Un modèle d’anévrisme de l’aorte abdominale chez la souris par infiltration péri-adventice de chlorure de calcium et d’élastase

Résumé

Ce manuscrit présente un protocole permettant d’établir un modèle d’anévrisme de l’aorte abdominale chez la souris à l’aide de chlorure de calcium et d’élastase, combinant les avantages des méthodes de modélisation précédentes. Ce modèle peut être utilisé pour étudier les mécanismes physiopathologiques sous-jacents aux anévrismes de l’aorte abdominale.

Résumé

L’anévrisme de l’aorte abdominale (AAA) est une maladie potentiellement mortelle associée à des taux de mortalité élevés. Elle se caractérise par la dilatation permanente de l’aorte abdominale avec une augmentation d’au moins 50% du diamètre artériel. Divers modèles animaux d’AAA ont été introduits pour imiter les changements physiopathologiques et étudier les mécanismes sous-jacents de l’AAA. Parmi ces modèles, les modèles AAA induits par le chlorure de calcium (CaCl₂) et l’élastase sont couramment utilisés chez la souris. Cependant, ces méthodes ont certaines limites. La perfusion intraluminale traditionnelle d’élastase pancréatique pancréatique porcine (EPI) est associée à une difficulté technique élevée et à un taux de rupture élevé, tandis que l’administration péri-adventice d’EPI donne des résultats incohérents. De plus, le modèle AAA induit par CaCl₂ ne présente pas de caractéristiques AAA humaines, telles que l’athérothrombose et la rupture d’anévrisme. Par conséquent, l’application combinée de CaCl₂ et d’EPI a été proposée comme approche pour améliorer les taux de réussite et induire de plus grandes augmentations de diamètre dans les modèles animaux AAA. Ce manuscrit présente un protocole complet pour l’établissement d’un modèle d’AAA chez la souris par infiltration périaortique d’EPI et de CaCl₂ dans le segment infrarénal de l’aorte abdominale. En suivant ce protocole, nous pouvons atteindre un taux de formation AAA d’environ 90% avec une simplicité technique et une reproductibilité. D’autres expériences échographiques et histologiques confirment que ce modèle reproduit efficacement les changements morphologiques et pathologiques observés dans l’AAA humain.

Introduction

L’anévrisme de l’aorte abdominale (AAA) est défini comme une augmentation du diamètre de plus de 50 % ou un diamètre aortique maximal supérieur à 3 cm dans l’aorte abdominale. Cette condition représente une menace importante pour la vie, avec un taux de mortalité d’environ 90% lors de la rupture d’un anévrisme ^1,2,3. À l’heure actuelle, la réparation chirurgicale ouverte et la réparation endovasculaire de l’aorte (EVAR) sont les seules interventions disponibles pour les patients atteints d’AAA ^4,5,6

Protocole

Le protocole d’expérimentation animale était conforme au Guide du National Institute of Health pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire (NIH Pub No. 86/23, 1985) et a été approuvé par le Comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux de l’Hôpital de Chine occidentale de l’Université du Sichuan (numéro d’approbation 202311300012). Des souris mâles C57/B6J âgées de huit à dix semaines ont été utilisées pour cette étude. Les détails des réactifs et de l’équipement utilisés sont répertoriés dans le tableau des matériaux.

1. Préparation préopératoire

Discussion

La recherche sur les mécanismes moléculaires de l’AAA nécessite un modèle animal stable. Par conséquent, de nombreux modèles animaux AAA ont été établis depuis son développement initial par Economou et al. dans les années 1960²⁹. Parmi ces modèles, le CaCl₂ est fréquemment utilisé chez les rongeurs en raison de sa rentabilité, de sa simplicité technique et de sa reproductibilité fiable. Cependant, l’infiltration périvasculaire de C.......

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
Anesthesia Machine	RWD	R550
Butorphanol	Jiangsu Hengrui Pharmaceutical Co., Ltd	220608BP	1ml: 1mg
C57BL/6JGpt Male Mice	GemPharmatech	N000013
Calcium Chloride	Sigma Aldrich	C4901	100 g
Carprofen	MCE	HY-B1227	100 mg
Chow Diet	Dossy Experimental Animals Co.Ltd
Digital Caliper	Greener	IP54
Ethanol	Jinhe Pharmaceutical Co.Ltd	539682	75%/500 mL
EVG Staining Kit	Solarbio	G1597
GraphPad Prism	Graphpad		Ver 9.0.0
H&E Staining Kit	Servicebio	G1076
Insulin Syringe	BD	2143420
Isoflurane	RWD	R510-22-4	100 mL
Masson Staining Kit	Servicebio	G1006
Normal Saline	Servicebio	G4702	500 mL
Paraformaldehyde	Biosharp	BL539A	4%/500 mL
PBS, 1x	Servicebio	G4202	500 mL
Porcine Pancreatic Elastase	Sigma Aldrich	E1250	100 mg
Povidine Iodine	Yongan Pharmaceutical Co.Ltd		5%/100 mg
Prolene Polypropylene Suture	Ethicon LLC	8709H
Rodent Ultrasound System	Fujifilm	Vevo 3100LT
Stereo Microscope	Olympus	SZ61
Ultrasonic Couplant	Keppler	KL-250	250 g