Commencez par utiliser un kit d’extraction commercial pour extraire l’ADN génomique des pupes ou des moustiques anophèles mâles adultes. Ensuite, préparez le mélange de réaction PCR. Étiqueter les 18 SR-DNA et le satellite AGY 53B en effectuant une réaction PCR.
Pour la préparation de la solution d’hybridation, ajoutez cinq microlitres de sonde d’ADN marquée dans un tube de 1,5 millilitre. Ajoutez ensuite cinq microlitres d’ADN de sperme de saumon. Précipitez la sonde d’ADN en ajoutant deux volumes d’éthanol à 100 % et 0,1 volume d’acétate de sodium à trois molaires.
Conserver à moins 20 degrés Celsius pendant au moins 2,5 heures. Centrifuger le tube à 17 000 g pendant 20 minutes à quatre degrés Celsius. Retirez ensuite l’éthanol et séchez le granulé à l’air libre à température ambiante dans l’obscurité pendant 20 minutes.
Ensuite, préparez le tampon d’hybridation dans un tube de 1,5 millilitre. Faites vortex la solution pendant une minute et laissez le sulfate de dextran se dissoudre à 37 degrés Celsius pendant 30 minutes. Pour obtenir la solution d’hybridation, dissoudre la palette d’ADN dans 20 à 30 microlitres du tampon d’hybridation.
Vortex la solution pendant une minute. Effectuez un essorage rapide et stockez les tubes à 37 degrés Celsius dans l’obscurité.
