L'immunohistochimie sur coupes en paraffine d'épiderme de souris en utilisant des anticorps fluorescents

Résumé

Nous décrivons une méthode fiable pour immunolocalisation dans l'épiderme modifiés pour les deux sections gelées et de paraffine que nous utilisons couramment très dans notre laboratoire.

Résumé

Dans l'épiderme, l'immunohistochimie est un moyen efficace de localiser des protéines spécifiques à leur compartiment expression relative, à savoir la base, suprabasale, et la strate couches corneum. La localisation précise dans l'épiderme d'une protéine particulière prête indices vers son rôle fonctionnel dans l'épiderme. Dans ce chapitre, nous décrivons une méthode fiable pour immunolocalisation dans l'épiderme modifiés pour les deux sections gelées et de paraffine que nous utilisons couramment très dans notre laboratoire. Coupes à la paraffine fournissent généralement la morphologie beaucoup mieux, donc, des résultats supérieurs et des photographies, mais ne sont pas tous des anticorps travaillera avec la fixation sévères et le traitement impliqués dans leur traitement. Par conséquent, le protocole pour la coupe congelée est également inclus. Dans la coupe de paraffine, deux protocoles de fixation sont décrites (Bouin et paraformaldéhyde), le choix de fixateur sera directement liée aux spécifications d'anticorps et peuvent exiger une autre méthode de fixation.

Protocole

Le protocole texte complet de cette approche expérimentale est disponible en protocoles Springer .