Maturation Profiling of Human Monocyte-Derived Dendritic Cells (Mo-DCs)

Commencez à prélever un nouvel échantillon des cellules d’intérêt pour la coloration des anticorps en lavant les cellules à température ambiante pendant cinq minutes à 300 G avec une pause normale. Répartissez les cellules dans des microtubes. Pour effectuer la coloration à l’aide des anticorps souhaités, incuber les anticorps conjugués par fluorescence dans l’obscurité pendant 15 minutes à température ambiante.

Lavez les cellules avec un millilitre de PBS avant de centrifuger pendant cinq minutes à 300 G à température ambiante. Ajoutez jusqu’à 100 microlitres de PBS à tous les microtubes. Ensuite, remettez les cellules en suspension dans 300 microlitres de 2% de paraformaldéhyde et stockez les tubes dans l’obscurité à quatre degrés Celsius jusqu’à la cytométrie en flux.

Une augmentation significative a été observée dans l’expression des molécules présentatrices d’antigènes MHC-I et MHC-II, et dans l’expression des molécules co-stimulatrices CD80 et CD86 dues au traitement par la sialidase.