Pour commencer, préparez l’installation de la plate-forme chirurgicale dans une pièce avec une surface de paillasse de 60 centimètres sur 60 centimètres pour l’opération. Nettoyez la surface avec de l’alcool à 70% et couvrez-la d’une serviette médicale jetable. Ensuite, désinfectez la zone avec un rayonnement ultraviolet pendant 30 minutes.
Habituer la femelle C57 noire/souris 6 de huit semaines à l’installation d’hébergement pendant une semaine avant l’opération. À l’aide d’un coton-tige propre, appliquez une lotion dépilatoire sur le dos de la souris anesthésiée. Après trois à cinq minutes, enlevez les poils à l’aide de gaze et de cotons-tiges.
Ensuite, nettoyez la peau avec 70% d’éthanol. Fixez la souris sur la plate-forme chirurgicale avec son dos vers le haut à l’aide d’une bande de caoutchouc ou d’une corde de coton, et appliquez une solution d’iodophor pour nettoyer le dos. Pour l’ovariectomie, à l’aide d’un scalpel jetable, faites une incision dorsale d’un centimètre longitudinalement de la base de la cuisse vers le haut, en veillant à ce que seules la peau et le fascia sous-cutané soient incisés et en évitant de couper dans le péritoine postérieur.
Ensuite, tirez l’incision vers la gauche pour visualiser un coussinet adipeux blanc. À l’aide d’une micropince et de ciseaux, coupez 0,5 centimètre le long du coussinet adipeux blanc pour exposer la cavité intrapéritonéale. Après avoir coupé le péritoine postérieur, à l’aide de micro-pinces, retirez lentement et doucement le coussinet adipeux blanc de la cavité intrapéritonéale.
Immédiatement après le retrait, humidifiez le tissu adipeux blanc avec de la gaze stérile imbibée de solution saline à 0,9 %. Dans la partie inférieure du coussinet adipeux blanc, identifiez les substances granulaires roses comme des ovaires et assurez-vous qu’elles sont connectées à l’utérus. À l’aide de sutures résorbables 5O, ligaturez l’extrémité ovarienne de l’utérus.
Ensuite, retirez l’ovaire gauche, en évitant le contact direct entre les instruments chirurgicaux et les ovaires, empêchant l’implantation intrapéritonéale du tissu ovarien. Après la chirurgie, replacez soigneusement le coussinet adipeux blanc dans la cavité intrapéritonéale. Ensuite, à l’aide d’une suture résorbable 5-0, effectuez une suture intermittente sur le péritoine postérieur.
Nettoyez toutes les zones de saignement avec de la gaze imbibée de solution saline stérile à 0,9 %. Ensuite, tirez l’incision cutanée vers la droite et retirez l’ovaire droit en utilisant la même méthode. Effectuez une suture intermittente avec des sutures non résorbables 4-0 et nettoyez tout saignement avec de la gaze stérile imbibée de solution saline à 0,9 %.
Après avoir terminé les deux sutures, nettoyez la plaie avec une solution d’iodophore. Après 24 heures, injectez du méloxicam par voie sous-cutanée pour soulager la douleur. Surveillez la souris quotidiennement pour confirmer la bonne cicatrisation des plaies chirurgicales sans aucun signe de complication.
Après trois jours, nourrissez la souris avec du valérate d’estradiol fraîchement préparé. Pour l’injection de FSH, préparer la solution de FSH en dissolvant de la poudre de FSH humaine recombinante dans une solution saline stérile à 0,9 % à raison de 100 unités internationales par millilitre. En fonction de l’activité biologique de la FSH recombinante, administrer du solvant ou différentes doses de FSH recombinante par injection intrapéritonéale pendant deux semaines.
Les images de frottis des cellules colorées par Papanicolaou ont clairement identifié les stades de l’œstrus, de l’œstrus, du métestrus et du diestrus du cycle de l’œstrus. En revanche, les souris de l’ovariectomie bilatérale ont perdu le cycle de l’œstrus. La méthode ELIZA a montré une diminution significative des taux sériques d’œstradiol chez les souris ovariectomie bilatérales par rapport aux souris du groupe fictif.
L’œstrogène endogène synthétisé dans le tissu extragonadique n’affecte pas la stabilité des niveaux d’œstrogènes dans le modèle murin traité par la FSH.
