Pour configurer le système d’imagerie, commencez par laisser le laser 532 nanomètres allumé pendant 15 minutes pour se réchauffer. Ensuite, placez une rampe personnalisée fixée à une scène réglable manuellement à côté de la membrane d’imagerie. Fixez un porte-dents de souris avec un tube respiratoire connecté à la rampe et fixez un coussin chauffant sur la surface de la rampe.
Une fois que le laser s’est réchauffé, placez une carte de détecteur proche infrarouge devant l’entrée du faisceau de fibres et vérifiez l’alignement du laser en vous assurant que la lumière laser pénètre dans le faisceau. Commencez la préparation des animaux en coupant les poils de la tête de la souris anesthésiée avec un rasoir électrique de près des yeux à derrière les oreilles. Appliquez une crème dépilatoire sur le dessus de la tête.
Après l’avoir laissé agir pendant cinq minutes, essuyez la crème avec un coton-tige humide. Répétez l’application jusqu’à ce que la peau de la tête soit complètement épilée. Juste avant de transférer l’animal sur la plate-forme du système, utilisez une aiguille de calibre 27 pour injecter rétro-orbitalement 100 microlitres de microbulles à concentration de stock.
Maintenant, mettez une goutte de la lotion de protection des yeux sur les yeux. Commencez l’imagerie PAUSAT en remplissant la fenêtre d’imagerie avec de l’eau distillée sur la surface pour le couplage acoustique. Ensuite, fixez la tête de la souris dans le porte-dent et assurez-vous d’une anesthésie et d’une circulation d’air appropriées.
À l’aide d’une lampe chauffante et d’une sonde rectale reliée à un régulateur de température, maintenez la température corporelle de l’animal à 37 degrés Celsius. Ouvrez l’application d’imagerie et accédez à l’échographie en mode B. Utilisez la fenêtre d’échographie en direct pour ajuster manuellement la tête de la souris à la position souhaitée et la hauteur de la scène en conséquence.
Ajustez la valeur de la fréquence de transmission des ultrasons en mode B à 16 mégahertz. Ensuite, entrez les informations du répertoire de sauvegarde dans l’application de création d’image. Ensuite, sélectionnez la région souhaitée de la scintigraphie cérébrale à l’aide de la boîte flottante.
Appuyez sur le bouton d’acquisition statique et vérifiez les résultats de l’analyse une fois l’acquisition de l’image terminée pour garantir l’imagerie de région souhaitée. Pour effectuer une imagerie d’angiographie acoustique, revenez à Acquisition d’images, puis changez le mode en Angiographie acoustique. Ensuite, entrez les paramètres de protocole de numérisation souhaités, en définissant l’espacement des images à 0,2 millimètre et 10 images par position.
Vérifiez les résultats de l’analyse sous l’analyse d’image pour garantir la qualité de l’image. Pour imager avec la tomographie photoacoustique, ouvrez l’oscillateur paramétrique optique, ou l’application PO, et réglez-le sur 756 nanomètres. Ensuite, traduisez manuellement le transducteur linéaire aux coordonnées précédemment déterminées pour co-enregistrer automatiquement les volumes wobbler et les volumes linéaires.
Ouvrez l’application laser et allumez le laser 532 nanomètres. Définissez les paramètres de numérisation sur une taille de pas de 0,4 millimètre, une longueur de numérisation de 20 millimètres et une moyenne de 10 images par position. Maintenant, ouvrez le programme MATLAB du système d’acquisition de données par ultrasons et appuyez sur le bouton d’exécution.
Ensuite, appuyez sur Démarrer dans l’application de numérisation. Une fois l’analyse terminée, ouvrez le programme d’enregistrement MATLAB. Remplacez le nom d’enregistrement par le nom de fichier souhaité et appuyez sur Exécuter.
Ensuite, changez la longueur d’onde OPO à 798 nanomètres et répétez le balayage. L’angiographie acoustique, ou imagerie AA, a montré que dans le cerveau non blessé, les deux hémisphères présentent une distribution similaire des vaisseaux sanguins. Des résultats similaires sont observés dans les images photoacoustiques à deux longueurs d’onde différentes.
Une réduction notable du signal dans le cortex latéral droit a été observée dans les images AA de souris électrocautérisées. La même région a également montré une oxygénation tissulaire réduite suggérant une ischémie. L’imagerie PAUSAT peut identifier les zones d’AVC basées sur le modèle d’AVC photothrombotique en identifiant la région du cortex supérieur avec un apport sanguin réduit et une saturation en oxygène diminuée.
L’âge de la souris peut affecter l’imagerie puisque le crâne devient plus épais et entraîne une impédance acoustique différente, ce qui entraîne une diminution de la profondeur d’imagerie pour les souris plus âgées.
