Modèle de pochite chez le rat après proctocolectomie et anastomose iléale-anale à l’aide de sulfate de dextran sodique

Résumé

Ce protocole décrit la méthode d’établissement d’un modèle de pochite chez le rat. Le modèle de la poche iléale a été créé en effectuant une chirurgie de la poche iléale-anastomose anale (IPAA) à l’aide de techniques microchirurgicales. Après l’opération, le rat a été traité avec du sulfate de dextran sodique (DSS) à 4 % pendant 4 jours.

Résumé

La colite ulcéreuse (CU) est une maladie chronique à médiation immunitaire qui affecte l’ensemble du côlon et du rectum avec une évolution récurrente et rémittente, entraînant une morbidité à vie. Lorsque le traitement médical est inefficace, en particulier en cas d’hémorragie gastro-intestinale massive, de perforation, de mégacôlon toxique ou de cancérogenèse, la chirurgie devient la dernière ligne de défense pour guérir la colite ulcéreuse. La résection colorectale totale et l’anastomose anale de la poche iléale (IPAA) offrent les meilleures chances de traitement à long terme. La pochite est la complication postopératoire la plus fréquente et la plus gênante. Dans cette étude, la microchirurgie est utilisée pour créer un modèle de poche iléale chez des rats expérimentaux via la chirurgie IPAA. Par la suite, un modèle de pochite soutenue chez le rat est établi en induisant une inflammation de la poche iléale avec du sulfate de dextran sodique (DSS). L’établissement réussi de la poche chez le rat est validé par l’analyse de l’état général postopératoire, du poids, de la consommation de nourriture et d’eau, des données fécales, ainsi que de la pathologie tissulaire de la poche, de l’immunohistochimie et de l’analyse des facteurs inflammatoires. Ce modèle animal expérimental de la pochite fournit une base pour l’étude de la pathogenèse et du traitement de la maladie.

Introduction

La pochite est une inflammation non spécifique qui affecte la poche iléale et constitue une complication fréquente après une proctocolectomie totale et une anastomose anale de la poche iléale (IPAA) chez les personnes atteintes de colite ulcéreuse (CU)^1,2,3. Cette affection a un taux d’occurrence relativement élevé, allant jusqu’à 50 %, et peut provoquer diverses manifestations cliniques, notamment la diarrhée, des douleurs abdominales, une perte de sang fécal et de la fièvre. La cause exacte de la pouchite reste insaisissable, bien que certa....

Protocole

Toutes les expériences sur les animaux ont été effectuées conformément aux politiques des comités d’éthique de l’hôpital général de l’Université de médecine de Tianjin. Des rats Sprague-Dawley mâles âgés de 9 à 12 semaines, pesant environ 320 à 360 g, ont été utilisés pour cette étude. Les détails des réactifs et de l’équipement utilisés sont répertoriés dans le tableau des matériaux.

1. Sélection et entretien des animaux

1. Choisissez un animal en bonne santé (poids corporel de ~220-240 g).
2. S’assurer qu’ils répondent aux critères d’un niveau spécifique exe....

Discussion

La colite ulcéreuse (CU) est une inflammation intestinale chronique caractérisée par des douleurs épigastriques récurrentes, de la diarrhée et des selles sanglantes de mucus. Il affecte principalement le rectum et peut impliquer la progression du côlon à des degrés divers. La chirurgie joue un rôle crucial dans la prise en charge de la CU 17,18,19. Depuis que Parks et

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
Anhydrous ethanol	Tianjin Fengchuan Chemical Reagent Technology Co., Ltd	China	Hematoxin-eosin Staining
Dextran Sulfate Sodium	Yeasen	60316ES76	Used to induce pouch inflammation
Formaldehyde solution	Tianjin Zhiyuan Reagent Company	China	Hematoxin-eosin Staining
Gauze	Jiangxi Zhonggan Medical Equipment Company	China	Used for animal microsurgery
Hematoxylin	Beijing Zhongshan Jinqiao Company	China	Hematoxin-eosin Staining
Interferon γ  Detection reagent kit	Cloud-clone	SEA049Ra	Detecting inflammatory factors
Interleukin-10 detection kit	Cloud-clone	SEA056Ra	Detecting inflammatory factors
Interleukin-17 detection kit	Cloud-clone	SEA063Ra	Detecting inflammatory factors
Interleukin-6 detection kit	Cloud-clone	SEA079Ra	Detecting inflammatory factors
Iodophor	Tangpai Medical Equipment Co., Ltd	China	Used for animal microsurgery
Microscopic manipulation instruments	Aesculap	Germany	Used for animal microsurgery
Occludin	abcam	ab216327	Immunohistochemical testing
Sewing needle	Yangzhou Fuda Medical Equipment Co., Ltd	China	Used for animal microsurgery
tumor necrosis factor α Detection reagent kit	Cloud-clone	SEA133Ra	Detecting inflammatory factors
Two person binocular surgical microscope	OPTON	Germany	Used for animal microsurgery
Xylene	Tianjin Yingda Rare and Precious Reagent Factory	China	Hematoxin-eosin Staining