Commencez à prélever le cœur du donneur néonatal en anesthésiant et en stérilisant le rat, puis en pratiquant une incision horizontale au niveau du xiphoïde avec un scalpel à 15 lames sous un microscope chirurgical 12,5x. Ensuite, utilisez des ciseaux pour créer des incisions verticales latéralement jusqu’aux aisselles, des deux côtés. Retirez la paroi thoracique antérieure avec une autre incision horizontale sous le cou.
Disséquez la veine cave inférieure, ou IVC, les veines caves supérieures droite et gauche, ou SVC, et les vaisseaux pulmonaires avec des ciseaux. Encerclez et ligaturez les vaisseaux ternes à l’aide d’une suture en soie 7-0. Poussez légèrement le diaphragme vers le bas avec une pince et administrez trois millilitres de solution de Krebs-Henseleit modifiée glacée et riche en potassium dans l’oreillette droite en perforant l’IVC avec une aiguille de calibre 30.
Coupez l’IVC, le SVC et les vaisseaux pulmonaires à l’aide de ciseaux. Assurez-vous de la bonne longueur en transectant les artères pulmonaires aussi loin que possible, et l’aorte, distale au tronc brachiocéphale, à l’aide d’un scalpel à lame numéro 11. Rincez le cœur avec la solution cardioplégique glacée à l’aide d’une seringue de trois millilitres.
Placez le rat anesthésié sur une étagère oblique. Fixez ses dents de devant avec une ficelle et positionnez la tête vers le chirurgien. Placez la lumière à l’extérieur du cou sur la zone des cordes vocales.
Saisissez la langue avec deux doigts et poussez-la doucement vers le haut et vers la gauche pour une visibilité optimale de l’intubation. Maintenant, utilisez une canule de calibre 18 de deux pouces pour un rat de 100 à 150 grammes et fixez le tube intratrachéal avec du ruban adhésif. Connectez la canule d’intubation au ventilateur pour petit animal et ajustez les paramètres en fonction de la taille de l’animal, en suivant les instructions du fabricant.
Après avoir intubé le rat, effectuez une laparotomie médiane à l’aide d’un scalpel à 15 lames pour faire l’incision cutanée. Ouvrez la paroi abdominale antérieure avec des ciseaux et mobilisez les intestins vers le quadrant supérieur droit. Ensuite, exposez l’aorte abdominale rétropéritonéale et la CIV, à l’aide d’applicateurs cotonneux.
Couvrez les intestins avec de la gaze chaude imbibée de solution saline et utilisez des écarteurs pour maintenir une exposition optimale de la CIV et de l’aorte abdominale. Maintenant, effectuez une dissection contondante de la IVC infrarouge et de l’aorte abdominale jusqu’à la bifurcation. Ligate ramification des artères et des veines infrarouges ternes avec une suture en nylon 10-0.
Transporter le cœur du donneur prélevé dans un bassin chirurgical stérile contenant un tampon de Krebs-Heneseleit jusqu’au champ opératoire. Assurez-vous d’irriguer le cœur du donneur par intermittence avec une solution cardioplégique glacée. Ensuite, séparez le tronc pulmonaire et l’aorte descendante à l’aide de micro-ciseaux et irriguez le cœur du donneur avec une solution cardioplégique glacée.
Ensuite, appliquez quatre pinces vasculaires atraumatiques sur les segments distaux et proximaux de l’aorte infrarouge et de la CVI. Effectuez une aortotomie à l’aide de micro-ciseaux pour faire deux petites coupes horizontales. Ensuite, placez le cœur du donneur sur le côté gauche de l’aorte.
Fixez l’aorte infrarouge du receveur et l’aorte ascendante du donneur et placez-les latéralement aux positions 12 et 6 heures de l’aortotomie avec des sutures. Procédez aux troisième et quatrième sutures aux positions trois et neuf heures, en retournant doucement le cœur vers le côté gauche de l’aorte après la troisième suture. Finalisez l’anastomose artérielle en ajoutant une à deux sutures à chaque espace interspatial.
Maintenant, faites pivoter le rat dans le sens inverse des aiguilles d’une montre, de sorte que la tête fasse face à la main gauche du chirurgien. Déplacez le cœur du donneur vers le côté gauche de l’aorte abdominale pour une vue optimale de la CIV. Réaliser une veinotomie sur l’IVC, légèrement proximale de l’anastomose aortique.
À l’aide d’une lame de ponction à 11 lames et de microciseaux pour ajuster la taille en fonction du diamètre du tronc pulmonaire du donneur, rincer la lumière intracovalle avec une solution saline héparinisée. Ensuite, effectuez l’anastomose veineuse entre la CIV du receveur et le tronc pulmonaire du donneur en plaçant des sutures en nylon 11-0 interrompues sur la paroi arrière du vaisseau, en commençant par les positions 12 et 6 heures. Placez une suture continue en nylon 11-0 sur la paroi avant, placez des bandes d’éponge de gélatine résorbables sur les anastomoses et retirez les pinces microvasculaires, en commençant par les pinces distales.
Assurez-vous que les vaisseaux coronaires se remplissent et que le cœur du donneur commence à battre peu de temps après le relâchement des pinces proximales. Appliquez une légère pression à l’aide d’un applicateur coton-tige sur les éponges pour obtenir une hémostase optimale. Replacez soigneusement les intestins dans l’abdomen, en prenant soin de ne pas déformer l’anastomose artérielle et veineuse.
Fermez la paroi abdominale et laissez l’animal récupérer. Une coupe horizontale du greffon du donneur réséquée au niveau du ventricule moyen des ventricules droit et gauche est représentée. L’analyse histologique a indiqué que le tissu de fibroélastose endocardique contenait de grandes quantités de fibres de collagène et d’élastine organisées.
Tissu de fibroélastose endocardique, coloré en double pour la VE-Cadhérine et l’alpha-SMA. Le CD-31, le phospho-SMAD2 et le SMAD3, le CD-31 et la limace ou l’escargot indiquaient une transition endothéliale à mésenchymateuse.
