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Method Article
Peur conditionnée peut être diminuée grâce à un processus appelé inhibiteur de l'extinction, mais peut refaire surface dans des conditions telles que le passage du temps ou de l'exposition au stress. Notre protocole présente une nouvelle façon d'éviter que le recouvrement peur en introduisant l'extinction pendant la fenêtre de reconsolidation (la phase de re-stockage d'une mémoire réactivée).
La peur est inadapté quand il persiste longtemps après que les circonstances sont devenues sûr. Il est donc crucial de développer une approche qui évite constamment le retour de la peur. Pavlov peur de conditionnement paradigmes sont couramment employées pour créer un environnement contrôlé, association crainte roman dans le laboratoire. Une fois le couplage d'un stimulus inoffensif (stimulus conditionné, CS) avec un résultat aversif (stimulus inconditionnel, États-Unis), nous pouvons susciter une réaction de peur (réponse conditionnée, ou CR) en présentant simplement le stimulus seul 1,2. Une fois que la peur est acquise, elle peut être réduite en utilisant la formation d'extinction, dans lequel le stimulus conditionné est présenté à plusieurs reprises sans résultat jusqu'à ce que la peur aversif ne s'exprime plus 3. Cet apprentissage inhibiteur crée une nouvelle représentation sans danger pour le CS, qui est en concurrence pour l'expression de la mémoire de 4 crainte d'origine. Bien que l'extinction est efficace pour inhiber la peur, elle n'est pas permanente. La peur peut spontanémentrécupérer avec le passage du temps. L'exposition au stress ou le retour au contexte de l'apprentissage initial peut également provoquer la peur de refaire surface 3,4.
Notre protocole porte sur la nature transitoire de l'extinction en ciblant la fenêtre reconsolidation de modifier la mémoire émotionnelle d'une manière plus permanente. Amplement suggère que la réactivation d'une mémoire consolidée elle retourne à un état instable, au cours de laquelle la mémoire est encore sensible aux interférences 5-9. Cette fenêtre d'opportunité semble s'ouvrir peu après la réactivation et fermer environ 6 heures plus tard, 5,11,16, mais cela peut varier en fonction de la force et de l'âge de la mémoire 15. En permettant à de nouvelles informations à intégrer dans la trace mnésique d'origine, cette mémoire peut être mise à jour car il rappuyage 10,11. Des études portant sur des animaux non humains ont réussi à bloquer l'expression de la mémoire la peur en introduisant des manipulations pharmacologiques dans le refenêtre de consolidation, cependant, la plupart des agents utilisés sont soit toxiques pour l'homme ou de montrer des effets équivoques lorsqu'il est utilisé dans des études humaines 12-14. Notre protocole répond à ces défis en offrant un moyen efficace, encore non invasive, la manipulation du comportement qui est sans danger pour les humains.
En incitant la peur récupération de la mémoire avant l'extinction, nous avons essentiellement déclencher le processus de reconsolidation, permettant nouvelles données de sécurité (c.-à-extinction) à incorporer tandis que la mémoire la peur est toujours sensible aux interférences. Une étude récente utilisant cette manipulation comportementale chez le rat a réussi à bloquer la mémoire de peur d'utiliser ces paramètres temporels 11. D'autres études chez l'homme ont montré que l'introduction de nouveaux renseignements après la récupération de précédemment consolidée moteur 16, 17 épisodique, ou déclaratifs 18 mémoires conduit à une interférence avec la trace mnésique d'origine 14. Nous présentons ci-dessous un pro romanProtocole utilisé pour bloquer la récupération peur chez les humains.
Vue d'ensemble
L'étude que nous décrivons dans ce protocole se déroule sur trois jours consécutifs, avec un design inter-sujets des trois groupes expérimentaux. Au jour 1, toutes les matières subissent conditionnement de la peur, où ils apprennent à distinguer deux indices, celui qui prédit un choc et une autre qui n'en a pas. Le jour 2, tous les sujets suivent une formation extinction, mais diffèrent quant à ce qui se passe à l'avance: Deux groupes reçoivent un signal de rappel à réactiver la mémoire crainte devant la formation d'extinction tandis qu'un troisième groupe ne reçoit aucun signal tel. Un groupe reçoit la queue de rappel 10 minutes avant l'extinction, donc ils subissent l'extinction alors que la mémoire est la peur reconsolidating. L'autre groupe reçoit la queue de rappel 6 heures avant l'extinction, donc ils subissent l'extinction après cette fenêtre a sans doute fermé. Le troisième groupe ne reçoit aucun signal de rappel avant de subir l'extinction, donc ils suivent une formation théorique d'extinction standard. Au jour 3, tous les sujets reTurn pour une autre session d'extinction. Leur niveau de peur quand ils voient d'abord la queue conditionné au jour 3 indique si la mémoire crainte demeure. Les trois jours sont effectuées dans le même cadre expérimental, qui est un son atténué, salle à température contrôlée. Les stimuli conditionnés sont des carrés colorés présentés sur un écran d'ordinateur. Nous induire et mesurer la peur avec un léger choc électrique et de conductance de la peau, respectivement, en utilisant un module de système Biopac (voir tableau 1). Un ordinateur de bureau est utilisé pour exécuter le logiciel AcqKnowledge qui permet l'enregistrement et le suivi de la résolution tandis qu'un autre ordinateur est utilisé pour exécuter le script et présenter expérimentale sur le sujet. Les sujets soumis à chacune des trois étapes dans le même temps de la journée.
1. Évaluation peur avec la réponse de conductance de la peau (SCR) - Demande d'électrodes et d'enregistrement
2. Induction peur avec stimulation légère décharge électrique - Demande d'électrode et de travail Procédure de
3. Jour 1 - Acquisition
4. Jour 2 - Formation réactivation et l'extinction
Répartition Sujet:
Au hasard diviser tous les sujets qui ont fait preuve d'acquisition adéquate de la peur du jour 1 (voir critères d'exclusion ci-dessous) en trois groupes:
Groupe 1 (réactivation-10 min): reçoit une formation 10 minutes après l'extinction de récupération dans la fenêtre de reconsolidation
Groupe2 (réactivation h-6): reçoit une formation d'extinction après 6 heures d'extraction à l'extérieur de la fenêtre de reconsolidation
Groupe 3 (non-réactivation): reçoit une formation théorique d'extinction standard sans récupération
5. Jour 3 - Essai de récupération spontanée peur
6. Pré-traitement des données & Scoring RCS
Timing
Jour 1
Préparation: 5-7 min
Script d'acquisition: ≈ 9 min
Total: 15 min
Jour 2
Préparation: 5-7 min
Script Réactivation: ≈ 30 s
Pause: 10 min
: ≈ 5,5 min
Total: 20 min
Jour 3
Préparation: 5-7 min
Re-extinction du Script: ≈ 6,5 min
Total: 15 min
7. Les résultats représentatifs pour chaque groupe
A la fin du jour 1 (acquisition), les sujets doivent démontrer différentiel SCR pour les CS, c'est plus répondre à la CS + que comparer à la CS-(voir la figure 4, l'acquisition, pour un exemple de sujets individuels). À la fin du jour 2 (réactivation / extinction), cette réponse différentielle devrait diminuer, de sorte qu'il n'y a pas plus de différence entre le CS + et CS-(voir la figure 4, l'extinction, pour un exemple de sujets individuels). Lors de l'examen guérison spontanée au jour 3, nous nous attendons à voir un manque de récupération de la peur dans le groupe réactivation-10 minpuisque ce groupe a reçu une formation d'extinction dans la fenêtre de reconsolidation, permettant ainsi la trace mnésique d'origine pour reconsolider avec cette nouvelle information, et de prévenir la reprise des réponses de peur (voir la figure 4, le panneau supérieur, pour un exemple d'un sujet individuel). Nous nous attendons à voir une récupération substantielle de la peur, cependant, pour l'+ CS (pas CS-) dans le groupe réactivation-6 h qui ont reçu une formation extinction en dehors de la fenêtre de la reconsolidation (voir la figure 4, panneau central, pour un exemple d'un individu sujet), ainsi que le groupe des non-réactivation qui ont reçu une formation théorique d'extinction standard (voir la figure 4, panneau inférieur, par exemple à partir d'un sujet individuel).
Figure 1. Exemple de RCS au cours électrode mis en place. Noir, flèches verticales indiquent le moment où l'objet a été chargé de prendreune respiration profonde qui a entraîné une augmentation marquée de la SCR. Cliquez ici pour agrandir la figure .
Figure 2. Exemple de RCS au cours du choc travail durant la procédure. Flèches noires verticales indiquent moment où choc a été administré. Les flèches grises indiquent le pic de hausse conductance de la peau en réponse au choc. Cliquez ici pour agrandir la figure .
Figure 3: Exemple de réponse conditionnée (RC) pour le début de la CS + suivie d'une plus grande réponse inconditionnée (UR) pour la livraison de choc (États-Unis);. Procès est celui d'un CS-. Les flèches grises indiquent le déclenchement CS et offset, noir indic flèchesmangé la livraison des États-Unis. Cliquez ici pour agrandir la figure .
Figure 4 Exemple de récupération d'acquisition, d'extinction et spontanée chez un sujet individuel de chaque condition expérimentale (panneau supérieur: réactivation-10 min; panneau central: la réactivation-6 h; panneau inférieur: pas de réactivation)..
Tableau 1. Tableau des produits et équipements pertinents.
Protocole Reconsolidation Tableau 2. Et le calendrier.
Tableau 3. Un exemple de commande à l'essai pour chaque phase de laexpérience. Notez un extra-CS doit être ajoutée à jour 2.2 (extinction) dans les deux groupes de rappel afin de tenir compte de la réactivation de l'+ CS. Le premier procès sur CS-Jour 3 (notée avec un fond gris) est ignoré en raison de la réponse d'orientation au début de la session.
Mise en place expérimentale
L'installation comprend un PC fonctionnant sous E-prime, un Mac exécutant reconnaître, un système MP100 Biopac, et une boîte de choc. En ligne de code est programmé dans le script E-prime pour communiquer avec le logiciel Reconnaître et la boîte de choc. Cela permet à E-prime d'envoyer des signaux d'accusé de réception onsets événement dénotant, et les signaux à la boîte de choc pour déclencher l'administration choc. La sortie de l'E-prime est envoyé via un port imprimante au système Biopac, qui à son tour envoie le signal d'événement à la physiologie d'enregistrement Mac avec Reconnaître via une connexion USB fourni avec le système Biopac, ainsi que la boîte de choc (voir Tableau 1 pour les produitsduit d'informations).
Critères d'exclusion
Les sujets doivent être exclus avant de terminer toutes les sessions expérimentales ou à partir de l'analyse des données si elles démontrent une des situations suivantes:
Le protocole que nous avons présenté ici permet de créer une réponse simple peur conditionnée à un stimulus neutre associé à un résultat aversif. Un jour plus tard nous avons réactivé la mémoire la peur afin de déclencher sa reconsolidation. Lors de cette étape nous avons provoqué des interférences sous la forme d'une formation extinction. Pour vérifier que l'extinction affecte la reconsolidation nous avons utilisé deux groupes témoins. Un groupe a subi l'extinction sans la reconsolidation...
Aucun conflit d'intérêt déclaré.
Nous remercions D. Johnson et K. Doelling de l'aide pour la collecte de données. Nous remercions également M.-H. Monfils, J. Ledoux, Y. et M. Milad Niv pour obtenir des conseils sur les protocoles expérimentaux. Cette étude a été financée par la Fondation James S. McDonnell et les National Institutes of Health (NIH) subvention R21 MH072279 (PAE), les subventions du NIH R37 MH038774, P50 MH058911, RO1 MH046516 et K05 MH067048 (JEL), les bourses de recherche postdoctorale du CRSNG, les IRSC et l'AHFMR (M.-HM), et une bourse Fulbright et prix Blavatnik (DS).
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