Pour commencer, placez les pupes de Lucillia sericata disponibles dans le commerce sur une feuille de papier. Jetez les larves sous-développées, les vieilles pupes foncées, les coquilles de pupilles vides, la sciure de bois ou d’autres impuretés. Transférer les jeunes pupes de couleur rouge brunâtre dans un bécher et immerger les pupes dans de l’eau désionisée.
Enveloppez le bécher avec du papier d’aluminium ou de la gaze et secouez-le pour nettoyer les impuretés de surface des nymphes. Ensuite, jetez l’eau. Placez les pupes nettoyées dans le réservoir filtrant d’un presse-ail et pressez fort.
Ensuite, recueillez le liquide tissulaire des pupes dans un tube centrifuge stérile de 50 millimètres et centrifugez-le à 25 000 x g pendant 10 minutes à quatre degrés Celsius. À l’aide d’une aiguille stérile de calibre 22, recueillir la couche de protéines dans un nouveau tube centrifuge en polypropylène de 50 millimètres et ajouter un milieu de drosophile liquide commercial dans un rapport égal à l’extrait protéique. Pour éliminer les particules de différentes tailles du mélange, filtrez-le à l’aide d’un système de filtration sous vide avec du papier filtre de différentes tailles de pores.
Pour éviter le colmatage, changez le papier filtre lorsque le débit ralentit. Une fois le filtrat centrifugé, stériliser le surnageant à l’aide d’un filtre à seringue de 0,22 micromètre et conserver le milieu d’élevage nasonia préparé, ou aliquotes NRM, à 20 degrés Celsius jusqu’à une utilisation ultérieure.