Commencez par positionner une souris anesthésiée sur son côté droit sur un support chirurgical chauffé pour exposer son abdomen gauche. Ancrez l’extrémité avant et les membres postérieurs de la souris avec du ruban adhésif en papier, en assurant la visibilité de la rate. Ensuite, désinfectez la peau au site chirurgical en appliquant généreusement un antiseptique.
Confirmez que la souris est complètement anesthésiée en lui administrant un pincement des orteils. À l’aide d’une pince, soulevez la peau de la partie supérieure gauche de l’abdomen et faites une incision circulaire de 10 millimètres dans la peau et la couche musculaire à l’aide de ciseaux castroviejo. Localisez le pancréas attaché à la rate pour déterminer la direction dans laquelle le point de croix doit être placé.
Utilisez une suture en soie 5/0 pour placer le premier point dans la couche musculaire à l’endroit identifié. Fixez l’extrémité avec trois à cinq nœuds. Continuez à coudre directement sur l’incision.
Ensuite, coupez et laissez une queue d’environ cinq centimètres. Répétez la couture, cette fois perpendiculairement à la maille d’origine. Ensuite, soulevez et positionnez délicatement le pancréas sur le point de croix.
Placez un point de fil de sac à main à environ un millimètre du trou, en entrelaçant la couche de peau et de muscle. Positionnez le cadre de la fenêtre de manière à ce que les bords de l’incision circulaire soient situés dans la rainure de la fenêtre. Maintenant, fixez la fenêtre implantée en attachant fermement la soie 5/0.
Chargez 100 microlitres d’adhésif cyanoacrylate liquide dans une seringue de 10 millimètres. Appliquez un délicat jet d’air comprimé vers le tissu pendant environ 10 secondes pour le sécher. À l’aide d’une pince, saisissez le cadre de la fenêtre par son bord extérieur et soulevez-le avec précaution pour assurer la séparation du pancréas de la base du cadre de la fenêtre.
Distribuez une fine couche d’adhésif cyanoacrylate liquide le long de l’évidement de la fenêtre, en évitant le tissu pancréatique. Ensuite, utilisez des ramasseurs à vide pour soulever la lamelle de cinq millimètres. Positionnez doucement la lamelle de recouvrement au centre du cadre de la fenêtre optique et maintenez une légère pression pendant environ 25 secondes pour permettre à l’adhésif de durcir.
À l’aide d’une pince, détachez la lamelle de protection des ramasseurs à vide. Ensuite, serrez les sutures au point de croix pour fixer le pancréas à la lamelle et coupez les extrémités des sutures. Enfin, retirez le ruban adhésif de la souris.
Éteignez le vaporisateur d’isoflurane et placez la souris dans une cage propre. Une augmentation de la stabilité latérale et axiale du tissu pancréatique a été observée après la période de décantation. L’imagerie avec le SWIP a montré des niveaux de dérive inférieurs par rapport aux fenêtres d’imagerie abdominale et pancréatique.
Une imagerie en série du pancréas murin a été réalisée après un traitement à la céruléine. Le déplacement des lobules a été observé après deux jours consécutifs. Le SWIP peut également être utilisé pour l’imagerie à long terme, permettant la visualisation et la quantification de la motilité vacuole.
Par exemple, la vitesse moyenne des vacuoles dans le pancréas murin a augmenté d’environ 10 % après le traitement à la céruléine, par rapport au PBS. Le traitement par céruléine a également augmenté la fréquence moyenne de rotation des structures subcellulaires de 10 %Cependant, il n’y avait pas de différence significative dans la vitesse nette, la directionnalité ou la distance cumulée entre les traitements. SWIP permet de visualiser et de capturer la migration des cellules tumorales.
La migration collective des cellules tumorales a été observée sur de courtes périodes. La migration de cellules tumorales et de macrophages a également été observée.
