Amélioration du taux de croissance initiale des plantes agricoles à l'aide de champs magnétiques statiques

Résumé

The goal of this protocol is to demonstrate the acceleration of the initial growth rate of plants by applying static magnetic fields with no external energy.

Résumé

Les appareils électroniques et les fils à haute tension induisent des champs magnétiques. Un champ magnétique de 1,300-2,500 Gauss (0,2 Tesla) a été appliqué à des boîtes de Petri contenant des graines de jardin Balsam (Impatiens balsamina), Mizuna (Brassica rapa var. Japonica), Komatsuna (Brassica rapa var. Perviridis), et Mescluns (Lepidium sativum ). Nous aimants appliqué dans la boîte de culture. Pendant les 4 jours d'application, nous avons observé que la tige et la racine de longueur augmentée. Le groupe soumis à un traitement de champ magnétique (n = 10) a montré une 1,4 fois plus rapide taux de croissance par rapport au groupe témoin (n = 11) dans un total de 8 jours (p <0,0005). Ce taux est de 20% plus élevé que celui rapporté dans les études précédentes. Les lignes complexes tubuline n'ont des points de connexion, mais les points de connexion se produisent lors de l'application d'aimants. Cela montre la différence complète de la commande, ce qui signifie des dispositions anormales. Cependant, la cause exacte reste incertaine. Ces resULTS d'amélioration de l'application d'aimants de croissance suggèrent qu'il est possible d'augmenter le taux de croissance, d'augmenter la productivité, ou de contrôler la vitesse de germination des plantes en appliquant des champs magnétiques statiques. En outre, les champs magnétiques peuvent provoquer des changements physiologiques dans les cellules végétales et peuvent induire la croissance. Par conséquent, une stimulation par un champ magnétique, peut avoir des effets possibles qui sont semblables à celles des engrais chimiques, ce qui signifie que l'utilisation d'engrais peut être évitée.

Introduction

La germination est la croissance d'une plante qui aboutit à la formation de la plantule ^1. Sous certaines conditions, la germination des graines commence et les tissus embryonnaires reprendre la croissance. Elle commence par l'hydratation de la semence afin d'activer les enzymes pour la germination. Les graines peuvent être amenées à germer in vitro (dans une boîte de Pétri ou tube à essai) ^1,2.

Les champs magnétiques statiques sont des forces spéciales qui provoquent des mouvements de molécules avec des charges ioniques par l' intermédiaire de la force de Lorentz ^3,4. force de Lorentz est formé quand un ionisées ou chargées objet se déplace sous un champ magnétique. Chaque matériau est formé avec des atomes qui sont constituées d'électrons et de protons. Lorsque les champs magnétiques deviennent présents, que ce soit statique ou alternatif, il affecte le mouvement du matériau chargé. Cela vaut également pour les plantes et les molécules d'eau, ce qui affecte la condition molécule intracellulaire. Dans une précédente étude, bobines électromagnétiques ont été utiliséspour générer des champs magnétiques pulsés, et les plantes 'Komatsuna' ont été choisis comme les sujets ^5. Dans la présente étude, aimant généré des champs magnétiques statiques ont été utilisés pour donner des effets similaires mais différents comme une étude d'expansion de la force de Lorentz.

La fréquence du champ magnétique, plutôt que sa polarité, est un facteur crucial pour la germination des plantes. Des études antérieures ont suggéré que les taux de germination maximales étaient de 20% plus élevé que le contrôle lorsque la fréquence du champ magnétique était d'environ 10 Hz. Lorsque le champ est éliminé d' une manière rétrograde, le taux de croissance a été altérée ^5. Les champs magnétiques statiques ont un effet considérable sur le ^6-8 de croissance initiale, principalement sur ​​la germination ⁶ et la croissance des racines ^7.

Dans la présente étude, nous avons utilisé des aimants statiques pour examiner la possibilité de réguler la croissance des plantes agricoles en utilisant des champs magnétiques. En particulier, nous avons cherché à déterminer si certaines conditions d'application de champ magnétique pourrait augmenter les taux de croissance à des niveaux plus élevés que ceux qui sont mentionnés dans la littérature. En outre, si la germination initiale des plantes peut être augmentée avec succès en utilisant un champ magnétique, l'utilisation d'engrais chimiques peut être évitée.

Protocole

1. Réglages initiaux

1. Espèces de plantes agricoles
   1. Utiliser Garden Balsam (Impatiens balsamina), Mizuna (Brassica rapa var. Japonica), Komatsuna (Brassica rapa var. Perviridis), et Mescluns (Lepidium sativum).
      NOTE: Impatiens balsamina (jardin Balsam ou Rose Balsam) est une espèce indigène à l' Inde; quelques membres sont également situés au Myanmar. Komatsuna (Brassica rapa var. Perviridis ou komatsuna) est une variante de la même espèce que le navet commun. Cress Garden (Lepidium sativum) est un type de plante qui est taxonomiquement liée à cresson et la moutarde. Ils ont des saveurs et des parfums similaires, pour lesquels ils sont utilisés dans le commerce de ^5,7.
2. Cultures végétales
   1. Culture Jardin Balsam (Impatiens balsamina), Mizuna (Brassica rapa var. Japonica), Komatsuna (Brassica rapa var. Perviridis), et Mescluns (Lepidium sativum) graines dans un diamètre de 100 mm (100 pi) boîte de Pétri. Assurez-vous que une plaque ne contient qu'un seul type d'espèce.
   2. Pour des conditions de culture, placer les graines sur une serviette en cellulose. Immergez la serviette et les graines dans de l'eau distillée triple. Mesurer et confirmer que le laboratoire intérieur RT est 18-25 ° C, avec une humidité allant de 65-75% (s'il vous plaît consulter la section 3.1.2).
   3. Pour nombre de graines, de la culture 10 ± 1 graines de jardin Balsam, 50 ± 10 graines de Mizuna, 330 ± 20 graines de Komatsuna, et 380 ± 20 graines de Mescluns. Utiliser des conditions identiques mesurées comme 18-25 ° C, avec une humidité allant de 65-75% (s'il vous plaît consulter la section 2.1.1).
      NOTE: Toutes les expériences ont été réalisées sur des conditions intérieures avec l'humidité régulée et plage de température dans le laboratoire. L'humidité et la température était pas statique, mais à condition que les conditions identiques pour aimant traité et le groupe témoin.

2. Culture des Quatre plantes agricoles

1. Procédure expérimentale
   1. Suivez la section 1.2.3) pour les espèces de conditions de plantes et de la culture dans le contrôle et le groupe appliqué à aimant.
   2. Appliquer trois aimants de 1.750 ± 350 Gauss (10.000 Gauss = 1 Tesla) au fond des boîtes de 100 pi pour Garden Balsam. Lors de l'application, en sorte que les trois aimants ne sont pas en contact direct avec les semences, et sont séparés par le fond en plastique de la boîte de Pétri. La distance directe entre les semences et les aimants doit être de 2-4 mm. Appliquer des aimants pour 168 heures (7 jours) pour quatre plantes agricoles.
   3. Après toutes les étapes identiques à 2.1.2), appliquer deux aimants, un (N côté tourné vers le haut) sur le côté de S supérieur et autre aimant (face vers le haut) sur le fond du jardin Balsam plaque de culture.
      NOTE: Les pôles sont appliqués différemment dans le jardin Balsam. Cependant, l'orientation polaire est pas considéré comme un facteur crucial dans cette étude pour des altérations de la croissance, comme tous les environnements sont identiques, sauf pour la directiondu flux magnétique. Le but de N et S application pole pour Garden Balsam était de voir sa capacité pratique à l'utiliser dans les champs, où l'orientation pôle pourrait être difficile à gérer.

3. tubuline Coloration de jardin Balsam

1. Magnet Applications avec Condition Lumière Réglementé
   1. Placez deux aimants (N pôles orientés vers le haut) en bas de la plaque de 100 mm pendant 48 heures, à l'aide de conditions à l'étape 1.2.2.
      NOTE: Pour la modification de la lumière, les boîtes de culture ont été placés sur une étagère en plastique dans l'incubateur. Incubateur a été utilisé pour l'interception de la lumière et de maintien en température à 25 ° C pendant 48 heures dans des environnements sombres. Finalement, cette condition n'a pas été utilisé dans cette expérience en raison de fortes variations de longueur de la croissance.
2. Coloration des plantes
   1. Fixer le impatiens entiers SPP fleur double plante, (y compris les tiges et les racines) cultivées dans des conditions identiques à l'étape 3.1.2) dans 4% de paraformaldehyde et 0,1 Mun tampon phosphate (pH 7,4) pendant 15 min.
   2. Retirer l'échantillon impatiens et immerge pendant 2 heures dans un tampon de blocage (2% de sérum de cheval / 1% de sérumalbumine bovine / 0,1% de Triton X-100 dans du PBS, pH 7,5). Laver l'échantillon impatiens par immersion avec du PBS pendant 15 min.
   3. Pour une double immunocoloration, incuber l'échantillon avec un anticorps primaire, anti-alpha tubuline (1: 1000), O / N à 4 ° C.
   4. Retirer l'échantillon et immerger les échantillons une fois avec du PBS pendant 10 min pour se laver. L'utilisation conjuguée à FITC anti-souris IgG (1: 400) comme anticorps secondaire et on incube pendant 2 heures à 25 ° C.
   5. Immerger l'échantillon dans du PBS et couvrir glisser l'ensemble de l'échantillon dans le fond de plaque à 24 puits. Obtenir des images en utilisant un microscope à fluorescence conventionnelle pour observer l'orientation de la tubuline (λ = 550 nm, grossie à 100X, 200X et 400X).
      NOTE: Dans ce cas, le groupe d'aimants traités (n = 10) et les contrôles (n = 11) ont été confirmés pour Garden Balsam (Impatiens balsamina) seulement, cultivé dans des conditions non sombres.

Méthodes 4. Collecte de données

1. Time-lapse Création de croissance Quatre plantes agricoles
   1. Photographie de l'usine à intervalles de 10 min, en réglant l'obturateur pour auto (cela peut être fait dans un appareil photo numérique). Réglez l'ouverture à F 3.2 et la valeur ISO 400.
   2. Collecter 700-900 images pendant 7-10 jours. Branchez l'appareil photo avec des fils électriques depuis la batterie peut être déchargée.
   3. Faites glisser les images en cliquant et en laissant tomber chaque image chronologiquement sous la ligne de streaming avec le logiciel moviemaking (voir matériaux et table d'équipement). Mettez-le sur une ligne de streaming en durées égales de 0,045 à 0,05 s pour chaque en un total de film de 30-40 sec. Vérifiez afin qu'il n'y ait pas de lacunes sombres avec la sélection de la chaque image dans un ordre chronologique.
   4. Après l'étape 4.1.3, cliquez sur le bouton de lecture dans le logiciel pour assurer le-film compilé dans un time-lapse vidéo slide 30-40 sec et cliquez rendre et enregistrer sur .mpeg ou au format .avi. Pour la taille markers, utilisez Quarter canadien, un Penny américain, et une règle de centimètres sur le côté de la photo.
   5. Effectuer t -test et boîte à moustaches pour l' analyse statistique ^11,12.
      NOTE: Les groupes de cinq nombre résumés ont été utilisés pour calculer la limite inférieure (L) valeur Q1 - [1,5 × (Q3 - Q1)] et plus de limite (H) valeur Q3 + [1,5 × (Q3 - Q1) ]. Cette approche a été incorporé dans l' étape 1.2.2 pour la collecte de données de longueur ^11. Les L et H montrent des valeurs de la zone de 99% des parcelles T de distribution, ce qui signifie que les points de données observées en dehors de cette gamme peuvent être considérés comme des valeurs aberrantes. Parcelles de boîte et de Student t -test ont été utilisées pour analyser les différences dans les hauteurs de semis ^12.

Résultats

Tubuline coloration a montré une dispersion ou des structures aminci dans des plantes cultivées en présence de l'aimant par rapport au témoin (figure 2). En outre, 7 jour des études time-lapse avec des plantes agricoles , y compris Komatsuna (Brassica rapa var. Perviridis) et Mescluns (Lepidium sativum) ont indiqué que un aimant dérivé champ magnétique statique augmente la croissance initiale de ces plantes (Figure 3).

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Discussion

Dans toutes les conditions, les aimants doivent être appliqués dans la boîte de Pétri. Cette étude a examiné l'influence des champs magnétiques sur le taux de graines de croissance pour plusieurs espèces agricoles, en mettant l'accent sur le jardin Balsam en tant que représentant des plantes agricoles. Par exemple, la tubuline coloration a été réalisée sur Garden Balsam pour évaluer les changements au niveau moléculaire dans la racine et la tige micro-structures squelettiques suggérant l'infl...

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
Static magnets	JIM	N/A	2000Gauss
2% horse serum/1% bovine serum albumin/0.1% Triton X-100	Sigma-Aldrich	Merged with 55514	Blocking buffer
Primary antibody	Santa Cruz Biotechnology	sc-8035	a-Tubulin
Secondary antibody	Santa Cruz Biotechnology	sc-2010	FITC-conjugated anti-mouse IgG
time lapse photographic techniques	Manually controlled	N/A	ISO value 400 & aperture F 3.2
Sony Vegas Pro 13.0	Sony	N/A	N/A