Adipose-Derived Stem Cell Differentiation to the Adipogenic Lineage

Commencez par ensemencer une plaque de six puits avec 10 000 cellules souches dérivées du tissu adipeux par centimètre carré. Une fois que les cellules deviennent confluentes à 60 à 80%, ajoutez le milieu de différenciation. Le jour 12, lavez les cellules avec du PBS et incuberez-les avec 500 microlitres de formol à 4% pendant une heure à température ambiante.

Une fois les cellules lavées à l’eau distillée, lavez-les avec de l’isopropanol à 60% pendant cinq minutes et laissez-les sécher. Ajouter 500 microlitres de colorant O rouge 0,5% huile dilué dans 60% d’alcool. Après incubation à température ambiante, lavez les puits deux fois avec un millilitre d’eau distillée et observez la plaque au microscope inversé.

Les cellules souches dérivées du tissu adipeux se sont différenciées vers la lignée adipogène montrant une taille cellulaire réduite et une forme arrondie dans les 48 heures. Après sept jours, les vésicules lipidiques étaient visibles, qui étaient positives pour la coloration rouge huileuse 12 jours après la différenciation.