Chatouillement, une Technique permettant d’induire l’Affect positif lors de la manipulation des Rats

Résumé

Cet article illustre l’application standard de manipulation ludique, une technique de chatouillement conçue pour imiter le jeu rude de rat. Cette technique est efficace pour réduire les réactions de peur aux humains et générant positif affectent lorsque les rats sont gérés pour des activités communes de l’élevage et médicaux et étudier les procédures telles que l’injection.

Résumé

Manipulation des petits animaux comme les rats peut entraîner plusieurs effets indésirables. Il s’agit de la peur des humains, résistance à la manipulation, le risque de blessure accru pour les animaux et les mains de leurs gestionnaires, une diminution de bien-être animal et moins de données de recherche valide. Pour minimiser les effets négatifs sur les résultats expérimentaux et des relations homme-animal, animaux de recherche est souvent habituée à être manipulés. Cependant, les méthodes d’accoutumance sont très variables et souvent d’une efficacité limitée. Plus puissamment, il est possible pour les humains imiter les aspects du comportement rude ludique des animaux lors de la manipulation. Lorsqu’il est appliqué à des rats de laboratoire, de manière systématique, cette manipulation ludique, dénommée chatouillement, a constamment donne lieu à des réponses comportementales positives. Cet article fournit une description détaillée d’un rat normalisé chatouillement technique. Cette méthode peut contribuer à futures enquêtes sur des États affectifs positifs chez les animaux, rendent plus facile à gérer le rat pour des activités communes d’élevage tels que cage changeant ou procédures médicales/recherche telles que l’injection et être mis en œuvre comme source de enrichissement social. Il est conclu que cette méthode peut être utilisée pour efficacement et commodément réduire les peurs des rats' de l’homme et améliorer leur bien-être, ainsi que modèle fiable des États affectifs positifs.

Introduction

Manipulation des petits animaux, comme domestique rat (Rattus norvegicus) conservées dans les laboratoires et comme animaux de compagnie, peut provoquer une augmentation significative en indicateurs comportements et physiologiques du stress¹, ainsi que des réponses aversifs évocateurs d' ²de détresse émotionnelle. Traitement des rats peut déclencher des réponses basées sur la peur envers les humains^3,4, qui peuvent compliquer la gestion supplémentaire, augmentent le risque de blessures aux animaux et gestionnaire et limiter la validité des données expérimentales⁵.

Pour éviter les effets négatifs des manipulations sur des résultats expérimentaux et des relations homme-animal, c’est une pratique courante pour un certain temps pour les animaux jeunes nouvellement acquises pour s’habituer à l’interaction humaine avant en les assignant à des traitements expérimentaux. Au cours de cette période d’acclimatation, gardiens susceptibles d’exposer des rats à une série d’événements qui peut être très variable dans la forme et la durée. Ceux-ci peuvent inclure l’exposition passive à des personnes, de toucher, de levage, de caresser, de soutien, de parler, et offrir des aliments traite. Bien que les combinaisons de ces procédures ont été signalés à réduire la peur de l’être humain⁶, on ignore quelles pratiques spécifiques sont plus efficaces à l’usage des gardiens animaux occupés. On signale que des rats peuvent avoir des réactions indésirables, ou du moins aucune réponse favorable, à certaines de ces techniques individuelles^2,7,8,9.

En revanche, abondante preuve étaye la conclusion que le fait de chatouillements, une technique de manipulation qui imite les aspects du comportement rude ludique des rats, est une forme robuste bénéfique de contacts sociaux, surtout pour les jeunes rats^{10, 11,12,13}. Les rats sont des mammifères très sociaux, qui est clair en observant le temps qu’ils passent à jouer ensemble comme juvéniles¹⁴ et leur forte motivation pour rétablir et maintenir des contacts sociaux avec leurs congénères^{15,16, 17}. Chatouillement rat s’inspire de la nature sociale ludique des rats pour convertir la manipulation en une expérience positive. Ce concept a été développé comme un modèle pour étudier le fondement neurobiologique des États affectifs positifs, évoquée par le comportement de jeu social⁷. Depuis lors, chatouillement de rat a été utilisé dans plus de 56 différentes expériences, 22 dont comparé chatouillement à autre manipulation techniques¹³.

Jeu rude du rat se caractérise par deux principaux comportements : « contact dorsale » et « NIP » (Figure 1)^18,19. Au cours d’une rude, un rat initie jouer en faisant contact dorsal avec nuque du partenaire. Le destinataire répond en faisant rouler la position en décubitus dorsal et est cloué par le statut d’initiateur au-dessus de¹⁹. Le jeu se poursuit avec les rats à tour de rôle dans chaque position, en haut et moins de^{18 ans}. Les gestionnaires d’humains sont capables d’imiter les deux composantes clés du jeu rude en alternant entre contact avec nuque un rat (contact dorsal) et ventrale (NIP) à l’aide de mouvements vigoureux et rapides des doigts semblables à celles utilisées lors de chatouiller un enfant. Bien sûr, le chatouillement n’est pas une copie exacte du jeu rude de rat parce que les rats ne peuvent pas épingler la main de l’homme pendant les chatouilles. En effet, le niveau d’engagement des individus au jeu rude et chatouillement peut différer^20,21. Malgré cela, il semble que chatouiller invoque les mêmes mécanismes de récompense que jeu rude parmi leurs congénères. Chatouillement est activement sollicité par les animaux et peut servir comme une récompense pour opérant, apprentissage, contribuant ainsi la preuve qu’être chatouillé est substantiellement enrichissante pour les jeunes rats^{7,11,12, 13 , 22}. bien que les rats ont également été signalés à apprendre une tâche opérante en échange de caresses douces comme la récompense, ils étaient plus rapides s’approcher de la main d’une personne offrant des chatouillements comparativement à⁷en caressant.

Les broches utilisées en chatouillant peuvent sembler similaires à des procédures communes de retenue mais il est démontré que des rats perçoivent ces types de traiter différemment. Lorsque des rats sont immobilisés à plusieurs reprises, comme pour une procédure d’injection, elles sécrètent des porphyrines excessives entraînant sanguinolents (« larmes rouges »)⁸. Sanguinolents survient en réponse aux facteurs de stress aigus et provoque la peau et la fourrure autour des yeux et le nez pour devenir souillé une couleur rougeâtre²³. Lorsque maintenu enfoncé et immobilisé sur le dos comme une épingle à plusieurs reprises, les rats ont montré moins attraction pour l’homme que lorsqu’il chatouillait¹². Ces résultats impliquent que les restrictions brèves répétées et les rejets pendant les chatouilles sont perçus différemment de retenue non ludique. Ainsi, la technique précise utilisée en chatouillant a des implications importantes pour générer un état affectif positif plutôt que de contribuer au traitement du stress.

Surveiller l’effet des chatouillements sur l’état affectif de rat peut être facilement accompli en se présentant aux cris de rats. Rats produisent généralement deux catégories d’ultrasons vocalisations (Cris), à près de 22 kHz et 50 kHz, en plus de cris audibles. Les cris 22kHz surviendront lorsque anticiper des événements aversifs et sont accompagnent de l’activité cholinergique cérébrale élevée²⁴. Par conséquent, cris 22kHz sont réputées pour indiquer un état affectif négatif de l’anxiété. Les cris de 50 kHz, en particulier du type modulés en fréquence « trille » (Figure 2), sont généralement associés à récompenser les situations et les stimuli et sont accompagnées de cerveau augmentation dopaminergique activité^24,25. En conséquence, est considéré comme expression d’abondants 50 kHz cris refléter un état affectif positif^24,26,27,28. Enfin, cris audibles sont généralement associées et donc utilisés comme marqueurs de, la douleur physique et l’inconfort. La production différentielle de ces trois formes de vocalisations offre ainsi un relevé fiable des modifications de l’état affectif de rats²⁶. Des rats produisent des cris à autour de 22 kHz pendant l’exposition aux prédateurs, l’exposition aux stimuli douloureux tels que pied choc et les combats entre mâles²⁸. Caressant a aussi signalé de susciter de multiples cris 22kHz chez les rats naïfs, déduits comme indiquant des affects négatifs². En revanche, lorsque titillé par les humains, comme lorsqu’ils effectuent un jeu rude avec les autres rats, rats produisent de nombreux cris de 50 kHz. Il s’ensuit que le taux de 50 kHz cris fournit une mesure graduée de la réaction affective positive générée en chatouillant le^29,30.

Les descriptions de « how to tickle un rat » sont plutôt brèves et peuvent conduire à des résultats variables. En outre, novice « ticklers rat » peut-être être trop indicative dans leurs tentatives d’imiter le jeu rude. Les mots « chatouillent vigoureusement » sont plus faciles à comprendre lorsque démontrer visuellement. Par conséquent, l’objectif de cet article est de fournir une description détaillée et la démonstration de la façon d’imiter des interactions positives ludique rats' d’une manière efficace et cohérente qui sûrement suscite des réactions positives de la plupart de rats lorsqu’ils sont manipulés. Ce protocole décrit une technique normalisée de chatouillement et explique comment chatouillement peut être combiné avec des procédures telles que la retenue et l’injection pour réduire potentiellement désagréables expériences affectives.

Protocole

Toutes les expériences ont été effectuées conformément au instituts nationaux de santé Guide pour le soin et Use of Laboratory Animals^31,32 dans les installations agréées par AAALAC International et ont été approuvés par l’état de Washington Université Institutional Animal Care and Use Committee. Le protocole suivant peut exposer le personnel à des allergènes animaux de laboratoire. Équipement de protection individuelle doit être porté tel que recommandé par les institutionnelle santé et fournisseurs de soins de santé et de programmes de sécurité. Le protocole décrit les procédures en vertu de laboratoire typique, conditions de logement mais pourrait être adapté pour une utilisation dans des installations plus élevé-biosécurité (par exemple en utilisant une armoire de sécurité biologique, etc.).

1. préparation du matériel et installation

1. Boîte de manipulation
   1. Préparer le cage chez un animal ou une autre enceinte pour chatouiller, ci-après appelée la zone de traitement.
   2. Assurez-vous que la boîte de manipulation est assez grande pour fournir l’espace pour la main de la tickler et pour les rats de se déplacer tout en l’empêchant de sauter par-dessus.
   3. Assurez-vous que la boîte de manipulation est exempte d’obstacles. Ainsi, si elle dispense de chatouillement dans la cage, supprimer des objets comme des huttes, rongeant les bâtonnets et le papier froissé.
   4. Ligne de la boîte de manipulation parqueter avec literie³³. Autres types de revêtement de sol souple peuvent être utilisés mais ne sont pas aussi efficaces à soutirer 50 kHz vocalisations¹³.
   5. Placez la zone de manipulation sur une table ou un comptoir à une hauteur qui permet aux mains du gestionnaire d’atteindre confortablement la surface entière de la boîte de manipulation.
   6. Minimiser l’effet de nouveauté en habituant les rats à la zone de manutention avant chatouillement, si nécessaire.
2. Minuterie : Pour indiquer le début et la fin de 15 épisodes de s, placer un dispositif de chronométrage près de la zone de manipulation où il peut être lu facilement. Alternativement, un signal auditif de temps peuvent être transmis à la tickler grâce à des écouteurs.
3. Enregistrement de vocalisation
   1. Si les vocalisations sont enregistrées pour quantifier les types différents de vocalisation pour fins de recherche, utilisez un microphone capable de capturer 10-120 kHz à large bande sonore, connecté à un appareil capable d’enregistrer des sons à haute fréquence.
   2. Suspendre ou fixer le micro vers le haut ou le côté de la boîte, assez basses pour bien détecter les appels et éviter toute confusion avec les appels des rats dans des cages voisines, mais hors de la portée physique des rats.
   3. Si vocalisations a seulement besoin d’être surveillés afin de confirmer la technique appropriée de chatouillement, puis utilisez un détecteur de chauves-souris et mis en place sur le côté de la boîte. Si vous utilisez un détecteur simple, hétérodyne, configurer le périphérique à 50 kHz.
4. Gants de laboratoire : utiliser une main nue ou gantée finement quand chatouillement. La technique de chatouillement a été développée en utilisant une main nue.  Cependant, une main gantée finement est également efficace pour comportement ludique et 50 kHz USV la production tout en permettant au maître pour détecter la quantité de pression exercée sur le corps du rat et sentir les réponses de la rat le gant.

2. procédure de chatouillement

1. Enfilez les gants de laboratoire, si nécessaire. Amener la cage sur une table ou un établi. Doucement transférer le rat dans la zone de manutention si chatouillement n'est pas dispensée dans la cage. Démarrer la minuterie et l’audio enregistrement si nécessaire.
2. Pour une application cohérente, alternez entre 15 s de contact de la main et 15 s sortie du contact pour un total de 2 min. Cette durée d’interaction s’avère suffisante pour augmenter l’attrait des rats aux humains,¹¹.
   1. Pour commencer la session chatouillement avec une sortie s 15, placer la main immobile à l’intérieur d’un côté de la boîte de manipulation. La présence de la main permet de rats pour solliciter l’interaction en orientant les lèche et lumière nips (amuse-gueules) à la main, indiquant l’intérêt du rat pour interagir²². Lorsque cela se produit, déplacez la main loin du rat, qui peut solliciter ludique, chassant de la main par le rat. Sinon, laisser la main hors de la boîte lors de la publication de s 15.
   2. Suivre la sortie avec 15 s de chatouillement, initier l’interaction avec un contact dorsal (2-4 s). À l’aide d’une seule main, toucher vigoureusement nuque du rat (surface dorsale du cou) avec le bout des doigts à l’aide de mouvements de doigt rapide aussi fréquemment exécutées en chatouillant humaine. Éviter tout contact avec la croupe de cette zone du corps est pris pour cible au cours de rencontres agressives³⁴.
   3. Suivez le contact dorsal avec une épingle. Placez le pouce et le majeur sous les pattes du rat ; Soulevez le rat, assez haut pour permettre rapidement tourner le rat sur le dos tout en s’assurant de la queue ne pas obtenir tordu.
      Remarque : Il peut aider à pousser légèrement sur l’arrière du rat avec le petit doigt quand on tourne le rat sur le dos.
   4. Tenez le rat vaguement, mais fermement ; être assertif mais pas énergique. Une fois le rat sur le dos sur le plancher, maintenez le corps sans serrer tout en glissant les doigts rapidement et vigoureusement mais doucement sur le ventre, comme est couramment utilisé en chatouillant humaine.
   5. Même si la stimulation est rapide et sûr de lui, garder le vif l’épinglage (2-4 s/pin) afin de minimiser les réactions négatives. Laissez le rat pour lui-même à droite et suivre rapidement avec un contact dorsal.
   6. Continuer d’alterner broches de dorsale. En moyenne, il devrait y avoir 4 à 5 broches/15 s³⁵.
   7. Ne ramassez pas le rat avec les deux mains. Durant les 15 s de chatouillement, toujours garder les doigts mobiles et au contact du corps de la rat, même dans les transitions broches de dorsale.
   8. Effectuer trois supplémentaires 15-s chatouilles et communiqués 15-s pour un total de 2 min.
3. Si vous utilisez une zone de manutention, retourner le rat à sa cage maison. Si vous utilisez la cage, placez les objets de l’enrichissement dans la cage. Nettoyer la zone de manutention avec du papier absorbant pour enlever les excréments et l’urine ne pas absorbé par la literie.
4. Répéter avec la cage suivante de rats, au besoin.

3. chatouillement simultanément plusieurs Rats

1. Des rats peuvent être chatouillés comme un groupe de³⁶. Si la durée de traitement n’est pas pertinent, alternes chatouillant chaque rat pendant 15 s. La durée de la session de chatouillement peut être prolongée au-delà 2 min au besoin afin que chaque rat reçoit quatre épisodes de chatouillement contact main entrecoupée par libération.
2. Si la durée de traitement est pertinente pour les résultats de la recherche, utilisez les procédures suivantes :
   1. Pour les paires, chatouiller un rat pour 15 s suivi immédiatement en chatouillant le deuxième rat pour les 15 prochaines s (i.e., lors de la publication du premier rat), et ainsi de suite. Le calendrier de rappel n’a pas une période de repos.
   2. Pour les triplés, utilisez la procédure décrite au point 3.2.1 pour chatouiller deux des rats et chatouiller le tiers en même temps comme l’un des autres à l’aide de l’autre main.
   3. Pour les groupes de 4 ou plus de rats, tickle chaque rat ou paire de rats pendant 15 s. La durée de la session de chatouillement peut être étendue au-delà de 2 min selon les besoins.

Résultats

Facteurs affectant ou pouvant affecter, réponses aux chatouillements sont résumées dans le tableau 1. Les résultats positifs de rat chatouillement est indiquées par plusieurs mesures du bien-être de rat et affect positif. Résultats communs comprennent une production accrue de cris de 50 kHz, le comportement de l’approche accrue et facilité accrue de la manipulation. Signalé les effets de rat chatouillement au niveau cellulaire et génétique comprennent l’expression des gènes modifiés dans l' hypothalamus³⁷et augmenté la neurogenèse dans le gyrus denté de l’hippocampe^38,39. Résultats indicatifs d’anxiété généralisée réduite et la peur de l’homme sont également signalés comme réduite latence d’aborder en 9 différentes expériences¹³, moins de congélation après conditionnement^40,41, la peur et l’augmentation des entrées au centre d’une arène de plein champ par des rats logés individuellement³⁶. Pour plus de renseignements voir LaFollette et coll., qui présentent un examen systématique de la littérature de chatouillement qui identifie 22 rapports enquêter sur des textes issus du rat chatouiller par rapport aux autres techniques¹³.

Les exemples suivant, spécifiques des résultats pouvant être obtenus lorsque la technique de chatouillement est jumelée avec retenue et procédures d’injection intra péritonéales (IP) sont décrites.

Rats Sprague-Dawley (les hommes, âgés de 85 à 94 jours ; n = 48) chatouillé pendant 2 min, immédiatement avant et après injection saline IP par jour pendant 10 jours, en particulier lorsqu’il est combiné avec le chatouillement juvénile expérience (2 min/jour depuis l’âge de 25 à 45 jours), produit plus 50 kHz USV juste avant (analyse de variance GLM, F_{3, 44} = 9,59, p < 0,0001 ; Figure 3 a) et juste après (F_{3, 44} = 8.74, p = 0,0001 ; Figure 3 b) injection (Tukey-Kramer, p < 0,05) comparée à des rats exposés à une main passive¹⁰. Au cours de la brève mise en œuvre de l’injection, production de cris de 50 kHz a été freinée (moyenne ± écart-type, 15 ± 1.4 cris/min) et traitement de manutention n’avait aucun effet sur leur taux¹⁰. Il a été conclu que le chatouillement, lorsqu’il est appliqué avant et après une procédure d’injection, induit un état affectif positif qui a animé l’aversion de la procédure, surtout pour ceux qui avaient été exposés à la chatouiller au stade juvénile.

Pour savoir si chatouillement serait efficace si réduite à avant ou après une injection plutôt que tous les deux et, si oui, laquelle serait mieux, on a comparé les réponses de rat à l’injection de chatouillement avant, après et avant-après. Taux de 50 kHz cris et des appels sonores ont été mesurés comme indicateurs de positifs et négatifs affectent, respectivement¹². Rats Sprague-Dawley (les hommes, âgés de 32 à 41 jours ; n = 96) ont été soit maîtrisé et une injection quotidienne de salins de IP (INJ) ou retenu sans recevoir une injection (contrôle, CON) et exposés à l’un des traitements suivants : aucune chatouillements, les rats n’étaient pas touché avant et après la procédure de retenue (TN) ; chatouillé pendant 2 min juste avant (TB), après (TA), ou avant et après (TBA) retenue¹². Dans les 2 min avant retenue, rats de traitements qui a reçu le chatouillement avant le dispositif de retenue (TB, TBA) produit les cris plus 50 kHz (GLMM ANOVA, F_3,88 = 49,19, p < 0,0001 ; La figure 3). Rats TA et TN ne diffèrent pas du taux de cris produites avant la procédure de retenue. Au cours de la procédure, un rat qui a reçu le chatouillement (TA, TB, TBA) produit plus 50 kHz USV que celles qui étaient pas chatouillé (TN ; F_3,88 = 50.67, p < 0,0001 ; Figure 3D). Parmi les rats chatouillés, ceux qui reçoivent un chatouillement avant l’intervention (TB, TBA) produit des cris plus de 50 kHz pendant la retenue par rapport à celles titillés par la suite (TA ; p < 0,05). Dans la période 2 min après l’intervention, des rats dans tous les groupes chatouillés (TA, TB, TBA) produit plus 50 kHz cris que ceux qui étaient pas chatouillé (TN ; F_3,88 = 53.64, p < 0,0001 ; Figure 3E). En outre, au cours de la procédure, des rats chatouillé avant retenue (TB, TBA) produit moins d’appels audibles comparées à des rats qui fait ne pas reçus chatouillement (TN), alors que les rats titillés par la suite (TA) ne différaient pas de celles des autres groupes (F_3,88 = 3,67, p= 0,02 ; Figure 3F). Les résultats démontrent que chatouiller les rats avant retenue pour une injection Intrapéritonéale produit signes d’affect positif supérieur à travers les périodes avant, pendant et après l’intervention que chatouiller qu’après retenue de¹².

Gardiens un des traitements suivants traitement appliquent à des rats (rats Sprague-Dawley mâles ; n = 32) de 57 à 74 jours après la naissance : manipulation minimale (1) une fois par semaine à cage changé ; (2) l’exposition à une main passive pendant 2 min par jour ; (3) 2 min de chatouillement chaque jour, pour imiter social jouer ; (4) 2 min tous les jours de retenue sur le dos de la rat, simulant l’épinglage désavantagerait par une dominante¹¹. Dans la minute suite à une adresse IP injection, rats des traitements passifs et Tickled consacré plus temps d’élevage dans la moitié avant de la cage, à proximité où le chercheur se tenait debout, comparativement à des rats de la Minimal et traitements de retenue (GLM ANOVA, F_{3, 27} = 5.70, p = 0,004 ; La figure 3). En outre, des rats Tickled prononcé plus 50 kHz cris que les rats dans le traitement passif lorsqu’il est exposé à une main familière ou inconnue pendant 3 min dans un essai de l’approche humaine (transformation logarithmique moyenne ± SE appels/min, un minimum : 0,7 ± 0,26, passif : 0,6 ± 0,18, chatouillé : 1,8 ± 0,30, Retenue : 1,4 ± 0,28 ; F_{3, 28} = 4.04, p = 0,02). Ainsi, la simple présence d’une main passive assistée par l’accoutumance des rats aux humains par rapport au traitement minimal, mais chatouillement était la méthode la plus efficace pour produire une réponse positive envers les humains,¹¹.

Figure 1 : bousculade Rat jouer comportement. Contact dorsale (A) ; (B) broche¹⁸. S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.

Figure 2 : vocalisations ultrasoniques de 50 kHz de la fréquence modulée type « trille ». Les vocalisations de trill cinq ont été produites en 1 s par un rat pendant les chatouilles. Les lignes horizontales à 17, 25 et 70 kHz ont été produites par des appareils électroniques dans la salle (e.g., ordinateur, micro, caméra).

Figure 3 : réponses des rats exposés au chatouillement avant, ou en combinaison avec procédures expérimentales telles que des injections intra péritonéales (IP). Taux (moyenne ± SE appels/min) de 50 kHz cris produit (A) avant et (B) après une procédure d’injection de rats mâles adultes exposés à un minimum (M) de manutention ou chatouiller (T) comme juvéniles et une main passive (P) ou chatouiller (T) immédiatement avant et après injection (ce qui donne quatre combinaison de traitement : M-P, T-P, M-T, T-T) ; de Cloutier et al. ¹⁰. taux de cris de 50 kHz (moyenne ± SE appels/min) produites (C) avant, (D) au cours et (E) après retenue (avec ou sans une injection Intrapéritonéale) une fois par jour pendant 10 jours consécutifs de jeunes rats mâles ayant ne reçu aucun chatouillement (TN) ou chatouillement avant (TB), après (TA), ou les deux avant et après (TBA) la procédure ; (F) le taux des appels sonores produites au cours de la retenue ; de Cloutier et al. ¹². (G) durée (moyenne ± SE s) d’élevage à proximité le chercheur au cours des 1 min après une injection Intrapéritonéale de rats mâles exposés à minimes, passive, chatouillement ou retenue pour manutention de gardiens ; de Cloutier et al. ¹¹. bars avec différentes lettres (a, b, c) indiquent des différences dans les comparaisons (Tukey-Kramer, p < 0,05). S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.

Facteur de	Effet				Références
Intrinsèques
Age	Aucune différence de 50 kHz ultrasons vocalisations (Cris) entre les rats n’âgés de 24 à 44 et 89-92 jours				18, 29, 42
	Diminution des cris de 50 kHz pour les rats de 71 jours à 148 jours				29
	17 hommes jour ancien fait de nombreux cris de 50 kHz plus que 7 à 9 mois vieux mâles				43
	Les rats chatouillés comme les juvéniles et les adultes ont montré des résultats plus positifs comparées à des rats seulement chatouillés comme juvéniles ou adultes.				10
Sexe	Rats mâles a produit plusieurs cris de 50 kHz à 44 et 71 jours, mais les femelles produisent des cris plus de 50 kHz à 148 jours				29
	Des rats mâles a produit plus 50 kHz cris que les femelles à 44 et 58 jours.				43
	Aucune différence de sexe dans les cris de 50 kHz à 96 jeunes rats Long-Evans ou 52 jeunes rats Wistar				42, 44
	Des rats Wistar femelles juvéniles produit des cris 22kHz plus que les hommes				44
Différences entre individus	Rats qui prononça plusieurs cris de 50 kHz a montré une diminution approche fois à Self-administered chatouillement, augmentent partialité du jugement positif après chatouillement et la prolifération des cellules hippocampiques après chatouillement				27, 37, 45
	Des rats plus ludiques produites plusieurs cris de 50 kHz				43
Souche	Non signalé, mais anecdotiques suggèrent des rats de différentes souches et éleveurs diffèrent dans leur réponse à chatouiller. Les lignes de rat ont divergé quand sélectionné à haute vs faible taux de cris de 50 KHz en réponse à chatouiller.				22, 26, 42, 46
Expérience antérieure de chatouillement	Augmentation de la production des cris ultrasoniques de 50 kHz				12
Extrinsèques
Literie	Des rats produit plus 50 kHz cris lorsque chatouillé sur vs literie familier sans literie				33
Stress	Chatouiller les rats 1 heure, mais pas de 23 heures, après la production de cris de 50 kHz à réduire le stress de contrainte				47, 48
Calendrier	Chatouiller les rats avant injection était plus efficace pour augmenter de 50 KHz cris que chatouiller après injection				12
Sexe du gestionnaire	Aucun effet constaté				Panksepp, J. 2014, données non publiées
Familiarité de rat avec Gestionnaire	Rats produit plusieurs cris de 50 kHz et passent plus de temps près d’un familier par rapport à un calendrier de rappel inconnu				11
Gestionnaire d’expérience de chatouillement / vigor de chatouiller par gestionnaire	Touchés de production de 50 kHz cris mais pas de préférence et approche le comportement				Cloutier, S. 2011, données non publiées
Durée des goupilles de gestionnaire / fréquence de l’alternance entre les contacts dorsales et épingles	Basse fréquence de nibbles (interprété comme jouer sollicitation) a ordonné à une main imposant 15-s pins (retenue) qu’une main qui chatouille avec une dorsales contacts multiples et par tranche de 15 s				11
Odorisants (parfum, shampooing, crème à raser) utilisé par le gestionnaire	Non signalé
Taille du groupe social	Habitat individuel accru des réponses positives à chatouiller par rapport au logement de groupe dans la plupart des expériences. Chatouillement rats logés en groupe avec des camarades de cage dans la cage réduit cette différence				7, 22, 27, 36
Intensité lumineuse	Chatouillement à 1000 lux réduit 50 kHz cris par rapport aux 25 lux.				43
Bruit	Non signalé
Cage de nettoyage avant de chatouiller	Production induite de cris 22kHz chez certains rats				12
Moment de la journée	Aucun effet sur la production de cris de 50 kHz lorsque exécuté au début ou à la fin de la période de lumière. Chatouillement des rats en début/fin de la lumière vs période milieu de période claire ou foncée n’a pas encore été comparée				Cloutier, S. 2011, données non publiées

Tableau 1 : Liste des facteurs affectant ou susceptibles d’influer sur les réponses des rats aux chatouillements, une technique de manipulation ludique destinée à imiter le jeu rude de rat.

Discussion

Ce protocole décrit une technique pour rat chatouillements, une technique de manipulation ludique imitant le comportement de jeu rude de rat qui est efficace pour générer des vocalisations indicatives de l’affect positif et augmentant le comportement d’approche lorsque les rats sont gérés pour élevage ou médical commun et étudier les procédures telles que l’injection de la propriété intellectuelle.

Jeu social, une forme de contact social, généralement positif a été proposée pour aider à l’étalonnage des réactions émotives à effrayante des situations^42,43et générer la résilience à l’anxiété et la dépression⁴⁴. Par rat imitant social jouent, chatouillement semble avoir des effets bénéfiques⁷de même. Ainsi, pour l’application de chatouilles réussir à induire des États affectifs positifs, il est important de garder à l’esprit que la main est destinée à agir comme « un partenaire de jeu » pendant les chatouilles. La main est séduisante car elle simule les comportements que les rats s’attendre et profiter d’un autre rat durant le jeu rude. Par conséquent, levage tenant le rat avec les deux mains imite pas jouer rat et ne peut pas avoir le même effet. En fait, des rats de laboratoire vont apprendre à éviter les restrictions non ludique dans lequel un gestionnaire tient d’une main et les caresse avec l’autre main,⁴⁵. Pendant le rat chatouillement, il est également important déplacer la main avec confiance et assurance, tout en étant vif et enjoué. Gardant l’épinglage rapide (2-4 s/pin) devrait réduire au minimum les réponses négatives parce que dans le jeu rude entre les rats, répété épinglage conduit à proférer de 22kHz cris¹⁸.

Même si les jeunes rats sont plus ludiques et réagir de manière plus forte aux chatouillements de rats adultes¹⁸, chatouillement à l’âge adulte a également avantages¹⁰. Chatouillement rats lorsqu’ils sont jeunes a également été trouvé pour avoir des prestations plus tard dans la vie³⁶, ce qui suggère que des rats expérience prolongée des effets positifs sur leur réaction émotionnelle d’une présence humaine. Différences entre les sexes en réponse aux chatouillements sont incompatibles, avec rapports d’aucune différence de sexe de jeunes rats^46,47, jeunes mâles produisant plus 50 kHz vocalisations et les vocalisations 22kHz moins que les femelles juvéniles^{29 ,48,39}et les femelles plus âgées produisant des vocalisations de 50 kHz plus que les hommes de même âge²⁹, semblable aux résultats pour le jeu social⁴⁹.

L’efficacité de la technique de chatouillement peut être évaluée à l’aide de la vocalisation et les habitudes de déplacement de rat. Les rats seront grignoter et se lécher les doigts du gestionnaire au cours des périodes de 15-s de communiqué à l’issue de chatouillement¹¹. Amuse-gueules sont légers, non préjudiciable des morsures qui ont été décrits en tant que comportement de jeu-invitation aux jeunes rats²². Lorsque le gestionnaire passe la main autour du boîtier de gestion, le rat suivra et courir après elle. Rats, surtout les jeunes, seront également exécuter, détalent autour la zone entre les épisodes de chatouillement et augmentent de manière distincte en activité après un combat de chatouillement, semblable à l’activité en cours d’exécution qui caractérise le jeu rude. Si le rat reste immobile pendant communiqués, adaptation de la technique de chatouillement, telles que la réduction de durée de goupille ou donnant moins d’épingles, est sans doute nécessaire. Il est préférable de donner les goupilles de courte durée pour la première session de chatouillement. Durée et nombre de broches peuvent être augmentées comme le rat s’habitue à chatouiller. Des rats prononcent des cris de 50 kHz, notamment les trilles, pendant chatouillement et entre les épisodes de chatouillement. Une augmentation progressive du nombre de trilles produites durant les sorties 15-s peut être vu au cours des deux premières semaines de chatouillement quotidienne avant de se stabiliser à⁴⁷. Les différences individuelles permettent des rats amusés d’être divisé en haute et basse appelants qui réagissent différemment au stress, l’anxiété et anhédonie^46,47,50.

Chatouillement de rat a été utilisé avec succès pour induire l’effet positif comme mises en recouvrement production sur la base de 50 kHz cris pendant chatouillement¹³. Il a récemment été mis en place comme une technique pour réduire la peur des humains chez les rats et d’atténuer leur aversion de médical et les procédures de recherche telles que l’injection. Suggèrent que, lorsqu’il est fourni pour seulement 2 min par jour par animal, chatouillement est une méthode efficace et pratique pour réduire l’évitement de l’homme¹¹. Étant donné que jeunes rats vont jouer ensemble pour environ 60 min chaque jour^51,52,53, chatouillement pendant 2 min par jour est pratique mais sans doute trop brèves pour reproduire tous les effets de jeu social parmi les rats. Propriétaires de rat pour animaux de compagnie, qui ont généralement plus de temps pour gérer leurs rats que les gardiens de laboratoire, peuvent fournir des rats chatouillement supplémentaires tant que les rats continuent à réagir positivement. Issu de Burgdorf et al. ^{44 , 45}, les 15 premières minutes de jeu rude semble être le plus positif pour les rats. À son tour, il peut être plus efficace chatouiller les rats pendant des périodes de plus de 15 min, surtout si pour une raison justifiée, ils ne peuvent pas être conservés dans un groupe social. Cependant, basé sur le jeu « formation pour l’inattendu »³⁸, une technique plus variée que la méthode décrite ici peut être nécessaire pour maintenir l’aspect ludique de plus chatouillant les séances. Des séances supplémentaires de chatouillement chaque jour peuvent aussi être bénéfiques aussi longtemps que les autres activités biologiquement importantes comme le sommeil et l’alimentation ne sont pas affectées. Ainsi que de contribuer à l’amélioration du bien-être des rats pour animaux de compagnie et de laboratoire, la technique de chatouillement normalisée décrite peut être utilisée dans la poursuite des recherches visant à comprendre les effets du jeu social et de ses composants sur comportementaux, sociaux et le cerveau développement.

Quand chatouillement s’est déroulée autour d’injection, particulièrement lorsqu’il est combiné avec l’expérience antérieure de chatouillement (fin 40-50 jours plus tôt), il a augmenté les tarifs USV 50 kHz avant et après l’injection et réduit le taux d’appel sonore lors de l’injection de¹⁰ . Ainsi chatouiller semble avoir atténué les effets néfastes des injections de IP, en particulier chez les rats habitués à chatouiller comme juvéniles¹⁰. Même si les chatouilles n’a pas empêché les malaises associés à l’injection comme mises en recouvrement production sur la base des appels sonores, il a augmenté de cris de 50 kHz par rapport à la condition de contrôle, avant, pendant et après la procédure de retenue¹². Selon les données de 50 kHz USV, le point de temps plus efficace pour l’application de chatouillement était juste avant plutôt qu’après la procédure de retenue¹². Chatouillement rats avant l’injection avait un report effet que positif élevé affectent au cours de la procédure¹². Chatouillement peut donc minimiser les effets négatifs possibles des procédures médicales de routine sur le comportement et le bien-être de rat. Plus de recherche est nécessaire pour déterminer comment la technique pourrait être associée efficacement avec les autres techniques d’injection et d’autres procédures médicales/experimental.

Dans l’ensemble, nous avons démontré que rat chatouillante résultats des résultats positifs comme une production accrue de 50 kHz USV et le comportement d’approche, ainsi que diminue l’évitement de l’homme et la résistance à la manipulation. Nous vous recommandons rat chatouillement comme une méthode viable pour l’amélioration du bien-être de rat et de modélisation des États affectifs positifs.

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
Table or workbench			No specific brand is recommended.
Handling box (rat home cage or another enclosure)			No specific brand is recommended.
Bedding or or other type of soft cover			No specific brand is recommended.
Gloves (thin laboratory gloves)			Optional.
Timing device	Deltaworks	Interval Timer:Timing for HIIT Training, Workouts https://itunes.apple.com/us/app/interval-timer-timing-for-hiit-training-workouts/id406473568?mt=8	Optional. Any timer will do, although it is convenient to use an interval timer if you are tickling multiple rats.
Ultrasonic microphone such as a bat detector or USB microphone	Magenta Electronics LTD	Bat4 Bat Detector https://www.magenta2000.co.uk/acatalog/Bat_Detector_Bat4.html	Optional. The Magenta bat detector is relatively inexpensive and easy to use, but can only detect vocalizations at one range at a time.
	Dodotronic	Ultramic 200K http://www.dodotronic.com/ultramics/?v=7516fd43adaa	Optional. This microphone has worked well in our experiments. There are many other options for ultrasonic microphones.
Bioacoustic software	CIBRA	SeaWave http://www-3.unipv.it/cibra/seawave.html	Optional. Free software with limited recording capabilities.
	CIBRA	SeaPro http://www-3.unipv.it/cibra/seapro.html	Optional. This software has extensive recording capabilities, and has worked well in our studies. There are many other software packages that work with bioacoustic microphones.