten auf Pathogen-assoziierte Molekulare Muster (PAMPs) ist ein aktives Gebiet der Forschung auf dem Gebiet der Pflanze-Mikroben-Interaktion. Eine wachsende Zahl von Pflanzengene involviert in verschiedenen Schritten der PAMP ausgel&ouml;ste Immunit&auml;t (PTI) Wege und mit der Erhebung oder Unterdr&uuml;ckung von PTI mikrobielle Faktoren wurden identifiziert. Diese Studien haben sich weitgehend auf Arabidopsis Thaliana verlassen, und daher die meisten die PTI-Assays wurden entwickelt und optimiert f&uuml;r dieses Modell-Pflanze-System. Obwohl PTI eine konservierte Funktion unter den Pflanzen ist, variieren die Antwortspektren &uuml;ber verschiedene Arten. So gibt es eine Notwendigkeit f&uuml;r robuste PTI-Assays in anderen Pathosystems, wie die Solanaceae Pflanze-Pathogen Interaktionen, die viele wirtschaftlich wichtigen Pflanzen und ihre Krankheiten enthalten. Wir haben optimiert, molekulare, zellul&auml;re und ganze Pflanze Methoden PTI Antworten in zwei weithin Messen studierte solanaceous Arten, Tomate (Solanum Lycopersicum) und Nicotiana Benthamiana. Hier bieten wir ausf&uuml;hrliche Protokolle zur Messung verschiedener PTI-assoziierte Ph&auml;notypen, einschlie&szlig;lich bakterielle Bev&ouml;lkerungen nach Vorbehandlung der Bl&auml;tter mit PAMPs, Induktion von Reporter-gen, Callose Absetzung, Aktivierung der Mitogen-aktivierte Proteinkinasen und eine auf der Grundlage der Luciferase Reporter-System. Diese Methoden werden begrenzte genetische Schirme und detaillierte Charakterisierung der potenziellen PTI-bezogenen Gene in Modell und wirtschaftlich bedeutenden Solanaceae spp.-Krankheitserreger Interaktionen erleichtern.

Methoden PAMP ausgel&ouml;ste Immunit&auml;t mit Tomaten und Nicotiana Benthamiana zu studieren.

Comprendere le basi molecolari delle risposte plant pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) &egrave; un&#39;area attiva di ricerca nel campo delle interazioni pianta-microbo. Un numero crescente di geni vegetali coinvolti in vari passi dell&#39;immunit&agrave; PAMP attivato percorsi (PTI) e sono stati identificati i fattori microbici coinvolti nell&#39;elicitazione o soppressione di PTI. Questi studi hanno in gran parte si basava su Arabidopsis thaliana e, pertanto, la maggior parte delle analisi della PTI hanno sviluppata e ottimizzata per quel sistema di pianta modello. Sebbene PTI &egrave; una caratteristica conservata tra le piante, gli spettri di risposta variano tra specie diverse. Cos&igrave;, c&#39;&egrave; bisogno di dosaggi PTI robusti in altri pathosystems, come quelli che coinvolgono le interazioni pianta-patogeno delle Solanacee, che includono molte piante economicamente importanti e le loro malattie. Abbiamo ottimizzato molecolari, cellulari e tutta la pianta metodi per misurare le risposte in due PTI ampiamente studiato specie solanacee, il pomodoro (Solanum lycopersicum) e Nicotiana benthamiana. Qui, forniamo dettagliati protocolli per misurare vari fenotipi PTI-associati, tra cui popolazioni batteriche dopo pretrattamento delle foglie con PAMPs, induzione di geni reporter, deposizione di callosio, attivazione della chinasi di proteina mitogene-attivata e un sistema basato su luciferase reporter. Questi metodi faciliter&agrave; schermi genetici limitati e la caratterizzazione dettagliata di potenziali geni correlati a PTI nel modello ed economicamente importante Solanaceae spp-patogeno interazioni.

Metodi per studiare immunit&agrave; PAMP innescato con pomodoro e Nicotiana benthamiana.

&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x95A2;&#x9023;&#x5206;&#x5B50;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#xFF08;&#x306E;PAMPs&#xFF09;&#x306B;&#x690D;&#x7269;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x57FA;&#x76E4;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x5206;&#x91CE;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x6D3B;&#x767A;&#x306A;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x3059;&#x3002; PTI&#x306E;&#x8A98;&#x767A;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;PAMP&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x514D;&#x75AB;&#xFF08;PTI&#xFF09;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x8981;&#x56E0;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x690D;&#x7269;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x304C;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306B;&#x983C;&#x3063;&#x3066;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;PTI&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x304C;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x5DE5;&#x5834;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; PTI&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x9593;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5FDC;&#x7B54;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7A2E;&#x9593;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7D4C;&#x6E08;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x690D;&#x7269;&#x3084;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x308B;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x30CA;&#x30B9;&#x79D1;&#x690D;&#x7269; - &#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3082;&#x306E;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;pathosystems&#x3001;&#x5805;&#x7262;&#x306A;PTI&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;2&#x3064;&#x200B;&#x200B;&#x306E;&#x5E83;&#x304F;&#x7814;&#x7A76;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30CA;&#x30B9;&#x79D1;&#x306E;&#x7A2E;&#x3001;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#xFF08;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#xFF09;&#x3068;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x30D9;&#x30F3;&#x30B5;&#x30DF;&#x3067;PTI&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x5168;&#x30D7;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x306E;PAMPs&#x3001;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3001;&#x30AB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B9;&#x6C88;&#x7740;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3001;&#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3068;&#x8449;&#x306E;&#x524D;&#x51E6;&#x7406;&#x5F8C;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x69D8;&#x3005;PTI-&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x7D4C;&#x6E08;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30CA;&#x30B9;spp.  - &#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;PTI-&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x7279;&#x6027;&#x8A55;&#x4FA1;&#x304C;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x3068;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x30D9;&#x30F3;&#x30B5;&#x30DF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;PAMP&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x514D;&#x75AB;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;

&#xC2DD;&#xBB3C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBD84;&#xC790; &#xD328;&#xD134; (PAMPs) &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xAE30;&#xC900; &#xC774;&#xD574; &#xC2DD;&#xBB3C;-&#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xBD84;&#xC57C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xD65C;&#xC131; &#xC601;&#xC5ED;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; (PTI) &#xACBD;&#xB85C; PAMP &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; &#xBA74;&#xC5ED;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xC694;&#xC778; &#xB3C4;&#xCD9C; &#xB610;&#xB294; &#xC5F0;&#xD569;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; Arabidopsis thaliana&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558; &#xACE0; &#xC5F0;&#xD569; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC744; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418; &#xACE0; &#xD574;&#xB2F9; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB41C;. &#xC5F0;&#xD569;&#xC740; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC911; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xAE30;&#xB2A5;, &#xC751;&#xB2F5; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xC885;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xB2E4;&#xC591;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xAC00;&#xC9C0; &#xD50C;&#xB79C;&#xD2B8; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB4F1;&#xC758; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC774; &#xB9CE;&#xC740; &#xACBD;&#xC81C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xCC98;&#xB7FC; &#xB2E4;&#xB978; pathosystems&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC5F0;&#xD569; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xC790;, &#xC138;&#xD3EC;, &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xC804;&#xCCB4; &#xACF5;&#xC7A5; &#xB450; &#xC5F0;&#xD569; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xCE21;&#xC815; &#xBC29;&#xBC95; &#xACF5;&#xBD80; solanaceous &#xC885;, &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; (&#xAE4C; lycopersicum) &#xBC0F; Nicotiana benthamiana. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; PAMPs &#xB098;&#xBB47;&#xC78E;&#xC758; &#xC804;&#xCC98;&#xB9AC;, &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790;, callose &#xC99D; &#xCC29;, &#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; kinases&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; &#xAE30;&#xC790; &#xB8E8;&#xC2DC;&#xD398;&#xB77C;&#xC544;&#xC81C; &#xAE30;&#xBC18; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xD6C4; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC5F0;&#xD569; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xACE0;&#xAE30;&#xB97C; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C1;&#xC138;&#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD654;&#xBA74;&#xACFC; &#xC0C1;&#xC138;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xBAA8;&#xB378; &#xBC0F; &#xACBD;&#xC81C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC885;-&#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC5F0;&#xD569; &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD55C;&#xB2E4;.

PAMP &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xC640; Nicotiana benthamiana&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;.

El entender la base molecular de la respuesta de las plantas a pat&#xF3;genos patrones moleculares asociados (PAMP) es un &#xE1;rea activa de investigaci&#xF3;n en el campo de las interacciones planta-microorganismo. Un n&#xFA;mero creciente de genes vegetales implicados en diversas etapas de PAMP activados por la inmunidad (PTI) las v&#xED;as y los factores microbianos implicados en el desencadenamiento o la supresi&#xF3;n de la PTI se han identificado. Estos estudios han confiado en gran medida la Arabidopsis thaliana y, por tanto, la mayor&#xED;a de los ensayos de PTI se han desarrollado y optimizado para que el sistema de planta modelo. A pesar de PTI es una caracter&#xED;stica conservada entre las plantas, los espectros de respuesta var&#xED;an entre las diferentes especies. As&#xED; pues, existe una necesidad de ensayos robustos PTI en patosistemas otros, tales como las que implican Solanaceae pat&#xF3;genos de plantas interacciones, que incluyen muchas plantas econ&#xF3;micamente importantes y sus enfermedades. Hemos optimizado los m&#xE9;todos moleculares, celulares y toda la planta para medir las respuestas de PTI en dos especies de solan&#xE1;ceas ampliamente estudiados, el tomate (Solanum lycopersicum) y Nicotiana benthamiana. Aqu&#xED;, ofrecemos protocolos detallados para la medici&#xF3;n de diversos PTI asociada a fenotipos, incluyendo las poblaciones de bacterias despu&#xE9;s de pretratamiento de las hojas con PAMP, la inducci&#xF3;n de genes reporteros, deposici&#xF3;n de calosa, la activaci&#xF3;n de las prote&#xED;nas quinasas activadas por mit&#xF3;genos, y un sistema indicador de la luciferasa basado. Estos m&#xE9;todos facilitar&#xE1; limitadas pantallas de gen&#xE9;tica y caracterizaci&#xF3;n detallada de los posibles genes relacionados con el PTI en el modelo y las interacciones de solan&#xE1;ceas de importancia econ&#xF3;mica de pat&#xF3;genos spp.

M&#xE9;todos para estudiar PAMP disparado por la inmunidad Uso de tomate y Nicotiana benthamiana

&#x91CE;&#x706B;&#x548C;&#x8BB8;&#x591A;&#x5176;&#x4ED6; proteobacterial &#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x6CE8;&#x5165;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E09;&#x3001; &#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x66F2;&#x76EE;&#x3002;&#x4E2D;&#x6C47;&#x8F91; &#x300B; &#x6A21;&#x578B;&#x75C5;&#x539F; P.&#x6591;&#x70B9;&#x7684; 28 &#x4E00;&#x5E06;&#x98CE;&#x987A;&#x7684;&#x6548;&#x5E94;&#x57FA;&#x56E0;&#x5149;&#x4F0F;&#x3002;&#x756A;&#x8304; DC3000 &#x88AB;&#x5220;&#x9664;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4EA7;&#x751F; polymutant DC3000D28E&#x3002;DC3000D28E &#x70DF;&#x8349;&#x751F;&#x957F;&#x662F;&#x65E0;&#x75C7;&#x72B6;&#x548C; 4 &#x65E5;&#x5FD7;&#x4F4E;&#x4E8E; DC3000&Delta;hopQ1-1&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6A21;&#x578B;&#x690D;&#x7269;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;DC3000D28E &#x4F3C;&#x4E4E;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A; effectorless &#x4F46;&#x5426;&#x5219;&#x4E3A; WT &#x4E2D;&#x8BCA;&#x65AD;&#x8868;&#x578B;&#x76F8;&#x5173;&#x690D;&#x7269;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92; &#xFF08;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;AvrPto Cya &#x8BB0;&#x8005;&#x6CE8;&#x5165; N.&#x672C;&#x751F;&#x70DF;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF09;&#x3002;&#x5404;&#x79CD;&#x6548;&#x5E94;&#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x7EB3;&#x5165;&#x6309;&#x5230;&#x672C;&#x673A;&#x57FA;&#x56E0;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x6216;&#x6210; DC3000D28E Hrp &#x81F4;&#x75C5;&#x5C9B;&#x53EF;&#x4EA4;&#x6362;&#x6548;&#x5E94;&#x6848;&#x53D1;&#x73B0;&#x573A;&#x53EF;&#x7F16;&#x7A0B;&#x6216;&#x968F;&#x673A;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x5927;&#x4F1A;&#x7A7F;&#x68AD; (PRIVAS) &#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x540E;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5229;&#x7528;&#x53CC;&#x9002;&#x914D;&#x5668;&#x548C;&#x9175;&#x6BCD;&#x9AD8;&#x6548;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x7F16;&#x7A0B;&#x6216;&#x968F;&#x673A;&#x7EC4;&#x5408;&#xFF0C;&#x7EC4;&#x5408;&#x591A;&#x6548;&#x5E94;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684; PCR &#x4EA7;&#x7269;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;&#x672C;&#x673A;&#x548C;&#x4ECB;&#x5BFC; PRIVAS &#x96C6;&#x6210;&#x4E86;&#x7EC4;&#x5408;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x6700;&#x5C0F;&#x529F;&#x80FD;&#x6C47;&#x8F91; &#x300B; &#x8FD8;&#x539F;&#x5F88;&#x591A;&#x6BD2;&#x529B; DC3000&Delta;hopQ1 1 N.&#x672C;&#x751F;&#x70DF;&#xFF0C;&#x63ED;&#x793A;&#x6548;&#x5E94;&#x51FD;&#x6570;&#x4E2D;&#x7684;&#x5C42;&#x6B21;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E2D;&#x7684;&#x516B;&#x4E2A;&#x6548;&#x5E94;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF1A; AvrPtoB &#x884C;&#x4E3A;&#x4E0E;&#x6291;&#x5236;&#x514D;&#x75AB;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x5176;&#x4ED6;&#x4EA7;&#x751F;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x589E;&#x957F; &#xFF08;HopM1 &#x548C; HopE1&#xFF09;&#x3001; &#x9EC4;&#x5316; (HopG1)&#x3001; &#x75C5;&#x53D8;&#x5F62;&#x6210; (HopAM1-1)&#xFF0C;&#x548C;&#x5145;&#x5206;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x548C;&#x75C7;&#x72B6;&#x751F;&#x4EA7; (&#x963F;&#x9644;&#x8FD1;&#x4F18;&#x5148;&#x4E8B;&#x9879;HopAA1-1 &#x548C;/&#x6216; HopN1 &#x534F;&#x540C;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x4E0E;&#x4EE5;&#x524D;&#x4EA7;&#x751F;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;)&#x3002;DC3000D28E&#x3001; PRIVAS &#x65B9;&#x6CD5;&#x548C;&#x6700;&#x5C0F;&#x529F;&#x80FD;&#x66F2;&#x76EE;&#x4E3A;&#x63A2;&#x8BA8;&#x690D;&#x7269;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65B0;&#x7684;&#x8D44;&#x6E90;&#x3002;

&#x9057;&#x4F20;&#x62C6;&#x88C5;&#x7EC4;&#x5408;&#x91CD;&#x7EC4;&#x6807;&#x8BC6;&#x7C7B;&#x578B; III &#x6548;&#x5E94;&#x5668;&#x5728;&#x91CE;&#x706B;&#x4E2D;&#x7684;&#x6700;&#x5C0F;&#x529F;&#x80FD;&#x6C47;&#x8F91; &#x300B;&#x3002;

The virulence of Pseudomonas syringae and many other proteobacterial pathogens is dependent on complex repertoires of effector proteins injected into host cells by type III secretion systems. The 28 well-expressed effector genes in the repertoire of the model pathogen P. syringae pv. tomato DC3000 were deleted to produce polymutant DC3000D28E. Growth of DC3000D28E in Nicotiana benthamiana was symptomless and 4 logs lower than that of DC3000Î”hopQ1-1, which causes disease in this model plant. DC3000D28E seemed functionally effectorless but otherwise WT in diagnostic phenotypes relevant to plant interactions (for example, ability to inject the AvrPto-Cya reporter into N. benthamiana). Various effector genes were integrated by homologous recombination into native loci or by a programmable or random in vivo assembly shuttle (PRIVAS) system into the exchangeable effector locus in the Hrp pathogenicity island of DC3000D28E. The latter method exploited dual adapters and recombination in yeast for efficient assembly of PCR products into programmed or random combinations of multiple effector genes. Native and PRIVAS-mediated integrations were combined to identify a minimal functional repertoire of eight effector genes that restored much of the virulence of DC3000Î”hopQ1-1 in N. benthamiana, revealing a hierarchy in effector function: AvrPtoB acts with priority in suppressing immunity, enabling other effectors to promote further growth (HopM1 and HopE1), chlorosis (HopG1), lesion formation (HopAM1-1), and near full growth and symptom production (AvrE, HopAA1-1, and/or HopN1 functioning synergistically with the previous effectors). DC3000D28E, the PRIVAS method, and minimal functional repertoires provide new resources for probing the plant immune system.

Genetic disassembly and combinatorial reassembly identify a minimal functional repertoire of type III effectors in Pseudomonas syringae.

La virulence de Pseudomonas syringae et de nombreux autres agents pathog&#xE8;nes prot&#xE9;obact&#xE9;riens d&#xE9;pend r&#xE9;pertoires complexes de prot&#xE9;ines effectrices inject&#xE9;s dans les cellules h&#xF4;tes par les syst&#xE8;mes de s&#xE9;cr&#xE9;tion de type III. Le puits 28-g&#xE8;nes exprim&#xE9;s effectrices dans le r&#xE9;pertoire du mod&#xE8;le pathog&#xE8;ne P. syringae pv. tomate DC3000 ont &#xE9;t&#xE9; supprim&#xE9;s pour produire DC3000D28E polymutant. La croissance de DC3000D28E dans Nicotiana benthamiana est asymptomatique et 4 billes inf&#xE9;rieur &#xE0; celui de DC3000&#x394;hopQ1-1, ce qui provoque la maladie de cette plante mod&#xE8;le. DC3000D28E semblait fonctionnellement effectorless mais sinon WT dans les ph&#xE9;notypes de diagnostic pertinentes aux interactions plantes (par exemple, la capacit&#xE9; d&#x26;#39;injecter le journaliste AvrPto-Cya dans N. benthamiana). Divers g&#xE8;nes effecteurs ont &#xE9;t&#xE9; int&#xE9;gr&#xE9;s par recombinaison homologue dans des loci indig&#xE8;nes ou par un syst&#xE8;me programmable ou al&#xE9;atoire in vivo assemblage de la navette (PRIVAS) dans le locus &#xE9;changeables effecteur dans l&#x26;#39;&#xEE;lot de pathog&#xE9;nicit&#xE9; Hrp de DC3000D28E. Cette derni&#xE8;re m&#xE9;thode exploit&#xE9;e adaptateurs double et de recombinaison chez la levure pour l&#x26;#39;assemblage efficace de produits de PCR dans des combinaisons programm&#xE9;es ou al&#xE9;atoires de plusieurs g&#xE8;nes effecteurs. Int&#xE9;grations autochtones et PRIVAS m&#xE9;diation ont &#xE9;t&#xE9; combin&#xE9;es afin d&#x26;#39;identifier un r&#xE9;pertoire fonctionnelle minimale de huit g&#xE8;nes effecteurs qui ont r&#xE9;tabli une grande partie de la virulence de DC3000&#x394;hopQ1-1 dans N. benthamiana, r&#xE9;v&#xE9;lant une hi&#xE9;rarchie dans la fonction d&#x26;#39;effecteur: actes AvrPtoB avec une priorit&#xE9; de l&#x26;#39;immunit&#xE9; de supprimer, ce qui permet d&#x26;#39;autres effecteurs pour promouvoir la croissance suppl&#xE9;mentaire (HopM1 et HopE1), la chlorose (HopG1), la formation de l&#xE9;sions (HopAM1-1), et pr&#xE8;s de pleine croissance et la production des sympt&#xF4;mes (Avre, HopAA1-1, et / ou HopN1 fonctionnement en synergie avec les effecteurs pr&#xE9;c&#xE9;dentes). DC3000D28E, la m&#xE9;thode PRIVAS, et un minimum de r&#xE9;pertoires fonctionnels fournir des ressources nouvelles pour sonder le syst&#xE8;me immunitaire des plantes.

G&#xE9;n&#xE9;tique D&#xE9;montage et remontage combinatoire Identifier un r&#xE9;pertoire minimal fonctionnelle des effecteurs de type III chez Pseudomonas syringae

Die Virulenz von Pseudomonas Syringae und viele andere Proteobacterial Erreger ist abh&auml;ngig von komplexen Repertoire der Effektor-Proteine, die durch Typ-III-Sekretion-Systeme in Wirtszellen injiziert. Die 28 Was Effektor-Gene im Repertoire der das Modell Erreger P. Syringae pv. Tomate DC3000 wurden gel&ouml;scht, um Polymutant DC3000D28E zu produzieren. Der DC3000D28E Nicotiana Benthamiana wuchs symptomless und 4 Protokolle niedriger als der DC3000&Delta;hopQ1-1, die Krankheit in diese Modellpflanze verursacht. DC3000D28E schien funktionell effectorless aber sonst WT in diagnostischen Ph&auml;notypen relevanten Wechselwirkungen (z. B. die M&ouml;glichkeit, die AvrPto-Cya-Reporter in N. Benthamiana injizieren) zu Pflanzen. Verschiedene Effektor-Gene wurden durch homologe Rekombination in native Loci oder eine programmierbare oder zuf&auml;llig in-vivo Flughafentransfer (PRIVAS) Montagesystem in der austauschbaren Effektor-Locus in der Hrp Pathogenit&auml;t Insel des DC3000D28E integriert. Die letztere Methode ausgenutzt dual-Adapter und Rekombination in der Hefe f&uuml;r effiziente Montage der PCR-Produkte in programmgesteuerte oder zuf&auml;llige Kombinationen von mehreren Effektor-Genen. Native und PRIVAS-vermittelte Integrationen wurden kombiniert, um eine minimale funktionalen Repertoire acht Effektor-Gene zu identifizieren, die viel von der Virulenz des DC3000&Delta;hopQ1-1 in N. Benthamiana, offenbart eine Hierarchie in Effektor-Funktion wiederhergestellt: AvrPtoB wirkt mit Priorit&auml;t bei der Unterdr&uuml;ckung der Immunit&auml;t, erm&ouml;glicht anderen Effektoren weiteres Wachstum (HopM1 und HopE1), die Chlorose (HopG1), die L&auml;sion Bildung (HopAM1-1), zu f&ouml;rdern und in der N&auml;he von voller Wachstum und Symptom-Produktion (AvrEHopAA1-1 und/oder HopN1 funktionieren synergetisch mit den vorherigen Effektoren). DC3000D28E PRIVAS-Methode und die minimale funktionalen Repertoire bieten neue Ressourcen f&uuml;r sondieren das Immunsystem der Pflanze.

Genetische Demontage und kombinatorische Montage identifizieren ein minimal funktionalen Repertoire von Typ III-Effektoren in Pseudomonas Syringae.

La virulenza di Pseudomonas syringae e molti altri patogeni proteobacterial dipende dal complessi repertori delle proteine effettrici iniettate in cellule ospiti dai sistemi di secrezione di tipo III. 28 Geni effettori sia nel repertorio del modello patogeno P. syringae pv. Tomato DC3000 sono stati cancellati per produrre polymutant DC3000D28E. Crescita del DC3000D28E in Nicotiana benthamiana era asintomatica e 4 registri inferiore a quella di DC3000&Delta;hopQ1-1, che causa la malattia di questa pianta modello. DC3000D28E sembrava funzionalmente effectorless ma altrimenti WT in diagnostici fenotipi rilevanti per piantare le interazioni (ad esempio, la capacit&agrave; di iniettare il reporter AvrPto-Cya nel N. benthamiana). Vari geni effettori sono stati integrati da ricombinazione omologa in loci nativi o da un sistema di navetta (PRIVAS) programmabile o casuale assemblaggio in vivo nel locus effettrici scambiabili nell&#39;isola di patogenicit&agrave; Hrp di DC3000D28E. Quest&#39;ultimo metodo sfruttato schede dual e ricombinazione in lievito per il montaggio efficiente dei prodotti di PCR in combinazioni casuali o programmate di molteplici geni effettori. Integrazioni native e PRIVAS-mediata sono stati combinati per identificare un repertorio minimo funzionale di otto geni effettori che restaurato molto la virulenza di DC3000&Delta;hopQ1-1 in N. benthamiana, rivelando una gerarchia in funzione effector: AvrPtoB agisce con priorit&agrave; nel sopprimere l&#39;immunit&agrave;, consentendo altri effettori promuovere l&#39;ulteriore crescita (HopM1 e HopE1), clorosi (HopG1), formazione di lesione (HopAM1-1) e nei pressi di piena crescita e sintomo di produzione (AvrEHopAA1-1, e/o HopN1 funzionamento in sinergia con i precedente effettori). DC3000D28E, il metodo di PRIVAS e repertori funzionali minime forniscono nuove risorse per sondare il sistema immunitario di pianta.

Genetico smontaggio e rimontaggio combinatoria identificare un repertorio minimo funzionale di effettori III tipo in Pseudomonas syringae.

Pseudomonas syringae&#x306E;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4ED6;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306F;III&#x578B;&#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30EC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 28&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x75C5;&#x539F;P. syringae&#x306E;PV&#x306E;&#x30EC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;DC3000&#x306F;polymutant&#x306E;DC3000D28E&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x524A;&#x9664;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x30D9;&#x30F3;&#x30B5;&#x30DF;&#x3067;DC3000D28E&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306F;&#x7121;&#x75C7;&#x72B6;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;DC3000&#x394;hopQ1-1&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3088;&#x308A;4&#x30ED;&#x30B0;&#x4F4E;&#x3044;&#x3002; DC3000D28E&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF08;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;N.&#x30D9;&#x30F3;&#x30B5;&#x30DF;&#x306B;AvrPto-cya&#x3068;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x6CE8;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#xFF09;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x8A3A;&#x65AD;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;effectorless&#x305D;&#x308C;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x306F;WT&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x305F;&#x3002;&#x7A2E;&#x3005;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x306B;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;DC3000D28E&#x306E;HRP&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x5CF6;&#x3067;&#x4EA4;&#x63DB;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x306B;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DE;&#x30D6;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;in vivo&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30B7;&#x30E3;&#x30C8;&#x30EB;&#x30D0;&#x30B9;&#xFF08;&#x30D7;&#x30EA;&#x30D0;&#xFF09;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x7D71;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F8C;&#x8005;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306A;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306B;PCR&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3092;&#x9175;&#x6BCD;&#x3067;&#x30C7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB;&#x30A2;&#x30C0;&#x30D7;&#x30BF;&#x3068;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x306E;&#x512A;&#x5148;&#x9806;&#x4F4D;&#x3092;&#x6301;&#x3064;AvrPtoB&#x884C;&#x70BA;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x5316;&#xFF1A;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3068;&#x30D7;&#x30EA;&#x30D0;&#x5A92;&#x4ECB;&#x7D71;&#x5408;&#x306F;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x968E;&#x5C64;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;N.&#x30D9;&#x30F3;&#x30B5;&#x30DF;&#x3067;DC3000&#x394;hopQ1-1&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3092;&#x56DE;&#x5FA9;8&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x30EC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x66F4;&#x306A;&#x308B;&#x6210;&#x9577;&#xFF08;HopM1&#x3068;HopE1&#xFF09;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30ED;&#x30B7;&#x30B9;&#xFF08;HopG1&#xFF09;&#x3001;&#x75C5;&#x5909;&#x5F62;&#x6210;&#xFF08;HopAM1-1&#xFF09;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x75C7;&#x72B6;&#x751F;&#x7523;&#xFF08;AVRE&#x3001;HopAA1-1&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E57;&#x52B9;&#x679C;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;HopN1&#x6A5F;&#x80FD;&#xFF09;&#x306E;&#x8FD1;&#x304F;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3002; DC3000D28E&#x3001;&#x30D7;&#x30EA;&#x30D0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x30EC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30EA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5206;&#x89E3;&#x3068;&#x7D44;&#x5408;&#x305B;&#x306F;&#x3001;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;Pseudomonas syringae&#x306E;III&#x578B;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30EC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;

&#xB179; syringae &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xB9CE;&#xC740; proteobacterial &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC758; &#xB3C5;&#xC131;&#xC740; &#xC720;&#xD615; III &#xBD84; &#xBE44; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xC785; &#xD558;&#xB294; effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC775;&#xD799;&#xB2C8;&#xB2E4;. 28 Well-expressed &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBAA8;&#xB378; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xD53C; &#xCCB4; syringae&#xC758; &#xB808; &#xD37C; &#xD1A0;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xD0DC;&#xC591;&#xAD11;. polymutant dc3000d28e&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; DC3000 &#xC0AD;&#xC81C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Nicotiana benthamiana&#xC5D0;&#xC11C; dc3000d28e&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xD588;&#xB2E4; symptomless &#xBC0F; DC3000&Delta;hopQ1-1,&#xC774; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xC6D0;&#xC778;&#xC758; &#xADF8;&#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB0AE;&#xC740; 4 &#xB85C;&#xADF8;. DC3000D28E &#xC9C4;&#xB2E8; &#xACE0;&#xAE30; &#xACF5;&#xC7A5; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; (&#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, &#xBA85;. benthamiana AvrPto Cya &#xAE30;&#xC790; &#xC8FC;&#xC785; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;)&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xAE30;&#xD0C0; WT &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; effectorless &#xAC83; &#xAC19;&#xC558;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; loci&#xC5D0; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xB610;&#xB294; Hrp pathogenicity &#xC12C; dc3000d28e&#xC5D0; &#xAD50;&#xD658; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xB85C; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; &#xAC00;&#xB2A5; &#xB610;&#xB294; &#xC784;&#xC758;&#xC758; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xC154;&#xD2C0; (&#xAC1C;&#xC778;) &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xD1B5;&#xD569; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD6C4;&#xC790;&#xC758; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC545;&#xC6A9; &#xB4C0;&#xC5BC; &#xC5B4;&#xB311;&#xD130;&#xC640; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC1C;&#xC758; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xB610;&#xB294; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC73C;&#xB85C; PCR &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8; &#xBAA8;&#xC5D0; &#xC7AC;&#xACB0;&#xD569;. &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xBC0F; &#xAC1C;&#xC778; &#xC911;&#xC7AC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD569; &#xB9CE;&#xC740; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACC4;&#xCE35; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xB4DC;&#xB7EC;&#xB0B4;&#xB294; &#xBA85;. benthamiana&#xC5D0;&#xC11C; DC3000&Delta;hopQ1-1&#xC758; &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xD558;&#xB294; 8 &#xAC1C;&#xC758; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB808; &#xD37C; &#xD1A0;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xACB0;&#xD569; &#xD588;&#xB2E4;: AvrPtoB &#xC6B0;&#xC120; &#xC21C;&#xC704;&#xAC00; &#xB2E4;&#xB978; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xCD94;&#xAC00; &#xC131;&#xC7A5; (HopM1 &#xBC0F; HopE1), chlorosis (HopG1), &#xBCD1; &#xBCC0; &#xD615;&#xC131; (HopAM1-1), &#xD64D;&#xBCF4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC804;&#xCCB4; &#xC131;&#xC7A5;&#xACFC; &#xC99D;&#xC0C1; &#xC0DD;&#xC0B0; (AvrE &#xADFC;&#xCC98; &#xC5ED;&#xD560;HopAA1-1 &#xBC0F; HopN1 synergistically &#xC774;&#xC804; &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC791;&#xB3D9;). DC3000D28E, &#xAC1C;&#xC778; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; &#xBC0F; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC94;&#xC720;&#xB7FD; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xD504;&#xB85C; &#xBE59;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBD84;&#xD574; &#xBC0F; &#xC870;&#xD569; &#xB9AC;&#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xB179; syringae&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xD615; III &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xC758; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB808; &#xD37C; &#xD1A0;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La virulencia de Pseudomonas syringae y muchos otros pat&#xF3;genos proteobacterial depende de repertorios complejos de prote&#xED;nas efectoras se inyectan en las c&#xE9;lulas hu&#xE9;sped por los sistemas de secreci&#xF3;n tipo III. El 28 bien expresado genes efectores en el repertorio del modelo de agente pat&#xF3;geno Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000 se han suprimido para producir DC3000D28E polymutant. El crecimiento de DC3000D28E en Nicotiana benthamiana era asintom&#xE1;tica y 4 registros m&#xE1;s baja que la DC3000&#x394;hopQ1-1, que causa la enfermedad en esta planta modelo. DC3000D28E parec&#xED;a funcionalmente effectorless WT, pero de otra manera en los fenotipos de diagn&#xF3;stico pertinentes a las interacciones de las plantas (por ejemplo, capacidad de inyectar el reportero AvrPto-Cya en N. benthamiana). Diversos genes efectores estaban integrados por recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga en los loci nativas o por un sistema programable o aleatoria in vivo conjunto de lanzadera (PRIVAS) en el locus intercambiable efectora en la isla de patogenicidad de HRP de DC3000D28E. El &#xFA;ltimo m&#xE9;todo explotado adaptadores duales y recombinaci&#xF3;n en la levadura para el montaje eficiente de productos de PCR en combinaciones programadas o al azar de m&#xFA;ltiples genes efectores. Integraciones nativas y PRIVAS mediada-se combinaron para identificar un repertorio m&#xED;nimo de ocho funcional de genes efectores que restauraron gran parte de la virulencia de DC3000&#x394;hopQ1-1 en N. benthamiana, revelando una jerarqu&#xED;a en la funci&#xF3;n efectora: actos AvrPtoB con prioridad la supresi&#xF3;n de la inmunidad, lo que permite otras efectores para promover un mayor crecimiento (HopM1 y HopE1), clorosis (HopG1), formaci&#xF3;n de la lesi&#xF3;n (HopAM1-1), y cerca de pleno crecimiento y producci&#xF3;n de los s&#xED;ntomas (Avre, HopAA1-1, y / o HopN1 funcionamiento de forma sin&#xE9;rgica con los efectores anteriores). DC3000D28E, el m&#xE9;todo PRIVAS, y un m&#xED;nimo de repertorios funcionales que aporten recursos nuevos para probar el sistema inmunol&#xF3;gico vegetal.

Gen&#xE9;tica Desmontaje y Montaje Combinatoria Identificar un repertorio m&#xED;nimo de funcionamiento de los efectores de tipo III en Pseudomonas syringae

&#x7EC6;&#x83CC;&#x6027;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x5047;&#x5355;&#x80DE;&#x83CC;&#x6591;&#x70B9;&#x5149;&#x4F0F;&#x756A;&#x8304; DC3000 &#x6291;&#x5236;&#x690D;&#x7269;&#x5148;&#x5929;&#x514D;&#x75AB;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x6CE8;&#x5165;&#x4E09;&#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x7EDF; &#xFF08;T3SS&#xFF09; &#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6548;&#x5E94;&#x5668; HopN1&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x964D;&#x4F4E;&#x4E86; DC3000 &#x80FD;&#x591F;&#x5F81;&#x6C42;&#x975E;&#x4E3B;&#x673A;&#x70DF;&#x8349;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5316;&#x7684;&#x6B7B;&#x4EA1;&#xFF0C;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x8FD8;&#x5236;&#x6B62;&#x751F;&#x4EA7;&#x56FD;&#x9632;&#x76F8;&#x5173;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27; (ROS) &#x548C;&#x80FC;&#x80DD;&#x8D28;&#x65F6;&#x7531;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x4F53;&#x80B2;&#x6591;&#x70B9; T3SS &#x8367;&#x5149;&#x5047;&#x5355;&#x80DE;&#x83CC;&#x3002;&#x51C0;&#x5316; His(6)-&#x6807;&#x8BB0;&#x7684; HopN1 &#x7528;&#x6765;&#x6807;&#x8BC6;&#x756A;&#x8304; PsbQ&#xFF0C;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x4E0D;&#x65AD;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x5149;&#x7CFB;&#x7EDF; II &#xFF08;PSII&#xFF09;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6C27;&#x6C14;&#x3002;HopN1 &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x4E3A;&#x53F6;&#x7EFF;&#x4F53;&#x548C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x964D;&#x7EA7; PsbQ &#x548C;&#x6291;&#x5236; PSII &#x6D3B;&#x52A8;&#x5728;&#x53F6;&#x7EFF;&#x4F53;&#x7684;&#x7B79;&#x5907;&#x5DE5;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x800C; HopN1(D299A) &#x975E;&#x50AC;&#x5316;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5931;&#x53BB;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x70DF;&#x8349;&#x5371;&#x5BB3; ROS &#x751F;&#x4EA7;&#x4E2D;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684; NtPsbQ &#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x6027;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684; DC3000&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x663E;&#x793A; PsbQ &#x4F5C;&#x4E3A;&#x690D;&#x7269;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x6291;&#x5236;&#x75C5;&#x539F;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;

&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x5E72;&#x6270;&#x5149;&#x5408;&#x4F5C;&#x7528;&#x6291;&#x5236;&#x690D;&#x7269;&#x56FA;&#x6709;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

The bacterial pathogen Pseudomonas syringae pv tomato DC3000 suppresses plant innate immunity with effector proteins injected by a type III secretion system (T3SS). The cysteine protease effector HopN1, which reduces the ability of DC3000 to elicit programmed cell death in non-host tobacco, was found to also suppress the production of defence-associated reactive oxygen species (ROS) and callose when delivered by Pseudomonas fluorescens heterologously expressing a P.â€ƒsyringae T3SS. Purified His(6) -tagged HopN1 was used to identify tomato PsbQ, a member of the oxygen evolving complex of photosystem II (PSII), as an interacting protein. HopN1 localized to chloroplasts and both degraded PsbQ and inhibited PSII activity in chloroplast preparations, whereas a HopN1(D299A) non-catalytic mutant lost these abilities. Gene silencing of NtPsbQ in tobacco compromised ROS production and programmed cell death by DC3000. Our data reveal PsbQ as a contributor to plant immunity responses and a target for pathogen suppression.

A bacterial cysteine protease effector protein interferes with photosynthesis to suppress plant innate immune responses.

La tomate de bact&eacute;rie pathog&egrave;ne Pseudomonas syringae pv DC3000 supprime l&#39;immunit&eacute; inn&eacute;e de plante avec prot&eacute;ines effectrices inject&eacute;s par un type III secretion system (T3SS). L&#39;effecteur de prot&eacute;ase de cyst&eacute;ine HopN1, ce qui r&eacute;duit la capacit&eacute; du DC3000 pour provoquer la mort cellulaire programm&eacute;e chez le tabac non h&ocirc;te, s&#39;est av&eacute;r&eacute; pour &eacute;galement supprimer la production d&#39;esp&egrave;ces oxyg&eacute;n&eacute;es radicalaires associ&eacute;es &agrave; la d&eacute;fense (ROS) et de la callose par Pseudomonas fluorescens fa&ccedil;on h&eacute;t&eacute;rologue exprimant un P. syringae T3SS. Purifi&eacute;e His(6)-&eacute;tiquet&eacute; HopN1 servait &agrave; identifier les tomates PsbQ, membre de l&#39;oxyg&egrave;ne en &eacute;volution complexe du photosyst&egrave;me II (PSII), comme une prot&eacute;ine de l&#39;interaction. HopN1 localis&eacute; dans les chloroplastes et les deux d&eacute;gradent PsbQ et inhibent l&#39;activit&eacute; PSII dans les pr&eacute;parations de chloroplastes, alors qu&#39;un mutant non catalytique HopN1(D299A) perdu ces capacit&eacute;s. Gene silencing of NtPsbQ dans la production de ROS tabac compromise et la mort programm&eacute;e de cellules par DC3000. Nos donn&eacute;es r&eacute;v&egrave;lent PsbQ comme contribuant aux r&eacute;actions de l&#39;immunit&eacute; des plantes et une cible pour la suppression de l&#39;agent pathog&egrave;ne.

Une prot&eacute;ine effectrice de bact&eacute;rienne cyst&eacute;ine prot&eacute;ase interf&egrave;re avec la photosynth&egrave;se pour supprimer les r&eacute;actions immunitaires inn&eacute;es de plante.

Die bakteriellen Erreger Pseudomonas Syringae pv Tomate DC3000 unterdr&uuml;ckt Pflanze Angeborene Immunit&auml;t mit Effektor-Proteine, die von einem Typ-III-Sekretionssystem (T3SS) injiziert. Cystein Protease Effektor HopN1, die die F&auml;higkeit der DC3000, programmierter Zelltod in nicht-Host Tabak entlocken reduziert, wurde festgestellt, dass auch die Produktion von Verteidigung-assoziierte reaktive Sauerstoffspezies (ROS) und Callose bei der Auslieferung von Pseudomonas Fluorescens heterologously auszudr&uuml;cken, ein p. Syringae T3SS unterdr&uuml;cken. Gereinigte His(6)-markierte HopN1 wurde verwendet, um Tomaten PsbQ, Mitglied der Sauerstoff, der sich entwickelnden Komplex des Photosystem II (PSII), als ein zusammenwirkendes Protein zu identifizieren. HopN1 in Chloroplasten lokalisiert und beide PsbQ degradiert und PSII Aktivit&auml;t im Chloroplast Pr&auml;parate, gehemmt, w&auml;hrend eine nicht-katalytische HopN1(D299A)-Mutante diese F&auml;higkeiten verloren. Gene silencing des NtPsbQ in ROS-Produktion von Tabak gef&auml;hrdet und programmierten Zelltod durch DC3000. Unsere Daten zeigen PsbQ als Beitrag zur Pflanze Immunit&auml;t Antworten und ein Ziel f&uuml;r Pathogen Unterdr&uuml;ckung.

Eine bakterielle Cystein Protease-Effektor-Protein behindert Fotosynthese, Pflanzen angeborenen Immunantworten zu unterdr&uuml;cken.

Il pomodoro patogeno batterico Pseudomonas syringae pv DC3000 sopprime l&#39;immunit&agrave; innata pianta con proteine effettrici iniettate da un tipo sistema di secrezione di III (T3SS). Effector di proteasi della cisteina HopN1, che riduce la capacit&agrave; di provocare la morte cellulare programmata nel tabacco non host DC3000, &egrave; stato trovato anche sopprimere la produzione di specie associate difesa reattive dell&#39;ossigeno (ROS) e callosio quando consegnato da Pseudomonas fluorescens heterologously esprimendo un p. syringae T3SS. Purificato His(6)-tagged HopN1 &egrave; stato utilizzato per identificare il pomodoro PsbQ, un membro dell&#39;ossigeno in evoluzione complessa del fotosistema II (PSII), come una proteina d&#39;interazione. HopN1 localizzata a cloroplasti e degradata PsbQ e inibito attivit&agrave; ISOFORMS in preparazioni cloroplasto, considerando che un mutante non catalitico HopN1(D299A) perso queste capacit&agrave;. Gene silenziamento di NtPsbQ nella produzione di ROS tabacco compromesso e morte programmata delle cellule da DC3000. I nostri dati rivelano PsbQ come un collaboratore di pianta immunit&agrave; risposte e una destinazione per la soppressione del patogeno.

Una proteina batterica cisteina proteasi interferisce con la fotosintesi per sopprimere la risposta immunitaria innata pianta.

&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x30B7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E2;&#x30CA;&#x30B9; &#x30C8;&#x30A6;&#x30AB;&#x30A8;&#x30C7; pv &#x30C8;&#x30DE;&#x30C8; DC3000&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; III &#x5206;&#x6CCC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0; (T3SS) &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6CE8;&#x5165;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; &#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC; &#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x975E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8; &#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x51FA;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B; DC3000 &#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3057;&#x3001;HopN1 &#x3082;&#x9632;&#x885B;&#x95A2;&#x9023;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E; (ROS) &#x3068; heterologously kbdna T3SS &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E2;&#x30CA;&#x30B9; &#x30FB; &#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30EC;&#x30C3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x914D;&#x4FE1;&#x6642;&#x306E;&#x30AB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;His(6) &#x7CBE;&#x88FD;-&#x30BF;&#x30B0; HopN1 &#x30C8;&#x30DE;&#x30C8; PsbQ&#x3001;&#x5149;&#x5316;&#x5B66;&#x7CFB; II)&#x3001;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x9032;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x9178;&#x7D20;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;HopN1 &#x8449;&#x7DD1;&#x4F53;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E; PsbQ &#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3001;&#x975E;&#x89E6;&#x5A92;&#x306E; HopN1(D299A) &#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5931;&#x3063;&#x305F;&#x4E00;&#x65B9;&#x8449;&#x7DD1;&#x4F53;&#x306E;&#x8ABF;&#x88FD;&#x3001;PSII &#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;NtPsbQ &#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x4FB5;&#x5BB3;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3; ROS &#x751F;&#x7523;&#x3067;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; DC3000 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x690D;&#x7269;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3068;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3068;&#x3057;&#x3066; PsbQ &#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3002;

&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; &#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x690D;&#x7269;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x5149;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xB179; syringae pv &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; DC3000 effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC885;&#xB958; III &#xBD84; &#xBE44; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; (T3SS)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0BD;&#xC785; &#xB41C; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; &#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544; &#xC81C; &#xC774;&#xD399;&#xD130;-&#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB2F4;&#xBC30;&#xC5D0; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; dc3000&#xC758; &#xB2A5;&#xB825; &#xAC10;&#xC18C;, HopN1 &#xB610;&#xD55C; &#xAD6D;&#xBC29; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; (&#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;)&#xC640; &#xB179; fluorescens heterologously P. syringae t3ss&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xC5EC; &#xC804;&#xB2EC; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; callose&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. His(6) &#xC815;&#xD654;-&#xD0DC;&#xADF8; Hopn1&#xB294; &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; PsbQ, photosystem II (PSII), &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC9C4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC0B0;&#xC18C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. HopN1 &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; chloroplasts &#xBAA8;&#xB450; &#xD0C0;&#xB77D; &#xD55C; PsbQ &#xD558; &#xACE0; HopN1(D299A) &#xBE44; &#xCD09;&#xB9E4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC783;&#xC5B4;&#xBC84;&#xB9B0; &#xBC18;&#xBA74; &#xC5FD;&#xB85D;&#xCCB4; &#xC900;&#xBE44;&#xC5D0;&#xC11C; PSII &#xD65C;&#xB3D9; &#xC800;&#xD574;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC190;&#xC0C1; &#xB2F4;&#xBC30; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0; Ntpsbq&#xC758; &#xC785;&#xC744; &#xD558; &#xACE0; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; DC3000 &#xC5EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5; &#xBC0F; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; Psbq&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C;.

&#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; &#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544; &#xC81C; effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAD11;&#xD569;&#xC131; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xBC29;&#xD574; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El tomate de pat&oacute;geno bacteriano Pseudomonas syringae pv DC3000 suprime la inmunidad innata de planta con prote&iacute;nas efectoras inyectadas por un tipo de sistema de secreci&oacute;n III (T3SS). El efector de la proteasa de ciste&iacute;na HopN1, que reduce la capacidad de DC3000 para provocar la muerte celular programada en tabaco no hospedante, se encontr&oacute; que tambi&eacute;n inhiben la producci&oacute;n de especies reactivas de ox&iacute;geno asociada a defensa (ROS) y Callosa cuando entregado por Pseudomonas fluorescens heterologously expresando un p. syringae T3SS. Purificada His(6)-etiquetado HopN1 se utiliz&oacute; para identificar tomate PsbQ, miembro del ox&iacute;geno evoluci&oacute;n compleja del fotosistema II (PSII), como una interacci&oacute;n de la prote&iacute;na. HopN1 localizada en cloroplastos y hab&iacute;a degradado PsbQ e inhibida actividad PSII en preparaciones de cloroplasto, mientras que un mutante no catal&iacute;tico HopN1(D299A) hab&iacute;a perdido estas habilidades. Gene silenciamiento de NtPsbQ en la producci&oacute;n de ROS de tabaco comprometida y muerte celular por DC3000 programada. Nuestros datos revelan PsbQ como una contribuci&oacute;n a las respuestas de inmunidad de planta y un objetivo para la supresi&oacute;n del pat&oacute;geno.

Una prote&iacute;na de bacteriana ciste&iacute;na proteasa efectora interfiere con la fotos&iacute;ntesis para suprimir la respuesta inmune innata de planta.

Suma Chakravarthy

Boyce Thompson Institute for Plant Research

Virus-induced Gene Silencing (VIGS) in Nicotiana benthamiana and Tomato

Assay for Pathogen-Associated Molecular Pattern (PAMP)-Triggered Immunity (PTI) in Plants