Commencez par stratifier les graines d’A.thaliana dans de l’eau stérile Milli-Q pendant trois jours à quatre degrés Celsius. Transférer les graines stratifiées dans les pots de compost en pipetant les graines stratifiées. Placez les pots dans une chambre de croissance à environnement contrôlé pendant environ six semaines jusqu’à ce que les inflorescences soient bien établies.
Pour assurer une floraison synchrone, semer ensemble les plantes donneuses et réceptrices de pollen et toute autre lignée de plantes témoins appropriées. Un jour avant le bioessai, sélectionnez ces boutons floraux de stade 12 de la plante receveuse, ayant des boutons floraux non ouverts qui montreront l’ouverture de la fleur et la déhiscence de l’anthère le lendemain. Ensuite, placez une lame de verre sous un microscope à dissection stéréo.
Collez la région de la tige près de la fleur réceptrice sélectionnée sur cette lame de verre. À l’aide d’une paire de pinces à pointe fine, ouvrez soigneusement le bouton floral et retirez tous les pétales et anthères des fleurs. Une fois cela fait, assurez-vous que le pistil n’est pas endommagé et que le stigmate est exempt de pollen contaminant.
