Après avoir terminé l’euthanasie primaire, vérifiez la perte de réponse à la douleur en pinçant le pied. Placez la grenouille sur le dos. Épinglez chaque membre.
Couper à travers la ligne médiane de la peau, puis couper latéralement pour créer deux lambeaux de peau. Saisissez la linea alba avec une pince et éloignez-la de la cavité cœlomique. Couper à travers la musculature.
Coupez ou épinglez tous les rabats. Coupez les os coracoïdes à l’aide de ciseaux à dissection et retirez tout excès de tissu pour obtenir un meilleur accès au cœur. Ensuite, déplacez doucement l’estomac du Xenopus disséqué vers le haut du lobe du foie gauche.
Saisissez doucement une extrémité pulmonaire à l’aide d’une pince à tissus et tirez-la à l’extérieur de la cavité cœlomique, puis épinglez le poumon à travers la pointe. Tirez le péricarde mince serré avec une pince à tissu. À l’aide de la pointe d’une paire de ciseaux d’iridectomie, perforez doucement le péricarde sans couper aucun tissu sous-jacent.
Retirez le péricarde des cavités cardiaques. Saisissez doucement l’apex du ventricule avec une pince. Sans perforer le ventricule, insérez l’aiguille à travers la fermeture de la pince dans la chambre ventriculaire.
Serrez les pinces tissulaires en place à l’aide d’un porte-aiguille ou d’un hémostatique. Démarrez le débit de la pompe à environ cinq millilitres par minute. Cela engorgera les cavités cardiaques et le tronc artériel.
Utilisez des ciseaux pour faire une entaille dans l’oreillette droite. Continuez l’écoulement de la pompe jusqu’à ce que le système vasculaire de l’estomac blanchisse. Lance l’oreillette du cœur gauche.
Augmentez le débit de la pompe à 10 millilitres par minute. À l’aide d’une pipette de transfert, rincer la cavité cœlomique et le milieu de perfusion. Si les organes se déplacent pendant le rinçage, déplacez-les doucement vers l’arrière pour maintenir la visibilité de l’estomac et des poumons.
Pour aider à visualiser le perfusat qui s’écoule du cœur, les oreillettes peuvent être réduites davantage. Gardez l’aiguille en place jusqu’à ce que le système vasculaire de l’estomac et les poumons aient blanchi et que le perfusat qui coule du cœur semble clair. Une perfusion réussie a été observée dans tous les tissus à l’exception du foie, ce qui les rend nettement plus légers et moins saturés de sang.
Ceci est le plus visible chez les albinos.
