Imprimez une recette contenant des ingrédients de pesée pour la préparation d’un régime artificiel. Pesez tous les ingrédients secs, sauf l’agar-agar, dans un seul récipient. Placez le mélange d’ingrédients secs dans un mélangeur et ajoutez cinq millilitres d’huile de lin au mélange d’ingrédients.
Mélanger 15 grammes de gélose à mailles fines pour chaque lot de régime avec 400 millilitres d’eau distillée dans un bécher d’un litre. Chauffer le mélange au micro-ondes jusqu’à ce que la gélose soit proche de l’ébullition, avec de fines bulles dans tout le mélange. Après ébullition, ajoutez 400 millilitres d’eau distillée à température de robinet pour faire baisser la température et mélanger avec les ingrédients secs.
Ensuite, placez des tasses diététiques de 74 onces sur le comptoir avec les bords se touchant. Ajouter le mélange de gélose au mélangeur et bien mélanger. Après le mélange, versez les mélanges dans des tasses de régime, en veillant à ce que le régime couvre le fond de chaque tasse.
Une fois le régime refroidi, placez les couvercles sur les tasses. Étiquetez les tasses avec le type de régime et empilez-les sur des plateaux. Feuilles de plante hôte maison avec des œufs de papillon dans des tasses de charcuterie de 30 onces avec un couvercle en filet à l’intérieur d’une chambre climatique de 24 degrés Celsius.
Après une semaine, inspectez les tasses pour détecter la présence de larves du premier stade tardif ou du début du deuxième stade. À l’aide d’un pinceau, transférez les larves dans le régime artificiel. Placez trois larves dans chaque tasse de quatre onces.
Placez les tasses sur le côté dans un bac en plastique, ce qui permet aux frass de tomber au fond et de s’éloigner du régime, réduisant ainsi le risque de moisissure et de maladie. Entreposer les tasses de régime dans des conditions de température contrôlée avec des niveaux de lumière faibles à modérés. Surveillez les tasses pour détecter la moisissure ou la maladie tous les un à deux jours en inspectant à travers les couvercles transparents des tasses.
Laissez les larves se nymphoser et émerger dans les tasses de régime. Retirez soigneusement les papillons adultes des tasses avec des mains propres, en saisissant les quatre ailes près de leur corps pour une tenue stable. Pour marquer les papillons, tenez les individus secs par la tête et le thorax.
Ensuite, à l’aide d’un sharpie à pointe fine, marquez un numéro sur l’aile postérieure. Déterminez le sexe des papillons en combinant les marques des ailes et l’examen des organes génitaux. Ensuite, saisissez l’adulte par la tête et le thorax d’une main tout en ouvrant une enveloppe de verre de cire de l’autre main.
Ensuite, transférez l’adulte dans l’enveloppe et fixez les ailes à travers l’enveloppe. Maintenez les papillons à cinq à six degrés Celsius jusqu’à une semaine avant l’expérimentation. Dans cette étude de cas, le taux de survie des papillons n’a pas été affecté par l’augmentation de la concentration de nickel, mais il y avait un effet significatif pour le cuivre et le zinc.
Le taux de développement des papillons a été affecté par le cuivre et le zinc. Au fur et à mesure que la concentration de cuivre augmentait, il y avait une augmentation du temps de développement, avec un écart important par rapport au témoin à partir de 50 ppm. À mesure que la concentration de zinc augmentait, il y avait une augmentation du temps de développement, avec un écart significatif par rapport au témoin à partir de 100 ppm.