Pour commencer, posez une souris mâle C57 noire C57 anesthésiée pendant huit à 10 semaines sur la paillasse chirurgicale. À l’aide d’une pince émoussée, retirez la langue et tenez-la avec les doigts. Insérez un laryngoscope dans la bouche et visualisez la corde vocale.
Stabilisez le menton de la souris sur le laryngoscope et tenez le cathéter intraveineux ou IV de calibre 20 avec un fil-guide inséré dedans. Ensuite, insérez légèrement le fil guide dans la corde vocale et poussez lentement le cathéter IV de calibre 20 dans la trachée jusqu’à ce que sa partie aile soit au même niveau que le bout du nez. Une fois que la souris est connectée au ventilateur, maintenez-la en position latérale avec la zone temporale droite vers le haut.
Maintenez la température rectale à 37 degrés Celsius à l’aide d’un coussin chauffant et d’une lampe chauffante. Après avoir localisé l’arcade zygomatique et incisé le muscle temporal, utilisez deux pinces pour disséquer l’arcade zygomatique sous-jacente et exposer l’articulation entre le maxillaire et les os zygomatiques. Ensuite, à l’aide de ciseaux, coupez une partie de trois millimètres de l’arcade zygomatique et retirez-la.
Enfin, séparez le muscle masséter de la base du crâne. Positionnez quatre petits écarteurs dans des directions différentes et exposez la base du crâne crânien avec un écarteur tirant latéralement les branches du nerf trijumeau. Appliquez une goutte saline sur le crâne au-dessus de l’artère cérébrale moyenne, ou tronc MCA et proximal de la branche du cortex rhinal.
Utilisez une meuleuse électrique pour éclaircir le crâne jusqu’à ce qu’une petite fracture soit visible. Et avec la pointe de la pince, retirez le crâne fin. Placez une boucle à un brin de soie tressée noire sur le dessus du MCA.
Insérez ensuite un 8-O aiguille microchirurgicale pour soulever le tronc de l’ACM et attacher la suture sous l’aiguille, en laissant les deux extrémités de l’aiguille au-dessus du nœud de boucle de fil de soie. Pour l’occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne, ou MCAO, serrez légèrement le nœud de fil de soie sous l’aiguille pour bloquer le flux sanguin artériel, représentant l’apparition du MCAO. Utilisez la pince pour maintenir la suture et retirez lentement l’aiguille à l’extrémité de l’ischémie.
L’imagerie laser par contraste de chatoiement a confirmé la réduction de l’apport sanguin dans le MCA droit. Dans le cas d’un MCAO transitoire après le retrait de la suture, la reperfusion du flux sanguin cérébral était évidente et s’est encore améliorée après 24 heures. La coloration TTC du cerveau après 24 heures d’accident vasculaire cérébral a démontré la génération de tissu infarctus dans les zones corticales et latérales du striatum chez les souris jeunes et âgées.
La taille de l’infarctus était modérée par rapport au MCAO filamentaire.
