Pour commencer l’intervention à l’intérieur de la salle d’opération correctement aménagée, placez le porc anesthésié en position couchée sternale et assurez-vous que toutes les lignes et tous les tubes connectés sont fixés. Enlevez tous les poils résiduels de la zone rasée désignée pour la blessure à l’aide d’une crème dépilatoire. Après avoir stérilisé les sites de la plaie, marquez la zone à l’aide d’un gabarit de brûlure stérile et d’un marqueur cutané chirurgical.
Réglez le brûleur en ajustant le point de consigne de l’unité de commande à 150 degrés Celsius. Le point de consigne le plus bas à 145 degrés Celsius et le point de consigne le plus élevé à 155 degrés Celsius. À l’aide d’un bloc d’acier inoxydable chauffé connecté à l’appareil de brûlure, créez une plaie de brûlure sur toute l’épaisseur en plaçant les blocs sur la peau pendant 60 secondes.
Prenez une photo numérique de tout le dos du porc, y compris une pancarte avec le point d’identification du porc et la date. Ensuite, prenez séparément des images pour chaque blessure ainsi qu’une règle et une pancarte affichant l’ID du porc, l’ID de la blessure et le point temporel. Pour évaluer la perfusion microvasculaire de la plaie en temps réel à l’aide de l’imagerie laser par chatoiement ou LSI, imagez toutes les plaies en un seul enregistrement à l’aide d’un imageur de perfusion sanguine LASCA.
Pour mesurer la perte d’eau transépidermique ou TEWL, placez un couvercle de sonde propre sur l’extrémité de la sonde TEWL, qui sera en contact avec le tissu de la plaie. Mesurez chaque plaie cinq fois, d’abord au centre, puis dans chaque coin. Exportez ensuite toutes les lectures vers une feuille de calcul.
Effectuez une échographie harmonique ou une cartographie HUSD en scannant la plaie avec une sonde à ultrasons à partir de la ligne médiane ou de la colonne vertébrale, en commençant par la peau normale et en se déplaçant vers le côté latéral du porc au-dessus des plaies jusqu’à ce que la peau normale soit à nouveau atteinte. Suivez le schéma de balayage pour chaque plaie en mode B et en mode élastographie tissulaire. Modifiez l’annotation une fois que chaque plaie est imagée à la fois en mode B et en mode élasto, ce qui correspond à deux enregistrements par plaie.
Une fois que toute l’imagerie est terminée, couvrez les plaies de brûlure individuellement avec des pansements transparents ou le pansement de test. Placez ensuite un pansement transparent plus grand sur toute la zone de la plaie. Appliquez une deuxième couche de gaze en rouleau sans serrer autour de tout le tronc du porc pour absorber tout liquide qui s’écoule des plaies.
Couvrez la gaze sans serrer avec une couche de bandage élastique flexible. Couvrez le bandage élastique avec une dernière couche de ruban élastique de quatre pouces. Après avoir arrêté le gaz anesthésique à la fin du pansement, laissez le porc rester sous oxygène pendant au moins cinq minutes.
Pour inoculer les brûlures le troisième jour après la brûlure, dispersez l’inoculum sur la surface des plaies exposées à l’aide d’une pipette et étalez-le uniformément à l’aide d’un épandeur jetable. Pour prélever les biopsies tissulaires à des fins d’analyse après l’imagerie, infiltrez la zone autour de la plaie avec 0,5 % de bupivacaïne. À l’aide d’un scalpel jetable avec une lame de taille 10, coupez une bande de 3 à 4 millimètres de large d’un bord de la plaie à l’autre, en gardant de petites marges de peau normale des deux côtés.
Préduire une biopsie à l’emporte-pièce de 6 millimètres de la plaie, soit à partir du lit de la plaie, soit du bord de la plaie. Réalisez l’hémostase après le prélèvement des échantillons en appuyant doucement sur la plaie avec une gaze stérile. Couvrez la plaie avec un pansement non adhérent et bandez-la comme indiqué précédemment.
L’analyse de l’échantillon de biopsie par coloration à l’hématoxyline et à l’éosine a montré une distorsion et une nécrose de toutes les couches histologiques de la peau. Le biofilm établi a été validé au septième jour après l’inoculation par l’unité formant colonie. Scannez l’imagerie par microscopie électronique et la coloration par immunofluorescence.
Les brûlures présentaient une épaisse membrane biogénique à la surface de la plaie au septième jour après l’inoculation, confirmant l’infection et l’établissement d’un biofilm. La zone de la plaie a commencé à rétrécir au 14e jour, mais une cicatrisation incomplète à environ 25 % de la taille initiale de la plaie a été observée au jour 56, ce qui indique la chronicité de la plaie. La chronicité de la plaie et l’altération de la cicatrisation ont été confirmées par le TEWL montrant une perte d’eau transépidermique élevée à tous les points de temps mesurés.
Cela a également été confirmé par la suppression des protéines jonctionnelles serrées, ZO-1 et 2, et l’altération de la restauration de la fonction barrière cutanée.
